JPH09211010A - 電気生理特性測定装置 - Google Patents
電気生理特性測定装置Info
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- JPH09211010A JPH09211010A JP8020125A JP2012596A JPH09211010A JP H09211010 A JPH09211010 A JP H09211010A JP 8020125 A JP8020125 A JP 8020125A JP 2012596 A JP2012596 A JP 2012596A JP H09211010 A JPH09211010 A JP H09211010A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 簡易な構成で、高い位置分解能で顕微観察や
電気生理学特性測定が可能な電気生理特性測定装置を提
供する。 【構成】 試料９００の広域像を観察する光学顕微鏡部
１００と、先端に微小開口を有し、先端の微小開口から
エバネッセント光を出力するガラスマイクロピペット電
極２００と、ガラスマイクロピペット電極２００を走査
しながら、試料９００の局所像を観察する走査型近接場
光学顕微鏡部３００と、ガラスマイクロピペット電極２
００の先端を試料９００の表面から２００ｎｍ以内の距
離に設定する電極高さ設定部４００と、電流をガラスマ
イクロピペット電極２００を介して導出して記録するパ
ッチクランプ測定部５００と、電気生理学的情報を収集
し、解析し、記録するとともに装置全体を制御する解析
制御部６００とを備える。
電気生理学特性測定が可能な電気生理特性測定装置を提
供する。 【構成】 試料９００の広域像を観察する光学顕微鏡部
１００と、先端に微小開口を有し、先端の微小開口から
エバネッセント光を出力するガラスマイクロピペット電
極２００と、ガラスマイクロピペット電極２００を走査
しながら、試料９００の局所像を観察する走査型近接場
光学顕微鏡部３００と、ガラスマイクロピペット電極２
００の先端を試料９００の表面から２００ｎｍ以内の距
離に設定する電極高さ設定部４００と、電流をガラスマ
イクロピペット電極２００を介して導出して記録するパ
ッチクランプ測定部５００と、電気生理学的情報を収集
し、解析し、記録するとともに装置全体を制御する解析
制御部６００とを備える。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、細胞などの電気生
理学的な測定や記録と近接場顕微観察とを同時に行う電
気生理特性測定装置に関するものである。
理学的な測定や記録と近接場顕微観察とを同時に行う電
気生理特性測定装置に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】生細胞の特性の観察にあたって、従来か
らの光学顕微鏡による形態観察に加えて、電気生理学的
特性の観察が注目されている。
らの光学顕微鏡による形態観察に加えて、電気生理学的
特性の観察が注目されている。
【０００３】こうしたパッチクランプ法に代表される電
気生理特性測定記録法と光学的顕微観察法を融合した複
合顕微観察用の装置として、微分干渉顕微鏡の映像をビ
デオとそれに付随する画像強調装置を用いて観察記録す
るビデオ強化型微分干渉顕微鏡にレーザピンセットおよ
びパッチクランプ電流測定装置を組込んだマルチ計測顕
微鏡が提案されている（辰巳他、近接場光学研究グルー
プ第二回研究討論会予稿集 ｐｐ７５−８０、１９９４
年１１月）。
気生理特性測定記録法と光学的顕微観察法を融合した複
合顕微観察用の装置として、微分干渉顕微鏡の映像をビ
デオとそれに付随する画像強調装置を用いて観察記録す
るビデオ強化型微分干渉顕微鏡にレーザピンセットおよ
びパッチクランプ電流測定装置を組込んだマルチ計測顕
微鏡が提案されている（辰巳他、近接場光学研究グルー
プ第二回研究討論会予稿集 ｐｐ７５−８０、１９９４
年１１月）。
【０００４】このマルチ計測顕微鏡装置では、落射照明
光を集光して試料に照射する第１の対物レンズとして水
浸式で開口数の大きな対物レンズを用いることにより側
方からのパッチ電極の進入を可能とするとともに、Ａｒ
−Ｋｒレーザ光源から出力された波長＝６４３ｎｍの光
を落射蛍光の光路に導入して、第１の対物レンズに試料
を挟んで対向して設置された開口数の大きな第２の対物
レンズで集光して試料に照射してレーザピンセット機能
を実行させる。
光を集光して試料に照射する第１の対物レンズとして水
浸式で開口数の大きな対物レンズを用いることにより側
方からのパッチ電極の進入を可能とするとともに、Ａｒ
−Ｋｒレーザ光源から出力された波長＝６４３ｎｍの光
を落射蛍光の光路に導入して、第１の対物レンズに試料
を挟んで対向して設置された開口数の大きな第２の対物
レンズで集光して試料に照射してレーザピンセット機能
を実行させる。
【０００５】この装置では、通常のレンズ光学系を用い
た光学顕微鏡下で、パッチ電極を試料の近くまで接近さ
せた後、電極から与えるパルス電気信号に応じて発生す
る電気信号を電極で検出し、検出された電気信号の振幅
を指標にして、パッチ電極を試料表面に接触させる。こ
の後、パッチ電極内を陰圧にして、試料の膜を電極内に
引き込み、ギガオーム（ＧΩ）シールを形成させる。
た光学顕微鏡下で、パッチ電極を試料の近くまで接近さ
せた後、電極から与えるパルス電気信号に応じて発生す
る電気信号を電極で検出し、検出された電気信号の振幅
を指標にして、パッチ電極を試料表面に接触させる。こ
の後、パッチ電極内を陰圧にして、試料の膜を電極内に
引き込み、ギガオーム（ＧΩ）シールを形成させる。
【０００６】こうして、この装置では、ビデオ強化型微
分干渉顕微鏡で細胞膜の光学的な映像を捉らえるととも
に、レーザピンセット機能のオン／オフ時における生体
膜電流の変化を観察する。
分干渉顕微鏡で細胞膜の光学的な映像を捉らえるととも
に、レーザピンセット機能のオン／オフ時における生体
膜電流の変化を観察する。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】パッチクランプ法に代
表される電気生理特性測定と光学的顕微観察とを融合し
た複合観察では、精度良く限定された微小な領域からの
電気生理特性の情報を選択性を高くして取得することが
条件となる。
表される電気生理特性測定と光学的顕微観察とを融合し
た複合観察では、精度良く限定された微小な領域からの
電気生理特性の情報を選択性を高くして取得することが
条件となる。
【０００８】この条件に対して、従来のパッチクランプ
装置では、（i）検出される電気信号の振幅および光学
顕微鏡像を指標にして、パッチ電極をマイクロマニピュ
レータを操作して試料の膜に接近させるので、接触後に
は電気信号の振幅が変化しなくなり、また光学顕微鏡観
察からも電極先端の精密な視認が困難であることから、
電極の位置を進めすぎて試料を傷つけてしまう場合が多
い。
装置では、（i）検出される電気信号の振幅および光学
顕微鏡像を指標にして、パッチ電極をマイクロマニピュ
レータを操作して試料の膜に接近させるので、接触後に
は電気信号の振幅が変化しなくなり、また光学顕微鏡観
察からも電極先端の精密な視認が困難であることから、
電極の位置を進めすぎて試料を傷つけてしまう場合が多
い。
【０００９】また、光学プローブとしてレーザーピンセ
ットを用いる従来の装置では、（ii）落射蛍光の光路に
レーザ光を導入し、開口数の大きな対物レンズで集光
し、試料に照射するレーザピンセットなので、光の作用
の及ぶ領域が照射光の光軸方向に限定できないという問
題点があった。
ットを用いる従来の装置では、（ii）落射蛍光の光路に
レーザ光を導入し、開口数の大きな対物レンズで集光
し、試料に照射するレーザピンセットなので、光の作用
の及ぶ領域が照射光の光軸方向に限定できないという問
題点があった。
【００１０】本発明は、上記を鑑みてなされたものであ
り、簡便かつ確実にＧΩシールの形成が可能であり、高
い位置分解能で顕微観察や電気生理学特性測定が可能な
電気生理特性測定装置を提供することを目的とする。
り、簡便かつ確実にＧΩシールの形成が可能であり、高
い位置分解能で顕微観察や電気生理学特性測定が可能な
電気生理特性測定装置を提供することを目的とする。
【００１１】
【課題を解決するための手段】請求項１の電気生理特性
測定装置は、（ａ）試料の広域像を観察する光学顕微鏡
部と、（ｂ）先端に微小開口を有し、外周部に光反射膜
および絶縁膜が形成されるとともに、内部空間に電極液
を収納し、後端の開口から前記微小開口の径より長い波
長の光が導入されると、前記微小開口からエバネッセン
ト光を出力するガラスマイクロピペット電極と、（ｃ）
照射光を発生する光照射部を備え、ガラスマイクロピペ
ット電極を移動しながら、ガラスマイクロピペット電極
を介してエバネッセント光を試料に照射し、試料の局所
像を観察する走査型近接場光学顕微鏡部と、（ｄ）ガラ
スマイクロピペット電極と試料との間の距離を２００ｎ
ｍ以下に近接させる電極高さ設定手段と、（ｅ）ガラス
マイクロピペット電極を通して電圧を印加して、その結
果生じた電流を検出するとともに、試料中の単一の生細
胞あるいは生体膜の微小な領域から生体膜を横切る電流
を電極液を介して導出して記録するパッチクランプ測定
部と、（ｆ）走査型近接場光学顕微鏡部から得られた試
料の局所像と、走査型近接場光学顕微鏡部の光の照射位
置ごとにパッチクランプ測定部から得られた電気生理学
的情報とを収集し、記録し、解析するとともに、装置全
体を制御する解析制御部とを備えることを特徴とする。
測定装置は、（ａ）試料の広域像を観察する光学顕微鏡
部と、（ｂ）先端に微小開口を有し、外周部に光反射膜
および絶縁膜が形成されるとともに、内部空間に電極液
を収納し、後端の開口から前記微小開口の径より長い波
長の光が導入されると、前記微小開口からエバネッセン
ト光を出力するガラスマイクロピペット電極と、（ｃ）
照射光を発生する光照射部を備え、ガラスマイクロピペ
ット電極を移動しながら、ガラスマイクロピペット電極
を介してエバネッセント光を試料に照射し、試料の局所
像を観察する走査型近接場光学顕微鏡部と、（ｄ）ガラ
スマイクロピペット電極と試料との間の距離を２００ｎ
ｍ以下に近接させる電極高さ設定手段と、（ｅ）ガラス
マイクロピペット電極を通して電圧を印加して、その結
果生じた電流を検出するとともに、試料中の単一の生細
胞あるいは生体膜の微小な領域から生体膜を横切る電流
を電極液を介して導出して記録するパッチクランプ測定
部と、（ｆ）走査型近接場光学顕微鏡部から得られた試
料の局所像と、走査型近接場光学顕微鏡部の光の照射位
置ごとにパッチクランプ測定部から得られた電気生理学
的情報とを収集し、記録し、解析するとともに、装置全
体を制御する解析制御部とを備えることを特徴とする。
【００１２】ここで、パッチクランプ測定部は、（i）
ガラスマイクロピペット電極で検出された生体電気信号
である生体膜を横切る電流信号を入力し、電圧信号に変
換し、増幅して出力する前置増幅器と、（ii）解析制御
部からの指示により、シール抵抗の測定、膜電位固定、
または膜電流固定に関する指令信号を出力する電気信号
発生装置と、（iii）前置増幅器から出力された電圧信
号を入力し、増幅し、処理して解析制御部へ向けて出力
するとともに、電気信号発生装置から出力された指令信
号を入力し、演算処理して前置増幅器へ向けて出力する
主増幅器とを備えることを特徴としてもよい。
ガラスマイクロピペット電極で検出された生体電気信号
である生体膜を横切る電流信号を入力し、電圧信号に変
換し、増幅して出力する前置増幅器と、（ii）解析制御
部からの指示により、シール抵抗の測定、膜電位固定、
または膜電流固定に関する指令信号を出力する電気信号
発生装置と、（iii）前置増幅器から出力された電圧信
号を入力し、増幅し、処理して解析制御部へ向けて出力
するとともに、電気信号発生装置から出力された指令信
号を入力し、演算処理して前置増幅器へ向けて出力する
主増幅器とを備えることを特徴としてもよい。
【００１３】また、電極高さ設定手段には、シィアフォ
ースノンコンタクト原子間力顕微鏡で採用されている共
振位相検知法を好適に採用できる。
ースノンコンタクト原子間力顕微鏡で採用されている共
振位相検知法を好適に採用できる。
【００１４】また、光学顕微鏡部では、コントラスト増
強が可能な、ホフマンモジュレーションシステム、位相
差顕微鏡、または微分干渉顕微鏡を好適に使用できる。
強が可能な、ホフマンモジュレーションシステム、位相
差顕微鏡、または微分干渉顕微鏡を好適に使用できる。
【００１５】また、光照射部は、波長可変レーザを備え
ることとしてもよいし、また、（i）白色光源と、（i
i）白色光源から出力された白色光を分光出力する分光
器と、（iii）分光器から出力された光の全波長成分の
中から特定の波長の光を選択して出力する光選択器とを
備えることとしてもよい。
ることとしてもよいし、また、（i）白色光源と、（i
i）白色光源から出力された白色光を分光出力する分光
器と、（iii）分光器から出力された光の全波長成分の
中から特定の波長の光を選択して出力する光選択器とを
備えることとしてもよい。
【００１６】請求項１の電気生理特性測定装置では、ま
ず、光学顕微鏡部で試料の広域像を得る。こうして得ら
れる試料の広域像に基づいて、ガラスマイクロピペット
電極を形態観察の対象である細胞などの生体試料上の位
置に移動する。引き続き、ガラスマイクロピペット電極
の先端を試料表面の近接場領域である初期位置まで接近
させる。ガラスマイクロピペット電極の近接場領域への
移動にあたっては、ノンコンタクト走査型顕微鏡モード
またはシィアフォースノンコンタクト走査型顕微鏡モー
ドなどの方式を好適に使用できる。
ず、光学顕微鏡部で試料の広域像を得る。こうして得ら
れる試料の広域像に基づいて、ガラスマイクロピペット
電極を形態観察の対象である細胞などの生体試料上の位
置に移動する。引き続き、ガラスマイクロピペット電極
の先端を試料表面の近接場領域である初期位置まで接近
させる。ガラスマイクロピペット電極の近接場領域への
移動にあたっては、ノンコンタクト走査型顕微鏡モード
またはシィアフォースノンコンタクト走査型顕微鏡モー
ドなどの方式を好適に使用できる。
【００１７】こうして、試料の近接場顕微観察による形
態観察にあたっての幾何学的準備が完了し、形態観察を
開始する。
態観察にあたっての幾何学的準備が完了し、形態観察を
開始する。
【００１８】まず、光照射部が発生した照射光を初期位
置に設定されたガラスマイクロピペット電極を介して照
射する。ここで、ガラスマイクロピペット電極を介して
試料に照射される照射光は非放射光であるエバネセント
光であり、結像のためのレンズなどを用いないので、レ
ンズの開口による回折の制限を受けず、位置分解能がガ
ラスマイクロピペット電極の先端の開口径のみで決定さ
れる。この結果、ガラスマイクロピペット電極の先端の
径を数１００ｎｍにし、ガラスマイクロピペット電極と
試料との間を近接場領域となる数１００ｎｍ以下とすれ
ば、照射光の波長の数分の１〜数１０分の１の分解能
で、試料の微細な形状や構造、あるいは微小領域におけ
る光学的な特性が観察できる。こうして観察される試料
の局所像は解析制御部に通知される。
置に設定されたガラスマイクロピペット電極を介して照
射する。ここで、ガラスマイクロピペット電極を介して
試料に照射される照射光は非放射光であるエバネセント
光であり、結像のためのレンズなどを用いないので、レ
ンズの開口による回折の制限を受けず、位置分解能がガ
ラスマイクロピペット電極の先端の開口径のみで決定さ
れる。この結果、ガラスマイクロピペット電極の先端の
径を数１００ｎｍにし、ガラスマイクロピペット電極と
試料との間を近接場領域となる数１００ｎｍ以下とすれ
ば、照射光の波長の数分の１〜数１０分の１の分解能
で、試料の微細な形状や構造、あるいは微小領域におけ
る光学的な特性が観察できる。こうして観察される試料
の局所像は解析制御部に通知される。
【００１９】解析制御部は、走査型近接場光学顕微鏡部
から通知された試料の局所像情報と、パッチクランプ測
定部から通知された電気生理学的特性情報を収集し、初
期位置情報とともに格納する。
から通知された試料の局所像情報と、パッチクランプ測
定部から通知された電気生理学的特性情報を収集し、初
期位置情報とともに格納する。
【００２０】次に、解析制御部は、走査型近接場光学顕
微鏡部に走査を指示する。そして、走査位置ごとに、上
記と同様にして、試料の局所像情報を収集し、走査位置
情報とともに格納する。
微鏡部に走査を指示する。そして、走査位置ごとに、上
記と同様にして、試料の局所像情報を収集し、走査位置
情報とともに格納する。
【００２１】走査にあたって、近接場領域内での走査を
確保するためには、コンスタントハイトモード制御、ノ
ンコンタクト走査型顕微鏡モード制御、またはシィアフ
ォースノンコンタクト走査型顕微鏡モード制御などの方
式を好適に使用できる。
確保するためには、コンスタントハイトモード制御、ノ
ンコンタクト走査型顕微鏡モード制御、またはシィアフ
ォースノンコンタクト走査型顕微鏡モード制御などの方
式を好適に使用できる。
【００２２】走査、情報収集、および情報格納の完了
後、解析制御部は格納情報に基づいて、解析制御部は、
試料の走査領域全体の光学像情報を解析し、顕微観察像
を再構成して表示や記録などを行う。この結果、通常の
光学顕微鏡による形態観察に比べて、より高い空間分解
能で試料の形態の観察ができる。
後、解析制御部は格納情報に基づいて、解析制御部は、
試料の走査領域全体の光学像情報を解析し、顕微観察像
を再構成して表示や記録などを行う。この結果、通常の
光学顕微鏡による形態観察に比べて、より高い空間分解
能で試料の形態の観察ができる。
【００２３】また、照射光の波長を変化させて各波長ご
とに、上記と同様に、走査、情報収集、および情報格納
を行い、試料の走査領域全体の光学像情報を解析し、顕
微観察像を再構成して表示や記録などを行う。この結
果、照射光の波長に応じた多元的な試料の観察ができ
る。
とに、上記と同様に、走査、情報収集、および情報格納
を行い、試料の走査領域全体の光学像情報を解析し、顕
微観察像を再構成して表示や記録などを行う。この結
果、照射光の波長に応じた多元的な試料の観察ができ
る。
【００２４】次に、上記の顕微観察像に基づいて、ガラ
スマイクロピペット電極を近接場顕微鏡部の走査手段を
用いて電気生理測定点の上方に移動する。
スマイクロピペット電極を近接場顕微鏡部の走査手段を
用いて電気生理測定点の上方に移動する。
【００２５】次いで、電極高さ設定手段を用いて、ガラ
スマイクロピペット電極を試料表面に接近させる。ま
た、これと同時に、ガラスマイクロピペット電極を通し
て電圧を印加し、生じる電流をモニタする。
スマイクロピペット電極を試料表面に接近させる。ま
た、これと同時に、ガラスマイクロピペット電極を通し
て電圧を印加し、生じる電流をモニタする。
【００２６】そして、電極高さ設定手段で２００ｎｍ以
内に接近したと判断されたこと、および、モニタ電流が
充分小さくなったと判断されたことを条件として、接近
操作を止める。
内に接近したと判断されたこと、および、モニタ電流が
充分小さくなったと判断されたことを条件として、接近
操作を止める。
【００２７】この結果、試料の表面からの距離が２００
ｎｍ以下であり、かつ、試料を傷つけない高さにガラス
マイクロピペット電極の先端が確実に設定される。
ｎｍ以下であり、かつ、試料を傷つけない高さにガラス
マイクロピペット電極の先端が確実に設定される。
【００２８】次に、電極内を陰圧にして、試料の膜を電
極内に引き込み、ＧΩシールを形成し、電極内部に電解
液を導入する。なお、ガラスマイクロピペット電極の外
周には絶縁膜が形成されているので、ギガオーム（Ｇ
Ω）シールが確実に形成される。
極内に引き込み、ＧΩシールを形成し、電極内部に電解
液を導入する。なお、ガラスマイクロピペット電極の外
周には絶縁膜が形成されているので、ギガオーム（Ｇ
Ω）シールが確実に形成される。
【００２９】こうして、試料の電気生理学的観察にあた
っての幾何学的準備が完了する。そして、試料中の単一
の生細胞あるいは生体膜の微小な領域から生体膜を横切
る電流を電極液を介してパッチクランプ測定部で導出
し、電圧信号への変換や増幅などを施して解析制御部へ
通知する。解析制御部では、パッチクランプ測定部から
通知された電気生理学的情報を収集し、記録し、解析す
る。
っての幾何学的準備が完了する。そして、試料中の単一
の生細胞あるいは生体膜の微小な領域から生体膜を横切
る電流を電極液を介してパッチクランプ測定部で導出
し、電圧信号への変換や増幅などを施して解析制御部へ
通知する。解析制御部では、パッチクランプ測定部から
通知された電気生理学的情報を収集し、記録し、解析す
る。
【００３０】また、光照射部が発生した照射光をガラス
マイクロピペット電極を介して照射すると、光の照射に
よって発生した試料内の電気生理学的変化に伴う生体膜
を横切る電流は、ガラスマイクロピペット電極から導出
されてパッチクランプ測定部で測定され、測定結果が解
析制御部に通知される。
マイクロピペット電極を介して照射すると、光の照射に
よって発生した試料内の電気生理学的変化に伴う生体膜
を横切る電流は、ガラスマイクロピペット電極から導出
されてパッチクランプ測定部で測定され、測定結果が解
析制御部に通知される。
【００３１】解析制御部は、走査型近接場光学顕微鏡部
から通知された試料の局所像情報に加えて、パッチクラ
ンプ測定部から通知された電気生理学的特性情報を収集
し、電気生理測定点情報とともに格納する。
から通知された試料の局所像情報に加えて、パッチクラ
ンプ測定部から通知された電気生理学的特性情報を収集
し、電気生理測定点情報とともに格納する。
【００３２】また、照射光の波長を変化させて各波長ご
とに、情報収集、および情報格納を行い、試料の光照射
位置に応じた電気生理学的特性情報を解析し、顕微観察
像と生体電気反応とを対応させて再構成して表示や記録
などを行う。この結果、照射光の波長に応じた多元的な
試料の観察ができる。
とに、情報収集、および情報格納を行い、試料の光照射
位置に応じた電気生理学的特性情報を解析し、顕微観察
像と生体電気反応とを対応させて再構成して表示や記録
などを行う。この結果、照射光の波長に応じた多元的な
試料の観察ができる。
【００３３】
【発明の実施の形態】以下、添付図面を参照して本発明
の光学プローブ顕微鏡装置の実施の形態を説明する。な
お、図面の説明にあたって同一の要素には同一の符号を
付し、重複する説明を省略する。
の光学プローブ顕微鏡装置の実施の形態を説明する。な
お、図面の説明にあたって同一の要素には同一の符号を
付し、重複する説明を省略する。
【００３４】図１は、本発明の電気生理特性測定装置の
全体構成図である。この装置は、近接場顕微鏡機能によ
り高い位置分解能で試料の光学像を得るとともに、パッ
チクランプ測定機能により光刺激による電気生理学的特
性の変化を測定する装置である。
全体構成図である。この装置は、近接場顕微鏡機能によ
り高い位置分解能で試料の光学像を得るとともに、パッ
チクランプ測定機能により光刺激による電気生理学的特
性の変化を測定する装置である。
【００３５】図１に示すように、この装置は、（ａ）試
料９００の広域像を観察する光学顕微鏡部１００と、
（ｂ）先端に微小開口を有し、外周部に光反射膜および
絶縁膜が形成されるとともに、内部空間に電極液を収納
し、後端の開口から微小開口の径より長い波長の光が導
入されると、微小開口からエバネッセント光を出力する
ガラスマイクロピペット電極２００と、（ｃ）照射光を
発生する波長可変光照射部３１０を備え、ガラスマイク
ロピペット電極２００を移動しながら、ガラスマイクロ
ピペット電極２００を介してエバネッセント光を試料９
００に照射し、試料９００の局所像を観察する走査型近
接場光学顕微鏡部３００と、（ｄ）ガラスマイクロピペ
ット電極２００と試料９００との間の距離を２００ｎｍ
以下に近接させる電極高さ設定部４００と、（ｅ）ガラ
スマイクロピペット電極２００を通して電圧を印加し
て、その結果生じた電流を検出するとともに、試料中の
単一の生細胞あるいは生体膜の微小な領域から生体膜を
横切る電流を電極液を介して導出して記録するパッチク
ランプ測定部５００と、（ｆ）走査型近接場光学顕微鏡
部２００から得られた試料９００の局所像と、走査型近
接場光学顕微鏡部３００の光の照射ごとにパッチクラン
プ測定部５００から得られた電気生理学的情報とを収集
し、記録し、解析するとともに、装置全体を制御する解
析制御部６００とを備える。そして、収納器７００に収
納された水浸状態の試料９００を観察する。
料９００の広域像を観察する光学顕微鏡部１００と、
（ｂ）先端に微小開口を有し、外周部に光反射膜および
絶縁膜が形成されるとともに、内部空間に電極液を収納
し、後端の開口から微小開口の径より長い波長の光が導
入されると、微小開口からエバネッセント光を出力する
ガラスマイクロピペット電極２００と、（ｃ）照射光を
発生する波長可変光照射部３１０を備え、ガラスマイク
ロピペット電極２００を移動しながら、ガラスマイクロ
ピペット電極２００を介してエバネッセント光を試料９
００に照射し、試料９００の局所像を観察する走査型近
接場光学顕微鏡部３００と、（ｄ）ガラスマイクロピペ
ット電極２００と試料９００との間の距離を２００ｎｍ
以下に近接させる電極高さ設定部４００と、（ｅ）ガラ
スマイクロピペット電極２００を通して電圧を印加し
て、その結果生じた電流を検出するとともに、試料中の
単一の生細胞あるいは生体膜の微小な領域から生体膜を
横切る電流を電極液を介して導出して記録するパッチク
ランプ測定部５００と、（ｆ）走査型近接場光学顕微鏡
部２００から得られた試料９００の局所像と、走査型近
接場光学顕微鏡部３００の光の照射ごとにパッチクラン
プ測定部５００から得られた電気生理学的情報とを収集
し、記録し、解析するとともに、装置全体を制御する解
析制御部６００とを備える。そして、収納器７００に収
納された水浸状態の試料９００を観察する。
【００３６】光学顕微鏡部１００では、ホフマンコンデ
ンサ、位相差顕微鏡、または微分干渉顕微鏡を好適に使
用できる。
ンサ、位相差顕微鏡、または微分干渉顕微鏡を好適に使
用できる。
【００３７】ガラスマイクロピペット電極２００は、先
端部に数１００ｎｍ程度の径の開口を有する。
端部に数１００ｎｍ程度の径の開口を有する。
【００３８】走査型近接場光学顕微鏡部３００は、
（i）波長可変光照射部３１０と、（ii）波長可変光照
射部３１０から出力された照射光がガラスマイクロピペ
ット電極２００を介して試料９００に照射されて発生す
る光学像を撮像する撮像部３２０と、（iii）ガラスマ
イクロピペット電極２００位置を移動させる走査部３３
０とを備える。
（i）波長可変光照射部３１０と、（ii）波長可変光照
射部３１０から出力された照射光がガラスマイクロピペ
ット電極２００を介して試料９００に照射されて発生す
る光学像を撮像する撮像部３２０と、（iii）ガラスマ
イクロピペット電極２００位置を移動させる走査部３３
０とを備える。
【００３９】図２は、波長可変光照射部３１０の構成図
である。図２（ａ）は、波長可変光源を、解析制御部６
００から指示された波長の光を出力する波長可変レーザ
３１２で構成した場合を示し、また、図３（ｂ）は、波
長可変光源を、（i）白色光源３１３と、（ii）白色光
源３１３から出力された白色光を分光出力する分光器３
１４と、（iii）分光器３１４から出力された光の内か
ら解析制御部から指示された波長の光を選択して出力す
る可動スリット３１５とで構成した場合を示す。
である。図２（ａ）は、波長可変光源を、解析制御部６
００から指示された波長の光を出力する波長可変レーザ
３１２で構成した場合を示し、また、図３（ｂ）は、波
長可変光源を、（i）白色光源３１３と、（ii）白色光
源３１３から出力された白色光を分光出力する分光器３
１４と、（iii）分光器３１４から出力された光の内か
ら解析制御部から指示された波長の光を選択して出力す
る可動スリット３１５とで構成した場合を示す。
【００４０】撮像部３２０は、（i）試料からの光を集
める対物レンズ３２１と、（ii）対物レンズ３２１を介
した光を結像させる結像光学系３２２と、（iii）結像
面に受光面が設置された撮像器３２３とを備える。
める対物レンズ３２１と、（ii）対物レンズ３２１を介
した光を結像させる結像光学系３２２と、（iii）結像
面に受光面が設置された撮像器３２３とを備える。
【００４１】電極高さ設定部４００では、シィアフォー
スノンコンタクト原子間力顕微鏡で採用されている共振
位相検知法が採用さている。
スノンコンタクト原子間力顕微鏡で採用されている共振
位相検知法が採用さている。
【００４２】パッチクランプ測定部５００は、（i）ガ
ラスマイクロピペット電極で検出された生体電気信号で
ある生体膜を横切る電流信号を入力し、電圧信号に変換
し、増幅して出力する前置増幅器５２０と、（ii）解析
制御部６００からの指示により、シール抵抗の測定、膜
電位固定、または膜電流固定に関する指令信号を出力す
る電気信号発生装置５３０と、（iii）前置増幅器５２
０から出力された電圧信号を入力し、増幅し、処理して
解析制御部へ向けて出力するとともに、電気信号発生装
置から出力された指令信号を入力し、演算処理して前置
増幅器５２０へ向けて出力する主増幅器５４０とを備え
る。
ラスマイクロピペット電極で検出された生体電気信号で
ある生体膜を横切る電流信号を入力し、電圧信号に変換
し、増幅して出力する前置増幅器５２０と、（ii）解析
制御部６００からの指示により、シール抵抗の測定、膜
電位固定、または膜電流固定に関する指令信号を出力す
る電気信号発生装置５３０と、（iii）前置増幅器５２
０から出力された電圧信号を入力し、増幅し、処理して
解析制御部へ向けて出力するとともに、電気信号発生装
置から出力された指令信号を入力し、演算処理して前置
増幅器５２０へ向けて出力する主増幅器５４０とを備え
る。
【００４３】本実施形態の電気生理特性測定装置では、
まず、光学顕微鏡部１００で試料９００の広域像を得
る。こうして得られる試料９００の広域像に基づいて、
ガラスマイクロピペット電極２００を形態観察の対象で
ある細胞などの生体試料９００上の位置に移動する。引
き続き、ガラスマイクロピペット電極２００の先端を試
料表面の近接場領域である初期位置まで接近させる。ガ
ラスマイクロピペット電極２００の近接場領域への移動
にあたっては、ノンコンタクト走査型顕微鏡モードまた
はシィアフォースノンコンタクト走査型顕微鏡モードな
どの方式を好適に使用できる。
まず、光学顕微鏡部１００で試料９００の広域像を得
る。こうして得られる試料９００の広域像に基づいて、
ガラスマイクロピペット電極２００を形態観察の対象で
ある細胞などの生体試料９００上の位置に移動する。引
き続き、ガラスマイクロピペット電極２００の先端を試
料表面の近接場領域である初期位置まで接近させる。ガ
ラスマイクロピペット電極２００の近接場領域への移動
にあたっては、ノンコンタクト走査型顕微鏡モードまた
はシィアフォースノンコンタクト走査型顕微鏡モードな
どの方式を好適に使用できる。
【００４４】こうして、試料の近接場顕微観察による形
態観察にあたっての幾何学的準備が完了し、形態観察を
開始する（図３参照）。
態観察にあたっての幾何学的準備が完了し、形態観察を
開始する（図３参照）。
【００４５】まず、光照射部３１０が発生した照射光を
初期位置に設定されたガラスマイクロピペット電極２０
０を介して照射する。ここで、ガラスマイクロピペット
電極２００を介して試料に照射される照射光は非放射光
であるエバネセント光であり、結像のためのレンズなど
を用いないので、レンズの開口による回折の制限を受け
ず、位置分解能がガラスマイクロピペット電極２００の
先端の開口径のみで決定される。この結果、ガラスマイ
クロピペット電極の先端の径を数１００ｎｍ程度とし、
ガラスマイクロピペット電極と試料との間を近接場領域
となる数１００ｎｍ以下とすれば、照射光の波長の数分
の１〜数１０分の１の分解能で、試料９００の微細な形
状や構造、あるいは微小領域における光学的な特性が撮
像部３２０で撮像され、観察できる。こうして観察され
る試料の局所像は解析制御部６００に通知される。
初期位置に設定されたガラスマイクロピペット電極２０
０を介して照射する。ここで、ガラスマイクロピペット
電極２００を介して試料に照射される照射光は非放射光
であるエバネセント光であり、結像のためのレンズなど
を用いないので、レンズの開口による回折の制限を受け
ず、位置分解能がガラスマイクロピペット電極２００の
先端の開口径のみで決定される。この結果、ガラスマイ
クロピペット電極の先端の径を数１００ｎｍ程度とし、
ガラスマイクロピペット電極と試料との間を近接場領域
となる数１００ｎｍ以下とすれば、照射光の波長の数分
の１〜数１０分の１の分解能で、試料９００の微細な形
状や構造、あるいは微小領域における光学的な特性が撮
像部３２０で撮像され、観察できる。こうして観察され
る試料の局所像は解析制御部６００に通知される。
【００４６】解析制御部６００は、走査型近接場光学顕
微鏡部２００から通知された試料９００の局所像情報を
収集し、初期位置情報とともに格納する。
微鏡部２００から通知された試料９００の局所像情報を
収集し、初期位置情報とともに格納する。
【００４７】次に、解析制御部６００は、走査型近接場
光学顕微鏡部３００に走査を指示する。そして、走査位
置ごとに、上記と同様にして、試料９００の局所像情報
を収集し、走査位置情報とともに格納する。
光学顕微鏡部３００に走査を指示する。そして、走査位
置ごとに、上記と同様にして、試料９００の局所像情報
を収集し、走査位置情報とともに格納する。
【００４８】走査にあたって、近接場領域内での走査を
確保するためには、コンスタントハイトモード制御、ノ
ンコンタクト走査型顕微鏡モード制御、またはシィアフ
ォースノンコンタクト走査型顕微鏡モード制御などの方
式を好適に使用できる。
確保するためには、コンスタントハイトモード制御、ノ
ンコンタクト走査型顕微鏡モード制御、またはシィアフ
ォースノンコンタクト走査型顕微鏡モード制御などの方
式を好適に使用できる。
【００４９】走査、情報収集、および情報格納の完了
後、解析制御部６００は格納情報に基づいて、解析制御
部６００は、試料の走査領域全体の光学像情報を解析
し、顕微観察像を再構成して表示や記録などを行う。こ
の結果、通常の光学顕微鏡による形態観察に比べて、よ
り高い空間分解能で試料９００の形態の観察ができる。
後、解析制御部６００は格納情報に基づいて、解析制御
部６００は、試料の走査領域全体の光学像情報を解析
し、顕微観察像を再構成して表示や記録などを行う。こ
の結果、通常の光学顕微鏡による形態観察に比べて、よ
り高い空間分解能で試料９００の形態の観察ができる。
【００５０】また、照射光の波長を変化させて各波長ご
とに、上記と同様に、走査、情報収集、および情報格納
を行い、試料９００の走査領域全体の光学像情報を解析
し、顕微観察像を再構成して表示や記録などを行う。こ
の結果、照射光の波長に応じた多元的な試料の観察がで
きる。
とに、上記と同様に、走査、情報収集、および情報格納
を行い、試料９００の走査領域全体の光学像情報を解析
し、顕微観察像を再構成して表示や記録などを行う。こ
の結果、照射光の波長に応じた多元的な試料の観察がで
きる。
【００５１】次に、上記の顕微観察像に基づいて、ガラ
スマイクロピペット電極２００を近接場顕微鏡部２００
の走査手段を用いて電気生理測定点の上方に移動する。
スマイクロピペット電極２００を近接場顕微鏡部２００
の走査手段を用いて電気生理測定点の上方に移動する。
【００５２】次いで、電極高さ設定部４００を用いて、
ガラスマイクロピペット電極２００を試料表面に接近さ
せる。また、これと同時に、ガラスマイクロピペット電
極２００を通して電圧を印加し、生じる電流をモニタす
る。
ガラスマイクロピペット電極２００を試料表面に接近さ
せる。また、これと同時に、ガラスマイクロピペット電
極２００を通して電圧を印加し、生じる電流をモニタす
る。
【００５３】そして、電極高さ設定部で２００ｎｍ以内
に接近したと判断されたこと、および、モニタ電流が充
分小さくなったと判断されたことを条件として、接近操
作を止める。
に接近したと判断されたこと、および、モニタ電流が充
分小さくなったと判断されたことを条件として、接近操
作を止める。
【００５４】この結果、試料９００の表面からの距離が
２００ｎｍ以下であり、かつ、試料を傷つけない高さに
ガラスマイクロピペット電極２００の先端が確実に設定
される（図４参照）。
２００ｎｍ以下であり、かつ、試料を傷つけない高さに
ガラスマイクロピペット電極２００の先端が確実に設定
される（図４参照）。
【００５５】次に、電極２００内を陰圧にして、試料９
００の膜を電極内に引き込み、ＧΩシールを形成させる
（図５参照）。このとき、ＧΩシールの形成までの過程
を電気的にモニタするため、シール抵抗値の測定、膜電
位固定および膜電流固定するための指令パルスを主増幅
器５４０を介して前置増幅器５２０に出力するために、
解析制御部６００の制御を受けたパルスジェネレータ５
３０を用いる。なお、ガラスマイクロピペット電極２０
０の外周には絶縁膜が形成されているので、ギガオーム
（ＧΩ）シールが確実に形成される。
００の膜を電極内に引き込み、ＧΩシールを形成させる
（図５参照）。このとき、ＧΩシールの形成までの過程
を電気的にモニタするため、シール抵抗値の測定、膜電
位固定および膜電流固定するための指令パルスを主増幅
器５４０を介して前置増幅器５２０に出力するために、
解析制御部６００の制御を受けたパルスジェネレータ５
３０を用いる。なお、ガラスマイクロピペット電極２０
０の外周には絶縁膜が形成されているので、ギガオーム
（ＧΩ）シールが確実に形成される。
【００５６】こうして、試料９００の電気生理学的観察
にあたっての幾何学的準備が完了する。そして、試料９
００中の単一の生細胞あるいは生体膜の微小な領域から
生体膜を横切る電流をマイクロピペット電極２００から
導出してパッチクランプ測定部で測定し、測定結果が解
析制御部６００へ通知される。なお、パッチ電極３１０
で導出された電流・電位は、前置増幅器５２０内の電流
電圧変換器により電圧信号に変換されるが、微小信号な
ので増幅、演算、電流雑音の低減などの処理を行う主増
幅器５４０を介して解析制御部６００に通知される。
にあたっての幾何学的準備が完了する。そして、試料９
００中の単一の生細胞あるいは生体膜の微小な領域から
生体膜を横切る電流をマイクロピペット電極２００から
導出してパッチクランプ測定部で測定し、測定結果が解
析制御部６００へ通知される。なお、パッチ電極３１０
で導出された電流・電位は、前置増幅器５２０内の電流
電圧変換器により電圧信号に変換されるが、微小信号な
ので増幅、演算、電流雑音の低減などの処理を行う主増
幅器５４０を介して解析制御部６００に通知される。
【００５７】解析制御部６００では、パッチクランプ測
定部５００から通知された電気生理学的情報を収集し、
記録し、解析する。
定部５００から通知された電気生理学的情報を収集し、
記録し、解析する。
【００５８】また、光照射部３１０が発生した照射光を
ガラスマイクロピペット電極２００を介して照射する
と、光の照射によって発生した試料内の電気生理学的変
化に伴う生体膜を横切る電流は、ガラスマイクロピペッ
ト電極２００から導出されてパッチクランプ測定部で測
定され、測定結果が解析制御部６００に通知される（図
６参照）。
ガラスマイクロピペット電極２００を介して照射する
と、光の照射によって発生した試料内の電気生理学的変
化に伴う生体膜を横切る電流は、ガラスマイクロピペッ
ト電極２００から導出されてパッチクランプ測定部で測
定され、測定結果が解析制御部６００に通知される（図
６参照）。
【００５９】解析制御部６００は、走査型近接場光学顕
微鏡部２００から通知された試料９００の局所像情報に
加えて、パッチクランプ測定部５００から通知された電
気生理学的特性情報を収集し、電気生理測定点情報、照
射光情報（照射光強度）とともに格納する。
微鏡部２００から通知された試料９００の局所像情報に
加えて、パッチクランプ測定部５００から通知された電
気生理学的特性情報を収集し、電気生理測定点情報、照
射光情報（照射光強度）とともに格納する。
【００６０】また、照射光の波長を変化させて各波長ご
とに、情報収集、および情報格納を行い、試料９００の
光照射位置に応じた電気生理学的特性情報を解析し、顕
微観察像と生体電気反応とを対応させて再構成して表示
や記録などを行う。この結果、照射光の波長に応じた多
元的な試料の観察ができる。
とに、情報収集、および情報格納を行い、試料９００の
光照射位置に応じた電気生理学的特性情報を解析し、顕
微観察像と生体電気反応とを対応させて再構成して表示
や記録などを行う。この結果、照射光の波長に応じた多
元的な試料の観察ができる。
【００６１】なお、本実施形態の装置を用いて、経時的
に情報収集することにより、照射光に対応して生じる試
料９００の電気生理学的特性の変化を経時的に観察する
こともできる。
に情報収集することにより、照射光に対応して生じる試
料９００の電気生理学的特性の変化を経時的に観察する
こともできる。
【００６２】
【発明の効果】以上、詳細に説明した通り、本発明の電
気生理特性測定装置によれば、走査型近接場光学顕微鏡
部によって光学的顕微鏡観察をし、走査型近接場光学顕
微鏡機能に必須の微小開口のガラスマイクロピペット電
極による微小領域への光照射によって生じる電気生理学
的変化をこのガラスマイクロピペット電極を介してパッ
チクランプ測定部で測定し、双方の情報を解析制御部で
統合するので、簡易な構成で、高い位置分解能で試料の
光学的態様と、光刺激位置による電気生理学的態様の変
化を観察することができる。
気生理特性測定装置によれば、走査型近接場光学顕微鏡
部によって光学的顕微鏡観察をし、走査型近接場光学顕
微鏡機能に必須の微小開口のガラスマイクロピペット電
極による微小領域への光照射によって生じる電気生理学
的変化をこのガラスマイクロピペット電極を介してパッ
チクランプ測定部で測定し、双方の情報を解析制御部で
統合するので、簡易な構成で、高い位置分解能で試料の
光学的態様と、光刺激位置による電気生理学的態様の変
化を観察することができる。
【図１】本発明の第１実施形態の電気生理特性測定装置
の構成図である。
の構成図である。
【図２】波長可変光照射部の構成図である。
【図３】近接場顕微観察時の試料付近の幾何学的配置の
説明図である。
説明図である。
【図４】ＧΩシール形成直前の試料付近の幾何学的配置
の説明図である。
の説明図である。
【図５】ＧΩシール形成後の試料付近の幾何学的配置の
説明図である。
説明図である。
【図６】電気生理特性測定時の試料付近の説明図であ
る。
る。
１００…光学顕微鏡部、２００…ガラスマイクロピペッ
ト電極、３００…走査型近接場光学顕微鏡部、３１０…
波長可変光照射部、３１１…波長可変レーザ、３１２…
白色光源、３１３…分光器、３１４…スリット、４００
…電極高さ設定部、５００…パッチクランプ測定部、５
１０…マイクロマニピュレータ、５２０…前置増幅器、
５３０…パルスジェネレータ、５４０…主増幅器、６０
０…解析制御部。
ト電極、３００…走査型近接場光学顕微鏡部、３１０…
波長可変光照射部、３１１…波長可変レーザ、３１２…
白色光源、３１３…分光器、３１４…スリット、４００
…電極高さ設定部、５００…パッチクランプ測定部、５
１０…マイクロマニピュレータ、５２０…前置増幅器、
５３０…パルスジェネレータ、５４０…主増幅器、６０
０…解析制御部。
Claims (6)
- 【請求項１】 試料の広域像を観察する光学顕微鏡部
と、 先端に微小開口を有し、外周部に光反射膜および絶縁膜
が形成されるとともに、内部空間に電極液を収納し、後
端の開口から前記微小開口の径より長い波長の光が導入
されると、前記微小開口からエバネッセント光を出力す
るガラスマイクロピペット電極と、 照射光を発生する光照射部を備え、前記ガラスマイクロ
ピペット電極を移動しながら、前記ガラスマイクロピペ
ット電極を介してエバネッセント光を試料に照射し、前
記試料の局所像を観察する走査型近接場光学顕微鏡部
と、 前記ガラスマイクロピペット電極と前記試料との間の距
離を２００ｎｍ以下に近接させる電極高さ設定手段と、 前記ガラスマイクロピペット電極を通して電圧を印加し
て、その結果生じた電流を検出するとともに、前記試料
中の単一の生細胞あるいは生体膜の微小な領域から生体
膜を横切る電流を前記電極液を介して導出して記録する
パッチクランプ測定部と、 前記走査型近接場光学顕微鏡部から得られた前記試料の
局所像と、前記走査型近接場光学顕微鏡部の光の照射位
置ごとに前記パッチクランプ測定部から得られた電気生
理学的情報とを収集し、記録し、解析するとともに、装
置全体を制御する解析制御部と、 を備えることを特徴とする電気生理特性測定装置。 - 【請求項２】 前記パッチクランプ測定部は、 前記ガラスマイクロピペット電極で検出された生体電気
信号である前記生体膜を横切る電流信号を入力し、電圧
信号に変換し、増幅して出力する前置増幅器と、 前記解析制御部からの指示により、シール抵抗の測定、
膜電位固定、または膜電流固定に関する指令信号を出力
する電気信号発生装置と、 前記前置増幅器から出力された電圧信号を入力し、増幅
し、処理して前記解析制御部へ向けて出力するととも
に、前記電気信号発生装置から出力された前記指令信号
を入力し、演算処理して前記前置増幅器へ向けて出力す
る主増幅器と、 を備えることを特徴とする請求項１記載の電気生理特性
測定装置。 - 【請求項３】 前記電極高さ設定手段は共振位相検知法
を用いる、ことを特徴とする請求項１記載の電気生理特
性測定装置。 - 【請求項４】 前記光学顕微鏡部は、ホフマンモジュレ
ーションシステム、位相差顕微鏡、および微分干渉顕微
鏡のいずれか１つを備える、ことを特徴とする請求項１
記載の電気生理特性測定装置。 - 【請求項５】 前記光照射部は波長可変レーザを備え
る、ことを特徴とする請求項１記載の電気生理特性測定
装置。 - 【請求項６】 前記光照射部は、 白色光源と、 前記白色光源から出力された白色光を分光出力する分光
器と、 前記分光器から出力された光の全波長成分の中から特定
の波長の光を選択して出力する光選択器と、 を備えることを特徴とする請求項１記載の電気生理特性
測定装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8020125A JPH09211010A (ja) | 1996-02-06 | 1996-02-06 | 電気生理特性測定装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8020125A JPH09211010A (ja) | 1996-02-06 | 1996-02-06 | 電気生理特性測定装置 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH09211010A true JPH09211010A (ja) | 1997-08-15 |
Family
ID=12018409
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8020125A Pending JPH09211010A (ja) | 1996-02-06 | 1996-02-06 | 電気生理特性測定装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH09211010A (ja) |
Cited By (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2000028536A1 (en) * | 1998-11-09 | 2000-05-18 | Seiko Instruments Inc. | Near-field optical head and production method thereof |
| EP0937962A3 (de) * | 1998-02-18 | 2000-05-24 | CREAVIS Gesellschaft für Technologie und Innovation mbH | Verfahren und Vorrichtung für mikromechanische Untersuchungen der Adhäsion von Mikroteilchen an Oberflächen |
| WO2001071349A1 (en) * | 2000-03-21 | 2001-09-27 | Xention Discovery Limited | Improved interface patch clamping |
| WO2002077627A3 (en) * | 2001-03-22 | 2002-12-12 | Imp College Innovations Ltd | Patch-clamping and its use in analysing subcellular features |
| WO2003044512A1 (en) * | 2001-11-19 | 2003-05-30 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Measurement device for measuring electric signal emitted by biological sample |
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