JPH08508404A - ヒト・免疫不全ウイルス１型の検出 - Google Patents

ヒト・免疫不全ウイルス１型の検出

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Abstract

(57)【要約】 ヒト・免疫不全ウイルス１型を他のウイルスから識別する増幅オリゴヌクレオチドおよびハイブリダイゼーション検定プローブ。

Description

【発明の詳細な説明】 ヒト・免疫不全ウイルス１型の検出 本発明は、１９８９年７月１１日出願の米国特許出願番号第０７／３７９,５ ０１号（カシアンおよびフルツ（KacianおよびFultz）、発明の名称「核酸配列 増幅法」）および１９９０年７月１０日出願の米国特許出願番号第０７／５５０ ,８３７号（カシアンおよびフルツ、発明の名称「核酸配列増幅法」）の一部継 続出願であり、両出願を出典明示により本明細書の一部とする。発明の分野 本発明は、試験試料中の微生物の検出を可能とする、増幅オリゴヌクレオチド およびヒト・免疫不全ウイルス１型（ＨＩＶ）に対するプローブの設計および構 築に関する。発明の背景 このセクションは関連領域の簡単な概略を提供する。関連分野において本願発 明の先行文献であると認められるものはない。ヒトにおけるヒト・免疫不全ウイ ルス１型の実験的診断は、一般に、血清中のウイルス性抗原（ｐ２４）または抗 ＨＩＶ−１抗体の存在を測定することによりなされる。しかしながら、血清反応 陽性の母親より生まれた乳児のような、ある個体群においては、ウイルス性ＤＮ Ａの直接的検出法がより有用な診断手段である。ウイルス性ＤＮＡの検出は、培 養法よりも迅速であり、危険性が少ない。直接ハイブリダイゼーション法は大部 分の患者において適当な感受性を欠いている（ショウ（Shaw）ら、サイエンス（ Science）２２６：１１６５−１１７１、１９８４）。多くの文献は、ヒト免疫 不全ウイルスの検出において有用であると言われているオリゴヌクレオチドに言 及している。これら文献の多くはまた、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）の使用 に言及している。これらの文献は以下のものを包含する：クオック（Kwok）ら、 ジャーナル・オブ・ウイロロジー（J.Virol.）６１：１６９０−１６９４、１９ ８７；アジウス（Agius）ら、ジャーナル・オブ・ウイロロジカル・メッソズ（J .Virol.Meth.）３０：１４１−１５０、１９９０；アルバートおよびフェンヨ（ AlbertおよびFenyo）、ジャーナル・オブ・クリニカル・ミクロバイオロジー（J .Clin.Microbiol.）２８：１５６０−１５６４、１９９０；ベルおよびラトナー （BellおよびRatner）、エイズ・リサーチ・アンド・ヒューマン・レトロウイル セス（AIDS Res.and Human Retroviruses）５：８７−９５、１９８９；ブルイ ステン（Bruisten）ら、フォン・サング（Von Sang）６１：２４−２９、１９９ １；クラーク（Clarke）ら、エイズ（AIDS）４：１１３３−１１３６，ダーレン （Dahlen）ら、ジャーナル・オブ・クリニカル・ミクロバイオロジー２９：７９ ８−８０４、１９９１；ダッジン（Dudding）ら、バイオケミカル・アンド・バ イオフィジカル・リサーチ・コミュニケーションズ（Biochem.Biophys.Res.Comm .）１６７：２４４−２５０、１９９０；フェルラー−レーコウアー（Ferrer-Le -Coeur）ら、トロンボシス・アンド・ヘモスタシス（Thrombosis and Haemostas is）６５：４７８−４８２、１９９１；ゴスワミ（Goswami）ら、エイズ５：７ ９７−８０３、１９９１；グランクビスト（Grankvist）ら、エイズ５：５７５ −５７８、１９９１；グアテッリ（Guatelli）ら、ジャーナル・オブ・ウイロロ ジー６４：４０９３−４０９８、１９９０；ハート（Hart）ら、ランセット（La ncet）２（８６１１）：５９６−５９９、１９８８；ホーランド（Holland）ら 、プロシーディングス・オブ・ナショナル・アカデミー・オブ・サイエンシス・ ユー・エス・エイ（Proc.Natl.Acad.Sci.USA）８８：７２７６−７２８０、１９ ９１；ケラー（keller）ら、アナリティカル・バイオケミストリー（Anal.Bioch em.）１７７：２７−３２、１９８９；クマー（kumar）ら、エイズ・リサーチ・ アンド・ヒューマン・レトロウイルセス５：３４５−３５４、１９８９；リンス （Linz）ら、ジャーナール・オブ・クリニカル・ケミストリー・アンド・クリニ カル・バイオケミストリー（J.Clin.Chem.Clin.Biochem.）２８：５−１３、１ ９９０；マノおよびチャーマン（ManoおよびChermann）、レス・ウイロール（Re s.Virol.）１４２：９５−１０４、１９９１；マリオッチ （Mariotti）ら、エイズ４：６３３−６３７、１９９０；マリオッチら、トラン スフュージョン（Transfusion）３０：７０４−７０６、１９９０；メイヤラン ス（Meyerhans）ら、セル（Cell）５８：９０１−９１０、１９８９；ムーセッ ト（Mousset）ら、エイズ４：１２２５−１２３０、１９９０；オー（Ou）ら、 サイエンス２３９：２９５−２９７、１９８８；パン（Pang）ら、ネイチャー（ Nature）３４３：８５−８９、１９９０；パターリニ（Paterlini）ら、ジャー ナル・オブ・メディカル・ウイロロジー（J.Med.Virol.）３０：５３−５７、１ ９９０；パーリン（Perrin）ら、ブラッド（Blood）７６：６４１−６４５、１ ９９０；プレストン（Preston）ら、ジャーナル・オブ・ウイロロジカル・メソ ッズ３３：３８３−３９０、１９９１；プリッチャードおよびステファノ（Prit chardおよびStefano）、アンナレス・デ・バイオロジー・クリニク（Ann.Biol.C lin.）４８：４９２−４９７、１９９０；ルジン（Rudin）ら、ヨーロピアン・ ジャーナル・オブ・クリニカル・ミクロバイオロジー・インフェクティブ・ディ シーズ（Eur.J.Clin.Microbiol.Infect.Dis.）１０：１４６−１５６、１９９１ ；シューブリッジ（Shoebridge）ら、エイズ５：２２１−２２４、１９９１；ス チーブンソン（Stevenson）ら、ジャーナル・オブ・ウイロロジー６４：３７９ ２−３８０３、１９９０；トラッケンミラー（truckenmiller）ら、レス・イム ノール（Res.Immunol.）１４０：５２７−５４４、１９８９；ファン・デ・ペレ （Van de Perre）ら、ニュー・イングランド・ジャーナル・オブ・メディシン（ New Eng.J.Med.）３２５：５９３−５９８、１９９１；ヴァラス（Varas）ら、 バイオテクニクス（Biotechniques）１１：３８４−３９１、１９９１；ベルパ ンジ（Velpandi）ら、ジャーナル・オブ・ウイロロジー６５：４８４７−４８５ ２、１９９１；ウィリアムス（Williams）ら、エイズ４：３９３−３９８、１９ ９０；ザチャー（Zachar）ら、ジャーナル・オブ・ウイロロジカル・メソッズ３ ３：３９１−３９５、１９９１；ザック（Zack）ら、セル（Cell）６１：２１３ −２２２、１９９０；フィンドレー（Findlay）らの、ＰＣＴ／ＵＳ９０／００ ４５２、発明の名称「所定の核酸を検出するための核酸試験製品およびその使用 」；ジンゲラス（Gingeras）らの、ＰＣＴ／ＵＳ８７／０１９６６、 発明の名称「核酸プローブ検定法および組成物」；ブラケルおよびスパドロ（Sp adoro）の、ＥＰＯ出願番号９０１２４７３８.７、公開番号０ ４３５ １５０ Ａ２、発明の名称「増幅捕捉検定」；モンカニーおよびモンタニアー（Moncany およびMontagnier）の、ＥＰＯ出願番号９０４０１５２０.３、公開番号０ ４０ ３ ３３３ Ａ２、発明の名称「ＨＩＶＩ、ＨＩＶ−２型およびＳＩＶのレトロウ イルスのゲノムのヌクレオチド配列決定法、ならびに特にそれらレトロウイルス のゲノムを増幅するための、およびそれらウイルスの感染をin vitroにて診断す るためのそれらの適用」；ウルデア（Urdea）の、ＰＣＴ／ＵＳ９１／００２１ ３、発明の名称「核酸ハイブリダイゼーション検定にてシグナルを増幅するため のレポーター分子としてのＤＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼの写し」；ムッソ（ Musso）らの、ＰＣＴ／ＵＳ８８／０３７３５、発明の名称「ランタニドキレー ト結合した核酸プローブ」；チャン（Chang）、ＥＰＯ出願番号第８５３０７２ ６０.１号、公開番号０ １８５ ４４４ Ａ２、発明の名称「ＨＴＬＶ−III ＤＮ Ａのクローニングおよび発現」；およびレベンソン（Levenson）の、ＥＰＯ出願 番号第８９３１１８６２.０号、公開番号０ ３７０ ６９４、発明の名称「核酸 を検出するための固相捕捉手段を用いる診断用キットおよび方法」；およびスニ ンスキー（Sninsky）らの、米国特許第５,００８,１８２号。発明の要約 本発明は、新規な増幅オリゴヌクレオチドおよびヒト・免疫不全ウイルス１型 を検出するための検出プローブを開示する。該プローブはヒト・免疫不全ウイル ス１型とその公知の密接な系統発生的類似体を識別する能力を有する。該増幅オ リゴヌクレオチドおよびプローブは、ヒト免疫不全ウイルス核酸の検出および／ または定量に関する検定にて用いることができる。 検出しようとする核酸配列（「標的配列」）にハイブリダイズ可能な核酸配列 は、標的配列についてのプローブとして役立つことが知られている。該プローブ を検出可能な基、例えば放射性同位体、抗原または化学ルミネッセンスで標識化 し、標的配列の検出を容易としてもよい。ある核酸配列の検出操作として、核酸 ハイブリダイゼーションを使用する背景となる記載は、コーネ（Kohne）の米国 特許第４,８５１,３３０号、およびホーガン（Hogan）らのＥＰＯ特許出願番号 ＰＣＴ／ＵＳ８７／０３００９、発明の名称「非ウイルス性微生物の検出および ／または定量についての核酸プローブ」より得られる。 さらに、ハイブリダイゼーションが、ＤＮＡ／ＤＮＡ、ＤＮＡ／ＲＮＡおよび ＲＮＡ／ＲＮＡを包含する相補性核酸鎖の間で起こりうることも知られている。 ヌクレオチド（例、塩基、アデニン（Ａ）、シトシン（Ｃ）、チミジン（Ｔ）、 グアニン（Ｇ）、ウラシル（Ｕ）またはイノシン（Ｉ））より形成される、デオ キシリボ（「ＤＮＡ」）またはリボ（「ＲＮＡ」）核酸の２本の１本鎖をハイブ リダイズさせ、２本の鎖が相補性塩基対の間の水素結合により一緒になって保持 される２本鎖構造を形成させる。一般に、ＡはＴまたはＵに水素結合し、一方で ＧはＣに水素結合する。したがって、ハイブリダイズした鎖上いずれの点でも、 古典的塩基対ＡＴまたはＡＵ、ＴＡまたはＵＡ、ＧＣまたはＣＧを見ることがで きる。かくして、第１の核酸の１本鎖が第２の１本鎖に対して十分に隣接する相 補性塩基を含有し、それら２本の鎖がそのハイブリダイゼーションを促進する条 件下にある場合、２本鎖の核酸が得られるであろう。適当な条件下、ＤＮＡ／Ｄ ＮＡ、ＲＮＡ／ＤＮＡまたはＲＮＡ／ＲＮＡのハイブリッドが形成されるかもし れない。本発明は糖基で異なるか、さもなければ化学的に修飾されたヌクレオチ ドを含有するプローブまたはプライマーを使用することからなり、それらは前記 したラインに沿って水素結合可能である。 かくして、第１の態様において、本発明は、ヒト・免疫不全ウイルス１型をヒ トの血液または組織中に見られる他のウイルスから識別しうるハイブリダイゼー ション検定プローブ、およびヒト免疫不全ウイルス核酸を選択的に増幅しうる増 幅オリゴヌクレオチドを特徴とする。詳しくは、該プローブは、ＨＩＶ１型の塩 基７６３−７９３に対応するヒト・免疫不全ウイルス１型の核酸領域、（ＨＸＢ ２単離体、ジンバンク、寄託番号Ｋ０３４５５）、または塩基１２７１−１３０ １、１３５８−１３８７、１４６４−１４８９、１５０１−１５４０、１８１３ −１８４５、２９６９−２９９９、３１２５−３１６１、４１４８−４１７０、 ４８０４−４８３２、５９５０−５９７８、９４９６−９５２３、５１０−５４ ２および６２４−６５１にハイブリダイズするヌクレオチドポリマーである。好 ましくは、オリゴヌクレオチドは、以下の配列を必須としてなるか、または以下 の配列からなる（リーディング５'ないし３'）： またはそのＲＮＡ等価物（ＳＥＱ.ＩＤ.Ｎos.６７−８０）、またはそれに対し て相補的なオリゴヌクレオチド（ＳＥＱ.ＩＤ.Ｎos.５３−６６）、またはこれ に相補的なオリゴヌクレオチドに対するＲＮＡ等価物（ＳＥＱ.ＩＤ.Ｎos.８１ −９４）からなる。 該オリゴヌクレオチドを後記するヘルパープローブと共にまたはなしで用いる 。ヘルパープローブ（例、ＳＥＱ.ＩＤ.Ｎos.１５−１８）ならびに該ヘルパー プローブに対する相補性オリゴヌクレオチド（例、ＳＥＱ.ＩＤ.Ｎos.９５−９ ８）およびこれのＲＮＡ等価物（例、ＳＥＱ.ＩＤ.Ｎos.１３２−１４０）の使 用は核酸ハイブリダイゼーションを強化する。 「必須としてなる」という語は、プローブが、緊縮ハイブリッド条件下、標的 配列とハイブリダイズし、他のウイルス核酸またはヒト核酸中に存在する他の関 連する標的配列とハイブリダイズしない、純粋な核酸として得られることを意味 する。このようなプローブはかかるハイブリダイゼーションを形成しない他の核 酸に結合するかもしれない。一般に、該プローブは大きさが１５ないし１００塩 基の間（最も好ましくは２０と５０の間）にあることが好ましい。しかし、それ はベクターにて提供されてもよい。 関連する態様にて、本発明は、緊縮ハイブリッド条件下、本発明のプローブと 標的核酸とのハイブリダイゼーションにより形成される核酸ハイブリッドの形成 を特色とする。緊縮ハイブリッド条件は、６０℃で、０.６Ｍ ＬiＣl含有の０. ０５Ｍコハク酸リチウム緩衝液の使用を包含する。該ハイブリッドはウイルス性 核酸の特異的検出を可能とするため、有用である。 もう一つ別の関連する態様において、本発明は、増幅検定においてヒト・免疫 不全ウイルス１型の特異的検出について有用な増幅オリゴヌクレオチドを特色と する。該増幅オリゴヌクレオチドは、ＨＩＶゲノム核酸の保存領域に対して相補 的であり、ＨＩＶ−１ ＨＸＢ２塩基６８２−７０５、８００−８２２、１３０ ７−１３３７、１３０６−１３３０、１３１５−１３４０、１３９５−１４２５ 、１５１０−１５３５、１５４９−１５７２、１７４３−１７７１、１９７２− １９８９、２８６８−２８８９、３００８−３０４２、３０９２−３１２４、３ ２０９−３２３５、４０５２−４０７９、４１７６−４２０９、４１６９−４２ ０６、４３９４−４４２８、４７５６−４７７８、４８３５−４８５７、４９５ ２−４９６９、５８３４−５８６０、５９７９−５９９９、９４３１−９４５７ 、９５２９−９５５５、４４９−４７３、５５０−５７７、５７８−６０１、５ ７９−６００、６２４−６４６および６８０−７０３に対応するＨＩＶの核酸の 領域にハイブリダイズしうるヌクレオチドポリマーである。 特に、かかる増幅オリゴヌクレオチドは、（リーディング５'ないし３'）： およびそのＲＮＡ等価物（ＳＥＱ.ＩＤ.Ｎos.９９−１３１）から選択される配 列からなるか、または必須としてなる。（Ｘ）は不存在であるか、または限定さ れるものではないが、Ｔ７、Ｔ３またはＳＰ６ ＲＮＡポリメラーゼについての プロモーター配列を包含する、酵素により認識される５'オリゴヌクレオチド配 列であり、それはＲＮＡポリメラーゼによるＲＮＡ転写の開始または伸長を促進 する。Ｘの一例は、ＳＥＱ.ＩＤ.Ｎo.５２： を包含する。 これらの増幅オリゴヌクレオチドは、ポリメラーゼ連鎖反応のような核酸増幅 検定またはＲＮＡポリメラーゼ、ＤＮＡポリメラーゼおよびＲＮaseまたはカシ アンおよびフルツ（KasianおよびFultz）、前掲にて、スニンスキー（Sninsky） ら、米国特許第５,０７９,３５１号によって記載されている、その等価物を用い る増幅反応にて用いられる。 本発明の増幅オリゴヌクレオチドおよびプローブは、ヒト・免疫不全ウイルス １型の菌株に独特な特異的配列の試料の、迅速かつ客観的な同定および定量方法 を提供する。 本発明の他の特色および利点は、以下の記載およびその具体例、ならびに請求 の範囲より明らかであろう。好ましい具体例の記載 本発明者らは、ヒト・免疫不全ウイルス１型の核酸配列に対して相補的である 特に有用なＤＮＡプローブを見いだした。さらには、本発明者らは、ヒト・免疫 不全ウイルス１型の検出についての特異的検定においてこれらプローブを用い、 それをヒトの血液または組織中に見られる公知かつたぶん最も密接に関連する分 類学または系統発生学上の類似体と識別することに成功した。 本発明者らはまた、ヒト・免疫不全ウイルス１型核酸に相補的である特に有用 な増幅オリゴヌクレオチドを同定し、これらオリゴヌクレオチドを、例えば、プ ライマーまたはプロモータープライマーの組み合わせ（すなわち、プロモーター 配列を有するプライマー）として用い、ヒト免疫不全ウイルスの核酸を増幅させ 、試料中におけるその直接検出を可能とした。 望ましい特性を有する増幅オリゴヌクレオチドおよびプローブを設計するため の有用なガイドラインが本明細書中に記載されている。増幅およびプローブを行 うことについての最適部位は、長さが約１５個の塩基よりも大きな２つ、好まし くは３つの保存領域を、約３５０塩基、好ましくは１５０塩基の隣接配列の範囲 内に含有する。プライマーまたはプロモーター／プライマーで観察される増幅の 程度は、オリゴヌクレオチドをその相補性配列にハイブリダイズさせる能力およ び酵素的に伸長するその能力を含む、数種のファクターに依存する。ハイブリダ イゼーション反応の範囲および特異性は多くのファクターにより影響されるため 、これらファクターの操作が個々のオリゴヌクレオチドの正確な感受性および特 異性、すなわちその標的に完全に相補的であるかどうかを決定するであろう。種 々の検定条件の重要性および効果は、ホーガン（Hogan）らのＥＰＯ特許出願番 号ＰＣＴ／ＵＳ８７／０３００９（発明の名称「ウイルス以外の微生物を検出お よび／または定量するための核酸プローブ」）、本願の譲受人に譲渡された、ミ リマン（Milliman）の米国特許出願番号０７／６９０,７８８（１９９１年４月 ２５日出願）（発明の名称「ヘモフィラス・インフルエンザに対する核酸プロー ブ」）に記載されているように当業者にとって公知である。 標的核酸配列の長さ、結果的に、プローブ配列の長さが重要である。位置およ び長さが異なる、特定領域に由来する数種の配列がある場合、それらは所望のハ イブリダイゼーション特性を有するプローブを生成するであろう。別の場合にお いて、ある配列は単に一の塩基が異なるだけの別の配列よりも著しく優れている かもしれない。全く相補性でない核酸がハイブリダイズする可能性もあるが、完 全に相同性の塩基配列の最長の鎖が、通常、主としてハイブリッド安定性を決定 するであろう。異なる長さおよび塩基組成のオリゴヌクレオチドのプローブを用 いてもよいが、本発明において好ましいオリゴヌクレオチドプローブは、長さが 約１０〜５０塩基であり、標的核酸と十分に相同性であって、緊縮ハイブリッド 条件下でハイブリダイズする。本発明者らは、最適プライマーが、約６５℃の、 標的に対する推定Ｔｍ（融解温度）を有する、１８−３８塩基の標的結合領域を 有することを見いだした。 増幅オリゴヌクレオチドまたはプローブは、オリゴマー：非標的（すなわち、 標的核酸に対して類似する配列を有する核酸）の核酸ハイブリッドの安定性を最 小とするように位置付けられなければならない。増幅オリゴマーおよび検出プロ ーブは標的および非標的配列を識別できることが好ましい。プローブを設計する において、これらＴｍ値の差異は、できる限り大きくすべきである（例えば、少 なくとも２℃、好ましくは５℃である）。 ハイブリダイゼーションに対して阻害的な強い内部構造を形成することが知ら れている核酸の領域はあまり好ましくない。このような構造は、例えば、ヘアー ピンループを包含する。同様に、広範な自己相補性を有するプローブも避けるべ きである。 非特異的拡張の範囲（プライマー−ダイマーまたは非標的コピー）もまた増幅 効能を発揮でき、したがってプライマーは、特に配列の３'末端で、低い自己ま たは交差相補性を有するものが選択される。長いホモポリマー管およびＧＣ高含 量を回避し、疑似プライマー拡張を減少させる。市販のコンピュータープログラ ムを利用し、この設計の態様を助成することができる。利用できるコンピュータ ープログラムはＭacＤＮＡＳＩＳ（商標）２.０（ヒタチ・ソフトウェア・エン ジニアリング・アメリカン・リミテッド）およびＯＬＩＧＯ（登録商標）ver.４ .１（ナショナル・バイオサイエンス）を包含する。 ハイブリダイゼーションは、２本の１本鎖の相補性核酸の結合であって、水素 結合した２本鎖を形成する。２本のうち１本の鎖が全体的にまたは部分的にハイ ブリッドに関連しているならば、それは新たなハイブリッドの形成にほとんど関 連できないであろう。注目する配列の実質的部分が１本鎖であるようにプローブ を設計することにより、ハイブリダイゼーションの速度および範囲が、著しく増 加するかもしれない。標的が一体化したゲノム配列である場合、その場合、ポリ メラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）の産生物のケースのように、それは２本鎖の形態に て天然に存在するであろう。これらの２本鎖の標的は、自然には、プローブによ るハイブリダイゼーションに対して阻害的であり、ハイブリダイゼーション工程 の前に変性を必要とする。最後に、十分な自己相補性があるならば、プローブ内 に分子内および分子間ハイブリッドを形成しうる。このような構造はプローブ設 計に注意して回避することができる。市販のコンピュータープログラムを利用し 、この型の相互作用を研究する。利用可能なコンピュータープログラムはＭacＤ ＮＡＳＩＳ（商標）２.０（ヒタチ・ソフトウェア・エンジニアリング・アメリ カン・リミテッド）およびＯＬＩＧＯ（登録商標）ver.４.１（ナショナル・バ イオサイエンス）を包含する。 合成後に、選択されたオリゴヌクレオチドのプローブを数種の周知方法により 標識化してもよい。ジェイ・サムブロック、イー・エフ・フリッシュおよびティ ・マニスティス（J.Sambrook、E.F.FritschおよびT.Maniatis）、モレキュラー ・クローニング（Molecular Cloning）１１（第２版、１９８９年）。有用な標 識は放射性同位体ならびに非放射活性レポート基を包含する。本発明者らは、一 般に、アクリジニウムエステルを用いる。 オリゴヌクレオチド／標的のハイブリッドの融解温度は、当業者に周知の同位 体法により測定できる。所定のハイブリッドについてのＴｍは、用いるハイブリ ダイゼーション方法に依存して変わることに注意すべきである。サムブロックら 、前掲。 ハイブリダイゼーションの速度は、Ｃot1/2を決定することにより測定しても よい。プローブがその標的とハイブリダイズする速度は、プローブ領域における 標的の２次構造の熱安定性の基準である。ハイブリダイゼーション速度の標準基 準は、１リットル当たりのヌクレオチドのモル数を、秒数倍して測定されるＣot1/2 である。すなわち、プローブの濃度にその濃度で最大の５０％のハイブリダ イゼーションが起こる時間を倍したものである。この値は、固定した時間につい て、可変量のプローブを一定量の標的にハイブリダイズさせることにより決定さ れる。Ｃot1/2は標準操作によりグラフからわかる。 以下の実施例は、標的微生物からの独特な核酸配列に対して相補的なオリゴヌ クレオチドプローブ、およびハイブリダイゼーション検定における使用を示すも のである。実施例： ヒト・免疫不全ウイルス１型に対して特異的なプローブを、確立されたジンバ ンクのデータベースより得られる配列と比較することにより同定した。ＳＥＱＩ Ｄ Ｎos.１−１２はヒト・免疫不全ウイルス１型に対して特異的であると特徴 付けられ、かつ示されている。ヒト・免疫不全ウイルス２型、ヒト・Ｔ−細胞白 血病ウイルス１型およびヒト・Ｔ−細胞白血病ウイルス２型を含め、系統発生的 に類似するものをヒト・免疫不全ウイルス１型の配列と比較するために用いた。実施例１．ＨＩＶについてのプローブ ハイブリダイゼーション保護検定を用いてヒト・免疫不全ウイルス１型につい てのプローブの反応性および特異性を測定した。該プローブを、まず、非ヌクレ オチド・リンカーで合成し、ついで、出典明示により本明細書の一部とする、ア ーノルド（Arnold）らのＰＣＴ／ＵＳ８８／０３３６１（発明の名称「ヌクレオ チド・プローブのアクリジニウムエステル標識化および精製」）の記載に従って 、化学ルミネッセンスのアクリジニウムエステル（ＡＥ）で標識化した。ハイブ リダイズされていないプローブに結合したアクリジニウムエステルは加水分解に 対して感受性であり、穏やかなアルカリ性条件下、非化学ルミネッセンスとされ る。しかし、ハイブリダイズされたプローブに結合したアクリジニウムエステル は加水分解に対して相対的に耐性である。かくして、アルカリ性緩衝液と一緒に インキュベートし、つづいてルミノメーターにて化学ルミネッセンスを検出する ことにより、アクリジニウムエステル標識化プローブのハイブリダイゼーション について検定することが可能である。結果を相対光単位（ＲＬＵ）にて示し、標 識化プローブにより放射された光子の量をルミノメーターにより測定した。 以下の実験において、標的ウイルスの完全または部分的配列を含有するクロー ンから調製したＤＮＡを検定した。クローンからＤＮＡを調製する方法が、例え ば、サムブロックら、前掲に挙げられている。クローンについてのＤＮＡの供給 源は以下のとおりであった；ヒト・免疫不全ウイルス１型、ＢＨ１０（エル・ラ トナー（L.Ratner）ら、ネイチャー３１２：２７７−２８４、１９８５）；ヒト ・免疫不全ウイルス２型ＮＩＨＺ（ジェイ・エフ・ザグリー（J.F.Zagury）ら、 プロシーディングス・オブ・ナショナル・アカデミー・オブ・サイエンシス・ユ ー・エス・エイ８５：５９４１−５９４５、１９８８）、ヒト・Ｔ−細胞白血病 ウイルス１型ｐＭＴ−２（エム・クラーク（M.Clarke）ら、ネイチャー３０５： ６０−６２、１９８３）；ヒト・Ｔ−細胞白血病ウイルス２型（ケイ・シモトモ （K.Shimotohmo）ら、プロシーディングス・オブ・ナショナル・アカデミー・オ ブ・サイエンシス・ユー・エス８２：３１０１−３１０５、１９８５）； およびヒト・Ｂ型肝炎ウイルス抗原型ＡＤＷ（ＡＴＣＣ（＃４５０２０）より入 手）。１０ｍＭ Ｎ−２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ'−２−エタンスルホ ン酸（ＨＥＰＥＳ）、１０ｍＭエチレンジアミンテトラ酢酸（ＥＤＴＡ）、１％ ラウリル硫酸リチウム（pＨ７.４）の５０μｌ中の標的を９５℃で５分間変性さ せ、ウェットアイス上で冷却し、５０μｌの０.１Ｍコハク酸リチウム緩衝液、p Ｈ４.７、２％（ｗ／ｖ）ラウリル硫酸リチウム、１.２Ｍ塩化リチウム、１０ｍ Ｍ ＥＤＴＡおよび２０ｍＭエチレングリコール−ビス−（ベーターアミノエチ ルエーテル）Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラ酢酸（ＥＧＴＡ）中のプローブ（０.０４ピ コモル）を加えた。ハイブリダイゼーションを６０℃で１０分間実施し、つづい て３００μｌの０.６Ｍホウ酸ナトリウム（pＨ８.５）、１％トリトンＸ−１０ ０を加え、次のインキュベートを６０℃で６分間行い、ハイブリダイズされてい ないプローブ上のＡＥを加水分解した。試料を氷水中に１分間冷却し、室温でさ らに３分間放置し、ついで検出試薬Ｉ（０.１％過酸化水素および１ｍＭ硝酸を 含有）および検出試薬II（１Ｎ水酸化ナトリウムおよび界面活性剤成分を含有） の自動注入装置を備えたリーダー（LEADER）１ルミノメーターにて分析した。ハ イブリダイゼーション反応のうち幾つかの反応は、出典明示により本明細書の一 部とする、ホーガン（Hogan）ら、米国特許第５,０３０,５５７号（発明の名称 「核酸ハイブリダイゼーションを強化するための手段および方法」）に記載され ているように、４ピコモルの非標識化「ヘルパー・プローブ」の添加で強化され た。５,０００ＲＬＵよりも大きなＲＬＵ値は結果が陽性であり；５,０００ＲＬ Ｕに満たないものは結果が陰性であった。 以下のデータ（表１）は、プローブが、ヒトの血管または組織中に見られる密 接に関連するウイルス由来のウイルス性ＤＮＡと交差反応しないことを示す。試 料もまた、各標的に対して特異的なプローブで試験した場合の陽性シグナルを示 し、それにより、試料が適切であることを確かめた。 前記のデータは、本明細書中に開示し、特許請求する新規プローブが、ヒトの 血液中に見られるこれらウイルス由来のヒト・免疫不全ウイルス１型の識別能を 有することを確認するものである。実施例２．ＰＣＲによるＨＩＶの増幅 ヒト・免疫不全ウイルス１型について、プライマーおよびプローブの反応性を 測定するため、以下の実験を行った。ヒト・免疫不全ウイルスＤＮＡを含有する プラスミドＤＮＡの、０、２０または１００のコピーを制限エンドヌクレアーゼ で直鎖状とし、５０ピコモルの各プライマー、１０ｍＭトリスＨＣl（pＨ８）、 ５０ｍＭ ＫＣl、１.２５ｍＭ ＭgＣl2、各０.２５ｍＭのｄＡＴＰ、ｄＴＴＰ、 ｄＣＴＰ、ｄＧＴＰおよび２.５Ｕ Ｔａｇ ＤＮＡポリメラーゼを含有する５０ μｌの増幅反応体に添加した。反応物を９５℃で１−２分間インキュベートし、 ついで５５℃で１５秒間、７２℃で３０秒間、および９０℃で２０秒間、パーキ ン−エルマー（Perkin-Elmer）９６００サーモサイクラーにて、または５５℃で ３０秒間、７２℃で６０秒間、および９５℃で６０秒間、パーキン−エルマー４ ８ウェル・サーモサイクラーにて３５回循環させた。循環後、反応物を７２℃で ６−７分間インキュベートし、４℃で貯蔵した。１０μｌの生成物を、０.０４ ピコモルの標識化プローブによるハイブリダイゼーション保護検定により分析し た。そのデータを表２に示す。７,０００より大きなＲＬＵは結果が陽性である と考えられる。 実施例３．患者の試料 この実施例において、ＨＩＶ １型に感染していることが知られている個体ま たはＨＩＶ １型に感染していない個体（陰性対照）から２００,０００フィコー ル−ハイパキュー（Ficoll-Hypaque）で精製した白血球より調製した溶解産物含 有の患者試料を実施例２の記載に従って分析した。これらの細胞は、ライダーお よびカシアン（RyderおよびKacian）による米国特許出願第０７／８９８,７８５ （１９９２年６月１２日出願）（発明の名称「血液からの核酸調製」）の記載に 従って調製した。結果を表３に示す。 実施例４．非ＰＣＲ増幅 増幅オリゴマーもまた増幅検定に基づく転写にて作用することを明らかにする ために、ＨＩＶ １型含有のプラスミドＤＮＡの０、２,０００または２０,００ ０コピーを制限エンドヌクレアーゼを用いて直鎖状とし、９５℃に２分間加熱し 、３７℃に１分間冷却した。８００ＵのＭＭＬＶ逆転写酵素を添加した後、反応 物 を３７℃で１２分間インキュベートし、９５℃に２分間加熱し、３７℃に１分間 冷却した。８００ＵのＭＭＬＶ逆転写酵素および４００ＵのＴ７ＲＮＡポリメラ ーゼを加え、反応物を３７℃で３時間インキュベートした。最終増幅条件は、１ ００μｌ中に、７０ｍＭトリスＨＣl（pＨ８）、３５ｍＭ ＫＣl、１５ｍＭ Ｋ ＯＨ（Ｎ−アセチル−システインで中和）、６ｍＭ ｒＧＴＰ、４ｍＭ ｒＣＴＰ 、４ｍＭ ｒＡＴＰ、４ｍＭ ｒＵＴＰ、各１ｍＭのｄＴＴＰ、ｄＡＴＰ、ｄＣＴ ＰおよびｄＧＴＰ、および２２ｍＭ ＭgＣl2であった。１０μｌの各反応物を４ ０μｌの水と混合し、ハイブリダイゼーション緩衝液が２０ｍＭアルドリチオー ルを含有することを除いて、表１と同様に検定した。ＲＬＵの結果を表４に示す 。 コピー数が増加するにつれて、ＲＬＵもまた増加した。すなわち、本発明のプ ライマーを用い、転写ベースの増幅検定に用いるＨＩＶ １型標的配列を増幅さ せることができ、この増幅した標的配列は本発明のプローブを用いて検出できる 。実施例５ この実施例は、ヒト・免疫不全ウイルス１型についてのプローブの、転写ベー スの増幅検定にて産生される低濃度の標的オリゴマーの検出能を示す。ＨＩＶ １型配列を含有する０または１０コピーのプラスミドＤＮＡを制限エンドヌクレ アーゼを用いて直鎖状とし、１μｇのヒトＤＮＡの存在下、９５℃に８分間加熱 し、ついで４２℃に６分間冷却した。増幅を、８００ＵのＭＭＬＶ逆転写酵素お よび４００ＵのＴ７ ＲＮＡポリメラーゼを用い、以下の反応混合物： ５０ｍＭトリスＨＣl（pＨ８）、１７.５ｍＭ ＭgＣl2、０.０５ｍＭ酢酸亜鉛、 １０％グリセロール、６.２５ｍＭ ｒＧＴＰ、２.５ｍＭ ｒＣＴＰ、６.２５mＭ ｒＡＴＰ、２.５ｍＭ ｒＵＴＰ、０.２ｍＭ ｄＴＴＰ、０.２ｍＭ ｄＡＴＰ、 ０.２ｍＭ ｄＣＴＰおよび０.２ｍＭ ｄＧＴＰにおいて実施した。プライマーＳ ＥＱ ＩＤ Ｎos.２６、２８および４１を３０ピコモルの濃度で用い、プライ マーＳＥＱ ＩＤ Ｎo.３９を１５ピコモルの濃度で用いた。すべての反応体を 実施例１の記載に従って、ハイブリダイゼーション緩衝液（２０ｍＭアルドリチ オールを補充した）１００μｌ中、０.０４ピコモルのプローブによるハイブリ ダイゼーション保護検定を用いて分析した。プローブＳＥＱ ＩＤ Ｎo.１０を 、 ２ピコモルの標識化されていないヘルパーＳＥＱ ＩＤ Ｎo.１７の存在下、ハ イブリダイズした。 他の具体例も以下に示す請求の範囲にある。 （１）一般情報： （ｉ）出願人：シェロール・エッチ・マックドノー、トーマス・ビー・ライ ダー、イーシン・ヤン （ii）発明の名称：核酸増幅オリゴヌクレオチドおよびヒト・免疫不全ウイ ルス１型に対するプローブ （iii）配列の数：１４０ （iv）対応する住所： （Ａ）受信人：ライオン＆ライオン （Ｂ）通り名：ウエスト・シックスス・ストリート６１１番 （Ｃ）都市名：ロスアンデルス （Ｄ）州名：カリホルニア （Ｅ）国名：アメリカ合衆国 （Ｆ）郵便番号：９００１７ （ｖ）コンピューター・レーダブル・フォーム （Ａ）媒体型：３.５”ディスケット、１.４４Ｍｂストレージ （Ｂ）コンピューター：ＩＢＭ ＰＳ／２モデル５０Ｚまたは５５ＳＸ （Ｃ）操作システム：ＩＢＭ Ｐ.Ｃ.ＤＯＳ（バージョン３.３０） （Ｄ）ソフトウェア：ワードパーフェクト（バージョン５.０） （vi）最新出願データ： （Ａ）出願番号： （Ｂ）出願日： （Ｃ）分類番号： （vii）先行出願データ （Ａ）出願番号：米国特許出願第０７／５５０,８３７号 （Ｂ）出願日：１９９０年１０月７日 （Ａ）出願番号：米国特許出願第０７／３７９,５０１号 （Ｂ）出願日：１９８９年１１月７日 （viii）代理人情報 （Ａ）名称：ワーバーグ・リチャード・ジェイ （Ｂ）登録番号：３２,３２７ （Ｃ）処理番号：１９６／１８９ （ix）電話電信情報 （Ａ）電話番号：（２１３）４８９−１６００ （Ｂ）テレファックス：（２１３）９５５−０４４０ （Ｃ）テレックス：６７−３５１０ （２）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３１ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１： （３）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３１ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２： （４）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３０ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３： （５）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２６ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４： （６）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３７ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５： （７）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３３ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６： （８）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３１ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７： （９）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３７ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８： （１０）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２３ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９： （１１）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２９ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０： （１２）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２９ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１： （１３）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２８ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２： （１４）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３３ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３： （１５）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２８ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４： （１６）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２４ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５： （１７）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３６ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６： （１８）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３３ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７： （１９）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２４ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８： （２０）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２４ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９： （２１）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２３ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０： （２２）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３１ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１： （２３）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２５ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２： （２４）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２６ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３： （２５）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２７ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４： （２６）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２５ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５： （２７）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２６に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：１９ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２６： （２８）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２６ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７： （２９）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２３ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８： （３０）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３０ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９ （３１）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：１８ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０： （３２）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２２ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１： （３３）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３５ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２： （３４）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３３ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３： （３５）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４に関する情報： （ｉ）配列の特徴 （Ａ）配列の長さ：２８ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４： （３６）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２８ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５： （３７）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３４ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６： （３８）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３８ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７： （３９）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３５ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８： （４０）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２２ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９： （４１）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２３ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０： （４２）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：１８ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１： （４３）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２７ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２： （４４）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２１ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３： （４５）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２７ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４： （４６）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４５に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２７ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４５： （４７）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２５ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６： （４８）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４７に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２８ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４７： （４９）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４８に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２５ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４８： （５０）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４９に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２３ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４９： （５１）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２３ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０： （５２）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２３ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１： （５３）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２７ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２： （５４）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５３に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３１ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５３： （５５）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３１ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４： （５６）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３０ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５： （５７）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２６ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６： （５８）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３７ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７： （５９）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３３ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８： （６０）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５９に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３１ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５９： （６１）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３７ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０： （６２）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２３ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１： （６３）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６２に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２９ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６２： （６４）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６３に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２９ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６３： （６５）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６４に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２８ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６４： （６６）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６５に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３３ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６５： （６７）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６６に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２８ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６６： （６８）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６７に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３１ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６７： （６９）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３１ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８： （７０）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６９に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３０ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６９： （７１）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７０に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２６ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７０： （７２）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７１に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３７ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７１： （７３）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７２に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３３ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ 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（Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８２： （８４）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８３に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３１ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８３： （８５）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８４に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２６ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８４： （８６）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８５に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３７ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８５： （８７）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８６に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３３ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８６： （８８）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３１ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７： （８９）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８８に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３７ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８８： （９０）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８９に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２３ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８９： （９１）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９０に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２９ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９０： （９２）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９１に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２９ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９１： （９３）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９２に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２８ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９２： （９４）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９３に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３３ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９３： （９５）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９４に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３８ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９４： （９６）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９５に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２４ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９５： （９７）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９６に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３６ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９６： （９８）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９７に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３３ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９７： （９９）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９８に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２４ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９８： （１００）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２４ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ii）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９： （１０１）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１００に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２３ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１００： （１０２）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０１に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３１ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０１： （１０３）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０２に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２５ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０２： （１０４）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０３に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２６ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０３： （１０５）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０４に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２７ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０４： （１０６）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０５に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２５ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０５： （１０７）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０６に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：１９ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０６： （１０８）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０７に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２６ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０７： （１０９）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０８に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２３ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０８： （１１０）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０９に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３０ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０９： （１１１）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１０に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：１８ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１０： （１１２）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１１に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２２ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１１： （１１３）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１２に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３５ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１２： （１１４）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１３に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３３ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１３： （１１５）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１４に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２８ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１４： （１１６）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１５に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２８ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１５： （１１７）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１６に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３４ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１６： （１１８）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１７に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３８ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１７： （１１９）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１８に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３５ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１８： （１２０）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１９に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２２ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１９： （１２１）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２０に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２３ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２０： （１２２）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２１に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：１８ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２１： （１２３）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２２に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２７ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２２： （１２４）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２３に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２１ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２３： （１２５）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２４に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２７ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２４： （１２６）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２５に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２７ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２５： （１２７）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２５ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６： （１２８）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２７に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２８ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２７： （１２９）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２８に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２５ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２８： （１３０）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２９に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２３ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２９： （１３１）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３０に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２３ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３０： （１３２）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３１に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２３ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３１： （１３３）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３２に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２４ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３２： （１３４）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３３に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３６ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３３： （１３５）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３４に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３３ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３４： （１３６）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３５に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２４ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３５： （１３７）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３６に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２４ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３６： （１３８）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３７に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３６ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３７： （１３９）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３８に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：３３ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３８： （１４０）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３９に関する情報： （ｉ）配列の特徴： （Ａ）配列の長さ：２４ （Ｂ）配列の型：核酸 （Ｃ）鎖の数：１本鎖 （Ｄ）トポロジー：直鎖状 （ｉｉ）配列の記載：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３９：
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ヤン，イーシン アメリカ合衆国92130カリフォルニア州、 サンディエゴ、グレンクリフ・ウェイ 13569番

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １． および からなる群より選択される配列を必須としてなるオリゴヌクレオチド。 ２．請求項１のオリゴヌクレオチドおよびこれに十分に相補的であり緊縮ハイ ブリッド条件下でハイブリダイゼーション可能なヌクレオチドポリマーの間に形 成される核酸ハイブリッド。 ３．請求項１のオリゴヌクレオチドおよびヘルパープローブからなるプローブ 混合物。 ヌクレオチドである請求項３記載のプローブ混合物。 より選択される配列を有するオリゴヌクレオチドである請求項３記載のプローブ 混合物。 より選択される配列を有するオリゴヌクレオチドである請求項３記載のプローブ 混合物。 リゴヌクレオチドである請求項３記載のプローブ混合物。 ８． および からなる群より選択される配列を必須としてなるオリゴヌクレオチド。 チド。 からなる群より選択されるヌクレオチド塩基配列を有するヌクレオチドポリマー に十分に相補的で、０.６Ｍ ＬｉＣｌを含有する０.０５Ｍコハク酸リチウム緩 衝液中、６０℃においてハイブリッドを形成する、１０ないし１００個の間のヌ クレオチドを必須としてなるオリゴヌクレオチド。 からなる群より選択されるヌクレオチド塩基配列を有するヌクレオチドポリマー に十分に相補的で、０.６Ｍ ＬｉＣｌを含有する０.０５Ｍコハク酸リチウム緩 衝液中、６０℃においてハイブリッドを形成する、１０ないし１００個の間のヌ クレオチドを必須としてなるオリゴヌクレオチド。 からなる群より選択されるヌクレオチド塩基配列を有するヌクレオチドポリマー に十分に相補的で、０.６Ｍ ＬｉＣｌを含有する０.０５Ｍコハク酸リチウム緩 衝液中、６０℃においてハイブリッドを形成する、１０ないし１００個の間のヌ クレオチドを必須としてなるオリゴヌクレオチド。 からなる群より選択されるヌクレオチド塩基配列を有するヌクレオチドポリマー に十分に相補的で、０.６Ｍ ＬｉＣｌを含有する０.０５Ｍコハク酸リチウム緩 衝液中、６０℃においてハイブリッドを形成する、１０ないし１００個の間のヌ クレオチドを必須としてなるオリゴヌクレオチド。 からなる群より選択されるヌクレオチド塩基配列を有するヌクレオチドポリマー に十分に相補的で、０.６Ｍ ＬｉＣｌを含有する０.０５Ｍコハク酸リチウム緩 衝液中、６０℃においてハイブリッドを形成する、１０ないし１００個の間のヌ クレオチドを必須としてなるオリゴヌクレオチド。 からなる群より選択されるヌクレオチド塩基配列を有するヌクレオチドポリマー に十分に相補的で、０.６Ｍ ＬｉＣｌを含有する０.０５Ｍコハク酸リチウム緩 衝液中、６０℃においてハイブリッドを形成する、１０ないし１００個の間のヌ クレオチドを必須としてなるオリゴヌクレオチド。 からなる群より選択されるヌクレオチド塩基配列を有するヌクレオチドポリマー に十分に相補的で、０.６Ｍ ＬｉＣｌを含有する０.０５Ｍコハク酸リチウム緩 衝液中、６０℃においてハイブリッドを形成する、１０ないし１００個の間のヌ クレオチドを必須としてなるオリゴヌクレオチド。 からなる群より選択されるヌクレオチド塩基配列を有するヌクレオチドポリマー に十分に相補的で、０.６Ｍ ＬｉＣｌを含有する０.０５Ｍコハク酸リチウム緩 衝液中、６０℃においてハイブリッドを形成する、１０ないし１００個の間のヌ クレオチドを必須としてなるオリゴヌクレオチド。 からなる群より選択されるヌクレオチド塩基配列を有するヌクレオチドポリマー に十分に相補的で、０.６Ｍ ＬｉＣｌを含有する０.０５Ｍコハク酸リチウム緩 衝液中、６０℃においてハイブリッドを形成する、１０ないし１００個の間のヌ クレオチドを必須としてなるオリゴヌクレオチド。 からなる群より選択されるヌクレオチド塩基配列を有するヌクレオチドポリマー に十分に相補的で、０.６Ｍ ＬｉＣｌを含有する０.０５Ｍコハク酸リチウム緩 衝液中、６０℃においてハイブリッドを形成する、１０ないし１００個の間のヌ クレオチドを必須としてなるオリゴヌクレオチド。 からなる群より選択されるヌクレオチド塩基配列を有するヌクレオチドポリマー に十分に相補的で、０.６Ｍ ＬｉＣｌを含有する０.０５Ｍコハク酸リチウム緩 衝液中、６０℃においてハイブリッドを形成する、１０ないし１００個の間のヌ クレオチドを必須としてなるオリゴヌクレオチド。 からなる群より選択されるヌクレオチド塩基配列を有するヌクレオチドポリマー に十分に相補的で、０.６Ｍ ＬｉＣｌを含有する０.０５Ｍコハク酸リチウム緩 衝液中、６０℃においてハイブリッドを形成する、１０ないし１００個の間のヌ クレオチドを必須としてなるオリゴヌクレオチド。 からなる群より選択されるヌクレオチド塩基配列を有するヌクレオチドポリマー に十分に相補的で、０.６Ｍ ＬｉＣｌを含有する０.０５Ｍコハク酸リチウム緩 衝液中、６０℃においてハイブリッドを形成する、１０ないし１００個の間のヌ クレオチドを必須としてなるオリゴヌクレオチド。 からなる群より選択されるヌクレオチド塩基配列を有するヌクレオチドポリマー に十分に相補的で、０.６Ｍ ＬｉＣｌを含有する０.０５Ｍコハク酸リチウム緩 衝液中、６０℃においてハイブリッドを形成する、１０ないし１００個の間のヌ クレオチドを必須としてなるオリゴヌクレオチド。 ２５．（Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識され るかまたはＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド 配列よりなるものである および からなる群より選択されるオリゴヌクレオチド。 ２６．（Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識され るかまたはＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド 配列よりなるものである および からなるオリゴヌクレオチドの群より選択されるオリゴヌクレオチド。 ２７．（Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識され るかまたはＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド 配列よりなるものである および からなる群より選択される２種のオリゴヌクレオチドからなるキット。 ２８．（Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識され るかまたはＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド 配列よりなるものである および からなる群より選択される２種のオリゴヌクレオチドからなるキット。 ２９．（Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識され るかまたはＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド ３０．（Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識され るかまたはＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド ３１．（Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識され るかまたはＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド ３２．（Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識され るかまたはＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド ３３．（Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識され るかまたはＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド を有するオリゴヌクレオチドからなるキット。 ３４．（Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識され るかまたはＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド 配列よりなるものである以下の配列 ３５．（Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識され るかまたはＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド ３６．（Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識され るかまたはＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド 配列よりなるものである以下の配列 ３７．（Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識され るかまたはＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド ３８．（Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識され るかまたはＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド 配列よりなるものである以下の配列 ３９．（Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識され るかまたはＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド ４０．（Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識され るかまたはＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド ４１．（Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識され るかまたはＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド ４２．（Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識され るかまたはＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド ４３．（Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識され るかまたはＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド ４４．（Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識され るかまたはＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド ４５．（Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識され るかまたはＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド ４６．（Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識され るかまたはＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド ４７．試料中のヒト・免疫不全ウイルス１型の核酸を選択的に増幅する方法で あって、 （Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識されるかま たはＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド配列よ りなるものである および からなる群より選択される１種またはそれ以上のオリゴヌクレオチドを用いて該 核酸を増幅する工程からなる方法。 ４８．試料中のヒト・免疫不全ウイルス１型の核酸を選択的に増幅する方法で あって、 （Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識されるかまた はＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド配列より なるものである および からなる群より選択される１種またはそれ以上のオリゴヌクレオチドを用いて該 核酸を増幅する工程からなる方法。 ４９．試料中のヒト・免疫不全ウイルス１型の核酸を検出する方法であって、 試料から直接得られるかまたは および からなる群より選択されるオリゴヌクレオチドを用いて該試料から増幅される核 酸をハイブリダイズさせる工程からなる方法。 ５０．試料から直接得られるかまたは および からなる群より選択されるオリゴヌクレオチドを用いて該試料から増幅される核 酸をハイブリダイズさせる工程からなる、試料中のヒト・免疫不全ウイルス１型 の核酸を検出する方法。 ５１．ヒト・免疫不全ウイルス１型の核酸を検出する方法であって、 （Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識されるかまた はＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド配列より を用いて増幅されたヌクレオチドを検出する工程からなる方法。 ５２．ヒト・免疫不全ウイルス１型の核酸を検出する方法であって、 （Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識されるかまた はＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド配列より なるものであるヌクレオチドポリマー を用いて増幅されたヌクレオチドを検出する工程からなる方法。 ５３．ヒト・免疫不全ウイルス１型の核酸を検出する方法であって、 （Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識されるかまた はＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド配列より を用いて増幅されたヌクレオチドを検出する工程からなる方法。 ５４．ヒト・免疫不全ウイルス１型の核酸を検出する方法であって、 （Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識されるかまた はＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド配列より を用いて増幅されたヌクレオチドを検出する工程からなる方法。 ５５．ヒト・免疫不全ウイルス１型の核酸を検出する方法であって、 （Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識されるかまた はＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド配列より を用いて増幅されたヌクレオチドを検出する工程からなる方法。 ５６．ヒト・免疫不全ウイルス１型の核酸を検出する方法であって、 （Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識されるかまた はＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド配列より を用いて増幅されたヌクレオチドを検出する工程からなる方法。 ５７．ヒト・免疫不全ウイルス１型の核酸を検出する方法であって、 （Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識されるかまた はＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド配列より を用いて増幅されたヌクレオチドを検出する工程からなる方法。 ５８．ヒト・免疫不全ウイルス１型の核酸を検出する方法であって、 （Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識されるかまた はＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド配列より なるものであるヌクレオチドポリマー を用いて増幅されたヌクレオチドを検出する工程からなる方法。 ５９．ヒト・免疫不全ウイルス１型の核酸を検出する方法であって、 （Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識されるかまた はＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド配列より を用いて増幅されたヌクレオチドを検出する工程からなる方法。 ６０．ヒト・免疫不全ウイルス１型の核酸を検出する方法であって、 （Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識されるかまた はＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド配列より を用いて増幅されたヌクレオチドを検出する工程からなる方法。 ６１．ヒト・免疫不全ウイルス１型の核酸を検出する方法であって、 （Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識されるかまた はＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド配列より を用いて増幅されたヌクレオチドを検出する工程からなる方法。 ６２．ヒト・免疫不全ウイルス１型の核酸を検出する方法であって、 （Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識されるかまた はＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド配列より を用いて増幅されたヌクレオチドを検出する工程からなる方法。 ６３．ヒト・免疫不全ウイルス１型の核酸を検出する方法であって、 （Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識されるかまた はＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド配列より なるものであるヌクレオチドポリマー れたヌクレオチドを検出する工程からなる方法。 ６４．ヒト・免疫不全ウイルス１型の核酸を検出する方法であって、 （Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識されるかまた はＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド配列より および もしくは からなるオリゴヌクレオチドを用いて増幅された核酸を検出することからなる方 法。 ６５．ヒト・免疫不全ウイルス１型の核酸を検出する方法であって、 （Ｘ）が不存在であるか、あるいはＲＮＡポリメラーゼにより認識されるかまた はＲＮＡポリメラーゼによる開始もしくは伸長を促進するヌクレオチド配列より を用いて増幅されたヌクレオチドを検出する工程からなる方法。
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