JPH09124498A

JPH09124498A - Ｇｏｄタイプのエラジタンニンを有効成分とする抗アレルギー作用剤並びにこれを配合した食品及び医薬品

Info

Publication number: JPH09124498A
Application number: JP8025712A
Authority: JP
Inventors: Koichi Nakahara; 光一中原; Katsuro Miyagawa; 克郎宮川; Toru Kodama; 亨児玉; Wataru Fujii; 亙藤居
Original assignee: Suntory Ltd
Current assignee: Suntory Ltd
Priority date: 1995-02-10
Filing date: 1996-02-13
Publication date: 1997-05-13

Abstract

(57)【要約】【構成】ＧＯＤタイプのエラジタンニンを有効成分と
して含有する、抗アレルギー作用剤並びにこれを配合し
た食品及び医薬品。【効果】本発明の抗アレルギー作用剤は、肥満細胞か
らのヒスタミン遊離抑制活性を有し抗炎症剤あるいは抗
アレルギー剤として有用なものである。更に、本発明の
食品を日常的に摂取することにより、アレルギー性鼻
炎、アトピー性皮膚炎、アレルギー性喘息等のアレルギ
ー性疾患などを予防・改善することが可能である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する分野】本発明は、抗アレルギー作用剤に
関し、更に詳細には、ＧＯＤタイプのエラジタンニンを
有効成分とする抗アレルギー作用剤並びにこれを含有す
る食品及び医薬品に関する。

【０００２】本明細書中の抗アレルギー作用とは、アレ
ルギー症状を改善、軽減、抑制または予防する作用のこ
とを示す。

【０００３】更に、本明細書中の改善抑制剤とは、症状
を改善、軽減、抑制または予防する医薬を示す。

【０００４】

【従来の技術】抗炎症や抗アレルギー作用を有する医薬
成分の研究は数多く行なわれており、当該作用を有する
数多くの合成化合物が報告されている。しかし、抗炎症
あるいは抗アレルギー活性を有する天然物質としては、
甘草成分（特にグリチルレチン酸）などが用いられてい
るのみで、十分な抗炎症及び抗アレルギー活性を有する
安全な天然物質は未だ得られていないのが現状である。

【０００５】抗炎症及び抗アレルギー活性を有する安全
な天然物質が得られれば、患者数の多いこれらの症状に
医薬品又は食品に配合して適用する際の安全性を高める
ことができる。また、日常的に摂取されている食品に配
合することで、これらの天然物質の摂取を容易に行うこ
とができ、しかも症状に対する予防的措置として摂取す
ることも可能となる。しかし、このような要望があるに
もかかわらず、前記のように、抗炎症、抗アレルギ−活
性を有する安全な天然物質が未だ知られていないため、
有用な食品素材は提供されていないというのが実情であ
った。

【０００６】従って、安全かつ有効な医薬品に使用で
き、しかも日常的に摂取、使用される食品に配合して炎
症やアレルギーに対する症状の改善や予防に有効な素材
の開発が望まれていた。

【０００７】

【課題を解決するための手段】一般的にアレルギー反応
には、アナフィラキシー（Ｉ型）、細胞障害型（II
型）、アルサス型（III 型）及び細胞介在型（遅延型）
（IV型）の４つの型があるが、最近特に問題になってい
る花粉症はＩ型アレルギー（即時型アレルギー）に分類
される。また、アトピー性皮膚炎もＩ型アレルギー反応
が主体と言われているが、更に最近では、ＩＶ型アレル
ギー反応の関与もあることが判明してきている。

【０００８】このＩ型アレルギーにおいては、抗原の侵
入により産生されたＩｇＥ抗体が肥満細胞膜上のＦｃレ
セプターに結合し、再び侵入した抗原がこのＩｇＥ抗体
と架橋すると肥満細胞膜内顆粒中のヒスタミンなどの化
学物質が遊離され、直接的あるいは間接的に喘息や鼻炎
などの症状を伴う急性炎症反応を引き起こす。

【０００９】従って、Ｉ型アレルギー反応を防ぐために
は、上記経路のいずれかを切断すれば良いことになる。

【００１０】Ｉ型アレルギーに属する疾患にはアナフィ
キラシーショック、大抵のアレルギー性気管支喘息、蕁
麻疹、アレルギー性鼻炎（鼻汁分泌過多、鼻閉など）、
腸管アレルギーなどが挙げられる。

【００１１】ＩＶ型アレルギー（遅延型アレルギー）で
は、感作リンパ球が関与する。そのうちの遅延型過敏症
エフェクターＴ細胞は抗原と反応し、いろいろの可溶性
の活性因子を産生・遊離する。その結果、マクロファー
ジや好中球の浸潤、血管透過性の亢進などの炎症反応が
惹起される。遅延型といわれるのは、炎症反応が最大に
達するのに２４時間〜４８時間を要するためである。

【００１２】ＩＶ型アレルギーに属するものとしては、
ツベルクリン反応、接触性皮膚炎、同種移植片拒絶反
応、結核、甲状腺炎、アレルギー性脳炎などがある。

【００１３】本発明者は、Ｉ型アレルギー反応、及びこ
れから引き起こされる急性炎症反応を抑制する物質とし
てヒスタミン遊離抑制物質に着目し、優れたヒスタミン
遊離抑制活性を有する天然物質を広く検索した。

【００１４】その結果、バラ科等の植物に含まれるＧＯ
Ｄタイプのエラジタンニンがヒスタミン遊離抑制作用を
有することを見出した。

【００１５】また、ＩＶ型アレルギーに対する作用の試
験である、マウス耳介接触性皮膚炎試験における、耳介
浮腫及び耳介血管透過性の測定、及びマウス遅延型足浮
腫テストをＧＯＤタイプのエラジタンニンについて行っ
たところ、既存の抗アレルギー作用剤と同等の抗アレル
ギー活性を示し、ＧＯＤタイプのエラジタンニンがＩＶ
型アレルギーに対しても効果があることが明らかになっ
た。

【００１６】以上の結果、ＧＯＤタイプのエラジタンニ
ンが、抗アレルギー活性を有することを見出し、これが
抗アレルギー作用剤として有用であることを確認して本
発明を完成するに至った。

【００１７】本発明の第１の目的は、ＧＯＤタイプのエ
ラジタンニンを有効成分として含有する、抗アレルギー
作用剤を提供することにある。

【００１８】また、本発明の他の目的は、前記抗アレル
ギー作用剤を含有する食品及び医薬品を提供することに
ある。

【００１９】本発明の抗アレルギー作用剤の有効成分で
あるＧＯＤタイプのエラジタンニン（以下、「ＧＯＤエ
ラジタンニン」という）とは、次の式（Ｉ）

【化４】（式中、Ｒ_１及びＲ_２は、それぞれ水素原子またはガ
ロイル基を示すか、一緒になってヘキサヒドロキシジフ
ェノイル基を示す）で示される構造単位を有する化合物
である。

【００２０】この構造単位中には、糖構造の他、下記の
ヘキサヒドロキシジフェノイル基（以下、「Ｄ」と略す
ことがある）とガロイル基（以下、「Ｇ」と略すことが
ある）との間でエーテル結合した部分構造が存在する。

【００２１】

【化５】そして、この部分結合中のエーテル結合の酸素がＧ側か
ら供給されているため、上記部分構造は、ＧＯＤタイプ
と呼ばれている（Ｇ→Ｏ→Ｄタイプ、Ｏは酸素原子を意
味する。）。

【００２２】本発明のＧＯＤエラジタンニンは、上記し
た構造単位が存在するものであれば、その分子量や重合
度はなんら限定されるものではないが、分子量２０，０
００以下で重合度２０以下のものが好適である。なお、
本発明のＧＯＤエラジタンニンの分子量の測定には、Ｊ
ｅｏｌＪＭＳ−ＨＸ１１０／１１０Ａタンデムマス
スペクトロメトリーシステムを用いたファブ質量分
析及びＴＳＫｇｅｌＧ３０００Ｈ−ＫＬ（東ソー製）
カラムを用いたゲル浸透クロマトグラフィーを使用する
ことができる。中でも好ましいＧＯＤエラジタンニンの
例としては、次の式（II）で表されるものが挙げられ
る。

【００２３】

【化６】（式中、Ｒ_１及びＲ_２は前記した意味を有し、ｎは０な
いし２０の数を示す）また、別の好ましいＧＯＤエラジタンニンの例として
は、次の式（III ）で表わされるものが挙げられる。

【００２４】

【化７】（式中、Ｒ_１及びＲ_２は前記した意味を有する）上記のＧＯＤエラジタンニンは既に公知の化合物であ
り、例えば、野中ら（J.C.S.Perkin I, 1067-1073(198
2) ）に開示された、バラ科ワレモコウ属ワレモコウ
（Sanguisorba officinalis L.）の根茎を乾燥させた生
薬である地楡から得たＧＯＤエラジタンニン、吉田ら(C
hem.Ph arm. Bull. 40(8), 1997-2001(1992)) に開示さ
れた、バラ科バラ属ローザヘンリュイボウル（Rosa
henryi BOUL. ）からのＧＯＤエラジタンニン、田中ら
（Chem. Pharm. Bull. 41(7), 1214-1220(1993) ）に開
示された，バラ科キイチゴ属植物であるルブスクラタ
エギフォリウスブンゲ（Rubus crataegifolius BUNG
E）, ルブスパルヴィフォリウスエル（Rubus parvi
folius L.）, ルブスパルマトウススンブ（Rubus p
a lmatus THUNB. ）, ホウロクイチゴ（Rubus sieboldii
BLUME ）, ビロードイチゴ（Rubus corchorifolius L.
）, ルブスパルマトウススンブヴァルコプト
フィルスクンゼ（Rubus palmatus THUNB. var coptop
hyllus KUNZE）, ルブスイダエウスエル（Rubus id
aeus L. ）, ルブスメソゲアヌスフォスケ（Rubus
mesogeanus FOCKE）, ルブスフォエニコラシウスマ
キシム（Rubu s phoenicolasius MAXIM. ）, ルブスカ
リシノイデスハヤト（Rubus calyci noides HAYATO
）, シマバライチゴ（Rubus lambertianus SERING
E），ゴショイチゴ（Rubus chingii ）及びワレモコウ
属であるサングイソルバテヌイフォリアヴァルパ
ルヴィフロラマキシム（Sanguisorba tenuifolia var
parvifl ora MAXIM.）などから得たＧＯＤエラジタンニ
ン等が知られており、本発明の抗アレルギー作用剤の有
効成分として利用することもできる。

【００２５】また、上記した文献のＧＯＤエラジタンニ
ンに限らず、当該化合物を含む他の植物から抽出・精製
により製造されたものを利用することもできる。

【００２６】抽出原料となる植物にはなんら限定はな
く、上記文献で原料として用いる種々の植物の他、好ま
しくは他のバラ科植物、例えば、ルブスミクロフィル
ス（Ru bus microphyllus）、ルブスコエネアヌス（R.
koehneanus )、ルブストリフィドウス（R. trifidus
)、ルブスメデイウス（R. medius）、ルブスアク
ミナトウス（R. acuminatus）、ルブスエリプティク
ス（R. ellipticus）、ルブスマルチブリートウス
（R. multibureatus ）、ルブスコレアヌス（R. co re
anus）、ルブスフォリオスス（R. foliosus）、ルブ
スパルヴィフォリウス（R. parvifolius ）、甜茶（R
ubus suavissimus S. Lee ）、ルブスババエナル
ハシ（Rubus babae Naruhashi ）、ルブスフルチコス
スエル（Rubu s fruticosus L. ）、ルブスヒラセア
ヌスマキノ（Rubus hiraseanus Makino ）、ルブス
ヒルストウススンブ（Rubus hirsutus Thunb. ）、ル
ブスマサキイナルハシ（Rubus masakii Naruhashi
）、ルブスメデイウスオウクッツェ（Rubus mediu
s O.Ktze.）、ルブスニガクマオカエトナルハ
シ（Rubus nigakuma Oka et Naruhashi ）、ルブスニ
カイイオオウィ（Rubus nikaii Ohwi ）、ルブスオ
オミネアヌスコイヅ（Rubus ohmineanus Koidz.）,
ルブスペダトウススミス（Rubus pedatus Smith
）、ルブスシュウドチンギイナルハシ（Rubus pse
udochingii Naruhashi ）、ルブスタワダヌスコイヅ
（Rubus tawadanus Koidz.）、ルブストヨレンシス
コイヅ（Rubus toyorensis Koidz. ）、ルブストリフ
ィドウススンブエックスマレイ（Rubus trifidus
Thunb.ex Murrey）、ルブスウッチネンシスコイヅ
（Rubus utchinensis Koidz.）、ルブスイエノシマヌ
スコイヅ（Rubus yenoshimanusKoidz. ）及びサング
イソルバテヌイフォリアフィスチヴァルアルバ
トラウトヴエトメイヤー（Sanguisorba tenuifolia
Fisch var.alba Trautv. et Meyer. ）などを利用する
ことができる。

【００２７】これらの植物からＧＯＤエラジタンニンを
抽出するために用いる溶剤としては、水；メタノールも
しくはエタノールなどのアルコール類またはアセトン、
メチルエチルケトンなどのケトン、類等が利用される。
これらの溶剤は、単独であっても、または２種以上の溶
剤の任意の混合溶剤のいずれであってもよいが、抽出物
が最終的に食品等に配合されることを考慮すると、安全
性の点で、水、エタノール、またはこれらの混合溶剤を
用いることが好ましい。

【００２８】抽出の際の植物と溶剤との比率は特に限定
されるものではないが、植物１に対して溶剤２〜１００
０重量倍、特に抽出操作、効率の点で５〜１００重量倍
が好ましい。また、抽出温度は室温−常圧下での溶剤の
沸点の範囲とするのが便利であり、抽出時間は抽出温度
等によって異なるが、数秒から２日間の範囲とするのが
好ましい。

【００２９】このようにして得られる植物抽出物は、必
要であれば更に吸着剤処理法、膜分離法、溶媒分画法等
の精製法に付すことにより、高純度のＧＯＤエラジタン
ニンを得ることができる。

【００３０】植物抽出物の活性成分を溶媒分画法によっ
て精製するには、例えば植物抽出物にはＧＯＤエラジタ
ンニンが溶解しにくくかつ水と非混和性の溶媒であれば
使用できる。好ましい溶媒としては、ブタノール、酢酸
エチル、酢酸メチル等が挙げられる。また、限外濾過膜
（ＵＦ膜）を用いて分子量分画で精製することも可能で
ある。

【００３１】吸収カラムクロマトグラフィーを用いる方
法としては植物抽出物あるいはその溶媒分画物を吸着カ
ラムクロマトグラフィーに付し、１種類以上の適当な溶
媒で溶出することにより、高純度のＧＯＤエラジタンニ
ンを得ることができる。より具体的には、植物抽出物あ
るいはその溶媒分画物を例えば、少量の水、メタノー
ル、エタノール等の溶媒あるいはこれらの混合溶媒に溶
解し、セファデックス（Sephadex）ＬＨ−２０（スウ
ェーデン、ファルマシア社製）、ダイヤイオン（Diaio
n）ＨＰ２０（三菱化学製）、デベロシル（Develosil
）ＯＤＳ（野村化学製）、セパビーズ（Sepabeads
）ＨＰ１ＭＧ（三菱化学製）、トヨパール（Toyopea
rl ）ＨＷ４０Ｆ（東ソー製）等の吸着剤カラムに吸
着させた後、水で十分に洗浄し、メタノール、エタノー
ル、アセトン等の親水性溶媒あるいはこれらの混合溶媒
で溶出させればよい。２つ以上の吸着カラムクロマトグ
ラフィーを組み合わせることにより、より高純度のＧＯ
Ｄエラジタンニンを得ることもできる。

【００３２】更に、本発明で使用することのできるＧＯ
Ｄエラジタンニンは、ＧＯＤエラジタンニンを含む植物
体の細断物としても得られる。植物体細断物はそのもの
を有効成分として、またティーバッグのように使用時に
抽出する形態として使用することもできる。好ましい植
物体細断物としては、植物体の葉、茎または根の細断物
が挙げられる。

【００３３】このようにして得られるＧＯＤエラジタン
ニンを用いて本発明の抗アレルギー作用剤を調製するに
は、これをそのままあるいは公知の医薬用担体を用い
て、常法により製剤化すれば良い。

【００３４】本発明の抗アレルギー作用剤は、錠剤、顆
粒剤、粉剤及びシロップ剤等の経口剤、注射剤、座剤等
の非経口剤、更には、食品への添加用剤とすることがで
きる。前記医薬用担体としては、これらの剤形に応じた
通常用いられているものを特に制限なく使用することが
できる。

【００３５】利用される医薬用担体のうち、好ましいも
のの例としては、デンプン、乳糖、白糖、マンニット、
カルボキシメチルセルロース、コーンスターチ、無機塩
等の固形担体や蒸留水、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、
エタノール等のアルコール、プロピレングリコール、ポ
リエチレングリコール等の液体担体や各種の動植物油、
白色ワセリン、パラフィン、ロウ等の油性担体等が挙げ
られる。

【００３６】本発明の抗アレルギー作用剤を、例えば抗
炎症剤、抗アレルギー剤等のヒスタミン遊離抑制作用を
主として利用する医薬品として用いる場合、ＧＯＤエラ
ジタンニンの投与量は使用するＧＯＤエラジタンニンの
純度や、患者の年齢、症状等により大きく変動するが、
一般には、経口投与の場合、ＧＯＤエラジタンニンの純
品換算で成人一人当り０．５〜５０００ｍｇ／日の範囲
である。

【００３７】また、本発明の食品は、その目的に応じて
通常用いられる適宜な成分と食品添加用剤である前記本
発明の抗アレルギー作用剤とを配合することにより製造
することができる。

【００３８】本発明の食品としては、食品添加用剤であ
る前記本発明抗アレルギー作用剤の他に、例えば、ブド
ウ糖、果糖、ショ糖、マルトース、ソルビトール、ステ
ビオサイド、ルブソサイド、コーンシロップ、乳糖、ク
エン酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸、乳酸、Ｌ−アス
コルビン酸、ｄｌ−α−トコフェロール、エリソルビン
酸ナトリウム、グリセリン、プロピレングリコール、グ
リセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステ
ル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステ
ル、プロピレングリコール脂肪酸エステル、アラビアガ
ム、カラギーナン、カゼイン、ゼラチン、ペクチン、寒
天、ビタミンＢ類、ニコチン酸アミド、パントテン酸カ
ルシウム、アミノ酸類、カルシウム塩類、色素、香料、
保存剤等、通常の食品原料として使用されているものを
適宜配合することにより製造され、飴（キャンデー）、
チューインガム、牛乳、ヨーグルト、乳清飲料、乳酸菌
飲料、ジュース、飲料、アイスクリーム、プディング、
水ようかん等を得ることができる。

【００３９】本発明の抗アレルギー作用剤の有効成分で
あるＧＯＤエラジタンニンは、例えば、古くから飲用さ
れている甜茶にも含まれる成分であるので、安全性の点
での問題は全くない。食品や化粧品に配合する場合は、
通常ＧＯＤエラジタンニンの純品換算で、０．０００１
〜５．０％の濃度範囲とすることが望ましい。

【００４０】

【作用】本発明の抗アレルギー作用剤の有効成分である
ＧＯＤエラジタンニンは、Ｉ型アレルギー反応におけ
る、肥満細胞からのヒスタミン遊離を阻害し、これに起
因するスギ花粉やハウスダスト、カビ、ダニ、ぺットの
毛、皮膚及び糞等によるアレルギー性鼻炎やアトピー性
皮膚炎などのアレルギー性炎症及びアレルギー性喘息、
食物アレルギー等のアレルギー性疾患の改善・予防効果
を示すものである。

【００４１】

【発明の効果】本発明の抗アレルギー作用剤は、肥満細
胞からのヒスタミン遊離抑制活性を有し、Ｉ型アレルギ
ー反応によるアレルギー疾患の改善・予防効果を有し、
またＩＶ型アレルギーに対する作用の試験でも良好な結
果が得られたことから、ＩＶ型アレルギー症状の改善や
抑制効果もあり、アレルギー症状改善抑制剤として有用
なものである。

【００４２】更に、食品添加用の本発明の抗アレルギー
作用剤を含む食品を日常的に摂取することにより、スギ
花粉やハウスダスト、カビ、ダニ、ペットの毛、皮膚及
び糞等に起因するアレルギー性鼻炎やアトピー性皮膚炎
等のアレルギー性炎症疾患及びアレルギー性喘息、食物
アレルギー等のアレルギー性疾患などを予防・改善する
ことができる。

【００４３】

【実施例】次にＧＯＤエラジタンニンの製造例及び実施
例を挙げ、本発明を更に詳しく説明するが、本発明はこ
れらの実施例等になんら制約されるものではない。

【００４４】［製造例１］（甜茶からのＧＯＤエラジタンニンの製造（１））甜茶
１００ｇを３０００ｍｌ容の三角フラスコに入れ、熱水
１０００ｍｌを加え、沸騰水浴中で３時間抽出を行っ
た。これを濾過し、得た濾液を凍結乾燥して、甜茶抽出
物３２ｇを得た（これを以下、「ＴＣＥ」と称す）。

【００４５】このうち２３ｇを２リットルの水に溶か
し、同量の酢酸エチル、次いでｎ−ブタノールで溶媒分
画を行い、水溶性画分として１５ｇを得た（これを以
下、「ＴＣＦ３」と称す）。これを５００ｍｌの水に溶
かし、ダイヤイオンＨＰ２０のカラム（φ４ｃｍ×３
２ｃｍ）に吸着させ、２リットルの水で洗浄後、６０容
量％エタノール水２リットルで溶出することにより、６
０％エタノール溶出画分５．６ｇを得た（これを以下、
「ＴＣＦ５」と称す）。

【００４６】これを水−エタノール（１：１ｖ／ｖ）１
００ｍｌに溶かし、セファデックスＬＨ−２０のカラム
（φ４ｃｍ×３０ｃｍ）に吸着させ、１リットルの水で
洗浄後、５０容量％エタノール水及びエタノールそれぞ
れ１リットルで順に溶出後、７０容量％アセトン水で溶
出し７０％アセトン溶出画分１．７ｇを得た（これを、
以下「ＴＣＦ１１」と称す）。上記の製造・精製工程を
図１に示す。

【００４７】ＴＣＦ１１（７０％アセトン溶出画分）５
ｍｇを１Ｎの塩酸２ｍｌに溶かし１００℃、２時間加熱
後、酢酸エチル２ｍｌで３回抽出し、抽出物をＨＰＬＣ
分析したところ、図２に示すように保持時間５．２７５
分にサンギソルビン酸ジラクトン（ Sanguisorbic acid
dilactone、ＧＯＤ）のピークを、同２．２８３分に没
食子酸（ gallic acid、Ｇ）のピークを、同８．４９２
分にエラグ酸（ ellagic acid、Ｄ）のピークをそれぞ
れ認め、ＧＯＤタイプのエラジタンニンを確認した。Ｔ
ＣＦ１１中のＧＯＤエラジタンニン含量は９０％であっ
た。

【００４８】ＨＰＬＣの分析条件は、デベロシル（Deve
losil ）ＯＤＳ−５カラム（φ４．５ｍｍ×１５０ｍ
ｍ、野村化学製）を用い、０．０５Ｍリン酸一カリウ
ム：０．０５Ｍリン酸：エタノール：酢酸エチル（４
０：４０：１５：５ｖ／ｖ）で溶出し、２８０ｎｍで検
出した。

【００４９】［製造例２］（ＧＯＤエラジタンニンの製造（２））甜茶熱水抽出物
１０ｇを１リットルの水に溶かし、同量の酢酸エチル、
次いでｎ−ブタノールで溶媒分画を行い、水溶性画分と
して６．５８ｇを得た。このうち１ｇを５ｍｌの水に溶
かし、デベロシルＯＤＳ−１０カラム（φ４ｃｍ×３
０ｃｍ、野村化学製）に吸着させ、２リットルの水で洗
浄後、２０容量％エタノール水２リットルで溶出し、２
０％エタノール溶出画分０．３６ｇを得た。

【００５０】デベロシルＯＤＳ−１０カラム２０％エ
タノール溶出画分中のＧＯＤエラジタンニンは、製造例
１と同様にして確認した。

【００５１】［製造例３］（ＧＯＤエラジタンニンの製造（３））製造例１と同様
にして、甜茶熱水抽出物を得た。このうちの２３g を製
造例１に準じ、図３に示す工程により分画処理を行い、
ＴＣＥ、ＴＣＦ３、ＴＣＦ５およびＴＣＦ１１の各画分
を得た。

【００５２】［実施例１］（ヒスタミン遊離抑制活性の検定（１））製造例１及び
２で得たＧＯＤエラジタンニンについて、下記方法でヒ
スタミン遊離抑制活性を測定した。その結果を下記の表
１に示す。

【００５３】（ラット腹腔肥満細胞からのヒスタミン遊
離抑制活性）試験動物としては、体重２７２〜３４９ｇ
のウイスター系雄性ラット（日本チャールズリバー）
を、５日間以上馴化した後、使用した。ラットは、温度
２０〜２５℃、湿度４０〜７０％、照明１２時間／日
（７時点灯、１９時消灯）の環境下で飼育した。飼育
中、固型飼料ＭＦ（オリエンタル酵母工業製）と、５μ
ｍのフィルターでろ過後、紫外線照射した水道水を自由
摂取させた。

【００５４】このラット腹腔から、サリバン（Sulliva
n）らの方法〔 J. Immunol. 114, 1473 - 1479 (1975)
〕に準じて肥満細胞を得た。すなわち、８週令のウイ
スター系雄性ラットを断頭により放血致死させた後、腹
腔内に肥満細胞用無カルシウム培地（Ca2+ free mast c
ell medium; ＭＣＭ液* ）を１匹あたり２０ｍｌ注入
し、２分間腹部を軽くマッサージしてから腹腔浸出液を
回収し、ＢＳＡ−生理食塩水（比重１．０６８）を用い
る重層遠心法により肥満細胞を単離した。得られた細胞
はＭＣＭ液で２回洗浄後、２×１０4 個／ｍｌとなるよ
うにＭＣＭ液に懸濁させ、細胞懸濁液とした。

【００５５】* ＭＣＭ液：１４０ｍＭのＮａＣｌ、２．
５ｍＭのＫＣｌ、１．２ｍＭのＭｇＣｌ₂、５ｍＭのグ
ルコース及び０．１％の牛血清アルブミン（ＢＳＡ）を
含むｐＨ７．１の６．７ｍＭリン酸緩衝液。

【００５６】ヒスタミン遊離抑制試験は次のようにして
行った。すなわち、試料溶液５μｌに上記で得た細胞懸
濁液０．５ｍｌを加えて３７℃−１０分間プレインキュ
ベートした。次いで、脱顆粒誘発剤としてコンパウンド
４８／８０（５０μｇ／ｍｌ）５μｌを加えて３７℃−
１０分間反応させた。その後、いったん氷冷し、遠心分
離（３０００×ｇ、２．５分、４℃）した上清中に遊離
されたヒスタミン量を蛍光検出器付き高速液体クロマト
グラフィーにより測定した。

【００５７】なお、ヒスタミン遊離抑制活性は、測定さ
れたヒスタミン値から次式により算出した。

【００５８】ヒスタミン遊離抑制率（％）＝（１−（Ｓ
Ｒ−Ｃ））／（Ｒ−Ｃ）×１００Ｃ：誘発剤を加えない対照の細胞から遊離されるヒスタ
ミン量Ｒ：誘発剤を加えたときに細胞から遊離されるヒスタミ
ン量ＳＲ：被験試料を共存させて誘発剤を加えたときに細胞
から遊離されるヒスタミン量

【００５９】［表１］被験試料ヒスタミンの遊離抑制活性ＩＣ85* (ｐｐｍ) クロモグリク酸ナトリウム３００** 製造例１の甜茶熱水抽出物１４０同ダイヤイオンＨＰ−２０６０％エタノール溶出物１２．５同セファデックスＬＨ−２０７０％アセトン溶出物７．５製造例２の甜茶熱水溶出物７２．６同水溶性画分１８．５同デベロシルＯＤＳ−１０１０．０２０％エタノール溶出物 * ＩＣ85；ヒスタミンの遊離を８５％抑制する濃度＊＊クロモグリク酸ナトリウムは、３００ｐｐｍにおいてもヒスタミン遊離を５０％しか抑制せず、更に用量を上げても抑制率は８５％に達しない。

【００６０】［実施例２］（ヒスタミン遊離抑制活性の検定（２））実施例１と同
様にして製造例３で得たＴＣＥ、ＴＣＦ３、ＴＣＦ５お
よびＴＣＦ１１の各画分のヒスタミン遊離抑制活性を検
討した。この結果を図４に示す。

【００６１】［実施例３］（ヒスタミン遊離抑制活性の検定（３））甜茶の熱水抽
出物から、ＨＰＬＣによりエラジタンニン・モノマー
（ＭＷ：６３４、イソストリクチニン）とＧＯＤエラジ
タンニン・ダイマー（ＭＷ：１８８６）を得た。また、
ＴＣＦ１１から、同様にして分子量３０００以上のＧＯ
Ｄエラジタンニン・ポリマーを得た。用いたＨＰＬＣの
条件は下の通りである。

【００６２】カラム；デベロシル（Develosil ） ODS-5 (4.5 ×150
mm ) 溶剤；０．０５ＭＨ₃ＰＯ₄ ：０．０５ＭＫＨ₂Ｐ
Ｏ₄ ：ＥｔＯＨ：ＡｃＯＥｔ＝４０：４０：１５：５流速；１．０ml／min 検知；ＵＶ２８０ｎｍ

【００６３】これらのエラジタンニン・モノマー、ＧＯ
Ｄエラジタンニン・ダイマーおよびＧＯＤエラジタンニ
ン・ポリマーについて、ラット腹腔肥満細胞からのコン
パウンド４８／８０によるヒスタミン遊離抑制効果を検
討した。この結果を図５に示す。

【００６４】図５の結果から明らかなように、それぞれ
濃度依存的にヒスタミンの遊離を抑制し、エラジタンニ
ンの重合度が増すほど活性は著しく増加した。具体的に
は、モノマーのＩＣ50が５０μＭであるのに対し、ダイ
マーのＩＣ50は４μＭ、ポリマーのＩＣ50は０. ６μＭ
であり、ダイマーおよびポリマーの活性はそれぞれモノ
マーの１２倍及び８３倍であった。

【００６５】また、公知の抗アレルギー剤であるケトチ
フェンと比較した場合、ダイマーおよびポリマーの活性
はそれぞれ１００倍及び６６７倍であった。

【００６６】なお、同時に緑茶ポリフェノールの主成分
であるエピガロカテキンガレートとカテキンについても
評価を行ったが、エピガロカテキンガレートのＩＣ50は
１５０μＭと弱く、またカテキンは全く抑制しなかっ
た。

【００６７】［実施例４］（アレルギー性鼻炎に及ぼすＧＯＤエラジタンニンの影
響）１. 受動感作ラットの作製抗DNP-As血清（血清IgE titer 1:32）を非感作ラットの
両側の頬部皮内と鼻吻皮下に各0.1ml 注射し、48時間後
に使用した。

【００６８】２. 鼻アレルギー誘発受動感作ラットを一晩絶食した。ウレタン麻酔下（12.5
mg/kg 、腹腔内投与）で頚部正中切開を施し、呼吸維
持のためカニューレを気管に挿入し、食道を結さつし
た。気管切開部より鼻腔内にポリエチレンチューブを挿
入した。ポリエチレンチューブの他端は灌流ポンプに接
続し、37℃に加温した生理食塩水を0.25ml/minの流速で
灌流し、鼻腔内を洗浄した。1 ％エバンスブルーを0.5m
l/100g body weightの割合で静脈注入し、10分間灌流液
を採取した（period 1）。次にDNP-As生理食塩水溶液
（2mg/ml）を10分間灌流（period 2）、鼻腔内の抗原を
除去した後、再び生理食塩水にて30分間灌流し灌流液を
10分ごとにわけて分取した（period3,4,5 ）。口腔内に
は灌流液の漏出を防ぐため、グリセリンを浸した脱脂綿
を詰めた。採取した試料は3000rpm 、10分遠心分離した
後に、分光光度計にて620nm の吸光度を測定し、鼻腔血
管透過性を評価した。

【００６９】なお、ＧＯＤエラジタンニン（TCF11 ）は
感作前日から４日間連続経口投与を行い、対照群には同
容量の純水のみ投与した。陽性対照群にはトラニスト
（tranilast ）300mg/kgを反応惹起１時間前に単回投与
した。

【００７０】この結果を図６に示す。

【００７１】その結果、抗原の存在する状況下（period
2）では、陽性対象群のトラニラストとほぼ同等の効果
を示し、その後抗原を除いた状況（period 3,4,5）にお
ける、症状改善の度合は、トラニラストよりも良好な結
果が得られ、ＧＯＤエラジタンニンがアレルギー性鼻炎
に対して効果があることが明らかになった。

【００７２】［実施例５］（ＧＯＤエラジタンニンのマウス耳介接触性皮膚炎に対
する効果）ICR マウスの背部に、2.5 ％のジニトロフル
オロベンゼン（dinitrofluorobenzene:DNFB 、生化学工
業、東京）エタノール溶液100 μl を皮下注射し感作し
た。６日後に１％DNFBオリーブ油溶液を25μl 耳介の両
面に塗布して一次耳介接触性皮膚炎を惹起した。24時間
後の耳介浮腫及び耳介血管透過性を測定した。

【００７３】耳介浮腫は、直径8mm の皮革打ち抜き用パ
ンチを用いて中央部を打ち抜き、耳介重量を測定した。
非抗原塗布の対照耳介を引いた値を腫張量とする。

【００７４】血管透過性は0.1ml/10g の1 ％エバンスブ
ルー生理食塩水溶液を尾静脈内に投与し、耳介のエバン
スブルー浸透色をKatayama* らの方法に従い、0.5ml の
1NKOH水溶液に37℃で浸漬し、一昼夜処理後、4.5ml の
抽出液（0.6N H₃PO₄：アセトン＝5 ：13）を加えて撹拌
し、室温、2700xg、15min 遠心して得られた上清が620n
m における吸光度を測定し、漏出色素を算出した。な
お、エバンスブルーの色素量はμg/ear として表示し
た。

【００７５】なお、ＧＯＤエラジタンニン（TCF11 ）は
DNFB皮下感作一日前から耳介接触性皮膚炎惹起まで７日
間連日に経口投与し、対照群には同容量の純水のみで、
陽性対照群にはデキサミタゾン（Dexamethasone 、Sigm
a ）を反応惹起直前に単回経口投与した。

【００７６】この結果を図７、８に示す。

【００７７】その結果、陽性対象群のデキサミタゾンと
ほぼ同等の効果を示した。したがって、ＧＯＤエラジタ
ンニンは、接触性皮膚炎に対して効果があることが明ら
かになった。

【００７８】*Katayama,S.,Shinoyama,H.,Ohtake,S:A n
ew method for extraction of extravasated dye in th
e skin and influence of fasting stress on passive
cutaneous ana;hylaxisin guinea pigs and rats. Micr
obiol.Immunol.22:89-101,1978

【００７９】［実施例６］（ＧＯＤエラジタンニンのマウス遅延型足浮腫テスト）
ICR マウスに107cells/0.2mlの羊赤血球（SRBC）を静脈
注射して感作した。４日後に108cellsのSRBCを左後肢せ
き皮下に投与して遅延型足浮腫反応を惹起し、惹起24時
間後、浮腫の程度を測定した。GOD エラジタンニン（TC
F11 ）はSRBC感作日より足浮腫惹起までの4 日間連続経
口投与を行い、対照群には同容量の純水のみ投与した。
陽性対照群にはデキサミタゾン（Dexamethasone 、Sigm
a ） 1mg/kg を単回経口投与した。

【００８０】この結果を図９に示す。

【００８１】その結果、陽性対象群のデキサミタゾンと
ほぼ同等の効果を示した。したがって、ＧＯＤエラジタ
ンニンは、ツベルクリン反応に代表されるＩＶ型アレル
ギーに対して効果があることが明らかになった。

【００８２】［実施例７］（錠剤）ＧＯＤエラジタンニンとして、製造例１の
ダイヤイオンＨＰ２０の６０％エタノール溶出物を用
い、錠剤を製造した。すなわち、製造例１のダイヤイオ
ンＨＰ２０の６０％エタノール溶出物１５０ｇを同量
の乳糖及びステアリン酸マグネシウム５ｇと混合し、こ
の混合物を単発式打錠機にて打錠し、直径１０ｍｍ、重
量３００ｍｇの錠剤を製造した。

【００８３】この錠剤を一日２錠、一週間服用すること
により、花粉症の目のかゆみや鼻汁過多等の症状は大幅
に軽減された。

【００８４】［実施例８］（顆粒剤）実施例７で得た錠剤を粉砕、整粒し、篩
別して２０〜５０メッシュの顆粒剤を得た。

【００８５】［実施例９］（キャンデー）下記の組成で、キャンデーを製造した。
ＧＯＤエラジタンニンの配合にもかかわらず、苦みもな
く、味は良好であった。

【００８６】（組成）（配合％）グラニュー糖５５．０水飴４３．５クエン酸１．０香料０．２色素０．２ＧＯＤエラジタンニン* ０．１ * ＧＯＤエラジタンニン：製造例１のセファデックス
ＬＨ−２０の７０％アセトン溶出物

【００８７】［実施例１０］（ジュース）下記の組成により、ジュースを製造した。
配合されたＧＯＤエラジタンニンがジュースの味や色に
影響を与えることはなかった。

【００８８】（組成）（配合％）冷凍濃縮温州みかん果汁５．０果糖ブドウ糖液糖１１．０クエン酸０．２Ｌ−アスコルビン酸０．０２香料０．２色素０．１ＧＯＤエラジタンニン* ０．２水８３．２８ * ＧＯＤエラジタンニン：製造例１のセファデックス
ＬＨ−２０の７０％アセトン溶出物

【図面の簡単な説明】

【図１】製造例１における甜茶熱水抽出物からのＧＯ
Ｄエラジタンニンの製造工程を示す図面。

【図２】製造例１で得たＧＯＤエラジタンニンの加水
分解物のＨＰＬＣ分析結果を示す図面。

【図３】製造例３における甜茶熱水抽出物からのＧＯ
Ｄエラジタンニンの製造工程を示す図面。

【図４】製造例３で得たＴＣＥ、ＴＣＦ３、ＴＣＦ５
およびＴＣＦ１１のヒスタミン遊離抑制活性を示す図
面。

【図５】エラジタンニン・モノマー、ＧＯＤエラジタ
ンニン・ダイマーおよびＧＯＤエラジタンニン・ポリマ
ーのヒスタミン遊離抑制活性を示す図面。

【図６】実施例４におけるアレルギー性鼻炎に及ぼす
ＧＯＤエラジタンニンの影響を示す図面。

【図７】実施例５におけるマウス耳介接触性皮膚炎に
よる血管透過性亢進に対するＧＯＤエラジタンニンの抑
制効果を示す図面。

【図８】実施例５におけるマウス耳介接触性皮膚炎に
よる耳介重量増加に対するＧＯＤエラジタンニンの抑制
効果を示す図面。

【図９】実施例７における羊赤血球によるマウス遅延
型足浮腫に対するＧＯＤエラジタンニンの抑制効果を示
す図面。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所Ａ６１Ｋ 7/00 Ａ６１Ｋ 7/48 7/48 31/70 ＡＡＬ 31/70 ＡＡＬＡＡＭＡＡＭＡＢＦＡＢＦＡＣＤＡＣＤＡＤＡＡＤＡＡＥＭＡＥＭＣ０７Ｈ 13/08 Ｃ０７Ｈ 13/08 Ａ２３Ｌ 2/00 Ｆ (72)発明者藤居亙大阪府三島郡島本町若山台１丁目１番１号サントリー株式会社生物医学研究所内

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】ＧＯＤタイプのエラジタンニンを有効成
分として含有する、抗アレルギー作用剤。
【請求項２】ＧＯＤタイプのエラジタンニンが、次の
式（Ｉ）、【化１】（式中、Ｒ_１及びＲ_２はそれぞれ水素原子またはガロイ
ル基を示すか、一緒になってヘキサヒドロキシジフェノ
イル基を示す）で表される構造単位を有するものである
請求項第１項記載の抗アレルギー作用剤。
【請求項３】ＧＯＤタイプのエラジタンニンが、次の
式（II）、【化２】（式中、Ｒ_１及びＲ_２は前記した意味を有し、ｎは０な
いし２０の数を示す）で表される化合物である請求項第
１項記載の抗アレルギー作用剤。
【請求項４】ＧＯＤタイプのエラジタンニンが、次の
式（III ）、【化３】（式中、Ｒ_１及びＲ_２は前記した意味を有する）で表さ
れる化合物である請求項第１項記載の抗アレルギー作用
剤。
【請求項５】ＧＯＤタイプのエラジタンニンが、バラ
科植物体より抽出されたものである請求項第１項ないし
第４項の何れかの項記載の抗アレルギー作用剤。
【請求項６】ＧＯＤタイプのエラジタンニンがバラ科
植物体の細断物である請求項第１項ないし第４項の何れ
かの項記載の抗アレルギー作用剤。
【請求項７】バラ科植物体の細断物が、葉、茎または
根の細断物である請求項第６項記載の抗アレルギー作用
剤。
【請求項８】バラ科植物体の細断物が、抽出に適した
形態に形成されたものである請求項第６項記載の抗アレ
ルギー作用剤。
【請求項９】バラ科植物が、バラ科キイチゴ属、ワレ
モコウ属及びバラ属のいずれかの属の植物である請求項
第５項または第６項記載の抗アレルギー作用剤。
【請求項１０】バラ科植物が、甜茶（Rubus suavissi
mus S.Lee ）、シマバライチゴ（Rubus lambertianus S
ERINGE）、ワレモコウ（Sanguisorba offici nalis
L.）、ゴショイチゴ（Rubus chingii ）、ルブスコレ
アヌス（Rubus co reanus）、ローザヘンリュイボウ
ル（Rosa henryi BOUL. ）, ルブスクラタエギフォリ
ウスブンゲ（Rubus crataegifolius BUNGE）, ルブス
パルヴィフォリウスエル（Rubus parvifolius
L.）, ルブスパルマトウススンブ（Rubus palmatus
THUNB. ）、ホウロクイチゴ（Rubus sieboldii BLUME
）, ビロードイチゴ（Rubus corchorifolius L. ）,
ルブスパルマトウススンブヴァルコプトフィル
スクンゼ（Rubus palmatus THUNB. var coptophyllus
KUNZE）, ルブスイダエウスエル（Rubus idaeus
L. ）, ルブスメソゲアヌスフォスケ（Rubus mesogea
nus FOCKE）, ルブスフォエニコラシウスマキシム
（Rubus phoenicolasius MAXIM. ）, ルブスカリシノ
イデスハヤト（Rubu s calycinoides HAYATO ）, サン
グイソルバテヌイフォリアヴァルパルヴィフロラ
マキシム（Sanguisorba tenuifolia var parviflora
MAXIM.）, ルブスババエナルハシ（Rubus babae Na
ruhashi ）, ルブスフルチコススエル（Rubus frut
icosus L. ）, ルブスヒラセアヌスマキノ（Rubus
hirasean us Makino ）, ルブスヒルストウススンブ
（Rubus hirsutus Thunb. ）, ルブスマサキイナル
ハシ（Rubus masakii Naruhashi ）, ルブスメデイウ
スオウクッツェ（Rubus medius O.Ktze.）, ルブス
ニガクマオカエトナルハシ（Rubus nigakuma Oka e
t Naruhashi ）, ルブスニカイイオオウィ（Rubus
nikaii Ohwi ）, ルブスオオミネアヌスコイヅ（Ru
bus ohmineanusKoidz. ）, ルブスペダトウススミ
ス（Rubus pedatus Smith ）, ルブスシュウドチンギイ
ナルハシ（Rubus pseudochingii Naruhashi ）, ルブ
スタワダヌスコイヅ（Rubus tawadanus Koidz.）,
ルブストヨレンシスコイヅ（Rubus toyorensis Koi
dz. ）, ルブストリフィドウススンブエックスマ
レイ（Rubus trifidus Thunb.ex Murrey）, ルブスウ
ッチネンシスコイヅ（Rubus utchinensis Koidz.）,
ルブスイエノシマヌスコイヅ（Rubus yeno shimanus
Koidz. ）またはサングイソルバテヌイフォリアフ
ィスチヴァルアルバトラウトヴエトメイヤー
（Sanguisorba tenuifolia Fisch var．alba Trautv. e
t Meyer. ）である請求項第５項または第６項記載の抗
アレルギー作用剤。
【請求項１１】請求項第１項ないし第１０項の何れか
の項記載の抗アレルギー作用剤を含有するＩ型アレルギ
ー症状改善抑制剤。
【請求項１２】請求項第１項ないし第１０項の何れか
の項記載の抗アレルギー作用剤を含有するＩＶ型アレル
ギー症状改善抑制剤。
【請求項１３】請求項第１項ないし第１０項の何れか
の項記載の抗アレルギー作用剤を含有するヒスタミン遊
離抑制剤。
【請求項１４】請求項第１項ないし第１０項の何れか
の項記載の抗アレルギー作用剤を含有する食品。
【請求項１５】請求項第１項ないし第１０項の何れか
の項記載の抗アレルギー作用剤を含有するアレルギー性
鼻炎症状改善抑制剤。
【請求項１６】請求項第１項ないし第１０項の何れか
の項記載の抗アレルギー作用剤を含有する花粉症改善抑
制剤。
【請求項１７】請求項第１項ないし第１０項の何れか
の項記載の抗アレルギー作用剤を含有するハウスダス
ト、カビ、ダニ、ペットの毛、皮膚及び糞等によるアレ
ルギー症状改善抑制剤。
【請求項１８】請求項第１項ないし第１０項の何れか
の項記載の抗アレルギー作用剤を含有する鼻汁分泌過多
症状改善抑制剤。
【請求項１９】請求項第１項ないし第１０項の何れか
の項記載の抗アレルギー作用剤を含有する接触性皮膚炎
改善抑制剤。
【請求項２０】請求項第１項ないし第１０項の何れか
の項記載の抗アレルギー作用剤を含有するアトピー性皮
膚炎症状改善抑制剤。
【請求項２１】請求項第１項ないし第１０項の何れか
の項記載の抗アレルギー作用剤を含有するアレルギー性
喘息症状改善抑制剤。
【請求項２２】請求項第１項ないし第１０項の何れか
の項記載の抗アレルギー作用剤を含有する腸管アレルギ
ー症状改善抑制剤。
【請求項２３】請求項第１項ないし第１０項の何れか
の項記載の抗アレルギー作用剤を含有する蕁麻疹症状改
善抑制剤。