JPH0913075A

JPH0913075A - 血中脂質を低減する油脂

Info

Publication number: JPH0913075A
Application number: JP7191082A
Authority: JP
Inventors: Hiroaki Tsuji; 宏明辻; Akira Seto; 明瀬戸; Katsumi Imaizumi; 勝己今泉; Ikuo Ikeda; 郁男池田
Original assignee: Nisshin Oil Mills Ltd
Current assignee: Nisshin Oillio Group Ltd
Priority date: 1995-07-04
Filing date: 1995-07-04
Publication date: 1997-01-14
Anticipated expiration: 2015-07-04
Also published as: JP3544246B2

Abstract

(57)【要約】【構成】グリセリドの構成脂肪酸としてｎ−３系長鎖
多価不飽和脂肪酸を含み、ｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪
酸の総量の４０モル％未満がグリセリドの２位に結合し
たトリグリセリドからなる油脂および該トリグリセリド
を含有してなる油脂。【効果】本発明の油脂は、従来のｎ−３系長鎖多価不
飽和脂肪酸供給源より少量の摂取で、血中トリグリセリ
ド値および／またはコレステロール値を減少させ、血中
脂質改善を容易ならしめる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は血中脂質濃度を低減する
作用のある油脂に関する。

【０００２】

【従来の技術】血清中の脂質濃度を評価する項目として
はコレステロール、トリグリセリド、リン脂質および遊
離脂肪酸が知られており、これらの脂質含量が増加した
状態が高脂血症である。血清コレステロール値と虚血性
心疾患の発症危険率との間には正の相関が認められ、し
かも血清コレステロール値を低下させると虚血性心疾患
の発症危険率も低下することが疫学調査より明らかにさ
れている（例えば、水島裕ら、「今日の治療薬（１９９
３年版）」、第３６１頁、南江堂）。また高トリグリセ
リド血症は脂肪肝、膵炎等の発症に結びつくほか、虚血
性心疾患の危険因子としての側面も指摘されている。そ
のため臨床的には、高脂血症のなかでも特に高コレステ
ロール血症および高トリグリセリド血症が大きな問題と
なっている。

【０００３】高脂血症が発症した場合、一般的には高脂
血症患者に対して摂取カロリー制限等の食事療法を２〜
３カ月間行い、血清中の脂質量の推移を観察した後、主
に冠状動脈疾患をはじめとする動脈硬化性疾患につなが
る危険因子を排除するためにクロフィブラート、ニコチ
ン酸コレスチラミン等の抗高脂血症剤が投与され、血清
中のコレステロール値やトリグリセリド値を低減化させ
ることが行われている。

【０００４】一方、エイコサペンタエン酸（all cis −
5,8,11,14,17−eicosapentaenoic acid 、以下ＥＰＡと
略す。Ｃ_20:5、Ｃの後の数字は総炭素数：二重結合数を
表わし以下同様とする。）やドコサヘキサエン酸（all
cis −4,7,10,13,16,19 −docosahexaenoic acid、以下
ＤＨＡと略す。Ｃ_22:6）のようなｎ−３系長鎖多価不飽
和脂肪酸およびこれらを含む食品素材が血清中トリグリ
セリド値やコレステロール値を低減させる作用があるこ
とが動物実験や臨床実験により明らかにされてきた（例
えば、Robinson，D.R.ら、J.Lipid Res.、第３４巻、第
１４３５頁、１９９３年）。血清中トリグリセリド値の
低減化の作用機序はｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸を含
む油脂の摂取により肝臓内でのトリグリセリド合成能が
抑制され、その結果として血中へのトリグリセリドの放
出が抑制されるためと推測されている（原健次、油
脂、第４６巻、No．４、第９０頁、１９９３年）。ま
た、血清中コレステロール値の低減はｎ−３系長鎖多価
不飽和脂肪酸が肝臓におけるコレステロール合成能を抑
制することによるものと推定されている。（Choi，Y.S.
ら、Lipids、第２４巻、第４５頁、１９８９年）。

【０００５】そこで、高脂血症の予防や高脂血症患者の
血清脂質濃度を改善する目的で、ＥＰＡやＤＨＡを含む
魚を多く含む食品を意図的に摂取したり、ＥＰＡやＤＨ
Ａを含む魚油や魚油濃縮物等を素材とする健康食品等が
市販されている。しかしこれらは多量かつ長期間にわた
り摂取あるいは投与することが必要であった。ＥＰＡや
ＤＨＡを含む魚油としては主にイワシ油、タラ肝油、ニ
シン油、イカ油、マグロ眼窩油等が用いられるが、これ
らの油脂の化学的構造はいずれもグリセリドにエステル
結合して存在するｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸の総量
の５０モル％以上が、トリグリセリドの２位の構成脂肪
酸としてあり、換言すれば、ｎ−３系長鎖多価不飽和脂
肪酸は１位および３位よりも２位により多くエステル結
合したトリグリセリド構造をとっている。

【０００６】一方、ＥＰＡやＤＨＡは前記のように血清
脂質の低減化効果を有する反面、通常の例えば食用植物
油脂を構造する脂肪酸に比べて二重結合を分子内に数多
く持つため酸化され易く、過剰に摂取すると生体に有害
な作用をもたらすことも知られている。生体内で脂質の
過酸化反応が進行すると生体膜に障害を生じ、虚血性疾
患、動脈硬化、白内障、癌、アルツハイマー病、膠原
病、アミロイドーシス等の病変の原因となることが推測
されている。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、このような
現状に鑑みなされたものであり、その目的とするところ
は、ヒトをはじめ動物に対して、副作用がなく、従来の
ｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸供給源よりも少量の摂取
で、血中脂質濃度を減少させ、血中脂質改善を容易なら
しめる作用のある油脂を提供することにある。

【０００８】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記目的
を達成すべく鋭意研究を行った結果、グリセリド構造の
１位および／または３位にｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪
酸を多くもつ油脂は、ｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸の
供給源として用いられている、２位にｎ−３系長鎖多価
不飽和脂肪酸を多くもつ魚油に比べて血清コレステロー
ル値やトリグリセリド値を減少させる効果が顕著に高
く、上記の目的が達成されることを見出した。本発明は
かかる知見に基づいて完成されたものである。

【０００９】すなわち本発明の要旨は、グリセリドの構
成脂肪酸としてｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸を含み、
ｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸の総量の４０モル％未満
がグリセリドの２位に結合したトリグリセリドからな
る、または該トリグリセリドを含有してなることを特徴
とする血中脂質濃度を低減する作用のある油脂である。

【００１０】本発明で特徴とするトリグリセリドは、ｎ
−３系長鎖多価不飽和脂肪酸を含有する脂肪酸とグリセ
リンとから構成されるトリグリセリドにおいて、ｎ−３
系長鎖多価不飽和脂肪酸の総量を１００モル％としたと
き、その４０モル％未満とｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪
酸以外の任意の脂肪酸とがトリグリセリドの２位にエス
テル結合しており、かつｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸
の６０モル％以上とｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸以外
の任意の脂肪酸とがトリグリセリドの１位および３位に
おいてランダムにまたは非ランダムに分布してエステル
結合しているものである。

【００１１】ここにｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸とは
炭素数が１８以上で二重結合を３個以上を有するｎ−３
系直鎖状不飽和脂肪酸をいい、具体的にはα−リノレン
酸（Ｃ_18:3）、オクタデカテトラエン酸（Ｃ_18:4、6,9,
12,15 −octadecatetraenoicacid ）、アラキドン酸
（Ｃ_20:4）、ＥＰＡ（Ｃ_20:5）、ドコサペンタエン酸
（Ｃ_22:5、7,10,13,16,19 −docosapentaenoic acid
）、ＤＨＡ（Ｃ_22:6）等を例示することができる。本
発明では、これらのうちα−リノレン酸、アラキドン
酸、ＥＰＡ、ドコサペンタエン酸およびＤＨＡからなる
群から選ばれる１種もしくは２種以上の任意の割合の混
合脂肪酸が好ましく、さらにはＥＰＡおよび／またはＤ
ＨＡがより好ましい。

【００１２】またｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸以外の
脂肪酸としては、短鎖、中鎖および長鎖各脂肪酸、また
飽和および不飽和各脂肪酸のいかんを問わず使用できる
が、このうち直鎖状であって、炭素数が６以上の中鎖な
いし長鎖の、飽和または不飽和脂肪酸に属するものが望
ましい。かかる脂肪酸としてカプロン酸（Ｃ_6:0）、カ
プリル酸（Ｃ_8:0）、カプリン酸（Ｃ_10:0）、ラウリン
酸（Ｃ_12:0）、ミリスチン酸（Ｃ_14:0）、パルミチン酸
（Ｃ_16:0）、パルミトオレイン酸（Ｃ_16:1）、ステアリ
ン酸（Ｃ_18:0）、オレイン酸（Ｃ_18:1）、エライジン酸
（Ｃ_18:1）、リノール酸（Ｃ_18:2）、α’−リノレン酸
（Ｃ_18:3、5,8,11−オクタデカトリエン酸）、γ−リノ
レン酸（Ｃ_18:3、6,9,12−オクタデカトリエン酸）、エ
レオステアリン酸（Ｃ_18:3、9,11,13 −オクタデカトリ
エン酸）、アラキジン酸（Ｃ_20:0）、ガドレイン酸（Ｃ
_20:1）、ベヘン酸（Ｃ_22:0）、エルカ酸（Ｃ_22:1）、ブ
ラシジン酸（Ｃ_22:1）等をあげることができる。これら
の脂肪酸は単独で用いてよく、または任意の割合の混合
脂肪酸として使用してもさしつえない。なお、これらの
うち、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オ
レイン酸、リノール酸等が好ましい。

【００１３】前記したｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸お
よびこれ以外の脂肪酸で構成される本発明のトリグリセ
リドを製造するには、化学合成法、エステル交換法、あ
るいは天然物からの抽出法等の技術を利用すればよい。
化学合成法としては、例えば所望量および組成の脂肪
酸、脂肪酸無水物あるいは脂肪酸ハロゲン化物（脂肪酸
クロライド）とグリセリンとを、酸性物質（塩酸、硫
酸、パラトルエンスルホン酸等）、アルカリ性物質（水
酸化ナトリウム、水酸化カリウム等）、金属（亜鉛、ス
ズ、チタン、ニッケル等）、金属酸化物（酸化亜鉛、ア
ルミナ、酸化第一鉄等）、金属ハロゲン化物（塩化アル
ミニウム、塩化スズ等）等のエステル化触媒の存在下ま
たは非存在下で、窒素ガス気流中にて１００〜２５０℃
に加熱し、生成する水を除きながら１〜２５時間エステ
ル化反応せしめるのがよい。

【００１４】エステル化生成物は必要に応じてアルカリ
脱酸処理、活性炭、活性白土、アルミナ、シリカゲル、
イオン交換樹脂等を用いる吸着・分画処理、メタノール
やエタノール等の親水性有機溶剤および／またはｎ−ヘ
キサンやキシレン等の親油性有機溶剤を用いる溶剤分別
処理を施して遊離脂肪酸、モノグリセリド、ジグリセリ
ド、着色物質、有臭成分等の不純物を除去し、さらには
これらの処理を適宜に組み合わせ、トリグリセリドの２
位に結合するｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸残基の含有
量が、トリグリセリドの１位、２位および３位に結合す
るｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸残基の総含有量の４０
モル％未満となるようにトリグリセリド成分を分画ない
しは濃縮してもよい。なお本発明のトリグリセリドは、
例えば加熱かつ減圧下に水蒸気を吹き込み脱臭処理して
おくことが望ましい。

【００１５】エステル交換法を利用して本発明のトリグ
リセリドを得るには、例えば原料としてｎ−３系長鎖多
価不飽和脂肪酸を多量に含有する脂肪酸のトリグリセリ
ド（成分ａ−１）とｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸を実
質的に含まないか少量含有の脂肪酸（成分ａ−２）、成
分ａ−２の低級アルコールエステル（メチルエステル、
エチルエステル等。以下同様。）または成分ａ−２のト
リグリセリドとを所望割合で混合し、あるいはｎ−３系
長鎖多価不飽和脂肪酸を実質的に含まないか少量含有の
脂肪酸のトリグリセリド（成分ｂ−１）とｎ−３系長鎖
多価不飽和脂肪酸を多量に含有する脂肪酸（成分ｂ−
２）または成分ｂ−２の低級アルコールエステルとを所
要量混合し、触媒として水酸化ナトリウム、水酸化カリ
ウム等のアルカリ性物質、ナトリウムメチラート、ナト
リウムエチラート、リチウムブチラート等の金属アルコ
ラート（金属アルコキシド）、塩基性アニオン交換樹
脂、酸性カチオン交換樹脂等のイオン交換樹脂、あるい
はリパーゼを用いてエステル交換反応を行わしめるのが
簡便である。なお触媒として特定のリパーゼを用いてエ
ステル交換すると、後述するように、トリグリセリドの
１位および３位に選択的に新たな脂肪酸基を導入するこ
とができ、本発明のトリグリセリドを製造する方法とし
て望ましい。

【００１６】前記エステル交換の原料は、成分ａ−１と
してアマニ油、エゴマ油、シソ油等の植物油、イワシ
油、タラ肝油、ニシン油、イカ油、マグロ眼窩油等の魚
油、クジラ、アザラシ、オットセイ等の海産哺乳動物を
起源として得られる圧搾もしくは抽出油、該動物の乳
脂、クロレラ、スピルリナ、ドナリエラ等またナンノク
ロロプシス属（例えばNannochloropsis oculata ）、ト
ラストキトリウム属（例えばThraustochytrium aureum
）、クリプテコディニウム属（例えばCrypthecodinium
cohnii）、イソクリシス属（例えばIsochrysis galban
a）等に属する微細藻類から抽出された油脂、モルティ
エレラ（Mortierella)属等の微生物に由来する油脂、ま
たｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸またはこれを任意の割
合で含む前記各種脂肪酸（段落番号００１２の項参照）
との混合脂肪酸のトリグリセリドを使用できる。成分ａ
−２としては段落番号００１２の項に記載の各種脂肪酸
またはその誘導体を用いることができる。

【００１７】また成分ｂ−１として動植物、微生物、微
細藻類等から得られるトリグリセリドがあり、大豆油、
菜種油、綿実油、コーン油、パーム油、ヤシ油、サフラ
ワー油、ハイオレイックサフラワー油、ヒマワリ油、ハ
イオレイックヒマワリ油、オリーブ油、落花生油、カカ
オ脂、チャイニーズタロウ、サル脂、シア脂、牛脂、
ラード、これらの水素添加油脂、分別油脂、前記成分ａ
−２のトリグリセリド、中鎖脂肪酸トリグリセリド等を
例示でき、成分ｂ−２としては前記成分ａ−１の加水分
解処理によって得られる脂肪酸がある。

【００１８】エステル交換反応は、一例として前記原料
をモル比率で成分ａ−１：成分ａ−２＝１：０．１〜
５、成分ｂ−１：成分ｂ−２＝１：２〜１０となるよう
に混合し、アルカリまたは金属アルコラートを触媒とす
る場合には実質的に無水状態として８０〜１２０℃で
０．５〜３時間エステル交換反応せしめる。またイオン
交換樹脂を用いる場合も同様に無水状態とするが、室温
〜４０℃程度にてカラム方式で原料を循環接触させるの
がよい。リパーゼを触媒として用いる場合には、原料中
の水分量を１重量％以下にし、市販のリパーゼ粉末ある
いはこれを公知の担体例えばセライト、ケイソウ土、活
性炭、多孔質ガラス、イオン交換樹脂、キトサン、高分
子ゲル、セルロース粉末等に固定化した固定化リパーゼ
を加え、２０〜８０℃で０．５〜２０時間エステル交換
反応せしめる。

【００１９】リパーゼは次に述べる微生物を起源とする
ものあるいは動物臓器由来のものを使用できる。すなわ
ちアスペルギルス属（例えばAspergillus niger ）、ム
コール属（例えばMucor miehei）、キャンディダ属（例
えばCandida cyrindracea ）、シュードモナス属（例え
ばPseudomonas fragi ）、アルカリゲネス属（例えば、
特公昭５８−３６９５３号公報に記載のAlcaligenes s
p. ）、リゾプス属（例えばRhizopus delemar）、ジオ
トリクム属（例えばGeotrichum candidum ）等に属する
微生物起源のリパーゼおよびブタ、ウシ等の膵臓リパー
ゼである。このうちアスペルギルス属、ムコール属、ア
ルカリゲネス属およびリゾプス属の微生物を起源とする
リパーゼ、ブタ膵臓リパーゼはグリセリドの１位および
３位に特異的に作用するため、本発明のトリグリセリド
を製造するに際しては好適である。

【００２０】前述した各種エステル交換方法によって得
られるエステル交換反応物は、選択する原料の種類によ
ってはエステル交換反応物そのものを本発明で用いるト
リグリセリドとすることができるが、前記化学合成法に
よって得られるエステル化生成物の場合と同様に、必要
に応じてアルカリ脱酸処理、吸着・分画処理、溶剤分別
処理あるいは無溶剤分別（ウィンタリング）処理等を適
宜に組み合わせてエステル交換反応物に施し、不純物を
除去したりグリセリド成分を分画あるいは濃縮して本発
明で用いるトリグリセリドとすることもできる。なお該
トリグリセリドは脱臭処理しておくことが望ましい。

【００２１】本発明に係るトリグリセリドは天然物から
油脂分を抽出する方法によっても得ることができる。す
なわち前記エステル交換の原料（成分ａ−１）として記
載したもののうち、クジラ、アザラシ（harbour seal、
harp seal 等）、オットセイ等の海産哺乳動物の体組
織、該動物から分泌される乳汁、クロレラ、スピルリ
ナ、ドナリエラ等の微細藻類の細胞またはこれらの培養
細胞、ナンノクロロプシス（Nannochloropsis ）属、ト
ラストキトリウム（Thraustochytrium）属、クリプテコ
ディニウム（Crypthecodinium ）属およびイソクリシス
（Isochrysis）属等に属する微細藻類例えばナンノクロ
ロプシスオキュラータ（Nannochloropsisoculata
）、トラストキトリウムアウレウム（Thraustochytr
ium aureum）、クリプテコディニウムコーニー（Cry
pthecodinium cohnii）、イソクリシスガルバナ（Isoch
rysis galbana）等の細胞またはこれらの培養細胞を原
材料とする。なお微生物を起源とする場合にはこれから
得られるトリグリセリドが本発明のグリセリド構造を満
足するものであればさしつかえない。

【００２２】これらを圧搾処理もしくはｎ−ヘキサン、
クロロホルム、ベンゼン、ジエチルエーテル、メタノー
ル等の有機溶剤を用いて抽出処理または分別処理して油
分を得、これに脱ガム、アルカリ脱酸、脱色、脱臭等の
処理を施して遊離脂肪酸、リン脂質、糖脂質、不ケン化
物、着色物質、有臭成分等の不純物を除き、グリセリド
画分を得ることができる。このグリセリド画分は本発明
で用いるトリグリセリドとして利用できるが、該グリセ
リド画分をさらに無溶剤低温分別、溶剤分別あるいはシ
リカゲル・カラム等により分画して、トリグリセリドの
２位に結合するｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸残基がよ
り一層少ないトリグリセリドを製造することも可能であ
る。

【００２３】以上に述べたような化学合成法、エステル
交換法、あるいは天然物からの抽出法等によって製造さ
れる本発明のトリグリセリドは、その構成脂肪酸として
のｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸の総量の４０モル％未
満がトリグリセリドの２位にエステル結合するものであ
るが、より好ましくは２０モル％未満である。４０モル
％以上になると本発明の所望の効果は小さくなる。本発
明のトリグリセリドはそのままで油脂として利用でき、
また通常の食用油脂例えば成分ｂ−１として記載したよ
うな動植物系油脂と混合して油脂としても用いることが
できる。このとき本発明のトリグリセリドの含有量は油
脂全体の５〜１００重量％が望ましく、さらには１０〜
１００重量％がより一層好ましい。最も好ましくは２０
〜１００重量％である。５重量％未満では本発明の所望
の効果が小さい。

【００２４】本発明に係る油脂は例えば通常の食用動植
物系油脂、ビタミンＥ、β−カロチン等とともにソフト
カプセルやマイクロカプセル等のカプセル状態にして摂
取することができ、また通常の食用油脂と同様に食品素
材として各種加工食品の原料、料理の材料に用い、摂食
することができる。または本発明に係る油脂は高脂血症
の予防および治療のために利用されることが期待でき
る。

【００２５】

【実施例】

実施例１トリオレイン１kgと、魚油（タマ生化学（株）製、商品
名：ＥＰＡ−１８）加水分解混合脂肪酸を低温分別した
魚油加水分解脂肪酸濃縮物（総脂肪酸中のＣ_20:5：３
７．４モル％、Ｃ_22:5：５．４モル％、Ｃ_22:6：２５．
２モル％。ｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸として７２．
５モル％。ＢＨＴを０．０１重量％添加。）とをモル比
で１：５にて混合し、水分含量を０．２重量％に調節し
た後、リポザイムＩＭ２０（商品名。ノボノルディス
ク社製、ムコールミーハイ（Mucor miehei) 由来のリ
パーゼ）を充填したガラス製カラム（１０cmφ×６０c
m) に４０℃にて通し選択的エステル交換反応を行わせ
た。

【００２６】水蒸気蒸留および水洗処理にてエステル交
換反応物から遊離脂肪酸を除去した後、ｎ−ヘキサンで
浸潤させたシリカゲル（和光製薬（株）製、商品名：ワ
コーゲルＣ１００）を充填したステンレス製カラムに供
し、ｎ−ヘキサンで溶出させジグリセリドを除き、本発
明のトリグリセリド７２０ｇを得た。本トリグリセリド
を構成する全脂肪酸組成、グリセリドの１位および３
位、２位の各脂肪酸組成をＧＬＣ分析によって求めた。
この結果を表１に示す。本トリグリセリドを構成するＣ
_20:5の９０モル％。Ｃ_22:6の９５モル％以上、ｎ−３系
長鎖多価不飽和脂肪酸の総量の９３．５モル％がトリグ
リセリドの１位および３位に分布していた。すなわち本
トリグリセリドの２位にはｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪
酸の総量の６．５モル％が分布していた。本トリグリセ
リドを以下の動物実験の試験油とした。

【００２７】本トリグリセリドの一部にナトリウムメト
キシド０．１重量％を加え、減圧下１００℃にてランダ
ムエステル交換反応を行わせた後、セライトを用いて濾
過し、本トリグリセリドのランダムエステル交換物を得
た。この全脂肪酸組成、１位および３位、２位の各脂肪
酸組成を前記同様に求めた（表１参照）。このトリグリ
セリドの２位にはｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸の総量
の５０．６モル％が分布していた。このランダムエステ
ル交換物を動物実験の対照油とした。

【００２８】

【表１】 ※総炭素数：二重結合数で表示。（ｎ−３）はｎ−３系脂肪酸を示す。

【００２９】４週齢のＳＤ系雄性ラット７匹を１試験区
とし、試験油および対照油を各５重量％配合した飼料
（表２参照）を用いて飼育実験を行った。この間、飼料
成分の酸化劣化を防ぐために、飼料は毎日調製し給餌し
た。水と前記各飼料とを自由摂取させて３週間飼育した
のち、各試験区ラットの血中および肝臓中の中性脂質、
総コレステロールおよびリン脂質各含有量を測定した。
この結果を表３に示す。なお各試験区とも飼料摂取量、
体重増加量および肝臓重量に有意差は認められなかっ
た。この実験結果から、本発明に係るトリグリセリド
（試験油）はラットに対して副作用がなく、試験油を添
加した区では、血中トリグリセリド（中性脂質）および
総コレステロールの値、肝臓中トリグリセリド値が顕著
に低減することが明らかになった。

【００３０】

【表２】 ※１日本クレア（株）製、ＡＩＮ−９３Ｇ−ＭＸ ※２日本クレア（株）製、ＡＩＮ−９３−ＶＸ ※３ｔ−ブチルヒドロキノン

【００３１】

【表３】 ※対照油添加区の値に対して危険率５％以下で有意差あり。

【００３２】実施例２試験油脂（本発明のトリグリセリドを含む油脂）および
対照油脂を次のように調製した。すなわち試験油脂は h
arp seal（アザラシ）油脂をドライアイス／アセトン冷
媒で−８０℃、１時間冷却し、析出した結晶部を濾紙で
濾別して調製した。対照油脂は脂肪酸組成の異なる２種
類の魚油（タラ肝油と雑魚油との混合油、マグロ眼窩
油）をドライアイス／アセトン冷媒で同様に冷却、分別
した濃縮物をブレンドし、その総脂肪酸組成を試験油脂
のそれとほぼ近似するものとした。表４にこれらの脂肪
酸組成を示す。

【００３３】

【表４】 ※：表１の注釈と同じ。

【００３４】４週齢のＳＤ系雄性ラット７匹を１試験区
とし、前記の試験油脂および対照油脂をそれぞれ２０重
量％含む油脂（試験油脂または対照油脂２０重量部、パ
ーム油５０重量部、ハイオレイックサフラワー油５重量
部およびハイリノールサフラワー油２５重量部の混合油
脂。脂肪酸組成は表５参照。）を各１０重量％配合した
飼料（飼料組成は脂肪５重量％を１０重量％とし、コー
ンスターチ４１．７重量％を３６．７重量％とする以外
は実施例１と同じ。）で、飼育実験を行った。この間、
飼料成分の酸化劣化を防ぐために、飼料は毎日調製し給
餌した。水と前記各飼料とを自由摂取させて３週間飼育
したのち、各試験区ラットの血中および肝臓中の中性脂
質、総コレステロールおよびリン脂質各含有量を測定し
た（表６参照）。なお各試験区とも飼料摂取量、体重増
加量および肝臓重量に有意な差異は認められなかった。
この実験結果から、本発明に係る油脂はラットに対して
副作用を及ぼさず、血中および肝臓中のトリグリセリド
（中性脂質）および総コレステロールの値を効果的に低
減することが認められた。

【００３５】

【表５】 ※：表１の注釈と同じ。(n-6) はｎ−６系脂肪酸を示す。 ※※：飽和脂肪酸、モノ不飽和脂肪酸、ｎ−６系脂肪酸およびｎ−３系脂肪酸のうちの各脂肪酸の割合。

【００３６】

【表６】 ※：表３の注釈と同じ。

【００３７】実施例３実施例２で使用した試験油脂および対照油脂の配合割合
を変えた油脂を飼料に添加して実施例２と同様にラット
飼育実験を行った。すなわち４週齢のＳＤ系雄性ラット
７匹を１試験区とし、実施例２に記載の試験油脂または
対照油脂をそれぞれ１０重量％含む油脂（試験油脂また
は対照油脂１０重量部、パーム油５０重量部、ハイオレ
イックサフラワー油１０重量部およびハイリノールサフ
ラワー油３０重量部の混合油脂。脂肪酸組成は表７参
照。）を各１０重量％配合した飼料（飼料組成は脂肪分
を除き実施例２と同じ。）で、飼育実験を行った。この
間、飼料成分の酸化劣化を防ぐために、飼料は毎日調製
した。水と前記各飼料とを自由摂取させて３週間飼育し
たのち、各試験区ラットの血中および肝臓中の中性脂
質、総コレステロールおよびリン脂質各含有量を測定し
た（表８参照）。なお各試験区とも飼料摂取量、体重増
加量および肝臓重量に有意な差異は認められなかった。
この実験結果および実施例２の結果から、本発明に係る
油脂はラットに対して副作用を及ぼさず、対照油脂に比
べて少量の試験油脂を混合した油脂の場合をも含めて、
血中および肝臓中のトリグリセリド（中性脂質）値を顕
著に低減する効果をもつことが認められた。

【００３８】

【表７】 ※および※※：表５の注釈と同じ。

【００３９】

【表８】 ※：表３の注釈と同じ。

【００４０】実施例４微細藻類クリプテコディニウムコーニー（Crypthecod
inium cohnii、ＡＴＣＣ３０３３６）を表９に示す培
地３０リットルに植つけ、３０℃にて、ジャーファーメ
ンターで１００時間通気培養し、培養液から培養藻体を
遠心分離して集め、さらにこれを凍結乾燥した（収量６
２５ｇ）。この乾燥藻体をクロロホルム：メタノール＝
１：１（重量比）混合溶媒中でヒスコトロン（商品名。
日音医理科器械製作所製）により細胞破砕して抽出し、
油分５２０ｇを得た。ｎ−ヘキサン中に分散させたシリ
カゲル（和光純薬（株）製、商品名：ワコーゲルＣ１
００）を充填したステンレス製カラムに前記油分を供
し、ジエチルエーテル：ｎ−ヘキサン＝１０：９０（容
量比）にて溶出させ、本発明に係るトリグリセリド２５
０ｇを得た。本トリグリセリド（これを試験油脂とし
た）の脂肪酸組成を実施例１と同様にして求めた（表１
０参照）。

【００４１】

【表９】（ｐＨ：６．８） ※１：ビタミンミックス水溶液（単位：該水溶液１リットル中の重量）ビオチン：０．００３ｇチアミン：１．０００ｇ ※２：メタルミックス水溶液（単位：該水溶液１リットル中の重量）Ｎａ₂ＥＤＴＡ：１．００ｇＦｅＣｌ₃・６Ｈ₂Ｏ：０．０５ｇＨ₃ＢＯ₃：１．００ｇＭｎＣｌ₂・４Ｈ₂Ｏ：０．１５ｇＺｎＣｌ₂：０．０１ｇＣｏＣｌ₂・６Ｈ₂Ｏ：０．００５ｇ

【００４２】

【表１０】 ※：表１の注釈と同じ。

【００４３】かくして得られた微細藻類由来のトリグリ
セリド（試験油脂）および実施例２に記載の対照油脂を
それぞれ１０重量％含む油脂（試験油脂または対照油脂
１０重量部、パーム油５０重量部、ハイオレイックサフ
ラワー油１０重量部およびハイリノールサフラワー油３
０重量部の混合油脂。脂肪酸組成は表１１参照）を各１
０重量％配合した飼料（飼料組成は脂肪分を除き実施例
３と同じ。）を調製し、実施例３と同様の飼育試験を行
った。各試験区ラットの血中および肝臓中脂質含量の分
析結果を表１２に示す。なお各試験区とも飼料摂取量、
体重増加量および肝臓重量に有意差は認められなかっ
た。この実験結果および実施例２の結果から、本発明に
係る油脂はラットに対して副作用を及ぼさず、対照油脂
に比べて少量の試験油脂を混合した油脂の場合をも含め
て、血中および肝臓中のトリグリセリド（中性脂質）お
よび総コレステロールの値を顕著に低減化する効果をも
つことが認められた。

【００４４】

【表１１】 ※および※※：表５の注釈と同じ。

【００４５】

【表１２】 ※：表３と同じ。

【００４６】

【発明の効果】本発明によれば、動物に対して、副作用
がなく、従来のｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸供給源に
比べて血中脂質濃度を低減化する効果が大きく、魚油等
の従来のｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸供給源よりも少
量の摂取で、血中および肝臓中のトリグリセリド値およ
び／またはコレステロール値を減少させ、血中脂質改善
を容易ならしめる作用のある油脂を提供できる。

【手続補正書】

【提出日】平成８年８月１２日

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】０００４

【補正方法】変更

【補正内容】

【０００４】一方、エイコサペンタエン酸（all cis −
5,8,11,14,17−eicosapentaenoic acid 、以下ＥＰＡと
略す。Ｃ_20:5、Ｃの後の数字は総炭素数：二重結合数を
表わし以下同様とする。）やドコサヘキサエン酸（all
cis −4,7,10,13,16,19 −docosahexaenoic acid、以下
ＤＨＡと略す。Ｃ_22:6）のようなｎ−３系長鎖多価不飽
和脂肪酸およびこれらを含む食品素材が血清中トリグリ
セリド値やコレステロール値を低減させる作用があるこ
とが動物実験や臨床実験により明らかにされてきた（例
えば、J.Dyerbergら、Prog.Lipid Res. 、第２１巻、第
２５５〜２６９頁、１９８２年）。血清中トリグリセリ
ド値の低減化の作用機序はｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪
酸を含む油脂の摂取により肝臓内でのトリグリセリド合
成能が抑制され、その結果として血中へのトリグリセリ
ドの放出が抑制されるためと推測されている（原健
次、油脂、第４６巻、No．４、第９０頁、１９９３
年）。また、血清中コレステロール値の低減はｎ−３系
長鎖多価不飽和脂肪酸が肝臓におけるコレステロール合
成能を抑制することによるものと推定されている。（Ch
oi，Y.S.ら、Lipids、第２４巻、第４５頁、１９８９
年）。

【手続補正２】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００１６

【補正方法】変更

【補正内容】

【００１６】前記エステル交換の原料は、成分ａ−１と
してアマニ油、エゴマ油、シソ油等の植物油、イワシ
油、タラ肝油、ニシン油、イカ油、マグロ眼窩油等の魚
油、クジラ、アザラシ、オットセイ等の海産哺乳動物を
起源として得られる圧搾もしくは抽出油、該動物の乳
脂、クロレラ、スピルリナ、ドナリエラ等またナンノク
ロロプシス属（例えばNannochloropsis oculata 、UTEX
LB 2164等）、トラストキトリウム属（例えばThrausto
chytrium aureum 、ATCC 28211、同34304 等）、クリプ
テコディニウム属（例えばCrypthecodinium cohnii、AT
CC 30021、同30334、同30336 、同50052 等）、イソク
リシス属（例えばIsochrysis galbana、CCAP927/1、UTE
X LB 987 等）等に属する微細藻類から抽出された油
脂、モルティエレラ（Mortierella)属等の微生物（M.is
abellina、IFO 6336、同6739、同7873、同7884、ATCC 4
4853等）に由来する油脂、またｎ−３系長鎖多価不飽和
脂肪酸またはこれを任意の割合で含む前記各種脂肪酸
（段落番号００１２の項参照）との混合脂肪酸のトリグ
リセリドを使用できる。ここでATCC:American Type Cul
tureCollection （米国）、CCAP:Culture Collection o
f Algae and Protozoa （英国）、UTEX:Culture Collec
tion of Algae at the University of Texas （米
国）、IFO:大阪発酵研究所の各略称である。成分ａ−２
としては段落番号００１２の項に記載の各種脂肪酸また
はその誘導体を用いることができる。

【手続補正３】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００２９

【補正方法】変更

【補正内容】

【００２９】４週齢のＳＤ系雄性ラット７匹を１試験区
とし、試験油および対照油を用い、各５重量％配合した
飼料（表２参照）を用いて飼育実験を行った。この間、
飼料成分の酸化劣化を防ぐために、飼料は毎日調製し給
餌した。水と前記各飼料とを自由摂取させて３週間飼育
したのち、各試験区ラットの血中および肝臓中の中性脂
質、総コレステロールおよびリン脂質各含有量を測定し
た。この結果を表３に示す。なお各試験区とも飼料摂取
量、体重増加量および肝臓重量に有意差は認められなか
った。この実験結果から、本発明に係るトリグリセリド
（試験油）はラットに対して副作用がなく、試験油を添
加した区では、血中トリグリセリド（中性脂質）および
総コレステロールの値、肝臓中トリグリセリド値が顕著
に低減することが明らかになった。

【手続補正４】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００３４

【補正方法】変更

【補正内容】

【００３４】４週齢のＳＤ系雄性ラット７匹を１試験区
とし、前記の試験油脂および対照油脂を用い、それぞれ
２０重量％含む油脂（試験油脂または対照油脂２０重量
部、パーム油５０重量部、ハイオレイックサフラワー油
５重量部およびハイリノールサフラワー油２５重量部の
混合油脂。脂肪酸組成は表５参照。）を各１０重量％配
合した飼料（飼料組成は脂肪５重量％を１０重量％と
し、コーンスターチ４１．７重量％を３６．７重量％と
する以外は実施例１と同じ。）で、飼育実験を行った。
この間、飼料成分の酸化劣化を防ぐために、飼料は毎日
調製し給餌した。水と前記各飼料とを自由摂取させて３
週間飼育したのち、各試験区ラットの血中および肝臓中
の中性脂質、総コレステロールおよびリン脂質各含有量
を測定した（表６参照）。なお各試験区とも飼料摂取
量、体重増加量および肝臓重量に有意な差異は認められ
なかった。この実験結果から、本発明に係る油脂はラッ
トに対して副作用を及ぼさず、血中および肝臓中のトリ
グリセリド（中性脂質）および総コレステロールの値を
効果的に低減することが認められた。

【手続補正５】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００４３

【補正方法】変更

【補正内容】

【００４３】かくして得られた微細藻類由来のトリグリ
セリド（試験油脂）および実施例２に記載の対照油脂を
用い、それぞれ１０重量％含む油脂（試験油脂または対
照油脂１０重量部、パーム油５０重量部、ハイオレイッ
クサフラワー油１０重量部およびハイリノールサフラワ
ー油３０重量部の混合油脂。脂肪酸組成は表１１参照）
を各１０重量％配合した飼料（飼料組成は脂肪分を除き
実施例３と同じ。）を調製し、実施例３と同様の飼育試
験を行った。各試験区ラットの血中および肝臓中脂質含
量の分析結果を表１２に示す。なお各試験区とも飼料摂
取量、体重増加量および肝臓重量に有意差は認められな
かった。この実験結果および実施例２の結果から、本発
明に係る油脂はラットに対して副作用を及ぼさず、対照
油脂に比べて少量の試験油脂を混合した油脂の場合をも
含めて、血中および肝臓中のトリグリセリド（中性脂
質）および総コレステロールの値を顕著に低減化する効
果をもつことが認められた。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所Ａ６１Ｋ 31/23 ＡＤＮＡ６１Ｋ 35/12 35/12 35/80 Ｚ 35/80 Ａ２３Ｄ 9/00 ５１６

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】グリセリドの構成脂肪酸としてｎ−３系
長鎖多価不飽和脂肪酸を含み、ｎ−３系長鎖多価不飽和
脂肪酸の総量の４０モル％未満がグリセリドの２位に結
合したトリグリセリドからなることを特徴とする血中脂
質濃度を低減する作用のある油脂。
【請求項２】請求項１に記載のトリグリセリドを５重
量％以上含有してなることを特徴とする血中脂質濃度を
低減する作用のある油脂。
【請求項３】ｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸がα−リ
ノレン酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸、ドコ
サペンタエン酸およびドコサヘキサエン酸からなる群か
ら選ばれる１種もしくは２種以上である請求項１または
２に記載の油脂。
【請求項４】ｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸がエイコ
サペンタエン酸および／またはドコサヘキサエン酸であ
る請求項１または２に記載の油脂。
【請求項５】トリグリセリドが海産哺乳動物もしくは
微細藻類から得られるものまたはこれらを濃縮処理した
ものまたはこれらをエステル交換処理したものである請
求項１〜４のいずれか１項に記載の油脂。
【請求項６】海産哺乳動物がクジラまたはアザラシで
ある請求項５に記載の油脂。
【請求項７】微細藻類がナンノクロロプシス属、トラ
ストキトリウム属、イソクリシス属またはクリプテコデ
ィニウム属のいずれかに属するものである請求項５に記
載の油脂。
【請求項８】トリグリセリドがグリセリドの１，３位
に特異性を有するリパーゼを用い、エステル交換反応に
よって製造されたものである請求項１、２または５のい
ずれか１項に記載の油脂。