JPH09188629A

JPH09188629A - 抗体産生細胞抑制剤及びそれを含有する組成物

Info

Publication number: JPH09188629A
Application number: JP8017190A
Authority: JP
Inventors: Keiichi Nishimura; 桂一西村; Makoto Fukushima; 信福島; Makoto Yamamoto; 信山本; Toshiyuki Fukuda; 寿之福田; Shinobu Abe; しのぶ阿部
Original assignee: Pola Chemical Industries Inc
Current assignee: Pola Orbis Holdings Inc
Priority date: 1996-01-06
Filing date: 1996-01-06
Publication date: 1997-07-22

Abstract

(57)【要約】【構成】絹関連高分子からなる抗体産生細胞抑制剤。
この抗体産生細胞抑制剤を含有する、自己免疫疾患用の
食品や医薬品などの組成物。【効果】本発明によれば、抗体産生細胞の抗体産生を
抑制し、自己免疫疾患の治療及び予防に有益な組成物が
提供できる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、自己免疫疾患の治
療又は予防に有益な抗体産生細胞抑制剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】近年、自己免疫疾患、例えば、アトピー
性皮膚炎や全身性エリテマトーデス、気管支喘息、アレ
ルギー性鼻炎等は住環境と食生活の急激な変化の影響を
受けてか、大幅に罹患者数を増やしている。これらの自
己免疫疾患に対して、現在のところは、非ステロイド系
或いはステロイド系抗炎症剤などの投与により対症的に
炎症を抑えているに過ぎない。

【０００３】この様な自己免疫疾患に於いては、多彩な
自己抗体、自己抗原感作リンパ球の存在が知られてお
り、自己抗体単独、補体依存性、食細胞抗体性、キラー
細胞依存性に組織障害を起こしていることが実験的にも
確認されている。しかしながら、その具体的なメカニズ
ムは解明されておらず、従って、自己免疫能を下げる試
みは、しばしば免疫不全を引き起こすため、根治的な治
療方法は無いのが現状であった。即ち、自己抗体を産生
する細胞、脾臓などの抗体産生細胞を抑制する薬剤が求
められていた。

【０００４】一方、絹関連高分子について、抗体産生細
胞を抑制すること、自己免疫疾患の予防又は治療に有益
であることは全く知られていなかった。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、この様な状
況を踏まえてなされたものであり、脾臓などの抗体産生
細胞を抑制する物質を提供することを課題とする。

【０００６】

【課題を解決するための手段】この様な状況に鑑みて、
本発明者等は抗体産生細胞を抑制する物質を求めて鋭意
研究を重ねた結果、絹関連高分子にその様な作用がある
ことを見いだし、発明を完成させた。以下、本発明につ
いて詳細に説明する。

【０００７】（１）本発明の抗体産生細胞抑制剤本発明の抗体産生細胞抑制剤は、絹関連高分子からな
る。絹関連高分子とは、絹を構成している蛋白又はペプ
チドの一部又は全部を意味し、具体的には、絹や繭その
もの、細切したり粉砕したりして加工した絹や繭、絹や
繭の溶媒抽出物、絹や繭のペプシン、トリプシン、キモ
トリプシン、カテプシン、パパイン、プロメリン、フィ
シン等のプロテアーゼによる酵素分解物、絹や繭の酸或
いは塩基による加水分解物、これらの分画精製物等が例
示できる。これらの内で好ましいものは、絹或いは繭の
酵素分解物と溶媒抽出物と絹或いは繭の溶媒抽出物とそ
れらの分画物であり、更に好ましくは絹の酵素分解物と
その分画物である。これらは、次のように製造できる。

【０００８】（原体）（１−１）絹又は繭絹又は繭をそのまま或いは加熱滅菌して服用すれば良
く、特段の加工はあっても良いし無くても良い。加工方
法は、例えば細切したりミル等により粉砕したりすれば
よい。加工することにより経口による投与がしやすくな
ったり、有効成分の吸収性が向上したりすることが期待
できる。

【０００９】（１−２）酵素分解物絹又は繭を水などの溶媒中に分散し、これにペプシン、
トリプシン、キモトリプシン、カテプシン、パパイン、
プロメリン、フィシン等のプロテアーゼを加え４０℃付
近の温度で２〜７２時間分解させればよい。酵母由来の
プロテアーゼ等微生物由来のプロテアーゼを用いても構
わない。ｐＨはプロテアーゼに至適なｐＨを用いればよ
い。これらの酵素群で好ましいものは入手がたやすいペ
プシンである。酵素分解後加熱等してプロテアーゼを不
活性化し溶媒を溜去などして用いればよい。

【００１０】（１−３）加水分解物加水分解物は原体を水などに分散させ、酸或いは塩基等
の触媒を加えて、沸点付近の温度で、１〜２４時間加熱
攪拌し、濃縮すれば得られる。触媒としては、酸につい
ては、例えば、塩酸、硫酸、硝酸などが挙げられ、塩基
としては、苛性ソーダ、苛性カリ等が例示でき、酸とし
ては塩酸、硫酸、硝酸等が例示できる。これらの内好ま
しいものは中和などの後処理が簡便な塩酸である。

【００１１】（１−４）溶媒抽出物溶媒抽出物は上記原体、酵素分解物、加水分解物に溶媒
を加え、沸点付近の温度であれば数時間、室温であれば
数日浸漬し、溶媒などを溜去すればよい。溶媒としては
極性溶媒が好ましく、例えば、水、エタノールやメタノ
ール等のアルコール類、アセトンやメチルエチルケトン
等のケトン類、ジエチルエーテルやテトラヒドロフラン
等のエーテル類、クロロホルムや四塩化炭素等のハロゲ
ン化炭化水素類、アセトニトリル等のニトリル類が挙げ
られる。これらは一種のみを用いても良いし二種以上を
混合して用いても良い。この様な溶媒で特に好ましいも
のは、安全性と抽出効率に優れる水とアルコールの混液
である。

【００１２】（１−５）分画物分画物としては、上記原体、酵素分解物、加水分解物、
溶媒抽出物をジエチルエーテル−水、クロロホルム−
水、ヘキサン−含水アルコール、水−ブタノール等の二
相溶剤系で液液抽出したもの、シリカゲル、ＯＤＳ、イ
オン交換樹脂等の担体を用いたカラムクロマトグラフィ
ー、ゲル濾過等による分画物、透析膜による分画物等が
例示できる。これらの内好ましいものはイオン交換樹脂
カラムクロマトグラフィーとゲル濾過である。

【００１３】（２）本発明の抗体産生細胞抑制剤本発明の抗体産生細胞抑制剤は、上記絹関連高分子から
なる。本発明で言う抗体産生細胞抑制剤とは抗体産生細
胞の抗体産生活動を抑制し抗体産生量を減少させる作用
を有する。上記絹関連高分子は後記実施例に示す様に脾
臓等の抗体産生細胞を抑制し抗体の産生量を減少させる
作用に優れるので、自己免疫疾患、取り分け、アトピー
性皮膚炎の治療と予防に優れる。特に、季節に依存して
発症するアトピー性皮膚炎に対しては、免疫反応がフレ
アーアップする以前に抗体産生細胞抑制剤をタイミング
良く投与することが可能なので、高い予防効果が期待で
きる。

【００１４】（３）本発明の組成物本発明の組成物は上記抗体産生細胞抑制剤を一種又は二
種以上含有することを特徴とする。本発明の組成物の種
類としては、例えば、自己免疫疾患の治療又は予防用の
医薬組成物、自己免疫疾患の治療又は予防用の食品組成
物、アトピー性皮膚炎や全身性エリテマトーデス等の皮
膚に関する自己免疫疾患用の皮膚外用剤や化粧料などが
例示できる。これらの組成物は本発明の抗体産生細胞抑
制剤以外にこれらの組成物で通常で使われている任意成
分を含有することが出来る。この様な任意成分として
は、医薬組成物に於いては、賦形剤、結合剤、被覆剤、
滑沢剤、糖衣剤、崩壊剤、増量剤、矯味矯臭剤、乳化・
可溶化・分散剤、安定剤、ｐＨ調整剤、等張剤等が挙げ
られ、食品としては、着色料、増粘剤、矯味矯臭剤、安
定剤、乳化剤、保存料、酸化安定剤などが挙げられ、皮
膚外用剤や化粧料に於いては、ワセリンやマイクロクリ
スタリンワックス等のような炭化水素類、ホホバ油やゲ
イロウ等のエステル類、牛脂、オリーブ油等のトリグリ
セライド類、セタノール、オレイルアルコール等の高級
アルコール類、ステアリン酸、オレイン酸等の脂肪酸、
グリセリンや１，３−ブタンジオール等の多価アルコー
ル類、非イオン界面活性剤、アニオン界面活性剤、カチ
オン界面活性剤、両性界面活性剤、エタノール、カーボ
ポール等の増粘剤、防腐剤、紫外線吸収剤、抗酸化剤、
色素、粉体類等等が挙げられる。更に、自己免疫弛緩の
治療や予防に好ましい成分、例えば、シソ等のハーブ成
分、デキサメタゾン等のステロイドホルモン、インドメ
タシン等の抗炎症剤を含有させることも可能である。こ
れら本発明の組成物は通常の方法によって製造できる。
これら組成物における好ましい本発明の抗体産生細胞抑
制剤の含有量は、医薬組成物では、０．１〜６０重量％
であり、より好ましくは１〜４０重量％であり、更に好
ましくは５〜３０重量％である。又、食品組成物に於い
ては、０．１〜８０重量％が好ましく、１〜７０重量％
がより好ましく、５〜５０重量％が更に好ましい。更に
皮膚外用剤や化粧料では０．０５〜３０重量％が好まし
く、０．１〜２０重量％がより好ましく、０．５〜１０
重量％が更に好ましい。本発明の組成物の適用量は、成
人一人一日当たり、医薬組成物が１〜１００ｇを経口、
経直腸、注射で１回〜数回投与すれば良く、食品組成物
が１〜５００ｇを１回〜数回摂取すれば良く、皮膚外用
剤又は化粧料は適当量を１回〜数回塗布すればよい。本
発明の抗体産生細胞抑制剤は後記実施例に示す如く安全
性に優れるので、この様な大量の投与が可能である。

【００１５】

【発明の実施の形態】以下に例を挙げて発明の実施の形
態について詳細に説明するが、本発明がこれら例のみに
限定をされないことは言うまでもない。

【００１６】例１（製造例）絹１００ｇを細切し、３９℃の温湯５００ｍｌに分散
し、これにペプシン１ｇを加え３９℃で７２時間攪拌
し、１００℃で１時間処理しペプシンを不活性化させ
た。これを凍結乾燥し抗体産生細胞抑制剤１を９５ｇ得
た。

【００１７】例２（製造例）抗体産生細胞抑制剤１を１０ｇとり、これに１００ｍｌ
の５０％エタノール水溶液を加え２時間加熱還流し、濾
過し、減圧濃縮して抗体産生細胞抑制剤２を１．３ｇ得
た。

【００１８】例３（製造例）蚕の繭２００ｇに５０％エタノール水溶液１ｌを加え２
時間加熱還流し、濾過、減圧濃縮し、抗体産生細胞抑制
剤３を２．９ｇ得た。

【００１９】例４（配合例：医薬組成物）下記の処方に準じて顆粒剤を作成した。即ち、処方成分
をグラッド造粒装置に秤込み、２０重量部の５０％エタ
ノール水溶液を噴霧しながら造粒した。これを４０℃で
４８時間送風乾燥し、篩過して顆粒を得た。抗体産生細胞抑制剤１３０重量部ヒドロキシプロピルメチルセルロース１０重量部乳糖４０重量部馬鈴薯デンプン２０重量部

【００２０】例５（配合例：医薬組成物）下記の処方に準じて顆粒剤を作成した。即ち、処方成分
をグラッド造粒装置に秤込み、２０重量部の５０％エタ
ノール水溶液を噴霧しながら造粒した。これを４０℃で
４８時間送風乾燥し、篩過して顆粒を得た。抗体産生細胞抑制剤２３０重量部ヒドロキシプロピルメチルセルロース１０重量部乳糖４０重量部馬鈴薯デンプン２０重量部

【００２１】例６（配合例：医薬組成物）下記の処方に準じて顆粒剤を作成した。即ち、処方成分
をグラッド造粒装置に秤込み、２０重量部の５０％エタ
ノール水溶液を噴霧しながら造粒した。これを４０℃で
４８時間送風乾燥し、篩過して顆粒を得た。抗体産生細胞抑制剤３３０重量部ヒドロキシプロピルメチルセルロース１０重量部乳糖４０重量部馬鈴薯デンプン２０重量部

【００２２】例７（配合例：食品組成物）下記の処方に準じて、キャンディーを作成した。即ち、
処方成分を１２０℃で加熱混合し、型へ流し込み成型し
てキャンディーとした。抗体産生細胞抑制剤１１０重量部水飴３０重量部ソルビット６０重量部

【００２３】例８（配合例：食品組成物）下記の処方に準じて、キャンディーを作成した。即ち、
処方成分を１２０℃で加熱混合し、型へ流し込み成型し
てキャンディーとした。抗体産生細胞抑制剤２１０重量部水飴３０重量部ソルビット６０重量部

【００２４】例９（配合例：食品組成物）下記の処方に準じて、キャンディーを作成した。即ち、
処方成分を１２０℃で加熱混合し、型へ流し込み成型し
てキャンディーとした。抗体産生細胞抑制剤３１０重量部水飴３０重量部ソルビット６０重量部

【００２５】例１０（配合例：皮膚外用剤）下記の処方に準じて皮膚外用剤を作成した。即ち、処方
成分をニーダーで加熱混練りし冷却し、軟膏を得た。抗体産生細胞抑制剤１５重量部ワセリン９５重量部

【００２６】例１１（配合例：皮膚外用剤）下記の処方に準じて皮膚外用剤を作成した。即ち、処方
成分をニーダーで加熱混練りし冷却し、軟膏を得た。抗体産生細胞抑制剤２５重量部ワセリン９５重量部

【００２７】例１２（配合例：皮膚外用剤）下記の処方に準じて皮膚外用剤を作成した。即ち、処方
成分をニーダーで加熱混練りし冷却し、軟膏を得た。抗体産生細胞抑制剤３５重量部ワセリン９５重量部

【００２８】

【実施例】

実施例１急性毒性ＩＣＲマウス１群５匹を用いて本発明の抗体産生細胞抑
制剤１〜３の急性毒性を調べた。即ち、本発明の抗体産
生細胞抑制剤１〜３をそれぞれ生理食塩水に分散又は可
溶化させ、２ｇ／Ｋｇの量を経口投与した。投与後１４
日に動物の生死を確認したところが全ての動物が生存し
ていた。このことより本発明の抗体産生細胞抑制剤のＬ
Ｄ５０値は２ｇ／Ｋｇより大きく、安全性が高いことが
判る。

【００２９】実施例２抗体産生細胞抑制作用抗体産生細胞抑制作用はジェルン（Ｊｅｒｎ）等が開発
した溶血プラーク法（Ｓｃｉｅｎｃｅ，１４０，４０
５，１９６３）に従って脾細胞の抗体産生細胞をプラー
ク形成によって識別し計数することによって行った。即
ち、ｄｄｙ雄性マウス１群６匹に尾静脈より、ＳＲＢＣ
（羊赤血球）を燐酸緩衝生理食塩水に４×１０⁸個／ｍ
ｌの濃度に分散させ、０．２５ｍｌ投与し感作させた。
ＳＲＢＣ投与日より連日４日、５００、１０００、２０
００ｍｇ／Ｋｇのドーズでサンプルを生理食塩水に分散
或いは可溶化させて投与した。最終の投与終了後２４時
間に脾臓を取り出し、ジェルンの方法によって抗体産生
細胞を計数した。即ち、脾臓細胞に分け、寒天培地上で
ＳＲＢＣとともにインキュベートし、更にモルモット血
清と共にインキュベートしプラーク形成細胞を計数し
た。結果を表１にしめす。これより、本発明の抗体産生
細胞抑制剤は抗体産生細胞抑制作用に優れることが判
る。

【００３０】

【表１】

【００３１】

【発明の効果】本発明によれば、抗体産生細胞の抗体産
生を抑制し、自己免疫疾患の治療及び予防に有益な組成
物が提供できる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者福田寿之神奈川県横浜市戸塚区柏尾町560 ポーラ化成工業株式会社戸塚研究所内 (72)発明者阿部しのぶ神奈川県横浜市戸塚区柏尾町560 ポーラ化成工業株式会社戸塚研究所内

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】絹関連高分子からなる抗体産生細胞抑制
剤。
【請求項２】絹関連高分子が絹、絹の抽出物、絹の酵
素分解物の何れかである、請求項１記載の抗体産生細胞
抑制剤。
【請求項３】請求項１又は２記載の抗体産生細胞抑制
剤を含有する組成物。
【請求項４】自己免疫疾患予防又は治療用の食品であ
ることを特徴とする、請求項３記載の組成物。
【請求項５】自己免疫疾患予防又は治療用の医薬組成
物であることを特徴とする、請求項３記載の組成物。
【請求項６】自己免疫疾患がアトピー性皮膚炎又は全
身性エリテマトーデスである、請求項４又は５記載の組
成物。