JPH08508569A - 対置部材クロマトグラフィー検定装置 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 イムノアッセイで使用するクロマトグラフィー検定装置は、生物学的に注目する分析物の迅速かつ便利な検定を実行可能で、その場（in situ）で抽出を行うことができ、独立した抽出容器を必要としない。本装置は広いダイナミックレンジを有し、粒子または着色成分による干渉を防止する。ひとつの形式において、本装置は、（１）検定しようとするサンプルを受け入れるのに適したサンプル調製帯域を含む第一の対置可能な部材（１１）、および（２）クロマトグラフィー媒体を含む第二の対置可能な部材（１４）を含む。第一と第二の対置可能な部材はサンプル調製帯域（１３）から検定しようとするサンプルをクロマトグラフィー媒体に適用するように対置させることが出来る。望ましくは、分析物は視覚的に検出可能なラベルで検出する。本装置のその他の変化においては、各種の分析物において最適なクロマトグラフィーを提供するとともに、二方向クロマトグラフィーを可能にする部材の構成が変化する。さらに別の変化は、競合法イムノアッセイに好適である。本装置は検査キットに含めることが出来、また本装置を使用してのサンドイッチ法と競合法の両方の検定方法も開示する。

Description

【発明の詳細な説明】 対置部材クロマトグラフィー検定装置 発明の背景 本発明はサンプルの特性を決定するための試験紙と、一体型筐体と、前記試験 紙および筐体を含むキットと、前記試験紙および筐体を用いてサンプルの特性を 決定する方法に関する。 分析物とくに生物学的に注目される分析物の検出および／または決定に用いる 分析システムのひとつがクロマトグラフィー検定システムである。このようなシ ステムでしばしば検定する分析物としては、 （１）ヒトの妊娠マーカーとしてしばしば検定されるホルモン、例えばヒト絨毛 性ゴナドトロピン（ｈＣＧ）など、 （２）抗原とくに病原性細菌、ウィルス、原虫たとえばストレプトコッカス（st reptococcus ）、肝炎ウイルス（Hepatitis Virus）、ジアルジア属（Giardia） に特異的な抗原、 （３）抗体とくに病原体の感染の結果産生される抗体たとえばピロリ菌（H.pylo i ）やヒト免疫不全ウィルス（HIV）に対する抗体など、 （４）その他の蛋白、たとえば大腸癌などの消化管疾患の初期指標ともなる便潜 血の検出時に頻繁に検定されるヘモグロビン、 （５）酵素たとえばアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、乳酸脱水素酵素 、アルカリフォスファターゼ、グルタミン酸脱水素酵素など生理機能および組織 損傷の指標として頻繁に検定される酵素、 （６）薬物、たとえば抗生物質、向精神薬、抗痙攣剤などの治療用薬物とコカイ ン、ヘロイン、マリファナなど乱用非合法薬物、 （７）環境汚染物質例えば殺虫剤や芳香族炭化水素など （８）ビタミン などが挙げられる。 このようなクロマトグラフィーシステムは医師ならびに医療技術者が各種状態 や疾患の院内迅速診断用および治療モニターとして頻繁に使用している。また患 者自身がこのような状態や疾患の家庭用モニターとしても使用し始めている。 このようなシステムで最も重要なのは、溶媒が薄く平坦な吸収媒体上を移動す るような「薄層」システムである。 このような薄層システムで実行可能な試験の内最も重要なのは、抗原またはハ プテンとこれに対応する抗原の間の特異的相互作用に基づく免疫検定（イムノア ッセイ）である。免疫検定を臨床的に重要性の高い分子の存在および／またはそ の量の検定手段として用いられることが以前から分かっている。１９５６年ごろ 、Ｊ．Ｍ．シンガーはリウマチ（rheumatoid arthritis）因子の検出のためラテ ックス免疫沈降法を用いることを発表している（Singer et al.,Am.J.Med.22:88 8-892(1956)）。 イムノアッセイと組み合わせて用いるクロマトグラフィー技術の一つが免疫ク ロマトグラフイーとして周知の方法である。一般に、この技術では検定しようと する分子に対する抗体に結合した染色試薬または粒子を用いて複合体を形成する 。この複合体をサンプル（検体）と混合し、検定しようとする分子がサンプルに 存在していれば、染色試薬を結合した抗体が検定しようとする分子に結合し、検 定しようとする分子が存在していることを示す。染色試薬または粒子は色、磁性 、放射性、別の分子に対する特異的反応、または他の物理または化学的性質で識 別することができる。用いられる特異的反応は被検分子の性質と検査しようとす るサンプルの性質で変化する。 免疫クロマトグラフィー検定は、検出する抗原抗体複合体の性質と今複合体を 産生するのに必要な反応シーケンスにしたがって、「サンドイッチ法」と「競合 法」の２種類に大きく分類される。検出しようとする抗原はそれ自体が抗体たと えばピロリ菌H.pyloriの特異抗体の血清学的検定などであり得る。このような場 合、検出しようとする抗体は特異性抗原に結合することができる。また、検出し ようとする分析物に対する第１の抗体（１次抗体）に結合する標識した２次抗体 を用いて間接的に検出しようとする抗体を検出することもできる。 一般に、サンドイッチ法免疫クロマトグラフィー法は検定しようとする分析物 を含むようなサンプルを分析物に対する抗体と混合することによる。これらの抗 体は易動性で、通常はラベルまたは着色試薬たとえば染料ラテックス、コロイド 状金属ゾル、またはラジオアイソトープと結合する。この混合物を注目している 分析物に対して不動化した抗体のバンドまたは領域を含むクロマトグラフィー媒 体に適用する。クロマトグラフィー媒体は試験紙によく似たストリップの形状を とることが多い。検定しようとする分子と標識した抗体の複合体がクロマトグラ フィー媒体上の不動化抗体の領域に到達すると結合が起こり、結合した標識抗体 はその領域に留まる。これで検定しようとする分子の存在が示される。この技術 は定量的または半定量の結果を得るのにも用いられる。 試験紙上で行うサンドイッチ法イムノアッセイの例は、グラッブら（Grubb et al.）による米国特許第４，１６８，１４６号ならびにトムら（Tom et al.）に よる米国特許第４，３６６，２４１号に記載されている。どちらの明細書も本明 細書において参照に含めてある。 競合法イムノアッセイでは、標識は通常標識した分析物またはサンプル内に存 在する標識していない分析物と抗体結合で競合するような類似の分析物である。 競合法イムノアッセイはハプテンなどの分析物の検出に使用するのが普通で、そ れぞれのハプテンは一価で一つの抗体分子とだけ結合することができる。競合法 イムノアッセイ装置の例は、ドイッチェら（Deutsch et al.）による米国特許第 ４，２３５，６０１号、リオッタ（Liotta）による米国特許第４，４４２，２０ ４号、ブクラーら（Buechler et al.）による米国特許第５，２０８，５３５号 に開示されている。これらは全て本明細書で参照に含めてある。 有用であっても現在利用可能な試験紙を用いるクロマトグラフィー技術は多く の欠点を有している。多くのサンプル例えば便などクロマトグラフィー媒体の穴 をつまらせてしまうような粒子性物質を含むサンプルは免疫クロマトグラフィー 処理を大幅に障害する。他のサンプル例えば血液などは細胞と色素成分を含むの で検査結果の読み取りを難しくする。サンプルが障害とならない場合でも、既存 のクロマトグラフィー検定装置ではサンプルをクロマトグラフィー媒体上に適用 するのが困難なことが多く、サンプルの前面がクロマトグラフィー媒体上を均一 に移動し均一で直線的な結合が起こるべき領域にサンプルがうまく到達しないこ ともある。 現在利用可能な試験紙では検定しようとするサンプルの性質または実行する検 定の性質によって他にも問題が起こる。このような装置では、感度を向上させる ためとバックグラウンドを減少するために望ましい洗浄段階を実行するのは現実 的ではない。また、装置内でプレインキュベーションを行うのは困難だったり場 合によっては不可能である。 さらに、広範囲の分離、たとえば牛乳から脂肪を分離する、または有機化学物 質の分離、たとえばトルエンからベンゼンを分離するなどを実行できるような免 疫クロマトグラフィー検定装置が必要とされている。 サンプルの調製と廃棄物生成は現在利用可能な免疫クロマトグラフィー用装置 および技術にかかる他の問題である。感染血液および血液分画に由来する感染性 疾患たとえばAIDSや肝炎などの感染率増大でこの問題が重大化した。サンプル（ 例えば糞便）またはサンプリング器具（例えば咽頭擦過綿球）を直接クロマトグ ラフィー媒体に適用することはほとんど不可能である。サンプルをクロマトグラ フィー媒体に適用できるようにするには幾つかの抽出処理や予備処理試薬が必要 になるのが普通である。これらの反応は幾つかの小さい容器例えば試験管や超遠 沈管内で検査を実行する医師や技師が行うが、移し換え器具たとえばピペットを 用いる必要がある。これらの装置のそれぞれは汚染されるので特別な注意をはら って使い捨てにし、廃棄物と接触する可能性のある作業者または人々が汚染され ないようにする。 医師または技師が使用する現在利用可能なクロマトグラフィー装置に係るさら に別の制約は２次元または３次元クロマトグラフィーを行えないことである。こ れらの技術が強力な分析ツールであることは古くから周知となっているにも係わ らず、単純な１次元クロマトグラフイーに比べた場合の複雑さのため、医師が診 察室でまたは検査室で試験紙装置に適用するのは困難だった。 したがって、広範囲なクロマトグラフィー検定を取り扱う能力を有する検定装 置の改良が必要である。このような装置は、サンドイッチ法および競合法イムノ アッセイ、ならびに他のクロマトグラフィーを使用する検定を含め、あらゆる種 類のイムノアッセイを行えるべきである。このような装置は汚染されている可能 性のあるサンプルを受け入れたり、またはサンプル準備器具を受け入れて抽出容 器や移し換え器具の必要性を排除できるべきである。このような装置は、試験紙 の形状を成すのが望ましく、有色サンプルまたは粒子を含むサンプルでも問題な く免疫クロマトグラフィー検定を行うことができ、クロマトグラフィー媒体上に サンプルを均一かつ平均に供給でき、試験の正確度および精密度を向上させられ るべきである。さらに、このような試験紙の改良は検査室または診察室で用いる 場合にも２次元または３次元クロマトグラフィーを行えるべきである。 要約 上述の要求に適合し生物学的に問題とする分析物の検定の改良を提供すると同 時に、検定の性能を簡略化し汚染を防止するような検定装置を開発した。本装置 はサンドイッチ法イムノアッセイ、競合法イムノアッセイ、これらの原理を組み 合わせた検定を含むあらゆる種類のイムノアッセイを実行可能である。本装置は 検出しようとする抗原がそれ自体抗体であるような例えばピロリ菌H.pyloriに対 する抗体などの血清学的検定を行うこともできる。本装置は検出しようとする抗 原が分析物に対する１次抗体に結合する標識２次抗体を用いることで間接的に検 出するような検定を行うことができる。 本発明による検定装置はひとつの対置可能な部材から別の対置可能な部材へ液 体を移動するため、またクロマトグラフィー媒体を介して液体を移動させるため に圧力を用いる。圧力は装置の動作を高速化するのみならず、障害となる粒子成 分を除去するための抽出段階などの他の段階も単一の装置内で行うことができる 。圧力は対置可能な部材どうしを対置可能な部材のそれぞれのインターロック部 材などの係合装置を用いて保持することで生成する。検定手順のそれぞれの段階 で最適な能力を確保するように所定の圧力を印加するのが望ましい。 また、本装置は他の種類の特異的結合検定を行うこともできる。例えば、 （１）レクチン、ホルモン受容体、またはウィルス受容体など特異的リガンドに よる特異的結合蛋白のアフィニティに基づいた検定、（２）酵素とこれに対応す る基質または阻害剤のアフィニティに基づいた検定、または（３）核酸（ＤＮＡ またはＲＮＡ）片の、ワトソンとクリックによる塩基対説に基づいた相補的核酸 片に対するアフィニティに基づいた検定。 本装置は、 （１）少なくとも２つの実質的に平坦な対置可能な部材を含んでなり、前記実質 的に平坦な部材の一方はその表面にクロマトグラフィー媒体を有することと、 （２）対置可能な部材を対向させるためとこれに圧力をかけるための手段をさら に含み、前記圧力は一方の対置可能な部材から他方の対置可能な部材へ前記対置 可能な部材に対して実質的に直角の方向へ液体を十分移動させることができ、分 析物の検出および／または同定を行うために前記クロマトグラフィー媒体にサン プルを適用できること を含む。 本発明による装置はまた、 （１）少なくとも３つの実質的に平坦で対置可能な部材を含んでなり、前記実質 的に平坦な部材の一つはその表面上に第１と第２の端部を有するクロマトグラフ ィー媒体を有することと、 （２）前記対置可能な部材を少なくとも２種類の異なる組み合せで対にして対向 させるためとこれに圧力をかけるための手段をさらに含み、前記圧力は一つの対 置可能な部材から別の対置可能な部材へ前記対置可能な部材に対して実質的に直 角の方向へ液体を移し換えるのに十分であって前記クロマトグラフィーへサンプ ルを適用し前記第１の端部から前記第２の端部へむかって前記クロマトグラフィ ー媒体に沿って流し前記クロマトグラフィー媒体上の分析物の検出および／また は同定を行うことと、 （３）前記対置可能な部材の一つに装着する少なくとも一つのアプリケータと一 つの吸収手段を含み、前記アプリケータと前記吸収手段が取り付けてある前記対 置可能な部材が前記クロマトグラフィー媒体を載せた前記対置可能な部材に対向 させたときに、前記クロマトグラフィー媒体に第２の液体を加えて前記第２の端 部から前記第１の端部へ向かって前記クロマトグラフィー媒体上を流し、前記ク ロマトグラフィー媒体を通る流れを逆転させ、前記クロマトグラフィー媒体を通 る流れの逆転の後で分析物の検出および／または同定を行えるように成してある こと を含む。 本発明の１つの態様において、本発明のクロマトグラフィー検定装置は、 （１）検定しようとするサンプルを受け入れるのに適したサンプル調製手段を含 む第１の対置可能な部材と （２）クロマトグラフィー媒体を含む第２の対置可能な部材と を含む。 サンドイッチ法イムノアッセイに好適なクロマトグラフィー検定装置の実施例 は、 （１）第１の対置可能な部材であって （ａ）第１と第２の端部を有するクロマトグラフィー媒体と （ｂ）前記クロマトグラフィー媒体の第１の端部と動作的に接するデテク タ適用パッドと （ｃ）前記デテクタ適用パッドと動作的に当接し前記クロマトグラフィー 媒体の第１の端部と間接的に当接する伝導手段と （ｄ）前記クロマトグラフィー媒体の第２の端部と動作的に当接する吸収 手段と、 （２）検査しようとするサンプルを受け入れるためのサンプル調製手段を含む第 ２の対置可能な部材と を含む。 本装置において、第１と第２の対置可能な部材は、第１と第２の対置可能な部 材を対向させることでサンプル調製手段が伝導手段と当接するようになり、検査 しようとするサンプルを伝導手段に適用しさらに伝導手段適用パッドを介してク ロマトグラフィー媒体の第１の端部に適用する。 一般に、サンプル調製手段はサンプル処理のために少なくとも一つの試薬を含 む。場合によっては、例えば尿または血清サンプルを検定する場合、抽出または その他のサンプル処理は必要とされない。また一般に、デテクタ適用パッドは水 性液体をデテクタ適用パッドに添加することで溶解可能な形状の分析物に特異的 結合する第１のパートナーを含み、第１の特異的結合パートナーは検出可能なラ ベルで標識しておき、またクロマトグラフィー媒体はさらにクロマトグラフィー 媒体の面積より面積が実質的に小さい検出部分を含む。この構成では検出部分は ここに不動化した分析物に対する特異的結合パートナーを含み、分析物がサンプ ル内に存在していれば、第１の特異的結合パートナーと、分析物と、第２の特異 的結合パートナーを含む三つ組の複合体が検出帯域に形成される。 望ましくは、検出可能なラベルは視覚的に検出可能なラベルとする。 望ましくは、第１と第２の対置可能な部材はヒンジで結合する。一般に、ヒン ジは水性液体に対して透水性がない。対置可能な部材はまた周辺部が直立した壁 を含み、これが装置を閉じてロックしたときに当接的に係合する。 検査キットは、別々の容器内に、前述のクロマトグラフィー検定装置とデテク タ適用パッドに適用する検出可能なラベルで標識した分析物用の特異的結合パー トナーを含むことができる。これ以外にも、デテクタ適用パッドが溶解可能な標 識した第１の特異的結合パートナーを含む場合、キットは検定装置と標識した特 異的結合パートナーを溶解するための水性液体とを含むことができる。同様に検 査キットは本発明の検定装置の他の実施例で構成することができる。 サンプル内の分析物を検出および／または同定するため本検定装置を用いてサ ンドイッチ法イムノアッセイを行う方法は、 （１）溶解可能に標識した第１の特異的結合パートナーをデテクタ適用パッド上 に含むクロマトグラフィー検定装置のサンプル適用パッドに水性サンプルを適用 する段階と、 （２）前記クロマトグラフィー検定装置の第１と第２の対置可能な部材を対向さ せてデテクタ適用パッドにおいて標識した特異的結合パートナーを溶解する水性 液体をサンプルが含むように成し、前記サンプルと溶解した標識した特異的結合 パートナーが伝導手段に適用されるように成す段階と、 （３）前記伝導手段を通ってさらに少なくとも前記クロマトグラフィー媒体の一 部を通って前記サンプルと標識した特異的結合パートナーが移動できるように成 し前記標識した特異的結合パートナーが前記テストサンプル内の分析物の存在お よび／または量の検出可能な指標となる段階と、 （４）前記分析物の検出および／または同定のために少なくとも前記クロマトグ ラフィー媒体の一部において前記標識した特異的結合媒体を観察および／または 測定する段階 を含むことができる。 本実施例の別の形式では、第２の対置可能な部材はサンプル調製手段と動作可 能に当接する第２のデテクタ適用パッドを含むこともできる。この形式では、第 ２のデテクタ適用パッドはサンプルをサンプル調製手段に添加することにより溶 解することのできる形状で分析物に対する第２の標識した特異的結合パートナー を含む。第２の標識した特異的結合パートナーは検出可能なラベルでラベルする 。第２の標識した特異的結合パートナーは、サンプル調製手段へのサンプルの適 用で第２の標識した特異的結合パートナーを溶解しサンプル調製手段がサンプル と第２の標識した特異的結合パートナーを含むように配置する。第１と第２の標 識した特異的結合パートナーは同一とするのが望ましく同一のラベルで標識する 。 本発明による検定装置の別の実施例は、 （１）第１の対置可能な部材であって、 （ａ）第１と第２の端部を有するクロマトグラフィー媒体と、 （ｂ）前記クロマトグラフィー媒体の第１の端部と動作可能に当接する伝 導手段とを含む部材と、 （２）第２の対置可能な部材であって、 （ａ）検定しようとするサンプルを受け入れるためのサンプル調製手段と 、 （ｂ）前記サンプル調製手段から隔離した吸収手段とを含む部材と を含む。 本装置において、第１と第２の対置可能な部材は第１と第２の対置可能な部材 を対向させることでサンプル調製手段が伝導手段と動作可能に当接してテストし ようとするサンプルが伝導手段に適用されさらにクロマトグラフィー媒体の第１ の端部に適用され、さらに吸収手段がクロマトグラフィー媒体の第２の端部と動 作可能に当接してクロマトグラフィー媒体の第２の端部から液体を吸い取るよう に構成する。吸収手段を第２の対置可能な部材へ移動することでさらに大きな吸 収手段を使用できるようになり、比較的大量のサンプルの検定を所望する場合に 有利であり得る。 第２の対置可能な部材上に吸収手段を有する本発明による検定装置の別の形式 は、第１の対置可能な部材上のサンプル調製手段と、クロマトグラフィー媒体と 、サンプル調製手段およびクロマトグラフィー媒体の第１の端部に動作可能に当 接する伝導手段とを有し、伝導手段がサンプル調製手段とクロマトグラフィー媒 体を連結する。第２の対置可能な部材は水性液体をアプリケータに添加すること で溶解可能な形状で分析物に対する特異的結合パートナーを含むアプリケータと 、アプリケータから隔離した吸収手段とを有する。本装置において、第１と第２ の対置可能な部材を対向させることでアプリケータがサンプル調製手段と動作可 能に当接するようになり、サンプルをサンプル調製手段に添加したとき分析物に 対する標識した特異的結合パートナーが溶解され吸収手段がクロマトグラフィー 媒体の第２の端部と動作可能に当接してクロマトグラフィー媒体から液体を吸い 取るように成してある。 第２の部材上に吸収部材を有する本発明による検定装置のさらに別の形式にお いて、第１の対置可能な部材はクロマトグラフィー媒体と伝導手段とを含む。第 ２の対置可能な部材は第１のアプリケータと、吸収部材とを含む。吸収部材は第 １のアプリケータおよび第２のアプリケータの双方から隔離する。第１と第２の アプリケータは第２の対置可能な部材上に配置して、第１と第２の対置可能な部 材が対向していないときには動作可能に当接しないようにする。吸収部材は第１ と第２の対置可能な部材が対置されたときにクロマトグラフィー媒体の第２の端 部と動作可能に当接するように配置する。第１と第２の対置可能な部材は第１と 第２の対置可能な部材を対向させることで伝導手段が第１のアプリケータと動作 可能に当接し、また伝導手段が第２のアプリケータと動作可能に当接することで 第１と第２のアプリケータが相互に動作可能に当接するように構成する。 本装置において、第２のアプリケータは溶解可能な形状の標識した第１の特異 的結合パートナーを含むデテクタ適用パッドを含むことができる。 本発明による本装置の使用法は、サンプルを第１のアプリケータに適用するこ とと、第１と第２の対置可能な部材を対向させてサンプルがデテクタ適用パッド 内の標識した特異的結合パートナーを溶解することを含む。クロマトグラフィー および検出段階は前述した通りである。 吸収手段を第２の部材上に含む本発明によるさらに別の検定装置は、 （１）第１の対置可能な部材であって、 （ａ）第１と第２の端部を含むクロマトグラフィー媒体と、 （ｂ）前記クロマトグラフィー媒体の第１の端部と動作可能に当接する伝導 手段と、 （ｃ）前記伝導手段と直接当接し前記クロマトグラフィー媒体の第１の端部 と間接的に当接するように配置したデテクタ適用パッドとを含む部材と、 （２）第２の対置可能な部材であって、 （ａ）サンプル適用パッドと、 （ｂ）前記サンプル適用パッドから隔離した吸収手段とを含む部材と を含む。 本装置において、第１と第２の対置可能な部材は第１と第２の対置可能な部材 を対置することにより、 （１）サンプル適用パッドがサンプルをデテクタ適用パッドさらには伝導手段を 介してクロマトグラフィー媒体の第１の端部に適用し、 （２）吸収手段がクロマトグラフィー媒体の第２の端部と動作可能に当接するよ うに構成する。 検定装置のこの形式を使用する検出方法は前述の方法と同様である。 第２の対置可能な部材上に吸収手段を組み込んだ本発明による検定装置のさら に別の形式は、 （１）第１の対置可能な部材であって、 （ａ）第１と第２の端部を有するクロマトグラフィー媒体と、 （ｂ）前記クロマトグラフィー媒体の第１の端部と直接当接するデテクタ適 用パッドとを含む部材と、 （２）第２の対置可能な部材であって、 （ａ）サンプル適用パッドと、 （ｂ）前記サンプル適用パッドから隔離した吸収手段とを含む部材と を含む。 本装置において、第１と第２の対置可能な部材は、第１と第２の対置可能な部 材を対向させることでクロマトグラフィー媒体の第１の端部に直接的に隣接する デデクタ適用パッドの領域以外でデテクタ適用パッドおよびサンプル適用パッド を当接させるように構成する。本装置の第１と第２の対置可能な部材を対向させ ることにより、 （１）テストしようとするサンプルをデテクタ適用パッドさらにはクロマトグラ フィー媒体の第１の端部に適用させ、 （２）吸収手段をクロマトグラフィー媒体の第２の端部と動作可能に当接させる 。 第２の対置可能な部材上に吸収手段を含む本発明によるさらに別の検定装置は 、 （１）第１の対置可能な部材であって、 （ａ）第１と第２の端部を有するクロマトグラフィー媒体と、 （ｂ）前記第１の対置可能な部材と前記第２の対置可能な部材が対向してい ないときには前記クロマトグラフィー媒体の第１の端部と動作可能に当接しない ように配置した伝導手段とを含む部材と （２）第２の対置可能な部材であって、 （ｉ）第１のアプリケータと、 （ｉｉ）第２のアプリケータと、 （ｉｉｉ）前記第１と第２のアプリケータから隔離してある吸収手段であっ て、前記第１と第２のアプリケータは第１と第２の対置可能な部材が対向してい ないときに動作可能に当接し内容に前記第２の対置可能な部材上に配置してある ことを含む部材と を含む。 本装置において、第１と第２の対置可能な部材は第１と第２の対置可能な部材 を対向させることで （１）伝導手段を第１のアプリケータと当接させ、伝導手段を第２のアプリケー タと当接させ、第２のアプリケータをクロマトグラフィー媒体の第１の端部と動 作可能に当接させることにより第１と第２のアプリケータを相互に動作可能に当 接するように配置して第１と第２のアプリケータの内容をクロマトグラフィー媒 体に適用することと、 （２）吸収手段をクロマトグラフィー媒体の第２の端部と動作可能に当接させる こと を含む。 サンドイッチ法イムノアッセイを実行するのに好適な本発明による検定装置の 別の実施例では、サンプルの一部によるクロマトグラフィー媒体の洗浄で結合し ていない標識した特異的結合パートナーを除去しバックグラウンドを減少させる ことができる。本実施例は、 （１）第１の対置可能な部材であって、 （ａ）第１と第２の端部を有するクロマトグラフィー媒体と、 （ｂ）前記クロマトグラフィー媒体の第１の端部と動作可能に当接する伝導 手段と、 （ｃ）前記クロマトグラフィー媒体の第２の端部と動作可能に当接する吸収 手段とを含む部材と、 （２）２つの部分に分割したアプリケータを含む第２の対置可能な部材であって 、 （ａ）前記アプリケータに水性液体を添加することで溶解可能な形状の分析 物に対する第１の特異的結合パートナーを含む第１の部分と、 （ｂ）標識した特異的結合パートナーを有していない第２の部分とを含む部 材と を含む。 本装置において、第１と第２の対置可能な部材は、第１と第２の対置可能な部 材を対向させることでアプリケータの第１の部分だけを伝導手段と当接させ、第 ２の部分は伝導手段と間接的に当接することでアプリケータの第１の部分の内容 をクロマトグラフィー媒体に適用するように構成する。クロマトグラフィー媒体 のアプリケータの第１の部分の内容の適用に続けて、アプリケータの第２の部分 の内容をクロマトグラフィー媒体に適用して洗浄を提供する。 本発明の別の実施例は標識した分析物の類似物を用いる競合法イムノアッセイ を実行するのに好適な検定装置を包含する。本実施例の一つの形式は、 （１）第１の対置可能な部材であって、 （ａ）第１と第２の端部を有するクロマトグラフィー媒体であって、分析物 またはこれの免疫学的類似物をクロマトグラフィー媒体の領域より実質的に小さ い独立した領域に不動化してあることと、 （ｂ）前記クロマトグラフィー媒体の第１の端部と動作可能に当接する第１ の伝導手段と、 （ｃ）前記クロマトグラフィー媒体の第２の端部と動作可能に当接する第２ の伝導手段とを含む部材と、 （２）第１の水性液体を添加することにより溶解可能な形状の分析物に対する第 １の特異的結合パートナーを含む第１のアプリケータを含む第２の対置可能な部 材と、 （３）第３の対置可能な部材であって、 （ａ）第２の水性液体の添加により溶解可能な形状にある分析物に対する第 ２の特異的結合パートナーを含む第２のアプリケータと、 （ｂ）前記第２のアプリケータから隔離した吸収手段とを含む部材 とを含む。 本装置において、第１と第２の対置可能な部材は第１と第２の対置可能な部材 を対向させることで第１の伝導手段が第１のアプリケータと動作可能に当接する ように配置して第１のアプリケータの内容がクロマトグラフィー媒体に適用され 、クロマトグラフィー媒体の少なくとも一部を介して吸い取られるように構成す る。第１と第３の対置可能な部材は、第１と第３の対置可能な部材を対向させる ことで吸収手段が第１の伝導手段と動作可能に当接してクロマトグラフィー媒体 から液体を吸い取るように構成する。第１と第３の対置可能な部材を対向させる ことで第２のアプリケータを第２の伝導手段と動作可能に当接させ、第２のアプ リケータの内容をクロマトグラフィー媒体に適用し、第１のアプリケータの内容 が吸い取られた部分と重複するクロマトグラフィー媒体の少なくとも一部を介し て吸い取られるように成してある。 本装置において、第１の特異的結合パートナーと第２の標識した特異的結合パ ートナーはそれぞれ分析物に対する抗体が望ましい。望ましくは、不動化した 分析物またはその類似物は分析物に対する特異的結合能力を欠いた蛋白に共有結 合した分析物を含む。 競合法イムノアッセイによる分析物の検出のための本検定装置を使用するため の方法は、 （１）第１の水性液体を含むサンプルをクロマトグラフィー検定装置の第１のア プリケータに適用することと、 （２）第２の水性液体を含む再構成液を第２のアプリケータに適用することと、 （３）クロマトグラフィー検定装置の第１と第２の対置可能な部材を対向させて 、サンプルと溶解した分析物の第１の特異的結合パートナーが第１の伝導手段へ さらにはクロマトグラフィー媒体の第１の端部へ適用されるように成すことと、 （４）独立した部分に不動化した免疫学的類似物の結合部位を阻害するようにサ ンプルと溶解した第１の特異的結合パートナーがクロマトグラフィー媒体の少な くとも一部を通って移動できるように成すことと、 （５）第１と第２の対置可能な部材を分離してこれらが対向しないように成すこ とと、 （６）第１と第３の対置可能な部材を対向させて溶解した標識した第２の特異的 結合パートナーが第２の伝導手段さらにはクロマトグラフィー媒体の第２の端部 に適用されるように成すことと、 （７）溶解した標識した第２の特異的結合パートナーが、サンプルと溶解した第 １の特異的結合パートナーが流れたクロマトグラフィー媒体全体と重複するクロ マトグラフィー媒体の少なくとも一部を通って移動し、被検サンプル内に分析物 が存在する場合には、標識した第２の特異的結合パートナーがサンプルと第１の 特異的結合パートナーを有する分析物の結合により独立した部分に不動化してあ る分析物またはこれの免疫学的類似物と結合できるように成すことと、 （８）独立した部分で第２の特異的結合パートナーを観察および／または測定し て分析物を検出および／または同定すること を含む。 望ましくは、本法はさらに、分析物と第１の特異的結合パートナーとの反応を 促進させるため、クロマトグラフィー検定装置をインキュベートする段階とこれ に続けて第１のアプリケータのサンプルを適用する段階とを含む。 本装置を使用する別の検定方法において、第１の再構成液はサンプルに加えて 第１のアプリケータへ適用することができる。 競合法イムノアッセイに好適な本発明による検定装置の別の形式は同様に使用 することができる。 競合法イムノアッセイを実行するための本発明による検定装置の別の形式は、 （１）第１の対置可能な部材であって、 （ａ）第１と第２の端部を有するクロマトグラフィー媒体であって、それぞ れのクロマトグラフィー媒体の面積より実質的に小さく独立した別個の重複しな い部分に、不動化した （ｉ）分析物の特異的結合パートナーと、 （ｉｉ）第２の特異的結合パートナーとを有し、前記第２の特異的結合パ ートナーは分析物のアフィニティを欠如する特異的結合対の構成要素と結合する ことができ、前記第２の特異的結合パートナーは前記第一の特異的結合パートナ ーより前記クロマトグラフィー媒体の第一の端部に近い位置に配置してあること と、 （ｂ）前記クロマトグラフィー媒体の第一の端部と動作可能に当接する第１ の伝導手段と、 （ｃ）前記クロマトグラフィー媒体の第２の端部と動作可能に当接する第２ の伝導手段とを含む部材と、 （２）第２の対置可能な部材であって、 （ａ）分析物の類似物を含み、前記分析物の類似物は分析物に対するアフィ ニティを欠如した特異的結合対の構成要素と共有結合した分析物を含み、かつ第 ２の特異的結合パートナーにより結合可能であり、前記特異的結合対の構成要素 は検出可能なラベルで標識してあり、前記分析物類似物は水性液体の添加により 溶解可能な形状を成すことを含むアプリケータと、 （ｂ）前記アプリケータから隔離した吸収手段とを含む部材と を含む。 本装置において、第１と第２の対置可能な部材は、第１と第２の対置可能な部 材を対向させることで第２の伝導手段をアプリケータと動作可能に当接するよう に配置して、アプリケータの内容がクロマトグラフィー媒体に適用されさらにク ロマトグラフィー媒体の少なくとも一部を通って流れるようにし、また吸収手段 を第１の伝導手段と動作可能に当接するように配置してクロマトグラフィー媒体 から液体を吸い取らせるように構成する。 本装置のこの形式は、望ましくはさらに、第１の対置可能な部材にヒンジで接 合したカバーを含み、第１と第２の対置可能な部材が対向するときにこれらの上 に折り曲げられるようにする。カバーはこれを切り取った開口部を有して、第１ と第２の対置可能な部材が対向し前記第１と第２の対置可能な部材の上にカバー が折り曲げられているときにクロマトグラフィー媒体の少なくとも一部が観察で きるように成してある。 望ましくは、この形式において、第１の特異的結合パートナーは分析物に特異 的な抗体、また第２の特異的結合パートナーは分析物に対する特異性を欠如した 免疫グロブリンを結合することのできる２次抗体である。望ましくは、分析物の 類似物は菌種からの免疫グロブリンに共有結合させた分析物を含み、特異的結合 パートナーはこの菌種に特異的な抗体である。 この形式はさらに、第１と第２の対置可能な部材が対向したときにクロマトグ ラフィー媒体全体および双方の伝導手段と吸収手段が当接するように配置した吸 収手段を含む第３の対置可能な部材を含む。この形式において、開口部はクロマ トグラフィー媒体の後ろに形成し、第２の対置可能な部材が第１の対置可能な部 材の上に折り曲げられ第３の対置可能な部材が第２の対置可能な部材の上に折り 曲げられたときに裏面からクロマトグラフィー媒体の少なくとも一部を観察する ことができる。 別の変化において、クロマトグラフィー媒体上に不動化した２次的特異的結合 パートナーの部分は少なくとも２つの独立した重複しないバンドに分割し、それ ぞれのバンドの２次特異的結合パートナーの量を決定して検出部分に結合した分 析物類似物の量すなわち被検サンプル内の分析物の濃度が分析物類似物が結合す るバンドの数で表示されるようにする。 競合法イムノアッセイに好適な本発明による検定装置のさらに別の形式はビオ チン−アビジン結合を使用する。本装置のこの形式は、 （１）第１の対置可能な部材であって、前記部材は第１の端部と第２の端部とを 有するクロマトグラフィー媒体を含み、その上の、それぞれが前記クロマトグラ フィー媒体の面積より実質的に小さい独立した別個の重複しない部分に、不動化 した （ａ）アビジン、ストレプトアビジン、抗ビオチン抗体およびこれらの誘導 体からなるグループから選択したビオチンと特異的に結合できる基質と、 （ｂ）３要素複合体と特異的に結合できる２次特異的結合パートナーとを有 し、前記３要素複合体は、 （ｉ）分析物と、 （ｉｉ）前記分析物と共有結合し前記分析物に対する特異的結合アフィニ ティを欠如した特異的結合対の構成要素と、 （ｉｉｉ）前記特異的結合対の構成要素に結合した検出可能なラベルとを 含むこと を含む部材と、 （２）水性サンプルの添加により溶解可能な形状の分析物に対する第１の特異的 結合パートナーを含む第１のアプリケータを含む第２の対置可能な部材であって 、前記第１の特異的結合パートナーはビオチンと共有結合し、前記第１の特異的 結合パートナーは２次特異的結合パートナーにより結合しないことと、 （３）第３の対置可能な部材であって、前記部材は、 （ａ）第２の水性液体の添加により溶解可能な形状の３要素複合体を含む第 ２のアプリケータと、 （ｂ）前記第２のアプリケータから隔離した吸収部材とを含むこと を含む。 本装置において、第１と第２の対置可能な部材は、第１と第２の対置可能な部 材を対向させることで第１の伝導手段を第１のアプリケータと動作可能に当接さ せ、第１のアプリケータの内容がクロマトグラフィー媒体に適用されまたクロマ トグラフィー媒体の少なくとも一部を通って流れるように構成する。第１と第３ の対置可能な部材は、第１と第３の対置可能な部材を対向させることで、吸収手 段を第１の伝導手段と当接させてクロマトグラフィー媒体から液体を吸い取り、 また第２のアプリケータを第２の伝導手段と動作可能に当接させることで、第２ のアプリケータの内容をクロマトグラフィー媒体に適用し、第１のアプリケータ の内容が流れた部分と重複するクロマトグラフィー媒体の少なくとも一部を通っ て流れるように構成する。 望ましくは、第一の特異的結合パートナーは抗分析物抗体である。３要素複合 体の特異的結合対の構成要素は家兎免疫グロブリンＧとして、この場合２次特異 的結合パートナーはヤギ抗家兎ＩｇＧであり得る。望ましくは、ビオチンと特異 的に結合できる基質はストレプトアビジンである。 クロマトグラフィー媒体上に不動化した２次特異結合パートナーの部分は少な くとも２つの独立して重複しないバンドに分割し、それぞれのバンドにおける２ 次特異的結合パートナーの量を決定することで、検出部分に結合する３要素複合 体の量、すなわち被検サンプル内の本来の分析物濃度が３要素複合体の結合する バンドの数で表されるようにすることができる。 競合法イムノアッセイを実行するのに好適な本発明によるクロマトグラフィー 検定装置のさらに別の形式は、 （１）第１の対置可能な部材であって、 （ａ）第１と第２の端部を有するクロマトグラフィー媒体であって、これの 上のそれぞれがクロマトグラフィー媒体の面積より実質的に小さい独立した重複 しない別々の領域に、不動化した （ｉ）分析物に対する特異的結合パートナーを結合することのできる分折 物類似物と、 （ｉｉ）分析物に対するアフィニティを有する特異的結合対の構成要素を 結合することができ、それ自体は分析物に対する結合アフィニティを欠如してい る２次特異的結合パートナーとを有することと、 （ｂ）前記クロマトグラフィー媒体の第一の端部に動作可能に当接する伝導 手段とを含む部材と、 （２）水性液体の添加で溶解可能な形状の分析物に対する特異的結合パートナー を含むアプリケータを含む第２の対置可能な部材と を含む。 本装置において、第１と第２の対置可能な部材は、第１と第２の対置可能な部 材を対向させることで伝導手段をアプリケータと動作可能に当接して、アプリケ ータの内容をクロマトグラフィー媒体に適用しクロマトグラフィー媒体の少なく とも一部を通って流れるように構成する。 望ましくは、第１の特異的結合パートナーは分析物に対して特異的な抗体であ り、分析物類似物は分析物とまたは分析物に対する特異的結合パートナーとの特 異的結合能力を欠如した蛋白に共有結合した分析物を含む。望ましくは、２次特 異的結合パートナーは分析物に対する抗体の抗原結合部位と関連のない菌種特異 的相互作用に基づいて分析物に特異的な抗体を結合する。 本装置において、クロマトグラフィー媒体上に不動化した２次特異的結合パー トナーの部分は少なくとも２つの独立した重複しないバンドに分割し、それぞれ のバンドの２次特異的結合パートナーの量を決定することで、検出部分に結合す る分析物に対する標識した特異的結合パートナーの量、すなわち被検サンプル内 の分析物の量が分析物に対して特異的に結合する標識したパートナーが結合する バンドの数で示されるようにすることができる。 競合法イムノアッセイを実行するのに好適な本発明による検定装置の別の形式 はクロマトグラフィー媒体を介しどちらも同じ方向に行う２段階の試薬移動によ る３成分装置である。本装置は、 （１）第１の対置可能な部材であって、 （ａ）第１の端部と第２の端部とを有するクロマトグラフィー媒体であって 、それぞれが前記クロマトグラフィー媒体の面積より小さい独立した別個の重複 しない領域に、不動化した （ｉ）分析物に対する特異的結合パートナーと （ｉｉ）前述の２次特異的結合パートナーとを有し、分析物に対する特異 的結合パートナーは前記クロマトグラフィー媒体の第１の端部に近いところに配 置することと、 （ｂ）第１のアプリケータとして機能させることのできる前記クロマトグラ フィー媒体の第１の端部と動作可能に当接する第１の伝導手段と、 （ｃ）前記クロマトグラフィー媒体の第２の端部と動作可能に当接する第２ の伝導手段とを含む部材と、 （２）第２の対置可能な部材であって、 （ａ）前述の分析物類似物を含み、前記分析物類似物は水性液体の添加によ り溶解可能な形状をなす第２のアプリケータと、 （ｂ）前記第２のアプリケータから隔離した第１の吸収手段とを含む部材と 、 （３）第２の吸収手段を含む第３の対置可能な部材と を含む。 本装置において、第１と第２の対置可能な部材は、第１と第２の対置可能な部 材を対向させることで第２のアプリケータを第１の伝導手段と動作可能に当接さ せ、第１の吸収部材を第２の伝導手段と動作可能に当接させるように構成する。 第１と第３の対置可能な部材は、第１と第３の対置可能な部材を対向させること で第２の吸収手段を第１の伝導手段およびクロマトグラフィー媒体と直接当接さ せ、ここから液体を吸い取るように構成する。 図面の簡単な説明 本発明の上記のおよびその他の特徴、態様、および利点は、以下の詳細な説明 と、添付の請求の範囲と、付属の図面とを参照することでより良く理解されるで あろう。図面において、 図１Ａは本発明による２部材クロマトグラフィー検定装置の一つの形式の略図 である。 図１Ｂは２つの部材を対向させて図示した図１Ａの２部材クロマトグラフィー 検定装置の略図である。 図２は本発明による２部材クロマトグラフィー検定装置の一つの形式の略図で 、第１の対置可能な部材はサンプル調製手段と前記サンプル調製手段と連通しな いクロマトグラフィー媒体とを含み、第２の対置可能な部材は伝導接続部材を 含む。 図３は本発明による２部材検定装置の別の形式の略図で、サンプル調製手段が 第１の対置可能な部材に含まれている。 図４は図３に示した形式の別の検定装置の略図で、第１の対置可能な部材では なく第２の対置可能な部材に吸収手段を有する。 図５は本発明による２部材検定装置の別の形式の略図で、同一の対置可能な部 材の上にサンプル調製手段と吸収部材が配置してある。 図６は本発明による２部材検定装置のさらに別の形式の略図で、２つのデテク タ適用パッドが別の対置可能な部材上にある。 図７は本発明による２部材検定装置のさらに別の形式の略図で、２つのアプリ ケータを一つの部材上に含む。 図８は図７に図示した形式の別の検定装置の略図で、第１の対置可能な部材で はなく第２の対置可能な部材上に吸収手段を有する。 図９は本発明による２部材検定装置のさらに別の形式の略図で、伝導手段と装 置を閉じたときに連結されるクロマトグラフィー媒体との間に不連続を含む。 図１０Ａは本発明による２部材検定装置のさらに別の形式の略図で、クロマト グラフィー媒体と動作可能に当接するデテクタ適用パッドを含む。 図１０Ｂは図１０Ａの２部材検定装置の裏面断面図で、対置した部材の詳細を 示す。 図１１Ａは本発明による２部材検定装置のさらに別の形式の略図で、図１０の 形式と一般に同様だが、デテクタ適用パッドがクロマトグラフィー媒体と直接当 接する。 図１１Ｂは図１１Ａの２部材検定装置の裏面断面図で、対置した部材の詳細を 示す。 図１２Ａは２方向クロマトグラフィーを行うのに好適な本発明による２部材検 定装置の別の形式の略図である。 図１２Ｂは図１２Ａの２部材クロマトグラフィー検定装置の上面図で、２つの 部材を対置させて図示してある。 図１３Ａは２方向クロマトグラフィーを行うのに好適な２部材検定装置のさら に別の形式の略図で、２つのアプリケータと一つの伝導手段とを有する。 図１３Ｂは図１３Ａの２部材クロマトグラフィー検定装置の上面図で、２つの 部材を対置させて図示してある。 図１４は本発明による２部材検定装置のさらに別の形式の略図で、第１の対置 可能な部材上のデテクタ適用パッドと第２の対置可能な部材上のサンプル調製手 段を有する。 図１５は本発明による２部材検定装置のさらに別の形式の略図でアプリケータ を部分に分割し、標識していないサンプルでクロマトグラフィー媒体の洗浄を提 供する。 図１６Ａは２方向クロマトグラフィーに好適なさらに別の２部材検定装置の略 図で、カバーを含む。 図１６Ｂは図１６Ａの２部材クロマトグラフィー検定装置の上面図で、２つの 部材を対置させて図示してある。 図１７Ａは本発明による３部材検定装置の略図である。 図１７Ｂは図１７Ａの３部材検定装置の裏面断面図で、対置した部材の詳細を 示す。 図１８は本発明による３部材検定装置の略図で、第３の部材がクロマトグラフ ィー媒体全体と両方の伝導手段から液体を吸収するように作用する。 図１９は本発明による多重検定装置の略図で、一つまたはそれ以上のサンプル の同時検定に好適である。 図２０は本発明による多重検定装置の別の形式の略図で、サンプルに対応した 折り畳み式のウェルを含む。 図２１は本発明による多重検定装置の異なる形式の略図で、試験カードを受け 入れるのに適する。 図２２は試験カードを受け入れるのに適する本発明による多重検定装置のさら に別の形式の略図である。 図２３は本発明による３部材検定装置の別の形式の略図で、クロマトグラフィ ー媒体上に不動化した分析物類似物に結合する標識した抗体を用いる競合法イム ノアッセイを実行するのに好適である。 図２４は標識した分析物類似物を用いる競合法イムノアッセイを実行するのに 好適なカバーを有する２部材検定装置の略図である。 図２５は標識した分析物類似物を使用する１次元競合法イムノアッセイを行う のに好適な３部材検定装置の略図で、第３の部材はクロマトグラフィー媒体全体 と両方の伝導手段から液体を吸収するように作用する。 図２６はビオチン−アビジン結合を使用する競合法イムノアッセイを行うのに 好適な本発明による３部材検定装置の略図である。 図２７は標識した抗分析物抗体を使用する競合法イムノアッセイを行うのに好 適な２部材検定装置の略図である。 図２８は綿球または類似のサンプリング器具を受け入れるのに好適で、ストレ プトコッカスＡ抗原（Streptococcus A antigen）検出のために設計した本発明 による検定装置の略図である。 発明の詳細な説明 定義 本開示の内容において、以下のような述語は特に指示がない限り以下のように 定義する。 特異的結合パートナー：関係する分子の３次元構造に依存する特異的非共有相 互作用により相互作用する分子対の構成要素。典型的な特異的結合パートナーの 対は、抗原−抗体、ハプテン−抗体、ホルモン−受容体、核酸糸−相補的核酸糸 、基質−酵素、インヒビター−酵素、炭水化物−レクチン、ビオチン−アビジン 、ウィルス−細胞受容体を含む。 動作可能な当接：２つの固形部材が直接または間接的に当接するときに、２つ の部材の一方から他方へ、毛細管またはその他によって、実質的に非中断的に水 性液体を流すことができるようにこれらの部材を動作可能に当接させる。「直接 的当接」は、２つの部材が物理的に、例えば端一端、または前面−後面などで接 触することを表す。一般に、２つの部材が直接当接する場合、これらは約０．５ ミリメートルから３ミリメートル程度重複する。しかし部材は端部が当接するよ うに配置することもできる。「間接的当接」は２つの部材が物理的には接触しな いが、一つまたはそれ以上の伝導手段により連結されることを表す。 有限容量：吸収手段はこれを配置してある装置内での検定の通常の実行中に受 け入れた液体で飽和する場合、有限容量を有する。この点で、吸収手段は吸収し た余分な液体を放出して少なくとも部分的に伝導することができる。 分析物：術語「分析物」は、分析物の類似物および誘導体が分析物自体と実質 的に等しく検定に使用する別の分子と結合する場合、検定しようとする実際の分 子とその類似物およびこれらの誘導体を含む。 抗体：術語「抗体」は適当な特異性の本来の抗体分子と抗体分画（Ｆａｂ、Ｆ （ａｂ’）、Ｆ（ａｂ’）２分画を含む）、および試験管内でサブユニットの再 結合により組み立てたハイブリッド抗体を含め化学的に変化させた本来の抗体分 子および抗体分画の両方を含む。 ２次特異的結合パートナー：特異的結合パートナーの対が相互作用するときに 特異的結合パートナーの対の構成要素に結合する更なる特異的結合パートナーを ２次特異的結合パートナーと呼ぶ。例えば、特異的結合パートナーの対はジアル ジア抗原（Giardia Ag）とウサギ抗ジアルジア抗体とを含むことができる。この 場合、２次特異的結合パートナーはヤギ抗ウサギＩｇＧ抗体であり得る。２次特 異的結合パートナーはこれが結合する抗体特異的結合パートナーの種、クラス、 またはサブクラスに対して特異的であり得る。これ以外に、特異的結合パートナ ーの一つをビオチンで標識した場合、２次特異的結合パートナーはアビジンに結 合した分子を含むことができる。 開示の概要 読者の利便のためと、本開示の構成の理解を助けるため、以下に本開示の概略 を示し、部分の見出しにおいて開示の構成を設定する。 Ｉ．クロマトグラフィー検定装置 Ａ．２部材検定装置 １．一般的構成 ２．２部材検定装置の特定の実施例 ａ．第２の部材に伝導接続部材を有する装置。 ｂ．第１の対置可能な部材にサンプル調製手段を有する装置。 ｃ．第２の部材に吸収手段を有する装置。 ｄ．同一の対置可能な部材上にサンプル調製手段と吸収手段を有する装置 。 ｅ．別の対置可能な部材上に２つのデテクタ適用パッドを有する装置。 ｆ．同一の対置可能な部材上に２つの独立したアプリケータを含む装置。 ｇ．第２の対置可能な部材上に２つのアプリケータと吸収手段とを有する 装置。 ｈ．伝導手段とクロマトグラフィー媒体の間にギャップまたは不連続を有 する装置。 ｉ．同一の対置可能な部材上にクロマトグラフィー媒体として標識した特 異的結合パートナーのためのパッドを有する装置。 ｊ．クロマトグラフィー媒体の第１の端部と直接当接するデテクタ適用パ ッドを有する装置。 ｋ．第２のアプリケータと吸収手段を第２の対置可能な部材上に含む２方 向装置。 ｌ．２つのアプリケータと伝導手段とを含む２方向装置。 ｍ．第１の部材上にデテクタ適用パッドを有する装置。 ｎ．洗浄を提供するための２部材アプリケータを有する装置。 Ｂ．カバー付き２部材装置 Ｃ．３部材装置 Ｄ．多重装置 １．基本多重装置 ２．折り畳み可能なウェルを有する多重装置 ３．試験カードを受け入れるのに適した多重装置 ＩＩ．競合法アッセイ用クロマトグラフィー検定装置 Ａ．３部材２方向フロー装置 Ｂ．カバー付き２部材２方向フロー装置 Ｃ．吸収手段付き３部材１次元フロー装置 Ｄ．ビオチンの特異性を用いる３部材２方向フロー装置 Ｅ．競合阻害イムノアッセイ用２部材装置 ＩＩＩ．検定装置で使用する分析物と抗体 ＩＶ．検査キット Ｉ．クロマトグラフィー検定装置 本発明の１つの態様は、生物学的サンプル内の分析物の検定に特に有用なクロ マトグラフィー検定装置を含む。これらの装置は予備抽出段階なしで生物学的サ ンプルの直接適用に好適であり、粒子または着色サンプルに起因する検定結果の 干渉を最小限にとどめるように構成してある。 本装置は少なくとも２つの実質的に平坦で対置可能な部材を有する。実質的に 平坦な部材の一つはその表面にクロマトグラフィー媒体を有する。 本装置はまた、対置可能な部材を対置させるためとこれに圧力を加えるための 手段を有する。加える圧力は一方の対置可能な部材から別の対置可能な部材へ対 置可能な部材とは実質的に直角の方向に液体を移動させるのに十分にして、分析 物の検出および／または同定のためにサンプルをクロマトグラフィー媒体へ適用 する。圧力はクロマトグラフィー媒体を介して液体を移動させクロマトグラフィ ーの過程を加速して少ない時間で検出可能な結果を得られるようにする。さらに 、圧力は装置内で例えば抽出段階等の抽出段階の実行を可能にし、吸収手段によ りクロマトグラフィー媒体から余剰な液体を取り除き検定のバックグラウンドを 減少させるためにも使用できる。圧力は対置可能な部材を対向して配置すること により発生し、例えばロックまたは把持部等の係合手段により部材を対向したま ま保持することで維持される。 本発明による装置はサンドイッチ法または競合法検定のいずれかの実行のため に構成することができる。 本装置をサンドイッチ法イムノアッセイの実行のために組み立てる場合、一般 に本装置の対置可能な部材の少なくとも一つは、第１の、標識した分析物に対す る特異的結合パートナーを含む。この第１の、標識した、分析物に対する特異的 結合パートナーは水性液体により溶解可能な形状を成す。第１の、標識した、分 析物に対する特異的結合パートナーはサンプル内の分析物と反応できるように配 置する。 サンドイッチ法イムノアッセイの実行に好適な装置において、クロマトグラフ ィー媒体は第２の、標識していない、不動化した分析物に対する特異的結合パー トナーの検出部分を含む。検出部分はクロマトグラフィー媒体より実質的に小さ い。これらの部材は、（１）第１の標識した特異的結合パートナー、（２）分析 物、（３）第２の標識していない特異的結合パートナー、を含む三つ組が、分析 物がサンプル中に存在する場合検出帯域に結合する。 競合法イムノアッセイを実行するのに適した装置において、クロマトグラフィ ー媒体は、クロマトグラフィー媒体より実質的に小さい少なくとも一つの領域に 、分析物またはこれの類似物および分析物に対する特異的結合パートナーから成 るグループから選択した特異的結合対の構成要素を含む。競合法イムノアッセイ を実行するのに適した本発明による装置では幾つかの異なる構成が可能である。 これらの異なる構成については後述する。 一般に、サンプルをクロマトグラフィー媒体に適用した後の分析物の検出およ び／または同定は視覚的に検出可能な標識した部材を用いて行う。標識した部材 は分析物または視覚的に検出可能なラベルに結合したこれの類似物、または視覚 的に検出可能なラベルに結合したラベルに対する特異的結合パートナーのいずれ かが望ましい。 本発明による検定装置は１つ以上の検定を同時に実行するように構成すること ができる。このような装置では、実質的に平坦な部材の一つが少なくとも２つの 独立し当接しないクロマトグラフィー媒体を有する。 本装置の変化は、２方向クロマトグラフィーに特に好適だが、この使用法に制 限されない。本装置は少なくとも３つの実質的に平坦で対置可能な部材を有する 。実質的に平坦な部材の一つはその表面上に第１と第２の端部を有するクロマ トグラフィー媒体を有する。３部材装置も、対置可能な部材を少なくとも２つの 異なる組み合せで対にして対向させ、ロックまたは把持部等の係合手段で対向し た部材を互いに保持してこれに圧力を適用するための手段を有する。圧力は一つ の対置可能な部材から別の部材へ対置可能な部材に対して実質的に直角の方向へ 液体を移し換え、またクロマトグラフィー媒体を通って液体を移動させるのに十 分である。これによりサンプルをクロマトグラフィー媒体に適用して第１の端部 から第２の端部ヘクロマトグラフィー媒体を横断して流すことができる。 本装置はまた、少なくとも一つのアプリケータと一つの吸収手段が対置可能な 部材の一つに配置してあり、アプリケータと吸収手段が配置してある対置可能な 部材をクロマトグラフィー媒体が配置してある対置可能な部材に対向させたとき に、第２の液体をクロマトグラフィー媒体に適用できるように位置させる。第２ の液体は第２の端部から第１の端部へ向かってクロマトグラフィー媒体を通って 流れる。これによりクロマトグラフィー媒体を通る流れを反転させる。分析物の 検出および／または同定は流れの反転の後で行う。 Ａ．２部材検定装置 本発明の検定装置の一つの実施例は１方向の流れにより１次元で操作する２部 材クロマトグラフィー検定装置である。 １．一般的構成 一般に、本発明による２部材クロマトグラフィー検定装置は、 （１）検定しようとするサンプルを受け入れるのに適したサンプル調製手段を含 む第１の対置可能な部材と、 （２）クロマトグラフィー媒体を含む第２の対置可能な部材 を含む。 本装置において、第１と第２の対置可能な部材は装置を閉じたときにサンプル 調製手段が検定しようとするサンプルをクロマトグラフィー媒体に適用させられ るように対置させることができる。使用において、第１と第２の対置可能な部材 は一般に、検出試薬をサンプル調製手段へ適用した後に対置させる。第１と第２ の対置可能な部材を対置させたとき、サンプル調製手段がサンプルと検出試薬を クロマトグラフィー媒体に適用する。サンプルと検出試薬がクロマトグラフィー 媒体の少なくとも一部を横断した後、検出試薬は分析物の存在および／または量 の検出可能な指標を与える。検出試薬はクロマトグラフィー媒体の少なくとも一 部で観察および／または測定される。これにより分析物の検出および／または同 定が行える。 基本的な装置の構造の詳細に付いての説明は、本発明による他の２部材および ３部材検定装置にも可能な限り適用される。 検出試薬は前述したような分析物に対する第１の特異的結合パートナーを含む 。これは更なる成分を含むこともある。 この処理は検出帯域に含まれる２次特異的結合パートナーの濃度と検出部分の 大きさによって定量的および／または定性的な分析物の指標を与えることができ る。 典型的には、結果を得るために、検定はサンプル調製手段におけるサンプルの インキュベーションに必要な時間とクロマトグラフィーそれ自体に必要な時間を 含め３０秒から１０分、さらに典型的には１ないし５分が必要である。一般に、 検定は室温で行うが、４℃で、または３７℃まで、または場合によっては、分折 物の性質と特異的結合パートナーの性質によりそれより高い温度で、行うことが できる。場合によっては検定を低い温度で実行する方が劣化を制限するのに望ま しいこともあり、また他の場合には高い温度で好適な分析物および特異的結合パ ートナーを用いた検定を実行するほうが検定を高速化できることもある。 このクロマトグラフィー検定装置の一般的な構成を図１Ａに示す。クロマトグ ラフィー検定装置１０は第１の対置可能な部材１１と第２の対置可能な部材１２ とを有する。第１の対置可能な部材１１はサンプル抽出手段１３を含む。第２の 対置可能な部材１２はクロマトグラフィー媒体１４を含む。クロマトグラフィー 媒体１４は第１の端部１５と第２の端部１６を有し、クロマトグラフィー媒体１ ４は検出帯域１７と制御帯域１８とを含む。第１の対置可能な部材１１と第２の 対置可能な部材１２はヒンジ１９で結合する。第１と第２の対置可能な部材１１ 、１２は望ましくはさらに第１と第２の対置可能な部材を対向して固定する係合 手段を含むのが望ましい。係合手段は、第１の対置可能な部材１１と第２の対置 可能な部材１２とが対向するときに係合されるロック２０、２１等のロックを含 むことができる。ロック２０、２１の構成および寸法は対置可能な部材１１、１ ２に最適な圧力の度合をかけるように変化できる。最適な圧力の度合はクロマト グラフィー媒体１４の厚みと構成、予定するサンプル量、その他の因子によって 変化することがある。サンプルまたは試薬の漏出を防止するため、封止部材また はガスケット２２を第１と第２の対置可能な部材１１、１２の周辺部に配置する 。係合手段例えばロック２０、２１と封止部材またはガスケット２２を用いるの が一般的に好適だが、これらの部材は本発明による基本装置を構成するために必 要ではない。第２の対置可能な部材１２は第１の窓２３を有し、任意で、第１の 対置可能な部材１１はいずれかの側面からクロマトグラフィー媒体１４を観察で きるようにするための第２の窓２４を有することができる。第２の窓２４は試薬 を適用する表面に対向する表面からクロマトグラフィー媒体１４を観察できるよ うにする。もう一つの選択しとして、第１の窓２３を設けず、第２の窓２４をク ロマトグラフィー媒体１４の観察に用いることもできる。一般に、本発明による ２部材装置は、開口部としても公知の１つまたは２ついずれかの窓を有して、図 １の窓２３のようにクロマトグラフィー媒体を担持しない対置可能な部材を通し て、または図１の窓２４のようにクロマトグラフィー媒体を担持する対置可能な 部材を通してクロマトグラフィー媒体を観察できるようにする。これ以外では、 第一および／または第２の対置可能な部材１１、１２を透明または透光性の材料 から作成し、クロマトグラフィー媒体１４を独立した開口部または窓なしに観察 できるようにしてもよい。 図１Ｂは対置可能な部材１１、１２を対置した後の装置１０を示す。検出帯域 １７と制御帯域１８を含むクロマトグラフィー媒体１４は窓２３を介して観察で きる。サンプル調製帯域１３は第１の端部１５でまたはその付近でクロマトグラ フィー媒体１４と当接し、サンプル調製帯域１３の内容が、検出帯域１７および 制御帯域１８を含むクロマトグラフィー媒体１４を通って流れるようにする。 装置１０は、任意で、図１Ａに図示したようにクロマトグラフィー媒体１４の 第１の端部１５と動作可能に当接する伝導手段２５をさらに含むことができる。 伝導手段２５はセルロースまたはその他の実質的に吸収せず水性液体を誘導でき る材料からなる。伝導手段２５は界面活性剤で処理して試薬がクロマトグラフィ ー媒体１４にさらに均一に適用できるようにする。伝導手段２５が存在するとき 、サンプル調製帯域１３は第１と第２の対置可能な部材１１、１２が当接する際 に伝導手段２５と当接するのが望ましい。 装置１０はさらに、クロマトグラフィー媒体１４の第２の端部１６と動作可能 に当接して、図１Ａに図示したように第１の端部１５から第２の端部１６に向か ってクロマトグラフィー媒体１４を通って液体を流す補助とする吸収手段２６を 含むことができる。 サンプル調製帯域１３は何らかの好適な材料、例えばこれらに限らないが、セ ルローズ、紙、ナイロン、レーヨン、ガラス線維、羊毛、または合成不織布など から作成できる。サンプル調製帯域１３の有孔率は、例えば全血や糞便検体など のサンプル内の細胞性または粒子性物質を漉し取るように選択できる。サンプル 調製帯域１３はサンプルをクロマトグラフィー媒体１４に適用する前にサンプル の処理を行うための少なくとも一つの試薬を含むことができる。 サンプル調製帯域１３に存在し得る試薬はサンプル調製帯域１３に適用するサ ンプルにより、また検定しようとする分析物により、変化する。試薬は、ｐＨを 調節するための酸またはアルカリ、ｐＨを安定させるためのバッファ、ＥＤＴＡ またはＥＧＴＡなど金属をキレート化するキレート剤、動物細胞の細胞膜または 細菌の細胞壁を溶解させて分析物を放出させるための水解酵素、酵素のための基 質または補酵素などを含むことができ、これらに制限されるものではない。特に 有用な抽出試薬の一つは亜硝酸ナトリウムと酢酸の混合物で亜硝酸を発生する。 亜硝酸塩はサンプル調製帯域１３において乾燥した状態で存在することができ、 酢酸はサンプルの添加後にサンプル調製帯域１３へ追加することができる。 サンプル、または任意で咽頭擦過綿球またはマイクロポアフィルタなどのサン プリング器具はサンプル調製帯域１３に作業員が配置することができ、必要であ れば他の試薬を追加できる。 第１と第２の対置可能な部材１１、１２の本体は、検定の実行に関係する液体 を含む湿度に対して十分な不透水性のある積層した厚紙から作成するのが望まし い。その他のセルロースを母体とする材料、例えば段ボールまたは固形漂白サル ファイト（ＳＢＳ）も使用できる。これ以外では、本体を不透水性のプラスチッ クから作成することもできる。好適なプラスチックは、例えばレクサンなどのポ リカーボネート・プラスチックである。 ヒンジ１９は水性液体に対して耐水性の材料、例えば第１と第２の対置可能な 部材１１、１２の本体と相互に接続可能な、またはこれに使用している材料と同 じ材料のプラスチックなどの材料から作成するのが望ましい。 典型的には、クロマトグラフィー媒体１４、吸収手段２６、伝導手段２５、お よびその他の液体を受け入れる部材は接着剤で第１と第２の対置可能な部材１１ 、１２の本体に固定する。好適な接着剤は従来技術で周知となっている。その他 の接続方法、例えばステープルや鋲止めなども使用できる。 分析物は分析物に対する標識した特異的結合パートナーを用いてまたは分析物 に対する特異的結合パートナーに対する標識した２次特異的結合パートナーを用 いるかのいずれかで検出する。多くの場合、標識した分析物の特異的結合パート ナーの使用が好適である。標識特異的結合パートナーのラベルは視覚的に検出可 能なラベル、たとえばコロイド状金属ラベルなどが望ましい。望ましくは、コロ イド状金属ラベルは、金、銀、青銅、鉄、または錫である。最適には、金である 。金で標識した抗体の調製については、Ｊ．デメイ、「金プローブの調製と使用 法」免疫細胞化学：現代の手法とその応用（Ｊ．Ｍ．ポラク＆Ｓ．ヴァンノール デン編著、ライト、英国ブリストル、１９８６年）第８章、１１５〜１４５ペー ジ（J.DcMcy,"The Preparation and Use of Gold Probes,"in Immunocytochemis try :Modern Methods and Applictations(J.M.Polak & S.VanNoorden,eds.,Wrigh t,Bristol,England,1986)）に記載されており、これは本明細書において参照に 含めてある。コロイド金で標識した抗体は、例えばミズーリ州セントルイスのシ グマ・ケミカルから市販されている。 これ以外では、他のコロイドラベル、例えばコロイド硫黄ラベルまたは着色シ リカラベル、も使用可能である。あまり好適でない代替法において、視覚的に検 出可能なラベルは着色ラテックス・ラベルである。他のラベル、例えば放射性ラ ベルを使用することも可能である。 出願人は必ずしもこの理論に拘泥する意図はないが、サンプルを含む水性液体 を、例えばコロイド金などのコロイド金属ラベルで標識した溶解可能な特異的結 合パートナーに適用する場合、分析物と標識した特異的結合パートナーの間の反 応動態は極端に迅速である。このような迅速な動態のため分析物と標識特異的結 合パートナーの組み合せがクロマトグラフィー媒体に適用される前に分析物の実 質的に完全な標識が行われてしまう。つまり、本発明による検定装置で実行する １方向クロマトグラフィー手順において、クロマトグラフィーに現れるのは分析 物とこれに対応する標識した特異的結合パートナーの２元複合体が主となる。こ れにより特異的結合パートナーと結合しない汚染物からこの複合体を分離でき、 検定精度を向上させることができる。 本実施例において、標識した特異的結合パートナーはサンプル調製帯域へ水性 液体を添加することで溶解することのできる形状でサンプル調製帯域１３に存在 するのが望ましい。典型的には、水性液体はサンプルそれ自体である。場合によ っては、特に小量のサンプルを用いる場合、さらにバッファまたはその他の水性 液体をサンプル調製帯域に添加するのが望ましいこともある。 以下において説明する他の実施例では、標識した特異的結合パートナーはサン プル調製帯域から独立しているが検定の実行中にこれと当接するクロマトグラフ ィー検定装置の部材上に存在することができる。このような実施例では、標識し た特異的結合パートナーはこの部材上で溶解可能な形状で存在し、サンプルが部 材と当接したときに溶解されるのが望ましい。場合によっては、標識した特異的 結合パートナーはサンプルとは別の独立した水性液体を部材に添加することで溶 解することができる。 第２の対置可能な部材１２上のクロマトグラフィー媒体１４は平坦なストリッ プである。典型的には媒体は矩形で、第１と第２の端部１５、１６を有する。本 明細書の説明を通じて、術語「第１の端部１５」はサンプルを適用するクロマト グラフィー媒体１４の端部を表し、また術語「第２の端部１６」はこれと対向す る端部を表す。サンプルの流れの原方向はクロマトグラフィー媒体１４の第１の 端部１５から第２の端部１６に向かう方向である。クロマトグラフィー媒体１４ は分析物と分析物−抗体結合の薄層クロマトグラフィー用媒体として好適な材料 、例えばニトロセルロース、ナイロン、レーヨン、セルロース、紙、またはシリ カから成る。クロマトグラフィー媒体１４は必要に応じて前処理または変化させ ることができる。典型的には、クロマトグラフィー媒体１４は透光性で、検定の 結果として出現する着色帯域をいずれかの側面から観察できるようにする。 幾つかの応用において、第２の可撓性の透明な支持をクロマトグラフィー媒体 １４の上部に配置してメンブレンを通るサンプルの流れを安定させ、メンブレン 上部への移動を防止する。好適な可撓性透明支持はポリエチレン、ビニール、マ イラー、セロファンを含む。 サンドイッチ法イムノアッセイなどの検定にクロマトグラフィー検定装置１０ を使用する場合、クロマトグラフィー媒体はさらにクロマトグラフィー媒体１４ より実質的に小さい検出帯域１７を含むことができる。この検出帯域は拡散しな いように不動化した分析物の第２の特異的結合パートナーを含む。第２の特異的 結合パートナーは共有または非共有手段によりクロマトグラフィー媒体に結合す ることができる。検定しようとする分析物が抗原またはハプテンの場合、第２の 特異的結合パートナーは抗原またはハプテンに対する抗体であり得る。これ以外 では、分析物は抗体のことがあり、第２の特異的結合パートナーは抗体により特 異的に結合され得るハプテンまたは抗原であり得る。 クロマトグラフィー媒体１４はさらにクロマトグラフィー媒体１４より実質的 に小さく検出帯域１７から離した制御帯域１８を含むことができる。制御帯域１ ８は三つ組「サンドイッチ」複合体の形成により検出帯域１７で結合されない標 識抗体を結合させるため拡散しないように不動化した分析物を含み得る。このよ うな抗体はいずれも不動化した分析物に結合し検出可能な帯域またはバンドを形 成する。これにより検定の動作についてのチェックと、後述するように試薬の正 しい結合のチェックを提供する。検出帯域１７の第２の特異的結合パートナーと 制御帯域１８の分析物の結合を用いる方法は従来技術で周知であるのでこれ以上 の説明を要しない。 これ以外では、ある種の分析物、例えば炭化水素について、分析物をクロマト グラフィー媒体１４上に安定に固定ずるのが困難または不可能な場合がある。こ のような場合、制御帯域１８は標識した抗分析物抗体に特異的な抗体の不動化帯 域を含み得る。例えば、分析物がストレプトコッカスＡ特異炭化水素で標識抗体 がストレプトコッカスＡ抗原に特異的なウサギＩｇＧの場合、制御帯域１８は抗 ウサギＩｇＧヤギ抗体を含み得る。このような場合、高い分析物濃度での検出帯 域１７への標識抗分析物抗体の完全な取り込みとその結果としての制御帯域１８ からの標識抗分析物抗体の消失を防止するため、分析物に対する特異性が低く標 識した抗分析物抗体とは別の種類の標識抗体の添加が望ましいことがある。この ような抗体は免疫学的に相違がない免疫グロブリンまたはテストサンプルには存 在しない分析物に対する抗体で構成できる。制御帯域１８は抗種特異抗体または テストサンプルに見つからない分析物を含むことになる。 本装置の幾つかの変化が可能である。前述したように一つの変化において、サ ンプル調製帯域１３はさらにサンプル調製帯域１３へ水性液体を添加することで 溶解可能な形状の検出可能なラベルで標識した分析物に対する特異的結合パート ナーを含むことができる。水性液体はサンプルそれ自体であり得る。標識した特 異的結合パートナーは、凍結乾燥するか、または可逆的に沈降させサンプルをサ ンプル調製帯域へ添加することにより溶解し移動するようにできる。この変化に おいて、検出試薬をサンプル調製帯域１３に添加する必要はないが、これは検出 試薬がサンプル調製帯域１３へサンプルを添加することで自動的に生成されるた めである。 別の変化において、第２の動作可能な部材上でクロマトグラフィー媒体１４の 第１の端部１５と動作可能に当接する伝導手段２５は、動作可能な当接において 有限容量の吸収手段２５ａで置き換えることができる。吸収手段２５ａは第１と 第２の対置可能な部材１１、１２が対向したときにサンプル調製帯域１３と当接 してサンプルを吸収手段に適用するように配置する。これはクロマトグラフィー 媒体１４内へのサンプルの流れを制御してクロマトグラフィー媒体１４が溢れな いようにする上で有用であり得る。 本形式において、吸収手段２５ａは前述したように溶解可能な形状で分析物に 対する標識特異的結合パートナーを含むことができる。この構成において、標識 特異的結合パートナーは第１と第２の対置可能な部材１１、１２が対置したとき に溶解してサンプルを吸収手段２５ａに適用する。サンプルと溶解した標識特異 的結合パートナーの組み合わせが第１の端部１５からクロマトグラフィー媒体１ ４に入る。 ２．２部材検定装置の特定の実施例 ａ．第２の部材に伝導接続部材を有する装置。 本発明による２部材装置の一つの実施例において、第１の対置可能な部材は、 （１）サンプル調製帯域と （２）前記サンプル調製帯域と連通しないクロマトグラフィー媒体 を含む。 第２の対置可能な部材は伝導接続部材を含む。第１と第２の対置可能な部材は 、接続部材がサンプル調製帯域とクロマトグラフィー媒体の間の連通を形成して サンプルをクロマトグラフィー媒体に適用できるように当接させることができる 。 本実施例を図２に図示する。クロマトグラフィー検定装置４０は第１の対置可 能な部材４１と第２の対置可能な部材４２を含む。第１の対置可能な部材はサン プル調製帯域４３とクロマトグラフィー媒体４４を含み、クロマトグラフィー媒 体４４は第１の端部５０と第２の端部５１を有する。クロマトグラフィー媒体４ ４は検出領域４５と制御領域４６とを有する。第２の対置可能な部材４２は伝導 接続部材４７を含む。第１と第２の対置可能な部材４１、４２はヒンジ４８によ って接続される。第１と第２の対置可能な部材４１、４２は第１と第２の対置可 能な部材４１、４２を包囲するガスケット５４を有するロック５２、５３などの 係合手段も含む。第２の対置可能な部材４２はクロマトグラフィー媒体４４の観 察が可能な開口部４９を有する。 第１と第２の対置可能な部材４１、４２を対置すると、第１の対置可能な部材 ４１上のサンプル調製帯域４３は第２の対置可能な部材４２上の伝導接続部材４ ７と当接し、第２の対置可能な部材４２がクロマトグラフィー媒体４４の第１の 端部５０と当接してクロマトグラフィー媒体４４にサンプルが適用される。 図２の装置の変化において、伝導接続部材４７は水性液体の添加により溶解可 能な形状の検出可能なラベルで標識した分析物の特異的結合パートナーを含むこ とができる。この形式において、サンプルはサンプル調製帯域４３に適用する。 これ以外では、サンプル調製帯域４３は液状の分析物用標識特異的結合パートナ ーの添加に使用することもでき、サンプル自体は伝導接続部材４７に添加する。 さらに別の変化において、サンプル調製帯域４３は分析物に対する溶解可能な特 異的結合パートナーを含むことができ、サンプルは伝導接続部材４７に添加する 。 ｂ．第１の対置可能な部材にサンプル調製手段を有する装置。 本発明によるクロマトグラフィー検定装置の別の実施例は、第１の対置可能な 部材上にサンプル調製帯域を含む、すなわちクロマトグラフィー媒体が配置して ある部材上に含む装置である。典型的には、本実施例において、第２の対置可能 な部材は溶解可能な形状で分析物のための標識した特異的結合パートナーを含む アプリケータを含む。 本実施例において、第１と第２の対置可能な部材を対置することでアプリケー タをサンプル調製帯域と当接させ分析物に対する標識特異的結合パートナーを溶 解する。 望ましくは、第１の対置可能な部材はさらに伝導手段を含み、サンプル調製帯 域とクロマトグラフィー媒体の間の動作可能な当接は伝導手段に対してサンプル 調製帯域とクロマトグラフィー媒体双方が動作可能に当接することで実現する。 望ましくは、第１の対置可能な部材はさらにクロマトグラフィー媒体の第２の 端部と動作可能に当接する吸収手段を含む。 クロマトグラフィー媒体は検出および制御領域を有して前述のように作成する のが望ましい。 検定装置の本実施例を図３に図示する。クロマトグラフィー検定装置６０は第 １の対置可能な部材６１と第２の対置可能な部材６２を有する。第１の対置可能 な部材６１はサンプル調製帯域６３、サンプル調製帯域６３と動作可能に当接す る伝導手段６４、第１の端部６６と第２の端部６７を有するクロマトグラフィー 媒体６５、およびクロマトグラフィー媒体６５の第２の端部６７と動作可能に当 接する吸収手段６８を含む。クロマトグラフィー媒体６５は検出領域６９と制御 領域７０を含む。第２の対置可能な部材６２は、溶解可能な形状において標識し た特異的結合パートナーを含有するのが望ましいアプリケータ７１を含む。第１ の対置可能な部材６１と第２の対置可能な部材６２はヒンジ７２で結合する。第 ２の対置可能な部材６２はクロマトグラフィー媒体６５の少なくとも一部を観察 できるようにするための窓７３を含む。第１と第２の対置可能な部材６１、６２ は第１と第２の対置可能な部材６１、６２を包囲するガスケット７６を有する例 えばロック７４、７５などの係合手段を有する。 動作において、サンプルはサンプル調製帯域６３に適用する。第１と第２の対 置可能な部材６１、６２を対置させて、サンプル調製帯域６３のサンプルが標識 した特異的結合パートナーを含むアプリケータ７１の内容を溶解するようにする 。サンプル調製帯域６３とアプリケータ７１の内容はサンプル調製帯域６３と伝 導手段６４を経由してクロマトグラフィー媒体６５に適用される。 ｃ．第２の部材に吸収手段を有する装置。 本実施例の別の態様において、吸収手段は第１の対置可能な部材の代わりに第 ２の対置可能な部材上に配置することができる。この別の態様において、吸収手 段は第１と第２の対置可能な部材が対置されたときにクロマトグラフィー媒体の 第２の端部と動作可能に当接する。これによって大量のサンプルを使用する必要 がある場合例えば低濃度でしか存在しない分析物の検出時などに好適であり得る 大容量の吸収手段が可能になる。 実施例のこの別の態様を図４に図示する。クロマトグラフィー検定装置８０は 第１の対置可能な部材８１と第２の対置可能な部材８２を含む。第１の対置可能 な部材８１はサンプル調製帯域８３、サンプル調製帯域８３と動作可能に当接す る伝導手段８４、および第１の端部８６と第２の端部８７を有し検出領域８８と 制御領域８９を有するクロマトグラフィー媒体８５を含む。第２の対置可能な部 材８２はアプリケータ９０と吸収手段９１を含み、アプリケータ９０は第２の対 置可能な部材８２上の吸収手段９１から離してある。第１の対置可能な部材８１ と第２の対置可能な部材８２はヒンジ９２で結合する。第２の対置可能な部材８ ２はクロマトグラフィー媒体８５の少なくとも一部を観察できるようにする開口 部９３を含む。第１と第２の対置可能な部材８１、８２は前述のようにロック９ ４、９５などの係合手段とガスケット９６とを含む。 使用において、サンプルはサンプル調製帯域８３に適用し、ここで抽出または その他のサンプル処理を行うことができる。サンプルは前述のように伝導手段８ ４を通って流れることでクロマトグラフィー媒体８５の第１の端部８６に入る。 第１の対置可能な部材８１と第２の対置可能な部材８２を対置させると、アプリ ケータ９０は伝導手段８４と動作可能に当接してアプリケータ９０内の標識した 特異的結合パートナーを溶解し、溶解した標識特異的結合パートナーを伝導手段 ８４へさらにはクロマトグラフィー媒体８５の第１の端部８６へ適用し、これに より溶解した標識特異的結合パートナーはクロマトグラフィー媒体８５に入る。 吸収手段９１は同時にクロマトグラフィー媒体８５の第２の端部８７と動作可能 に当接してクロマトグラフィー媒体８５から液体を吸い取る。 ｄ．同一の対置可能な部材上にサンプル調製手段と吸収手段を有する装置 。 本発明によるクロマトグラフＥ検定装置の別の実施例は、サンプル調製帯域と 吸収手段が同一の対置可能な部材上に配置してあるような２部材装置である。こ れはある種の用途において大容量の吸収手段を使用してさらに迅速にまた効率的 にクロマトグラフィー媒体の第２の端部から液体を吸い取ることができる利点を 有する。 ２部材クロマトグラフィー検定装置の本実施例を図５に図示する。クロマトグ ラフィー装置１００はヒンジ１０３で結合した第１の対置可能な部材１０１と第 ２の対置可能な部材１０２を有する。第１の対置可能な部材１０１は第１の端部 １０５と第２の端部１０６を有するクロマトグラフィー媒体１０４と、クロマト グラフィー媒体１０４の第１の端部１０５に動作可能に当接する伝導手段１０７ を含む。クロマトグラフィー媒体１０５は検出領域１０８と、任意で制御領域１ ０９を含む。 第２の対置可能な部材１０２は検定しようとするサンプルを受け入れるための サンプル調製帯域１１０と、サンプル調製帯域１１０から離してある吸収手段１ １１を含む。サンプル調製帯域１１０は溶解可能な形状で分析物のための標識し た特異的結合パートナーを含むことができる。第２の対置可能な部材１０２はク ロマトグラフィー媒体を観察できるようにする開口部１１２を有する。第１と第 ２の対置可能な部材１０１、１０２はロック１１３、１１４などの係合手段とガ スケット１１５を前述したように有する。 第１と第２の対置可能な部材１０１、１０２を対置させると、サンプル調製帯 域１１０は伝導手段１０７と動作可能に当接してサンプルを伝導手段１０７さら にはクロマトグラフィー媒体１０４の第１の端部１０５に適用する。吸収手段１ １１はクロマトグラフィー媒体１０４の第２の端部１０６と動作可能に当接して クロマトグラフィー媒体１０４の第２の端部１０６から液体を吸い取る。その他 の態様において、本装置の設計と動作は前述の図４に図示した装置と同様である 。 ｅ．別の対置可能な部材上に２つのデテクタ適用パッドを有する装置。 本発明による２部材検定装置のさらに別の実施例は別の対置可能な部材上に２ つの独立したデテクタ適用パッドを含む。この構成は、標識した抗体が希釈液の 形状でしか利用できず抗体を濃縮しようとすると変性または失活させてしまうよ うな場合などの、大量の標識特異的結合パートナーをしようするのが望ましい場 合に特に有用である。 この２部材クロマトグラフィー検定装置の実施例を図６に図示する。クロマト グラフィー検定装置１２０は第１の対置可能な部材１２１と第２の対置可能な部 材１２２をヒンジ１２３で結合してある。第１の対置可能な部材１２１は第１の 端部１２５と第２の端部１２６を有するクロマトグラフィー媒体１２４を含む。 クロマトグラフィー媒体１２４は検出領域１２７と、任意で制御領域１２８を含 む。 第１の対置可能な部材１２１はクロマトグラフィー媒体１２４の第１の端部１ ２５と動作可能に当接する第１のデテクタ適用パッド１２９も有する。第１のデ テクタ適用パッド１２９は第１のデテクタ適用パッド１２９へ水性液体の添加で 溶解可能な形状にある分析物に対する第１の特異的結合パートナーを含む。第１ の特異的結合パートナーは典型的には検出可能なラベルで標識する。第１の対置 可能な部材１２１は第１のデテクタ適用パッド１２９と動作可能に当接する伝導 手段１３０も有して、第１のデテクタ適用パッド１２９が伝導手段１３０とクロ マトグラフィー媒体１２４の第１の端部１２５を連結するようになす。第１の対 置可能な部材１２１はクロマトグラフィー媒体１２４の第２の端部１２６と動作 可能に当接する吸収部材１３１も有する。 第２の対置可能な部材１２２は検定しようとするサンプルを受け入れるための サンプル調製帯域１３２を含む。第２の対置可能な部材１２２もサンプル調製帯 域１３２と動作可能に当接する第２のデテクタ適用パッド１３３を含み、サンプ ル調製帯域１３２は第２のデテクタ適用パッド１３３の上に配置する。サンプル 調製帯域１３２と第２のデテクタ適用パッド１３３は、ファスナーまたは接着剤 で相互に保持することができる。第２のデテクタ適用パッド１３３とサンプル調 製帯域１３２は、サンプル調製帯域１３２に適用されるサンプルが第２のデテク タ適用パッド１３３に入る前にサンプル調製帯域１３２を通過するように配置す る第２のデテクタ適用パッド１３３はサンプル調製帯域１３２へのサンプルの追 加で溶解可能な形状にある分析物のための第２の特異的結合パートナーを含む。 第２のデテクタ適用パッド１３３は、サンプル調製帯域１３２へのサンプルの適 用で第２の特異的結合パートナーを溶解して、サンプル調製帯域１３２がサンプ ルと第２の特異的結合パートナーの混合物を含むように配置する。 第２の特異的結合パートナーは検出可能なラベルで標識する。望ましくは、第 １と第２の特異的結合パートナーは同一とし、第１と第２の特異的結合パートナ ーを標識する検出可能なラベルも同一とする。 第２の対置可能な部材１２２は検出帯域１２７と、存在する場合には制御帯域 １２８を含むクロマトグラフィー媒体１２４の少なくとも一部が観察できるよう にするための開口部１３４も含む。第１と第２の対置可能な部材１２１、１２２ は、基本的２部材装置において前述したようにロック１３５、１３６などの係合 手段とガスケット１３７も含む。 第１と第２の対置可能な部材１２１、１２２が対置されると、サンプル調製帯 域１３２は伝導手段１３０と当接してサンプルと第２の特異的結合パートナーを 伝導手段１３０さらにはクロマトグラフィー媒体１２４の第１の端部１２５へ第 １のデテクタ適用パッド１２９を経由して適用する。つまり、サンプルは順番に 、第２の特異的結合パートナー、さらに第１の特異的結合パートナーに接触して から、クロマトグラフィーのためクロマトグラフィー媒体１２４の第１の端部１ ２５に適用される。これによって大量の標識した特異的結合パートナーをサンプ ルと当接させて検定の感度を向上させる。 ｆ．同一の対置可能な部材上に２つの独立したアプリケータを含む装置。 ２つの独立したアプリケータを同一の対置可能な部材上に含む本発明によるク ロマトグラフィー検定装置のさらに別の実施例である。これら２つのアプリケー タは対置可能な部材が対置されたときに対置可能な部材上の伝導手段によって連 結されるまで動作可能に当接しない。 このクロマトグラフィー検定装置の実施例を図７に図示する。クロマトグラフ ィー検定装置１４０は第１の対置可能な部材１４１と第２の対置可能な部材１４ ２とを有する。第１の対置可能な部材１４１は第１の端部１４４と第２の端部１ ４５を有するクロマトグラフィー媒体１４３と、第１の端部１４４と動作可能に 当接する伝導手段１４６と、クロマトグラフィー媒体１４３の第２の端部１４５ と動作可能に当接する吸収手段１４７を含む。クロマトグラフィー媒体１４３は 検出帯域１４８と制御帯域１４９とを含む。第２の対置可能な部材１４２は第１ のアプリケータ（サンプル適用パッド）１５０と第２のアプリケータ（デテクタ 適用パッド１５１）を含む。第１のアプリケータ１５０と第２のアプリケータ １５１は、第１の対置可能な部材１４１と第２の対置可能な部材１４２が対置さ れるまで動作可能に当接しない。第１の対置可能な部材１４１と第２の対置可能 な部材１４２が対置されると、第１のアプリケータ１５０が伝導手段１４６と当 接し第２のアプリケータ１５１は伝導手段１４６およびクロマトグラフィー媒体 １４３の第１の端部１４４の両方と当接する。重複は典型的に数ミリメートル、 すなわち液体の移し換えに十分な量である。これによって第１のアプリケータと 第２のアプリケータが伝導手段１４６で連結され、第１のアプリケータ１５０と 第２のアプリケータ１５１の内容がクロマトグラフィー媒体１４３に適用される 。第１の対置可能な部材１４１と第２の対置可能な部材１４２はヒンジ１５２で 連結する。第２の対置可能な部材１４２はクロマトグラフィー媒体１４３の観察 ができるようにするための窓１５３を含む。第１と第２の対置可能な部材１４１ 、１４２はロック１５４、１５５などの係合手段とガスケット１５６も含む。 第１のアプリケータ１５０はサンプル適用パッドを含むことができ、また第２ のアプリケータ１５１は検出試薬を適用できるデテクタ適用パッドを含むことが できる。第１と第２の対置可能な部材１４１、１４２を対置すると、サンプル適 用パッドとデテクタ適用パッドの内容が伝導手段１４６を介してクロマトグラフ ィー媒体に適用される。 望ましくは、第２のアプリケータ１５１（デテクタ適用パッド）は第２のアプ リケータ１５１へ水性液体を添加して溶解可能な形状にある検出可能なラベルで 標識した分析物のための特異的結合パートナーを含む。水性液体は典型的にサン プルそれ自体で、第１と第２の対置可能な部材１４１、１４２が対置されたとき に標識した特異的結合パートナーを溶解する。ある種の検定において、別々の再 構成水性液体をデテクタ適用パッドに添加するのが望ましいことがある。これ以 外では、標識した特異的結合パートナーは第２のアプリケータ１５１に液状で適 用することができる。 ｇ．第２の対置可能な部材上に２つのアプリケータと吸収手段とを有する 装置。 この実施例の別の変化において、吸収手段は第１の対置可能な部材から（すな わち、クロマトグラフィー媒体を含む対置可能な部材から）第２の対置可能な部 材（すなわち、第１と第２のアプリケータを含む対置可能な部材へ）置き換える ことができる。これにより大量のサンプルが使用でき、低濃度で存在する分析物 の検出のために望ましい。 この変化を図８に図示する。クロマトグラフィー検定装置１６０は第１の対置 可能な部材１６２と第２の対置可能な部材１６４を含む。第１の対置可能な部材 １６２は第１の端部１６８と第２の端部１７０を有するクロマトグラフィー媒体 １６６と、クロマトグラフィー媒体１６６の第１の端部１６８と動作可能に当接 する伝導手段１７２を含む。クロマトグラフィー媒体１６６は検出帯域１７４と 制御帯域１７６を含む。第２の対置可能な部材１６４は第１のアプリケータ（サ ンプル適用パッド）１７８と第２のアプリケータ（デテクタ適用パッド）１８０ を含む。第１のアプリケータ１７８と第２のアプリケータ１８０は、第１の対置 可能な部材１６２と第２の対置可能な部材１６４が対置され、図７に図示した検 定装置について前述したように連結されるまで動作可能に当接しない。第２の対 置可能な部材１６４は第１のアプリケータ１７８と第２のアプリケータ１８０か ら離してある吸収手段１８２も含む。第１の対置可能な部材１６２と第２の対置 可能な部材１６４が当接すると、第１のアプリケータ１７８と第２のアプリケー タは伝導手段１７２によって連結され、第１のアプリケータ１７８の内容と第２ のアプリケータ１８０の内容がクロマトグラフィー媒体１６６に適用される。同 時に、吸収手段１８２はクロマトグラフィー媒体１６６の第２の端部１７０と動 作可能に当接してクロマトグラフィー媒体１６６から液体を吸い取る。第１の対 置可能な部材１６２と第２の対置可能な部材１６４はヒンジ１８４で連結される 。第２の対置可能な部材１６４はクロマトグラフィー媒体１６６の観察ができる ようにするための窓１８６を含む。第１と第２の対置可能な部材１６２、１６４ はロック１８５、１８７などの係合手段とガスケット１８８も含む。 ｈ．伝導手段とクロマトグラフィー媒体の間にギャップまたは不連続を有 する装置。 本装置の更なる変化は伝導手段とクロマトグラフィー媒体の間にギャップまた は不連続を含み、液体の流れる経路が第１のアプリケータから伝導手段を通りさ らに第２のアプリケータを通って最終的にクロマトグラフィー媒体を通過するよ うに成してある。 本装置のこの変化を図９に図示する。クロマトグラフィー検定装置１９０は第 １の対置可能な部材１９１と第２の対置可能な部材１９２を有する。第１の対置 可能な部材１９１は第１の端部１９４と第２の端部１９５を有するクロマトグラ フィー媒体１９３と、装置１９０が開放位置にあるとき、クロマトグラフィー媒 体１９３の第１の端部１９４と動作可能に当接しない伝導手段１９６と、クロマ トグラフィー媒体１９３の第２の端部１９５と動作可能に当接する吸収手段１９ ７を含む。クロマトグラフィー媒体１９３は検出帯域１９８と制御帯域１９９を 含む。第２の対置可能な部材１９２は第１のアプリケータ（サンプル適用パッド ）２００と第２のアプリケータ（デテクタ適用パッド）２０１を含む。第１のア プリケータ２００と第２のアプリケータ２０１は、第１の対置可能な部材１９１ と第２の対置可能な部材１９２が対置されるまで動作可能に当接しない。第１の 対置可能な部材１９１と第２の対置可能な部材１９２が対置されると、第１の対 置可能な部材１９１と第２の対置可能な部材１９２を連結するヒンジ２０３が閉 じることによって、第１のアプリケータ２００と第２のアプリケータ２０１が伝 導手段１９６によって連結され、第２のアプリケータ２０１はクロマトグラフィ ー媒体１９３と当接する。すなわち、液体の流れる経路は第１のアプリケータ２ ００から伝導手段１９６を通り、ついで第２のアプリケータ２０１を通りクロマ トグラフィー媒体１９３に達する。第２の対置可能な部材１９２はクロマトグラ フィー媒体１９３の観察ができるようにするための窓２０２を含む。第１と第２ の対置可能な部材１９１、１９２は前述のようにロック２０４、２０５などの係 合手段とガスケット２０６も含む。 ｉ．同一の対置可能な部材上にクロマトグラフィー媒体として標識した特 異的結合パートナーのためのパッドを有する装置。 本発明によるクロマトグラフィー検定装置のさらに別の実施例は、クロマトグ ラフィー媒体と同一の対置可能な部材上に標識した特異的結合パートナーのため のパッドを含む２部材装置である。本装置において、サンプルアプリケータは他 方の対置可能な部材上に配置する。 本発明によるクロマトグラフィー検定装置のこの実施例を図１０Ａに図示する 。クロマトグラフィー検定装置２１０は第１の対置可能な部材２１２と第２の対 置可能な部材２１４を有する。第１の対置可能な部材２１２は第１の端部２１８ と第２の端部２２０を有するクロマトグラフィー媒体２１６を含む。クロマトグ ラフィー媒体は、サンドイッチ法イムノアッセイに好適な他の検定装置の変化で 前述したように、検出帯域２２２と、任意で制御帯域２２４を有する。第１の対 置可能な部材２１２はクロマトグラフィー媒体２１６の第１の端部２１８と動作 可能に当接する伝導手段２２６と、クロマトグラフィー媒体２１６の第２の端部 と動作可能に当接する吸収手段２２８も有する。第１の対置可能な部材２１２は 伝導手段２２６と直接的に当接しクロマトグラフィー媒体２１６の第１の端部２ １８と間接的に当接するように配置してあるデテクタ適用パッド２３０も有する 。第２の対置可能な部材２１４はサンプル適用パッド２３２を有する。第１の対 置可能な部材２１２と第２の対置可能な部材２１４はヒンジ２３４で連結される 。第１の対置可能な部材２１２と第２の対置可能な部材２１４が対置されると、 サンプル適用パッド２３２がデテクタ適用パッド２３０と当接する。第２の対置 可能な部材２１４はクロマトグラフィー媒体２１６の観察ができるようにするた めの窓２３６を含む。第１と第２の対置可能な部材２１２、２１４は、前述した ように、ロック２３３、２３５などの係合手段とガスケット２３７を有する。 装置２１０の裏面断面図を図１０Ｂに図示する。図１０Ｂに図示した断面は図 １０Ａの図面において線１０Ｂに沿ってクロマトグラフィー媒体２１６とヒンジ ２３４の間でヒンジ２３４に対向する辺に向かって見たものである。図１０Ｂは 第１の対置可能な部材２１２と第２の対置可能な部材２１４を対置して図示して ある。サンプル適用パッド２３２はデテクタ適用パッド２３０と当接するように 図示してある。デテクタ適用パッド２３０は伝導手段２２６と当接し、伝導手段 はさらにクロマトグラフィー媒体２１６の第１の端部２１８と当接する。クロマ トグラフィー媒体２１６の検出帯域２２２と制御帯域２２４は図示されている。 制御帯域２２４に近いクロマトグラフィー媒体２１６の第２の端部２２０は吸収 手段２２８と当接する。 第１と第２の対置可能な部材２１２、２１４を対置させることでサンプル適用 パッド２３２がテストしようとするサンプルをデテクタ適用パッド２３０さらに はクロマトグラフィー媒体２１６の第１の端部２１８へ伝導手段２２６を介して 適用する。 望ましくは、デテクタ適用パッド２３０はデテクタ適用パッド２３０へ水性液 体を追加することで溶解可能な形状の分析物の第１の特異的結合パートナーと、 検出可能なラベルで標識した第１の特異的結合パートナーを含む。 望ましくは、サンプルが適用された後のサンプル適用パッド２３２の内容は、 水性液体を含み、デテクタ適用パッド２３０へ適用された水性液体はサンプル適 用パッドの内容を含む。この構成において、ラベルした特異的結合パートナーを 溶解するのに余分な液体は必要とされない。 本装置の変化において、吸収手段は第１の対置可能な部材に配置するのではな く第２の対置可能な部材上に配置する。吸収手段はこれも第２の対置可能な部材 上に配置してあるサンプル適用パッドから隔てられており、図５に図示したよう に第１の対置可能な部材と第２の対置可能な部材が対置されたとき、クロマトグ ラフィー媒体の第２の端部と動作可能に当接するように配置してある。 ｊ．クロマトグラフィー媒体の第１の端部と直接当接するデテクタ適用パ ッドを有する装置。 本装置のさらなる変化はデテクタ適用パッドとクロマトグラフィー媒体の間の 伝導手段を排除し、デテクタ適用パッドがクロマトグラフィー媒体の第１の端部 に直接当接するように成す。この変化において、第１と第２の対置可能な部材を 当接させたとき、デテクタ適用パッドとサンプル適用パッドはクロマトグラ フィー媒体の第１の端部に直接的に隣接するデテクタ適用パッドの領域以外で当 接する。デテクタ適用パッドの粗の領域にはわずかなギャップまたはオフセット が存在し、サンプルはサンプル適用パッドからクロマトグラフィー媒体へ直接流 れることは出来ない。このギャップまたはオフセットは典型的には約０．５ミリ メートルから約２ミリメートルで、より典型的には約０．５ミリメートルから約 １ミリメートルである。 この変化は標識した抗ヘモグロビン抗体の使用により便潜血を検出するのに特 に好適で、便１００グラムあたり多くとも１０ミリリットルの血液に相当するヘ モグロビン濃度（便１グラムあたり１３ｍｇのヘモグロビン）を検出でき、高濃 度の「フック」作用による偽陰性は見られない。 この変化を図１１Ａに図示してある。クロマトグラフィー検定装置２５０は第 １の対置可能な部材２５２と第２の対置可能な部材２５４を有する。第１の対置 可能な部材２５２は第１の端部２５８と第２の端部２６０を有するクロマトグラ フィー媒体２５６は検出帯域２６２と制御帯域２６４を有する。第１の対置可能 な部材２５２はクロマトグラフィー媒体２５６の第２の端部２６０と動作可能に 当接する吸収手段２６６も有する。第１の対置可能な部材２５２はクロマトグラ フィー媒体２５６の第１の端部と直接的に当接するデテクタ適用パッド２６８も 有する。第２の対置可能な部材２５４はサンプル適用パッド２７０を有する。第 １の対置可能な部材２５２と第２の対置可能な部材２５４はヒンジ２７２で連結 される。第１の対置可能な部材２５２と第２の対置可能な部材２５４が対置され ると、サンプル適用パッド２７０はクロマトグラフィー媒体２５６の第１の端部 ２５８と当接するデテクタ適用パッド２６８の端部にある狭いギャップまたはオ フセット２７４を除き、デテクタ適用パッド２６８と当接する。このギャップ２ ７４はサンプル適用パッド２７０にて起用されたサンプルが直接クロマトグラフ ィー媒体２５６へ流れないようにするためのものである。第２の対置可能な部材 ２５４はクロマトグラフィー媒体２５６の観察を行えるようにするための窓２７ ６を有する。第１と第２の対置可能な部材２５２、２５４はロック２７８、２８ ０などの係合手段と前述のようなガスケット２８２を有する。 図１１Ａの線１１Ａに沿って見た装置２５０の裏面断面図を図１１Ｂに図示す る。図１１Ｂに図示した断面は図１１Ａの断面においてクロマトグラフィー媒体 ２５６とヒンジ２７２の間からヒンジ２７２に対向する端部に向かって見た断面 である。図１１Ｂは第１の対置可能な部材２５２と第２の対置可能な部材２５４ を対置させて図示してあり、ヒンジは閉じた位置にある。サンプル適用パッド２ ７０は、クロマトグラフィー媒体２５６に最も近いデテクタ適用パッド２６８の 端部にある狭いギャップ２７４を除いて、デテクタ適用パッド２６８と当接して 図示してある。デテクタ適用パッド２６８はクロマトグラフィー媒体２５６の第 １の端部２５８と直接当接する。クロマトグラフィー媒体２５６の検出帯域２６ ２と制御帯域２６４は図示してある。制御帯域２６４に近いクロマトグラフィー 媒体２５６の第２の端部２６０は吸収手段２６６と当接する。 ｋ．第２のアプリケータと吸収手段を第２の対置可能な部材上に含む２方 向装置。 このクロマトグラフィー検定装置の実施例は図１２Ａに図示してある。検定装 置３００は第１の対置可能な部材３０２と第２の対置可能な部材３０４を有する 。第１の対置可能な部材３０２は第１の端部３０８と第２の端部３１０を有する クロマトグラフィー媒体３０６を有する。第１の対置可能な部材３０２はクロマ トグラフィー媒体３０６の第１の端部と動作可能に当接する第１のアプリケータ ３１２も有する。クロマトグラフィー媒体３０６は検出帯域３１４と、任意で、 検出帯域３１４とクロマトグラフィー媒体３０６の第２の端部３１０の間に配置 した制御帯域３１６も有する。検出帯域３１４と制御帯域３１６はサンドイッチ 法イムノアッセイに好適な検定装置の他の実施例において前述したように構成す る。第２の対置可能な部材３０４は吸収手段３１８と第２のアプリケータを含み 、吸収手段は吸収パッドとすることができる。第１と第２の対置可能な部材３０ ２、３１４はヒンジ３２２で連結される。第２の対置可能な部材３０４はクロマ トグラフィー媒体３０６の観察を行えるようにするための窓３２４を含む。第１ と第２の対置可能な部材３０２、３０４は前述したように係合手段３２３、３２ ５とガスケット３２６を含む。 ヒンジ３２２を閉じると、装置３００は図１２Ｂの上面図で図示したように見 える。検出帯域３１４と、存在する場合には制御帯域３１６を含むクロマトグラ フィー媒体３０６は窓３２４を通して観察可能である。 本装置のこの実施例において、第１のアプリケータ３１２へ第１の液体を添加 することでクロマトグラフィー媒体３０６の第１の端部３０８へ第１の液体を提 供する。第１と第２の対置可能な部材３０２、３０４を対置することにより第２ のアプリケータ３２０がクロマトグラフィー媒体３０６の第２の端部３１０と動 作可能に当接し、クロマトグラフィー媒体３０６の第２の端部へ第２の液体を適 用できるようになり、また吸収手段が第１のアプリケータ３１２と動作可能に当 接して、第１のアプリケータ３１２を通してクロマトグラフィー媒体３０６から 液体を吸い取り、流れを反転させられるようになる。本装置の動作において、サ ンプルは第１のアプリケータ３１２へ適用し標識特異的結合パートナーの溶液を 第２のアプリケータ３２０へ適用する。サンプルは第１の端部３０８から第２の 端部３１０へ向かってクロマトグラフィー媒体３０６を移動し、サンプル内に存 在する全ての分析物が検出帯域３１４において不動化した抗体と結合する。第１ と第２の対置可能な部材３０２、３０４を当接させると、標識した特異的結合パ ートナーがクロマトグラフィー媒体３０６に適用されてクロマトグラフィー媒体 ３０６を第２の端部３１０から第１の端部３０８へ向かって移動する。標識した 特異的結合パートナーは検出帯域３１４において不動化した抗体に結合した全て の分析物と結合することになり、検出可能な三つ組複合体を生成する。標識した 特異的結合パートナーは制御帯域３１６において不動化した分析物またはその類 似物にも結合し、正しく検定が行われたことの指標を提供する。 １．２つのアプリケータと伝導手段とを含む２方向装置。 本発明によるクロマトグラフィー検定装置の別の実施例は、流れを逆転させる ための吸収手段とクロマトグラフィー媒体と動作可能に当接する試薬パッドを含 む２方向クロマトグラフイーに好適な装置である。 クロマトグラフィー検定装置のこの実施例を図１３Ａに図示する。検定装置３ ４０は第１の対置可能な部材３４２と第２の対置可能な部材３４４を有する。第 １の対置可能な部材３４２は第１の端部３４８と第２の端部３５０を有するクロ マトグラフィー媒体３４６を有する。第１のアプリケータ３５２はクロマトグラ フィー媒体３４６の第１の端部３４８に隣接してこれと動作的に当接する。伝導 手段３５４はクロマトグラフィー媒体３４６の第２の端部に隣接しこれと動作可 能に当接する。クロマトグラフィー媒体３４６は検出帯域３５６と、任意で制御 帯域３５８を含む。第２の対置可能な部材３４４は吸収手段３６０と第２のアプ リケータ３６２を含む。第１と第２の対置可能な部材３４２、３４４はヒンジ３ ６４で連結される。第２の対置可能な部材３４４はクロマトグラフィー媒体３４ ６を観察できるようにするための窓３６６を含む。第１と第２の対置可能な部材 ３４２、３４４は係合手段３６５、３６７と前述したようなガスケット３６８を 含む。 第１と第２の対置可能な部材３４２、３４４を当接させると、吸収手段３６０ は第１のアプリケータ３５２と当接し、第２のアプリケータ３６２は伝導手段と 動作可能に当接し、これによって流れを反転させる。検出帯域３５６と存在する 場合には制御帯域３５８を含むクロマトグラフィー媒体３６４の一部は、第１と 第２の対置可能な部材３４２、３４４を対置させたときに窓３６６を通して観察 することができる。 図１３Ｂは第１と第２の対置可能な部材３４２、３４４を対置して配置したと きの装置３４０の上面図を示す。検出帯域３５６と制御帯域３５８は第２の対置 可能な部材３４４の窓３６６を通して観察可能である。 本装置において、第１のアプリケータ３５２は、テストしようとするサンプル を適用するサンプル適用パッドを含むことができ、また第２のアプリケータ３６ ２はバッファを添加するバッファ適用パッドを含むことができる。第１のアプリ ケータ３５２（サンプル適用パッド）は、前述したように、クロマトグラフィー 媒体へ適用する前にサンプルを処理する少なくとも一つの試薬を含むことができ る。第２のアプリケータ３６２（バッファ適用パッド）は典型的には前述したよ うに水性液体の添加により溶解可能な形状を成す分析物のための特異的結合パー トナーを含む。 第１のアプリケータ（サンプル適用パッド）は、さらに不活性の染料を含み、 クロマトグラフィー媒体３４６を通るサンプルの流れを視覚的にモニターできる ようにするのが望ましい。望ましくは、不活性染料は検出可能なラベルの色と対 照的な色である。例えば、検出可能なラベルがピンクのコロイド金だとすると、 不活性染料は青色であり得る。サンプルの移動は不活性染料を観察することでモ ニターする。サンプルが十分な距離、例えばクロマトグラフィー媒体３４６の３ 分の２または４分の３移動した後、第１と第２の対置可能な部材３４２、３４４ を当接させて、吸収手段３６０を第１のアプリケータ３５２と当接させる。これ はクロマトグラフィー媒体３４６を通るサンプルの流れを逆転させ、検出帯域３ ５６にさらに分析物を取り込むことができる。また第２のアプリケータ３６２を 伝導手段３５４と当接させるので、分析物に対する標識特異的結合パートナーを 溶解して含むバッファ溶液をクロマトグラフィー媒体３４６に適用することにな る。バッファ溶液は第２の端部３５０から第１の端部３４８に向かってクロマト グラフィー媒体３４６を移動する。これが検出帯域３５６に達すると、分析物に 対して標識した特異的結合パートナーが検出帯域３５６に既に結合している分析 物と結合する。分析物の検出および／または同定は前述したように行う。 第１と第２の対置可能な部材３４２、３４４は、サンプルを第１の液体として 第１のアプリケータ３５２に適用するときには当接していないので、第１のアプ リケータ３５２に第１にサンプルを適用するか、またはバッファを第２のアプリ ケータ３６２に第１に適用するかのいずれかでラベルした特異的結合パートナー を再較正させることが可能である。 ２方向装置の変化は、第１の対置可能な部材３４２上の伝導手段３５４を有限 容量の第１の吸収手段３５４ａに置き換えたものである。第２の対置可能な部材 ３４４上の吸収手段３６０は第２の吸収手段となる。第１の対置可能な部材３４ ２上の有限容量の吸収手段３５４ａは、溶解可能なラベルした特異的結合パート ナーを含む第２のアプリケータ３６２をこれと動作可能に当接して配置して、第 ２の吸収手段３６０を第１のアプリケータ３５２と動作可能に当接して配置した ときに、これを通って液体が逆流できる特性を有する。 ｍ．第１の部材上にデテクタ適用パッドを有する装置。 本発明による２部材クロマトグラフィー検定装置の別の実施例は、デテクタ適 用パッドを第１の対置可能な部材に配置しサンプル調製帯域を第２の対置可能な 部材に配置する。本装置において、デテクタ適用パッドはクロマトグラフィー媒 体の第１の端部と動作可能に当接するように配置する。デテクタ適用パッドはデ テクタ適用パッドへ水性液体を添加することにより溶解可能な形状で分析物に対 する標識した特異的結合パートナーを含むのが望ましい。本装置はさらに、デテ クタ適用パッドと動作可能に当接しクロマトグラフィー媒体の第１の端部と間接 的に当接する伝導手段、ならびにクロマトグラフィー媒体の第２の端部と動作可 能に当接する吸収手段を含む。 本装置のこの実施例の動作において、サンプルは第２の対置可能な部材上のサ ンプル調製帯域に適用し、その後第１と第２の対置可能な部材を対置する。これ によりサンプル調製帯域の内容を伝導手段に適用し、さらにデテクタ適用パッド を介してクロマトグラフィー媒体の第１の端部に適用する。サンプルがデテクタ 適用パッドに達すると、デテクタ適用パッドの内容が溶解する。デテクタ適用パ ッドの内容が分析物に対する特異的結合パートナーを含む場合、デテクタ適用パ ッドを経由したサンプルの通過で特異的結合パートナーがサンプル内に存在する あらゆる分析物と結合する。 本装置のこの実施例を図１４に図示する。検定装置３８０は第１の対置可能な 部材３８２と第２の対置可能な部材３８４を有する。第１の対置可能な部材３８ ２は第１の端部３８８と第２の端部３９０を有するクロマトグラフィー媒体３８ ６を含む。第１の対置可能な部材３８２はクロマトグラフィー媒体３８６の第１ の端部と動作可能に当接するデテクタ適用パッド３９２と、デテクタ適用パッド ３９２と動作可能に当接しクロマトグラフィー媒体３８６の第１の端部３８８と 間接的に当接する伝導手段３９４と、クロマトグラフィー媒体３８６の第２の端 部３９０と動作可能に当接する吸収手段３９６を含む。クロマトグラフィー媒体 ３８６は検出帯域３９８と制御帯域４００を含む。第２の対置可能な部材３８４ はサンプル調製帯域４０２を含む。第１と第２の対置可能な部材３８２、３８４ はヒンジ４０４で連結される。第２の対置可能な部材３８４はクロマトグラフィ ー媒体３８６の少なくとも一部を観察できるようにするための開口部４０６を有 する。第１と第２の対置可能な部材は前述のような係合手段４０５、４０７とガ スケット４０８を含む。 本実施例の変化は第２の対置可能な部材３８４上ならびに第１の対置可能な部 材３８２上で溶解可能な形状で分析物のための特異的結合パートナーを含む。溶 解可能な特異的結合パートナーを第２の対置可能な部材３８４上に配置した場合 、サンプル調製帯域４０２に直接配置しないのが望ましい。むしろ部分４０３に おいてサンプル調製帯域４０２を包囲してサンプルが第１にサンプル調製帯域４ ０２を通過し、その後にサンプル調製帯域４０２を包囲する部分４０３に移動し 、特異的結合パートナーを溶解させるのが好適である。例えば、サンプル調製帯 域４０２は第２の対置可能な部材３８４の表面上に載せ接着剤または締結具で接 着してある適切に処理した漉紙片を含むことができる。これによりサンプルの処 理例えばｐＨの調整、無傷の細胞の溶解、および／または粒子除去を溶解可能な 特異的結合パートナーにサンプルが接触する前に行うことができる。この実施例 のこの変化はさらに広いダイナミックレンジを提供でき、利用できる抗体が低い アフィニティを有する場合または低濃度の分析物を検出しなければならない場合 に有用である。 ｎ．洗浄を提供するための２部材アプリケータを有する装置。 本発明による２部分検定装置の別の実施例はサンプルと標識した特異的結合パ ートナーの混合物がクロマトグラフィー媒体を通過した後で標識した特異的結合 パートナーと未反応のサンプルの洗浄を提供するための２分割アプリケータを有 する。この実施例は清明なバックグラウンドを提供し弱い陽性の結果を簡単に読 み取れる利点を有する。 本実施例において、第１の対置可能な部材は第１と第２の端部を有するクロマ トグラフィー媒体と、クロマトグラフィー媒体の第１の端部と動作可能に当接す る伝導手段と、クロマトグラフィー媒体の第２の端部と動作可能に当接する吸収 手段とを含む。第２の対置可能な部材は２つの部分に分割したアプリケータを含 み、第１の部分は溶解可能な形状で分析物のための標識した特異的結合パートナ ーを含み、第２の部分は標識した特異的結合パートナーを含まない。第１と第２ の対置可能な部材を伝導手段と直接当接するアプリケータの第１の部分と当接さ せ第２の部分と当接させないことで、アプリケータの第１の部分の内容を伝導手 段にさらにはクロマトグラフィー媒体の第１の端部に適用できる。第２の部分は 、第２の部分の内容が第１の部分を通りさらに伝導手段を通って流れるので、伝 導手段と間接的に当接するように配置してある。つまりアプリケータの第１の部 分の内容を伝導手段に適用した後で、第２の部分の内容を伝導手段に適用する。 第２の部分の内容は、サンプルを含むが標識した特異的結合パートナーを含まな いので、クロマトグラフィー媒体から結合していない特異的結合パートナーを洗 い流すために供用し、これによってクロマトグラフィー媒体に見える視認可能な ラベルのバックグラウンドを減少させ、検定装置の読み取りを改善する。これは 弱い陽性の検定において特に有用である。 検定装置のこの実施例を図１５に図示してある。検定装置４２０は第１の対置 可能な部材４２２と第２の対置可能な部材４２４を有する。第１の対置可能な部 材４２２は第１の端部４２８と第２の端部４３０を有するクロマトグラフィー媒 体４２６と、クロマトグラフィー媒体４２６の第１の端部と動作可能に当接する 伝導手段４３２と、クロマトグラフィー媒体４２６の第２の端部４３０と動作可 能に当接する吸収手段４３４を含む。第２の対置可能な部材４２４は２つの部分 に分割したアプリケータ４３６を有し、第１の部分は第１と第２の対置可能な部 材４２２、４２４を対置したときに伝導手段４３２と直接当接し、第２の部分４ ４０は第１と第２の対置可能な部材４２２、４２４を対置したときに伝導手段４ ３２と間接的に当接する。クロマトグラフィー媒体４２６は検出帯域４４２と制 御帯域４４４を有する。第１と第２の対置可能な部材４２２、４２４はヒンジ４ ４６で連結される。第２の対置可能な部材４２４はクロマトグラフィー媒体４２ ６の少なくとも一部を観察できるようにするための窓４４８を有する。第１と第 ２の対置可能な部材４２２、４２４は前述したように係合手段４２３、４２５と ガスケット４２７も含む。 Ｂ．カバー付き２部材装置 本発明によるクロマトグラフィー検定装置の別の実施例はカバー付き２部材装 置である。 検定装置のこの実施例を図１６Ａに図示する。検定装置４６０は第１の対置可 能な部材４６２と、第２の対置可能な部材４６４と、カバー４６６を有する。第 ２の対置可能な部材４６４は第１のヒンジ４６８で第１の対置可能な部材４６２ の一方の側面に開閉式に取り付ける。カバー４６６は第２のヒンジ４７０で第１ の対置可能な部材４６２の対向する側面に開閉式に取り付ける。第１の対置可能 な部材４６２は第１の端部４７４と第２の端部４７６を有するクロマトグラフィ ー媒体４７２を有する。門部４８０に取り付けた第１のアプリケータまたはサン プルパッドはクロマトグラフィー媒体４７２の第１の端部４７４に隣接しこれと 動作可能に当接する。第１のアプリケータ４７８は、前述したように、クロマト グラフィー媒体へ適用する前にサンプルを処理するための少なくとも一つの試薬 を含むことのできるサンプル調製帯域を含むことができる。第１のアプリケータ ４７８は前述したようにクロマトグラフィーの進行状況を示すための不活性染料 も含むことができる。第１の吸収手段４８２はクロマトグラフィー媒体４７２の 第２の端部４７６に隣接しこれと動作可能に当接する。クロマトグラフィー媒体 ４７２は検出帯域４８４と制御帯域４８６を含み、限界線４８８で任意にマーク する。限界線４８８は第１の対置可能な部材４６２上でも同様に任意でマークす ることができる。第２の対置可能な部材４６４は、典型的には分析物のための標 識した特異的結合パートナーを含む第２のアプリケータ４９０と第２の吸収手段 ４９２を含む。カバー４６６は第１の開口部４９４を含む。望ましくは、第２の 対置可能な部材４６２は第２の開口部４９６を含む。本装置において、第２の対 置可能な部材４６４とカバー４６６は係合手段４９１、４９３も含む。本装置４ ６０は前述したようにガスケット４９５で包囲する。カバー４６６は係合手段４ ９７も含みこれを所定位置に保持することができる。 図１６Ｂは、第２の対置可能な部材４６４を第１の対置可能な部材４６２の上 に折り曲げてカバー４６６を第２の対置可能な部材４６４の上に折り曲げた本装 置４６０の上面図を示す。クロマトグラフィー媒体４７２の一部は、検出帯域４ ８４と制御帯域４８６を含め、カバー４６６の第１の開口部４９４を通してまた 第２の対置可能な部材４６４の第２の開口部４９６を通して視認できる。 本装置の動作において、第１のアプリケータ４７８へ第１の液体を添加するこ とで第１の液体がクロマトグラフィー媒体４７２の第１の端部４７４へ適用され る。典型的には、第１の液体は分析物を含み得るサンプルである。 本装置において、第１の対置可能な部材４６２における門部４８０の機能は、 第２の吸収手段４９２をクロマトグラフィー媒体４７２と少なくとも部分的に直 接当接する位置に配置して過剰なサンプルを除去し、同時に第１のアプリケータ がこの当接を阻害しないように吸収手段を配置することである。 使用において、サンプルは第１のアプリケータ４７８に添加してクロマトグラ フィーが第１の端部４７４から第２の端部４７６に向かってクロマトグラフィー 媒体４７２において進むようになす。染料が限界線４８８に達したら、第１と第 ２の対置可能な部材４６２、４６４を対置させ、第２のアプリケータ４９０を第 １の吸収手段４８２と動作可能に当接させて第２の液体をクロマトグラフィー媒 体４７２の第２の端部４７６に適用するように成し、また第２の吸収手段４９２ を第１のアプリケータ４７８と当接させて第１のアプリケータ４７８を介してク ロマトグラフィー媒体４７２から液体を吸い取るように成す。これでクロマトグ ラフィーの流れを反転させ、第２の端部４７６から第１の端部４７４に向かって クロマトグラフィー媒体４７２を通る標識した特異的結合パートナーを引き戻す 。したがって本装置は２方向クロマトグラフィーに有用である。 カバー４６６は第２の対置可能な部材４６４の上に折り曲げて第１の対置可能 な部材４６２に対して第２の対置可能な部材４６４をさらに確実に固定し保持す ることができる。これによって使用後に、医学的記録として本装置をいっそう便 利に保管できる。 Ｃ．３部材装置 本発明によるクロマトグラフィー検定装置の別の実施例は、２方向クロマトグ ラフィーを使用する３部材検定装置である。 ３部材検定装置の本実施例を図１７Ａに図示する。検定装置５２０は第１の対 置可能な部材５２２、第２の対置可能な部材５２４、第３の対置可能な部材５２ ６を有する。第２の対置可能な部材５２４は第１のヒンジ５２８で第１の対置可 能な部材５２２の一方の側面に開閉式に取り付け、第３の対置可能な部材５２６ は第２のヒンジ５３０で第１の対置可能な部材５２２の対向する側面に開閉式に 取り付ける。第１の対置可能な部材５２２は第１の端部５３４と第２の端部５３ ６を有するクロマトグラフィー媒体５３２を有する。クロマトグラフィー媒体５ ３２は検出帯域５３８と制御帯域５４０を有する。第１の伝導手段５４２はクロ マトグラフィー媒体５３２の第１の端部５３４と動作可能に当接し、第２の伝導 手段５４４はクロマトグラフィー媒体５３２の第２の端部５３６と動作可能に当 接する。第２の対置可能な部材５２４は、第１の吸収手段５４６と、サンプルの 適用を意図した第１のアプリケータ５４８を含む。典型的には、第１のアプリケ ータ５４８は第１のアプリケータ５４８へ水性サンプルを適用することで溶解可 能な形状において分析物のための第１の特異的結合パートナーを含む。第１の開 口部５５０を第２の対置可能な部材５２４に開けてクロマトグラフィー媒体５３ ２の少なくとも一部を観察できるようにする。第１の開口部５５０は第１の吸収 手段５４６と第１のアプリケータ５４８の間に設ける。第３の対置可能な部材５ ２６は標識したに時特異的結合パートナーのための第２のアプリケータ５５２と 第２の吸収手段５５４を含む。第２の開口部５５６を第３の対置可能な部材５２ ６に開けてクロマトグラフィー媒体５３２の少なくとも一部を観察できるように する。第２の開口部５５６は第２のアプリケータ５５２と第２の吸収手段５５４ の間に設ける。本装置５２０を閉じたとき、第２の対置可能な部材５２４が第１ の対置可能な部材５２２の上に折り畳まれ、第３の対置可能な部材５２６が第１ の対置可能な部材５２２の上に折り畳まれるので、クロマトグラフィー媒体５３ ２の少なくとも一部が第１の開口部５５０と第２の開口部５５６を通して視認で きる（図１７Ｂ参照）。第２と第３の対置可能な部材５２４、５２６は部材を相 互に保持するための係合手段５５１、５５５を含む。可撓性の縁またはガス ケット５５７は部材の縁を包囲して試薬またはサンプルを本装置５２０内に保持 する。後述するように他の３部材検定装置においても同様の係合手段と縁または ガスケットを使用する。 本装置において、第１と第２の対置可能な部材５２２、５２４を対置して第１ の吸収手段５４６を第２の伝導手段５４４と動作可能に当接させ、また第１のア プリケータ５４８を第１の伝導手段５４２と動作可能に当接させることで、液体 をクロマトグラフィー媒体５３２に適用し、第１のアプリケータ５４８に適用し た第１の液体が検出帯域５３８と制御帯域５４０を含むクロマトグラフィー媒体 ５３２の少なくとも一部を通って流れるようにする。 第１と第２の対置可能な部材５２２、５２４が対置から離れると、第１と第３ の対置可能な部材５２２、５２６が対置する。これによって第２の吸収部材５５ ４が第１の伝導手段５４２と動作可能に当接してクロマトグラフィー媒体５３２ から液体を吸い取り、また第２のアプリケータ５５２を第２の伝導手段５４４と 動作可能に当接させてクロマトグラフィー媒体５３２に液体を適用する。これに よって流れを反転させ、第２のアプリケータ５５２に適用した第２の液体が、第 １の液体がクロマトグラフィー媒体５３２を通って流れた方向とは対向する方向 に第１の液体が流れるクロマトグラフィー媒体の少なくとも一部を通って流れる ようにする。第１、第２、第３の対置可能な部材５２２、５２４、５２６は、第 ３の対置可能な部材５２６が第１の対置可能な部材５２２と対置したときに第２ の対置可能な部材５２４が第１と第３の対置可能な部材５２２、５２６の上に折 り畳まれてカバーを形成できるように構成する。 本装置を使用した血清学的検定の実施において、第２の吸収手段５５４と第１ の伝導手段５４２の間の確実な圧力は、標識した２次特異的結合パートナーの進 行面より先にクロマトグラフィー媒体５３２から非特異的免疫グロブリンが吸い 取られるように、または標識した特異的抗分析物の進行より先に結合していない 分析物を吸い取るようにするために重要である。抗免疫グロブリンラベルと非特 異的免疫グロブリンの混合が起こると、非特異的免疫グロブリンが抗免疫グロブ リンラベル（結合）を中和して特異的に取り込んだ免疫グロブリンの標識に利用 できるものが少なくなるかまたは全く無くなる。本装置の第３の対置可能な部材 ５２６はこの機能を高信頼性で作用するために一定の圧力がかかるように支援す る。これは本発明による検定装置の利点の一つである。 第１の特異的結合パートナーは検出可能なラベルで直接標識することができる 。これ以外にも、第１の特異的結合パートナーの間接ラベリングを用いることも できる。間接的ラベリングの場合、第１の特異的結合パートナーは標識しないが 、第２のアプリケータによって第１の特異的結合パートナーと特異的に結合する 標識した第２の特異的結合パートナーを適用することで検出する。間接ラベリン グは、困難を伴わずに市販の抗体を直接ラベルできないジアルジア属（Giardia ）またはその他の抗原の検出に特に有用である。第１の特異的結合パートナーを 直接標識しない場合、第２のアプリケータ５５２は第ＩＩＩ節で後述するように 第１の特異的結合パートナーのためのラベルを付けた２次特異的結合パートナー を含むのが望ましい。 ３部材装置の別の実施例は第３の部材上に吸収手段を用いクロマトグラフィー 媒体全体およびこれと動作可能に当接する部材から液体を除去するように配置す る。これはバックグラウンド色を生成する、すなわち感度を減少させる可能性の ある過剰なサンプルの除去を目的としている。 本実施例を図１８に示す。検定装置５６０は第１の対置可能な部材５６１、第 ２の対置可能な部材５６２、第３の対置可能な部材５６３を有する。第２の対置 可能な部材５６２は第１のヒンジ５６４で第１の対置可能な部材５６１の一方の 側面に開閉式に取り付けてある。第３の対置可能な部材５６３は第２のヒンジ５ ６５で第１の対置可能な部材５６１の他方の側面に開閉式に取り付けてある。第 １の対置可能な部材５６１は第１の端部５６７と第２の端部５６８を有するクロ マトグラフィー媒体５６６を有する。第１のアプリケータ５６９はクロマトグラ フィー媒体５６６の第１の端部５６７に隣接しこれと動作可能に当接する。伝導 手段５７０はクロマトグラフィー媒体５６６の第２の端部５６８に隣接しこれと 動作可能に当接する。クロマトグラフィー媒体は検出帯域５７１と、任意で制御 帯域５７２を含む。第２の対置可能な部材５６２は第１の吸収手段５７３と第２ のアプリケータ５７４を含み、第２のアプリケータは典型的には溶解可能な形状 で分析物へのラベルした特異的結合パートナーを含む。第３の対置可能な部材５ ６３は、第３の対置可能な部材５６３を第１の対置可能な部材５６１に対置した とき、クロマトグラフィー媒体５６６から液体を吸収するためにクロマトグラフ ィー媒体５６６の長さに沿って実質的に延在する第２の吸収手段５７５と、第１ のアプリケータ５６９と、伝導手段５７０を含む。第１の対置可能な部材５６１ は、第１の対置可能な部材５６１の裏面で、クロマトグラフィー媒体５６６の少 なくとも一部を観察するためクロマトグラフィー媒体５６６の後側に、開口部５ ７６を有する。第２と第３の対置可能な部材５６２、５６３は前述したような係 合手段５７７、５７９とガスケット５８０も含む。 使用において、検査しようとするサンプルを第１のアプリケータ５６９に適用 し、バッファ溶液を第２のアプリケータ５７４に適用する。サンプルはこの後検 出帯域５７１と制御帯域５７２を含むクロマトグラフィー媒体５６６を通って流 れることができる。第１と第２の対置可能な部材５６１、５６２をこの後で対置 して、第２のアプリケータ５７４が第１のアプリケータ５６９と当接し、第１の 吸収手段５７３がクロマトグラフィー媒体５６６の第２の端部５６８で伝導手段 ５７０と当接させる。これにより本来第２のアプリケータ５７４内の溶解した標 識特異的結合パートナーがクロマトグラフィー媒体を通って流れる。サンプルと 溶解した特異的結合パートナーとのクロマトグラフィー媒体５６６を通る流れが 完了した後、第３の対置可能な部材５６３を第１の対置可能な部材５６１に対置 させることで、第２の吸収手段５７５がクロマトグラフィー媒体５６６、第１の アプリケータ５６９、伝導手段５７０から液体を除去することができる。第２の 対置可能な部材５６２を第３の対置可能な部材５６３の上に折り曲げ、検出帯域 ５７１と制御帯域５７２を含むクロマトグラフィー媒体５６６はクロマトグラフ ィー媒体５６６の後ろに設けた開口部５７６を通して観察する。 Ｄ．多重装置 本発明によるクロマトグラフィー検定装置の別の実施例は多数の検定を同時に 実行可能な他重検定装置である。検定は同一の分析物または別の分析物に付いて 行うことができる。一般に、前述した装置の全ての形式は第１と第２の対置可能 な部材、さらに必要なら第３の対置可能な部材に多数のクロマトグラフィー媒体 、サンプル調製帯域、アプリケータ、伝導手段、吸収手段、およびその他の必要 な部材を設けることで多重使用に好適である。 １．基本多重装置 本発明による多重検定装置の一つの形式を図１９に図示する。検定装置５９０ は第１の対置可能な部材５９２と第２の対置可能な部材５９４を有する。第２の 対置可能な部材５９４は第１の対置可能な部材５９２にヒンジ５９６で蝶番式に 取り付けてある。第１の対置可能な部材５９２は複数のクロマトグラフィー媒体 ５９８を含む。クロマトグラフィー媒体５９８のそれぞれは第１の端部６００と 第２の端部６０２を有し、検出帯域６０４と制御帯域６０６を含む。それぞれの クロマトグラフィー媒体５９８の第２の端部６０２は吸収手段６０８と動作可能 に当接してクロマトグラフィー媒体５９８を通る流れを作る。それぞれのクロマ トグラフィー媒体５９８には独立した吸収手段６０８がある。第２の対置可能な 部材５９４は、それぞれのクロマトグラフィー媒体５９８に一つづつの複数のサ ンプル調製帯域６１０を含む。典型的には、それぞれのサンプル調製帯域６１０ は、サンプル調製帯域６１０に液状サンプルの添加により溶解可能な形状で、検 出しようとする分析物のための標識した特異的結合パートナーを含む。これ以外 に、液状の標識した特異的結合パートナーを、サンプルの追加の前または後にサ ンプル調製帯域６１０へ追加することもできる。第１と第２の対置可能な部材５ ９２、５９４を対置させることで、それぞれのサンプル調製帯域６１０から対応 するクロマトグラフィー媒体５９８の第１の端部６００へ適用する。第２の対置 可能な部材５９４はそれぞれのクロマトグラフィー媒体５９８に一つづつの複数 の開口部６１２を含む。第１の対置可能な部材５９２と第２の対置可能な部材５ ９４は前述のように係合手段６１４、６１６とガスケット６１８を含む。 多重検定装置は、本装置を使用しようとする検定により、２個から１２個また はそれ以上のサンプル調製帯域とクロマトグラフィー媒体を含む。典型的には、 本装置は２個から５個の独立したサンプル調製帯域とクロマトグラフィー媒体を 含む。 本装置のこの実施例は、異なる量の同一サンプルで多数の異なる分析物を検定 するために使用する、または多数の異なるサンプルで同一の分析物の検定に使用 することができる。後者の態様は、同一の患者から異なる時刻に採取したサンプ ルで目的とする分析物例えば便潜血などの検定を行わなければならないような条 件での検定に特に有用である。便潜血の存在は、１日１回、またはそれ以外の間 隔で処方された期間中に採取した一連の糞便検体を用いて調べることが多い。こ れ以外に、一つまたはそれ以上の検定をコントロールまたは参照基準として使用 することができる。 ２．折り畳み可能なウェルを有する多重装置 多重検定装置のさらに別の変化において、少なくとも一つのサンプル調製帯域 は抽出綿球またはその他のサンプルを含む器具を入れることのできる折り畳み式 のウェルを含めることがある。この変化において、第１の対置可能な部材はさら に第１の対置可能な部材と第２の対置可能な部材を対置させたときに第２の対置 可能な部材上に折り重なる蝶番式に折り曲げ可能な羽根を含むことができる。 多重検定装置のこの変化を図２０に図示してある。検定装置６２０は第１の対 置可能な部材６２２と第２の対置可能な部材６２４を有する。第２の対置可能な 部材６２４はヒンジ６２６で第１の対置可能な部材６２２に蝶番式に取り付ける 。第１の対置可能な部材６２２には２つの折り曲げ可能な羽根６２８、６３０が 蝶番式に取り付けてある。第１の対置可能な部材６２２は制御ウェル６３２と折 り畳み可能なすなわちスポンジ状の材料から作成したサンプルウェル６３４を有 する。第２の対置可能な部材６２４は、複数のクロマトグラフィー媒体６３６、 本実施例では２つを有し、それぞれが検出帯域６３８と制御帯域６４０を有する 。第２の対置可能な部材６３８は検出帯域６３８と制御帯域６４０を含むクロマ トグラフィー媒体６３６の少なくとも一部を観察するための開口部６４２を有す る。第１と第２の対置可能な部材６２２、６２４は係合手段６４１、６４３を含 む。第１の対置可能な部材６２２と第２の対置可能な部材６２４を対置した とき、制御ウェル６３２内と折り畳み式サンプルウェル６３４内のサンプルがク ロマトグラフィーのために対応するクロマトグラフィー媒体６３６へ適用される 。 ３．試験カードを受け入れるのに適した多重装置 多重検定装置のさらに別の変化は便潜血におけるヘモグロビンの検出に特に有 用である。本装置は、典型的には連続した数日にわたり採取した幾つかの乾燥し た便検体を含む検査カードを受け入れるのに適している。 本装置を図２１に図示してある。検定装置６６０は第１の対置可能な部材６６ ２、第１のヒンジ６６６で第１の対置可能な部材６６２に蝶番式に取り付けた第 ２の対置可能な部材６６４、第２のヒンジ６７０で第１の対置可能な部材６６２ に蝶番式に取り付けた第３の対置可能な部材６６８を含む。第１の対置可能な部 材６６２は複数の乾燥した検体６７４を載置した検査カードを受け入れるのに適 する。第２の対置可能な部材６６４は試薬パッド６７６を内部に含む。第３の対 置可能な部材６６８はそれぞれが検出帯域６８０と制御帯域６８２を有する前述 したような複数のクロマトグラフィー媒体６７８を有する。検査しようとするそ れぞれのサンプルに対して別個のクロマトグラフィー媒体６７８を用いる。第３ の対置可能な部材６６８は、それぞれが検出帯域６８０と制御帯域６８２を含む クロマトグラフィー媒体６７８の少なくとも一部を観察できるようにするための 開口部６８４を有する。第２と第３の対置可能な部材は係合手段６８１、６８５ を含み、本装置６６０には３部材検定装置に付いて前述したようなガスケット６ ８６を含む。 使用において、複数の乾燥検体６７４を含む検査カード６７２を第２の対置可 能な部材６６４に挿入する。第２の対置可能な部材６６４は試薬パッド６７６を 含む第１の対置可能な部材６６２の上に折り曲げて、試薬パッド６７６を検査カ ード６７２内の複数の乾燥検体６７４と接触させ乾燥検体６７４から分析物を抽 出させる。次に第２の対置可能な部材６６４を第１の対置可能な部材６６２から 開く。最後に第３の対置可能な部材６６８を第１の対置可能な部材６６２の上 に折り曲げて、試薬パッド６７６の内容と乾燥検体から抽出した分析物をクロマ トグラフィー媒体６７８に適用しクロマトグラフィーを行うことができる。 本装置において、試薬パッド６７６は試薬パッド６７６への水性試薬の添加に より溶解可能な形状で検出可能なラベルにより標識した分析物のための特異的結 合パートナーを含む。添加される試薬は検定しようとする分析物例えばヘモグロ ビン用の抽出試薬である。 第２の対置可能な部材６６４を第１の対置可能な部材６６２に対置したとき、 分析物が検査カード６７２上のサンプルから抽出されて標識した特異的結合パー トナーに結合する。第３の対置可能な部材６６８を次に第２の対置可能な部材に 対置させると、標識した特異的結合パートナーに結合した全ての分析物がクロマ トグラフィー媒体６７８を通って移動し、クロマトグラフィー媒体６７８のそれ ぞれに設けてある検出帯域６８０へ結合する。 本発明による多重検定装置のさらに別の変化は、図１９に図示してある装置と 類似しているが検査カードを受け入れるのに適した多重検定装置である。検査カ ードは、便潜血検査を実行する場合例えば乾燥した糞便サンプルなどの複数のサ ンプルを含むことができる。 この変化を図２２に図示してある。検定装置７００は第１の対置可能な部材７ ０２と第２の対置可能な部材７０４を有する。第２の対置可能な部材７０４はヒ ンジ７０６で第１の対置可能な部材７０２に蝶番式に取り付ける。第１の対置可 能な部材７０２は複数のクロマトグラフィー媒体７０８を含む。クロマトグラフ ィー媒体７０８のそれぞれは第１の端部７１０と第２の端部７１２を有し、検出 帯域７１８と制御帯域７２０を含む。それぞれのクロマトグラフィー媒体７０８ の第１の端部７１０は伝導手段７１４と動作可能に当接し、それぞれのクロマト グラフィー媒体７０８の第２の端部７１２は吸収手段７１６と動作可能に当接す る。それぞれのクロマトグラフィー媒体７０８には独立した伝導手段７１４と吸 収手段７１６がある。第１の対置可能な部材７０２は、それぞれの伝導手段と動 作可能に当接するように配置した複数の乾燥検体７２４を含む検査カード７２２ を受け入れるのに適する。第２の対置可能な部材７０４はそれぞれのクロマトグ ラフィー媒体７０８に一つづつ、複数のアプリケータ７２６を含む。望ましく は、それぞれのアプリケータ７２６は溶解可能な形状で分析物のための標識した 特異的結合パートナーを含む。 使用において、バッファまたはその他の水性液体をそれぞれのアプリケータ７ ２６に適用して標識した特異的結合パートナーを再構成する。第１と第２の対置 可能な部材７０２、７０４を対置させることでそれぞれのアプリケータ７２６を これに対応する乾燥検体７２４に適用し、それぞれの乾燥検体７２４とそれぞれ のアプリケータ７２６の内容がそれぞれの伝導手段７１４さらにはそれぞれのク ロマトグラフィー媒体７０８に適用されるようにする。検査カード７２２は所定 位置にそれぞれの検体７２４を保持し、これらにアプリケータ７２６の内容を受 け入れられるように、また検体７２４の分析物が抽出されて標識した特異的結合 パートナーと反応し、伝導手段７１４に適用されるようにする。第２の対置可能 な部材７０４はそれぞれのクロマトグラフィー媒体７０８に一つづつ、それぞれ のクロマトグラフィー媒体７０８を観察するための複数の開口部７２８を含む。 第１と第２の対置可能な部材７０２、７０４はそれぞれサンプルおよび試薬を保 持するための係合手段７２５、７２７とガスケット７３０を含む。 ＩＩ．競合法アッセイ用クロマトグラフィー検定装置 構造において上記で開示した検定装置と同様の検定装置を一価分析物の競合法 検定に使用することができる。一価分析物は典型的にハプテンだが、同じ原理を 一価である何らかの分析物、例えばさらなる抗体結合部位を阻害したまたは変更 した通常は多価の抗原についての検定に使用することができる。検定可能な分析 物には、次のようなものが含まれる：テオフィリン、ジゴキシン、ジソピラマイ ド、リドカイン、プロカインアミド、プロプラノロール、キニジン、アミカシン AMK、ペニシリンその他のβラクタム系抗生剤、クロラムフェニコールCP、ゲン タマイシンGM、カナマイシンKM、ネチルマイシン、トブラマイシンTOB、三環系 抗うつ剤、エトサクシミド、フェノバール、ジアセパム、フェニトイン、プリミ ドン、バルプロ酸、アセトアミノフェン、アセチルサリチル酸、イブプロフェン 、メトトレキセート。また乱用薬物例えば塩酸モルヒネ、コデイン、コカイン、 フェンタニル、３−メチルフェンタニル、アンフェタミン、リゼルグ酸ジエ チルアミド（LSD）、フェンシクリジン、ヘロインとこれらの代謝産物、ＤＮＰ 、１置換−４−ハイドロキシ−２−ニトロベンゼン、４置換−２−ニトロトリア ルキルアニリン塩。また環境汚染物質たとえばベンゼン、トルエン、キシレン、 エチルベンゼン、クロルダン、ＤＤＴとその代謝産物、２，４−Ｄ、２，４，５ −Ｔ、アトラジン。 これらの検定の実施に好適な特異的結合パートナーには、抗体および特異的結 合蛋白が含まれるが、これらに限らない。後者の一例は、バチルス・ステアロサ ーモフィルス（B.stearothermophilus）から分離したペニシリン結合蛋白（ＰＢ Ｐ）がある。 競合法イムノアッセイを実行するのに適した従来の検定装置とは異なり、本発 明による装置は、サンプル内の分析物の存在で陽性または検出可能な結果が、そ れぞれ装置の検出帯域の着色線として得られる利点を有している。典型的には、 競合法イムノアッセイにおいて、検出可能な信号の発生は陰性の結果（分析物が 存在していない）を表す。つまり、観察された結果と検出の間には反対の関連性 が存在する。本発明の装置は分析物濃度と検出可能な信号の間に直接の相関が得 られ、偽陰性の結果を得る可能性は少ない。これらの装置はダイナミックレンジ の拡張も有している。 Ａ．３部材２方向フロー装置 本発明による競合法検定のためのクロマトグラフィー検定装置の一つの実施例 は３部材２方向フロー装置である。 本装置は３つの対置可能な部材を有する。第１の対置可能な部材は第１の端部 と第２の端部を有するクロマトグラフィー媒体を含み、第１の方向における流れ は第１の端部から第２の端部へ向かい、第２の方向においては第２の端部から第 １の端部へ向かう。クロマトグラフィー媒体は、クロマトグラフィー媒体の面積 より実質的に小さい独立した部分に、分析物または免疫学的なこれの類似物を不 動化してある。 免疫学的類似物は、望ましくは、分析物に対する特異的結合能力を欠如したタ ンパクに共有結合した分析物、例えば正常ＩｇＧまたはその他の非免疫性ＩｇＧ である。このようなＩｇＧは注目する分析物で吸収して特異的結合能力を有する あらゆる免疫グロブリン分画、分析物に対する自然抗体または分析物と交叉反応 できるような抗体のいずれかを除去するのが望ましい。 非免疫ＩｇＧを含むタンパクとのハプテンの結合は従来技術で周知となってお り、例えば、Ｐ．ティセンの「酵素免疫法の理論と実際」、エルセヴィア、アム ステルダム、１９８５年（P.Tijssen,"Practice and Theory of Enzyme Immunoa ssays"(Elsevier,amsterdam,1985)）２７９〜２９６ページに記載されており、 本明細書において参照に含めてある。要するに、カルボキシル基を含むまたはカ ルボキシル化することのできるハプテンは混合脱水反応により、水溶性カルボジ イミドとの反応により、またはＮ−ハイドロキシサクシニミドによるエステル化 で結合することができる。カルボキシル化は例えば酸素または窒素置換基をハロ エステルでアルキル化してからエステルを水解するような反応、またはハイドロ キシル基またはステロイド環のケトン基に対してヘミサクシネート・エステルま たはカルボキシメチルオキシムの形成によって行うことができる。 アミノ基またはアミノ基に還元できるニトロ基を有するハプテンは、芳香族ア ミンについて、ジアゾニウム塩に変換してわずかに塩基性のｐＨで反応させるこ とができる。脂肪族アミンを有するハプテンは、カルボジイミドとの反応、相同 二機能性試薬であるトリレン−２，４−ジイソシアネートとの反応、またはマレ イミド化合物との反応を含むさまざまな方法で、蛋白質と結合させることができ る。また、脂肪族アミンは、ｐ−ニトロベンゾイルクロライドと反応させた後ｐ −安息香酸アミドに還元し、ジアゾ化の後でこれを蛋白質に結合することで脂肪 族アミンへ変換することができる。さらに、二機能性イミド化エステル例えばジ メチルピメリミデート、ジメチルアジピミデート、またはジメチルスベリミデー トなどを、アミノ基を含むハプテンをタンパクに結合させるために使用すること ができる。 チオールを含むハプテンはマレミド例えば４−（Ｎ−マレイミドメチル）−シ クロヘキサン−１−カルボキシル酸Ｎ−ハイドロキシサクシニミドエステルなど と蛋白質に結合させることができる。 ハイドロキシル基を有するハプテンでは、アルコール官能性をヘミサクシネー トに変換し、結合に利用できるカルボキシル基を導入する。この他、二機能性試 薬セバコイルジクロリドがアルコールを塩酸に変換し、これがタンパクと反応す る。 フェノールはジアゾ化したｐ−安息香酸で活性化してカルボキシル基を導入し 、また混合無水反応によってタンパクと反応させることができる。糖はｐ−ニト ロフェニルグリコシドを形成してからニトロ基をアミノ基に還元しジアゾ化によ る結合を行わせることで活性化することができる。その他の方法には、過ヨウ素 酸との反応の後ホウ化水素ナトリウムによる還元性アルキル化でアミンと結合さ せることによる糖の近位グリコールのアルデヒドへの開裂が含まれる。これ以外 で、ハプテンを含むハイドロキシル基はホスゲンとの反応でクロロカーボネート へ変換した後に結合することができる。 アルデヒド基またはケトン基を有するハプテンでは、Ｏ−カルボキシメチルオ キシムの形成でカルボキシル基を導入できる。ケトン基はｐ−ヒドラジン安息香 酸で誘導してカルボキシル基を生成することができる。アルデヒドを含むハプテ ンはホウ化水素ナトリウムなどの還元剤との反応で安定化したシッフ基の形成に より直接結合させることができる。 クロマトグラフィー媒体はニトロセルローズが望ましく、これに分析物類似物 を疎水性相互作用で非共有的に結合させる。その他のクロマトグラフィー媒体も 使用可能で、分析物類似物をクロマトグラフィー媒体に共有的に結合させること もできる。 第１の対置可能な部材はクロマトグラフィー媒体の第１の端部と動作可能に当 接する第１の伝導手段とクロマトグラフィー媒体の第２の端部と動作可能に当接 する第２の伝導手段をさらに含む。 第２の対置可能な部材は第１のアプリケータへの第１の水性液体の添加により 溶解可能な形状において分析物に対する第１の特異的結合パートナーを含む第１ のアプリケータを含む。第１の適用液体はサンプルであり得るが、望ましくは、 サンプルと第１の再構成液体の組み合わせとして第１の再構成液体を第１に添加 する。 第３の対置可能な部材は第２のアプリケータへの第２の再構成液体の添加によ り溶解可能な形状において分析物に対する２次特異的結合パートナーを含む第２ のアプリケータを含む。２次特異的結合パートナーは検出可能なラベル、望まし くは視覚的に検出可能なラベル例えば前述したような金ゾルラベルなどで標識す る。第３の対置可能な部材は第３の対置可能な部材上の第２のアプリケータから 隔離した吸収部材も含む。 第１と第２の特異的結合パートナーは典型的には分析粒に対する抗体である。 これらは同一であり得るが必ずしもそうでなくとも良い。完全な二価抗体の代わ りに、一価抗体の分画例えばＦａｂまたはＦａｂ’分画を用いることができる。 これは、一つ以上の対応する分析物と何らかの抗体分子を反応させることが競合 法検定において必須ではないことから、ある種の用途に好適であり得る。 使用において、第１のアプリケータ上の第１の特異的結合パートナーを、望ま しくはサンプル単独の添加で、またはこの他で、第１の再構成液体を添加し続け てサンプルを添加することで溶解する。第２のアプリケータ上の第２の特異的結 合パートナーも第２の再構成液体の添加で溶解する。典型的には、第１と第２の 再構成液体は同一である。再構成液体は、キレート剤、界面活性剤、抗菌剤、お よび保存量などの添加成分を含むことのできるバッファ溶液が望ましい。好適な 再構成液体は、０．８％のツイーン２０を含む０．１モル、ｐＨ７．２のリン酸 緩衝食塩水と、０．００５％トリトンＸ−１００、０．００３％ＥＤＴＡ４ナト リウム、０．０５％の窒化ナトリウムを含む２．５ミリモル、ｐＨ７．５のＨＥ ＰＥＳ緩衝液を等量づつ混合して調製する。望ましくは、第１と第２のアプリケ ータのそれぞれに適用する再構成液体の量は、約５μｌから約２００μｌで、よ り望ましくは約１０μｌから約１００μｌ、最も望ましいのは約２０μｌである 。適用するサンプルの量は約５μｌから約４０μｌが望ましく、最も望ましいの は約３０μｌである。 サンプルを第１のアプリケータに適用後、本装置をインキュベートして溶解可 能な特異的結合パートナーを溶解させ、分析物と１次特異的結合パートナーの反 応を行わせる。望ましくは、インキュベーションは約５分から約３０分、最も望 ましいのは約１５分である。インキュベーションは典型的には室温で行うが、 もっと低いまたはもっと高い温度でも良い。高い温度でのインキュベーションは 反応を促進することがあり、低い温度でのインキュベーションは感受性サンプル の酸化またはその他の崩壊を防止するのに望ましいことがある。 インキュベーション後、第１の対置可能な部材と第２の対置可能な部材を対置 させ、サンプルと溶解した分析物に対する１次特異的結合パートナーを第１の伝 導手段に適用してクロマトグラフィー媒体の第１の端部へ適用する。サンプルと 溶解した特異的結合パートナーはクロマトグラフィー媒体の少なくとも一部を通 り、クロマトグラフィー媒体の独立した部分に不動化した分析物または免疫学的 類似物を通過して移動する。典型的にはこれに約１０秒ないし約２０秒を要する 。 この点で、第１と第２の対置可能な部材を開いて分離し、第１と第３の対置可 能な部材を相互に対置させて吸収手段を第１の伝導手段に当接させ、第２のアプ リケータを第２の伝導手段に当接させる。これによって吸収手段にクロマトグラ フィー媒体の第１の端部から液体を吸い取らせ、また第２のアプリケータに溶解 した標識してある特異的結合パートナーを含む液体をクロマトグラフィー媒体の 第２の端部へ適用させる。望ましくは、第２の対置可能な部材を第１と第３の対 置可能な部材の上に折り曲げて十分な液体を第２のアプリケータから流出させ吸 収手段に吸収させて流れの反転を効率的に行うようにする。第２の部材を折り曲 げることでクロマトグラフィー媒体にかかる圧力が流れの反転を助長する。 溶解した標識してある特異的結合パートナーは、サンプルと第１の特異的結合 パートナーが通過移動したクロマトグラフィー媒体の一部分と重複し不動化した 分析物または免疫学的類似物を含む独立部分を含むクロマトグラフィー媒体の少 なくとも一部を通って移動できるようになる。分析物がサンプル中に存在する場 合、標識した特異的結合パートナーは独立部分で結合して検出される。検出可能 なラベルが視覚的に検出可能なラベルの場合、独立部分に線が見えるようになる 。 検定は定性的検定すなわちＯＮ／ＯＦＦ検定として実行可能である。このよう な検定の場合、第一の特異的結合パートナーは独立部分に不動化した分析物また はその免疫学的類似物を事実上すべて結合する。独立部分にあって第一の特異的 結合パートナーに結合された部位はこれ以上結合しないように阻害される。分析 物がサンプル中に存在する場合、分析物は第１の特異的結合パートナーを結合し 、これによって第１の特異的結合パートナーが独立部分で不動化した分析物また は分析物の類似物と結合しないようにする。つまり、第２の、標識した特異的結 合パートナーは、独立部分で分析物またはその免疫学的類似物と結合でき、検出 可能な信号を提供する。 定性的形式は一つの匡体内で２つまたはそれ以上のクロマトグラフィー媒体を 使用でき、少なくともその一つは基準として使用する対照標準に割り当てる。 この形式の競合検定に好適な装置を図２３に図示してある。クロマトグラフィ ー検定装置７４０は第１の対置可能な部材７４２、第２の対置可能な部材７４４ 、第３の対置可能な部材７４６を有する。第２の対置可能な部材７４４は第１の ヒンジ７４８で第１の対置可能な部材７４２の一方の側面に蝶番式に取り付ける 。第３の対置可能な部材７４６は第２のヒンジ７５０で第１の対置可能な部材７ ４２の他方の側面に蝶番式に取り付ける。第１の対置可能な部材７４２は第１の 端部７５４と第２の端部７５６を有するクロマトグラフィー媒体７５２を有し、 クロマトグラフィー媒体７５２の第１の端部７５４と動作可能に当接する第１の 伝導手段７５８とクロマトグラフィー媒体７５６の第２の端部と動作可能に当接 する第２の伝導手段７６０を有する。クロマトグラフィー媒体７５２は、前述し たように信号として読み取る分析物またはその免疫学的類似物を不動化してある 独立した部分７６２を有する。 第２の対置可能な部材７４４は、溶解可能な形状で分析物に対する第１の特異 的結合パートナーを含む第１のアプリケータを有し、これにサンプルを適用する のが望ましい。 第３の対置可能な部材７４６は検出可能なラベルで標識し第２の水性液体の添 加で溶解可能な形状で存在する分析物に対する第２の特異的結合パートナーを含 む第２のアプリケータ７６６を有する。第３の特異的結合パートナー７４６は第 ２のアプリケータ７６６から隔離した吸収手段７６８を有する。第３の特異的結 合パートナー７４６は独立した部分７６２を含むクロマトグラフィー媒体７５２ の少なくとも一部を観察するための開口部７７０も有する。これ以外に、開口部 ７７２は第１の対置可能な部材７４２のクロマトグラフィー媒体７５２の独立し た部分７６２の後ろに配置して、装置７４０を閉じたときに装置７４０の裏面か ら観察する。第２と第３の対置可能な部材７４４、７４６は係合手段７６９、７ ７３を有し、本装置７４０は試薬を内包するガスケット７７４を含む。 第１の対置可能な部材７４２と第２の対置可能な部材７４４を対置させたとき 、第１のアプリケータ７６４は第１の伝導手段７５８と動作可能に当接して第１ のアプリケータ７６４の内容を第１の伝導手段７５８さらにはクロマトグラフィ ー媒体７５２の第１の端部７５４にて起用する。第３の対置可能な部材７４６と 第１の対置可能な部材７４２を対置させたときには、吸収手段７６８がクロマト グラフィー媒体７５２の第１の端部７５４に隣接する第１の伝導手段７５８と動 作可能に当接し、第２のアプリケータ７６６はクロマトグラフィー媒体７５２の 第２の端部７５６に隣接する第２の伝導手段７６０と動作可能に当接して、クロ マトグラフィー媒体７５２内の液体の流れる方向を反転させる。 Ｂ．カバー付き２部材２方向フロー装置 本発明による競合法検定のためのクロマトグラフィー検定装置の第２の実施例 はカバー付き２部材２方向フロー検定装置である。本実施例において、検査しよ うとするサンプルは抗体とプレインキュベートせず、クロマトグラフィー媒体と 直接的に当接する伝導手段へ直接適用する。 競合法イムノアッセイ用のクロマトグラフィー検定装置の第２の実施例は、第 １の対置可能な部材と第２の対置可能な部材を含むことができる。第１の対置可 能な部材は第１の端部と第２の端部を有するクロマトグラフィー媒体を有する。 クロマトグラフィー媒体は、不動化した（１）分析物のための１次特異的結合パ ートナー、（２）分析物に対するアフィニティを欠如した特異的結合対の構成要 素を結合することのできる２次特異的結合パートナーを有する。これらの部材は 独立した別個の重複しない部分でクロマトグラフィー媒体上に配置する。２次特 異的結合パートナーは分析物に対する１次特異的結合パートナーよりクロマトグ ラフィー媒体の第１の端部に近いところに配置する。望ましくは、第１の特異 的結合パートナーはクロマトグラフィー媒体において２次特異的結合パートナー から０．２５インチ（６．３５ミリ）程度の位置に配置して効率を増加させる。 分析物に対する１次特異的結合パートナーは、典型的には、前述したように分 析物に対する抗体または抗体分画である。 ２次特異的結合パートナーは典型的には種特異性決定基に基づき、また結合す べき免疫グロブリンの抗体の特異性があればこれに基づくことのない、別の免疫 グロブリンを結合することができる抗体である。例えば、２次特異的結合パート ナーは、免疫学的特異性に係わらず、全てのウサギ免疫グロブリンＧ分子を結合 できるような、ヤギ抗ウサギＩｇＧ抗体であり得る。 １次特異的結合パートナーはクロマトグラフィー媒体の第１の端部と動作可能 に当接する第１の伝導手段と、クロマトグラフィー媒体の第２の端部と動作可能 に当接する第２の伝導手段も含む。望ましくは、第１の対置可能な部材には限界 線をマークしておき、２方向クロマトグラフィー処理において流れの反転を起こ すべき点を表すようにする。 第２の対置可能な部材は、（１）再構成液体の添加により溶解可能な形状で分 析物類似物を含むアプリケータ、（２）アプリケータからは成してある吸収手段 、を含む。 分析物類似物は２次特異的結合パートナーにより結合可能な特異的結合対の構 成要素に共有結合した分析物である。分析物類似物内の特異的結合対の構成要素 は検出可能なラベルで標識する。望ましくは、検出可能なラベルは視覚的に検出 可能なラベルである。もっとも望ましくは、視覚的に検出可能なラベルは例えば 金、銀、または銅ゾルなどの金属ゾルである。 例えば、２次特異的結合パートナーがヤギ抗ウサギＩｇＧである場合、分析物 に結合した特異的結合対の構成要素は分析物に対する抗体活性のない通常のウサ ギＩｇＧである。 ペニシリンが分析物の場合に、検定のこの形式に好適な分析物類似物の例は、 ウサギＩｇＧに共有結合させた７−アミノセフェロスポラン酸で、ウサギＩｇＧ は金コロイドで標識する。 第１と第２の対置可能な部材を対置させると第２の伝導手段がアプリケータと 動作可能に当接し、アプリケータの内容が第２の伝導手段に適用されてクロマト グラフィー媒体の少なくとも一部を通って流れる。また吸収手段を第１の伝導手 段と動作可能に当接させてクロマトグラフィー媒体の第１の端部から液体を吸い 取りクロマトグラフィー媒体の流れを反転させる。 下向きの流れの第１相のあいだ、陽性検体に存在する分析物は干渉されないク ロマトグラフィー媒体上の２次特異的結合パートナーの部分を通過してから分析 物に対する１次特異的結合パートナーの部分に結合する。陽性サンプルでは、上 向きの流れの第２相のあいだ、ラベルした分析物類似物は分析物に対する１次特 異的結合パートナーとの結合が阻害されるので２次特異的結合パートナーと結合 する。サンプルに分析物が入っていない場合、下向きの流れの相の間に１次特異 的結合パートナーと分析物の結合が起こらず、上向きの流れの第２相の間に１次 特異的結合パートナーと分析物類似物が結合して２次特異的結合パートナーには 達しないことになるので、２次特異的結合パートナーでは信号が現れない。 望ましくは、本装置は第１の対置可能な部材に蝶番式に取り付けたカバーをさ らに含み、第１と第２の対置可能な部材が対置されたときにこれらの上に折り曲 げられるようにする。カバーは開口部を設けて、第１と第２の対置可能な部材を 対置させたときにクロマトグラフィー媒体の少なくとも一部が観察できるように 成す。これ以外では、開口部をクロマトグラフィー媒体の裏面に配置し閉じた装 置の裏面から観察する。 本装置は、２つまたはそれ以上のクロマトグラフィー媒体を一つの筐体に含む ことができ、少なくともクロマトグラフィー媒体の一つはサンプル内に存在する 分析物濃度の半定量または定性的指標を与える基準として使用する対照標準とし て設計する。 本実施例の別の形式において、２次特異的結合パートナーは検出帯域において 複数のバンドとして不動化し、２次特異的結合パートナーと結合するために利用 できる標識した分析物の類似物が滴定されるようにする。それぞれのバンドでの ２次特異的結合パートナーの量は、検出帯域に結合する分析物類似物の量さらに はテストサンプル内の分析物の濃度が分析物類似物に結合するバンドの数で表さ れるようにする。これは分析物濃度の半定量的推定をもたらす。典型的には、こ の形式において、クロマトグラフィー媒体上で分析物に対する１次特異的結合パ ートナーにもっとも近い２次特異的結合パートナーのバンドはもっとも低濃度の ２次特異的結合パートナーを有し、これに続くそれぞれのバンドは最低のバンド の濃度より２次特異的結合パートナーの濃度が次第に大きくなるようにする。 分析物の濃度が十分に大きくて十分な未結合の標識した分析物類似物が２次特 異的結合パートナーの第１のバンドを飽和させるほど存在している場合、標識し た分析物類似物のうちの幾らかは２次特異的結合パートナーの第２のバンドに結 合する。つまりクロマトグラフィー媒体の検出領域に２本の線が見えることにな る。したがって分析物濃度の範囲は検出帯域の１本、２本、または３本の線で表 される。 検定しようとする分析物の予想濃度範囲で検出帯域の１本またはそれ以上の線 の出現のきっかけとなる濃度を決定する。例えば、ニコチン代謝産物のコチニン を用いると、体液中の濃度１０ｐｐｂはタバコの煙に対する有意な受動的暴露を 表し、また濃度５００ｐｐｂは能動的喫煙者であることを表し、濃度１０，００ ０ｐｐｂは非常なヘビースモーカーを表すことができる。検定装置は１本の線が コチニン１０ｐｐｂ、２本の線が５００ｐｐｂ、３本の線が１０，０００ｐｐｂ で検出帯域に現れるように設定できる。 動作において、前述したように再構成液体をアプリケータに適用して分析物類 似物を溶解する。サンプルを次に第１の伝導手段に適用して限界線まで移動させ る。典型的には第１の方向でのクロマトグラフィーは約５秒ないし約２５秒かか り、より典型的には約１０秒かかる。次に第２の対置可能な部材を第１の対置可 能な部材の上に折り曲げて対向させる。次にカバーを第１と第２の対置可能な部 材の上に折り畳む。約３０秒から約１０分、典型的には２分のインキュベーショ ン時間の後、分析物がサンプル内に存在していれば２次特異的結合パートナーに 視認できる線が見える。サンプルと再構成液体の好適な量は競合法イムノアッセ イ装置の第１の実施例で前述したとおりである。 競合法イムノアッセイのこの実施例に好適な装置を図２４に図示してある。ク ロマトグラフィー検定装置７８０は第１の対置可能な部材７８２、第２の対置可 能な部材７８４、およびカバー７８６を有する。第２の対置可能な部材７８４は 第１のヒンジ７８８で第１の対置可能な部材７８２の一方の側面に蝶番式に取り 付ける。カバー７８６は第２のヒンジ７９０で第１の対置可能な部材７８２の他 方の側面に蝶番式に取り付ける。第１の対置可能な部材７８２は第１の端部７９ ４と第２の端部７９６を有するクロマトグラフィー媒体７９２を有する。クロマ トグラフィー媒体７９２は分析物に対する第１の特異的結合パートナー７９８が 不動化してある領域と、２次特異的結合パートナー８００が不動化してある重複 しない領域を有する。第１の対置可能な部材７８２はクロマトグラフィー媒体７ ９２の第１の端部７９４と動作可能に当接する第１の伝導手段８０２、およびク ロマトグラフィー媒体７９２の第２の端部７９６と動作可能に当接する第２の伝 導手段８０４も含む。第１の対置可能な部材７８２は第１と第２の対置可能な部 材７８２、７８４を対置させて検定実行中に液体のながれる方向を逆転させ流転 を表すための限界線８０６も含む。 第２の対置可能な部材７８４は再構成液体の追加で溶解可能な形状で分析物類 似物を含むアプリケータ８０８を含む。第２の対置可能な部材７８４はアプリケ ータ８０８から離した吸収手段８１０と開口部８１４も含む。第１と第２の対置 可能な部材７８２、７８４を対置させたとき、アプリケータ８０８が第２の伝導 手段８０４と動作可能に当接し吸収手段８１０が第１の伝導手段８０２と動作可 能に当接するように置かれて液体の流れる方向を反転させる。カバー７８６はク ロマトグラフィー媒体７９２の一部を観察できるようにするための開口部８１２ を設けてある。望ましくは、開口部８１２は分析物に対する１次特異的結合パー トナー７９８の部分ではなく２次特異的結合パートナー８００の部分が観察でき るようにする。第２の対置可能な部材７８４とカバー７８６は係合手段８１１、 ８１３も含む。本装置はガスケット８１５で包囲する。 Ｃ．吸収手段付き３部材１次元フロー装置 競合法イムノアッセイのこの実施例に好適な別の装置を図２５に図示してある 。本装置はクロマトグラフィー媒体および両方の伝導手段から液体を吸い取る吸 収手段またはブロッタを含む第３の部材を有する。吸収手段はクロマトグラ フィー媒体と動作可能に当接するときにこれの実質的部分を横断して延在する。 クロマトグラフィー検定装置８２０は第１の対置可能な部材８２２、第２の対置 可能な部材８２４、第３の対置可能な部材８２６を有する。第２の対置可能な部 材８２４は第１のヒンジ８２８で第１の対置可能な部材８２２の一方の側面に蝶 番式に取り付けてある。第３の対置可能な部材８２６は第２のヒンジ８３０で第 １の対置可能な部材８２２の他方の側面に蝶番式に取り付けてある。第１の対置 可能な部材８２２は第１の端部８３４と第２の端部８３６を有するクロマトグラ フィー媒体８３２を有する。クロマトグラフィー媒体は分析物のための１次特異 的結合パートナー８４０の部分と２次特異的結合パートナー８３８の部分を重複 し内容に不動化してある。第１の対置可能な部材８２２はアプリケータとして用 いクロマトグラフィー媒体８３２の第１の端部と動作可能に当接する第１の伝導 手段８４２とクロマトグラフィー媒体８３２の第２の端部８３６と動作可能に当 接する第２の伝導手段８４４を有する。第１の対置可能な部材８２２は第１と第 ２の対置可能な部材８２２、８２４を相互に当接させる点を示す限界線も含む。 第２の対置可能な部材８２４は分析物類似物を含む第２のアプリケータ８５０ を含む。典型的には、水性液体を第２のアプリケータ８５０に添加して第２のア プリケータ８５０上の分析物類似物を溶解する。第２の対置可能な部材８２４は 第２のアプリケータ８５０から離してある第１の吸収手段８４８も含む。第１と 第２の対置可能な部材８２２、８２４を対置させると、第２のアプリケータ８５ ０は第１の伝導手段８４２と動作可能に当接するように配置され第１の吸収手段 ８４８は第２の伝導手段８４４と動作可能に当接するように配置されて液体を吸 い取る。クロマトグラフィー媒体８３２の一部を裏面から観察できるようにクロ マトグラフィー媒体の後側には開口部８５２が設けてある。第２と第３の対置可 能な部材８２４、８２６は係合手段８４９、８５３を含む。本装置８２０はガス ケット８５８も含む。 第３の対置可能な部材８２６は第３と第１の対置可能な部材８２６、８２２を 対置させたときにクロマトグラフィー媒体８３２の実質的部分と動作可能に当接 するように配置してある第２の吸収手段８５４を含む。これにより第１の伝導手 段８４２からと第２の伝導手段８４４からおよびクロマトグラフィー媒体８３２ から過剰な液体を排除する。 使用において、サンプルは第１の伝導手段またはアプリケータ８４２に適用し てクロマトグラフィー媒体８３２を通って移動させる。第３の対置可能な部材８ ２６を第１の対置可能な部材８２２と対置させて第２の吸収手段８５４を第１の 伝導手段またはアプリケータ８４２およびクロマトグラフィー媒体８３２と直接 的に当接させ、可能な液体を第２の吸収手段８５４に流出させる。次に第２の対 置可能な部材８２４と第１の対置可能な部材８２２を対置させて、溶解した標識 した分析物類似物を含む第２のアプリケータ８５０をクロマトグラフィー媒体８ ３２の第１の端部８３４で伝導手段またはアプリケータ８４２と当接させる。ま た、第１の吸収手段８４８をクロマトグラフィー媒体８３２の第２の端部で第２ の伝導手段８４４と当接させる。第３の対置可能な部材８２６をカバーとして第 ２の対置可能な部材８２４の上に閉じる。クロマトグラフィー媒体の一部はクロ マトグラフィー媒体８３２の裏面に配置してある開口部８５２から視認できる。 分析物の検出および／または同定は２方向フロー装置について前述の第ＩＩ節 （Ｂ）で説明したのと同じ方法で行う。 Ｄ．ビオチンの特異性を用いる３部材２方向フロー装置 本発明によるクロマトグラフィー検定装置の別の実施例はビオチン−アビジン 架橋の特異性を用いる３部材２方向フロー検定装置である。 第１の対置可能な部材は前述のように第１の端部と第２の端部を有するクロマ トグラフィー媒体を有する。クロマトグラフィー媒体は、（１）アビジン、スト レプトアビジン、抗ビオチン抗体、およびこれらの誘導体からなるグループから 選択したビオチンを特異的に結合することのできる基質と、（２）２次特異的結 合パートナーを不動化してある。２次特異的結合パートナーは３要素複合体に特 異的に結合することができ、３要素複合体は、（ａ）分析物、（ｂ）分析物と共 有結合してある分析物に対する特異的結合アフィニティを欠如した特異的結合対 の構成要素、および（ｃ）特異的結合対の構成要素に結合した検出可能なラベル 、を含む。この３要素複合体は後述するように第３の対置可能な部材上に配置す る。 結合部材はクロマトグラフィー媒体上の独立した別個の重複しない部分に不動 化し、それぞれの帯域はクロマトグラフィー媒体の面積より実質的に小さい。２ 次特異的結合パートナーは第１の独立した部分に不動化してあり、第２の独立し た部分に不動化してあるビオチンと結合可能な基質（一般に本明細書では「アビ ジン」と称する）が置かれている位置より、クロマトグラフィー媒体の第１の端 部に近い位置に配置する。 第１の対置可能な部材はクロマトグラフィー媒体の第１の端部と動作可能に当 接する第１の伝導手段およびクロマトグラフィー媒体の第２の端部と動作可能に 当接する第２の伝導手段も含む。 第２の対置可能な部材は水性液体の添加で溶解可能な形状において分析物に対 する１次特異的結合パートナーを含む第１のアプリケータを含む。前述のように 、水性液体は、望ましくはサンプル単独、または第１の再構成液体とその後のサ ンプルとすることができる。１次特異的結合パートナーは２次特異的結合パート ナーが結合することができない。１次特異的結合パートナーはビオチンと結合す る。 ビオチンを、抗体を含む球状蛋白に結合するための方法は従来技術で周知であ り、例えばＰ．ティセンの前掲書２５〜３１ページに記載されており、本明細書 においては参照に含めてある。ビオチンは反応エステルとしての蛋白と直接、ま たはεアミノカプロン酸などのスペーサーを導入することで、結合することがで きる。典型的な反応エステルは、ビオチニル−ｐ−ニトロフェニルエステル、ビ オチニル−Ｎ−ハイドロキシサクシニミドエステル、およびカプロイルアミドビ オチニル−Ｎ−ハイドロキシサクシニミドエステルで、最後の化合物はビオチン 成分と蛋白の間にスペーサーを提供する。ビオチンも他の基と反応することがで きる。 第３の対置可能な部材は、（１）分析物と、（２）分析物に対するアフィニテ ィを欠如した特異的結合対の構成要素と、検出可能なラベルを含む前述の３要素 複合体と、（３）第一のアプリケータから離した吸収部材、を含む。 本装置において、第１と第２の対置可能な部材を対置させることで第１の伝導 手段を第１のアプリケータと動作可能に当接させ、第１のアプリケータの内容を 第１の伝導手段さらにクロマトグラフィー媒体の第１の端部に適用する。つまり 、第１のアプリケータの内容はクロマトグラフィー媒体の少なくとも一部を通っ て移動する。第１と第３の対置可能な部材を対置させることで、第２のアプリケ ータを第２の伝導手段と動作可能に当接させて第２のアプリケータの内容をクロ マトグラフィー媒体の第２の端部に適用し、吸収手段を第１の伝導手段と動作可 能に当接させてクロマトグラフィー媒体の第１の端部から液体を吸い取り流れを 反転させる。 クロマトグラフィー検定装置の本実施例で使用するための抗体の好適な組み合 わせの例は、テオフィリンを分析物とすると、ビオチニル化した１次特異的結合 パートナーとしてはビオチニル化したマウスモノクローナル抗テオフィリンＩｇ Ｇ抗体、不動化した２次特異的結合パートナーとしてはヤギ抗ウサギＩｇＧ抗体 、３要素複合体における特異的結合対の構成要素としては抗テオフィリン活性を 欠如したウサギＩｇＧである。 本実施例による装置で検定することのできる分析物の別の例はペニシリンで、 特異的結合パートナーとしてペニシリン結合蛋白（ＰＢＰ）、ウサギＩｇＧに共 有結合させた７−アミノセフェロスポラン酸を含む３要素複合体を使用し、ウサ ギＩｇＧは金コロイドで標識する。他のβラクタム環系抗生剤も同様に検定可能 である。 動作において、第１のアプリケータ上のビオチニル化した１次特異的結合パー トナーを、望ましくはサンプル単独の適用によって、または第１の再構成液体の 適用に続けて前述したようにサンプルを適用することにより、溶解する。第２の アプリケータ上の３要素複合体は第ＩＩ節（ａ）で前述したように第２の再構成 液体で溶解する。サンプル内の全ての分析物が第１の特異的結合パートナーと結 合するのに十分なインキュベーション期間の後、第１と第２の対置可能な部材を 対置させてサンプルと溶解した１次特異的結合パートナーを第１の伝導手段へさ らにクロマトグラフィー媒体の第１の端部へ適用する。サンプルと１次特異的結 合パートナーはクロマトグラフィー媒体を通って移動し、クロマトグラフィー媒 体の不動化した試薬が載せてある２つの独立した重複しない部分を通過する。第 １のビオチニル化した特異的結合パートナーは第２の独立した部分でビオチンに 結合することのできる成分に結合する。分析物がサンプル中に含まれる場合、こ のビオチニル化しビオチン−アビジン架橋で固体支持に結合してある特異的結合 パートナーそれ自体が分析物と結合する。分析物がサンプル中に含まれていない 場合、分析物は結合したビオチニル化特異的結合パートナーに結合しない。 サンプルと溶解した１次特異的結合パートナーが第２の独立した部分を通過し た後、第１と第２の対置可能な部材を引き離して、第１と第３の対置可能な部材 を対置させ、流れを反転させ第２の伝導手段に３要素複合体を適用する。３要素 複合体は第２の端部から第１の端部に向かってクロマトグラフィー媒体を移動す る。分析物がテストサンプル中に存在していた場合、ビオチニル化し第２の独立 した部分でアビジンに結合した特異的結合パートナーは３要素複合体の分析物を 結合できないので、３要素複合体は２次特異的結合パートナーに到達する。２次 特異的結合パートナーは３要素複合体の特異的結合対の構成要素を結合し、これ が検出される。典型的に、本装置の第３の対置可能な部材は開口部を有しており ２次特異的結合パートナーの第２の独立した部分ではなく第１の独立した部分が 、第３の対置可能な部材を第１の対置可能な部材と対置したときにクロマトグラ フィー媒体上で確認できるようになっている。しかし、分析物がサンプルに含ま れない場合、３要素複合体はアビジンに結合する１次特異的結合パートナーに結 合し、抗原結合部位は占有されないことになる。３要素複合体は検出のための２ 次特異的結合パートナーを含む第１の独立した部分には到達しない。 競合法イムノアッセイのこの形式を実施するのに適したクロマトグラフィー検 定装置を図２６に図示してある。クロマトグラフィー検定装置８６０は第１の対 置可能な部材８６２、第２の対置可能な部材８６４、第３の対置可能な部材８６ ６を有する。第２の対置可能な部材８６４は第１のヒンジ８６８で第１の対置可 能な部材８６２の一方の側面に蝶番式に取り付けてあり、第３の対置可能な部材 ８６６は第２のヒンジ８７０で第１の対置可能な部材８６２の他方の側面に蝶番 式に取り付けてある。第１の対置可能な部材８６２は第１の端部８７４と第２の 端部８７６を有するクロマトグラフィー媒体８７２を有し、第１の伝導手段８７ ８がクロマトグラフィー媒体８７２の第１の端部８７４と動作可能に当接し第２ の伝導手段８８０がクロマトグラフィー媒体８７２の第２の端部８７６と動作可 能に当接する。クロマトグラフィー媒体８７２は２次特異的結合パートナー８８ ２の第１の独立した部分とアビジンの第２の独立した部分８８４を有する。第１ と第２の独立した部分８８２、８８４は重複せず、第１の独立した部分８８２が クロマトグラフィー媒体８７２の第１の端部８７４に近い位置に配置してある。 第２の対置可能な部材８６４は分析物に対する溶解可能な１次特異的結合パート ナーを含む第１のアプリケータ８８６を有する。第３の特異的結合パートナー８ ６６は溶解可能な３要素複合体を含む第２のアプリケータ８８８と第２のアプリ ケータ８８８から離した吸収手段８９０を有する。第２の対置可能な部材８６４ と第３の対置可能な部材８６６はクロマトグラフィー媒体８７２の一部を観察す るための開口部８９２、８９４を有する。望ましくは、開口部８９２、８９４で アビジンを含む第２の独立した部分８８４ではなく２次特異的結合パートナーを 含む第１の部分８８２の観察ができるようにする。第２と第３の対置可能な部材 ８６４、８６６は係合手段８９１、８９５も含む。本装置はガスケット８９６も 含む。 第１と第２の対置可能な部材８６２、８６４を対置させることで第１のアプリ ケータ８８６が第１の伝導手段８７８と動作可能に当接し、クロマトグラフィー 媒体８７２を通る流れが始まる。続いて、第１と第３の対置可能な部材８６２、 ８６６を対置させることで、第２のアプリケータ８８８が第２の伝導手段８８０ と動作可能に当接し、吸収手段８９０は第１の伝導手段８７８と動作可能に当接 し、クロマトグラフィー媒体８７２を通る流れの方向を反転させる。 本装置の本実施例の変化において、検出帯域は、第ＩＩ節（Ｂ）で既に述べた ように、２つまたはそれ以上の２次特異的結合パートナーのバンドを含むことが できる。これで結合するために利用できる標識した３要素複合体の量を滴定して 検出帯域内の視覚的に認識可能なバンドの数でテストサンプル内に存在する分析 物の量の指標を提供する。 Ｅ．競合阻害イムノアッセイ用２部材装置 本発明によるクロマトグラフィー検定装置の別の実施例は競合法イムノアッセ イを実施するのに好適である。本装置は分析物がテストサンプル中に存在する場 合に検出可能な信号を提供することによる分析物濃度についての陽性指標を提供 する。 本装置は２部材装置で、装置を通して流れは１方向である。第１の対置可能な 部材は第１の端部と第２の端部を有するクロマトグラフィー媒体を含む。クロマ トグラフィー媒体は、（１）分析物に対する特異的結合パートナーを結合するこ とのできる分析物類似物、（２）分析物に対するアフィニティを有する特異的結 合対構成要素を結合することのできる２次特異的結合パートナーを不動化してあ り、２次特異的結合パートナー自体は分析物に対するアフィニティを欠如してい る。要素はクロマトグラフィー媒体上の独立した別個の重複しない部分に配置す る。分析物類似物は２次特異的結合パートナーが置かれている位置よりクロマト グラフィー媒体の第１の端部に近いところに配置する。 分析物類似物はクロマトグラフィー媒体に結合することができ、蛋白分子に共 有結合した分析物、例えば非特異性免疫グロブリンである。蛋白分子は分析物に 対するまたは分析物の特異的結合パートナーに対する結合アフィニティを有さな いこと。 ２次特異的結合パートナーは特に前述したように特異的結合決定基に基づいて 分析物に対する特異的結合パートナーを結合する。２次特異的結合パートナーと 分析物に対する特異的結合パートナーとの相互作用は分析物に対する特異的結合 パートナーの抗原結合部位に関係しない。 第１の対置可能な部材はクロマトグラフィー媒体の第１の端部と動作可能に当 接する伝導手段も含む。望ましくは、第１の対置可能な部材はクロマトグラフィ ー媒体の第２の端部と動作可能に当接する吸収部材も含む。 第２の対置可能な部材は検出可能なラベルで標識した分析物に対する特異的結 合パートナーを含むアプリケータを含む。望ましくは、検出可能なラベルは金属 ゾル等の視覚的に検出可能なラベルである。別の形式の一つにおいて、第２の対 置可能な部材はさらに第１の対置可能な部材が吸収部材を欠如している場合アプ リケータから離した吸収部材を含むことができる。望ましくは、第２の対置可能 な部材はクロマトグラフィー媒体の一部を観察できるような開口部も含む。望ま しくは、開口部は分析物類似物の部分ではなく２次特異的結合パートナーの部分 を観察できるようにする。 使用において、テストしようとするサンプルはアプリケータに適用して標識し た特異的結合パートナーを溶解する。典型的には、サンプルは約１分から約３分 にわたり特異的結合パートナーとインキュベートするが、感受性の増大が所望の 場合この時間を増加することができる。 第１と第２の対置可能な部材を対置させて、アプリケータの内容を伝導手段さ らにクロマトグラフィー媒体の第１の端部に適用する。陽性テストサンプルに存 在する分析物は標識した特異的結合パートナーの分析物結合部位を占有し、標識 した特異的結合パートナーはクロマトグラフィー媒体の分析物類似物に結合しな いことになる。その代わり、標識した特異的結合パートナーが２次特異的結合パ ートナーの領域に進出してここで結合され、分析物の存在を示す陽性の検出可能 な線を形成する。 テストサンプル中に分析物が存在しないとき、分析物に対する標識した特異的 結合パートナーは全て分析物類似物によって結合されて２次特異的結合パートナ ーには到達しない。使用する試薬量を滴定して陽性反応を示すのに必要な分析物 の濃度を調節し臨床的または薬理的要求に対応させることができる。 競合法イムノアッセイのこの実施例に好適な装置を図２７に図示してある。本 装置９００はヒンジ９０６で蝶番式に取り付けてある第１の対置可能な部材９０ ２と第２の対置可能な部材９０４を有する。第１の対置可能な部材９０２は第１ の端部９１０と第２の端部９１２を有するクロマトグラフィー媒体９０８を有す る。クロマトグラフィー媒体９０８は不動化した分析物類似物の部分９１４と、 不動化した２次特異的結合パートナーの部分９１６を有する。第１の対置可能な 部材９０２はクロマトグラフィー媒体９０８の第１の端部９１０と動作可能に当 接する伝導手段９１８とクロマトグラフィー媒体９０８の第２の端部９１２に動 作可能に当接する吸収手段９２０も有する。 第２の対置可能な部材９０４はサンプルの添加により溶解可能な形状で分析物 に対する標識した特異的結合パートナーを含むアプリケータ９２２を含む。第２ の対置可能な部材９０４はクロマトグラフィー媒体９０８の少なくとも一部を観 察できるようにする開口部９２４も含む。望ましくは開口部は分析物類似物９１ ４ではなく２次特異的結合パートナー９１６の部分を観察できるようにする。第 １と第２の対置可能な部材は２部材装置において前述したように係合手段９２３ 、９２５とガスケット９２６も含む。 本装置のこの実施例の別の形式において、検出帯域は２つまたはそれ以上の２ 次特異的結合パートナーのバンドを含み、第ＩＩ節（Ｂ）で既に述べたように、 テストサンプルの分析物濃度の半定量的指示を提供する。これは結合に利用可能 な標識した特異的結合パートナーの量を滴定して検出帯域で視覚的に認識できる バンドの数によりテストサンプル中に存在する分析物の量の指標を与えるもので ある。 ＩＩＩ．検定装置で使用する分析物と抗体 本発明によるクロマトグラフィー検定装置による検出に好適な分析物は、抗原 、ハプテン、抗体を含む。本装置で検出可能な抗原は、ヘモグロビン、ストレプ トコッカスＡおよびＢ抗原、寄生性原虫ジアルジアに特異的な抗原、および、Ｈ ＩＶ抗原や肝炎ウィルスに特異性のオーストラリア抗原を含むウィルス抗原であ る。検定可能な抗体は、例えばピロリ菌（H.pylori）などの微生物に対する抗体 やＨＩＶを含むウィルス等に対する抗体である。検出可能なハプテンは、第ＩＩ Ｉ節で既に列挙したようなハプテンならびに十分な特異性の抗体を調製できるそ の他のハプテンを含む。 分析物が抗原またはハプテンでサンドイッチ法を用いる場合、第１と第２の特 異的結合パートナーは抗体が望ましい。多くの用途では、第１と第２の特異的結 合パートナーは分析物上の別のエピトープに対する抗体であるのが望ましいが、 必ずしも必要ではない。抗体はポリクローナルまたはモノクローナルでＩｇＧ、 ＩｇＭ、またはＩｇＡであり得る。多くの用途では、ポリクローナル抗体が好適 で、これは抗原変異性が存在するまたは存在し得るような系でポリクローナル抗 体本来の変位性がより正確な検出が行えるようにするためである。 分析物がハプテンでサンドイッチ法を用いる場合、第１と第２の特異的結合パ ートナーは別のエピトープに対する抗体とするのが強く望まれる。これ以外では 、標識した特異的結合パートナーと分析物の複合体の不動化した２次特異的結合 パートナーとの結合を干渉するような望ましくない競合反応が起こることがある 。全てのハプテンが一つ以上のエピトープに対応する程十分に大きくないことが 分かっているが、ある種のハプテンはそれ自身が注入されたときに抗原形成を起 こす程十分に大きくなくとも、一つ以上のエピトープを有することができる程度 に十分に大きい。一つ以上のハプテンのエピトープに対する抗体を入手できない ような場合、競合法検定が一般的に好適とされる。 分析物が抗体でサンドイッチ法検定を使用する場合、第１の特異的結合パート ナーは典型的には種、クラス、またはサブクラス（アイソタイプ）特異性に基づ いて分析物に結合する標識抗体である。抗体分析物に対する第１の特異的結合パ ートナーが抗体分析物の一定の領域に結合して、干渉を防止するようにするのが 非常に好適である。分析物が抗原の場合、２次特異的結合パートナーは抗体分析 物が特異的な抗原またはハプテンが望ましい。 幾つかの用途においては、間接標識法を用いるのが望ましい。例えば、ジアル ジア抗原のテストでは、直接標識するのが困難なＩｇＭ抗原を用いることができ る。この場合、可動性の１次特異的結合パートナーに対する２次特異的結合パー トナーを標識することができる。典型的には、標識した２次特異的結合パートナ ーは種、クラス、またはサブクラスの特異性に基づいて１次特異的結合パートナ ーである抗体に結合する。 ２次特異的結合パートナーを用いることの代わりに、１次特異的結合パートナ ーをビオチンに結合してアビジン結合したラベルを用いても良い。 このような分析物と、特異的結合パートナーと、ラベルの間のサンドイッチ法 イムノアッセイでの関連を以下の表１にまとめた。 競合法イムノアッセイの反応様式における分析物、特異的結合パートナー、ラ ベル、およびその他の関連物質の間の関連性を次の表２にまとめた。 ＩＶ．検査キット 本発明の別の態様は特定の分析物を検出するために使用できる検査キットであ る。検査キットは、別々の容器内に、 （１）本発明によるクロマトグラフィー検定装置 （２）サンプルの処理または抽出に要求される必要な全ての試薬 （３）任意で、検定装置が溶解可能な形状で分析物に対する標識特異的結合パー トナーを含まない場合、必要な特異的結合パートナー。 を含む。 （２）と（３）で必要な部材は別々のパッケージに納め、液状または固体状（ 凍結乾燥、結晶化、沈澱、または塊）とする。後者の場合、使用者が溶解し、典 型的には蒸留水または純水、生理食塩水またはバッファ溶液を用いる。 場合によっては、検査キットは、特異的結合パートナーまたは分析物類似物ど ちらかの、溶解可能な形状で装置に存在する試薬のための再構成液体を含むこと もできる。特定の例は、それぞれの形式の装置の操作の開示とともに既に開示し た通りである。 本発明による検査装置のさらに別の変化も可能である。例えば、説明した２部 材装置のどれも対置可能な部材の一方に蝶番式にカバーを取り付けることができ る。このカバーはクロマトグラフィー媒体の少なくとも一部を観察できるように するか囲口部を設けることができる。 本発明は以下の例で図示する。例は図示だけを目的としており本発明の範囲を 如何なる点でも制限するように構成されたものではない。 例 例１ ストレプトコッカス抗原検出用の装置の構成 ストレプトコッカスＡ抗原に対する標識抗体を用いてストレプトコッカスＡ抗 原検出用に装置を構成した。本装置は基本的に図２８に図示したように構成し た。 図２８は第１の対置可能な部材９４２、第１の対置可能な部材９４２に蝶番式 に取り付けた第２の対置可能な部材９４４、第２の対置可能な部材９４４に蝶番 式に取り付けたカバー９４６を有する本発明によるクロマトグラフィー検定装置 ９４０を示す。第１の対置可能な部材９４２はクロマトグラフィー媒体９４８を ふくむ。第２の対置可能な部材９４４は涙滴型レセプタクル９５０を所定位置に 保持するリボン９５２を含み、リボン９５２の張力を第２の対置可能な部材９４ ４の両端にかけている。涙滴型レセプタクル９５０はリボン９５２の張力で所定 位置の保持されたときウェルを形成する。第１の対置可能な部材９４２は第１の 窓９５４を含み、カバー９４６は第２の窓９５６を含む。 対置可能な部材は堅固で、不透水性プラスチック例えばポリカーボネートから 作成した。第１と第２の対置可能な部材ならびにカバーはそれぞれ長さ約３イン チ、第１の対置可能な部材は幅が約２．２５インチ、また第２の対置可能な部材 とカバーはそれぞれ幅が約２．３７５インチだった。第２の対置可能な部材は、 綿球またはその他のサンプリング器具を受け入れるために涙滴型のウェルを設け てあるフォームラバー製のレセプタクルと位置を揃えた。綿球はウェルの両端で 第２の対置可能な部材に別々に挿入するリボンで所定位置の保持した。 クロマトグラフィー媒体は、孔径８ミクロンで幅０．５インチのニトロセルロ ースストリップ（ＭＳＩ社製、マサチューセッツ州ウエストボロー）で、両面テ ープ（３Ｍ社製、ミネソタ州ミネアポリス）を用いてプラスチック製裏ぶたに固 定した。伝導手段と吸収手段はセルロースストリップ（アールストローム・フィ ルトレーション社製、ペンシルバニア州ホリースプリングス）吸収手段では長さ １７／３２インチのアールストローム・グレード９３９、また伝導手段では長さ ０．２５インチのアールストローム・グレード１２８１とした。デテクタ適用パ ッドも同じくアールストローム・グレード１２８１で幅０．３７５インチとした 。デテクタ適用パッドは吸収手段とわずかに重複し、吸収手段は第１の端部でク ロマトグラフィー媒体とわずかに重複している。クロマトグラフィー媒体は吸収 手段と第２の端部でわずかに重複した。 必要な試薬は第１にクロマトグラフィー媒体とデテクタ適用パッドに含め、そ の後裏ぶたに部材を保持するための両面テープを使って装置を組み立てた。 検出帯域はｐＨ７．２、０．００１モル／ｌのリン酸緩衝生食水に２ｍｇ／ｍ ｌのウサギ抗ストレプトコッカスＡ抗原を含ませた。制御帯域はヤギ抗ウサギＩ ｇＧを同じバッファに同等の濃度で含ませた。抗体溶液をクロマトグラフィー媒 体の適当な範囲に適用してから低湿度環境において華氏１００度で乾燥した。ク ロマトグラフィー媒体は過剰な阻害溶液（ＥＬＩＳＡ用阻害試薬、ベーリンガー マンハイム（ドイツ国マンハイム）を０．２％ツイーン２０を含む蒸留水で１： １０に希釈）で湿潤してからまた華氏１００度で乾燥した。 デテクタ適用パッドには４０ナノモル金コロイド粒子で標識したウサギ抗スト レプトコッカス抗体を含ませた。標識抗体をデテクタ適用パッドに適用するため 、標識抗体はＤＢＮ（１．５モル／ｌのｐｈ７．４トリスＨＣＬ、１％（ｖ／ｖ ）ツイーン２０、０．４％（ｖ／ｖ）Ｂｒｉｊ３５、０．０２％（ｗ／ｖ）窒化 ナトリウム、３ｍｇ／ｍｌのウサギＩｇＧ）で１：１．５に希釈した。試験あた り１５μｌの希釈した標識抗体をデテクタ適用パッドに添加した。デテクタ適用 パッドは華氏１００度で３０分間乾燥させた。 例２ 例１の装置によるストレプトコッカス抗原の検出 例１の装置を用いてストレプトコッカスＡ抗原を検出した。量を変えてストレ プトコッカスＡ群細菌を添付した織布ダクロン綿球をサンプルウェルに挿入した 。抽出試薬Ａ（０．２５％酢酸、５％のツイーン２０）３滴と、抽出試薬Ｂ（２ モル／ｌの窒化ナトリウム、５％のツイーン２０）３滴をスワブに加え、スワブ を回転させてやさしく混和し、１分間インキュベートした。装置を閉じ、第１と 第２の対置可能な部材を当接させ、カバーを第１の対置可能な部材の上に折り曲 げた。結果は約２分から約５分のインキュベーション時間の後に読み取った。ピ ンク〜赤の帯がクロマトグラフィー媒体の検出帯域に出現しストレプトコッカス Ａ抗原の検出を示した。 例１の装置は１×１０の５乗のストレプトコッカスＡ群細菌を２分間インキュ ベーションしたあと検出でき、また５×１０の４乗個のストレプトコッカスＡ群 細菌を５分間のインキュベーションののちに検出できた。比較として、ハイブリ テック（カリフォルニア州ラホーラ）のコンサイス（Concise〜）イムノアッセ イは１×１０の５乗個のストレプトコッカスＡ群細菌を５分間のインキュベーシ ョン後にのみ検出し、５×１０の４乗個のストレプトコッカスＡ群細菌は２０分 間のインキュベーション後でも検出できなかった。同様に、ニューホライズン社 製スマート（Smart〜）イムノアッセイは１×１０の５乗個のストレプトコッカ スＡ群細菌を７分間のインキュベーション後にのみ検出でき、５×１０の４乗個 のストレプトコッカスＡ群細菌についても７分間のインキュベーションの後で曖 昧な結果となった。 例３ 便潜血中のヘモグロビン検出用装置 （将来的な例） 便潜血中のヘモグロビン検出用の検定装置を図１Ａおよび図１Ｂにしたがって 組み立て、クロマトグラフィー媒体の第１の端部に任意の伝導手段を含める。標 識した特異的結合パートナーを溶解可能な形状でサンプル適用パッドに適用する 。標識した特異的結合パートナーはヤギ抗ヒト抗体で、金コロイドの標識をつけ る。便サンプル６０μｌをサンプル適用パッドに適用し共役系と混和する。装置 を閉じ便サンプルと再較正した抗体の組み合わせを伝導手段に当接させクロマト グラフィー媒体を通して移動させる。クロマトグラフィー媒体は約１分間から約 ５分間の時間にわたって行う。クロマトグラフィー媒体は抗ヒトヘモグロビン抗 体を不動化してある検出帯域とウサギ抗ヤギＩｇＧ抗体を不動化した制御帯域を の潜血の存在を示す。制御帯域には色が現れるが検出帯域には色が現れない場合 は潜血がないことと正しく試験が行われたことを示している。 本装置は便潜血中のヘモグロビンを、濃度範囲約０．２ｍｌ／便１００ｇから 約１７ｍｌ／便１００ｇで検出可能である。本装置はペルオキシダーゼと食品由 来の（ヒト以外の）ヘモグロビンによる干渉を受けない。 例４ ３部材検定装置を用いたテオフィリンの競合法イムノアッセイ 気管支拡張剤テオフィリンの検出のための競合法イムノアッセイ検定装置を組 み立てた。シュライヒャー・アンド・シュエル（ニューハンプシャー州キーン） 社製の１２ミクロンのニトロセルロース・メンブレンを両面接着剤で２．５イン チ×１１／１６インチのブロックに固定した。ニトロセルロースに疎水結合する ことが可能なテオフィリン類似物は、テオフィリンと正常ウサギ免疫グロブリン Ｇの共有結合を行い次の手順で調製した。８−（３−カルボキシプロピル）−１ ，３−ジメチルキサンチン（１８ｍｇ、０．０６８ｍＭ）を２ｍｌのテトラハイ ドロフランに融かした溶液と１ｍｌのジメチルホルムアミドをＮ−ハイドロキシ サクシナマイド（１７ｍｇ、０．１５ｍＭ）、ジシクロヘキシルカルボジイミド （２７ｍｇ、０．１３ｍＭ）で処理した。室温で一晩放置し、反応混合物を２時 間冷却してグラスウールで漉過した。反応混合物からの結晶をテトラハイドロフ ランで洗浄し溶液を混合した。溶媒は真空中で除去し、残留物を３〜４ｍｌのジ エチルエーテルにて洗浄して、過剰なカルボジイミドを除去した。洗浄した残留 物は１ｍｌのジメチルホルムアミドで洗浄した。正常ウサギＩｇＧ（１３．７ｍ ｇ／ｍｌ溶液の３．７５ｍｌ）を水で１０ｍｌに希釈した。活性Ｎ−ハイドロキ シサクシナマイドエステルをゆっくりとＩｇＧ溶液に加え、ついで１０μｌのト リエチルアミンを加えたこれによって反応混合物は蛋白１モルあたり約１９０当 量の活性エステルを含む。反応混合物は冷蔵庫で３日間有効である。 テオフィリン−ウサギＩｇＧ結合溶液１０μｌ（０．０５モルのリン酸バッフ ァに１ｍｇ／ｍｌ）をメンブレンの長さ２．５インチの上側の領域からハミルト ンシリンジを使って均一に適用した。メンブレンはデシケータで１５分間乾燥 させ、蛋白阻害溶液（脱脂粉乳０．２％、ツイーン２０が０．２％）に浸した後 さらに１５分間乾燥した。テオフィリン−ウサギＩｇＧの線がメンブレン上部に 確認された。アルストローム・サイトセップ７９９−１３（アルストローム・フ ィルトレーション社製）の１／４インチのストリップをメンブレンの上部に接着 して伝導帯域とした。アルストローム９９２メンブレンの第２の伝導バンドをメ ンブレンの下側領域に固定した。メンブレンのブロックを１／４インチ幅に切断 し、デシケータで保存した。 試薬パッドは、１／４インチ×１／４インチのリポア（グレード９２５４グラ スファイバー製フィルタ、ライドール・テクニカルペーパーズ社製、ニューハン プシャー州ロチェスター）を正方形に切断した。第１の試薬パッドとして、４０ μｌの抗テオフィリン抗体（マウスモノクローナル抗体、Ｏ．Ｅ．Ｍ．コンセプ ト社製、ニュージャージー州トムスリバー）を乾燥安定バッファ（０．５モルの トリスＨＣＬ、ｐＨ７．２、０．１％のＢｒｉｊ−３５、１．０％のウシ血清ア ルブミン）１８０μｇ／ｍｌ濃度に調製してパッドに適用し２時間乾燥させた。 第２の試薬パッドとしては、モノクローナル抗テオフィリン抗体を用いた２０μ ｌの抗テオフィリン金結合剤の実用液（Ｅ−Ｙラボラトリーズ社製）をパッドに 適用した。第２の試薬パッドも２時間乾燥した。 メンブレンストリップは厚紙の筐体に固定し、テオフィリン−ウサギＩｇＧの 線が図２３に図示してあるように筐体の窓から確認できるようにした。抗テオフ ィリン抗体を含む第１の試薬パッドは筐体の左側１／３の上側の部分に配置して 、閉じたときに、図２３のアプリケータ７６４と同様に、メンブレンの上側の伝 導帯域と当接するようにした。抗テオフィリン金結合剤を含む第２の試薬パッド は筐体の右側１／３の下側の領域に配置して、図２３のアプリケータ７６８と同 様に、メンブレンの下側の伝導領域と当接するようにした。２ｃｍ×２ｃｍの正 方形のアルストローム２７０を吸収パッドに使用し、筐体の右側１／３の上側領 域に配置し、右側１／３を中央部の上に閉じたときに上側の伝導領域と当接する ようにした。 例５ 例４の競合法検定装置を用いたテオフィリン検定の実施 （将来的な例） 検定手順として、再構成バッファ（０．８％のツイーン２０を含むリン酸緩衝 生食水０．１モル、ｐＨ７．２を１容、０．００５％のトリトンＸ−１００、０ ．００３％のＥＤＴＡ４ナトリウム、０．０５％の窒化ナトリウムを含む２．５ ｍＭＨＥＰＥＳバッファ、ｐＨ７．５を１容）４０μｌを第１の試薬パッドに加 える。同じ量（４０μｌ）の再構成バッファを第２の試薬パッドに加える。テス トしようとするサンプルのサンプル（１０μｌ）を第１の試薬パッドに加えて室 温で１５分間インキュベートする。筐体の左側１／３は中央部の上に閉じ、サン プルと抗テオフィリン抗体を含む第１の試薬パッドの内容をクロマトグラフィー 媒体に適用する。液の前面がまもなく窓から見えるようになる。前面がメンブレ ンを半分程度下ったとき、約１０秒から２０秒で、筐体を開け、第２の試薬パッ ドと吸収パッドを含む検定装置の右側１／３をクロマトグラフィー媒体の上に閉 じる。第１の試薬パッドを含む装置の左側１／３も装置の右側１／３と中央部の 上に閉じる。テオフィリンが血清濃度１．２５μｇ／ｍｌ以上サンプル中に存在 すると、視覚的に確認可能な線がテオフィリン−ウサギＩｇＧの線に１分以内に 現れる。 例６ ウサギおよびヤギ免疫グロブリンＧによるアトラジンの結合 ＩｇＧに対するハプテンの結合の度合を示すため、ウサギおよびヤギ免疫グロ ブリンＧとアトラジンの結合を調製した。ウサギＩｇＧとの結合剤として、ウサ ギＩｇＧ（リン酸緩衝生食水５ミリリットル中に３４．１ｍｇ）を１２ｍｇの無 水チオールアセチルコハク酸と２０μｌのトリエチルアミン（蛋白１モルあたり 無水物約３００当量）で処理した。溶液は冷蔵庫で一晩放置してから水２リット ルで１回、またリン酸緩衝生食水２リットルで４回、透析した。塩酸ハイドロキ シルアミン溶液を６３ｍｇ／ｍｌ濃度で調製した。前述のように８ｍｌのＰＢＳ に調製したウサギＩｇＧをハイドロキシルアミン溶液５２μｌ（３．３ｍｇ、約 ２００当量）に加えた。溶液は室温で４５分間放置した。 窒素原子の置換基の末端メチル基を活性化したアトラジン誘導体（後述の式１ ）をアセトニトリルに溶解し、濃度１９．７ｍｇ／ｍｌとした。この溶液の一部 （２００ｅｑ、１６．６ｍｇ、８４４μｌ）をウサギＩｇＧ−チオール溶液に加 えた。溶液は室温で一晩放置した。 式（１） 同様の手順を用いてアトラジンをヤギ免疫グロブリンＧに結合させた。ヤギＩ ｇＧ（１．５ｍｌのＰＢＳに７．８ｍｇ）を８ｍｇの無水チオールアセチルコハ ク酸と１０μｌのトリエチルアミンで処理した。溶液は冷蔵庫で一晩放置してか ら、ウサギＩｇＧと同様に透析した。透析したヤギＩｇＧ溶液は１０μｌのハイ ドロキシアミン溶液（０．７５ｍｇ、約２００ｅｑ）で処理した。溶液は室温で ４５分間放置した。アトラジン誘導体の第２の部分（２００ｅｑ、３．８ｍｇ、 １９０μｌ）をヤギＩｇＧ−チオール溶液に加え、一晩反応させた。ヤギＩｇＧ −アトラジン結合物をポリスチレン製のマイクロタイタープレートに固定しての ＥＬＩＳＡでは反応に成功したことが示された。 例７ 標識した３要素結合物を用いる競合法イムノアッセイ装置 標識した３要素結合物を用いたテオフィリン検出用の本発明による競合法イム ノアッセイ検定装置を組み立てた。本装置は図２４に図示した装置と同様のカバ ーを有する２部材装置である。ここで説明する方向は、該図面に図示したよう に横向きにおいた装置に対する方向である。 ニトロセルロースメンブレン（孔径１２ミクロン）（シュレイヒャー・アンド ・シュエル社製）を両面テープ（３Ｍ社製）で２．５インチ×１１／１６インチ のブロックに固定した。透明プラスチックのブロックは接着剤の裏側に既に配置 しておいた。抗テオフィリンモノクローナル抗体（例４参照）をリン酸緩衝生食 水（１０μｌ）に溶いたものをハミルトンシリンジでニトロセルロースメンブレ ンの長さ２．５インチの上部領域に、最上部から５／１６インチ離して均一に適 用した。ヤギ抗ウサギＩｇＧをペル・フリーズ生化学（アーカンソー州ロジャー ス）から入手した。純粋ＩｇＧは、カプリル酸と硫酸アンモニウムによる沈降法 で血清から取り出した。純化したヤギ抗ウサギＩｇＧ（リン酸緩衝生食水に３． ５ｍｇ／ｍｌ）１０μｌを抗テオフィリン抗体の第１の線の上に、最上部から１ ／８インチ離して適用した。メンブレンは回転脱水機で１０分間乾燥させ、次に 阻害溶液（例４参照）に浸してから１５分間乾燥させた。アルストローム１２８ １（アルストローム・フィルトレーション社製）の１／４インチバンドをメンブ レンの最上部に接着して伝導領域として機能させた。第２の伝導バンド、アルス トローム９９２を下側の帯域に固定した。メンブレンのブロックをこのあと１／ ４インチ幅のストリップに切断した。 試薬パッドとして、１／４×１／４インチ平方のアルストローム１２８１を切 り出した。あらかじめ希釈しておいたテオフィリン−ウサギＩｇＧ−金（Ｅ．Ｙ ．ラボラトリーズ社製）をそれぞれのパッドに適用した。正方形は２時間乾燥し た。メンブレンストリップを筐体に固定し、上部のヤギ抗ウサギＩｇＧの線だけ が窓を通して見えるようにした。試薬パッドは筐体の左側１／３に配置して、中 央パネル上に閉じたとき、メンブレンの下側伝導帯域と当接するようにした。２ ｃｍ×２ｃｍの正方形のアルストローム２７０を筐体の左側１／３の上側の、窓 のすぐ上の領域におき、これを吸収パッドとして用いるようにした。閉じたとき にメンブレンの上側伝導帯域と当接するように配置した。 例８ テオフィリン検出用の例７の検定装置の使用 （将来的な例） 例７の検定装置を用いたテオフィリンの検定では、４０μｌの再構成バッファ （例５参照）を試薬パッドに加えた。１５μｌのサンプル、例えばヒト血清中の テオフィリン標準をメンブレンストリップの上側伝導帯域に適用する。液の前面 はクロマトグラフィー媒体のほぼ３／４をすぎたところに記した線まで、約１０ 秒かけて移動させる。筐体の左側１／３を中央部の上に閉じ、さらに左側１／３ の上に右側１／３を閉じて、液体の流れを反転させる。テオフィリンが閾値濃度 で存在していれば、視覚的に確認可能な線が２分以内に現れる。 例９ 競合阻害イムノアッセイ用の２部材装置 例４に示したニトロセルロースメンブレンのストリップと、接着剤と、試薬パ ッドを用いて２部材装置を組み立てた。本装置は前述の図２７に図示してあるも のと同様である。ここで説明する方向は、図面に図示してあるように横向きに装 置をおいたときの方向である。２つの線をニトロセルロースクロマトグラフィー メンブレンに固定した。第１の線はアフィニティを純化したヤギ抗マウスＩｇＧ （Ｏ．Ｅ．Ｍ．コンセプト社製）を乾燥バッファ（０．０１Ｍのリン酸、３．０ ％のシュークロース、０．５％のウシ血清アルブミン、０．５％のツイーン２０ 、０．０５％のｐＨ７．４窒化ナトリウム）にて１０μｌ含ませた。第２の線は １μｇ／ｍｌで０．０５モルリン酸バッファに例４のテオフィリン−ウサギＩｇ Ｇ結合物を１０μｌ含ませた。メンブレンは脱水機で乾燥してから蛋白阻害溶液 （０．１モルのトリスＨＣＬ、０．１％のＢＳＡ、ｐＨ７．４）に浸し、再乾燥 させた。第２の対置可能な部材上のアプリケータには、マウス抗テオフィリンモ ノクローナル抗体（Ｏ．Ｅ．Ｍ．コンセプト社製）を金コロイド（Ｅ． Ｙ．ラボラトリーズ社製）に結合させた実用液２０μｌを乾燥バッファに適用し てから２時間乾燥させた。 検定では、テオフィリン（アルドリッチ・ケミカル、ウィスコンシン州ミルウ ォーキー）をメタノールに溶解して保存液を作成し、つぎにＰＢＳまたは血清で 希釈を行った。サンプル（３０μｌ）を第２の対置可能な部材上のアプリケータ に加えて抗テオフィリン−金結合物を溶解した。１分間のインキュベーションの のちに、２つの対置可能な部材を当接させてアプリケータがテスト・ストリップ の下側の伝導手段と当接するようにした。２分から５分以内にヤギ抗マウスＩｇ Ｇ抗体の領域に視覚的に検出可能な線が現れ、筐体の開口部を通して１本の線だ けが見えた。１ｐｐｂまでの低濃度のテオフィリンを検出することができた。 例１０ 半定量的結果を得られる競合法イムノアッセイ用２部材装置 アトラジンの競合法イムノアッセイ用２部材装置を、検出帯域にはアフィニテ ィ純化したヤギ抗マウスＩｇＧ（ＧＡＭ）（Ｏ．Ｅ．Ｍ．コンセプト社製）の３ 本の線と、さらにアトラジン−ヤギＩｇＧ結合物（例６）の線を加えて、例９に したがって組み立てた。ヤギＩｇＧ−アトラジン結合物に対するクロマトグラフ ィー媒体に最も近い線は最も希釈した抗体を含み、濃度は０．５ｍｇ／ｍｌだっ た。他の２本の線はもっと高濃度の抗体を含み、それぞれ濃度１．０ｍｇ／ｍｌ だった。マウス抗アトラジンモノクローナル抗体はアグリ・ダイアグノスティク ス社（ニュージャージー州シナミンソン）から購入した。第２の対置可能な部材 に適用した抗アトラジン金結合物の乾燥／安定バッファは、４％シュークロース 、１０ミリモルリン酸、０．５％ウシ血清アルブミン、０．２５％ツイーン２０ 、０．０５％窒化ナトリウム、ｐＨ７．４だった。 検定では、アトラジン（スペルコ社製、ペンシルバニア州ベラフォンテ）を標 準としてメタノールに溶解し、つぎに希釈液は実用標準液として使用するた め脱イオン水にて調製した。サンプル３０μｌを第２の対置可能な部材上のアプ リケータに加えた。１分間インキュベートしてから、２つの対置可能な部材を相 互に当接させてサンプルと溶解した抗アトラジン金をクロマトグラフィー媒体に 適用した。３分以内に１ないし１０ｐｐｂの濃度のサンプルのアトラジンがクロ マトグラフィー媒体上の１本の線に現れ、１１ないし１００ｐｐｂ濃度のサンプ ルで２本線、１０１ないし１０００ｐｐｂでは３本の線が現れた。 本発明の利点 本発明によるクロマトグラフィー検定装置は、対置可能な部材から組み立てる ことにおいて利点を提供する。対置可能な部材の使用はおおきな汎用性を提供し 、多数の異なるシーケンスにおいて反応を実施することができる。これは、この ような対置可能な部材の使用でテストストリップまたはその他の反応部材の正確 に形成した帯域に試薬を供給できるため、可能になっている。対置可能な部材の 使用は、試薬が装置の死腔に溜ることで無駄にならないようにすることで、最小 限の試薬消費量で最適な実施を提供する。最後に、対置可能な部材の使用は、そ れぞれＨＩＶまたは肝炎ウィルスとして汚染の危険性のある血液サンプルの最適 な量を提供する。 本発明による検定装置の別の利点は、圧力を用いて一つの対置可能な部材から 別の対置可能な部材へまたクロマトグラフィー媒体を通して液体を移動させ、適 用する圧力を制御することで実施しようとするそれぞれの検定に最適にするよう な装置の能力にある。これは検定処理を高速化し、検定装置内での抽出等の操作 の実施が可能になる。また部材内に残留する試薬の死腔量を減少することで少な いサンプルと少ない量の高価なまたは標識抗体等の純化が難しい試薬の使用が可 能になる。 さらに、本発明によるクロマトグラフィー検定装置は迅速かつ正確に、臨床的 に重要な分析物例えばストレプトコッカスＡ群およびＢ群抗原、便潜血同定のた めのヘモグロビン、ヘリコバクタ・ピロリに対する抗体などと、臨床的に重要な ハプテンの検出が行える。本装置の構造はクロマトグラフィー媒体へのサンプル の適用をさらに均等化し、他の方法では粒子または着色サンプルにより持ち込ま れることのある干渉を減少できる。金属コロイドラベルを溶解可能な形状で用い ることにより、極めて迅速なラベル付け動態を提供し、またサンプルをクロマト グラフィー媒体に適用する前に、２成分の分析物−ラベル複合体の実質的に完全 な形成が可能になる。これは汚染物質の分離に役立ち検定の能力を向上させる。 さらに、本装置の筐体の構造ならびに配置は、他の方法では干渉をつくり出す過 剰な免疫グロブリンを含むサンプルの吸い取りを確実に行うことで検定の実施の 支援となる。 生物学的サンプル例えば血液、痰、または糞便の抽出は直接装置内で行うこと ができるので、破棄すべき汚染物質の量が減少し、医師、技師または一般人の汚 染物による感染事故の可能性を減少する。さらに、本装置は２方向クロマトグラ フィーを実施することが可能であるためさらに精度を向上させ干渉を減少するこ とができる。本発明による装置を使用した検査法は広いダイナミックレンジを有 しており、高濃度の分析物では他の検査法で発生するような偽陰性が実質的に起 こらない。 本発明は相当な詳細にわたり、これの好適な形式の幾つかを参照して説明した が、他の形式および実施態様が可能である。これらの形式には、本明細書におい て説明した基本原理で動作し、（ａ）サンプルの「その場」抽出、（ｂ）標識特 異的結合パートナーの溶解と分析物への迅速な結合、（ｃ）他の方法では干渉源 となるような過剰サンプルを除去するクロマトグラフィー媒体と吸収手段の配置 、のいずれかを用いる２または３部材装置の他の構成を含む。これらの形式は競 合法イムノアッセイならびにサンドイッチ法イムノアッセイに適した各種の構造 の検定装置を含む。特に、本発明による装置はクロマトグラフィー媒体を通る直 線的な流れではなく対角線方向または円周方向の流れを用いるのにも対応できる 。本発明はさらに、本装置の２または３部材が永久的に固定された構造で保持さ れずに、例えば電気的または磁気的な力でまたは分離可能な締結具たとえばベル クロ（Velcro〜）などのフックアンドアイファブリックを用いることで分雛しま た組み合わせて検定を実行することができるような変化 を包含する。したがって、本発明の範囲は後続の請求の範囲によって定めるもの とする。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，Ｍ Ｃ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ， ＴＤ，ＴＧ)，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＣＡ，ＣＮ， ＦＩ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＰ，ＫＲ，ＬＫ，ＭＧ，ＭＷ，Ｎ Ｏ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＫ，ＵＡ，ＵＳ ，ＶＮ (72)発明者 プラウティー、カレン アメリカ合衆国 04093 メイン州 ウエ スト バクストン ボックス 692ピー アール ナンバー ２ 【要約の続き】 ンドイッチ法と競合法の両方の検定方法も開示する。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．サンプル中の分析物の検出および／または決定のためのクロマトグラフィー 検定装置であって、 （ａ）第１の対置可能な部材は （ｉ）第１の端部と第２の端部を有するクロマトグラフィー媒体と （ｉｉ）前記分析物の検出用に少なくとも一つの試薬を含み、前記クロマト グラフィー媒体の前記第１の端部と動作可能に当接するデテクタ適用パッドと （ｉｉｉ）前記デテクタ適用パッドと動作可能に当接し前記クロマトグラフ ィー媒体の前記第１の端部と間接的に当接して液体を通過させるための伝導手段 と （ｉｖ）前記クロマトグラフィー媒体の前記第２の端部と動作可能に当接し て液体を吸い取るための吸収手段を含み、 （ｂ）テストしようとするサンプルを受け入れるためのサンプル調製帯域を含 む第２の対置可能な部材は前記第１の対置可能な部材と着脱可能になして前記第 １と第２の対置可能な部材を当接させ液体を前記第２の対置可能な部材から前記 第１の対置可能な部材へ移し換えるようになすことを含み、 前記第１と第２の対置可能な部材は、前記第１と第２の対置可能な部材が対置 していないときにサンプルを前記第２の対置可能な部材の前記サンプル調製帯域 へ適用でき、また第１と第２の対置可能な部材を対置させることで前記サンプル 調製帯域が前記伝導手段と当接して前記伝導手段を通して流すためにテストしよ うとするサンプルを伝導手段へさらに前記デテクタ適用パッドを介して前記クロ マトグラフィー媒体の前記第１の端部へ適用して、前記分析物の検出のための試 薬を前記サンプルに加えるように構成してあり、前記デテクタ適用パッドを通り 前記伝導手段から前記クロマトグラフィー媒体の前記第１の端部への流れが前記 吸収手段による液体の吸収で支援されるようになしてあるクロマトグラフィー検 定装置。 ２．前記第２の対置可能な部材上の前記サンプル調製帯域は前記サンプルの処理 のために少なくとも一つの試薬を含む請求の範囲第１項に記載のクロマトグラフ ィー検定装置。 ３．前記第１の対置可能な部材上の前記デテクタ適用パッドは、前記デテクタ適 用パッドへの水性液体の添加により溶解可能な形状で前記分析物に対する第１の 特異的結合パートナーを含み、前記第１の特異的結合パートナーは検出可能なラ ベルで標識してあり、前記クロマトグラフィー媒体はさらに前記クロマトグラフ ィー媒体の面積より面積が実質的に小さい検出帯域を含み、前記検出帯域はこれ に不動化して前記分析物に対する特異的結合パートナーを含み、前記サンプル内 に分析物が存在する場合には前記第１の特異的結合パートナーと前記分析物と前 記第２の特異的結合パートナーを含む三つ組複合体が形成されるように成してあ る請求の範囲第１項に記載のクロマトグラフィー検定装置。 ４．前記第１と第２の対置可能な部材は水性液体に対して防水性のヒンジで接合 される請求の範囲第１項に記載のクロマトグラフィー検定装置。 ５．サンプル内の分析物の検出および／または同定のための検査キットであって 、別々の容器に （ａ）請求の範囲第１項に記載のクロマトグラフィー検定装置 （ｂ）前記デテクタ適用パッドに適用する検出可能なラベルで標識した前記分 析物のための特異的結合パートナー を含む検査キット。 ６．サンプル内の分析物の検出および／または同定のための検査キットであって 、別々の容器に （ａ）請求の範囲第１項に記載のクロマトグラフィー検定装置 （ｂ）前記第１の対置可能な部材上の前記デテクタ適用パッドに適用する検出 可能なラベルで標識した前記分析物のための第１の特異的結合パートナーを溶解 するための水性液体 を含む検査キット ７．水性サンプルの分析物の検出および／または同定のための方法であって、 （ａ）前記水性液体を、請求の範囲第１項に記載のクロマトグラフィー検定装置 の前記第２の対置可能な部材上の前記サンプル調製帯域に、前記第１と第２の対 置可能な部材が当接していないときに、適用する段階と、 （ｂ）前記サンプルの適用に続けて、前記クロマトグラフィー検定装置の前記第 １と第２の対置可能な部材を当接させて、前記サンプルが前記第１の対置可能な 部材上の前記デテクタ適用パッドにおいて前記特異的結合パートナーを溶解する 水性液体を含み、また前記サンプルと前記溶解した標識した特異的結合パートナ ーが前記第１の対置可能な部材の前記伝導手段に適用されるように成す段階と、 （ｃ）次に前記サンプルと前記標識した特異的結合パートナーが前記デテクタ適 用パッドから前記クロマトグラフィー媒体の少なくとも一部を通って移動して、 前記クロマトグラフィー媒体に結合することによる前記テストサンプル内の前記 分析物の存在および／または量の検出可能な指標を前記標識した特異的結合パー トナーが示し、前記クロマトグラフィー媒体を通る流れが前記吸収手段による液 体の吸収で支援されるように成す段階と、 （ｄ）次に前記分析物を検出および／または同定するため前記クロマトグラフィ ー媒体の少なくとも一部に結合した前記標識した特異的結合パートナーを観察お よび／または測定する段階 を含む方法。 ８．サンプル中の分析物の検出および／または決定のためのクロマトグラフィー 検定装置であって、 （ａ）第１の対置可能な部材は （ｉ）第１の端部と第２の端部を有するクロマトグラフィー媒体と （ｉｉ）前記クロマトグラフィー媒体の前記第１の端部と動作可能に当接す る第１のデテクタ適用パッドであって、前記第１のデテクタ適用パッドは前記第 １のデテクタ適用パッドへ水性液体の添加により溶解可能な形状で前記分析物に 対する第１の特異的結合パートナーを含み、前記第１の特異的結合パートナーは 検出可能なラベルで標識してあることと （ｉｉｉ）前記第１のデテクタ適用パッドと動作可能に当接して液体を通過 させるための伝導手段であって、前記第１のデテクタ適用パッドが前記伝導手段 と前記クロマトグラフィー媒体の第１の端部を連結することで前記伝導手段から 前記第１のデテクタ適用パッドを通り前記クロマトグラフィー媒体の前記第１の 端部へ液体が流れるようにすることと （ｉｖ）前記クロマトグラフィー媒体の前記第２の端部と動作的に当接して 液体を吸収するための吸収手段を含み、 （ｂ）前記第１の対置可能な部材に取り付け可能な第２の対置可能な部材であ って、前記第１と第２の対置可能な部材が当接し液体が前記第２の対置可能な部 材から前記第１の対置可能な部材へ流れるように成し、前記第２の対置可能な部 材は、 （ｉ）検定しようとするサンプルを受け入れるためのサンプル調製帯域と （ｉｉ）前記サンプル調製帯域と動作可能に当接する第２のデテクタ適用パ ッドであって、前記第２のデテクタ適用パッドは前記サンプル適用パッドへのサ ンプルの添加により溶解可能な形状で前記分析物に対する第２の特異的結合パー トナーを含み、前記第２の特異的結合パートナーは検出可能なラベルで標識され 、前記第２のデテクタ適用パッドは前記第２の対置可能な部材上の前記サンプル 適用パッドに近い位置へ配置して前記サンプル適用パッドへのサンプルの適用で 前記第２の特異的結合パートナーを溶解し前記サンプル調製帯域が前記サンプル と前記第２の特異的結合パートナーを含むように成すことを含み、 前記第１と第２の対置可能な部材は、前記第１と第２の対置可能な部材が当接 していないときに前記サンプル調製帯域へサンプルを適用することができ、また 前記第１と第２の対置可能な部材を当接させることで前記第２の対置可能な部材 上の前記サンプル調製帯域が前記第１の対置可能な部材上の前記伝導手段と当接 して、テストしようとする前記サンプルと前記第２の特異的結合パートナーを前 記伝導手段に適用して前記伝導手段を通りさらに前記クロマトグラフィー媒体の 前記第１の端部へ前記第１のデテクタ適用パッドを通して流して前記第１の特異 的結合パートナーを前記サンプルと前記第２の特異的結合パートナーに加え、前 記伝導手段から前記第１のデテクタ適用パッドを通り前記クロマトグラフィー媒 体の前記第１の端部への流れが前記吸収手段による液体吸収により支援されるよ うに構成してあるクロマトグラフィー検定装置。 ９．前記第２の対置可能な部材上の前記サンプル調製帯域はサンプルを前記サン プル調製帯域に適用する前に前記サンプルの処理を行うための少なくとも一つの 試薬を含む請求の範囲第８項に記載のクロマトグラフィー検定装置。 １０．前記第１と第２のデテクタ適用パッドにおいて前記分析物のための前記第 １と第２の特異的結合パートナーは同一であり前記第１と第２の特異的結合パー トナーを標識する前記検出可能なラベルは同一である請求の範囲第８項に記載の クロマトグラフィー検定装置。 １１．前記同一の検出可能なラベルは視覚的に検出可能なラベルである請求の範 囲第１０項に記載のクロマトグラフィー検定装置。 １２．前記第１の対置可能な部材上の前記クロマトグラフィー媒体は前記クロマ トグラフィー媒体より面積において実質的に小さい検出帯域をさらに含み、前記 検出帯域は前記分析物に対する第３の特異的結合パートナーを不動化して含み、 分析物が前記サンプル中に存在する場合、（１）前記第１と第２の特異的結合パ ートナーのいずれか、（２）前記分析物、（３）前記不動化してある第３の特異 的結合パートナーを含む三つ組複合体が前記検出帯域に形成する請求の範囲第８ 項に記載のクロマトグラフィー検定装置。 １３．サンプル内の分析物の検出および／または同定のための検査キットであっ て、別々の容器に （ａ）請求の範囲第８項に記載のクロマトグラフィー検定装置 （ｂ）前記分析物に対する前記第１の特異的結合パートナーと前記分析物に 対する前記第２の特異的結合パートナーの少なくとも一方を溶解するための、前 記第１の対置可能な部材上の前記第１のデテクタ適用パッドと前記第２の対置可 能な部材上の前記第２のデテクタ適用パッドの少なくとも一方へ適用する水性液 体 を含む検査キット。 １４．水性サンプルの分析物の検出および／または同定のための方法であって、 （ａ）前記サンプルを、請求の範囲第８項に記載のクロマトグラフィー検定装置 の前記第２の対置可能な部材上の前記サンプル調製帯域に、前記第１と第２の対 置可能な部材が当接していないときに、適用する段階と、 （ｂ）前記サンプルの適用に続けて、前記クロマトグラフィー検定装置の前記第 １と第２の対置可能な部材を当接させて、 （ｉ）前記第２の対置可能な部材上の前記サンプル調製帯域が前記サンプルと 前記第２の特異的結合パートナーの混合物を前記第１の対置可能な部材上の前記 伝導手段に適用し、 （ｉｉ）前記サンプルと前記第２の特異的結合パートナーの前記混合物が前記 伝導手段を通って流れて前記第１の対置可能な部材上の前記第１のデテクタ適用 パッドに到達し、 （ｉｉｉ）前記サンプルと前記第２の特異的結合パートナーの前記混合物が前 記第１のデテクタ適用パッドに適用されて前記第１の特異的結合パートナーを溶 解して前記サンプルと前記第１の特異的結合パートナーと前記第２の特異的結合 パートナーの混合物を形成するようになす段階と、 （ｃ）次に前記サンプルと前記第１の特異的結合パートナーと前記第２の特異的 結合パートナーの前記混合物を前記第１のデテクタ適用パッドから前記クロマト グラフィー媒体の少なくとも一部を通って移動させることにより前記第１と第２ の標識した特異的結合パートナーの少なくとも一方は前記クロマトグラフィー媒 体に結合することで前記テストサンプル内の分析物の存在および／または量の検 出可能な指標を提供し、前記クロマトグラフィー媒体を通る流れが前記吸収手段 による液体の吸収で支援される段階と、 （ｄ）次に前記分析物を検出および／または同定するために前記クロマトグラフ ィー媒体の少なくとも一部に結合した前記第１または第２の特異的結合パートナ ーの少なくとも一方を観察または測定する段階 を含む方法。 １５．サンプル内の分析物の検出および／または同定のためのクロマトグラフィ ー検定装置であって、 （ａ）第１の対置可能な部材は （ｉ）第１の端部と第２の端部を有するクロマトグラフィー媒体と、 （ｉｉ）前記クロマトグラフィー媒体の前記第１の端部と動作可能に当接し て液体を通過させるための伝導手段とを含み、 （ｂ）前記第１の対置可能な部材と接続可能な第２の対置可能な部材は前記第 １と第２の対置可能な部材を対置させて液体を前記第２の対置可能な部材から前 記第１の対置可能な部材へ移し換えるように成してあり、前記第２の対置可能な 部材は （ｉ）検定しようとするサンプルを受け入れるためのサンプル調製帯域と、 （ｉｉ）前記第２の対置可能な部材上の前記サンプル調製帯域から離して液 体を吸い取るための吸収手段を含み、 前記第１と第２の対置可能な部材は前記第１と第２の対置可能な部材が対置し ていないときに前記第２の対置可能な部材上の前記サンプル調製帯域にサンプル を適用することができ、前記第１と第２の対置可能な部材を対置させることで前 記第２の対置可能な部材上の前記サンプル調製帯域が前記第１の対置可能な部材 上の前記吸収手段と動作可能に当接して、前記吸収手段を通って前記クロマトグ ラフィー媒体の前記第１の端部へ流れるように検定しようとする前記サンプルを 前記吸収手段に適用し、また前記吸収手段を前記クロマトグラフィー媒体の第２ の端部と動作可能に当接させて前記クロマトグラフィー媒体の前記第２の端部か ら液体を吸い取り前記第１の端部から前記第２の端部へ前記クロマトグラフィー 媒体を通る液体の流れを支援するように構成される方法。 １６．サンプル内の分析物の検出および／または同定のためのクロマトグラフィ ー検定装置であって、 （ａ）第１の対置可能な部材は （ｉ）検定しようとするサンプルを受け入れるためのサンプル調製帯域と、 （ｉｉ）第１と第２の端部を有するクロマトグラフィー媒体と、 （ｉｉｉ）前記サンプル調製帯域および前記クロマトグラフィー媒体の第１ の端部と動作可能に当接して液体を流すことのできる伝導手段であって前記伝導 手段は前記サンプル調製帯域と前記クロマトグラフィー媒体を連結して前記サン プル調製帯域から前記伝導手段を経由して前記クロマトグラフィー媒体の前記第 １の端部へ液体を流せるように成してあることを含み、 （ｂ）前記第１の対置可能な部材と接続可能な第２の対置可能な部材は前記第 １と第２の対置可能な部材を対置させて前記第２の対置可能な部材から前記第１ の対置可能な部材へ液体を移し換えるように成してあり、前記第２の対置可能な 部材は （ｉ）前記第１と第２の対置可能な部材を対置させたときに前記第１の対置 可能な部材上の前記サンプル調製帯域へ液体を適用するためのアプリケータであ って、前記アプリケータへ水性液体の添加により溶解可能な形状で検出可能なラ ベルで標識した分析物のための特異的結合パートナーを含むアプリケータと、 （ｉｉ）前記第１と第２の対置可能な部材が対置していないときに前記アプ リケータから離して液体を吸い取るための吸収手段とを含み、 前記第１と第２の対置可能な部材は前記第１と第２の対置可能な部材が対置し ていないときに前記第１の対置可能な部材上の前記サンプル調製帯域にサンプル を適用でき、また前記第１と第２の対置可能な部材を対置させることで前記第２ の対置可能な部材上の前記アプリケータが前記第１の対置可能な部材上の前記サ ンプル調製帯域と動作可能に当接して、前記サンプルが前記サンプル調製帯域に 加えられたときに、前記分析物のための前記標識した特異的結合パートナーが溶 解するように成し、また前記第２の対置可能な部材上の前記吸収手段が前記第１ の対置可能な部材上の前記クロマトグラフィー媒体の前記第２の端部と動作可能 に当接して前記クロマトグラフィー媒体から液体を吸い取り前記クロマトグラフ ィー媒体を通る前記アプリケータと前記サンプル調製帯域からの流れを支援する ように成してあるクロマトグラフィー検定装置。 １７．サンプル中の分析物の検出および／または同定のためのクロマトグラフィ ー検定装置であって、 （ａ）第１の対置可能な部材は （ｉ）第１の端部と第２の端部を有するクロマトグラフィー媒体と、 （ｉｉ）前記クロマトグラフィー媒体の前記第１の端部と動作可能に当接し て液体を通過させるための伝導手段とを含み、 （ｂ）前記第１の対置可能な部材と接続可能な第２の対置可能な部材は前記第 １と第２の対置可能な部材を対置させて液体を前記第２の対置可能な部材から前 記第１の対置可能な部材へ移し換えるように成してあり、前記第２の対置可能な 部材は （ｉ）前記第１と第２の対置可能な部材を対置させたときに前記第１の対置 可能な部材上の前記サンプル調製帯域へ液体を適用するための第１のアプリケー タと （ｉｉ）前記第１と第２の対置可能な部材を対置させたときに前記第１の対 置可能な部材上の前記伝導手段へ液体を適用するために前記第１のアプリケータ から前記第２の対置可能な部材上で離してある第２のアプリケータと、 （ｉｉｉ）前記第１のアプリケータと前記第２のアプリケータから前記第２ の対置可能な部材上で離してあり液体を吸い取るためのアプリケータであって、 前記第２のアプリケータは第２の対置可能な部材上で前記第１と第２の対置可能 な部材が対置していないときに相互に動作可能に当接しないように配置してあり 、前記吸収手段は前記第２の対置可能な部材上で前記第１と第２の対置可能な部 材を対置させたときに前記クロマトグラフィー媒体の前記第２の端部と動作可能 に当接するように配置してあることを含み、 前記第１と第２の対置可能な部材は前記第１と第２の対置可能な部材を対置さ せることで前記第１の対置可能な部材上の前記伝導手段が前記第２の対置可能な 部材上の前記第１のアプリケータと動作可能に当接し、また前記伝導手段が前記 第２の対置可能な部材上の前記第２のアプリケータと動作可能に当接することに よって、前記第１と第２のアプリケータが相互に間接的に動作可能に当接して、 前記第１と第２のアプリケータの内容が前記伝導手段と前記クロマトグラフィー 媒体を通って流れ、前記伝導手段と前記クロマトグラフィー媒体を通る流れが前 記吸収手段による液体の吸収で支援されるように成してあるクロマトグラフィー 検定装置。 １８．前記第２の対置可能な部材上の前記第１のアプリケータは前記第１と第２ の対置可能な部材が対置していないときにサンプルを受け入れるためのサンプル 適用パッドを含み、前記第２の対置可能な部材上の前記第２のアプリケータは前 記分析物の検出のために少なくとも一つの検出試薬を適用することのできるデテ クタ適用パッドを含み、これによって前記第１と第２の対置可能な部材を対置さ せたときに前記サンプル適用パッドの内容と前記デテクタ適用パッドの内容が前 記第１の対置可能な部材上の前記伝導手段に適用される請求の範囲第１７項に記 載のクロマトグラフィー検定装置。 １９．前記第２の対置可能な部材上の前記デテクタ適用パッドは前記デテクタ適 用パッドへ水性液体の添加により溶解可能な形状で前記分析物に対する第１の特 異的結合パートナーを含み、前記第１の特異的結合パートナーは検出可能なラベ ルで標識され、前記第１の対置可能な部材上の前記クロマトグラフィー媒体はさ らに、前記クロマトグラフィー媒体より面積的に実質的に小さい検出帯域を含み 、前記検出帯域はここに不動化してある前記分析物に対する第２の特異的結合パ ートナーを含み、前記サンプル中に分析物が存在する場合、前記第１の特異的結 合パートナーと前記分析物と前記第２の特異的結合パートナーを含む三つ組複合 体を形成するように成してある請求の範囲第１８項に記載のクロマトグラフィー 検定装置。 ２０．サンプル内の分析物の検出および／または同定のための検査キットであっ て、別々の容器に （ａ）請求の範囲第１７項に記載のクロマトグラフィー検定装置と、 （ｂ）検出可能なラベルで標識してあり前記第２の対置可能な部材上の前記第 ２のアプリケータへ適用する前記分析物に対する特異的結合パートナー を含む検査キット。 ２１．サンプル内の分析物の検出および／または同定のための検査キットであっ て、別々の容器に （ａ）請求の範囲第１９項に記載のクロマトグラフィー検定装置と、 （ｂ）検出可能なラベルで標識した前記分析物に対する前記特異的結合パート ナーを溶解し前記第２の対置可能な部材上の前記デテクタ適用パッドへ適用する 水性液体 を含む検査キット。 ２２．水性サンプル内の分析物の検出および／または同定のための方法であって 、 （ａ）請求の範囲第１９項に記載のクロマトグラフィー検定装置の前記第２の 対置可能な部材上の前記サンプル適用パッドに、前記第１と第２の対置可能な部 材が当接していないときに前記サンプルを適用する段階と、 （ｂ）前記サンプルの適用に続けて、前記クロマトグラフィー検定装置の前記 第１と第２の対置可能な部材を対置させ、 （ｉ）前記第２の対置可能な部材上の前記デテクタ適用パッドにおいて前記 特異的結合パートナーを溶解する前記水性液体を前記サンプルが含み、 （ｉｉ）前記サンプルと前記溶解した標識した特異的結合パートナーを、前 記サンプル適用パッドと前記第１の対置可能な部材上の前記伝導手段の間の当接 および前記デテクタ適用パッドと前記伝導手段の間の当接の結果として、前記ク ロマトグラフィー媒体の前記第１の端部に適用し、 （ｉｉｉ）前記第２の対置可能な部材上の前記吸収手段を前記第１の対置可 能な部材上の前記クロマトグラフィー媒体の前記第２の対置可能な部材と動作可 能に当接して配置して前記サンプル適用パッドと前記デテクタ適用パッドから前 記クロマトグラフィー媒体を通る液体の流れを支援する段階と、 （ｃ）次に前記サンプルと前記標識した特異的結合パートナーを前記クロマト グラフィー媒体の少なくとも一部を通って移動させることで、前記標識した特異 的結合パートナーは前記クロマトグラフィー媒体に結合することで前記分析物の 存在および／または量の検出可能な指標を提供する段階と、 （ｄ）次に前記分析物を検出および／または同定するために前記クロマトグラ フィー媒体の少なくとも一部に結合した前記標識した特異的結合パートナーを観 察および／または測定する段階 を含む方法。 ２３．サンプル内の分析物の検出および／または同定のためのクロマトグラフィ ー検定装置であって、 （ａ）第１の対置可能な部材は、 （ｉ）第１の端部と第２の端部を有するクロマトグラフィー媒体と、 （ｉｉ）前記クロマトグラフィー媒体の前記第１の端部と動作可能に当接し 液体を通過させるための伝導手段と、 （ｉｉｉ）前記伝導手段と直接的に当接し前記分析物の検出用に少なくとも 一つの試薬を含み前記第１の対置可能な部材上に配置して前記クロマトグラフィ ー媒体の前記第１の端部と間接的に当接するように成したデテクタ適用パッドと を含み、 （ｂ）前記第１の対置可能な部材に取り付け可能な第２の対置可能な部材は、 前記第１と第２の対置可能な部材を対置させ前記第２の対置可能な部材から前記 第１の対置可能な部材へ液体を移し換えるように成してあり、 （ｉ）サンプルを適用するサンプル適用パッドと、 （ｉｉ）前記第２の対置可能な部材上の前記サンプル適用パッドから離して ある液体を吸収するための吸収手段とを含み、 前記第１と第２の対置可能な部材は前記第１と第２の対置可能な部材が対置さ れないときに前記第２の対置可能な部材上の前記サンプル適用パッドにサンプル を適用できるように構成しまた前記第１と第２の対置可能な部材を対置すること により （１）前記第２の対置可能な部材上の前記サンプル適用パッドが前記第１の 対置可能な部材上の前記デテクタ適用パッドさらに前記クロマトグラフィー媒体 の前記第１の端部へ前記デテクタ適用パッドと直接的に当接する前記第１の対置 可能な部材上の前記伝導手段を介して前記サンプルを適用し、 （２）前記第２の対置可能な部材上の前記吸収手段は前記第１の対置可能な 部材上の前記クロマトグラフィー媒体の前記第２の端部と動作可能に当接して前 記伝導手段と前記クロマトグラフィー媒体を通る流れが前記吸収手段による液体 の吸収で支援されるように成してあるクロマトグラフィー検定装置。 ２４．前記第１の対置可能な部材上の前記デテクタ適用パッドは前記デテクタ適 用パッドへの水性液体の添加により溶解可能な形状で前記分析物に対する第１の 特異的結合パートナーを含み、前記第１の特異的結合パートナーは検出可能なラ ベルで標識され、前記第１の対置可能な部材上の前記クロマトグラフィー媒体は 前記クロマトグラフィー媒体より面積において実質的に小さい検出帯域をさらに 含み、前記検出帯域は前記分析物に対する第２の特異的結合パートナーをこれに 不動化して含んで、分析物が前記サンプル内に存在する場合、前記第１の特異的 結合パートナーと前記分析物と前記第２の特異的結合パートナーを含む三つ組複 合物が前記検出帯域に形成する請求の範囲第２３項に記載のクロマトグラフィー 検定装置。 ２５．サンプルを適用した後前記第２の対置可能な部材上の前記サンプル適用パ ッドの内容は水性液体を含み、前記第１の対置可能な部材上の前記デテクタ適用 パッドに適用した水性液体は前記サンプル適用パッドの内容を含む請求の範囲第 ２４項に記載のクロマトグラフィー検定装置。 ２６．サンプル内の分析物の検出および／または同定のための検査キットは、 別々の容器に、 （ａ）請求の範囲第２４項のクロマトグラフィー検定装置と、 （ｂ）前記第１の対置可能な部材上の前記デテクタ適用パッドに適用する検出 可能なラベルで標識した前記分析物のための特異的結合パートナー を含む検査キット。 ２７．水性サンプル内の分析物の検出および／または同定のための方法であって 、 （ａ）請求の範囲第２４項に記載のクロマトグラフィー検定装置の前記第２の 対置可能な部材上の前記サンプル適用パッドへ、前記第１と第２の対置可能な部 材が対置していないときに前記サンプルを適用する段階と、 （ｂ）前記サンプルの適用段階に続けて、前記クロマトグラフィー検定装置の 前記第１と第２の対置可能な部材を対置させ、 （ｉ）前記サンプルが前記第１の対置可能な部材上の前記デテクタ適用パッ ドに前記特異的結合パートナーを溶解する水性液体を含み、 （ｉｉ）前記サンプルと前記溶解した標識した特異的結合パートナーを、前 記サンプル適用パッドと前記デテクタ適用パッドの間の当接の結果として、前記 伝導手段を通る流れにより前記クロマトグラフィー媒体の前記第１の端部へ適用 し、 （ｉｉｉ）前記第２の対置可能な部材の前記吸収手段を前記第１の対置可能 な部材上の前記クロマトグラフィー媒体の前記第２の端部と動作可能に当接して 前記クロマトグラフィー媒体を通る前記サンプル適用パッドと前記デテクタ適用 パッドからの液体の流れを支援するように成す段階と、 （ｃ）次に前記サンプルと前記標識した特異的結合パートナーが前記クロマト グラフィー媒体の少なくとも一部を通って移動できるようにして前記標識した特 異的結合パートナーは前記クロマトグラフィー媒体に結合することで前記分析物 の存在および／または量の検出可能な指標を提供する段階と、 （ｄ）次に前記分析物を検出および／または同定するために前記クロマトグラ フィー媒体の少なくとも一部に結合した前記標識した特異的結合パートナーを観 察および／または測定する段階と を含む方法。 ２８．サンプル内の分析物の検出および／または同定のためのクロマトグラフィ ー検定装置であって、 （ａ）第１の対置可能な部材は、 （ｉ）第１と第２の端部を有するクロマトグラフィー媒体と、 （ｉｉ）前記クロマトグラフィー媒体の前記第１の端部と直接当接し前記分 析物の検出用の少なくとも一つの試薬を含むデテクタ適用パッドとを含み、 （ｂ）前記第１の対置可能な部材に取り付け可能な第２の対置可能な部材は、 前記第１と第２の対置可能な部材を対置させて前記第２の対置可能な部材から前 記第１の対置可能な部材へ液体を移し換えるように成してあり、前記第２の対置 可能な部材は （ｉ）検定しようとするサンプルを受け入れるためのサンプル適用パッドと 、 （ｉｉ）前記サンプル適用パッドから前記第２の対置可能な部材上で離して ある液体を吸い取るための吸収手段を含み、 前記第１と第２の対置可能な部材は、前記第１と第２の対置可能な部材が対置 していないときに前記第２の対置可能な部材上の前記サンプル適用パッドへサン プルを適用することができ、また前記第１と第２の対置可能な部材を当接させる ことで前記第１の対置可能な部材上の前記デテクタ適用パッドと前記第２の対置 可能な部材上のサンプル適用パッドが、前記クロマトグラフィー媒体の前記第１ の端部に直接隣接する前記デテクタ適用パッドの部分を除いて当接し、前記サン プル適用パッドから前記デテクタ適用パッドへ液体を移し、同時に前記サンプル 適用パッドから前記クロマトグラフィー媒体への直接的な液体の移動を最小限に 抑さえるように構成され、 前記第１と第２の対置可能な部材を対置させることで、 （１）テストしようとするサンプルを前記第１の対置可能な部材上の前記デテ クタ適用パッドへさらに前記クロマトグラフィー媒体の第１の端部へ適用し、 （２）前記第２の対置可能な部材上の前記吸収手段を前記クロマトグラフィー 媒体の前記第２の端部と動作可能に当接させて前記デテクタ適用パッドと前記ク ロマトグラフィー媒体を通る流れが前記吸収手段による液体の吸収で支援される ように成してあるクロマトグラフィー検定装置。 ２９．前記第１の対置可能な部材上の前記デテクタ適用パッドは前記デテクタ適 用パッドへの水性液体の添加により溶解可能な形状で前記分析物に対する第１の 特異的結合パートナーを含み、前記第１の特異的結合パートナーは検出可能なラ ベルで標識され、前記第１の対置可能な部材上の前記クロマトグラフィー媒体は さらに前記クロマトグラフィー媒体より面積において実質的に小さい検出帯域を 含み、前記検出帯域は不動化した前記分析物に対する第２の特異的結合パートナ ーを含み、前記サンプル内に分析物が存在する場合、前記第１の特異的結合パー トナーと前記分析物と前記第２の特異的結合パートナーを含む三つ組複合体が前 記検出帯域に形成するように成してある請求の範囲第２８項に記載のクロマトグ ラフィー検定装置。 ３０．前記第２の対置可能な部材上の前記サンプル適用パッドの内容はサンプル を適用した後水性液体を含み、前記第１の対置可能な部材上の前記デテクタ適用 パッドに適用した水性液体は前記デテクタ適用パッドへ移動した前記サンプル適 用パッドの内容を含む請求の範囲第２８項に記載のクロマトグラフィー検定装置 。 ３１．サンプル内の分析物の検出および／または同定のための検査キットは、別 々の容器に、 （ａ）請求の範囲第２８項のクロマトグラフィー検定装置と、 （ｂ）前記第１の対置可能な部材上の前記デテクタ適用パッドに適用する検出 可能なラベルで標識した前記分析物のための特異的結合パートナー を含む検査キット。 ３２．水性サンプル内の分析物の検出および／または同定のための方法であって 、 （ａ）請求の範囲第３０項に記載のクロマトグラフィー検定装置の前記第２の 対置可能な部材上の前記サンプル適用パッドへ、前記第１と第２の対置可能な部 材が対置していないときに前記サンプルを適用する段階と、 （ｂ）前記サンプルの適用段階に続けて、前記クロマトグラフィー検定装置の 前記第１と第２の対置可能な部材を対置させ、 （ｉ）前記サンプルが前記第１の対置可能な部材上の前記デテクタ適用パッ ドに前記特異的結合パートナーを溶解する水性液体を含み、 （ｉｉ）前記サンプルと前記溶解した標識した特異的結合パートナーを、前 記第２の対置可能な部材上の前記サンプル適用パッドと前記第１の対置可能な部 材上の前記デテクタ適用パッドの間の当接の結果として、前記クロマトグラフィ ー媒体の前記第１の端部へ適用し、 （ｉｉｉ）前記第２の対置可能な部材の前記吸収手段を前記第１の対置可能 な部材上の前記クロマトグラフィー媒体の前記第２の端部と動作可能に当接して 前記クロマトグラフィー媒体を通る前記サンプル適用パッドと前記デテクタ適用 パッドからの液体の流れを支援するように成す段階と、 （ｃ）次に前記サンプルと前記標識した特異的結合パートナーが前記クロマト グラフィー媒体の少なくとも一部を通って移動できるようにして、前記標識した 特異的結合パートナーは前記クロマトグラフィー媒体に結合することで前記分析 物の存在および／または量の検出可能な指標を提供する段階と、 （ｄ）次に前記分析物を検出および／または同定するために前記クロマトグラ フィー媒体の少なくとも一部に結合した前記標識した特異的結合パートナーを観 察および／または測定する段階と を含む方法。 ３３．サンプル内の分析物の検出および／または同定のためのクロマトグラフィ ー検定装置であって、 （ａ）第１の対置可能な部材は、 （ｉ）第１と第２の端部を有するクロマトグラフィー媒体と、 （ｉｉ）前記第１と第２の対置可能な部材が対置していないときに前記クロ マトグラフィー媒体の前記第１の端部と動作可能に当接しないような液体を通過 させるための前記第１の対置可能な部材上に配置した伝導手段を含み、 （ｂ）前記第１の対置可能な部材に取り付け可能な第２の対置可能な部材は、 前記第１と第２の対置可能な部材を対置させて前記第２の対置可能な部材から前 記第１の対置可能な部材へ液体を移し換えるように成してあり、前記第２の対置 可能な部材は （ｉ）前記第１と第２の対置可能な部材を対置させたときに前記第１の対置 可能な部材上の前記伝導手段に液体を適用するための第１のアプリケータと、 （ｉｉ）前記第１と第２の対置可能な部材を対置させたときに前記第１の対 置可能な部材上の前記伝導手段へ液体を適用するための前記第１のアプリケータ から前記第２の対置可能な部材上で離してある第２のアプリケータと、 （ｉｉｉ）前記第１と第２のアプリケータから前記第２の対置可能な部材上 で離してある液体を吸い取るための吸収手段を含み、前記第１と第２のアプリケ ータは前記第２の対置可能な部材上で前記第１と第２の対置可能な部材が対置さ れないときに相互に動作可能に当接しないように配置され、 前記第１と第２の対置可能な部材は、前記第１と第２の対置可能な部材を対置 させることで、 （１）前記第１の対置可能な部材上の前記伝導手段を前記第２の対置可能な部 材上の前記第１のアプリケータと動作可能に当接させ、前記伝導手段を前記第２ の対置可能な部材上の前記第２のアプリケータと動作可能に当接させ、さらに前 記第２のアプリケータを前記クロマトグラフィー媒体の前記第１の端部と動作可 能に当接させることにより、前記第１と第２のアプリケータを相互に間接的に動 作可能に当接させて、前記クロマトグラフィー媒体に前記第１と第２のアプリケ ータの内容を適用し、前記第１と第２のアプリケータの内容が前記クロマトグラ フィー媒体を流れるように成し、 （２）前記第２の対置可能な部材上の前記吸収手段を前記クロマトグラフィー 媒体の第２の端部と動作可能に当接させて、前記第１と第２のアプリケータから 前記伝導手段を通りさらに前記クロマトグラフィー媒体を通る液体の流れを前記 吸収手段による液体の吸収が支援するように成してあるクロマトグラフィー検定 装置。 ３４．前記第２の対置可能な部材上の前記第１のアプリケータは前記第１と第２ の対置可能な部材が対置されないときにサンプルを適用するためのサンプル適用 パッドを含み、前記第２の対置可能な部材上の前記第２のアプリケータは少なく とも一つの検出試薬を適用可能なデテクタ適用パッドを含み、これによって前記 第１と第２の対置可能な部材を対置させたときに、前記サンプル適用パッドと前 記デテクタ適用パッドの内容が前記伝導手段を介して前記クロマトグラフィー媒 体へ適用される請求の範囲第３３項に記載のクロマトグラフィー検定装置。 ３５．前記第２の対置可能な部材上の前記デテクタ適用パッドは前記デテクタ適 用パッドへの水性液体の添加により溶解可能な形状で前記分析物に対する第１の 特異的結合パートナーを含み、前記第１の特異的結合パートナーは検出可能なラ ベルで標識され、前記第１の対置可能な部材上の前記クロマトグラフィー媒体は さらに、前記クロマトグラフィー媒体より面積において実質的に小さい検出帯域 を含み、前記検出帯域はこれに不動化した前記分析物に対する特異的結合パート ナーを含み、前記サンプル中に分析物が存在する場合は、前記第１の特異的結合 パートナーと前記分析物と前記第２の特異的結合パートナーを含む三つ組複合体 が前記検出帯域において形成する請求の範囲第３４項に記載のクロマトグラフィ ー検定装置。 ３６．サンプル内の分析物の検出および／または同定のための検査キットは、別 々の容器に、 （ａ）請求の範囲第３３項のクロマトグラフィー検定装置と、 （ｂ）前記第２の対置可能な部材上の前記第２のアプリケータに適用する検出 可能なラベルで標識した前記分析物のための特異的結合パートナー を含む検査キット。 ３７．水性サンプル内の分析物の検出および／または同定のための方法であって 、 （ａ）請求の範囲第３４項に記載のクロマトグラフィー検定装置の前記第２の 対置可能な部材上の前記第１のアプリケータへ、前記第１と第２の対置可能な部 材が対置していないときに前記サンプルを適用する段階と、 （ｂ）前記サンプルの適用段階に続けて、前記クロマトグラフィー検定装置の 前記第１と第２の対置可能な部材を対置させ、 （ｉ）前記サンプルが前記第２の対置可能な部材上の前記デテクタ適用パッ ドに前記標識した特異的結合パートナーを溶解する水性液体を含み、 （ｉｉ）前記サンプルと前記溶解した標識した特異的結合パートナーを、前 記第１の対置可能な部材上の前記伝導手段を介して前記クロマトグラフィー媒体 の前記第１の端部へ適用し、 （ｉｉｉ）前記第２の対置可能な部材の前記吸収手段を前記クロマトグラフ ィー媒体の前記第１の端部と動作可能に当接して、前記クロマトグラフィー媒体 を通る前記サンプル適用パッドと前記デテクタ適用パッドからの液体の流れを支 援するように成す段階と、 （ｃ）次に前記サンプルと前記標識した特異的結合パートナーが前記クロマト グラフィー媒体の少なくとも一部を通って移動できるようにして、前記標識した 特異的結合パートナーは前記クロマトグラフィー媒体に結合することで前記分析 物の存在および／または量の検出可能な指標を提供する段階と、 （ｄ）次に前記分析物を検出および／または同定するために前記クロマトグラ フィー媒体の少なくとも一部に結合した前記標識した特異的結合パートナーを観 察および／または測定する段階と を含む方法。 ３８．サンプル内の分析物の検出および／または同定のためのクロマトグラフィ ー検定装置であって、 （ａ）第１の対置可能な部材は、 （ｉ）第１と第２の端部を有するクロマトグラフィー媒体と、 （ｉｉ）前記クロマトグラフィー媒体の前記第１の端部と動作可能に当接し て液体を通過させるための伝導手段と、 （ｉｉｉ）前記クロマトグラフィー媒体の第２の端部と動作可能に当接して 液体を吸収するための吸収手段とを含み、 （ｂ）前記第１の対置可能な部材に取り付け可能な第２の対置可能な部材は、 前記第１と第２の対置可能な部材を対置させて前記第２の対置可能な部材から前 記第１の対置可能な部材へ液体を移し換えるように成してあり、前記第２の対置 可能な部材は前記第１と第２の対置可能な部材を対置させたときに前記第１の対 置可能な部材上の前記伝導手段へ液体を適用するためのアプリケータを含み、前 記アプリケータは２つの部分に分割され： （ｉ）第１の部分は前記第１と第２の対置可能な部材が対置されないときに 前記アプリケータへの水性液体の添加により溶解可能な形状で第１の特異的結合 パートナーを含み、前記第１の特異的結合パートナーは検出可能なラベルで標識 され、 （ｉｉ）第２の部分は前記分析物のための第１の特異的結合パートナーを欠 如しており、 前記第１と第２の対置可能な部材は前記第１と第２の対置可能な部材を対置さ せることで前記第２の対置可能な部材上の前記アプリケータの第２の部分ではな く第１の部分だけを前記第１の対置可能な部材上の前記伝導手段と直接的に当接 させ、前記アプリケータの前記第１の部分の内容を前記クロマトグラフィー媒体 に適用し、前記アプリケータの前記第１の部分の内容の前記クロマトグラフィー 媒体への適用に続けて前記アプリケータの前記第２の部分の内容を前記クロマト グラフィー媒体に適用するように構成してあり、前記吸収手段は前記クロマトグ ラフィー媒体から液体を吸い取って前記アプリケータから前記伝導手段と前記ク ロマトグラフィー媒体を通る液体の流れを支援するクロマトグラフィー検定装置 。 ３９．前記第１の対置可能な部材上の前記クロマトグラフィー媒体はさらに前記 クロマトグラフィー媒体より面積において実質的に小さい検出帯域を含み、前記 検出帯域は不動化した前記分析物に対する第２の特異的結合パートナーを含み、 前記サンプル内に分析物が存在する場合、前記第１の特異的結合パートナーと前 記分析物と前記第２の特異的結合パートナーを含む三つ組複合体が前記検出帯域 に形成するように成してある請求の範囲第３８項に記載のクロマトグラフィー検 定装置。 ４０．水性サンプル内の分析物の検出および／または同定のための方法であって 、 （ａ）請求の範囲第３８項に記載のクロマトグラフィー検定装置の前記第２の 対置可能な部材上の前記アプリケータへ、前記第１と第２の対置可能な部材が対 置していないときに前記サンプルを適用して前記サンプルが前記アプリケータの 前記第１と第２の部分の両方に適用されるように成す段階と、 （ｂ）前記サンプルの適用段階に続けて、前記クロマトグラフィー検定装置の 前記第１と第２の対置可能な部材を対置させ、 （ｉ）前記クロマトグラフィー検定装置の前記第２の対置可能な部材上の前 記アプリケータの前記第１の部分に適用された前記サンプルが前記アプリケータ の前記第１の部分の前記標識した特異的結合パートナーを溶解する水性液体を含 み、 （ｉｉ）前記サンプルと前記アプリケータの前記第１の部分に存在する前記 溶解した標識した特異的結合パートナーを、前記第１の対置可能な部材上の前記 伝導手段を介して前記クロマトグラフィー媒体の前記第１の端部へ適用し、 （ｉｉｉ）前記アプリケータの前記第１の部分から前記クロマトグラフィー 媒体の前記第１の端部への前記サンプルと前記溶解した標識した特異的結合パー トナーの適用に続けて、前記アプリケータの前記第２の部分に存在する前記サン プルが前記伝導手段を介して前記クロマトグラフィー媒体の前記第１の端部へ適 用される段階と、 （ｃ）次に前記サンプルと前記アプリケータの前記第１の部分からの前記溶解 した標識特異的結合パートナーに続けて、前記アプリケータの前記第２の部分か らの前記サンプルを前記クロマトグラフィー媒体の少なくとも一部を通って移動 させることで、前記標識した特異的結合パートナーの前記ラベルが前記クロマト グラフィー媒体に結合することにより前記分析物の存在および／または量の検出 可能な指標を提供し、また前記アプリケータの前記第２の部分からの前記サンプ ルが前記クロマトグラフィー媒体の少なくとも一部からの分析物に結合していな い少なくともある程度の標識した特異的結合パートナーを洗浄し、前記クロマト グラフィー媒体を通る液体の流れが前記吸収手段による前記クロマトグラフィー 媒体からの液体の吸い取りで支援される段階と、 （ｄ）次に前記分析物を検出および／または同定するために前記クロマトグラ フィー媒体の少なくとも一部に結合した前記ラベルを観察および／または測定す る段階と を含む方法。 ４１．競合法イムノアッセイによるサンプル内の免疫学的一価分析物の検出およ び同定のためのクロマトグラフィー検定装置であって、 （ａ）第１の対置可能な部材は、 （ｉ）第１の端部と第２の端部を有するクロマトグラフィー媒体であって、 前記クロマトグラフィー媒体の面積より実質的に小さい独立した部分に分析物ま たはその免疫学的類似物を不動化してあるクロマトグラフィー媒体と、 （ｉｉ）前記クロマトグラフィー媒体の前記第１の端部と動作可能に当接し て液体を通過させるための第１の伝導手段と、 （ｉｉｉ）前記クロマトグラフィー媒体の前記第２の端部と動作可能に当接 して液体を通過させるための第２の伝導手段とを含み、 （ｂ）前記第１の対置可能な部材に取り付け可能な第２の対置可能な部材は、 前記第１と第２の対置可能な部材を対置させて前記第２の対置可能な部材から前 記第１の対置可能な部材へ液体を移し換えるように成し、前記第２の対置可能な 部材は前記第１と第２の対置可能な部材が当接したときに前記第１の対置可能な 部材上の前記第１の伝導手段へ液体を適用するための第１のアプリケータを含み 、前記第１のアプリケータは前記第１のアプリケータへの第１の水性液体の添 加により溶解可能な形状で前記分析物に対する第１の特異的結合パートナーを含 み、 （ｃ）前記第１の対置可能な部材に取り付け可能な第３の対置可能な部材は、 前記第１と第３の対置可能な部材を対置させて前記第３の対置可能な部材から前 記第１の対置可能な部材へ液体を移し換えるように成し、前記第３の対置可能な 部材は （ｉ）前記第１と第３の対置可能な部材を対置させたとき前記第１の対置可 能な部材上の前記第２の伝導手段へ液体を適用するための第２のアプリケータで あって、前記第２のアプリケータは前記第２のアプリケータへ第２の水性液体の 添加により溶解可能な形状で前記分析物に対する第２の特異的結合パートナーを 含み、前記第２の特異的結合パートナーは検出可能なラベルで標識されることと 、 （ｉｉ）前記第２のアプリケータから前記第３の対置可能な部材上で離して ある液体を吸収するための吸収手段とを含み、 前記第１と第２の対置可能な部材は、前記第１と第２の対置可能な部材を対置 させることで前記第１の対置可能な部材上の前記第１の伝導手段を前記第２の対 置可能な部材上の前記第１のアプリケータと動作可能に当接させ、前記第１のア プリケータの内容を前記第１の伝導手段を介して前記クロマトグラフィー媒体に 適用しまた前記クロマトグラフィー媒体の少なくとも一部を介して吸い取ること を含み、 前記第１と第３の対置可能な部材は前記第１と第３の対置可能な部材を対置さ せることで前記第３の対置可能な部材上の吸収手段を前記第１の対置可能な部材 上の第１の伝導手段と動作可能に当接して、前記第１の伝導手段を介して前記ク ロマトグラフィー媒体から液体を吸い取り、第３の対置可能な部材上の前記第２ のアプリケータを前記第１の対置可能な部材上の前記第２の伝導手段と動作可能 に当接して、前記第２のアプリケータの内容を前記クロマトグラフィー媒体に適 用し、また前記第１と第２の対置可能な部材が前記クロマトグラフィー媒体と当 接したときに前記クロマトグラフィー媒体に適用した前記第１のアプリケータの 内容が吸い取られる前記部分に重複する前記クロマトグラフィー媒体の少なくと も一部を介して吸い取るように成してあるクロマトグラフィー検定装置。 ４２．前記第１と第２の特異的結合パートナーはそれぞれ前記分析物に対する抗 体である請求の範囲第４１項に記載のクロマトグラフィー検定装置。 ４３．前記不動化した分析物またはその類似物は前記分析物に対する特異的結合 活性を欠如した蛋白に共有結合した分析物を含む請求の範囲第４１項に記載のク ロマトグラフィー検定装置。 ４４．サンプル内の免疫学的に一価の分析物の検出および／または同定のための 検査キットであって、別々の容器に、 （ａ）請求の範囲第４１項に記載のクロマトグラフィー検定装置と、 （ｂ）前記第３の対置可能な部材上の前記第２のアプリケータに含まれる前記 分析物に対する前記第２の特異的結合パートナーを溶解するための第２の水性液 体 を含む検査キット。 ４５．水性サンプル内の免疫学的に一価の分析物の検出および／または同定のた めの方法であって、 （ａ）請求の範囲第４１項に記載のクロマトグラフィー検定装置の前記第２の 対置可能な部材上の前記第１のアプリケータに、前記第１の対置可能な部材が前 記第２の対置可能な部材または前記第３の対置可能な部材と対置されないとき、 前記第１の水性液体を含む前記サンプルを適用する段階と、 （ｂ）前記第１と第３の対置可能な部材が対置されないときに前記第３の対置 可能な部材上の前記第２のアプリケータに前記第２の水性液体を含む再構成液体 を適用する段階と、 （ｃ）前記サンプルの適用に続けて、前記クロマトグラフィー検定装置の前記 第１と第２の対置可能な部材を対置させ、前記サンプルと前記分析物に対する溶 解した第１の特異的結合パートナーを、前記第１のアプリケータと前記第１の伝 導手段の間の当接の結果として、前記第１の伝導手段さらには前記クロマトグラ フィー媒体の第１の端部へ適用する段階と、 （ｄ）次に前記サンプルと前記溶解した第１の特異的結合パートナーを前記ク ロマトグラフィー媒体の少なくとも一部を通って移動させる段階と、 （ｅ）次に前記第１と第２の対置可能な部材を引き離してこれらが対置しない ようにする段階と、 （ｆ）次に前記第１と第３の対置可能な部材を対置させて、前記溶解した標識 した第２の特異的結合パートナーを、前記第２のアプリケータと前記第２の吸収 手段の間の当接により、前記第１の対置可能な部材上の前記第２の伝導手段へさ らに前記クロマトグラフィー媒体の前記第２の端部へ適用し、また前記第３の対 置可能な部材上の前記吸収手段を前記第１の伝導手段と動作可能に当接させて前 記クロマトグラフィー媒体を通る前記第２のアプリケータからの液体の流れを支 援する段階と、 （ｇ）次に前記溶解した標識した第２の特異的結合パートナーを、前記サンプ ルと前記溶解した第１の特異的結合パートナーが流れた前記クロマトグラフィー 媒体の部分と重複する前記クロマトグラフィー媒体の少なくとも一部を通って移 動させて、前記テストサンプル中に分析物が存在する場合、前記独立した部分に 不動化してある前記分析物またはこれの免疫学的類似物に前記標識した第２の特 異的結合パートナーを結合する段階と、 （ｈ）次に前記独立した部分に結合した前記第２の特異的結合パートナーを観 察および／または測定して前記分析物を検出および／または同定する段階と を含む方法。 ４６．前記分析物と前記第１の特異的結合パートナーの間の反応を促進させるた めに、前記第２の対置可能な部材上の前記第１のアプリケータに前記サンプルを 適用することに続けて前記クロマトグラフィー検定装置をインキュベートする段 階をさらに含む請求の範囲第４５項に記載の方法。 ４７．水性サンプル内の免疫学的に一価の分析物を検出および／または同定する ための方法であって、 （ａ）請求の範囲第４１項に記載のクロマトグラフィー検定装置の前記第２の 対置可能な部材上の前記第１のアプリケータに、前記第１の対置可能な部材が前 記第２の対置可能な部材または前記第３の対置可能な部材のいずれかと対置して いないときに第１の再構成液体を適用する段階と、 （ｂ）前記第１の対置可能な部材が前記第２の対置可能な部材または前記第３ の対置可能な部材のいずれかと対置していないときに、請求の範囲第４１項に記 載のクロマトグラフィー検定装置の前記第１のアプリケータに前記サンプルを適 用する段階であって、前記第１の再構成液体と前記サンプルの組合せが前記第１ の水性液体を含む段階と、 （ｃ）前記第１と第３の対置可能な部材が対置していないときに、前記第２の 水性液体を含む第２の再構成液体を前記第３の対置可能な部材上の前記第２のア プリケータに適用する段階と、 （ｄ）サンプルの適用に続けて、前記クロマトグラフィー検定装置の前記第１ と第２の対置可能な部材を対置して、前記第１のアプリケータと前記第１の伝導 手段の間の当接の結果として、前記サンプルと前記分析物に対する前記溶解した 第１の特異的結合パートナーを前記第１の伝導手段さらには前記クロマトグラフ ィー媒体の前記第１の端部へ適用する段階と、 （ｅ）次に前記サンプルと前記溶解した第１の特異的結合パートナーを前記ク ロマトグラフィー媒体の少なくとも一部を通って移動させる段階と、 （ｆ）次に前記第１と第２の対置可能な部材が対置しないように引き離す段階 と、 （ｇ）次に前記第１と第３の対置可能な部材を対置させ、前記溶解した標識し た第２の特異的結合パートナーを、前記第２のアプリケータと前記第２の吸収手 段の間の当接により、前記第１の対置可能な部材上の前記第２の伝導手段さらに は前記クロマトグラフィー媒体の前記第２の端部へ適用し、また前記第３の対置 可能な部材上の前記吸収手段を前記第１の伝導手段と動作可能に当接して、前記 第２のアプリケータから前記クロマトグラフィー媒体を通る液体の流れを支援す る段階と、 （ｈ）次に前記溶解した標識した第２の特異的結合パートナーを前記サンプル と前記溶解した第１の特異的結合パートナーが流れた前記クロマトグラフィー媒 体の部分と重複する前記クロマトグラフィー媒体の少なくとも一部を通って移動 させることにより、テストサンプル中に分析物が存在する場合には、前記標識し た第２の特異的結合パートナーを前記独立した部分に不動化してある前記分析物 またはその免疫学的類似物に結合させる段階と、 （ｉ）次に前記独立した部分に結合した前記第２の特異的結合パートナーを観 察および／または測定して前記分析物を検出および／または同定する段階 を含む方法。 ４８．前記分析物と前記第１の特異的結合パートナーの間の反応を促進させるた めに、前記第２の対置可能な部材上の前記第１のアプリケータに前記サンプルを 適用することに続けて前記クロマトグラフィー検定装置をインキュベートする段 階をさらに含む請求の範囲第４７項に記載の方法。 ４９．競合法イムノアッセイによりサンプル中の免疫学的一価分析物の検出およ び／または同定のためのクロマトグラフィー検定装置であって、 （ａ）第一の対置可能な部材は、 （ｉ）第１の端部と第２の端部とを有するクロマトグラフィー媒体であって それぞれが前記クロマトグラフィー媒体の面積より実質的に小さい独立した別個 の重複しない部分に不動化してある： （Ａ）前記分析物に対する特異的結合パートナーと （Ｂ）前記分析物に対するアフィニティを欠如した特異的結合対の構成要 素を結合することのできる２次特異的結合パートナーとを有し、前記２次特異的 結合パートナーは前記第一の特異的結合パートナーより前記クロマトグラフィー 媒体の前記第１の端部に近いところに配置してあり、 （ｉｉ）前記クロマトグラフィー媒体の前記第１の端部と動作可能に当接し て液体を通過させるための第１の伝導手段と、 （ｉｉｉ）前記クロマトグラフィー媒体の前記第２の端部と動作可能に当接 して液体を通過させるための第２の伝導手段とを含み、 （ｂ）前記第１の対置可能な部材に取り付け可能な第２の対置可能な部材は、 前記第１と第２の対置可能な部材を対置させて前記第２の対置可能な部材から前 記第１の対置可能な部材へ液体を移動させるように成してあり、前記第２の対置 可能な部材は、 （ｉ）前記第１と第２の対置可能な部材を対置させたときに前記第２の伝導 手段へ液体を適用するための分析物類似物を含むアプリケータであって、前記分 析物類似物は前記分析物に対するアフィニティを欠如する特異的結合対の構成要 素に共有結合した分析物を含み、また前記第２の特異的結合パートナーに結合可 能であり、前記特異的結合対の構成要素は検出可能なラベルで標識され、前記分 析物類似物は前記アプリケータへの水性液体の添加により溶解可能な形状にある ことと、 （ｉｉ）前記アプリケータから前記第２の対置可能な部材上で離してある液 体を吸収するための吸収手段とを含み、 前記第１と第２の対置可能な部材は、前記第１と第２の対置可能な部材を対置 させることで前記第２の伝導手段を前記アプリケータと動作可能に当接させて、 前記アプリケータの内容を前記クロマトグラフィー媒体に適用し、また前記クロ マトグラフィー媒体の少なくとも一部を通って流れるように成し、また前記吸収 手段を前記第１の伝導手段と動作可能に当接させて前記クロマトグラフィー媒体 から液体を吸い取るように構成してあるクロマトグラフィー検定装置。 ５０．前記第１の対置可能な部材に蝶番式に取り付けたカバーをさらに含み、前 記第１と第２の対置可能な部材が対抗されたときにこれらの上に折り曲げられる ように成してあり、前記カバーは前記第１と第２の対置可能な部材を対向させ前 記カバーを前記第１と第２の対置可能な部材の上に折り曲げたときに前記クロマ トグラフィー媒体の少なくとも一部を観察できるように開けた開口部を有する請 求の範囲第４９項に記載のクロマトグラフィー検定装置。 ５１．前記第１の特異的結合パートナーは前記分析物に対して特異的な抗体で あって、前記第２の特異的結合パートナーは前記分析物に対する特異性を欠如し た抗体を結合することのできる２次抗体である請求の範囲第４９項に記載のクロ マトグラフィー検定装置。 ５２．前記分析物類似物は免疫グロブリンに共有結合した分析物を含む請求の範 囲第４９項に記載のクロマトグラフィー検定装置。 ５３．前記クロマトグラフィー媒体上に不動化した前記第２の特異的結合パート ナーの部分は少なくとも２つの独立して重複しないバンドに分割され、それぞれ のバンドの前記第２の特異的結合パートナーの量を決定して、前記検出帯域に結 合する分析物類似物の量すなわちテストサンプル中の分析物の濃度を前記分析物 類似物が結合するバンドの数で示す請求の範囲第４９項に記載のクロマトグラフ ィー検定装置。 ５４．サンプル中の免疫学的一価分析物の検出および／または同定のための検査 キットであって、独立した容器に、 （ａ）請求の範囲第４９項に記載のクロマトグラフィー検定装置と、 （ｂ）前記第２の対置可能な部材上の前記アプリケータに適用する前記分析物 類似物を溶解するための水性液体 を含む検査キット。 ５５．水性サンプル中の免疫学的一価分析物を検出および／または同定するため の方法であって、 （ａ）請求の範囲第５３項に記載のクロマトグラフィー検定装置の前記第２の 対置可能な部材の前記アプリケータへ、前記第１と第２の対置可能な部材が対置 されていないときに、前記第２の特異的結合パートナーを再構成するための水性 液体を含む再構成液体を適用する段階と、 （ｂ）前記第１と第２の対置可能な部材が対置されていないときに前記クロマ トグラフィー検定装置の前記第１の対置可能な部材上の前記第１の伝導手段に前 記サンプルを適用する段階と、 （ｃ）次に前記クロマトグラフィー媒体の独立した帯域に不動化した前記分析 物に対する前記第１の特異的結合パートナーを含む前記クロマトグラフィー媒体 の少なくとも一部を通って前記サンプルを移動させる段階と、 （ｄ）次に前記第１と第２の特異的結合パートナーを対置させて、前記アプリ ケータと前記第２の伝導手段との間の当接の結果として、前記溶解した標識した 第２の特異的結合パートナーを前記第２の伝導手段さらには前記クロマトグラフ ィー媒体の第２の端部に適用する段階と、 （ｅ）次に前記溶解した標識した分析物類似物を、前記サンプルが流れる前記 クロマトグラフィー媒体の部分と重複し不動化した試薬の両方の独立した帯域を 含む前記クロマトグラフィー媒体の少なくとも一部を通って移動させることで、 分析物が前記テストサンプル中に存在するときには、前記標識した分析物類似物 が前記第２の特異的結合パートナーに結合する段階と、 （ｆ）次に前記不動化した第２の特異的結合パートナーを含む前記独立した帯 域に結合した前記標識した分析物類似物を観察および／または測定して前記分折 物を検出および／または同定する段階 を含む方法。 ５６．水性サンプル内の免疫学的一価分析物を検出および／または同定するため の方法であって、 （ａ）請求の範囲第４９項に記載のクロマトグラフィー検定装置の前記第２の 対置可能な部材の前記アプリケータへ、前記第１と第２の対置可能な部材が対置 されていないときに、前記第２の特異的結合パートナーを再構成するための水性 液体を含む再構成液体を適用する段階と、 （ｂ）前記第１と第２の対置可能な部材が対置されていないときに前記クロマ トグラフィー検定装置の前記第１の対置可能な部材上の前記第１の伝導手段に前 記サンプルを適用する段階と、 （ｃ）次に前記クロマトグラフィー媒体の独立した帯域に不動化した前記分析 物に対する前記第１の特異的結合パートナーを含む前記クロマトグラフィー媒体 の少なくとも一部を通って前記サンプルを移動させる段階と、 （ｄ）次に前記第１と第２の特異的結合パートナーを対置させて、前記アプリ ケータと前記第２の伝導手段との間の当接の結果として、前記溶解した標識した 第２の特異的結合パートナーを前記第２の伝導手段さらには前記クロマトグラフ ィー媒体の第２の端部に適用する段階と、 （ｅ）次に前記溶解した標識した分析物類似物を、前記サンプルが流れる前記 クロマトグラフィー媒体の部分と重複し不動化した試薬の両方の独立した帯域を 含む前記クロマトグラフィー媒体の少なくとも一部を通って移動させることで、 分析物が前記テストサンプル中に存在するときには、前記標識した分析物類似物 が前記第２の特異的結合パートナーに結合する段階と、 （ｆ）次に前記不動化した第２の特異的結合パートナーを含む前記独立した帯 域に結合した前記標識した分析物類似物を観察および／または測定して前記分析 物を検出および／または同定し、標識した分析物類似物が結合するバンドの個数 が分析物濃度に併せて増加するように成してある段階 を含む方法。 ５７．競合法イムノアッセイによりサンプル中の免疫学的一価分析物の検出およ び／または同定のためのクロマトグラフィー検定装置であって、 （ａ）第１の対置可能な部材は （ｉ）第１と第２の端部を有するクロマトグラフィー媒体であって、前記ク ロマトグラフィー媒体の面積より実質的に小さいそれぞれの独立した別個の重複 しない領域に不動化してある： （Ａ）前記分析物に対する特異的結合パートナー （Ｂ）前記分析物に対するアフィニティを欠如した特異的結合対の構成要 素を結合することのできる第２の特異的結合パートナーを有し、前記第２の特異 的結合パートナーは前記第一の特異的結合パートナーより前記クロマトグラフィ ー媒体の前記第１の端部に近いところに配置してあることと、 （ｉｉ）前記クロマトグラフィー媒体の前記第１の端部と動作可能に当接し 第１のアプリケータとして機能することができる液体を通すための第１の伝導手 段と、 （ｉｉｉ）前記クロマトグラフィー媒体の前記第２の端部と動作可能に当接 し液体を通すための第２の伝導手段とを含み、 （ｂ）前記第１の対置可能な部材に取り付け可能な第２の対置可能な部材は、 前記第１と第２の対置可能な部材を対置させて前記第２の対置可能な部材から前 記第１の対置可能な部材へ液体を移し換えるように成してあり、前記第２の対置 可能な部材は、 （ｉ）前記第１と第２の対置可能な部材を対置させたときに前記第２の伝 導手段へ液体を適用するための分析物類似物を含む第２のアプリケータであって 、前記分析物類似物は前記分析物に対するアフィニティを欠如した特異的結合対 の構成要素に共有結合させた分析物を含み、前記特異的結合対の構成要素は検出 可能なラベルで標識してあり、前記分析物類似物は前記第２のアプリケータへの 水性液体の添加により溶解可能な形状を成すことと、 （ｉｉ）前記第２の対置可能な部材上で前記第２のアプリケータから離し てあり液体を吸収するための第１の吸収手段とを含み、 （ｃ）第３の対置可能な部材は液体を吸収するための第２の吸収手段を含み、 前記第１と第２の対置可能な部材は、前記第１と第２の対置可能な部材を対置 させたときに前記第２のアプリケータが前記第１の伝導手段と動作可能に当接し 、また前記第１の吸収手段が前記第２の伝導手段と動作可能に当接して、前記第 ２の伝導手段を介して前記クロマトグラフィー媒体から液体を吸い取るように構 成してあり、 前記第１と第３の対置可能な部材は、前記第１と第３の対置可能な部材を対置 させることで前記第２の吸収手段を前記第１の伝導手段および前記クロマトグラ フィー媒体と直接的に当接して、前記第１の伝導手段を介して前記クロマトグラ フィー媒体から液体を吸い取るように構成してあるクロマトグラフィー検定装置 。 ５８．水性サンプル中の免疫学的一価分析物の検出および／または同定のための 方法であって、 （ａ）請求の範囲第５７項に記載のクロマトグラフィー検定装置の前記第１の 対置可能な部材上の前記第１の伝導手段へ、前記第１と第２の対置可能な部材が 対置されていないときに前記サンプルを適用する段階と、 （ｂ）前記クロマトグラフィー検定装置の前記第２の対置可能な部材上の前記 第２のアプリケータに再構成液体を適用して、前記第２のアプリケータの前記標 識した分析物類似物を溶解する段階と、 （ｃ）分析物に対する前記特異的結合パートナーと第２の特異的結合パートナ ーを不動化して含む前記クロマトグラフィー媒体の少なくとも一部を通って前記 サンプルを移動させる段階と、 （ｄ）前記第３と第１の対置可能な部材を対置させて、前記第３の対置可能な 部材上の前記第２の吸収手段を前記第１の対置可能な部材上の前記第１の伝導手 段および前記クロマトグラフィー媒体と直接的に当接させ、前記アプリケータと 前記第１の伝導手段の間と前記アプリケータと前記クロマトグラフィー媒体の間 の当接の結果として前記クロマトグラフィー媒体から液体を吸い取る段階と、 （ｅ）次に前記第２と第１の対置可能な部材を当接させて前記第２の対置可能 な部材上の前記第２のアプリケータを前記第１の対置可能な部材上の前記第１の 伝導手段と動作可能に当接させ、また前記第２の対置可能な部材上の前記第１の 吸収手段を前記第１の対置可能な部材上の前記第２の伝導手段と動作可能に当接 させて、前記第２のアプリケータと前記第１の伝導手段の間および前記第１の吸 収手段と前記第２の伝導手段の間の当接の結果として、前記溶解した標識した分 析物類似物を前記第１の伝導手段さらに前記クロマトグラフィー媒体の第１の端 部へ適用する段階と、 （ｆ）次に前記溶解した標識した分析物類似物を前記分析物に対する特異的結 合パートナーと前記第２の特異的結合パートナーとを含む前記クロマトグラフィ ー媒体の少なくとも一部を通って移動させる段階と、 （ｇ）次に前記分析物を検出および／または同定するために前記第２の特異的 結合パートナーに結合した前記標識した分析物類似物を観察および／または測定 する段階 を含む方法。 ５９．競合法イムノアッセイによりサンプル中の免疫学的一価分析物の検出およ び同定のためのクロマトグラフィー検定装置であって、 （ａ）第１の対置可能な部材は （ｉ）第１と第２の端部を有するクロマトグラフィー媒体であって、前記ク ロマトグラフィー媒体の面積より実質的に小さいそれぞれの独立した別個の重複 しない部分に不動化した： （Ａ）アビジン、ストレプトアビジン、抗ビオチン抗体、およびこれらの 誘導体から成るグループから選択したビオチンを特異的に結合することのできる 基質と、 （Ｂ）３要素複合体を特異的に結合することのできる第２の特異的結合パ ートナーを有し、前記３成分特異的結合パートナーは、（１）分析物、（２）前 記分析物に対する特異的結合アフィニティを欠如し前記分析物に共有結合させて ある特異的結合対の構成要素、（３）前記特異的結合対の前記構成要素に結合し た検出可能なラベルを含み、 （ｉｉ）前記クロマトグラフィー媒体の第１の端部と動作可能に当接し液体 を通過させることのできる第１の伝導手段と （ｉｉｉ）前記クロマトグラフィー媒体の前記第２の端部と動作可能に当接 し液体を通過させることのできる第２の伝導手段とを含み、 （ｂ）前記第１の対置可能な部材に取り付け可能な第２の対置可能な部材は、 前記第１と第２の対置可能な部材を対置させて前記第２の対置可能な部材から前 記第１の対置可能な部材へ液体を移し換えるように成してあり、前記第２の対置 可能な部材は水性サンプルの添加により溶解可能な形状で前記分析物に対する第 １の特異的結合パートナーを含む第１の伝導手段へ液体を適用するための第１の アプリケータを含み、前記第１の特異的結合パートナーはビオチンに共有結合さ せてあり、前記第１の特異的結合パートナーは前記第２の特異的結合パートナー によって結合されることはなく、 （ｃ）前記第１の対置可能な部材に取り付け可能な第３の対置可能な部材は、 前記第１と第３の対置可能な部材を対置させて前記第３の対置可能な部材から前 記第１の対置可能な部材へ液体を移し換えるように成してあり、前記第３の対置 可能な部材は、 （ｉ）前記３要素複合体を含む前記第２の伝導手段に液体を適用するための 第２のアプリケータであって、前記複合体は前記第２のアプリケータへ第２の水 性液体の添加により溶解可能な形状を成し、 （ｉｉ）前記第３の対置可能な部材上で前記第２のアプリケータから離して ある液体を吸収するための吸収手段とを含み、 前記第１と第２の対置可能な部材は、前記第１と第２の対置可能な部材を対置 させることで前記第１の伝導手段を前記第１のアプリケータと動作可能に当接し て、前記第１のアプリケータの内容を前記クロマトグラフィー媒体に適用し前記 クロマトグラフィー媒体の少なくとも一部を通って移動させるように成してあり 、 前記第１と第３の対置可能な部材は、前記第１と第３の対置可能な部材を対置 させることで前記吸収手段を前記第１の伝導手段と当接させてクロマトグラフィ ー媒体から液体を吸い取り、また前記第２のアプリケータを前記第２の伝導手段 と動作可能に当接させて、前記第２のアプリケータの内容を前記クロマトグラフ ィー媒体に適用しまた前記第１のアプリケータの内容が流れる部分に重複する前 記クロマトグラフィー媒体の少なくとも一部を通して流すように成してあるクロ マトグラフィー検定装置。 ６０．前記第１の特異的結合パートナーは抗分析物抗体である請求の範囲第５９ 項に記載のクロマトグラフィー検定装置。 ６１．前記３要素複合体における前記特異的結合対の構成要素はウサギ免疫グロ ブリンＧであり前記第２の特異的結合パートナーは山羊抗ウサギＩｇＧである請 求の範囲第６０項に記載のクロマトグラフィー検定装置。 ６２．前記ビオチンを特異的に結合できる基質はストレプトアビジンである請求 の範囲第５９項に記載のクロマトグラフィー検定装置。 ６３．前記クロマトグラフィー媒体上に不動化した前記第２の特異的結合パート ナーの領域は少なくとも２つの独立した重複しないバンドに分割され、それぞれ のバンド内の第２の特異的結合パートナーの量を同定して、前記検出帯域に結合 する３要素複合体の量すなわち前記テストサンプル中の本来の分析物濃度を３要 素複合体が結合するバンドの数で表す請求の範囲第５９項に記載のクロマトグラ フィー検定装置。 ６４．サンプル中の免疫学的一価分析物の検出および／または同定のための検査 キットであって、独立した容器内に （ａ）請求の範囲第５９項に記載のクロマトグラフィー検定装置と、 （ｂ）前記第３の対置可能な部材上の前記第２のアプリケータに適用するため の前記３要素複合体を溶解する第２の水性液体 を含む検査キット。 ６５．水性サンプル中の免疫学的一価分析物を検出および／または同定するため の方法であって、 （ａ）請求の範囲第５９項に記載のクロマトグラフィー検定装置の前記第１の アプリケータへ、前記第１と第２の対置可能な部材が対置していないときに、前 記第１の水性液体を含む前記サンプルを適用する段階と、 （ｂ）前記第１と第３の対置可能な部材が対置されていないときに、前記第２ の水性液体を含む前記第２のアプリケータに再構成液体を適用する段階と、 （ｃ）前記サンプルの適用に続けて、前記クロマトグラフィー検定装置の前記 第１と第２の対置可能な部材を対置させ、前記サンプルと前記分析物に対する前 記溶解した第１の特異的結合パートナーを前記第１の伝導手段を介して前記クロ マトグラフィー媒体の前記第１の端部に適用する段階と、 （ｄ）次に前記サンプルと前記溶解した第１の特異的結合パートナーを前記ク ロマトグラフィー媒体の少なくとも一部を通って移動させる段階と、 （ｅ）次に前記第１と第２の対置可能な部材を引き離して対置しないようにす る段階と、 （ｆ）次に前記第１と第３の対置可能な部材を対置させて、前記溶解した３要 素複合体を前記伝導手段を介して前記クロマトグラフィー媒体の前記第２の端部 に適用する段階と、 （ｇ）次に前記溶解した３要素複合体を、前記サンプルと前記溶解した第１の 特異的結合パートナーが流れた前記クロマトグラフィー媒体の部分に重複する前 記クロマトグラフィー媒体の少なくとも一部を通って移動させ、分析物と前記テ ストサンプルが存在する場合には、前記３要素複合体が前記第２の独立した部分 に不動化してある前記第２の特異的結合パートナーに結合するように成す段階と 、 （ｈ）次に前記分析物を検出および／または同定するために前記第２の独立し た部分に結合した前記標識した特異的結合パートナーを観察および／または測定 する段階 を含む方法。 ６６．前記分析物と前記第１の特異的結合パートナーの間の反応を促進するため に前記第１のアプリケータに前記サンプルを適用することに続けて前記クロマト グラフィー検定装置をインキュベートする段階をさらに含む請求の範囲第６５項 に記載の方法。 ６７．水性サンプル中の免疫学的一価分析物を検出および／または同定するため の方法であって、 （ａ）請求の範囲第５９項に記載のクロマトグラフィー検定装置の前記第１の アプリケータへ、前記第１と第２の対置可能な部材が対置していないときに、前 記第１の再構成液体を含む前記サンプルを適用する段階と、 （ｂ）請求の範囲第６６項に記載のクロマトグラフィー検定装置の前記第１の アプリケータへ、前記第１と第２の対置可能な部材を対置させていないときに、 前記サンプルを適用し、前記第１の再構成液体と前記サンプルの組み合わせが前 記第１の水性液体を含む段階と、 （ｃ）前記第１と第２の対置可能な部材を対置させていないときに、前記第２ のアプリケータへ、前記第２の水性液体を含む第２の再構成液体を適用する段階 と、 （ｄ）前記サンプルの適用に続けて、前記クロマトグラフィー検定装置の前記 第１と第２の対置可能な部材を対置させて、前記サンプルと前記分析物に対する 前記溶解した第１の特異的結合パートナーを前記第１の伝導手段を介して前記ク ロマトグラフィー媒体の前記第１の端部へ適用する段階と、 （ｅ）次に前記サンプルと前記溶解した第１の特異的結合パートナーを前記ク ロマトグラフィー媒体の少なくとも一部を通って移動させる段階と、 （ｆ）次に前記第１と第２の対置可能な部材を引き離してこれらが対置しない ようにする段階と、 （ｇ）次に前記第１と第３の対置可能な部材を対置させ、溶解した３要素複合 体を前記第２の伝導手段を介して前記クロマトグラフィー媒体の前記第２の端部 へ適用する段階と、 （ｈ）次に前記溶解した３要素複合体を、前記サンプルと前記溶解した第１の 特異的結合パートナーが通った前記クロマトグラフィー媒体の部分に重複する前 記クロマトグラフィー媒体の少なくとも一部を通って移動させ、分析物と前記テ ストサンプルが存在する場合には、前記３要素複合体が前記第２の独立した部分 に不動化した前記第２の特異的結合パートナーに結合するように成す段階と、 （ｉ）次に前記分析物を検出および／または同定するために前記第２の独立し た部分に結合した前記標識した特異的結合パートナーを観察および／または測定 する段階 を含む方法。 ６８．前記分析物と前記第一の特異的結合パートナーの間の反応を促進させるた めに前記サンプルを前記第１のアプリケータに適用することに続けて前記クロマ トグラフィー検定装置をインキュベートする段階をさらに含む請求の範囲第６７ 項に記載の方法。 ６９．テストサンプル中の免疫学的一価分析物の検出および／または同定のため の方法であって、 （ａ）請求の範囲第６３項に記載のクロマトグラフィー検定装置の前記第１の アプリケータへ、前記第１と第２の対置可能な部材が対置されていないときに、 前記第１の水性液体を含む前記サンプルを適用する段階と、 （ｂ）前記第１と第３の対置可能な部材が対置されていないときに、前記第２ の水性液体を含む再構成液体を前記第２のアプリケータへ適用する段階と、 （ｃ）前記サンプルの適用に続けて、前記クロマトグラフィー検定装置の前記 第１と第２の対置可能な部材を対置させて前記サンプルと前記分析物に対する前 記溶解した第１の特異的結合パートナーを前記第１の伝導手段を介して前記クロ マトグラフィー媒体の前記第１の端部へ適用する段階と、 （ｄ）次に前記サンプルと前記溶解した第１の特異的結合パートナーを前記ク ロマトグラフィー媒体の少なくとも一部を通って移動させる段階と、 （ｅ）次に前記第１と第２の対置可能な部材を引き離してこれらが対置しない ようにする段階と、 （ｆ）次に前記第１と第３の対置可能な部材を対置させて、前記溶解した３要 素複合体を前記第２の伝導手段を介して前記クロマトグラフィー媒体の前記第２ の端部へ適用する段階と、 （ｇ）次に前記溶解した３要素複合体を前記サンプルと前記溶解した第１の特 異的結合パートナーが流れた前記クロマトグラフィー媒体の部分に重複する前記 クロマトグラフィー媒体の少なくとも一部を通って移動させ、分析物と前記テス トサンプルが存在する場合には、前記３要素複合体を前記第２の独立した部分に 不動化した前記第２の特異的結合パートナーに結合させる段階と、 （ｈ）前記不動化した第２の特異的結合パートナーを含む前記独立した部分内 部で２つまたはそれ以上のバンドに結合した前記標識した分析物類似物を観察お よび／または測定して、前記分析物を検出および／または同定し、標識した分析 物類似物が結合するバンドの数が分析物濃度に従って増加する段階 を含む方法。 ７０．競合法イムノアッセイによりサンプル中の免疫学的一価分析物の検出およ び／または同定のためのクロマトグラフィー検定装置であって、 （ａ）第１の対置可能な部材は （ｉ）第１の端部と第２の端部を有するクロマトグラフィー媒体であって、 前記クロマトグラフィー媒体の面積より実質的に小さいそれぞれの独立した重複 しない別個の部分に不動化してある： （Ａ）前記分析物に対する特異的結合パートナーを結合することのできる 分析物類似物と （Ｂ）前記分析物に対するアフィニティを有する特異的結合対の構成要素 を結合することのできる第２の特異的結合パートナーを有し、前記第２の特異的 結合パートナー自体は前記分析物に対する結合アフィニティを欠如しており、 （ｉｉ）前記クロマトグラフィー媒体の前記第１の端部と動作可能に当接し 液体を通すことのできる伝導手段とを含み、 （ｂ）前記第１の対置可能な部材に取り付け可能な第２の対置可能な部材は、 前記第１と第２の対置可能な部材を対置させて前記第２の対置可能な部材から前 記第１の対置可能な部材へ液体を移し換えるように成し、前記第２の対置可能な 部材は、水性液体の添加により溶解可能な形状で前記分析物に対する特異的結合 パートナーを含むものを適用するためのアプリケータを含み、 前記第１と第２の対置可能な部材は、前記第１と第２の対置可能な部材を当接 させることで前記伝導手段を前記アプリケータと動作可能に当接して、前記アプ リケータの内容を前記クロマトグラフィー媒体に適用し、前記クロマトグラフィ ー媒体の少なくとも一部を通って流れるように成してあるクロマトグラフィー検 定装置。 ７１．前記第１の特異的結合パートナーは前記分析物に特異的な抗体である請求 の範囲第７０項に記載のクロマトグラフィー検定装置。 ７２．前記分析物類似物は前記分析物に対するまたは前記分析物に対する前記特 異的結合パートナーに対する特異的結合能力を欠如した蛋白に共有結合した分析 物を含む請求の範囲第７０項に記載のクロマトグラフィー検定装置。 ７３．前記第２の特異的結合パートナーは前記分析物に対する前記抗体の抗原結 合部位に関与しない種特異的相互作用に基づいて前記分析物に特異的な前記抗体 を結合する請求の範囲第７１項に記載のクロマトグラフィー検定装置。 ７４．前記第１の対置可能な部材は、前記クロマトグラフィー媒体の前記第２の 端部に動作可能に当接して液体を吸い取り、前記クロマトグラフィー媒体を通る 液体の流れを支援するための吸収手段をさらに含む請求の範囲第７０項に記載の クロマトグラフィー検定装置。 ７５．前記第２の対置可能な部材は前記アプリケータから離してあり液体を吸い 取るための吸収手段をさらに含み、前記吸収手段は前記第２の対置可能な部材上 で前記第１と第２の対置可能な部材を対置させて前記吸収手段を前記クロマトグ ラフィー媒体の第２の端部と動作可能に当接させ、前記クロマトグラフィー媒体 を通る液体の流れを支援するように配置してある請求の範囲第７０項に記載のク ロマトグラフィー検定装置。 ７６．前記クロマトグラフィー媒体上に不動化してある前記第２の特異的結合パ ートナーの領域は少なくとも２つの独立した重複しないバンドに分割してあり、 それぞれのバンドでの第２の特異的結合パートナーの量を同定することで、前記 検出帯域に結合する前記分析物に対する標識した特異的結合パートナーの量、す なわち前記テストサンプル内の分析物の量を、前記分析物に対する前記標識した 特異的結合パートナーが結合するバンドの数で表すように成してある請求の範囲 第７０項に記載のクロマトグラフィー検定装置。 ７７．水性サンプル中の免疫学的一価分析物を検出および／または同定するため の方法であって、 （ａ）請求の範囲第７０項に記載のクロマトグラフィー検定装置の前記アプリ ケータへ、前記第１と第２の対置可能な部材が対置していないときに、前記水性 液体を含む前記サンプルを適用する段階と、 （ｂ）前記サンプルの適用に続けて、前記クロマトグラフィー検定装置の前記 第１と第２の対置可能な部材を対置させ、前記サンプルと前記分析物に対する前 記溶解した標識した特異的結合パートナーを、前記伝導手段を介して前記クロマ トグラフィー媒体の前記第１の端部に適用する段階と、 （ｃ）次に前記サンプルと前記溶解した標識した特異的結合パートナーを、前 記分析物類似物と前記第２の特異的結合パートナーの独立した別個の重複しない 部分を少なくとも含む前記クロマトグラフィー媒体の少なくとも一部を通って移 動させる段階と、 （ｄ）前記特異的結合パートナーの前記独立した部分に結合した前記標識した 特異的結合パートナーを観察および／または測定して前記分析物を検出および／ または同定する段階 を含む方法。 ７８．水性サンプル中の免疫学的一価分析物を検出および／または同定するため の方法であって、 （ａ）請求の範囲第７６項に記載のクロマトグラフィー検定装置の前記アプリ ケータへ、前記第１と第２の対置可能な部材が対置していないときに、前記水性 液体を含む前記サンプルを適用する段階と、 （ｂ）前記サンプルの適用に続けて、前記クロマトグラフィー検定装置の前記 第１と第２の対置可能な部材を対置させ、前記サンプルと前記分析物に対する前 記溶解した標識した特異的結合パートナーを、前記伝導手段を介して前記クロマ トグラフィー媒体の前記第１の端部に適用する段階と、 （ｃ）次に前記サンプルと前記溶解した標識した特異的結合パートナーを、前 記分析物類似物と前記第２の特異的結合パートナーの独立した別個の重複しない 部分を少なくとも含む前記クロマトグラフィー媒体の少なくとも一部を通って移 動させる段階と、 （ｄ）前記不動化してある第２の特異的結合パートナーを含む前記独立した部 分内部で２つまたはそれ以上のバンドに結合した前記標識した特異的結合パート ナーを観察および／または測定して前記分析物を検出および／または同定し、標 識した分析物類似物が結合するバンドの数が分析物濃度に従って増加する段階を 含む方法。 ７９．前記検出可能なラベルが視覚的に検出可能なラベルである請求の範囲第４ 項、第１９項、第３５項、第３９項、第４１項、第４９項、第５７項、第５９項 、または第７０項に記載のクロマトグラフィー検定装置。 ８０．サンプル中の分析物の検出および／または同定のためのクロマトグラフィ ー検定装置であって、 （ａ）少なくとも２つの実質的に平坦で対置可能な部材を含み、前記実質的に 平坦で対置可能な部材の一方はその表面にクロマトグラフィー媒体を有すること と、 （ｂ）前記対置可能な部材を対置させこれに圧力をかけるための手段をさらに 含み、前記圧力は前記対置可能な部材に対して実質的に直角の方向に一方の対置 可能な部材から他方の対置可能な部材へ液体を十分移動でき、前記分析物の検出 および／または同定のためにサンプルを前記クロマトグラフィー媒体に適用し、 前記対置可能な部材を対置させる手段により前記部材の前記動作可能な当接で液 体を移動し、前記部材が対置していないときに前記対置可能な部材の一方にサン プルを適用できるように成し、また前記対置可能な部材が対置されたときには前 記サンプルが前記対置可能な部材の一方から前記対置可能な部材の他方へ移動す るように成してあるクロマトグラフィー検定装置。 ８１．前記実質的に対置可能な部材の少なくとも一方は、前記対置可能な部材が 対置されないときにテストしようとするサンプルを受け入れるためのサンプル調 製帯域を有する請求の範囲第８０項に記載のクロマトグラフィー検定装置。 ８２．請求の範囲第８０項に記載のクロマトグラフィー検定装置であって、 （ｉ）前記部材の少なくとも一方は、第１の、標識した、前記分析物に対する 特異的結合パートナーを、水性液体の添加により溶解可能な形状で含み、該水性 液体はサンプルのことがあり、前記第１の、標識した、特異的結合パートナーは 前記部材上にあって前記サンプル中の前記分析物と反応できることと、 （ｉｉ）前記クロマトグラフィー媒体は、第２の、標識していない、不動化し た分析物に対する特異的結合パートナーの検出帯域を含み、前記検出帯域は前記 クロマトグラフィー媒体より面積において実質的に小さく、分析物が前記サンプ ル中に存在する場合には（１）前記第１の、標識してある、特異的結合パートナ ー、（２）前記分析物、（３）前記不動化した第２の特異的結合パートナーを含 む三つ組複合体が前記検出帯域に形成して、サンドイッチ法イムノアッセイを行 うクロマトグラフィー検定装置。 ８３．請求の範囲第８０項に記載のクロマトグラフィー検定装置であって、前記 クロマトグラフィー媒体は、前記クロマトグラフィー媒体より実質的に小さい少 なくとも一つの帯域において、分析物またはその類似物と、前記分析物に対する 特異的結合パートナーから成るグループから選択した特異的結合対の構成要素を 含み、前記検定装置は前記サンプル中の分析物質について競合法イムノアッセイ を実行できるクロマトグラフィー検定装置。 ８４．請求の範囲第８０項に記載のクロマトグラフィー検定装置であって、前記 実質的に平坦な部材の一方は少なくとも２つの独立して当接しないクロマトグラ フィー媒体を有して、少なくとも２つの分析物の検出および／または同定を同時 に行うことができるように成してあるクロマトグラフィー検定装置。 ８５．請求の範囲第８０項に記載のクロマトグラフィー検定装置であって、前記 サンプルを前記クロマトグラフィー媒体に適用した後の前記分析物の検出および ／または同定は、視覚的に検出可能なラベルに結合してある前記分析物またはそ の類似物と視覚的に検出可能なラベルに結合してある前記分析物に対する特異的 結合パートナーからなるグループから選択した視覚的に検出可能な標識をつ けた成分の使用により生じるクロマトグラフィー検定装置。 ８６．サンプル中の分析物の検出および／または同定のためのクロマトグラフィ ー検定装置であって、 （ａ）少なくとも３つの実質的に平坦で対置可能な部材を含み、前記実質的に 平坦で対置可能な部材の一つはその表面にクロマトグラフィー媒体を有し、前記 クロマトグラフィー媒体は第１と第２の端部を有することと、 （ｂ）前記対置可能な部材を少なくとも２つの異なる組み合わせで対にして対 置させ、これに圧力をかけるための手段をさらに含み、前記圧力は前記対置可能 な部材に対して実質的に直角の方向で一方の対置可能な部材から他方へ液体を移 し換え、前記サンプルが前記クロマトグラフィー媒体に適用されて前記第１の端 部から前記第２の端部へ前記クロマトグラフィー媒体を通って流れて前記クロマ トグラフィー媒体の上の前記分析物の検出および／または同定を行うのに十分で あって、前記対置可能な部材を対置させる手段により、液体を移動するために対 にした組み合わせによる前記対置可能な部材を動作可能に当接して、前記部材が 対置されていないときに前記対置可能な部材の一方にサンプルを適用することが でき、また前記対置可能な部材を対置させたときには前記対置可能な部材の一方 から前記対置可能な部材の他方へ前記サンプルが移動するように成してあること と、 （ｃ）前記クロマトグラフィー媒体に液体を適用するための少なくとも一つの アプリケータと、前記対置可能な部材の一方に配置した液体を吸収するための一 つの吸収手段をさらに含み、前記アプリケータと前記吸収手段が配置してある前 記対置可能な部材と前記クロマトグラフィー媒体が配置してある前記対置可能な 部材とを、前記対置可能な部材を対置するための前記手段により対置させたとき 、第２の液体が前記クロマトグラフィー媒体に適用されて前記第２の端部から前 記第１の端部へ前記クロマトグラフィー媒体を通って流れ、前記第２の端部から 前記第１の端部へ向かう流れは前記吸収手段による液体の吸収で支援され、これ によって前記クロマトグラフィー媒体を通る流れを反転させ、また前記分析物の 検出および／または同定は前記クロマトグラフィー媒体を通る流れの反転に続 けて成されることを含むクロマトグラフィー検定装置。 ８７．請求の範囲第８６項に記載のクロマトグラフィー検定装置であって、前記 実質的に対置可能な部材の少なくとも一つはサンプル調製帯域を有するクロマト グラフィー検定装置。 ８８．請求の範囲第８６項に記載のクロマトグラフィー検定装置であって、 （ｉ）前記部材の少なくとも一つは第１の、標識した、前記分析物に対する特 異的結合パートナーを、水性液体の添加により溶解可能な形状で含み、前記水性 液体はサンプルとすることができ、前記第１の、標識した、特異的結合パートナ ーは前記部材上に載置して前記サンプル中の分析物と反応できるように成してあ ることと、 （ｉｉ）前記クロマトグラフィー媒体は、第２の、標識していない、不動化し た前記分析物に対する特異的結合パートナーの検出帯域を含み、前記検出帯域は 前記クロマトグラフィー媒体より面積において実質的に小さくなして、分析物が 前記サンプル内に存在する場合、（１）前記第１の、標識した、特異的結合パー トナー、（２）前記分析物、（３）前記不動化した第２の特異的結合パートナー を含む三つ組複合体が前記検出帯域に形成して、サンドイッチ法イムノアッセイ を行うクロマトグラフィー検定装置。 ８９．請求の範囲第８６項に記載のクロマトグラフィー検定装置であって、前記 クロマトグラフィー媒体は、前記クロマトグラフィー媒体より実質的に小さい少 なくとも一つの帯域において、分析物またはその類似物と前記分析物に対する特 異的結合パートナーから成るグループから選択した特異的結合対の構成要素を含 み、前記検定装置は前記サンプル内の分析物について競合法イムノアッセイを実 行することができるように成してあるクロマトグラフィー検定装置。 ９０．請求の範囲第８６項に記載のクロマトグラフィー検定装置であって、前記 実質的に平坦な部材の一つは、それぞれが第１と第２の端部を有する少なく とも２つの独立した当接しないクロマトグラフィー媒体を有して、少なくとも２ つの分析物についての検出および／または同定を同時の行うことができるように 成してあるクロマトグラフィー検定装置。 ９１．請求の範囲第８６項に記載のクロマトグラフィー検定装置であって、前記 サンプルを前記クロマトグラフィー媒体に適用した後の前記分析物の検出および ／または同定は、視覚的に検出可能なラベルを結合してある前記分析物またはそ の類似物と視覚的に検出可能なラベルを結合してある前記分析物に対する特異的 結合パートナーから成るグループから選択した視覚的に検出可能な標識してある 成分を用いることで行うように成してあるクロマトグラフィー検定装置。