JPH0913076A

JPH0913076A - 血小板凝集能を抑制する油脂

Info

Publication number: JPH0913076A
Application number: JP7191083A
Authority: JP
Inventors: Hiroaki Tsuji; 宏明辻; Akira Seto; 明瀬戸; Katsumi Imaizumi; 勝己今泉; Ikuo Ikeda; 郁男池田
Original assignee: Nisshin Oil Mills Ltd
Current assignee: Nisshin Oillio Group Ltd
Priority date: 1995-07-04
Filing date: 1995-07-04
Publication date: 1997-01-14
Anticipated expiration: 2015-07-04
Also published as: JP3544247B2

Abstract

(57)【要約】【構成】グリセリドの構成脂肪酸としてｎ−３系長鎖
多価不飽和脂肪酸を含み、ｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪
酸の総量の４０モル％未満がグリセリドの２位に結合し
たトリグリセリドからなる油脂および該トリグリセリド
を含有してなる油脂。【効果】本発明の油脂は、従来のｎ−３系長鎖多価不
飽和脂肪酸供給源より少量の摂取で、血小板凝集能を抑
制し動脈血管を拡張する作用のあるエイコサノイドを産
生する効果が大きく、したがって動脈硬化症の予防およ
び改善を容易ならしめる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は血小板凝集能を抑制する
作用のある油脂に関する。

【０００２】

【従来の技術】動脈硬化症は病理学的には粥状動脈硬化
症、中膜硬化症および細動脈硬化症に分けられる。粥状
動脈硬化症は冠状動脈、脳底動脈、腎動脈、胸・腹部大
動脈等の内膜に脂肪沈着やプラーク形成が起こるもの
で、一方、中膜硬化症は大腿動脈等四肢の中程度の動脈
に、また細動脈硬化症は腎・副腎、脾臓、卵巣、膵臓等
の細動脈にみられる硬化性変化である。これらの動脈硬
化症は血管内膜での中膜平滑筋細胞の無制限の増殖と細
胞内のコレステロールの異常蓄積が成因となっていると
考えられており、これら血管壁の異常や血流の異常から
血小板の粘着・凝集が促進されそして動脈血栓へと進行
する。

【０００３】生体内で多価不飽和脂肪酸から合成される
プロスタグランジンやトロンボキサン等のエイコサノイ
ドには血小板凝集作用、血管収縮作用をもつものと、逆
に血小板凝集抑制作用、血管拡張作用を有しているもの
があり、これらエイコサノイドは動脈硬化症と密接に係
わっていることがわかっている。またエイコサノイドの
なかでもプロスタグランジンＩ₂（以下、ＰＧＩ₂と略
すことがある。）は血小板凝集抑制作用、血管拡張作用
および血圧低下作用を有し、トロボキサンＡ₂（以下、
ＴＸＡ₂と略すことがある。）は血小板凝集誘起作用お
よび血管収縮作用を有することが知られている。

【０００４】ところで、従来の疫学的調査により、魚類
や海獣類を常食としているグリーンランド島に居住する
エスキモー人は、彼らとほぼ同程度の高脂肪食のデンマ
ーク人と比較して、動脈硬化症をはじめとする虚血性心
疾患の発症率が少ないことが明らかになり、かかる疾患
の発症に食餌性の多価不飽和脂肪酸が係わっていること
が判明した（Dyerberg,T. ら、Am. J. Clin. Nutritio
n, 第２８巻、第９５８頁、１９７５年）。また、さら
なる疫学調査により、エイコサペンタエン酸（all cis
−5,8,11,14,17−eicosapentaenoic acid 、以下ＥＰＡ
と略す。Ｃ_20:5、Ｃの後の数字は総炭素数：二重結合数
を表わし以下同様とする。）やドコサヘキサエン酸（al
l cis −4,7,10,13,16,19 −docosahexaenoic acid、以
下ＤＨＡと略す。Ｃ_22:6）のようなｎ−３系長鎖多価不
飽和脂肪酸等の摂取と血小板凝集能抑制、全血粘度の低
下との間に有意な相関がみられ、心臓血管系疾患や脳血
管系疾患による死亡率との間に逆相関ないしは該疾患に
よる死亡率の低下が認められることが報告されている
（例えば、Hirai,A.ら、Lancet、第２巻、第１１３２
頁、１９８０年）。ｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸の摂
取による虚血性心疾患由来の死亡率低下の機序としては
抗血小板凝集作用、血漿脂質改善作用が考えられる。

【０００５】薬物を用いる動脈血栓の治療には血小板凝
集抑制剤（例えば、ワーファリン、アスピリン等）を主
体とする抗血小板療法やできあがった血栓、塞栓を溶解
するための血栓溶解剤（例えば、ウロキナーゼ、ストレ
プトキナーゼ等）が広く用いられている。一方、ＥＰＡ
やＤＨＡのようなｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸の摂取
が、前記のように、動脈硬化症等の虚血性心疾患の予防
や治療に有効であることが動物実験や臨床実験により明
らかにされてきた。

【０００６】そこで、動脈硬化症の予防ないし症状を改
善する目的で、ＥＰＡやＤＨＡを含む魚を多く含む食品
を意図的に摂取したり、ＥＰＡやＤＨＡを含む魚油や魚
油濃縮物等を素材とする健康食品等が市販されている。
しかしこれらは多量かつ長期間にわたり摂取あるいは投
与することが必要であった。ＥＰＡやＤＨＡを含む魚油
としては主にイワシ油、タラ肝油、ニシン油、イカ油、
マグロ眼窩油等が用いられるが、これらの油脂の化学的
構造はいずれもグリセリドにエステル結合して存在する
ｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸の総量の５０モル％以上
がトリグリセリドの２位の構成脂肪酸としてあり、換言
すればｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸は１位および３位
よりも２位により多くエステル結合したトリグリセリド
構造をとっている。

【０００７】一方、ＥＰＡやＤＨＡは前記のように動脈
硬化症の予防ないし該症状の改善効果を有する反面、通
常の例えば食用植物油脂を構成する脂肪酸に比べて二重
結合を分子内に数多く持つため酸化され易く、過剰に摂
取すると生体に有害な作用をもたらすことも知られてい
る。生体内で脂質の過酸化反応が進行すると生体膜に障
害を生じ、虚血性疾患、動脈硬化、白内障、癌、アルツ
ハイマー病、膠原病、アミロイドーシス等の病変の原因
となることが推測されている。

【０００８】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、このような
現状に鑑みなされたものであり、その目的とするところ
は、ヒトをはじめ動物に対して、副作用がなく、従来の
ｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸供給源よりも少量の摂取
で、血小板凝集能を抑制し、ひいては動脈硬化症の予防
や改善を容易ならしめる作用のある油脂を提供すること
にある。

【０００９】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記目的
を達成すべく鋭意研究を行った結果、グリセリド構造の
１位および／または３位にｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪
酸を多くもつ油脂は、ｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸の
供給源として用いられている、２位にｎ−３系長鎖多価
不飽和脂肪酸を多くもつ魚油に比べて血小板凝集能を抑
制する効果が顕著に高く、動脈硬化症の予防や改善効果
が期待でき、上記の目的が達成されることを見出した。
本発明はかかる知見に基づいて完成されたものである。

【００１０】すなわち本発明の要旨は、グリセリドの構
成脂肪酸としてｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸を含み、
ｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸の総量の４０モル％未満
がグリセリドの２位に結合したトリグリセリドからな
る、または該トリグリセリドを含有してなることを特徴
とする血小板凝集能を抑制する作用のある油脂である。

【００１１】本発明で特徴とするトリグリセリドは、ｎ
−３系長鎖多価不飽和脂肪酸を含有する脂肪酸とグリセ
リンとから構成されるトリグリセリドにおいて、ｎ−３
系長鎖多価不飽和脂肪酸の総量を１００モル％としたと
き、その４０モル％未満とｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪
酸以外の任意の脂肪酸とがトリグリセリドの２位にエス
テル結合しており、かつｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸
の６０モル％以上とｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸以外
の任意の脂肪酸とがトリグリセリドの１位および３位に
おいてランダムにまたは非ランダムに分布してエステル
結合しているものである。

【００１２】ここにｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸とは
炭素数が１８以上で二重結合を３個以上を有するｎ−３
系直鎖状不飽和脂肪酸をいい、具体的にはα−リノレン
酸（Ｃ_18:3）、オクタデカテトラエン酸（Ｃ_18:4、6,9,
12,15 −octadecatetraenoicacid ）、アラキドン酸
（Ｃ_20:4）、ＥＰＡ（Ｃ_20:5）、ドコサペンタエン酸
（Ｃ_22:5、7,10,13,16,19 −docosapentaenoic acid
）、ＤＨＡ（Ｃ_22:6）等を例示することができる。本
発明では、これらのうちα−リノレン酸、アラキドン
酸、ＥＰＡ、ドコサペンタエン酸およびＤＨＡからなる
群から選ばれる１種もしくは２種以上の任意の割合の混
合脂肪酸が好ましく、さらにはＥＰＡおよび／またはＤ
ＨＡがより好ましい。

【００１３】またｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸以外の
脂肪酸としては、短鎖、中鎖および長鎖各脂肪酸、また
飽和および不飽和各脂肪酸のいかんを問わず使用できる
が、このうち直鎖状であって、炭素数が６以上の中鎖な
いし長鎖の、飽和または不飽和脂肪酸に属するものが望
ましい。かかる脂肪酸としてカプロン酸（Ｃ_6:0）、カ
プリル酸（Ｃ_8:0）、カプリン酸（Ｃ_10:0）、ラウリン
酸（Ｃ_12:0）、ミリスチン酸（Ｃ_14:0）、パルミチン酸
（Ｃ_16:0）、パルミトオレイン酸（Ｃ_16:1）、ステアリ
ン酸（Ｃ_18:0）、オレイン酸（Ｃ_18:1）、エライジン酸
（Ｃ_18:1）、リノール酸（Ｃ_18:2）、α’−リノレン酸
（Ｃ_18:3、5,8,11−オクタデカトリエン酸）、γ−リノ
レン酸（Ｃ_18:3、6,9,12−オクタデカトリエン酸）、エ
レオステアリン酸（Ｃ_18:3、9,11,13 −オクタデカトリ
エン酸）、アラキジン酸（Ｃ_20:0）、ガドレイン酸（Ｃ
_20:1）、ベヘン酸（Ｃ_20:0）、エルカ酸（Ｃ_22:1）、ブ
ラシジン酸（Ｃ_22:1）等をあげることができる。これら
の脂肪酸は単独で用いてよく、または任意の割合の混合
脂肪酸として使用してもさしつえない。なお、これらの
うち、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オ
レイン酸、リノール酸等が好ましい。

【００１４】前記したｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸お
よびこれ以外の脂肪酸で構成される本発明のトリグリセ
リドを製造するには、化学合成法、エステル交換法、あ
るいは天然物からの抽出法等の技術を利用すればよい。
化学合成法としては、例えば所望量および組成の脂肪
酸、脂肪酸無水物あるいは脂肪酸ハロゲン化物（脂肪酸
クロライド）とグリセリンとを、酸性物質（塩酸、硫
酸、パラトルエンスルホン酸等）、アルカリ性物質（水
酸化ナトリウム、水酸化カリウム等）、金属（亜鉛、ス
ズ、チタン、ニッケル等）、金属酸化物（酸化亜鉛、ア
ルミナ、酸化第一鉄等）、金属ハロゲン化物（塩化アル
ミニウム、塩化スズ等）等のエステル化触媒の存在下ま
たは非存在下で、窒素ガス気流中にて１００〜２５０℃
に加熱し、生成する水を除きながら１〜２５時間エステ
ル化反応せしめるのがよい。

【００１５】エステル化生成物は必要に応じてアルカリ
脱酸処理、活性炭、活性白土、アルミナ、シリカゲル、
イオン交換樹脂等を用いる吸着・分画処理、メタノール
やエタノール等の親水性有機溶剤および／またはｎ−ヘ
キサンやキシレン等の親油性有機溶剤を用いる溶剤分別
処理を施して遊離脂肪酸、モノグリセリド、ジグリセリ
ド、着色物質、有臭成分等の不純物を除去し、さらには
これらの処理を適宜に組み合わせ、トリグリセリドの２
位に結合するｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸残基の含有
量が、トリグリセリドの１位、２位および３位に結合す
るｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸残基の総含有量の４０
モル％未満となるようにトリグリセリド成分を分画ない
しは濃縮してもよい。なお本発明のトリグリセリドは、
例えば加熱かつ減圧下に水蒸気を吹き込み脱臭処理して
おくことが望ましい。

【００１６】エステル交換法を利用して本発明のトリグ
リセリドを得るには、例えば原料としてｎ−３系長鎖多
価不飽和脂肪酸を多量に含有する脂肪酸のトリグリセリ
ド（成分ａ−１）とｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸を実
質的に含まないか少量含有の脂肪酸（成分ａ−２）、成
分ａ−２の低級アルコールエステル（メチルエステル、
エチルエステル等。以下同様。）または成分ａ−２のト
リグリセリドとを所望割合で混合し、あるいはｎ−３系
長鎖多価不飽和脂肪酸を実質的に含まないか少量含有の
脂肪酸のトリグリセリド（成分ｂ−１）とｎ−３系長鎖
多価不飽和脂肪酸を多量に含有する脂肪酸（成分ｂ−
２）または成分ｂ−２の低級アルコールエステルとを所
要量混合し、触媒として水酸化ナトリウム、水酸化カリ
ウム等のアルカリ性物質、ナトリウムメチラート、ナト
リウムエチラート、リチウムブチラート等の金属アルコ
ラート（金属アルコキシド）、塩基性アニオン交換樹
脂、酸性カチオン交換樹脂等のイオン交換樹脂、あるい
はリパーゼを用いてエステル交換反応を行わしめるのが
簡便である。なお触媒として特定のリパーゼを用いてエ
ステル交換すると、後述するように、トリグリセリドの
１位および３位に選択的に新たな脂肪酸基を導入するこ
とができ、本発明のトリグリセリドを製造する方法とし
て望ましい。

【００１７】前記エステル交換の原料は、成分ａ−１と
してアマニ油、エゴマ油、シソ油等の植物油、イワシ
油、タラ肝油、ニシン油、イカ油、マグロ眼窩油等の魚
油、クジラ、アザラシ、オットセイ等の海産哺乳動物を
起源として得られる圧搾もしくは抽出油、該動物の乳
脂、クロレラ、スピルリナ、ドナリエラ等またナンノク
ロロプシス属（例えばNannochloropsis oculata ）、ト
ラストキトリウム属（例えばThraustochytrium aureum
）、クリプテコディニウム属（例えばCrypthecodinium
cohnii）、イソクリシス属（例えばIsochrysis galban
a）等に属する微細藻類から抽出された油脂、モルティ
エレラ（Mortierella ）属等の微生物に由来する油脂、
またｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸またはこれを任意の
割合で含む前記各種脂肪酸（段落番号００１３の項参
照）との混合脂肪酸のトリグリセリドを使用できる。成
分ａ−２としては段落番号００１３の項に記載の各種脂
肪酸またはその誘導体を用いることができる。

【００１８】また成分ｂ−１として動植物、微生物、微
細藻類等から得られるトリグリセリドがあり、大豆油、
菜種油、綿実油、コーン油、パーム油、ヤシ油、サフラ
ワー油、ハイオレイックサフラワー油、ヒマワリ油、ハ
イオレイックヒマワリ油、オリーブ油、落花生油、カカ
オ脂、チャイニーズタロウ、サル脂、シア脂、牛脂、
ラード、これらの水素添加油脂、分別油脂、前記成分ａ
−２のトリグリセリド、中鎖脂肪酸トリグリセリド等を
例示でき、成分ｂ−２としては前記成分ａ−１の加水分
解処理によって得られる脂肪酸がある。

【００１９】エステル交換反応は、一例として前記原料
をモル比率で成分ａ−１：成分ａ−２＝１：０．１〜
５、成分ｂ−１：成分ｂ−２＝１：２〜１０となるよう
に混合し、アルカリまたは金属アルコラートを触媒とす
る場合には実質的に無水状態として８０〜１２０℃で
０．５〜３時間エステル交換反応せしめる。またイオン
交換樹脂を用いる場合も同様に無水状態とするが、室温
〜４０℃程度にてカラム方式で原料を循環接触させるの
がよい。リパーゼを触媒として用いる場合には、原料中
の水分量を１重量％以下にし、市販のリパーゼ粉末ある
いはこれを公知の担体例えばセライト、ケイソウ土、活
性炭、多孔質ガラス、イオン交換樹脂、キトサン、高分
子ゲル、セルロース粉末等に固定化した固定化リパーゼ
を加え、２０〜８０℃で０．５〜２０時間エステル交換
反応せしめる。

【００２０】リパーゼは次に述べる微生物を起源とする
ものあるいは動物臓器由来のものを使用できる。すなわ
ちアスペルギルス属（例えばAspergillus niger ）、ム
コール属（例えばMucor miehei）、キャンディダ属（例
えばCandida cyrindracea ）、シュードモナス属（例え
ばPseudomonas fragi ）、アルカリゲネス属（例えば特
公昭５８−３６９５３号公報に記載のAlcaligenes sp.
）、リゾプス属（例えばRhizopus delemar）、ジオト
リクム属（例えばGeotrichum candidum ）等に属する微
生物起源のリパーゼおよびブタ、ウシ等の膵臓リパーゼ
である。このうちアスペルギルス属、ムコール属、アル
カリゲネス属およびリゾプス属の微生物を起源とするリ
パーゼ、ブタ膵臓リパーゼはグリセリドの１位および３
位に特異的に作用するため、本発明のトリグリセリドを
製造するに際しては好適である。

【００２１】前述した各種エステル交換方法によって得
られるエステル交換反応物は、選択する原料の種類によ
ってはエステル交換反応物そのものを本発明で用いるト
リグリセリドとすることができるが、前記化学合成法に
よって得られるエステル化生成物の場合と同様に、必要
に応じてアルカリ脱酸処理、吸着・分画処理、溶剤分別
処理あるいは無溶剤分別（ウィンタリング）処理等を適
宜に組み合わせてエステル交換反応物に施し、不純物を
除去したりグリセリド成分を分画あるいは濃縮して本発
明で用いるトリグリセリドとすることもできる。なお該
トリグリセリドは脱臭処理しておくことが望ましい。

【００２２】本発明に係るトリグリセリドは天然物から
油脂分を抽出する方法によっても得ることができる。す
なわち前記エステル交換の原料（成分ａ−１）として記
載したもののうち、クジラ、アザラシ（harbour seal、
harp seal 等）、オットセイ等の海産哺乳動物の体組
織、該動物から分泌される乳汁、クロレラ、スピルリ
ナ、ドナリエラ等の微細藻類の細胞またはこれらの培養
細胞、ナンノクロロプシス（Nannochloropsis ）属、ト
ラストキトリウム（Thraustochytrium）属、クリプテコ
ディニウム（Crypthecodinium ）属およびイソクリシス
（Isochrysis）属等に属する微細藻類例えばナンノクロ
ロプシスオキュラータ（Nannochloropsisoculata
）、トラストキトリウムアウレウム（Thraustochytr
ium aureum ）、クリプテコディニウムコーニー（Cry
pthecodinium cohnii）、イソクリシスガルバナ（Isoch
rysis galbana）等の細胞またはこれらの培養細胞を原
材料とする。なお微生物を起源とする場合には、これか
ら得られるトリグリセリドが本発明のグリセリド構造を
満足するものであればさしつかえない。

【００２３】これらを圧搾処理もしくはｎ−ヘキサン、
クロロホルム、ベンゼン、ジエチルエーテル、メタノー
ル等の有機溶剤を用いて抽出処理または分別処理して油
分を得、これに脱ガム、アルカリ脱酸、脱色、脱臭等の
処理を施して遊離脂肪酸、リン脂質、糖脂質、不ケン化
物、着色物質、有臭成分等の不純物を除き、グリセリド
画分を得ることができる。このグリセリド画分は本発明
で用いるトリグリセリドとして利用できるが、該グリセ
リド画分をさらに無溶剤低温分別、溶剤分別あるいはシ
リカゲル・カラム等により分画して、トリグリセリドの
２位に結合するｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸残基がよ
り一層少ないトリグリセリドを製造することも可能であ
る。

【００２４】以上に述べたような化学合成法、エステル
交換法、あるいは天然物からの抽出法等によって製造さ
れる本発明のトリグリセリドは、その構成脂肪酸として
のｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸の総量の４０モル％未
満がトリグリセリドの２位にエステル結合するものであ
るが、より好ましくは２０モル％未満である。４０モル
％以上になると本発明の所望の効果は小さくなる。本発
明のトリグリセリドはそのままで油脂として利用でき、
また通常の食用油脂例えば成分ｂ−１として記載したよ
うな動植物系油脂と混合して油脂としても用いることが
できる。このとき本発明のトリグリセリドの含有量は油
脂全体の５〜１００重量％が望ましく、さらには１０〜
１００重量％がより一層好ましい。最も好ましくは２０
〜１００重量％である。５重量％未満では本発明の所望
の効果が小さい。

【００２５】本発明に係る油脂は、例えば通常の食用動
植物系油脂、ビタミンＥ、β−カロチン等とともにソフ
トカプセルやマイクロカプセル等のカプセル状態にして
摂取することができ、また通常の食用油脂と同様に食品
素材として各種加工食品の原料、料理の材料に用い、摂
食することができる。また本発明に係る油脂は動脈硬化
症の予防および治療のために利用されることが期待でき
る。

【００２６】

【実施例】

実施例１トリオレイン１kgと、魚油（タマ生化学（株）製、商品
名：ＥＰＡ−１８）加水分解混合脂肪酸を低温分別した
魚油加水分解脂肪酸濃縮物（総脂肪酸中のＣ_20:5：３
７．４モル％、Ｃ_22:5：５．４モル％、Ｃ_22:6：２５．
２モル％。ｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸として７２．
５モル％。ＢＨＴを０．０１重量％添加。）とをモル比
で１：５にて混合し、水分含量を０．２重量％に調節し
た後、リポザイムＩＭ２０（商品名。ノボノルディス
ク社製、ムコールミーハイ（Mucor miehei）由来のリ
パーゼ）を充填したガラス製カラム（１０cmφ×６０c
m) に４０℃にて通し選択的エステル交換反応を行わせ
た。

【００２７】水蒸気蒸留および水洗処理にてエステル交
換反応物から遊離脂肪酸を除去した後、ｎ−ヘキサンで
浸潤させたシリカゲル（和光製薬（株）製、商品名：ワ
コーゲルＣ１００）を充填したステンレス製カラムに供
し、ｎ−ヘキサンで溶出させジグリセリドを除き、本発
明のトリグリセリド７２０ｇを得た。本トリグリセリド
を構成する全脂肪酸組成、グリセリドの１位および３
位、２位の各脂肪酸組成をＧＬＣ分析によって求めた。
この結果を表１に示す。本トリグリセリドを構成するＣ
_20:5の９０モル％。Ｃ_22:6の９５モル％以上、ｎ−３系
長鎖多価不飽和脂肪酸の総量の９３．５モル％がトリグ
リセリドの１位および３位に分布していた。すなわち本
トリグリセリドの２位にはｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪
酸の総量の６．５モル％が分布していた。本トリグリセ
リドを以下の動物実験の試験油とした。

【００２８】本トリグリセリドの一部にナトリウムメト
キシド０．１重量％を加え、減圧下１００℃にてランダ
ムエステル交換反応を行わせた後、セライトを用いて濾
過し、本トリグリセリドのランダムエステル交換物を得
た。この全脂肪酸組成、１位および３位、２位の各脂肪
酸組成を前記同様に求めた（表１参照）。このトリグリ
セリドの２位にはｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸の総量
の５０．６モル％が分布していた。このランダムエステ
ル交換物を動物実験の対照油とした。

【００２９】

【表１】 ※総炭素数：二重結合数で表示。（ｎ−３）はｎ−３系脂肪酸を示す。

【００３０】４週齢のＳＤ系雄性ラット７匹を１試験区
とし、試験油および対照油を各５重量％配合した飼料
（表２参照）を用いて飼育実験を行った。この間、飼料
成分の酸化劣化を防ぐために、飼料は毎日調製し給餌し
た。水と前記各飼料とを自由摂取させて３週間飼育した
のち、各試験区ラットの大動脈のＰＧＩ₂および血液中
のＴＸＡ₂の各量を測定した。この結果を表３に示す。
なお各試験区とも飼料摂取量、体重増加量および肝臓重
量に有意差は認められなかった。この実験結果から、本
発明に係るトリグリセリド（試験油）はラットに対して
副作用がなく、試験油を添加した区では、ＰＧＩ₂の産
生量が顕著に増大（すなわち血小板凝集能の抑制作用お
よび動脈弛緩作用の増加）し、かつＴＸＡ₂の産生量が
極めて減少（すなわち血小板凝集能の誘起作用および動
脈収縮作用の低下）することが明らかになり、したがっ
て本発明に係るトリグリセリドは動脈硬化症の予防およ
び治療のために利用できる可能性が認められた。

【００３１】

【表２】 ※１日本クレア（株）製、ＡＩＮ−９３Ｇ−ＭＸ ※２日本クレア（株）製、ＡＩＮ−９３−ＶＸ ※３ｔ−ブチルヒドロキノン

【００３２】

【表３】 ※対照油添加区の値に対して危険率５％以下で有意差あり。

【００３３】実施例２試験油脂（本発明のトリグリセリドを含む油脂）および
対照油脂を次のように調製した。すなわち試験油脂はha
rp seal （アザラシ）油脂をドライアイス／アセトン冷
媒で−８０℃、１時間冷却し、析出した結晶部を濾紙で
濾別して調製した。対照油脂は脂肪酸組成の異なる２種
類の魚油（タラ肝油と雑魚油との混合油、マグロ眼窩
油）をドライアイス／アセトン冷媒で同様に冷却、分別
した濃縮物をブレンドし、その総脂肪酸組成を試験油脂
のそれとほぼ近似するものとした。表４これらの脂肪酸
組成を示す。

【００３４】

【表４】 ※：表１の注釈と同じ。

【００３５】４週齢のＳＤ系雄性ラット７匹を１試験区
とし、前記の試験油脂および対照油脂をそれぞれ２０重
量％含む油脂（試験油脂または対照油脂２０重量部、パ
ーム油５０重量部、ハイオレイックサフラワー油５重量
部およびハイリノールサフラワー油２５重量部の混合油
脂。脂肪酸組成は表５参照。）を各１０重量％配合した
飼料（飼料組成は脂肪５重量％を１０重量％とし、コー
ンスターチ４１．７重量％を３６．７重量％とする以外
は実施例１と同じ。）で、飼育実験を行った。この間、
飼料成分の酸化劣化を防ぐために、飼料は毎日調製し給
餌した。水と前記各飼料とを自由摂取させて３週間飼育
したのち、各試験区ラットの大動脈のＰＧＩ₂および血
液中のＴＸＡ₂の各量を測定した（表６参照）。なお各
試験区とも飼料摂取量、体重増加量および肝臓重量に有
意な差異は認められなかった。この実験結果から、試験
油脂（本発明に係るトリグリセリドを含有する油脂）を
添加した区では、ラットに対して副作用が認められず、
またＰＧＩ₂産生の増大およびＴＸＡ₂産生の減少すな
わち血小板凝集能の抑制作用と動脈血管拡張作用とが増
強されることが明らかになった。したがって本発明に係
るトリグリセリドを含有する油脂は動脈硬化症の予防お
よび治療のために利用できる可能性が認められた。

【００３６】

【表５】 ※：表１の注釈と同じ。（ｎ−６）はｎ−６系脂肪酸を示す。 ※※：飽和脂肪酸、モノ不飽和脂肪酸、ｎ−６系脂肪酸およびｎ−３系脂肪酸のうちの各脂肪酸の割合。

【００３７】

【表７】 ※：表３の注釈と同じ。

【００３８】実施例３実施例２で使用した試験油脂および対照油脂の配合割合
を変えた油脂を飼料に添加して実施例２と同様にラット
飼育実験を行った。すなわち４週齢のＳＤ系雄性ラット
７匹を１試験区とし、実施例２に記載の試験油脂または
対照油脂をそれぞれ１０重量％含む油脂（試験油脂また
は対照油脂１０重量部、パーム油５０重量部、ハイオレ
イックサフラワー油１０重量部およびハイリノールサフ
ラワー油３０重量部の混合油脂。脂肪酸組成は表７参
照。）を各１０重量％配合した飼料（飼料組成は脂肪分
を除き実施例２と同じ。）で、飼育実験を行った。この
間、飼料成分の酸化劣化を防ぐために、飼料は毎日調製
した。水と前記各飼料とを自由摂取させて３週間飼育し
たのち、各試験区ラットの大動脈のＰＧＩ₂および血液
中のＴＸＡ₂の各量を測定した（表８参照）。なお各試
験区とも飼料摂取量、体重増加量および肝臓重量に有意
な差異は認められなかった。この実験結果および実施例
２の結果から、本発明に係るトリグリセリドを含有する
油脂は、ラットに対して副作用を及ぼすことなく、対照
油脂に比べて少量の試験油脂を混合した油脂の場合をも
含めて、ＰＧＩ₂産生量の増大およびＴＸＡ₂産生量の
減少をひきおこし、血小板凝集能の抑制作用と動脈血管
の拡張作用とを増強せしめることが明らかになった。こ
のことから、本発明に係るトリグリセリドを含有する油
脂は動脈硬化症の予防および治療のために利用できる可
能性が認められた。

【００３９】

【表７】 ※および※※：表５の注釈と同じ。

【００４０】

【表８】 ※：表３の注釈と同じ。

【００４１】実施例４微細藻類クリプテコディニウムコーニー（Crypthecod
inium cohnii、ＡＴＣＣ３０３３６）を表９に示す培地
３０リットルに植えつけ、３０℃にて、ジャーファーメ
ンターで１００時間通気培養し、培養液から培養藻体を
遠心分離して集め、さらにこれを凍結乾燥した（収量６
２５ｇ）。この乾燥藻体をクロロホルム：メタノール＝
１：１（重量比）混合溶媒中でヒスコトロン（商品名。
日音医理科器械製作所製）により細胞破砕して抽出し、
油分５２０ｇを得た。ｎ−ヘキサン中に分散させたシリ
カゲル（和光純薬（株）製、商品名：ワコーゲルＣ１０
０）を充填したステンレス製カラムに前記油分を供し、
ジエチルエーテル：ｎ−ヘキサン＝１０：９０（容量
比）にて溶出させ、本発明に係るトリグリセリド２５０
ｇを得た。本トリグリセリド（これを試験油脂とした）
の脂肪酸組成を実施例１と同様にして求めた（表１０参
照）。

【００４２】

【表９】（ｐＨ：６．８） ※１：ビタミンミックス水溶液（単位：該水溶液１リットル中の重量）ビオチン：０．００３ｇチアミン：１．０００ｇ ※２：メタルミックス水溶液（単位：該水溶液１リットル中の重量）Ｎａ₂ＥＤＴＡ：１．００ｇＦｅＣｌ₃・６Ｈ₂Ｏ：０．０５ｇＨ₃ＢＯ₃：１．００ｇＭｎＣｌ₂・４Ｈ₂Ｏ：０．１５ｇＺｎＣｌ₂：０．０１ｇＣｏＣｌ₂・６Ｈ₂Ｏ：０．００５ｇ

【００４３】

【表１０】 ※：表１の注釈と同じ。

【００４４】かくして得られた微細藻類由来のトリグリ
セリド（試験油脂）および実施例２に記載の対照油脂を
それぞれ１０重量％含む油脂（試験油脂または対照油脂
１０重量部、パーム油５０重量部、ハイオレイックサフ
ラワー油１０重量部およびハイリノールサフラワー油３
０重量部の混合油脂。脂肪酸組成は表１１参照。）を各
１０重量％配合した飼料（飼料組成は脂肪分を除き実施
例３と同じ。）を調製し、実施例３と同様の飼育試験を
行った。各試験区ラットの大動脈のＰＧＩ₂および血中
のＴＸＡ₂の産生量の分析結果を表１２に示す。なお各
試験区とも飼料摂取量、体重増加量および肝臓重量に有
意差は認められなかった。この実験結果および実施例２
の結果から、本発明に係る油脂はラットに対して副作用
を及ぼさず、対照油脂に比べて少量の試験油脂を混合し
た油脂の場合をも含めて、ＰＧＩ₂産生量を増大および
ＴＸＡ₂産生量を減少させ、血小板凝集能の抑制作用と
動脈血管の拡張作用とを増強せしめることが明らかにな
った。このことから、本発明にかかるトリグリセリドを
含有する油脂は動脈硬化症の予防および治療のために利
用できる可能性が認められた。

【００４５】

【表１１】 ※および※※：表５の注釈と同じ。

【００４６】

【表１２】 ※：表３の注釈と同じ。

【００４７】

【発明の効果】本発明によれば、動物に対して、副作用
がなく、従来のｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸供給源に
比べてＰＧＩ₂産生を増大させかつＴＸＡ₂産生を減少
させる効果が大きく、魚油等の従来のｎ−３系長鎖多価
不飽和脂肪酸供給源よりも少量の摂取で、血小板凝集能
を抑制しかつ動脈血管を拡張する作用のあるエイコサノ
イド産生力に富み、したがって動脈硬化症の予防および
改善を容易ならしめる作用のある油脂を提供できる。

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【手続補正書】

【提出日】平成８年８月１２日

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００１７

【補正方法】変更

【補正内容】

【００１７】前記エステル交換の原料は、成分ａ−１と
してアマニ油、エゴマ油、シソ油等の植物油、イワシ
油、タラ肝油、ニシン油、イカ油、マグロ眼窩油等の魚
油、クジラ、アザラシ、オットセイ等の海産哺乳動物を
起源として得られる圧搾もしくは抽出油、該動物の乳
脂、クロレラ、スピルリナ、ドナリエラ等またナンノク
ロロプシス属（例えばNannochloropsis oculata 、UTEX
LB 2164等）、トラストキトリウム属（例えばThrausto
chytrium aureum 、ATCC 28211、同34304 等）、クリプ
テコディニウム属（例えばCrypthecodinium cohnii、AT
CC 30021、同30334、同30336 、同50052 等）、イソク
リシス属（例えばIsochrysis galbana、CCAP927/1、UTE
X LB 987 等）等に属する微細藻類から抽出された油
脂、モルティエレラ（Mortierella ）属等の微生物（M.
isabellina、IFO 6336、同6739、同7873、同7884、ATCC
44853等）に由来する油脂、またｎ−３系長鎖多価不飽
和脂肪酸またはこれを任意の割合で含む前記各種脂肪酸
（段落番号００１３の項参照）との混合脂肪酸のトリグ
リセリドを使用できる。ここでATCC:American Type Cul
ture Collection （米国）、CCAP:Culture Collection
of Algae and Protozoa （英国）、UTEX:Culture Colle
ction of Algae at the University of Texas （米
国）、IFO:大阪発酵研究所の各略称である。成分ａ−２
としては段落番号００１３の項に記載の各種脂肪酸また
はその誘導体を用いることができる。

【手続補正２】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００３０

【補正方法】変更

【補正内容】

【００３０】４週齢のＳＤ系雄性ラット７匹を１試験区
とし、試験油および対照油を用い、各５重量％配合した
飼料（表２参照）を用いて飼育実験を行った。この間、
飼料成分の酸化劣化を防ぐために、飼料は毎日調製し給
餌した。水と前記各飼料とを自由摂取させて３週間飼育
したのち、各試験区ラットの大動脈のＰＧＩ₂および血
液中のＴＸＡ₂の各量を測定した。この結果を表３に示
す。なお各試験区とも飼料摂取量、体重増加量および肝
臓重量に有意差は認められなかった。この実験結果か
ら、本発明に係るトリグリセリド（試験油）はラットに
対して副作用がなく、試験油を添加した区では、ＰＧＩ
₂の産生量が顕著に増大（すなわち血小板凝集能の抑制
作用および動脈弛緩作用の増加）し、かつＴＸＡ₂の産
生量が極めて減少（すなわち血小板凝集能の誘起作用お
よび動脈収縮作用の低下）することが明らかになり、し
たがって本発明に係るトリグリセリドは動脈硬化症の予
防および治療のために利用できる可能性が認められた。

【手続補正３】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００３５

【補正方法】変更

【補正内容】

【００３５】４週齢のＳＤ系雄性ラット７匹を１試験区
とし、前記の試験油脂および対照油脂を用い、それぞれ
２０重量％含む油脂（試験油脂または対照油脂２０重量
部、パーム油５０重量部、ハイオレイックサフラワー油
５重量部およびハイリノールサフラワー油２５重量部の
混合油脂。脂肪酸組成は表５参照。）を各１０重量％配
合した飼料（飼料組成は脂肪５重量％を１０重量％と
し、コーンスターチ４１．７重量％を３６．７重量％と
する以外は実施例１と同じ。）で、飼育実験を行った。
この間、飼料成分の酸化劣化を防ぐために、飼料は毎日
調製し給餌した。水と前記各飼料とを自由摂取させて３
週間飼育したのち、各試験区ラットの大動脈のＰＧＩ₂
および血液中のＴＸＡ₂の各量を測定した（表６参
照）。なお各試験区とも飼料摂取量、体重増加量および
肝臓重量に有意な差異は認められなかった。この実験結
果から、試験油脂（本発明に係るトリグリセリドを含有
する油脂）を添加した区では、ラットに対して副作用が
認められず、またＰＧＩ₂産生の増大およびＴＸＡ₂産
生の減少すなわち血小板凝集能の抑制作用と動脈血管拡
張作用とが増強されることが明らかになった。したがっ
て本発明に係るトリグリセリドを含有する油脂は動脈硬
化症の予防および治療のために利用できる可能性が認め
られた。

【手続補正４】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００４４

【補正方法】変更

【補正内容】

【００４４】かくして得られた微細藻類由来のトリグリ
セリド（試験油脂）および実施例２に記載の対照油脂を
用い、それぞれ１０重量％含む油脂（試験油脂または対
照油脂１０重量部、パーム油５０重量部、ハイオレイッ
クサフラワー油１０重量部およびハイリノールサフラワ
ー油３０重量部の混合油脂。脂肪酸組成は表１１参
照。）を各１０重量％配合した飼料（飼料組成は脂肪分
を除き実施例３と同じ。）を調製し、実施例３と同様の
飼育試験を行った。各試験区ラットの大動脈のＰＧＩ₂
および血中のＴＸＡ₂の産生量の分析結果を表１２に示
す。なお各試験区とも飼料摂取量、体重増加量および肝
臓重量に有意差は認められなかった。この実験結果およ
び実施例２の結果から、本発明に係る油脂はラットに対
して副作用を及ぼさず、対照油脂に比べて少量の試験油
脂を混合した油脂の場合をも含めて、ＰＧＩ₂産生量を
増大およびＴＸＡ₂産生量を減少させ、血小板凝集能の
抑制作用と動脈血管の拡張作用とを増強せしめることが
明らかになった。このことから、本発明にかかるトリグ
リセリドを含有する油脂は動脈硬化症の予防および治療
のために利用できる可能性が認められた。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所Ａ６１Ｋ 35/80 Ａ２３Ｄ 9/00 ５１６

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】グリセリドの構成脂肪酸としてｎ−３系
長鎖多価不飽和脂肪酸を含み、ｎ−３系長鎖多価不飽和
脂肪酸の総量の４０モル％未満がグリセリドの２位に結
合したトリグリセリドからなることを特徴とする血小板
凝集能を抑制する作用のある油脂。
【請求項２】請求項１に記載のトリグリセリドを５重
量％以上含有してなることを特徴とする血小板凝集能を
抑制する作用のある油脂。
【請求項３】ｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸がα−リ
ノレン酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸、ドコ
サペンタエン酸およびドコサヘキサエン酸からなる群か
ら選ばれる１種もしくは２種以上である請求項１または
２に記載の油脂。
【請求項４】ｎ−３系長鎖多価不飽和脂肪酸がエイコ
サペンタエン酸および／またはドコサヘキサエン酸であ
る請求項１または２に記載の油脂。
【請求項５】トリグリセリドが海産哺乳動物もしくは
微細藻類から得られるものまたはこれらを濃縮処理した
ものまたはこれらをエステル交換処理したものである請
求項１〜４のいずれか１項に記載の油脂。
【請求項６】海産哺乳動物がクジラまたはアザラシで
ある請求項５に記載の油脂。
【請求項７】微細藻類がナンノクロロプシス属、トラ
ストキトリウム属、イソクリシス属またはクリプテコデ
ィニウム属のいずれかに属するものである請求項５に記
載の油脂。
【請求項８】トリグリセリドがグリセリドの１，３位
に特異性を有するリパーゼを用い、エステル交換反応に
よって製造されたものである請求項１、２または５のい
ずれか１項に記載の油脂。