JPH08505628A

JPH08505628A - ペプチド型細胞接着阻害薬

Info

Publication number: JPH08505628A
Application number: JP6516421A
Authority: JP
Inventors: チャン，シュウ−ラン・エヌジー; カーダレリ，ピナ・エム; ロブル，トーマス・ジェイ
Original assignee: 田辺製薬株式会社
Priority date: 1993-01-08
Filing date: 1994-01-07
Publication date: 1996-06-18
Also published as: EP0677060A1; SG52262A1; WO1994015958A3; CN1114961A; WO1994015958A2; CA2153228A1

Abstract

(57)【要約】内皮細胞への白血球の接着に加えてフィブロネクチンに関連する接着を含む、細胞接着を制御するのに有用である環状インテグリン受容体拮抗薬を開示する。また本化合物を合成し、検査し、製剤化し、そして治療薬として用いる方法をも開示するものである。

Description

【発明の詳細な説明】ペプチド型細胞接着阻害薬関連出願との相互参照本出願は１９９２年１月２３日にＷＯ９２／００９９５として公開されたＰＣＴ出願と関連するものであり、ＷＯ９２／００９９５の記載内容は本出願に参考文献として組み込まれる。本発明の背景本発明の分野本発明は細胞接着制御作用をもつことを特徴とする新規環状ペプチドおよびペプチド様化合物に関するものである。関連技術の説明細胞外マトリックス（ＥＣＭ）は組織の構造を維持し、細胞の移動、分化を促進する結合組織の主要構成成分である。これらの機能の一環としてフィブロネクチン、コラーゲン、ラミニン、フオン・ヴィルブラント因子、トロンボスポンジン、フィブリノーゲン、テナシンのような細胞外マトリックス分子はin vitroで細胞接着を促進させることが見出されている。この接着相互作用は止血、血栓、創傷治癒、癌転移、免疫、炎症を含む一連の生物学的な過程に大きく関与している。フィブロネクチン（ＦＮ）は原型のＥＣＭ分子である。フィブロネクチン分子の主要な細胞結合部位は合成によりアルギニン・グリシン・アスパラギン酸すなわち単文字命名法ではＲＧＤのアミノ酸配列と再現されている。細胞接着を阻害或は促進するＲＧＤ配列を含むペプチドはこれまでにも報告されている。（米国特許No．4,589,881；4,661,111；4,517,686；4,683,291；4,57 8,079； 4,614,517；および4,792,525）グリシンをアラニンに置換、あるいはアスパラギン酸をグルタミン酸に置換、すなわちトリペプチドに１個のメチル基あるいはメチレン基を付加するといった小さな変換でもこれらの接着活性が失われる（Pierschbacher et al，PNAS，81 ，5985（1984））。最近、二番目のＦＮ細胞の結合領域が分子のＡ鎖の分岐した部位の何れか一方に存在することがわかっている。ＦＮにおける１０個のアミノ酸認識配列（ＧＰＥＩＬＤＶＰＳＴ）（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．：１）は細胞と相互作用する部位であることが示されている（Wayn er et al.，J．Cell Biol.，109：1321（1989）；Guan et al.，Cell，60：53（ 1990））。ＦＮのこれらの部位を認識する受容体は非共有結合的に結合したαおよびβサブユニットの異なる二量体混合物からなるインテグリンと呼ばれる遺伝子スーパーファミリーに属する。通常のβサブユニットは特定のαサブユニットと結合して一定の特異性をもつ接着受容体を形成する。８種のβサブユニットがクローンされ、これまでにこれらの配列が明らかにされてきた。ＶＬＡファミリー（Very Late Activation Antigens）としてよく知られているβ₁サブファミリーはＦＮ、コラーゲンおよびラミニンのようなＥＣＭ分子と結合する。総説としてHynes ，Cell，48：549（1987）；Hemler，Annu．Rev．Immunol.，8：365（1990）を参照されたい。ＦＮの２個の特別に分れた結合部位との白血球の相互作用は２つの別個のインテグリンによって仲介される。ＲＧＤ部位はインテグリンα５β１によって認識される。一方、ＥＩＬＤＶ（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２）はα４β１によって認識される（Pytela et al.，Cel l，40；191（1985）；Wayner et al.，J．Cell Biol．109：1321（1989）：Guan et al，Cell 60：53（1990））。血管内皮細胞は血液と組織との間の境界を形成し、血漿と同様、白血球の組織内への移行を制御している。炎症部位で生じた各種のシグナルは白血球や内皮細胞を活性化するため、接着活性も増大する。この初期接着に引続き、宿主防御機能を行うために白血球は組織へ移行する。いくつかの接着分子が同定されると共に白血球と内皮細胞との相互作用も明らかにされた。白血球においては、CD11a/CD18，CD11b/CD18，CD11c/CD18などのβ₂ インテグリンサブファミリーがこの反応で重要な役割を果すことが示されている。 β₁サブファミリーにおいては、α４β１はフィブロネクチンへの結合に加えて、血管細胞接着分子（VCAM）と呼ばれる内皮細胞でサイトカイン誘起作用を示す。内皮細胞で白血球への結合作用をもつ他の分子としては、ＩＣＡＭ−１，ＩＣＡＭ−２，Ｅ−セレクチン，Ｐ−セレクチンなどがある（Carlos and Harlan ，Immunol．Rev.，114：1（1990）；Osborn，L.，Cell，62：3（1990））；Spri nger T.，Nature，346：425（1990）；Geng et al.，Nature，347：757（1990）；Stoolman，L．Cell，56：907（1989））。最近のデーダは炎症においてα４β１インテグリンが重要な役割を果すことを示している。In vitroデータはα４の抗体がリンパ球の滑液内皮細胞への接着を阻害することを示している。つまり、この接着がリウマチ関節炎において重要である。（van Dinther-Janssen et al，J．Immunol.，147：4207（1991））。α ４のモノクローナル抗体が好塩基細胞や好酸性細胞のサイトカインで活性化された内皮細胞への接着を阻害することも報告されている。（Walsh et al，J．Immu nol.，146：3419（1991））；Bochner et al，J．Exp．Med.，173：1553（1991 ））。これはα４がアレルギーや喘息にも重要な役割を行っていることを暗示している。加えて、in vivoでは実験的自己免疫疾患の脳脊髄炎が抗α４−モノクローナル抗体によって阻害されうるこが明らかになっている（Yednock et al.， Nature，356：63（1992））。白血球の炎症部位への移行も抗−α４モノクローナル抗体によって阻害される（ Issekutz et al.，J．Immunol.，147：4178（1991））。最後に接触性過感作のモデルにおいて、ペプタイドＧＲＧＤＳＰ（ＳＥＱ，ＩＤ．ＮＯ．：３）あるいはＥＩＬＤＶ（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．：２）を感作細胞と共に抗原投与された非感作レシビエントマウスに移入した場合、耳の腫脹が抑制されたことから、α ４β１およびα５β１が炎症反応に関与していることが示唆されている（Fergus onet al.，Proc，Natl．Acad．Sci．USA，88：8072（1991））。このようにα４ β１とα５β１は炎症疾患の調節に重要な受容体である。発明の概要本発明は細胞接着制御薬としての活性を持つ化合物に関するものである。これらの化合物はアルギニン・グリシン・アスパラギン酸（Arg-Gly-AspまたはRGD）のアミノ酸配列、すなわちＲＧＤトリペプタイドエピトープは含まれない。事実、いくつかの化合物はこのＲＧＤエピトープの３種のアミノ酸のいずれをも含んでいない。それらの化合物の一つの特徴は細胞外マトリックス・リガンドまたは他の細胞接着リガンドに似た性質を持ち、細胞表面の受容体に結合することである。その受容体としてはインテグリン受容体が挙げられ、インテグリン受容体としては一般的にフィブロネクチン、コラーゲン、ラミニン、LFA-1、MAC-1、p150，p95、ヴィトロネクチン、gpIIb/IIIa受容体などが挙げられる。それら新規化合物は、例えばあるアミノ酸配列を含んだリガンドと拮抗しさらに細胞表面上のリガンド指向性受容体と結合することによって細胞接着を制御することが見出されている。細胞接着性蛋白、たとえばフィブロネクチン（但し、これに限定されるものではない）などは、細胞の受容体に結合するのを妨害され、細胞接着が阻害あるいは抵抗を受けるのである。その他の利用法としては、細胞を界面に引きつけるといった方法であるいは細胞接着の他の促進方法で細胞接着を促進することも考えられる。ここに述べる有用化合物はこのようにして細胞接着制御薬としての役割を果たすわけである。本発明の一つの目的は細胞接着を制御する働きのある新規化合物を提供することである。本発明のもう一つの目的は細胞接着を制御する細胞受容体に結合する能力を持った新規非ＲＧＤ含有化合物を提供することである。本発明のもう一つの目的は、新規化合物を用いて細胞接着を制御する新しい方法を提供することである。本発明のもう一つの目的は、細胞接着分子あるいはインテグリン受容体に結合する化合物を提供することである。本発明のもう一つの目的は、インテグリン受容体、具体的にはフィブロネクチン受容体を介した細胞接着に対し、きわめて強い調節活性を持った化合物を提供することである。例えばある面で本発明はＵ９３７−フィブロネクチン接着アッッセイでＩＣ₅₀ が約５００μＭ以下の活性をもつ化合物を含み、また別の面からみると、本発明は上記のようなアッセイでＩＣ₅₀が約１００μＭ以下の化合物をも含む。また、本発明は上記のようなフィブロネクチン受容体、広くはインテグリン受容体の接着抑制をin vitroあるいはin vivoで測定する方法を紹介する。本発明中の化合物は低濃度において強い抑制作用を示しＩＣ₅₀は約５００μＭあるいは約１００ μＭ以下である。本発明のもう一つの目的は、白血球の内皮細胞への接着を制御する作用の強い化合物を提供することである。つまり、一面では本発明はJurkat内皮細胞接着アッセイでＩＣ₅₀が約２００μＭ以下の化合物を含み、他の面では本発明は上記のようなアッヤイで約１０μＭ以下のＩＣ₅₀を示す化合物を含む。ＩＣ₅₀が１０μ Ｍ以下の活性を示す化合物が最も望ましい。１００μＭ以下は１０μＭ以下ほどは望ましくはなく、５００μＭ以下はさらに望ましくなく、約５００μＭは最も望ましくない。また、本発明は上記のような白血球接着抑制をIn vitroまたは in vivoで測定する方法を紹介する。本発明の化合物は低濃度で強い抑制作用を示し、ＩＣ₅₀は約２５０μＭあるいは約５０μＭ以下である。本発明のもう一つの目的は、細胞接着分子あるいはインテグリン受容体に結合することにより細胞接着を制御する新規化合物を提供することである。ここでいう新規化合物はペプチド様化合物、條飾されたアミノ酸、あるいはアミノ酸のＤ -isomerを含むためin vivoでの分解が抑制されるといわれている。本発明のもう一つの目的は、細胞接着に伴う、あるいは細胞接着が関係する種々の疾病や容体の研究、診断、治療に利用できる新規化合物、製剤、手段を提供することである。それらの疾病や容体とはリウマチ関節炎、喘息、アレルギー疾患、成人型呼吸窮迫症候群（ARDS）、心血管系疾患、血栓症または有害な血小板凝集、線溶後再閉塞、移植臓器拒絶反応、組織移植、臓器移植、敗血症ショック、再潅流傷害、乾癖、湿疹、接触性皮膚炎および他の炎症性皮膚疾患、骨粗鬆症、骨関節炎、アテローム性動脈硬化症、転移を含む腫瘍、創傷治癒、網膜剥離を含むある種の眼疾患、Ｉ型糖尿病、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス（SL E）、炎病および眼球炎症、腸炎症（例えば潰瘍性大腸炎、限局性腸炎）を含む免疫性炎症および他の自己免疫疾患等が含まれるが、それらに限られない。細胞接着蛋白のフィブロネクチン（ＦＮ）は精子の卵母細胞への結合に関与している。（Fusi and Bronson，J．Androl.，13：28-35（1992））。それゆえ、本発明のもう一つの目的は精子の卵母細胞への結合を阻害する避妊用の化合物を提供することである。本発明はまた、精子の卵白細胞への接着を抑制することによる避妊の診断を可能にするものでもある。本発明のもう一つの目的は細胞接着に関する前述の疾病ないし容体を研究、診断、治療する目的で開示されている化合物に対する抗体とが抗イデオタイプ抗体とかあるいはそれに限らない種々の誘導体化合物を提供することである。本発明のもう一つの目的は本発明の環状ペプチドと高い親和性で結合する蛋白、多糖類、あるいは他の物質を精製するのに用いられるマトリックスを提供することである。発明の詳細な説明細胞接着はいくつかの正常な生理機能を保つため必要であるが、細胞接着が好ましくないあるいは制御されるべき状況も存在する。一連の炎症性疾患では白血球と内皮の相互作用の異常が関与しているといわれている。この場合、白血球がさらに内皮に付着すると疾患組織はさらに障害をうける。in vitroの実験では、白血球が内皮細胞あるいは細胞外マトリックスに付着するような有害な結合は白血球のインテグリン受容体を介することを示している。この状態ではインテグリン受容体への親和性があるペプチドあるいは他の化合物は競合的拮抗薬として望ましく、ＡＲＤＳ、喘息およびリウマチ関節炎などの炎症性疾患に有用である。細胞接着はまた癌性腫瘍の転移にも寄与している。転移は″癌死の隠れた主因 ″と呼ばれている（Welch，et al.，Intern．J．Cancer 1989，43，449.）。基底膜成分への細胞接着を阻害するようなＲＧＤ含有ペプチドは転移を抑制するのに役立つかもしれない。 Humphries，M.J．et al.，Science 1986，223，469；Liotta，Cancer Res．1986 ，46，1； Roose，Biochem．Biophys．Acta．1986，738，263を参照されたい。同様にRGD受容体に対して適度の親和性を持ったペプチドまたはその他の化合物も抗転移薬としての有用性を持つはずである。有害な血液凝固もまた過度の細胞接着が原因となる。血小板が細胞外マトリックス上で付着、伸展、凝集する過程は、血栓形成にとって必須である。これらの過程は血小板粘着性糖蛋白、フィブリノーゲン、フィブロネクチンおよびフォン・ヴィルブラント因子によって調節されている。フィブリノーゲンは血小板凝集の補助因子として働き、フィブロネクチンは血小板の付着、伸展過程を支えている。フォン・ヴィルブラント因子は血小板の内皮下マトリックスへの付着、伸展にとって重要である（Plow et al.，PNAS-USA 1985，82，8057）。マトリックス糖蛋白のRGD部位を認識する細胞受容体に対して結合し、アンタゴニストとして機能するペプチドまたはその他の化合物は抗血栓薬として有用であろう。細胞接着を促進的に制御することによって治療できるような他の生理的状態も存在するかもしれない。例えば、創傷治癒は細胞接着が不十分であると時間がかかり好ましくない。インテグリン受容体に対して適度な親和性を持ち、例えばマトリックス表面の適当な位置に結合させたペプチドまたはその他の化合物は、有益な細胞接着を促進し、適当なRGD受容体を持った接着細胞による創傷治癒を促す結果となるかもしれない。また、人工器官移植にあたって、そのようなペプチドや他の化合物で人工器官を被覆することによって生物学的に適合した人工器官の表面を提供することにもなる。本発明の化合物で被覆された人工器官移植は、結果として人工器官は細胞の被覆が必要であることを示している。人工器官の表面を細胞層で覆うと人工器官そのものによる免疫系の刺激によりもたらされる拒絶反応を最小限に抑えることになろう。もう一つの例として、血管内皮細胞との接着を亢進させる本発明化合物を循環器系と関連させた人工器官に被覆させると、人工器官での血管が通る表面層での内皮細胞の生成はより高めることになるだろう。内皮細胞が完全に形成されると、この内皮細胞層は人工器官の内皮細胞によらないものによってひきおこされる血液細胞に対する障害を防ぐだろう。本発明の細胞接着制御化合物は、アミノ酸配列を含む構造式で書き表され、それらアミノ酸は以下の三文字記号ないしは一文字略号で書き表される。このようなアミノ酸略号を用いて光学異性体が指示なく書かれたときは、ｌ体ないしｄ体を適宜用いると解してよい。略号としては以下用いた。１．１−ＡＣＣ：１−アミノ−１−シクロヘキサンカルボン酸Ａｄａ：１−アダマンタン酢酸（Ａｄａ）−Ａｌａ：β-アダマンチルアラニンＡｄａ−ＣＡ：１−アダマンタンカルボン酸Ａｉｂ：α−アミノイソ酪酸（２−メチルアラニン） β−Ａｌａ：β−アラニン（３−アミノプロピオン酸） β−Ａｓｐ：β−アスパラギン酸（β−ＣＮ）Ａ：β−シアノアラニンＡＭＢＡ：４−（アミノメチル）安息香酸ＡｎＢ：４−アミノ酪酸ＡｎＣ：６−アミノカプロン酸（ＡＭＰ）：２−アミノメチルピリジンＡＲＤＳ：成人型呼吸窮迫症候群ＢＯＣ：tert−ブチロキシカルボニル［（３−Ｂｒ）Ｔｙｒ］：３−ブロモ−チロシンＢＯＰ：ベンゾトリアゾール−１−イル−トリス（ジメチルアミノ）−ホスホニウムヘキサフロロホスフェートＢＳＡ：ウシ血清アルブミンＣＢＯ：Cis−ビシクロ［3,3,0］オクタン−２−カルボン酸Ｃｂｚ：ベンジルオキシカルボニルＣＨＡ：３−（シクロヘキシル）−アラニンＣＨＡｃ：３−シクロヘキシル酢酸Ｃｈｘ：シクロヘキシルエステルＣｌ−Ａｌａ：クロルアラニンＣＰＡ：シクロヘキシルフェニル酢酸ｄＡ：Ｄ−アラニンＤＣＣ：ジシクロヘキシルカルボジイミドＤＣＭ：ジクロロメタンＤｈｐ：３，４−ジヒドロープロリンＤＩＥＡ：ジイソプロピルエチルアミノＤＭＥＭ：ダルベッコ修正イーグル培地ＤＭＦ：ジメチルホルムアミドｄ−Ｎａｌ：Ｄ−３−（２’−ナフチル）アラニンＤｐｒ：ジアミノプロパンＤＴＣ：Ｌ−５，５−ジメチルチアゾリン−４−カルボン酸ｄｖ：Ｄ−バリン１−ＦＣＡ：１−フルオレンカルボン酸９−ＦＣＡ：９−フルオレンカルボン酸９−ＦＡ：９−フルオレン酢酸５−ＦＩＮＣ：５−フルオロインドールカルボン酸Ｆｍ：フルオレニルメチルエステルＦＭＯＣ：フルオレニルメチルオキシカルボニルＦＮ：フィブロネクチンＧＡＣ：グアニジン酢酸３−Ｇｌｕ：γ−アミノペンタン−１，５−ジオイック酸ＨＣＡ：ヒドロ桂皮酸ＨＯＢｔ：１−ヒドロキシベンゾトリアゾールＨｏｍｏＣ：ホモシステインＨｏｍｏＰ：ホモプロリンＨｏｍｏＲ：ホモアルギニンＨｏｍｏＳ：ホモセリンＨｙｐ：４−ヒドロキシプロリンＩＣＡＭ−１：細胞間接着分子１ＩＣ₅₀：接着が対照の５０％まで阻害されろ濃度１−Ｎａｌ：１−３−（２’−ナフチル）アラニンＩＰＡ：イソプロピルアルコールイソニペコテイック酸：４−ピペリジンカルボン酸３−Ｍｅ−Ａｄａ：３−メチル−１−アダマンタン酢酸ｍｏｎｏＭｅＲ：Ｎ−メチルーアルギニンＭｐｒ：３−メルカブトブロビオン酸（des−α−アミノシステイン）ＭＴＣ：Ｌ−２−メチルチアゾリジン−４−カルボン酸ＮＡＣＡ：３−ノルアダマンタンカルボン酸Ｎａｐｈ−Ａｃ：１−ナフチル酢酸ＮＢ−Ａｃ：２−ノルボルナン酢酸Ｎｉｃ−Ｌｙｓ：ニコチニルリジンＮｌｅ：ルロイシン［（Ｎ−Ｍｅ）Ｒ］：Ｎ−メチルアルギニンｎｏｒＡｄａ−ＣＡ：３−ノルアダマンタンカルボン酸ｎｏｒＡｒｇ：ノルアルギニン（H₂NC（=NH）NH（CH₂）₂CH（NH₂）CO₂H）Ｏｒｎ：オルニチンＯ−Ｃｙｓ：システイン酸Ｐｅｎ：ペニシラミン（β，β−ジメチルシステイン）ＰｈＡｃ：フェニル酢酸ＰＭＰ：１−（β−メルカブト−β，β−シクロペンタメチレン）プロピオン酸ＰｙＥ：ピログルタミン酸ｐｙｒｏＧｌｕ：ピログルタミン酸ＱＣ：キナルジック酸Ｒ．Ｔ．：室温（約２４℃）Ｓａｒ：ザルコシンＳＬＥ：全身性エリテマトーデスＴＡ：３−β−チエニルアラニンＴＣ：ＤＬ−チアゾリジン−２−カルボン酸ＴＣＡ：１，４−チアゼン−３−カルボン酸ＴＥＡ：トリエチルアミンＴＦＡ：トリフルオロ酢酸（ｔｈｉｏｐ）：３−チオプロリンあるいは１−チアゾリジン−４−カルボン酸ＴＩＣ：：１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸ｔｌｃ：薄層クロマトグラフィーＴＴＣ：Ｌ−テトラヒドロチアジン−４−カルボン酸ＶＬＡ：最後期活性化抗原定義ここに用いたように、以下に示す単語及び／又は語句の意味は次の通りである。 “同族体”とは母化合物として認められる基本骨格に置換基を導入させた誘導体のことである。さらに、母化合物とはその化合物に固有の化学的官能基を残した原型ともいうべきものをいう。また、“アミノ酸同族体”とはペプチド結合を行う部位は残されているが、側鎖の炭素および窒素の誘導体や、α炭素およびそれに近似した部位の窒素での誘導体のことをいう。アミノ酸のＤ−エナンチオマーはこの定義に含まれている。さらに例えば“アルギニン同族体”とはアルギニンを基本骨格とし、それにさらに置換基が付加したものをいう。つまり、アルギニン同族体としては、Ｎ−メチル−Arg，Ｎ−低級アルキル−Arg，Ｎ，Ｎ−ジメチル−Arg，Ｎ，Ｎ−ジ低級アルキル−Arg，ホモArg，ノルArg，側鎖がグアニジニル置換のＮ−ニトロ-Arg，Ｎ^ω-ニトロ−Arg，Ｎ，Ｎ’−ジメチルArg，Ｎ，Ｎ’−ジ低級アルキルArg，β，γあるいはδ炭素がニトロ、アルキル、アリール、ニトロアルキルまたはニトロアリールグルーブ等で置換されたアルギニン誘導体をいう。 “フェニルアラニン同族体”とはハロゲン、メチルあるいはフェニル環上が低級アルキル、ニトロあるいはヒドロキシル基で置換されたものが挙げられる。例えばＰ−ニトロフェニル、Ｐ−ハロフェニル、Ｐ−アミノフェニルおよびペンタフルオロフェニルなどが挙げられるが、これらに限定されるものではない。二置換同族体としては、例えばジクロロフェニルアラニン、オルト、メタ−ジメチルフェニルアラニン等やオルト−メチル−メタ−クロロ−フェニルアラニンのような異なる２種の置換基をもつ同族体が挙げられる。上記のように、Ｎ−メチル−フェニルアラニンのようなＮ−アルキル置換化合物もフェニルアラニン同族体に含まれる。 “チロシン同族体”としては、フェニルアラニン同族体と同様のものが挙げられ、例えば３−ブロモ−チロシン、３，５−ジブロモ−チロシン、３，５−ジヨードチロシン等やＯ−メチル−チロシン、Ｏ−低級アルキル−チロシンなどのフェニル環のヒドロキシル基の誘導体も含む。 “プロリン同族体”としては、３−チオプロリン等の硫黄原子を含有した化合物やホモプロリン、ヒドロキシプロリン、３，４−ジヒドロキシプロリン、ＤＬ −やアゾリジン−２−カルボン酸、１，４−テトラヒドロチアジン−３−カルボン酸、Ｌ−５，５−ジメチルチアゾリン−４−カルボン酸、１，３−テトラヒドロチアジン−４−カルボン酸、Ｌ−テトラヒドロチアジン−４−カルボン酸および１，３−，１，４−および１，５−チアゼピン−カルボン酸のような化合物も含む。 “アスパラギン酸同族体”および“グルタミン酸同族体”としては、これらのアミノ酸のω−カルボン酸エステル体も含む。 “リジン同族体”としては、α−アミノ基およびε−アミノ基のアミドやα− アミノ基およびε−アミノ基のアルキル誘導体をも含むものである。同様にリジン同族体にはＤｐＲ，オルニチン、ホモリジンおよびこれらの化合物の同族体や関連アミノ酸も含む。 A．化合物の説明本発明の一つとしては次の構造式の化合物が示される。上記構造式Ｉにおいて、L¹とL²の間には閉環部分Ｚを介した架橋が形成され、化合物は閉環構造をとる。以下に示す“αＨＮ”はN末端アミノ酸のαアミノ基をいう。同様に末端のα−カルボキシル基″αC=O”と表す。側鎖官能基は丸カッコで示される。 L¹とL²は閉環部分Zを形成するのに適した官能基を持つものが選ばれる。それ故、ZはL¹とL²による閉環に寄与する官能基によって形成され、さらに何らかの原子やスペーサーグループを含んでいてもよい。以下に更に詳細に記載するが、望ましい官能基としてはチオール、アミノおよびカルボキシル基が挙げられる。そのような官能基はアミノ酸やアミノ酸同族体の側鎖、あるいは側鎖の（L¹における）α−アミノ基や（L²における）α−カルボキシル基により供給される。一方、閉環に寄与する官能基としては、残基1および／または６に共有結合している非ペプチド性の環状結合残基が挙げられる。本発明の好ましい具体例として、架橋形成残基L¹及びL²はそれぞれCys，Pen及びhomoCから選択される。L¹にはその他MprおよびPMPからも選択しうる。これらの官能基には全てスルフヒドリル基を含む。L²にはそのほかメルカブトエチルアミン（MEA）からも選択しうる。MEAが選択された場合には、Y¹とY²は存在しない。例えば、架橋はスルフヒドリル基の酸化的カップリング反応により、L¹及びL² 間のジスルフイド結合を形成することにより形成される。この場合、閉環に寄与する基zは二個の硫黄原子間の共有結合となる。例えばL¹及びL²が共にCys残基の場合を一般的に表せば、以下の通りである。但し、（他の場所での同様な表記と同じく）側鎖官能基部分（ここでは両者が硫黄元素）をその側鎖を有する残基の上に括弧で囲んで書き表す。このうち特に L¹がCysあるいはMprでL²がcysであるものが好ましい。閉環架橋はまた炭化水素部分によっても形成される。例えば-（CH₂）n-で示される（ポリ）メチレン架橋（但し、nは１から８、好ましくは１から約４の整数）によっても形成される。その一例を以下に示す。ここでは、（Zで示される）三個のメチレン残基が（L¹ 及びL²で示される）二個のシステイン側鎖の硫黄原子間を介在して環状化合物を成している。参考文献：L．Fieser et al.，″Reagents for Organic Synthesis″，Vol．1， pp．356-357，J．Wiley and Sons：（1967）：Fieser，J．Amer．Chem．Soc.，9 6，1945（1959））．他の好ましい具体例としてL¹及びL²は他のアミノ酸やその同族体、あるいはアミノ酸様化合物から選択される。これら閉環部分の形成に適する官能基としては、アミノ酸あるいはその同族体の側鎖、アミノ末端あるいはカルボキシル末端が挙げられる。例えば、L²はAsp，GluまたはL¹上のアミノ基（例えばN^αアミノ基または、たとえばLys，Ornの側鎖アミノ基）との縮合反応の結果、アミド結合を形成することによって環状結合を作るのに適した側鎖カルボキシルグルーブを有する他のアミノ酸または同族体から選んでもよい。但し、以下の構造は含まれないものとする。この様な場合、閉環部分ZはL¹及びL²間の単結合となる。同様に、アミノ酸残基L²はその末端カルボキシル基をL¹のアミノ酸残基または同族体のL¹上の側鎖アミノ基もしくはα−アミノ基とアミド架橋を形成するカルボキシル基として提供してもよい。あるいは、アミド架橋の方向が逆、つまり、L¹が側鎖カルボキシル基を、L²が側鎖アミノ基を提供してもよい。当該構造を有する化合物を以下に例示する。但し、L¹（Lys）の側鎖アミノ基とL²（Asp）の側鎖カルボキシル基が直接結合している。但し、（L¹及びL²の側鎖の）アミド結合の方向が逆転している。あるいは、但し、図示されたL¹のアミノ末端がGlu（L²）の側鎖カルボキシル基と、あるいは図示されたL²の側鎖カルボキシル末端がOrn（L¹）の側鎖アミノ基とそれぞれ直接結合している。但し、図示されたL¹のα−アミノ末端は図示されたL²のカルボキシル末端と直接結合している。つまり、アミド結合が化合物のペプチドバックボーン中で形成されている。本発明の他の好ましい具体例としては、例えば下記の如きジケト基及びジアミノ基によって形成される閉環部分Zを持つものが挙げられる。及び但し、nは前記と同じ意味を有する。ジケト架橋は例えばリジン残基のε−アミノ基の連結に用いられ、一方、ジアミノ架橋はグルタミン酸あるいはアスパラギン酸のδ−カルボキシル基の間で連結に都合よく使用される。このようにして形成された化合物としては例えば下記のような構造のものが挙げられる。及びここでも、他の場所での記載と同様に、L¹とL²の側鎖の官能基（アミノおよびカルボニル)は残基略号の上の括弧内に記載されている。上記は適当な炭化水素架橋の単なる少数の例にすぎず、他の形がありうることは当業者にとって明らかであろう。閉環構造Z中にそのような炭化水素の形を部分構造としてもつ場合、分岐鎖であっても構わなく、また、安定な構造を作るのに適当な大きさ（特にZが二個ないしそれ以上のメチレン基である場合）であれば、ヒドロキシル、アミノ、ニトロ、アルコキシあるいはハロゲンのような一つないしそれ以上のヘテロ元素を含む置換基を含むこともできる。そのような置換基は本件化合物の溶解性や体内分布に影響を与えるかも知れない。芳香族化合物やシクロアルキル炭化水素を含む架橋グループも、例えば下記のようなジケトまたはジアミノ構造としてZ位に使うことが出来る。 Z構造の炭化水素部分は炭素１からおよそ４の単純炭化水素のものが好ましい。連結部分として異なる二種の官能基を持つものも勿論、連結可能である。例えば、一つの末端にケト基を持ち、もう一方の末端にアミノ基を持つ場合が挙げられる。それ故、前述したような多くの基が架橋部分として使用出来、例えば以下のものが挙げられる。 L¹とL²との間の閉環架橋は以下に示すようにモノスルフイド（チオエーテル）鎖を介しても形成される。このような架橋を形成するための一つの方法はL¹あるいはL²にシステインを使用し、もう一方の架橋部分の官能基としてブロモ酢酸をもつ残基を使用することである（参考文献：Barker et al.，J．Med．Chem.， 35：2040-2048（1992））。一方、L¹はα、β−デヒドロアラニン、L²はシステイン残基であってもよい。これらの反応によりランチオニン型のチオエーテル架橋が形成される。 L¹及びL²間の閉環架橋は、以下に例示するように、モノスルフィド（チオエーテル）を介して形成させることも出来る。これに関する参考文献；Palmer et al.，″Peptides-- Chemistry，Structure ，Biology″，pp．616-618，River＆Marshall，Ed,．Escom.，Leider（1990）；およびJung，op．clt.，pp．865-869. アミノ酸残基の同族体もL¹及び/又はL²として使うことが出来る。例えば、同族体（但し、側鎖を長くしたり短くしたりしたものであり、閉環のためのカルボキシル、アミノ又はその他の反応性をもつ官能基はなお保持したもの）、アミノ酸、適当な官能基をもついろいろな側鎖を有する同族体、（例えばβ−シアノアラニン、カナヴァニン、ジエンコール酸、α−アザフェニルアラニン又は２−アミノヘキサンジオイック酸）または、他のアミノ酸同族体（例としては前掲のアミノ酸同族体を参照）のd-エナンチオマーを利用する事が出来る。残基配列1-2-3-4-5-6のカルボキシルおよび/またはアミノ末端とアミド結合で共有結合し、Zを介した閉環に適した官能基を有するアミノ酸類似構造体もL¹及び/又はL²として用いることが出来る。そのようなアミノ酸類似構造体としては、閉環に関与する官能基（好ましくはヘテロ原子含有官能基）を少なくとも一個含む、1又はそれ以上のヘテロ原子を有する有機化合物も含まれる。例としては下記の残基が挙げられる。但し、nは１から約８、好ましくは１から４であり、例えばβ−アラニン及びガンマーアミノ酸残基が挙げられる。（nが１の場合は、α−アミノ酸類似体というよりはアミノ酸のグリシンである。）そのような構造を持つ基としては、上述したアミノ酸やアミノ酸同族体と同じく、L²が挙げられる。（その場合、上に図示したカルボニル基は、カルボキシル前駆体等から形成され、残基２、もし存在すれば残基１のアミノ末端とアミド結合している。）また、L¹を挙げることも出来る。（その場合、図示したアミノ基は末端残基４，５または６のカルボキシル末端とアミド結合している。）もし、そのような結合残基Lを一つだけ用いるとすれば、それはL¹とL²の両方を兼ねる（そしてその結果Zを含む）ことになる。すなわち、配列1-2-3-4-5-6の両末端で一つずつ計二つのアミド結合を作ることにより、閉環を達成する。そのようにして出来た構造を例示すると下記の通りである。但し、配列1-2-3-4-5-6のN^α−アミノ末端とカルボキシル末端はそれぞれ上に図示したアミノ酸類似連結グループのカルボニル残基とアミノ残基に直接結合し、二つのペプチド様アミド結合をつくる。同様に、その様なアミノ酸類似連結構造により、閉環を行うことも出来る。すなわち、配列1-2-3-4-5-6の末端についた（例えば、アミノもしくはカルボキシル側鎖のように）第二の連結構造（L¹もしくはL²のように）の側鎖官能基がアミノ酸類似体構造に結合し、その類似体構造が（L²またはL¹として）配列の残存末端残基に結合して化合物を閉環する。これは、下式で示される構造によって例示される。但し、L²（例えばAsp）は括弧で示したカルボキシル基を供給し、残基１がN^α 末端アミノ基を供給する。そして下記のアミノ酸類似連結構造はL¹の役割を果す。芳香環、シクロアルキルまたは他の連結部分を含むアミノ酸類似体であるL¹及び/又はL²としては例えば下記のものが挙げられる。同様に、上に図示したヘテロ２官能基（ケト・アミノ）構造もZグループとしての役割を果す。つまりL¹及びL²の相補的な側鎖（例えばL¹の側鎖アミノ基とL² の側鎖カルボキシル基）を二つのアミド結合を介して架橋を形成することができる。適当にL¹、L²およびZを選択して閉環する他の手段としては、当業者により見つけられるであろうが、それらは本発明の範囲に含められる。上述した閉環構造（Z）、架橋残基（L¹およびL²）、置換基、アミノ酸同族体、アミノ酸類似体、閉環方法等については必要な変更を加えて以下に述べる他の構造式についてもあてはまることが明らかに期待される。構造Ｉにおいて残基１は欠落しており、残基２はArg、残基３はAla、残基４は Asp、残基５は3-thioProであるのがそれぞれ最も好ましく、残基６は欠落しているのが好ましい。残基配列1-2-3-4-5-6の残基1-4がArg-Ala-Asp（thiop）（SEQ．ID．No.：9）の配列のものが最も好ましい。残基１が欠落、残基２が欠落、残基３がAsp，残基４がthiopで、残基５および６がともに欠落している配列が特に好ましい。つまり、残基1-2-3-4-5-6としてはAsp-（thiop）の配列が好ましい。三番目に特に好ましい配列はX¹がGlyで、残基１及び２が共に欠落し、残基３がAsp、残基４が（thiop），残基５及び６が共に欠落しているものである。四番目に特に好ましい配列はX²が1-FCAで、X¹，残基１及び２が共に欠落し、残基３がAsp，残基４が（thiop），残基５及び６が共に欠落しているものである。五番目に特に好ましい化合物としてはX²がFmoc，X¹がArg，残基１および２が共に欠落し、残基３がAnB，残基４が（thiop），残基５および６が共に欠落しているものである。六番目に特に好ましい化合物はX²が欠落し、X¹がArg、残基１および２が共に欠落し、残基３がAla，残基４が（thiop），残基５および６が共に欠落しているものである。七番目に特に好ましい化合物はX¹およびX²が欠落し、残基１が欠落し、残基２がArg、残基３がd-Ala、残基４がAsp、残基５が欠落し、残基６が（thiop）のものである。八番目に特に好ましい化合物は残基１が欠落し、残基２がArg、残基３がAla、残基４がLeu、残基５が欠落し、残基６が（thiop）のものである。構造ＩにおいてX¹およびY¹はそれぞれあってもなくてもよく、ある場合には、得られる化合物の活性を促進するよう、及び/又はたとえば生体環境内において代謝から保護し、それによって有効半減期が増加する基をそれぞれ独立に選ぶのが好ましい。この点に関し、一個またはそれ以上のd-アミノ酸を、好ましくは一つあるいはそれ以上の末端残基の位置（すなわち、多くのアミノまたはカルボキシル残基、またはX¹やY¹）で使うと、体内での蛋白質分解やその他の酵素による代謝から化合物を防ぎ安定化すると考えられている。X¹の好ましい残基の具体例としては、 Gly-、Phe-、Leu-、Asn-、Val-、Try-、Ala-，Arg-，His-，1-、または2-ナフチルアラニン、シクロヘキシルAla-、AMBA、AnC、AnBおよびω-アミノ低級アルキルカルボン酸、Aib-、Ser-Tyr-Asn-、Ala-Thr-Val-およびp-クロロPhe-が挙げられる。Y¹の好ましい残基としては、-Ala、-Ala-Ser、-Ala-Ser-Ser、-Ala-Ser-S er-Lys、-Ala-Ser-Ser-Lys-Pro、-Thr、-Thr-Phe、-Aib、-p-クロロ-Phe、AMBA 、AnC、AnB、ω-アミノ低級アルキルカルボン酸、1-または2-ナフチルアラニンおよび-（シクロヘキシル）Alaが挙げられる。このようなX¹およびY¹グループは以下に示す構造式の対応した位置においても好ましい残基である。水素以外のR'をもつ置換残基X²又はY²としては、例えばX²がアシルグループR' CO，特にギ酸、酢酸及び窒素や硫黄（例えば3-メルカプトプロピオン酸）を含む直鎖状多官能基含有カルボン酸が好ましい。Y²としては、特に低級アルキルアミン等のR'NH で示されるアミノグループが好ましい。更に、好ましい置換基としては、X²についてはアダマンタン酢酸、アダマンタンカルボン酸、１又は2-ナフチル酢酸、 2-ノルボルナン酢酸、３−ノルアダマンタンカルボン酸、３−メチルアダマンタン酢酸等のバルキーな化合物が挙げられる。Y²については低級アルキルアミン、アリルアミン、１又は2-アダマンチルアミン、及びα位のカルボン酸がテトラゾール基で置換されているアミノ酸が挙げられる。 R'はそれぞれ薬理的に好ましい置換基からなり、水素、直鎖状及び分岐鎖状や非置換及び置換のC₁-C₈低級アルキル基、C₂-C₈アルケニル基、C₂-C₈アルキニル基、C₆-C₁₄アリール基、C₇-C₁₄アルクアリル基、C₇-C₁₄シクロアルクアリル基及びC₃-C₁₄シクロアルキル基等から選ばれる。-NR'₂の場合には、窒素原子と結合した環状グループ、任意に酸素、窒素または硫黄を含む5-8員環の異項環が含まれる。更にこれらの環状グループにはギ酸、酢酸、異項環カルボン酸、アリールカルボン酸、異項芳香環カルボン酸、アルキルカルボン酸、アルケニルカルボン酸、アルキニルカルボン酸、その他の多官能基をもつ硫黄及び窒素含有直鎖カルボン酸、アダマンチル、フルオレニル、1-FCA，9-FCA，9-FA，FMOC，Ada，Ada-C A，NACA，3-Me-Ada，（NB）-Ac，PhAc，Naph-Ac，HCA，QC，CPA，DTC，TCA，AMB A，他の多環式芳香環及び異項芳香環カルボン酸及び酢酸、QC，CPA，BOC，5-FIN C及びCBO等が場合によっては結合している。以下に例示するような構造が挙げられる。例えば、構造Ｉの残基５で示される基としては、側鎖ヒドロキシルグループ（括弧で示される）がR'が前記の水素以外のもので置換される場合もあるアミノ酸残基の誘導体が挙げられる。そのように置換された残基を構造Ｉの残基５に用いるときは、R'が水素または C₁からC₈の低級アルキル、特にメチルまたはエチルのアルキル基であるものが好ましい。構造Ｉの範囲に含まれる特に好ましい化合物として以下のようなものがある。但し、本明細書の統一的使用法に準拠して、略号-Cys-は側鎖の硫黄元素を別記したシステインを表し、同様に、構造（S）-（S）はジスルフィド結合を表す。上記した化合物はフィブロネクチンへの細胞接着の阻害活性を示す。他の好ましい化合物としては、残基１が欠落またはLeu，残基２がArg，残基L¹ がCys，残基４がAsp，残基５が欠落またはSer，残基６が欠落、Pro又は（thiop ），残基L²がCysであるもの挙げられる。下記表1記載化合物は特に好ましいものである。表1に選択した化合物の配列一覧表は以下に示した。：化合物2（SEQ．ID．NO. ：13）；化合物3（SEQ．ID．NO.：5）；化合物23，33，48，49，51，54，55，62 及び92（SEQ．ID．NO.：4）；化合物29（SEQ．ID．NO.：6）；化合物42（SEQ．I D．NO.：7）；化合物50（SEQ．ID．NO.：8）；化合物65及び66（SEQ．ID．NO.： 9）；化合物67（SEQ．ID．NO.：10）；化合物68（SEQ．ID．NO.：11）；化合物6 9（SEQ．ID．NO.：12）；化合物71（SEQ．ID．NO.：14）；化合物75（SEQ．ID． NO.：15）；化合物77（SEQ．ID．NO.：16），化合物78及び79（SEQ．ID．NO.：1 7）；化合物80（SEQ．ID．NO.：18）；化合物81（SEQ．ID．NO.：19）；化合物8 2（SEQ．ID．NO.：20）；化合物84（SEQ．ID．NO.：21）；化合物85（SEQ．ID． NO.：22）；化合物86（SEQ．ID．NO.：23）；化合物87（SEQ．ID．NO.：24）；化合物89（SEQ．ID．NO.：25）．構造Ｉの連結部分については上述した通り、Cys以外の連結残基L¹及びL²、および単結合以外のZグループも用いることが出来る。この点に関し、残基がL¹をはさんで存在することは隣接する残基との結合に関与しないL¹上の側鎖もしくは官能基によってL²と閉環する（Zを介して）必要のあることは明らかであろう。残基L²は末端（一般的にはカルボキシル）の官能基若しくは側鎖官能基によって閉環に関与するのがより一般的である。 X¹の好ましい残基としては、Gly-、Phe-、Leu-、Asn-、Val-、Thy-、1-、または2-ナフチルアラニン、シクロヘキシルAla-、AMBA、AnC、AnB、ω-アミノ低級アルキルカルボン酸、Aib-、Ser-Tyr-Asn-、Ala-Thr-Val-およびp-クロロ-Phe- が挙げられる。Y¹の好ましい残基としては、-Ala、-Ala-Ser、-Ala-Ser-Ser、-A la-Ser-Ser-Lys、-Ala-Ser-Ser-Lys-Pro、-Thr、-Thr-Phe、-Aib、-p-クロロ-Ph e、AMBA、AnC、AnB、ω-アミノ低級アルキルカルボン酸、1-または2-ナフチルアラニンおよび-（シクロヘキシルAla）が挙げられる。水素以外のR'を含むX²またはY²としては、例えばR'COで示されるアシルグループまたはR'NHで示されるアミノグループが挙げられ、好ましい置換基はX²においては、バルキーな化合物、例えばアダマンタン酢酸、アダマンタンカルボン酸、1-または2-ナフチル酢酸、2- ノルボルナン酢酸、3-ノルアダマンタンカルボン酸、3-メチルアダマンタン酢酸が挙げられ、Y²においては、1-または2-アダマンチルアミンなどが挙げられる。他の適当なR'グループとしては、低級アルキルアミン、低級アリールアミン又は9-フルオレン酢酸、１−フルオレンカルボン酸、4-フルオレンカルボン酸、2- フルオレンカルボン酸、9-フルオレンカルボン酸、フェニル酢酸、ヒドロキシ桂皮酸、キナルジン酸、ギ酸、酢酸、トリフロロ酢酸、シクロヘキシル酢酸及び3- メルカプトプロピオン酸のような酸が挙げられる。一般にX²には酸部分が、Y²には塩基部分が選ばれる。構造Ｉの化合物の誘導体は抗原の生成に使用することが出来る。又、その抗原は抗体の調製に役立てることが出来る。この様にして得られた抗体はある場合には細胞接着を阻害し、或いはマトリックス蛋白又は他のリガンドの受容体として作用するとか、あろいは、もし、抗イデオタイプ様の働きがあれば、細胞受容体をブロックすることによって免疫活性を制御することが期待できる。治療面での有用性本発明を用いた治療を行う場合、その誘導体や塩を含む活性化合物、又は以下に述べるように、これらの化合物を含む医薬組成物の有効用量が、これらの化合物単独、或いは他の化合物と混合したり、本発明の化合物或いは免疫抑制剤、抗ヒスタミン剤、コルチコステロイド等の他の化合物と混合して、通常の方法又は公知技術を用いて投与される。これらの化合物又は組成物は経口、舌下、局所（例えば皮膚や目）により、また、吸入、坐薬によっても、あるいは非経口的（例えば筋肉注射、静脈注射、皮下注射あるいは皮内注入）によっても投与出来る。さらに詳細については以下に述べるが、錠剤、懸濁液、エアゾール等の固体、液体のいずれでも投与出来る。投与は持続する治療に対しては一定の決められた投与量を用い、一回投与の治療では任意に投与量を決める。一回の投与量はヒトでは1〜3,000mgである。医薬組成物の調製の為の有用な担体としては固体、液体又はその混合物のいずれをも使用することが出来る。例えば、その組成物は錠剤、ピル、カプセル、粉末、腸溶錠、又は他の被覆した製剤（例えばイオン交換樹脂または他の担体、又はリピドで包みこんだもの、又はリポ蛋白の小胞又は末端アミノ酸への付加）、徐放性製剤、溶解型製剤、移植器材或いは部品、マイクロスフェアー製剤、溶液（例えば点眼剤）、懸濁液、エリキシル、エアゾール等が挙げられる。水、食塩水、ブドウ糖水溶液及びグリコールは好ましい液体の担体であり、特に（等張性であれば）注射用溶液として用いるのが好ましい。担体は、石油、動物、野菜又は合成原料等の様々なオイルから選ばれる。例えばピーナッツ油、大豆油、鉱物油、ゴマ油等が挙げられる。好ましい製剤学的な賦形剤はデンプン、ヤルロース、タルク、ブドウ糖、乳糖、蔗糖、ゼラチン、麦芽、米、穀粉、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸ナトリウム、グリセロールモノステアレート、塩化ナトリウム、乾燥脱脂乳、グリセロール、プロピレングリコール、水、エタノール等が挙げられる。組成物には殺菌等といった製剤学上の慣用な処理がとられると共に防腐剤、安定化剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧調製用の塩、緩衝液等の慣用な製剤学的な付加物が含まれていてもよい。好ましい製剤学的担体及びその製剤はMartin著「Remington's Pharmaceutical Sciences」第15版，Mack Publishing Co.，Easton（1975）PP．1405-1412及びP P．1461-1487に述べられている。こういった組成物は一般に、有効量の活性化合物と共に宿主投与を行うのに適当な薬物有効量が含まれるよう薬物に適当な量の担体が含まれるものである。具体的には本発明の好ましい治療法は症状を軽減させたい場合、特に行なわれ、または差し迫った場合にも行われる。他の好ましい治療法としては病気の持続療法又は予防手段に効果的に行うことが出来る。本発明の治療を実施する場合、患者に投与する為の医薬組成物の特定の用量は、病気の性質、その程度、投与スケジュール、年齢及び患者の体調等を考慮して行う必要がある。適用量は医薬品の技術として公知の臨床試験を行うことによって決められる。患者の体重kg当り、化合物0.1〜100mgの範囲の用量が有効である。体重kg当り1〜100mgの範囲で化合物を用いるのが一般的に好ましい。この場合の投与法は注射又は経口である。最も好ましい用量は、一般に、液状の担体或いは賦形剤の1ml当り化合物0.1mg程度を含有する製剤を使用する場合であり、毎日の適用量を用いればよい。本発明の化合物、および治療または医薬組成物は、細胞が他のリガンドに不適当な（例えば過剰又は不十分）結合をする状態を含んだ、インテグリン受容体がリガンドに結合することによって仲介される各種の疾病又は他の状態の研究や治療を行うに有用である。この様な疾病及び状態としては、リウマチ関節炎、喘恩、アレルギー疾患、成人呼吸窮迫症候群、炎症性腸疾患（例えば潰瘍性大腸炎及びクローン病）及び眼の炎症性疾患の様な炎症性疾患、自己免疫疾患、血栓症又は不適当な血小板凝集状態及び心臓血管系疾患、血栓崩壊後の閉塞の予防、転移を含む新生物による疾患、受精及び胎芽着床の阻害による避妊、先に述べたように細胞の結合が増加することが望ましい創傷治癒又は人工器官の移植等の状態がある。本発明の化合物は異常な細胞接着に起因する疾病の診断にも使用出来る。例えば、血管の内皮細胞又は表面に出た細胞外マトリックスに対する白血球の過剰な接着は動脈硬化の初期段階に関係している。つまり、白血球の内皮細胞への過剰な結合は進行性の動脈閉塞にとって危険であることが示されているのである。本発明の化合物の中、何れの化合物が白血球の内皮細胞への結合を阻害できるかということを見出し、その化合物の患者の内皮細胞への結合度を測定することにより、この危険因子を決定することが出来る。更に、本発明の化合物は細胞接着分子又は細胞接着分子の受容体に結合する抗体によっておこる自己免疫疾患等の疾病の診断に使用出来る。例えば、もし、構造Ｉの化合物に類似した細胞接着分子への抗体の結合によって疾病が引き起こされれば、このような抗体の存在に対する診断テストは血液の免疫アッセイ又は抗体に拮抗する基質と結合する構造Ｉの化合物を使用する患者の血清によって容易に行うことが出来る。結合した抗体はヒト抗体のFc部位に対する標識化した別の抗体等の典型的な技術、又はバクテリアからの標識化したFc-結合蛋白（プロテインA又はプロテインG）を用いて検出出来る。その他にも、構造Ｉの化合物が疾病由来の抗体と同じ受容体に結合するので、その競合する免疫アッセイのフォーマットが使用出来る。この免疫アッセイのフォーマットにおいては、化合物Ｉが標識化され、基質に付着する受容体蛋白への結合が競合するかどうかが測定出来る。加えて、本発明の化合物の誘導体は、そのペプチドが担体蛋白に結合することによって抗体が調製されるので、抗体を作るのに有用である。動物はそれ故、この混合物によって免疫性が与えられ、それによってペプチドに対する抗体が生成される。これらの抗体は、ある場合には細胞接着を阻害し、又はマトリックス蛋白や他のリガンドの受容体として働いたり、もしそれらが抗イデオタイプ的に働けば、細胞受容体をブロックすることによって免疫活性を制御することもあるであろう。更に、本発明化合物は、本発明化合物と高い親和性で結合する基質を精製するためのマトリックスを作るのに使われる。このマトリックスは、例えば本発明化合物がクロマトグラフの樹脂を誘導したものに共有結合で付加させることによって生成することが出来る。具体的にいえば、遊離アミノ基を含む表1に示す環状ペプチドはブロムシアンで活性化したクロマトグラフの樹脂に結合することが出来る。この樹脂は例えばファルマシア社（Uppsala，Sweden，cat．no．52-1153-00-AK）から入手出来る。もし、必要ならば、アミノ基は必要なペプチドに変換していくことが出来る。例えば、リジン残基を導入するとか、他のアミン含有残基を付加することが可能である。更に、もちろん、カルボジイミドで活性された樹脂は遊離カルボキシル基をもつ環状ペプチドとの結合に使用することが出来る。ペプチドは製造者によって、基本的にはプロトコールを用いて結合付加される。環状ペプチドが結合した樹脂は、この為、環状ペプチドと高い親和性で結合が可能な蛋白、ポリサッカライド等の精製に使用することが出来る。この精製は環状ペプチドが結合した樹脂を用いて行う。先ず、特別な複合体が生成される条件下で、樹脂に結合した環状ペプチドと親和性をもつ化合物が含まれている検体をこの樹脂に結合させる。樹脂に結合した複合体の精製は不必要な物質を除く為の溶媒を使用し、その後、複合体を壊す為の溶媒で洗浄すると、望ましい精製される物質のみを溶出することが出来る。実施例本発明の実施または試験に際しここに記載したものと類似または同等の方法および原料を用いることができるが、好ましい方法および原料を述べる。上掲した様に、参照したすべての出版物はここでは参考文献として本文中に示した。実施例１化合物の合成法および一般的説明 ″骨格″、即ち本発明の環状化合物のペプチド結合連結部は通常固相ペプチド合成法により合成した後、必要があれば閉環に関与する残基の保護基のみを選択的に除去する方法で閉環する。この様にして化合物のペプチド配列順序を変えたり伸ばしたりしないで、ペプチドを的確に閉環する。その他の合成および閉環法がこの技術分野では知られており、ここに開示する環状化合物およびその製剤の調製に使用できる。他に記述していなくても、1992年1月23日に公開されたＰＴＣ国際公開番号WO 92/00995に記載された方法は本発明の化合物のペプチド合成に一般に適用できる。即ち、本発明におけるペプチド鎖は固相ペプチド合成（例えば、ＢＯＣまたはＦＭＯＣ）法、液相合成またはこれらの方法を組み合わせたものを含めてこの技術分野で知られているその他の方法で合成できる。確立され汎用されているＢＯＣおよびＦＭＯＣ法は次の参考文献に記載されている： Merrifield，J．Am．Chem．Soc.，88，2149（1963）； Meienhofer，”Hormonal Proteins and Peptides″，pp．48-267，C．H．Li， Ed.，Academic Press，（1983）； Barany et al，in″The Peptides″，PP．3-285，E．Gross and J．Meienhofe r，Eds.，Academic Press，New York（1980）実験の部：具体的合成例Ｎ，Ｎ−ジアルキル-アルギニン類Ｎ，Ｎ−ジメチルアルギニン、Ｎ，Ｎ’−ジメチルアルギニンおよびＮ，Ｎ’−ジエチルアルギニンは１９９２年１月２３日に公開されたＰＴＣ国際特許公開番号．WO 92/00995、およびその中に記載された参考文献に記された一般的方法を用いて合成した。修飾アルギニンの保護：上記方法で得た原料化合物は結晶化または他の精製をしないでＢＯＣ−保護法に用いることが出来る。１等量のアミノ酸を１等量の１ＮＮａＯＨと等容量のジオキサンに溶解する。ＢＯＣ−無水物（１．１等量）をそのジオキサン溶液に溶解し、必要に応じて１ＮＮａＯＨを加えながらｐＨ９に保って室温で４時間撹拌した。反応は、原料化合物の消失をＴＬＣ（ニンヒドリンで発色させて）で追跡した。反応が完結したら酢酸を加えてｐＨ５にした。１５分間撹拌した後、生成物を凍結乾燥して分離した。ＴＬＣ系：メタノール／アンモニア水、１：１。ジメチルアルギニン；Ｒｆ0.6 、ジエチルアルギニン；Ｒｆ 0.8。プロリン同族体Ｄ，Ｌ−チアゾリジン−２−カルボン酸、Ｎ−ＢＯＣ−Ｄ，Ｌ−チアゾリジン−２−カルボン酸、Ｎ−ＢＯＣ−Ｌ−５、５−ジメチルチアゾリジン−４ −カルボン酸、Ｌ−２−メチルチアゾリジン−４−カルボン酸およびＮ−ＢＯＣ −Ｌ−２−メチルチアゾリジン−４−カルボン酸は１９９２年１月２３日に公開されたＰＴＣ国際特許公開番号WO 92/00995およびその中に記載された参考文献に記された一般的方法を用いて合成した。Ｌ−１，３−テトラヒドロチアジン−４−カルボン酸方法ホモシステインチオラクトン塩酸塩（Ｓｉｇｍａ）５ｇの水溶液（７５ｍｌ）に、１ＮＨＣｌ（３ｍｌ）及び３７％ホルムアルデヒド水溶液（Ａｌｄｒｉｃｈ）（１６ｍｌ）を加えた。室温で２日間撹拌した後、乾固するまで濃縮した（浴温４０−５０°Ｃ）。生成物は乾燥エタノール（１００ｍｌ）に溶解し、濾過した後２５ｍｌまで減圧濃縮した。等容量の酢酸エチルを滴加し、混合物を氷室に１夜静置した。灰色がかった白色、または黄褐色の結晶を酢酸エチルで洗浄し減圧乾燥して約３．０ｇ（収率５０．４％）を得た。粗生成物は最小量の乾燥エタノールに溶解し氷冷した。結晶化が始まった後、追加量の酢酸エチルを撹拌しながら加え、４時間氷冷した。得られた結晶を集め、酢酸エチルで洗浄し、減圧乾燥して２ｇのＬ−１，３−テトラヒドロチアジン−４−カルボン酸を得た。分析：シリカゲルＴＬＣ；システムＡ（ブタノール／酢酸／水／ピリジン４：１：２：１）：生成物Ｒｆ０．４。融点：２０８−２１０°Ｃ分解。旋光度（水）：−１４．０３°、ｄ＝１。Ｎ−ＢＯＣ−Ｌ−１，３−テトラヒドロチアジン−４−カルボン酸方法：Ｌ−１，３−テトラヒドロチアジン−４−カルボン酸（３ｇ，１６．３ｍｍｏｌ）を含む水（５０ｍｌ）、１ＮＮａＯＨ（１７ｍｌ）、ジオキサン（過酸化物除去）（５０ｍｌ）に（ＢＯＣ）₂Ｏ（３．８ｇ，１７．４ｍｍｏｌ）のジオキサン（１０ｍｌ）溶液を加えた。反応のｐＨは１ＮＮａＯＨで８−９に保ち１夜撹拌した。終夜反応は不完全であることが判つた。追加の（ＢＯＣ）₂Ｏ（０．３８ｇ）を反応混合物に加え、反応を完結させるためにさらに４時間撹拌した。反応混合物は半量まで減圧濃縮し、ヘキサン（２ｘ５０ｍｌ）で抽出した。ヘキサン層は捨てた。水層を氷冷し、１ＮＮａＨＳＯ₄でｐＨ３の酸性にし、５０ｍｌの酢酸エチルで３回抽出した。酢酸エチル層は集めて水（３ｘ５０ｍｌ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ₄で乾燥し濾過した。溶媒は減圧下、除去することにより、ただちに淡コハク色のオイルが結晶化した。少量のヘキサンを加えて結晶を砕き結晶を集め易くした。生成物は減圧乾燥し、３．６ｇの灰白色粉末を得た。分析：シリカゲルＴＬＣ；システムＡ；生成物Ｒｆ０．８。融点：１１２−１１３°Ｃ。旋光度（アセトン） −１６２．４゜、ｄ＝１。元素分析、計算値Ｃ₁₀Ｈ₁₇ＮＯ₄Ｓ；分子量２４７：Ｃ，４８．５８；Ｈ，６．８８；Ｎ，５．６７。実験値：Ｃ，４８．５２；Ｈ，６．９４；Ｎ，５．６７。Ｌ−１，４−テトラヒドロチアジン−３−カルボン酸第１段階：ナトリウム（１６．８ｇ）の液体アンモニア（１．５ｌ）溶液に、Ｌ −システイン（Ｓｉｇｍａ、３８ｇ）を少量ずつ０．５時間以上で青色が永続的に消えるまで加えた。ブロモエタノール（Ａｌｄｒｉｃｈ、５６ｇ）を４５分間でゆっくりと加え、アンモニアが蒸発するに任せて１夜攪拌した。第２段階：第１段階で得た残渣を濃塩酸（１５００ｍｌ）に溶かし、９０−９５°Ｃで７時間加熱した。溶液を減圧で濃縮し、固体を得た。固体をイソプロピルアルコール（１２００ｍｌ）に懸濁し、濾過した。母液を泥状にまで濃縮して濾過し、濾取した固体を乾燥した。第３段階：第２段階で得た固体（４５ｇ）をＤＭＦ（１１）に溶解し、トリエチルアミン（７５０ｍｌ）を加えた。混合物を２．５時間９０−９５°Ｃで加熱し、次いでロータリーエバポレータで乾燥するまで濃縮した。得られた固体を水（１．５１）に溶解し、ＡｍｂｅｒｌｉｔｅＩＲ−１２０Ｈ⁺樹脂（８００ｍｌ）カラムで処理した。中性になるまで洗浄した後，１．５Ｎアンモニア水溶液で生成物を溶離した。生成物は乾燥するまで濃縮し、水に溶かし、活性炭で処理し、セライトを通して濾過し、２倍量のアセトンでゆっくり希釈した。結晶を集め、アセトンで洗浄し、送風乾燥して１６．２ｇの目的物Ｌ−１，４−テトラヒドロチアジン−３−カルボン酸を得た。Ｎ−ＢＯＣ−Ｌ−１，４−テトラヒドロチアジン−３−カルボン酸ジオキサンと１ＮＮａＯＨの１：１混液に溶解したＬ−１，４−テトラヒドロチアジン−３−カルボン酸（１６ｇ）に、ジオキサン（１０ｍｌ）に溶解した（ＢＯＣ）₂Ｏ（２４ｇ）を加えた。ｐＨを９に保って室温にて１夜放置した。溶液は１／２に濃縮し、各５０ｍｌのヘキサンで連続して３回抽出した。水層は水で３００ｍｌに希釈し、冷却後、ＮａＨＳＯ₄でｐＨ３の酸性とした。析出した固体を集め、水で洗浄し，Ｐ₂Ｏ₅上で乾燥して２２．４ｇの白色粉体として目的物Ｎ−ＢＯＣ−Ｌ−１，４−テトラヒドロチアジン−３−カルボン酸を得た。アミノ酸前駆体はBACHEM（Torrance，California）から購入した。ＤＣＣはSigma Co．（St．Louis，MO）；ＴＦＡはHalocaron Co．（New York，NY）から購入した。トリエチルアミンはFisher Scientific（Fairlane，NJ）、４− メチルベンズヒドリルアミン樹脂はCBA Inc．（Boulder．CO）から、その他の試薬は分析用かそれ以上の品質のものを用いた。すべてのペプチド類は固相法（Barany et al，The Petides，E．Gross and J．Meienhofer eds.，Volume 2，Part A，Chapter 1，Academic Press，Inc .，1-284（1979））とＢＯＣ／ＤＣＣ化学（Barany et al，The Peptides，E．G ross and J．Meienhofer eds.，Volume 2，Part A，Chapter 1，Academic Press ，I nc.，1-284（1979））を用いたBeckman自動ペプチド合成機（System 990，Beckm an Instruments，Inc.，Palo Alto，California）で合成した。ＢＯＣ／ＤＣＣ以外の活性化試薬はＤＣＣ／ＨＯＢｔ（D．L．Nyugen and B．Castro，″Peptid e Chemistry″，pp．231-238 Protein Research Foundation Press，Osaka（198 7））またはＢＯＰあるいはＢＯＰ／ＨＯＢｔ（D．Hudson，J．Org．Chem.，53 ：617-624（1988））を含む。Ｎ−ＢＯＣ−Ｓ−（４−メチルベンジル）−システイン（ＢＯＣ−Ｃｙｓ−（４−ＭｅＢｚｌ））のクロロメチルポリスチレン樹脂（Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄｒｅｓｉｎ）への付加はフッ化カリウム（Horiki，Chem．Lett．（＃2）：166-168（1978））の存在下で実施した。。環状ペプチドの一般合成法ペプチドの合成：ＢＯＣ−Ｃｙｓ（４−ＭｅＢｚｌ）−ポリスチレン樹脂（Ｃ− 末端カルボン酸用）または４−メチルベンズヒドリルアミン樹脂（Ｃ−末端カルボン酸アミド用）を表２に示すＢＯＣアミノ酸法を用いたペプチドの段階的組立に用いた。関連する方法は公開されたＰＴＣ国際特許公開番号．WO 92/0095にあり、あらかじめ参考文献に含まれている。続く末端アミノ酸の縮合に、Ｎ−末端ＢＯＣ保護基はその樹脂をＴＦＡ：ＤＣＭ（１：１）と２０分間混合することによって脱離した。続いて樹脂を順次ＤＣＭ（３回）、ＭｅＯＨ（２回），ＤＣＭ（３回）で洗浄して送風乾燥した。分離：樹脂上のＢＯＣ−脱保護ペプチドを−５から０°Ｃで蒸留したＨＦ（１０ｍｌ／ｇ樹脂）、アニソール（１ｍｌ／ｇ樹脂）およびジメチルスルフィド（０．５ｍｌ／ｇ樹脂）の混合物とともに攪拌してペプチドを樹脂から分離した。１時間後ＨＦを減圧にて溜去した。分離したペプチド／樹脂混合物はジエチルエーテルで３回洗浄し、次いで８０％酢酸水溶液で抽出した。抽出液（２００ｍｌ／ｇ樹脂）は集め、環状化段階に用いた。環状化：分子内ジスルフィド橋の形成は沃素酸化法（Wunch et al，Int．J．Pep tide Protein Res.，32：368-383（1988），Bodanszky，Int．J．Peptide Prote in Res.，25，449-474（1985））で実施した。沃素飽和氷酢酸を８０％酢酸水溶液に溶かした粗ペプチドに、溶液が淡褐色になるまで滴下した。１時間室温で撹拌した後、過剰の沃素はアスコルビン酸水溶液を加えることによって不活化した。生成した環状ペプチドは減圧濃縮し、水に懸濁して凍結乾燥した。精製：環状ペプチドはVydac C₁₈カラム（15-20mm、5x30cm ID）を装着し、移動相として１％の燐酸トリエチルアミン塩水溶液（ＴＥＡＰ，ｐＨ２．３）中の直線濃度漸増アセトニトリルを用いたWaters Delta Prep 3000 system（Waters，M ilford，Massachusetts）で精製した。目的とする溜分を集め、純粋なペプチド燐酸塩として得た。ペプチド塩は再度カラムに吸着させ，０．５％酢酸アセトニトリルで溶離し、目的とする酢酸塩を得た。分析：精製したペプチドは Beckman C₁₈ column（RPC18 Ultrasphere，5μm，4 .6x150mm ID）を装着したＢｅｃｋｍａｎＳｙｓｔｅｍ１２６（Detctor mod ule 166）で分析した。溶離は緩衝液Ａ＝０．１Ｍ燐酸ナトリウム水溶液ｐＨ４．４−４．５、と緩衝液Ｂ＝緩衝液Ａ中の６０％アセトニトリルを用い、緩衝液Ｂの直線漸増で流速１ｍｌ／分で実施した。漸増時間は漸増の中間付近でペプチドが溶離するように２０か３０分のいずれかに各ペプチドで設定した。それぞれのペプチドの保持時間は表に示した（表１）。ＦＭＯＣの除去：ピペリジン（６ｍｌ）を１ｇのＦＭＯＣペプチドを含むＤＭＦ溶液（24 ml）に加え、２０％ピペリジンＤＭＦ溶液にした。溶液は室温にて２０分間攪拌し、次いで減圧にて乾固するまで濃縮した。残渣は酢酸エチル／水（１：１）に溶解し、水相は酢酸エチルで２回逆抽出し、濾過した後凍結乾燥した。アミド結合環状化合物の合成（側鎖−側鎖結合）本実施例では以下の化合物を合成した：すべてのアミノ酸およびアミノ酸誘導体はBACHEM（Torrance，Californ ia）から購入した。９−フルオレニルメタノールとＤＤＣはSigma Chemical Co （St．Louis，Missouri）から得た。ジイソプロピルエチルアミンと４−（ジメチルアミノ）ピリジンはAldrich（Milwaukee，Wisconsin）より得た。特に断らない限り他の試薬は、さらに精製しないで分析用純度のものを用いた。すべての残基はＢＯＣ保護を用いて固相法で結合した。ＡｓｐとＧｌｕの側鎖カルボキシル基はフルオレニルメチルエステルとして保護し、ＬｙｓのＥ位やＧｌｙのα位の−アミノ基はＮ−ＦＭＯＣとして保護した二つの側鎖（ＡｓｐとＬｙｓ）のアミド架橋は、そのペプチドが樹脂に結合している状態で形成した。この方法は図１ａに示した。（ａ）アスパラギン酸、グルタミン酸のＮ−ＢＯＣ−Ｏ−９− フルオレニルメチルオメガエステルの合成アスパラギン酸、グルタミン酸のＮ−ＢＯＣ−Ｏ−９−フルオレニルメチルオメガエステルは以下の通りＢｏｌｉｎ，（Bolin et al.，Organic Prepar ations and Procedures Intern.，21：67-74（1989））によって一般的に記述された方法にある改良を加えて得た。Ｎ−ＢＯＣ−Ｏ^β−９−フルオレニルメチルアスパラギン酸エステルＮ−ＢＯＣ−Ｏ^α−ベンジルアスパラギン酸エステル（８．３１ｇ，２５．７ｍｍｏｌ）と９−フルオレニルメタノール（４．８５ｇ，２４．５ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１５０ｍｌ）に溶解し、氷浴で冷却した。４−（ジメチルアミノ）ピリジン（３０ｍｇ，０．２４ｍｍｏｌ）を溶液に加えてＤＣＣ（５．３１ｇ，２５．７ｍｍｏｌ）を１０分間以上で少量ずつ加えた。得られた混合物を冷却しながら１時間撹拌した。析出したＮ，Ｎ’−ジシクロヘキシルウレアを濾別し、母液をＤＣＭ（２５０ｍｌ）で希釈した。この溶液を１０％クエン酸（５０ｍｌ、２回）、水（５０ｍｌ、１回），２５％ＮａＨＣＯ₃（５０ｍｌ、２回）、水（５０ｍｌ、１回）、飽和食塩水（５０ｍｌ、１回）の順で抽出した。次に溶液はＭｇＳＯ₄上で乾燥し、濃縮して油性残渣を得た。メタノール、エーテル、石油エーテル（１：３：１０）混溶媒から再結晶し、融点７４−７７° ＣのＮ−ＢＯＣ−Ｏ^α−ベンジル−Ｏ^β−フルオレニルメチルアスパラギン酸エステル１０．８５ｇ（収率、８４％）を得た。上記生成物５．５ｇ（１０．９ｍｍｏｌ）を１５０ｍｌの加温したメタノールに溶解し、２０％Ｐｄ（ＯＨ）₂ ／Ｃ（３００ｍｇ）上で室温にて１．５時間、水素圧３５−４０ｐｓｉで水素化した。触媒は濾別し溶液は減圧乾固した。残渣の油状物はジエチルエーテル（２００ｍｌ）に溶解し、１％ＮａＨＣＯ₃（５０ｍｌ、３回）、水（５０ｍｌ、１回）、５％クエン酸（５０ｍｌ、２回）、飽和食塩水（５０ｍｌ、１回）の順で抽出した。エーテル層はＭｇＳＯ₄で乾燥し、濃縮した。ジエチルエーテル／石油エーテルから再結晶した。融点１３５−１３７°ＣのＮ−ＢＯＣ−Ｏ^β−９− フルオレニルメチルアスパラギン酸エステル（３．５３ｇ）を得た。Ｎ−ＢＯＣ−Ｏ^γ−９−フルオレニルメチルグルタミン酸エステル。Ｎ−ＢＯＣ−Ｏ^α−ベンジルグルタミン酸エステル（４．５ｇ，１３．３ｍｍｏｌ）と９−フルオレニルメタノール（２．５ｇ，１２．５ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１００ｍｌ）に溶解し、氷浴で冷却しながら撹拌した。この溶液に４−（ジメチルアミノ）ピリジン（１５．５ｍｇ，０．１３ｍｍｏｌ）を加えてＤＣＣ（２．７５ｇ，１３．３ｍｍｏｌ）を加え、冷却しながら４時間攪拌した。析出したＮ，Ｎ’−ジシクロヘキシルウレアを濾別し、母液をＤＣＭ（２００ｍｌ）で希釈した。この溶液を上記のアスパラギン酸エステルの場合と同様に洗浄し、処理し、融点９７−９９．５°ＣのＮ−ＢＯＣ−Ｏ^α−ベンジル−Ｏ^γ−９−フルオレニルメチルグルタミン酸エステル（４．２ｇ）を得た。上記生成物４．０ｇ（７．７５ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ／ＥｔＯＨ／ＩＰＡ（２：１：１）混合溶媒（２００ｍｌ）中、１０％Ｐｄ／Ｃ（１２５ｍｇ）で室温にて２時間、水素圧４０ｐｓｉで水素化した。反応混合物は触媒を除くために濾過し、減圧濃縮して油状残渣を得た。残渣は次いでジエチルエーテル（１５０ｍｌ）と混ぜ、上記のアスパラギン酸エステルの場合と同様に処理し、水相は集めてエーテル（４０ｍｌ、２回）で逆抽出した。エーテル相を集めてＭｇＳＯ₄上で乾燥し、濾過後濃縮し、ジエチルエーテル／石油エーテル（１：１０）から再結晶して、融点１２３．５−１２６°ＣのＮ−ＢＯＣ−Ｏ^γ−９−フルオレニルメチルグルタミン酸エステル（２．３ｇ）を得た。（ｂ）保護基を有するＲＫ^*Ｄ（ｔｈｉｏｐ）Ｄ^*ペプチド鎖の合成上記ペプチドの合成は自動ペプチド合成機（System 990，Beckman Inst ruments，Inc.，Palo Alto，California）および手動合成装置（S．C．Glass Te ch，Bonica，California）を連結して実施した。ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓ（Foster City，California）から購入したＢＯＣ−Ａｓｐ（ＯＦｍ）ＯＣＨ₂−ＰＡＭ樹脂（１．０ｇ，０．７５ｍｍｏｌ）を用いて合成を開始した。以下のアミノ酸類を合成に用いた：ＢＯＣ−（３−ｔｈｉｏｐ）、ＢＯＣ−Ａｓｐ（Ｏ−ｂｅｎｚｙｌ）、ＢＯＣ−Ｌｙｓ（Ｎ’−ＦＭＯＣ）、およびＢＯＣ −Ａｒｇ（Ｎ^γ−Ｔｏｓ）。過剰（２−３倍）のアミノ酸を各縮合に用いたペプチド鎖はＢＯＣ化学を用いたＢｅｃｋｍａｎペプチド合成機で、表２に示したと同様な標準化したサイクルに従って各アミノ酸を段階的に合成量に合わせて構築した。脱保護試薬、中和剤、および活性化試薬としてＤＣＭ中の５０％ＴＦＡ、ＤＣＭ中の５％ＤＩＥＡ、およびＤＣＭ中の０．５ＭのＤＣＣをそれぞれ各縮合に用いた。（ｃ）ペプチド鎖の頭部修飾Ｎ−末端ＡｒｇからＤＣＭ中の５０％ＴＦＡでＢＯＣ基を除き、ＤＣＭ中の５％ＤＩＥＡで中和した後、樹脂上の保護したペプチドは活性化したＡｄａＣＡと反応させた。Ｎ−末端を脱保護し、側鎖を保護した樹脂上のペプチドはＭｅＯＨ（１分間、２回）、ＤＣＭ（１分間、３回）で洗浄し、ＤＣＭ中の５％ＤＩＥＡで再度中和（１分間、１回；２０分間、１回）し、ＤＣＭ（１分間、３回）洗浄し、ＤＭＦ中ＤＣＣとＨＯＢｔを用いて（ＡｄａＣＡ）末端に結合した。次いでペプチドは下記一般法にてＡｓｐのβ−カルボキシル基とＬｙｓのε−アミノ基間のアミド結合を形成して環化した。（ｄ）アミド架橋形成の一般的環化方法ペプチド鎖の形成の後、以下の方法に従ってアミド環状化を実施した。各段階の間では濾過を実施した：（１）ＭｅＯＨ（１分、２回）；（２）ＤＣＭ（１分、３回）；（３）ＤＭＦ中の２０％ピペリジン、洗浄１分、脱保護２０分；（４）ＤＭＦ（１分、２回）；（５）ＭｅＯＨ（１分、２回）；（６）ＤＣＭ（１分、３回）：（７）ＤＭＦ（２０ｍｌ／ｇ樹脂）中のＢＯＰ試薬（４等量）、２分間撹拌、ＤＩＥＡ（ＤＭＦ容量の２％）を加え４時間撹拌（環化の終了はニンヒドリン試験で監視した；もし４時間で反応が不完全であると判定されたらニンヒドリン試験が陰性になるまで反応を続けた）；（８）ＤＭＦ（１分、２回）；（９）ＤＣＭ（１分、２回）；（１０）ＭｅＯＨ（１分、２回）。最終環状化化合物は１０％アニソール存在下、０°Ｃにて１時間ＨＦ処理することにより、樹脂から分離した。ＨＦを溜去した後、残渣をジエチルエーテルで洗浄し、５％酢酸水溶液で抽出した。水層は粗ペプチドを得る為に凍結乾燥した。（ｅ）精製環状ペプチドはC₁₈カラムを装着し、移動相としてＴＥＡＰ（ｐＨ２．２−２．４）中の直線濃度漸増アセトニトリルを用いたＷａｔｅｒｓＤｅｌｔａＰｒｅｐ３０００ｓｙｓｔｅｍ（Waters，Milford，MA）で精製した。純粋な化合物溜分を集め、再度C₁₈カラムで処理した。この際、０．５％酢酸で検体を溶離し、目的とするペプチドの燐酸塩を酢酸塩に変換した。純粋なペプチド溜分はまとめて減圧濃縮し、水に再溶解して凍結乾燥した。白色粉末状、純度９８．７％のペプチド９２．９ｍｇを得た。アミド結合をした環状化合物の合成（骨格−側鎖の結合）本実施例では、以下の化合物を合成した。上記化合物の手動合成はＣＢＡ，Ｉｎｃ．（Boulder，Colorado）製の４−メチルベンズヒドリルアミン樹脂（２．０ｇ，１．４ｍｍｏｌ）を用いて開始した。ペプチド鎖は上記実施例４の化合物合成で述べたＢＯＣ法を用いて修飾した。本合成ではＢＯＣ−Ａｓｐ（Ｆｍ）、ＢＯＣ−１、４−ＴＴＣ、ＢＯＣ−Ａｓｐ（Ｏ−ｂｅｎｚｙｌ）、ＢＯＣ−Ｖａｌ、ＢＯＣ−Ａｒｇ（Ｎ′−ｔｏｓｙｌ）、およびＮ−ＦＭＯＣ−Ｇｌｙを用いた。Ｇｌｙの末端アミノ基とＡｓｐ⁶のβ−カルボキシル基との環化は上記一般的アミド環状化法に従って実施した。得られた環状化合物はＨＦと１０％アニソールで０゜Ｃにて１時間処理することにより樹脂から分離した。ＨＦを溜去した後、混合物はジエチルエーテルで洗浄（エーテル層相は捨てた）後、１Ｎ酢酸水溶液で抽出した。水抽出物は凍結乾燥して粗ペプチド（１．２３ｇ）を得た。化合物の精製はＣ₁₈カラムを装着したＷａｔｅｒｓ社の分取ＨＰＬＣを用いて前記実施例での方法に従って行った。白色粉末状のＨＰＬＣで９９．７％純度の純粋生成物（６７８ｍｇ）を得た。アミド結合をした環状化合物の合成（完全な側鎖修飾に先立つ環化）本実施例では、以下の化合物を合成した（式，ＩＤ．ＮＯ．：１８）。本化合物は1992年1月23日に公開されたＰＴＣ国際特許公開番号WO92/00995に記した方法を用いて合成した。環状ジスルフィド化合物の合成本実施例では、以下の化合物を合成した（式，ＩＤ．ＮＯ．：４）。１−ＦＣＡはAldr1ch Chemical Co（Milwaukee，WI）から購入した。すべてのアミノ酸、アミノ酸誘導体および同族体、および非天然アミノ酸類はBACHEM（To rrance，California）から購入した。ＤＣＣはSigma Co．（St．Louis，Missour i）；トリフルオロ酢酸はHalocarbon Co．（New York，New York）から購入した。トリエチルアミンはFisher Scientific （Fair Lawn，New Jersey）、その他の試薬は分析用の品質のものを通常の販売元から得て用いた。すべてのペプチド類はＢＯＣ化学を用いたBeckman自動ペプチド合成機（Syste m990, Beckman Instruments, Inc., Palo Alto, California）により固相法で合成した。Ｎ−ＢＯＣ−Ｓ−（４−メチルベンジル）−システイン（ＢＯＣ−Ｃｙｓ−（４−ＭｅＢｚｌ））のクロロメチルポリスチレン樹脂（Ｍerrifield樹脂）への付加はフッ化カリウムの存在下で実施した。ＢＯＣ−Ｃｙｓ（４−ＭｅＢｚｌ）（０．９モル等量）を膨潤したＤＭＦ中のMerifield樹脂（Bio-Rad lab.，Richm ond，California）（１．０モル等量）とＫＦ（１．８モル等量）の存在下、８０゜Ｃにて１６時間反応した。樹脂は濾取し、洗浄、乾燥した。樹脂の置換モル等量は重量で決定した。ＢＯＣ−Ｃｙｓ（４−ＭｅＢｚｌ）樹脂上のペプチド鎖の配列の仕上げは、上記、表２の方法に従いＢＯＣ法を用いて段階的に行った。合成の最後にＮ−末端のＢＯＣ保護基はＴＦＡ：ＤＣＭ（１：１）を用い３０分間で除去した。得た化合物は次にＨＦで樹脂から分離し、ジスルフィドは先に記述したように形成し、常法に従って精製した。カルボン酸末端にＮＨＮＲ’（特にＡＭＰ）またはテトラゾールを含む環状ペプチドの合成一般的に、カルボン酸末端にＮＨＮＲ’のアミド化修飾を有するペプチド、特に、カルボン酸末端にＡＭＰ誘導体を有する化合物、またはカルボン酸末端がテトラゾールに置き換えられたペプチド類は本発明の他のペプチドで実施した方法の若干の変法で合成した。これらの合成には、カルボン酸末端アミノ酸（即ち、Ｙ¹を除く）を除いた環状ペプチドの部分は上記固相法で合成し、樹脂から分離した。得られたペプチドは次に適当な誘導体にしたカルボン酸末端アミノ酸と液相法で縮合した。この方法は先に参考文献に含めた１９９２年１月２３日に公開されたＰＴＣ国際特許公開番号ＷＯ９２／００９９５に記されている。液層合成法の詳細はＢｏｄａｎｓｚｋｙ（″Peptide Synthesis″Springer-Verlag， New York（1984））にある。 α−カルボン酸がテトラゾールに置き換えられたアミノ酸の合成はＬａｎｇｒｙ（Langry，K．C.，J．Org．Chem．56：2400-2404（1991））に従って実施した。実施例２細胞接着阻害測定Ｕ９３７細胞フィブロネクチン接着測定本発明化合物の典型的in vitro系における細胞接着阻害作用を以下の測定法により確定した。本測定法はフィブロネクチンと被検化合物が共存する競合測定法である。ミクロタイタープレートをまずフィブロネクチンで被覆した。次に被検ペプチドを濃度を増加させながらフィブロネクチン受容体を持つ細胞と一緒に加えた。次いでプレートをインキュベート、洗浄し、付着した細胞数を測定するため染色した。本測定法により、化合物の抗細胞接着作用と制御作用が直接測定できる。細胞株Ｕ９３７は American Type Tissue Culture Collection（Rockville,M D）から購入した。細胞は10％の牛胎児血清を含むＲＰＭＩ培地（J.R．Scientif ic Company，Woodland Hills，CA）で培養した。フィブロネクチンはヒト血漿からＥｎｇｖａｌｌ等（Int．J．Cancer，20：1-4（1977））の方法で精製した。ミクロタイタープレート（９６穴、Falcon）を、フィブロネクチン（５μg/ml ）を含む０．１ｍｌの燐酸緩衝液食塩水（ＰＢＳ）を用いて、４゜Ｃで一晩かけて被覆した。対照として５μg/mlの牛血清アルブミン（ＢＳＡ）を用いた。結合しなかった蛋白はプレートをＰＢＳで洗って除去した。次いで反応しなかった部位を保護するために、プレートを２．５ｍｇ／ｍｌのＢＳＡを含むＰＢＳ（１００μｌ）で３７°Ｃで１時間覆った。Ｕ９４７株の細胞を集めてＨａｎｋｓの緩衝液（ＨＢＳＳ）で２度洗った。細胞数を数え、２．５×１０⁶個／ｍｌになるようにＤｕｌｂｅｃｃｏ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）とＢＳＡ（２．５ｍｇ／ｍｌ）で調整し、細胞接着測定に用いた。被検化合物をＤＭＥＭ−ＢＳＡに溶かし、７．５％重炭酸ソーダでｐＨを７．４に調整した。化合物（１００μｌ）をＦＮ被覆ウエルに終濃度５００，２５０，１２５，６２．５，３１．３，１５．６，７．８，３．９，１．９５，および０．９８μｇ／ｍｌで加えた。この濃度はペプチドの活性によって決め、試験に用いた。Ｕ９３７細胞液を１穴に１００μｌ加え、プレートを３７℃で１時間インキュベートした。インキュベーションの後、プレートをＰＢＳで一度洗い、付着した細胞を３％パラホルムアルデヒドを含むＰＢＳで固定し、３．７％ホルムアルデヒド中の０．５％トルイジンブルーで染色した。細胞は一晩室温で染色し、トルイジンブルーに染まった細胞の５９０ｎｍにおける吸光度を垂直光路分光光度計で測定し、細胞接着度を定量化した（VMAX Kinetic Microplate Reader，Molecular Devices，Menlo Park，CA）。本法は先に報告された方法（Cardarelli等、PNAS-USA，83：2647-2651（1986））の変法であるＪｕｒｋａｔ−ＣＳ−１接着測定法（Ｊｕｒｋａｔ−α₄測定法）ＣＳ−１由来ペプチド、ＣＬＨＰＧＥＩＬＤＶＰＳＴ（SEQ．ID．NO.：26）とＣＬＨＧＰＩＥＬＶＳＤＰＴ（SEQ．ID．NO.：27）をミクロタイタープレートにヘテロ２官能基交差結合剤、３−（２−ピリジルジチオ）プロピオン酸Ｎ−ヒドロキシ琥珀酸イミドエステル（ＳＰＤＰ）（Ｓｉｇｍａ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）を用いて公知の方法（Pierschbacher，PNAS-USA 80：1224（1983）で固定した。簡単に述べると、ミクロタイタープレートは室温で２０μg/mlのヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）で２時間被覆し、次いで１時間ＳＰＤＰ（１０μｇ／ｍｌ）で１時間誘導体化した。過剰の遊離試薬を除いた後、システインを含むペプチドを加え、一晩４゜Ｃで交差結合させた。続いて細胞接着測定を、ヒトＴ−リンパ細胞ライン「ＪＵＫＡＴ」を用いること以外は「Ｕ９３７細胞フィブロネクチン接着測定法」に従って実施した。Ｊｕｒｋａｔ−内皮細胞接着測定法本発明化合物の典型的ln vitro系における細胞−細胞接着阻害作用を以下の測定法により確定した。本測定法は被検化合物が共存下で、内皮細胞単層とＴ−細胞ライン［Ｊｕｒｋａｔ］の接着相互作用を測定する。被検化合物は濃度を増しながらＴ−細胞へ加え、これを内皮細胞単層へ加えた。試験プレートをインキュベートし、洗浄し、接着した細胞数のパーセンテージを定量した。本測定法は直接本発明化合物の細胞接着阻害作用と接着制御作用を証明する。ヒト臍静脈内皮細胞はＣｌｏｎｅｔｉｃｓ（San Diego，CA）から２代継代したものを購入した。細胞は０．５％豚皮ゼラチン前被覆フラスコ（Sigma，St．L ouis，MO）で、１０％牛胎児血清を加えたＥＧＭ−ＵＶ液（Clonetics，San Die go,CA）中で増殖した。培地を２〜３日おきに替えると４〜６日でコンフルエント状態に達した。細胞接着について第八因子抗原の有無を調べ、我々の結果では１２継代でこの抗原が陽性となった。内皮細胞は１２継代以降は使用しなかった。Ｔ細胞ＪｕｒｋａｔはAmerican Type Tissue Culture Collectionから入手し、１０％ウシの胎児血清を含むＲＰＭＩ培地で培養した。細胞ＨＢＳＳで２度洗い、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）２．５ｍｇ／ｍｌを含むＤｕｌｂｅｃｃｏ’ ｓＭｉｎｉｍａｌＥａｇｌｅ’ｓＭｅｄｉａ（ＤＭＥＭ）に再懸濁した。牛胎児血清５％を含むＨＳＳＳに溶かした１０μｇ／ｍｌの酢酸フルオレセイン（Sigma，St．Louis，MO）で染色した。細胞の染色は１５分間室温で遮光下に行い、２度洗ってＤＭＥＭ−ＨＳＡ液に再懸濁した。９６穴組織培養プレートで増殖したコンフルエントな内皮細胞は、０．１ｎｇ／ｍｌ（５０Ｕ／ｍｌ）の組み換えＩＬ−１（Amgen，Thousand Oaks，CA）で３７℃、４時間刺激した。このインキュベーション後、細胞単層は２度ＨＢＳＳで洗い、０．１ｍｌのＤＭＥＭ−ＨＳＡ液を加えた。Ｊｕｒｋａｔ細胞（５×１０⁵ 個）は被検ペプチドの適当な濃度と混ぜ、この混合物（０．１ｍｌ）を内皮細胞単層に加えた。通常、２５０、５０、１０および２μＭのペプチド濃度でテストした。いくつかの活性の強いペプチドは５０、１０、２および０．４μＭ濃度でテストしてIC₅₀値を決定した。プレートを氷の上に５分間置き、Ｊｕｒｋａｔ細胞を沈降させてから３７゜Ｃで２０分間インキュベートした。このインキュベーション後、細胞単層を２回、１ｍＭの塩化カルシウムと１ｍＭの塩化マグネシウムを含むＰＢＳで洗い、Ｐａｎｄｅｘ蛍光濃度分析計（Baxter，Mundelein，IL ）でプレートの蛍光を測定した。それぞれのウエルの蛍光を任意の蛍光単位で読み取り、ペプチドが存在しないときの細胞接着を１００％として、被検ペプチド存在下での接着の％を計算した。細胞単層はまた３％パラフォルムアルデヒドで固定し、顕微鏡で接着を確認した。細胞接着測定を、ヒトＴ−リンパ細胞ライン「ＪＵＲＫＡＴ」をＵ９３７細胞の代わりに用いること以外は「Ｕ９３７細胞フィブロネクチン接着測定法」に従って実施した。Ｕ９３７細胞のフィブロネクチンへの接着結果力価はμＭ単位で表す。本測定法での活性は、ＩＣ₅₀が５００μＭ以下に限定する。これは、接着を５０％阻害するのにより高いモル濃度を要求する化合物はなお活性であり、興味があるかもしれないが、ヒトにIn vivoで投与したときに高用量が必要であると考えられるので、総合的にあまり興味はないと云う意味を持たせるためである。１０μＭ以下で活性である化合物はもっとも好ましい、１００μＭ以下のものは好ましいとは云えないまでも受け入れることができ、５００μＭ以下のものは好ましくないものであり、そして５００μＭ以上のものは全く好ましくない。すなわち本発明の目的は、フィブロネクチンへの細胞接着を阻害することに限定するものではなく、細胞接着制御に非常に高い活性を持つ化合物を提供することである。データはまた、ＲＧＤ配列を含まない化合物はフィブロネクチンへの接着阻害に有効であることを示している。Ｊｕｒｋａｔ−内皮細胞接着の結果ＩＬ−１刺激内皮細胞へのＪｕｒｋａｔ細胞の接着阻害の結果。本測定法において、活性（Ａ）はＩＣ₅₀が２５０μＭ以下；不活性（Ｉ）はＩＣ₅₀が２５０μ Ｍ以上であると専断的に定義する。先述のように、これはＩＣ₅₀が２５０μＭ以上の化合物が実際に不活性であることを意味するのではなく、むしろそれらはＩＣ₅₀が低いので、ヒトでは実際的には十分活性ではないことを意味する。すなわち本発明の目的は、内皮細胞へのＴ細胞の接着を阻害することに限定するものではなく、細胞接着制御に非常に高い活性を持つ化合物を提供することである。この相互作用に含まれる厳密なレセプターおよび被験化合物で標的とされたレセプターは内皮細胞の白血球およびＶＣＡＭ−１のα₄β₁、α₄β₇に限定されない。最後に、データはＲＧＤ配列を含まない化合物は細胞−細胞間接着の阻害に有効であることを示している以下の表３は本発明の多様な化合物のデータを用いた３つの上記測定法から得られた結果を示す。表３から選ばれた化合物は以下の配列で一欄される：化合物２（SEQ．ID NO．：13）；化合物３（SEQ．ID．NO.：5）；化合物２３，３３，４８，４９，５１，５４，５５，６２および９２（SEQ．ID．NO．：4）；化合物２９（SEQ．ID．N O．：6）；化合物４２（SEQ．ID．NO．：7）；化合物５０（SEQ．ID．NO．：8）；化合物６５および６６（SEQ．ID．NO．：9）；化合物６７（SEQ．ID．NO．：1 0）；化合物６８（SEQ．ID．NO.：11）；化合物６９（SEQ．ID．NO．：12）；化合物７１（SEQ．ID．NO．：14）；化合物７５（SEQ．ID．NO．：15）；化合物７７（SEQ．ID．NO．：16）；化合物７８，７９（SEQ．ID．NO．：17）；化合物８０（SEQ．ID．NO．：18）；化合物８１（SEQ．ID．NO．：19）;化合物８２（SEQ ．ID．NO．：20）；化合物８４（SEQ．ID．NO．：21）；化合物８５（SEQ．ID． NO．：22）；化合物８６（SEQ．ID．NO．：23）；化合物８７（SEQ．ID．NO．： 24）；化合物８９（SEQ．ID．NO．：25）。配列リスト（１）一般情報（i）出願人：チャン、シュウーランエヌ．カルダレリ、ピナエム．ローブル、トーマスジェイ．（ii）発明の名称：ペプチド型細胞接着阻害剤（iii）配列数：28 （iv）連絡先：（A）名称：バーチ、スチュワート、コーラッシアンドバーチ（B）ストリート名：私書箱 747 （C）都市名：フォールズチャーチ（D）州名：バージニア（E）国名：アメリカ合衆国（F）ジップコード：22040-3487 （v）コンピュータ読みとりフォーム：（A）記録媒体：フロッピーディスク（B）コンピューター：IBM PCコンパチブル（C）作動システム：PC-DOS/MS-DOS （D）ソフトウェア：パテントーインリリース＃1.0，Ver．＃1.25 （vi）現行出願データ（A）出願番号：US 08/001,773 （B）出願日：1993.1.8 （C）分類：（viii）代理人情報（A）氏名：マーフィージュニア、ジェラルド M. （B）登録番号：28,977 （C）参照／ドケット番号：485-103P （iX）通信情報：（A）電話：703-241-1300 （B）テレファックス：703-241-2848 （C）テレックス：248345 （２）配列番号１に関する情報（i）配列の特徴（A）配列の長さ：アミノ酸10個（B）配列の型：アミノ酸（C）鎖の数：一本鎖（D）トボロジー：直鎖状（ii）配列の種類：ペプチド（iii）ハイポセティカル配列：Ｎｏ．（v）フラグメント型：中間部フラグメント（ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：peptide （B）存在位置：１..１０（D）他の情報：／ラベル＝ペプチド／注＝″フィブロネクチンの細胞認識部位″ （xi）配列：配列番号１：（２）配列番号２に関する情報（i）配列の特徴（A）配列の長さ：アミノ酸５個（B）配列の型：アミノ酸（C）鎖の数：一本鎖（D）トポロジー：直鎖状（ii）配列の種類：ペプチド（iii）ハイポセティカル配列：Ｎｏ（v）フラグメント型：中間部フラグメント（ix）配列の特徴（A）特徴を表す記号：peptide （B）存在位置：１..５（D）他の情報：／ラベル＝ペプチド／注＝”アルファー４−ベーター１インテグリン認識ペプチド″ （xi）配列：配列番号２（２）配列番号３に関する情報（i）配列の特徴（A）配列の長さ：アミノ酸６個（B）配列の型：アミノ酸（D）トポロジー：環状（ii）分子配列の型：ペプチド（v）フラグメント型：中間部フラグメント（ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：peptide （B）存在位置：１..６（D）他の情報：／ラベル＝ペプチド／注＝”接触過敏症感作実験に使用ペプチド″ （xi）配列：配列番号３（２）配列番号４に関する情報（i）配列の特徴（A）配列の長さ：アミノ酸４個（B）配列の型：アミノ酸（D）トポロジー：環状（ii）配列の種類：ペプチド（v）フラグメント型：中間部フラグメント（ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modifiedsite （B）存在位置：１（D）他の情報：／ラベル＝修飾アミノ酸／注＝″1-FCA，Ada，GAC， DTC，Fmoc，5-FINC，CBOまたはザルコシンで誘導体化した″ （ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：３（D）他の情報：／ラベル＝修飾アミノ酸／注＝″チオプロリン″ （ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：４（D）他の情報：／ラベル＝修飾アミノ酸／注＝”アミド化Ｃ−末端であってもよい、例えば、表１および３の化合物９２、または請求範囲８のＡＭＰで誘導体化したＣ−末端” （xi）配列：配列番号４（２）配列番号５に関する情報（i）配列の特徴（A）配列の長さ：アミノ酸７個（B）配列の型：アミノ酸（D）トポロジー：環状（ii）配列の種類：ペプチド（v）フラグメント型：中間部フラグメント（ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：peptide （B）存在位置：１..７（D）他の情報：／ラベル＝ペプチド／注＝”表１および３の化合物３” （xi）配列：配列番号５（２）配列番号６に関する情報（i）配列の特徴（A）配列の長さ：アミノ酸８個（B）配列の型：アミノ酸（D）トポロジー：環状（ii）配列の種類：ペプチド（v）フラグメント型：中間部フラグメント（ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：peptide （B）存在位置：１..８（D）他の情報：／ラベル＝ペプチド／注＝″表１および３の化合物２９″ （xi）配列：配列番号６（２）配列番号７に関する情報（i）配列の特徴（A）配列の長さ：アミノ酸７個（B）配列の型：アミノ酸（D）トポロジー：環状（ii）配列の種類：ペプチド（v）フラグメント型：中間部フラグメント（ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：５（D）他の情報：／ラベル＝″修飾アミノ酸／注＝″ｐ−クロロフェニルアラニン″ （ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：６（D）他の情報：／ラベル＝修飾アミノ酸／注＝″チオプロリン″ （xi）配列：配列番号７（２）配列番号８に関する情報（i）配列の特徴（A）配列の長さ：アミノ酸９個（B）配列の型：アミノ酸（D）トポロジー：環状（ii）配列の種類：ペプチド（v）フラグメント型：中間部フラグメント（ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：７（D）他の情報：／ラベル=″修飾アミノ酸／注=″ｐ−クロロフェニルアラニン″ （ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：８（D）他の情報：／ラベル＝修飾アミノ酸／注＝″チオプロリン″ （xi）配列：配列番号８（２）配列番号９に関する情報（i）配列の特徴（A）配列の長さ：アミノ酸５個（B）配列の型：アミノ酸（D）トポロジー：環状（ii）配列の種類：ペプチド（ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：１（D）他の情報：／ラベル＝修飾アミノ酸／注＝”AnBで誘導体化アミド化されうる″ （ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：４（D）他の情報：／ラベル＝修飾アミノ酸／注＝″チオプロリン″ （xi）配列：配列番号９（２）配列番号10に関する情報（i）配列の特徴（A）配列の長さ：アミノ酸５個（B）配列の型：アミノ酸（D）トポジー：環状（ii）配列の種類：ペプチド（v）フラグメント型：中間部フラグメント（ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：１（D）他の情報：／ラベル=″修飾アミノ酸／注=″AnBで誘導体化した″ （ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：４（D）他の情報：／ラベル＝修飾アミノ酸／注＝″チオプロリン″ （xi）配列：配列番号10 （２）配列番号11に関する情報（i）配列の特徴（A）配列の長さ：アミノ酸５個（B）配列の型：アミノ酸（D）トボロジー：環状（ii）配列の種類：ペプチド（v）フラグメント型：中間部フラグメント（ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：５（D）他の情報：／ラベル＝″修飾アミノ酸／注＝″チオプロリン″ （xi）配列：配列番号11 （２）配列番号12に関する情報（i）配列の特徴（A）配列の長さ：アミノ酸６個（B）配列の型：アミノ酸（D）トポロジー：環状（ii）配列の種類：ペプチド（v）フラグメント型：中間部フラグメント（ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：５（D）他の情報：／ラベル＝”修飾アミノ酸／注＝″チオプロリン″ （xi）配列：配列番号12 （２）配列番号13に関する情報（i）配列の特徴（A）配列の長さ：アミノ酸７個（B）配列の型：アミノ酸（D）トポロジー：環状（ii）配列の種類：ペプチド（v）ラグメント型：中間部フラグメント（ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：３（D）他の情報：／ラベル＝”修飾アミノ酸／注＝″ザルコシン″ （xi）配列：配列番号13 （２）配列番号14に関する情報（i）配列の特徴（A）配列の長さ：アミノ酸５個（B）配列の型：アミノ酸（D）トポロジー：環状（ii）配列の種類：ペプチド（v）フラグメント型：中間部フラグメント（ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：１（D）他の情報：／ラベル＝″修飾アミノ酸／注＝″オルニチン″ （ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：４（D）他の情報：／ラベル＝″修飾アミノ酸／注＝″チオプロリン″ （xi）配列：配列番号14 （２）配列番号15に関する情報（i）配列の特徴（A）配列の長さ：アミノ酸６個（B）配列の型：アミノ酸（D）トポロジー：環状（ii）配列の種類：ペプチド（v）フラグメント型：中間部フラグメント（ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：５（D）他の情報：／ラベル＝”修飾アミノ酸／注＝″チオプロリン″ （xi）配列：配列番号15 （２）配列番号16に関する情報（i）配列の特徴（A）配列の長さ：アミノ酸５個（B）配列の型：アミノ酸（D）トポロジー：環状（ii）配列の種類：ペプチド（v）フラグメント型：中間部フラグメント（ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：１（D）他の情報：／ラベル＝”修飾アミノ酸／注＝″AnBで誘導体化″ （ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：４（D）他の情報：／ラベル＝修飾アミノ酸／注＝″チオプロリン″ （xi）配列：配列番号16 （２）配列番号17に関する情報（i）配列の特徴（A）配列の長さ：アミノ酸５個（B）配列の型：アミノ酸（D）トポロジー：環状（ii）配列の種類：ペプチド（v）フラグメント型：中間部フラグメント（ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：１（D）他の情報：／ラベル＝修飾アミノ酸／注＝”1-FCAで誘導体化した″ （ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：４（D）他の情報：/ラベル=修飾アミノ酸/注=″チオプロリンであってもよい、化合物79を見よ″ （xi）配列：配列番号17 （２）配列番号18に関する情報（i）配列の特徴（A）配列の長さ：アミノ酸６個（B）配列の型：アミノ酸（D）トポロジー：環状（ii）配列の種類：ペプチド（v）フラグメント型：中間部フラグメント（ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：５（D）他の情報：／ラベル＝”修飾アミノ酸／注＝″チオプロリン″ （xi）配列：配列番号18 （２）配列番号19に関する情報（i）配列の特徴（A）配列の長さ：アミノ酸５個（B）配列の型：アミノ酸（D）トポロジー：環状（ii）配列の種類：ペプチド（v）フラグメント型：中間部フラグメント（ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：１（D）他の情報：／ラベル＝修飾アミノ酸／注＝”Aibで誘導体化した″ （ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：４（D）他の情報：／ラベル＝修飾アミノ酸／注＝″チオプロリン″ （xi）配列：配列番号19 （２）配列番号20に関する情報（i）配列の特徴（A）配列の長さ：アミノ酸６個（B）配列の型：アミノ酸（D）トポロジー：環状（ii）配列の種類：ペプチド（v）フラグメント型：中間部フラグメント（ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：５（D）他の情報：／ラベル＝″修飾アミノ酸／注″チオプロリン″ （xi）配列：配列番号20 （２）配列番号21に関する情報（i）配列の特徴（A）配列の長さ：アミノ酸６個（B）配列の型：アミノ酸（D）トポロジー：環状（ii）配列の種類：ペプチド（v）フラグメント型：中間部フラグメント（ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：３（D）他の情報：／ラベル＝修飾アミノ酸／注＝″3-Brチロシン″ （ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：５（D）他の情報：／ラベル＝修飾アミノ酸／注＝″チオプロリン″ （xi）配列：配列番号21 （２）配列番号22に関する情報（i）配列の特徴（A）配列の長さ：アミノ酸５個（B）配列の型：アミノ酸（D）トポロジー：環状（ii）配列の種類：ペプチド（v）フラグメント型：中間部フラグメント（ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：３（D）他の情報：／ラベル″修飾アミノ酸／注＝″3-Brチロシン″ （ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：４（D）他の情報：／ラベル＝修飾アミノ酸／注＝″チオプロリン″ （xi）配列：配列番号22 （２）配列番号23に関する情報（i）配列の特徴（A）配列の長さ：アミノ酸６個（B）配列の型：アミノ酸（D）トポロジー：環状（ii）配列の種類：ペプチド（v）フラグメント型：中間部フラグメント（ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：３（D）他の情報：／ラベル=″修飾アミノ酸／注=″3-ピリジルアラニン″ （ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：５（D）他の情報：／ラベル＝修飾アミノ酸／注＝″チオプロリン″ （xi）配列：配列番号23 （２）配列番号24に関する情報（i）配列の特徴（A）配列の長さ：アミノ酸５個（B）配列の型：アミノ酸（D）トポロジー：環状（ii）配列の種類：ペプチド（v）フラグメント型：中間部フラグメント（ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：１（D）他の情報：/ラベル＝修飾アミノ酸/注＝”AMBAで誘導体化した″ （ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：４（D）他の情報：／ラベル＝修飾アミノ酸／注＝″チオプロリン″ （xi）配列：配列番号24 （２）配列番号25に関する情報（i）配列の特徴（A）配列の長さ：アミノ酸５個（B）配列の型：アミノ酸（D）トポロジー：環状（ii）配列の種類：ペプチド（v）フラグメント型：中間部フラグメント（ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：４（D）他の情報：／ラベル＝修飾アミノ酸／＝″チオプロリン″ （xi）配列：配列番号25 （２）配列番号26に関する情報（i）配列の特徴（A）配列の長さ：アミノ酸13個（B）配列の型：アミノ酸（D）トポロジー：直鎖状（ii）配列の種類：ペプチド（v）フラグメント型：中間部フラグメント（ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：peptide （B）存在位置：１...13 （D）他の情報：／ラベル＝ペプチド／注＝”CS-1由来ペプチド″ （xi）配列：配列番号26 （２）配列番号27に関する情報（i）配列の特徴（A）配列の長さ：アミノ酸13個（B）配列の型：アミノ酸（D）トポロジー：直鎖状（ii）配列の種類：ペプチド（v）フラグメント型：中間部フラグメント（ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：peptide （B）存在位置：１...13 （D）他の情報：／ラベル＝ペプチド／注＝″CS-1由来ペプチド″ （xi）配列：配列番号27 （２）配列番号28に関する情報（i）配列の特徴（A）配列の長さ：アミノ酸４個（B）配列の型：アミノ酸（D）トポロジー：環状（ii）配列の種類：ペプチド（v）フラグメント型：中間部フラグメント（ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：１（D）他の情報：／ラベル＝修飾アミノ酸／注＝″1-FCAまたは酢酸で誘導体化した″ （ix）配列の特徴：（A）特徴を表す記号：modified site （B）存在位置：４（D）他の情報：／ラベル＝修飾アミノ酸／注＝″アミド化Ｃ−末端″ （xi）配列：配列番号28

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＡ６１Ｋ 38/00 ＡＢＧＡＢＪＡＢＬＡＢＮＡＢＸＡＣＢＡＣＤＡＣＪＡＣＺＡＤＡＡＤＳＡＤＵＣ０７Ｋ 7/06 8318−4ＨＧ０１Ｎ 33/53 Ｄ 8310−2ＪＹ 8310−2ＪＡ６１Ｋ 37/02 ＡＢＧＡＣＤＡＢＦＡＢＮＡＣＢＡＢＣＡＤＡＡＢＸＡＤＵＡＢＬＡＣＪＡＣＺ

Claims

【特許請求の範囲】請求項１．次式で表される化合物：または薬理的に許容し得る塩、但し、Ｌ¹およびＬ²は同一または異なって、Cys，Pen，Mpr，AnB，AnC，β-Ala ，Lys，Orn，Dpr，Asp，Glu，アミノ酸残基、アミノ酸同族体およびＬ¹とＬ²の間で環状架橋構造を形成することができる官能基を有するアミノ酸類から選ばれ；ＺはＬ¹とＬ²の間で環を形成する部分または結合であり；１は任意で、存在する場合はLeu，Tyr，Phe，Ile，Pro，Pro同族体、Gl y，Ala，Val，norLeu，norVal，Trp，D-Nal，Sar，（Ada）-Ala，AnC，AnB，Lys ，ω−アミノ低級アルキルカルボン酸，Gly，Ala，Gly-Gly，Ala-Ala，AnC-AnC ，AnB-AnB，β-Ala，β-Ala-β-A1a，1-Nal，TTC，TCA，DTCおよびMTCから選ばれ；２は任意で、存在する場合はArg，Arg同族体，Lys，Lys同族体，His，A 1a，Gly，Sar，Leu，AnB，Phe，Phe同族体，Pro，Pro同族体，TCA，TTC，DTCおよびDprから選ばれ；３はGly，Sar，Ala，Ala同族体，d-Ala，Ile，Val，d-Val，d-Nal，Phe ，Lys，Arg，Asp，β-Asp，Asn，Aib，AnB，β-Ala，Glu，Met，Leu，Tyr，3-Br -Tyr，システイン酸，3,5-ジブロモ-Tyr，3,5-ジヨード-Tyrから選ばれ；４はAsp，d-Asp，G1u，Asn，Gln，AspおよびGluのFm-エステル，AspおよびGluの他の置換アルキル、アリール、およびアルクアリールエステル，A snおよびGlnのアルキル、アリール、およびアルクアリールアミド、Gly，Ala， β-Ala，Leu，Val，AnB，Phe，o，m，p-ハロゲノ-Phe，p-ニトロ-Phe，Arg，Cys ，TIC，Pro，およびProから選ばれ；５は任意で、存在する場合はSer，Thr，Trp，Ala，Val，Phe，o，m，ｐ -ハロゲノ-Phe，p-ニトロ-Phe，p-フルオロ-Phe，p-クロロ-Phe，3,5-ジブロモ- Tyr，p-メトキシ−Thy，但し、ｍは２、３、または４、から選ばれ；６は任意で、存在する場合はPro，d-Pro，thiop，1,3-ジチアゼピン，1 ,4-ジチアゼピン，および1,5-ジチアゼピン，Pro同族体，1,1-ACC，Dhp，Hyp，ホモPro，Phe，DTC，TTC，TC，MTC，TCA，o-ハロゲノ-Phe，m-ハロゲノ-Phe，p- ハロゲノ-Phe，p-ニトロ-Phe，イソニペコチン酸、N-メチルアラニンおよびTIC から選ばれ；Ｘ¹は任意で、存在する場合は、１個から４個のＤまたはＬアミノ酸およびアミノ酸同族体、Ada，AnC，AnB，CBO，ω−アミノ低級アルキルカルボン酸およびAMBA，低級アルキル、芳香族カルボン酸、アルキル芳香族カルボン酸およびSARから選ばれ；Ｙ¹は任意で、存在する場合は、１個から４個のＤまたはＬアミノ酸およびアミノ酸同族体、Ada，AnC，AnB，CBO，ω−アミノ低級アルキルカルボン酸、AMBA，アミノメチルピリジン、低級アルキルアミン、芳香族アミン、アルキル芳香族アミンおよびSARから選ばれ；Ｘ²は任意でＮ^a−置換されていてもよいＲ’またはＲ’ＣＯ−、ギ酸、酢酸、ヘテロ環状カルボン酸、アリールカルボン酸類、ヘテロ芳香族カルボン酸類、アルキルカルボン酸類、アルケニルカルボン酸類、アルキニルカルボン酸類、他の混合官能基である硫黄および窒素を含む直鎖状カルボン酸類、アダマンチル、フルオレニル、1-FCA，9-FCA，9FA，FMOC，Ada，Ada-CA，NAcA，3-Me-Ada，（NB）-Ac，PhAc，Naph-Ac，HCA，QC，CPA，DTC，TCA，AMBA，他の多環芳香族およびヘテロ芳香族カルボン酸および酢酸類、QC，CPA，BOC，5-FINCおよびCBOであってもよく；Ｙ²は任意で-OR'，NHR'，NR'NH₂，NHNR'，-NR'₂，-NHNH₂，-SR'，アミノメチルピリジンおよびテトラゾールで置換したα−カルボン酸部を有するアミノ酸から選ばれるカルボン酸末端置換基であってもよく；また、Ｒ’は個々独立に薬理的に適した置換基であり、好ましくはハロゲン、直鎖状および分岐、非置換および置換のＣ₁−Ｃ₈低級アルキル類、Ｃ₂− Ｃ₈アルケニル類、Ｃ₂−Ｃ₈アルキニル類、Ｃ₆−Ｃ₁₄アリール類、Ｃ₇−Ｃ₁₄アルクアリール類、Ｃ₇−Ｃ₁₄シクロアルクアリール類およびＣ₃−Ｃ₁₄シクロアルキル類から選ばれ、さらに-NR'₂の場合は、任意に酸素、窒素または硫黄をさらなるヘテロ原子として含む、窒素原子とともに形成されるヘテロ５−８員環から選ばれるものであってもよい。但し、（１）３がＧｌｙであり、２がArgまたはArg同族体である場合、４はAsp、A sp同族体、GluまたはGlu同族体ではなく、（２）３がGlyであり、４がAsp、Asp同族体、GluまたはGlu同族体である場合、２はArgまたはArg同族体ではない。請求項２．Ｌ¹およびＬ²がいずれもCysであり、ジスルフィド結合、ラクタム、ランチオニン様モノスルフィドまたは他の結合で環架橋を形成したものである請求項１記載の化合物。請求項３．から選ばれる請求項１記載の化合物。請求項４．から選ばれる請求項１の化合物。請求項５．Ｚがジケト、ジアミノおよびヘテロ２官能性結合基から選ばれる２官能基を有する結合基である請求項１記載の化合物。請求項６．次式で表される化合物但し、X¹，X²，1，2，L¹，4，5，6，L²，Y¹，およびY²は、請求項１と同一の意味を表す。請求項７．次式で表される化合物但し、Ｘ²は保護基で、６はProまたはPro誘導体を表す。請求項８．である請求項７記載の化合物請求項９．請求項１記載の化合物および薬理的に許容しうる担体からなる医薬組成物。請求項１０．請求項６記載の化合物および薬理的に許容しうる担体からなる医薬組成物。請求項１１．請求項７記載の化合物および薬理的に許容しうる担体からなる医薬組成物。請求項１２．１投与あたり０．１から１００ｍｇ／ｋｇの範囲で請求項９記載の組成物を患者に投与することからなる、細胞外マトリックスへの不適切な細胞接着に起因する疾病の予防または治療法。請求項１３．細胞外マトリックスへの正常な細胞接着能を回復するために、請求項１０記載の組成物の有効量を患者に投与することからなる、細胞外マトリックスへの異常な細胞接着に起因する疾病の予防または治療法。請求項１４．正常な細胞間接着能を回復するために、請求項１１記載の組成物の有効量を患者に投与することからなる、異常な細胞間接着に起因する疾病の予防または治療法。請求項１５．白血球が内皮細胞または細胞外マトリックスへ接着するのを阻害するために請求項９記載の組成物の有効量を投与することからなる、白血球が内皮細胞または細胞外マトリックスへ接着するのを阻害する方法。請求項１６．請求項１記載の化合物に選択的に結合する抗体。請求項１７． i）請求項１に列挙した化合物の少なくとも１つを基質上に固定して基質の誘導体を作り； ii）患者の血液または血清検体を得て： iii）（i）で得られた基質と（ii）で記載した血液または血清とを、内皮細胞に選択的に結合する抗体が上記の基質と結合するであろう条件下で接触させ；さらに iv）上記基質と結合した抗体を検出することからなる内皮細胞と結合する抗体の存在に起因する疾病の診断方法。請求項１８． i）請求項１に列挙した化合物の少なくとも１つを基質上に固定して基質の誘導体を作り； ii）患者の血液または血清検体を得て： iii）（i）で誘導体化した基質と（ii）で述べた血液または血清とを、患者の血液または血清に存在し、上記内皮細胞に選択的に結合する抗体が上記誘導体化した基質と結合するであろう条件下で接触させ；さらに iv）上記基質と結合した抗体を検出することからなる細胞外マトリックスと結合する抗体の存在に起因する疾病の診断方法。請求項１９． i）患者から内皮組織検体を得て； ii）内皮組織の細胞を請求項１に列挙した化合物と接触させ；その上 iii）上記内皮細胞と選択的に結合する上記化合物の量を測定することからなる内皮細胞への過度の細胞接着に起因する疾病の診断方法。請求項２０．人工器官の表面を請求項１に列挙した化合物で被覆して、人工器官の表面に生体適合性表面を形成する方法。請求項２１．疾病がリウマチ関節炎、喘息、アレルギー疾患、成人型呼吸窮迫症候群、心血管系疾患、血栓症または血小板凝集障害、線溶後の再閉塞、同種移植臓器の拒絶、移植片宿主不適合、臓器移植、敗血症ショック、再還流傷害、乾癬、湿疹、接触性皮膚炎、および他の皮膚炎症疾患、骨粗鬆症、変形性関節炎、アテローム性動脈硬化症、腫瘍転移または癌増殖を含む腫瘍性疾患、網膜剥離のごとき眼疾患、Ｉ型糖尿病、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、眼の炎症反応および炎症性腹部疾患を含む炎症性および免疫性炎症性反応、潰瘍性大腸炎、限局性腸炎、および他の自己免疫疾患から選ばれる疾病である請求項１３記載の方法。請求項２２．有効な避妊、受精阻害、精子熟成阻害または精子の受精能獲得に有効な量の請求項１記載の化合物を患者に投与することからなる避妊、受精阻害、精子成熟阻害、または精子の受精能獲得の阻害を行う方法。請求項２３．不溶性担体に共有結合した請求項１記載の化合物からなる、請求項１記載の化合物に親和性を有する巨大分子精製の為のマトリックス。請求項２４． i）請求項１記載の化合物が結合した不溶性マトリックスを準備し、 ii）上記請求項１記載の化合物と高い親和性を持つ巨大分子を含む検体に、上記巨大分子と請求項１記載の化合物で錯体を形成しやすい条件で接触させて、上記マトリックスに結合させ、 iii）上記錯体を分解しないであろう溶液で汚染物質を除くために上記錯体が結合したマトリックスを洗浄し、 iv）上記巨大分子と請求項１記載の化合物との錯体を分解しない溶液で上記担体を洗浄して、目的物を溶出し、 V）請求項１記載の化合物に高い親和性を有する巨大分子を回収することからなる請求項１記載の化合物に高い親和性を持って選択的に結合する巨大分子を精製する方法。