JPH02110346A - 形態及び機能画像化装置 - Google Patents

形態及び機能画像化装置

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JPH02110346A
JPH02110346A JP26278188A JP26278188A JPH02110346A JP H02110346 A JPH02110346 A JP H02110346A JP 26278188 A JP26278188 A JP 26278188A JP 26278188 A JP26278188 A JP 26278188A JP H02110346 A JPH02110346 A JP H02110346A
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    • G01N21/00Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/17Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
    • G01N21/25Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands
    • G01N21/31Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry
    • G01N21/39Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry using tunable lasers

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  • Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 (産業上の利用分野) 本発明は、例えば生物試料の形態情報と機能情報とを計
測して可視画像化する装置に関するものであり、特に、
光散乱体内部の形態情報と機能情報を画像化する装置に
関するものである。
(従来の技術) 対象とする物体の形態をamするために、従来から種々
のエネルギーの電磁波が用いられている。
そして、いずれの電磁波においても、反射波あるいは透
過波が利用されている。物体の内部状態をw4察するに
は、透過波を利用し、試料が透明体であれば、顕微鏡で
焦点位置をずらすことにより、ある程度内部状態をI!
!Qすることが可能であるが、光散乱体や光不透過体で
は、超音波やX線が用いられる。しかし、これらの観察
法においては、内部構造の陰影像が得られるのみである
が、各種断層撮影法の創案によって、初めて特定位置の
内部構造の観察が行えるようになった。しかしながら、
これらはいずれも形態をwA察するのみで、内部の機能
を観察するためには全く無力である。唯一内部機能をa
mできるものは、放射性同位元素を核種としてモニター
するポジトロンCTである。しかし、ポジトロンCTは
、小物体の内部機能11祭には全く不向きである。
一方、近年、生体機能の解明において、細胞の集合体と
して1つの系を形成している組織の、組織系として働い
ている状態での機能を計測し、病態メカニズム、生命活
動の解析を行うことが求められている。
(発明が解決しようとする課題) 本発明の目的は、これら従来のものの欠点をなくし、試
料の形態と機能状態、特に光散乱体の内部形態と内部機
能を可視化して観察することが可能な形態及び機能画像
化装地を提供することである。
(課題を解決するための手段) 本発明は、上記の従来技術の問題点に着目してなされた
もので、本発明の形態及び機能画像化装地は、2以上の
異なる波長のレーザー光について。
光散乱体試料の各点から散乱される透過光のみを選択的
に取り出すように構成し、取り出された散乱透過光を光
ヘテロダイン検波出力によって測定し、計測対象物質に
無吸収な又は吸収の少ない波長の光での光ヘテロダイン
検波出力と測定点の位置データーとから試料内部の形態
を画像化し、−方、計測対象物質に無吸収な又は吸収の
少ない波長の光での光ヘテロダイン検波出力と吸収波長
光での光ヘテロダイン検波出力との差をとり、この差分
データーと測定点の位置データーとから試料内部の機能
を画像化するように構成したものである。
(作用) レーザー装置から射出したレーザー光を二分し、一方の
光の周波数をωからΔωだけ偏移させ、いずれか一方の
光(周波数ω又はω+Δω)をレンズを通して試料に収
束して照射し、光散乱試料を透過した散乱光をレンズに
よって集光して、収束面に配置した開口(ピンホール)
を通過させ、この開口によって視野をレンズの開口径で
決まる回折限界まで制限し、その透過光と他方の光(周
波数ω+Δω又はω)とを混合して光電検出器により検
出する。開口によって空間コヒーレンスが高められた試
料からの透過散乱信号光は、収束照射点の試料の状態に
応じて振幅変調を受けており、他方の光(局発参照光)
とは周波数Δωだけ異なるため、光電検出器の出力は、
信号光と局発参照光とを加えて自乗したものとなり、こ
れは直流成分に周波数Δωの交流成分が乗ったものとな
る(光ヘテロダイン検波)。周波数Δωの成分のみを電
気的フィルターにより選別検出することにより、信号光
を光電検出器の量子限界感度で検出できるので、信号光
の変化を極めて高感度で検出できる。そして、透過散乱
光は、開口(ピンホール)によって回折限界視野まで制
限されるので、収束照射点の周囲からのバックグラウン
ド散乱光がノイズ光として入っておらず、高精度、高解
像度で試料内部の特定点の情報を検出することができる
試料を走査するか又は照射光を走査することによって、
この検出を試料の各点について行い、検出の時の試料の
照射位置と光ヘテロダイン検波出力とにより、CRT等
の出力画面上に試料を画像化することができる。
上記のようにして、光散乱試料内の計測対象物質に吸収
されない波長λ、と吸収のある波長λ2について、それ
ぞれの画像データーを同時に又は時間的にずらして(順
次)収集し、λ1についてのデーターによって画像化を
行うことで、光散乱体内部の形態が観察できる。また、
試料の各位置のλ1についてのデータからλ2について
のデーターを減算して画像化することで、位置情報を保
持した計測対象物質の波長λ2の吸収画像、すなわち、
計測対象物質の濃度分布に対応した画像が得られる。こ
のような画像化を異なる3以上の波長について行えば、
より精密な計測が可能であるとともに、複数種の計測対
象物質の濃度分布を求めることができる。また、このよ
うな操作をビデオレートの実時間単位(1/30sec
)で行うことによって、計測対象物質の変化状態を連続
的な画像として観察可能となる。さらに、照射位置の走
査を試料の奥行方向にも行えば、計測対象物質の3次元
像観察が可能である。
(実施例) 次に、添付の図面に基づいて本発明の詳細な説明する。
第1図はこの発明に係る形態及び機能画像化装地の実施
例の光路図である。
この装置は、レーザー装W11.レーザー装fi!lよ
り射出された。試料中の計測対象物質により吸収されな
いレーザー光であるLlを90°偏向させるミラー2、
ミラー2から反射されたレーザー光を透過光と90°反
射光に二分するビームスプリッタ−3,二分された一方
のレーザー光である透過光L1^を周波数変換する周波
数変換器4、周波数変換器4によって周波数変換された
レーザー光り、Cを対物レンズ6へ90°反射するハー
フミラ−5、周波数変換されたレーザー光L1cを試料
台16上の試料7に収束して照射する対物レンズ6、試
料7により散乱され透過した光を再結像させるレンズ8
、レンズ8による結像点、すなわち試料7中のレーザー
光L1cの収束点と共役な位置に配置されたピンホール
9、ビームスプリッタ−3の反射光である二分された他
方のレーザー光L16を90″偏向するミラー11.二
分された他方のレーザー光Lil5を収束するレンズ1
2、ピンホール9によってレンズ8の回折限界視野まで
制限された試料7中の収束点からの散乱光L□Dとレン
ズ12よって収束され再び発散光になったレーザー光L
 x Bとを混合するビームスプリッタ−10、混合さ
れたレーザー光を電気信号に変換する光電検出器13、
光電検出器13の出力を増幅する増幅器14、増幅器1
4の出力に接続された選択レベル測定器15、試料台1
6を走査駆動する移動用モーター17.移動用モーター
17を駆動するドライバー18、選択レベル測定器15
とドライバー18の出力が入力するCRT19、選択レ
ベル測定115とドライバー18の画像データーを蓄積
するフレームメモリー20、フレームメモリー20の容
積画像データーをモニターするモニター21、実視野観
察用のランプ22.ランプ22からの照明光を集光する
コンデンサーレンズ23、コンデンサーレンズ23から
の照明光を試料7に向けて反射するハーフミラ−24、
試料7からの反射11!察光を偏向するプリズム25、
及び、接眼レンズ26からなっている。
この形態及び機能画像化装地においては、レーザー族Y
ilより射出されたレーザー光LL(波長λ1、周波数
ω1)は、ミラー2によりビームスプリッタ−3に導か
れ、このビームスプリッタ−3で透過光L□Aと反射光
L1Bの光に二分される。二分されたレーザー光り、^
は周波数変換器4により周波数ω、+Δω、のレーザー
光し工。に変換され、ハーフミラ−5により対物レンズ
6に導かれ、試料7に収束照射される。試料7により散
乱され透過した光LtDは、レンズ8によって試料7中
の収束点と共役な位置にあるピンホール9の開口に収束
され、この開口(ピンホール)によって、散乱透過光の
視野はレンズ8の回折限界まで制限される。開口を通過
して球面波となった光り、Dは、ビームスプリッタ−1
0により、ビームスプリッタ−3で二分されミラー11
を経てレンズ12により収束され、球面波となった局発
参照光L1Bと同心の関係で混合され、光電検出器13
により検出される。
光電検出器13からの出力は、増幅器14と選択レベル
測定器15とによってレーザー光し工。とレーザー光L
11Sの差周波数Δω1成分のみが選別出力される。一
方、試料台16は移動用モーター17によりX−Y−Z
の三軸方向に駆動され、その制御はドライバー18によ
り行われる。ドライバー18からの位置信号は、選択レ
ベル測定器15からの出力とともに演算装置119に導
かれる。
この選択レベル測定器15とドライバー18からの画像
データーはフレームメモリー20上に蓄積される。
次に、レーザー装置1より射出されるレーザー光を、レ
ーザー光L1とは別波長の、試料中の計測対象物質によ
り吸収されるレーザー光La(波長λ1、周波数ω2)
に変更し、このレーザー光L2により、前述と同様にレ
ーザー光L z eによる散乱透過光L z Dと局発
参照光L t Bの光ヘテロダイン検波出力を取得し、
この出力とドライバー18からの位置信号からなる画像
データーはフレームメモリー20上に蓄積される。
次に、フレームメモリー20上に蓄積されたレーザー光
L□による光ヘテロダイン検波出力と位置データーとに
より、試料内部の形態が画像化されてモニター21上に
表示され、さらに、レーザー光L1 による光ヘテロダ
イン検波出力とレーザー光L2 による光ヘテロダイン
検波出力との差分と位置データーとにより、計測対象物
質の分布画像がモニター21上に表示される。
また、実視野ii察は、ランプ22、コンデンサーレン
ズ23.ハーフミラ−24による照明により、対物レン
ズ6、プリズム24、接眼レンズ26から構成された顕
微鏡によって行われる。
第2図はこの発明に係る形態及び機能画像化装地の他の
実施例の光路図である。上述の第1の実施例のものがレ
ーザー光の波長を順次時系列で(時間的にずらして)変
えているのに対して、この実施例では、複数の波長のレ
ーザー光を同時に用い、計測対象物質の実時間変化を計
測可能にする装置となっている。
この装置は、第1のレーザー装置31、第1のレーザー
装置!i31より射出されたレーザー光L1を90°偏
向させるミラー33、ミラー33から反射されたレーザ
ー光を透過光と90°反射光に二分するビームスプリッ
タ−34、二分された透過光である一方のレーザー光し
工^を周波数変換する第1の周波数変換器35、第1の
周波数変換器35によって周波数変換されたレーザー光
L1cを90”反射するミラー39.ミラー39から反
射されたレーザー光り、cを反射するダイクロイックミ
ラー40、ダイクロイックミラー40によって反射され
たレーザー光L I Cを対物レンズ42へ90°反射
するハーフミラ−41、周波数変換されたレーザー光り
、Cを試料台57上の試料43へ収束して照射する対物
レンズ42.試料43により散乱され透過した光を再結
像させるレンズ44、レンズ44の結像点であって試料
43中のレーザー光L I Cの収束点と共役な位置に
配置された開口板45.ビームスプリッタ−34の反射
光である二分された他方のレーザー光L1Bを90°偏
向するミラー46、二分された他方のレーザー光し工6
をダイクロイックミラー47を経て収束するレンズ48
、開口板45によってレンズ44の回折限界視野まで制
限された試料43中の収束点からの散乱透過光L工0と
レンズ48よって収束され再び発散光になったレーザー
光LzBとを混合するビームスプリッタ−49,第2の
レーザー装置32、第2のレーザー装置32より射出さ
れたレーザー光L2 を90″偏向させるミラー36、
ミラー36から反射されたレーザー光を透過光と90°
反射光に二分するビームスプリッタ−37,二分された
透過光である一方のレーザー光L 2 Aを周波数変換
する第2の周波数変換器38.第2の周波数変換器38
によって周波数変換されたレーザー光L2cをレーザー
光L x Cと合成する前記ダイクロイックミラー40
、二分された他方のレーザー光L28をレーザー光Lt
Bと合成する前記ダイクロイックミラー47、混合され
たレーザー光を電気信号に変換する第1の光電検出器5
0と第2の光電検出器51、第1の光電検出器50の出
力を増幅する第1の増幅器52、増幅器52の出力に接
続された第1の選択レベル測定器53、第2の光電検出
器51の出力を増幅する第2の増幅器54、増幅器54
の出力に接続された第2の選択レベル測定器55、第1
の選択レベル測定器53と第2の選択レベル測定器55
の出力の差をとる演算器56、試料台57を走査駆動す
る移動用モーター58、移動用モーター58を駆動する
ドライバー59、演算器56とドライバー59の出力が
入力するCRT60、実視野観察用のランプ61、ラン
プ61からの照明光を集光するコンデンサーレンズ62
、コンデンサーレンズ62からの照明光を試料43に向
けて反射するハーフミラ−63、試料43からの反射R
余光を偏向するプリズム64、及び、接眼レンズ65か
らなっている。
この形態及び機能画像化装地においては、レーザー装置
31より射出されたレーザー光L1(波長111周波数
ω1)は、第1図の実施例と同様に、参照光L1Bと周
波数ω、+Δω1のL t Cの光に二分される。第2
のレーザー装置32より射出されたレーザー光L!(波
長λ2、周波数ω2)は。
Llと同様に、 LlBと周波数ω2+Δω2のL2c
の光に二分される。二分されたLlCとり、Cはダイク
ロッイックミラー40により合成され、ハーフミラ−4
1を経て、対物レンズ42により試料43に収束照射さ
れる。試料43により散乱され透過した光り、D+L、
、は、レンズ44によって試料43中の収束点と共役な
位置にある開口板45の開口に収束され、この開口によ
って散乱透過光はレンズ44の回折限界視野まで制限さ
れる。また。
レーザー光L11SとL2Bはダイクロツクミラー47
により合成され、レンズ48により収束されて球面波と
なって1局発参照光L1n+ 17Bとなる。ビームス
プリッタ−49によって、開口板45の開口を通過して
球面波となった光LiD+L、Dは、上記球面波局発参
照光LiB+L、Bと同心の関係で混合され、第1及び
第2の光電検出器50.51に導びかれる。光電検出器
50.51は、それぞれ測定周波数Δω、及びΔω2に
設定される。第1の増幅器52と第1の選択レベル測定
器53、及び、第2の増幅器54と第2の選択レベル測
定器55により、周波数Δω□とΔω2の出力を演算器
56に出力し、演算器56からはΔω1の検出出力。
およびΔω□の検出出力とΔω2の検出出力の差の出力
がCRT60に出力される。一方、試料台57は移動モ
ニター58によりX−Y−Zの三軸方向に駆動され、そ
の制御はドライバー59により行われる。ドライバー5
9からの位置信号は、演算器56からの出力とともに、
CRT60に導かれ、CRT上に画像表示される。ここ
で、試料に対して吸収のないL工のデーターで画像を構
成すると、光散乱体試料の内部形態がIiI!察できる
ことになる。また、試料に対して吸収のない波長である
Llのデーターから試料中の測定対象物に吸収される波
長L2のデーターの差分をとって画像化すると、CRT
上には光散乱体試料内部の測定対象物の分布画像が示さ
れる。さらに、一画面を1/30secで作成すれば、
n定対象物の実時間での変化を画像としてIlt察でき
ることになる。
次に、第3図に第1図の機能画像化装地の変形例を示す
。第1図のものと異なる点は、第1図のものが試料7の
照射点から発する球面波をレンズ8を用いて開口板9の
ピンホールに集光し、このピンホールからの球面波とレ
ンズ12からの球面波とを光電検出器13の位置で干渉
させて光ヘテロダイン検波するのに対して、この実施例
においては、開口板9のピンホールから発する球面波を
平面波に変換するようにレンズ8−1を配置し、他方、
レンズ12からの球面波を平面波に変換するようにレン
ズ12−2を配置して、平面波同士を干渉させるように
している。
第2図の同様な変形例を第4図に示す。この場合には、
開口板45のピンホールから発する球面波を平面波に変
換するようにレンズ44−1を配置し、他方、レンズ4
8からの球面波を平面波に変換するようにレンズ48−
2を配置して、平面波同士を干渉させるようにしている
(発明の効果) この発明によると、上述したような構成により、光散乱
体試料の内部形態と試料内部の特定物質の有無や変化を
2次元あるいは3次元像として可視化でき、従来全<w
A測できなかった光散乱の多い生物組織や各種材料等の
内部形態及び機能を画像化してa測できる。したがって
、各種材料評価や生物組織の機能評価を非侵襲に行うこ
とが出来。
各分野に新しい計測、分析手法を提供しうるものである
【図面の簡単な説明】
第1図はこの発明に係る形態及び機能画像化装地の1実
施例の光路図、第2図はこの発明に係る形態及び機能画
像化装地の他の実施例の光路図、第3図は第1図の形態
及び機能画像化装地の変形例の光路図、第4図は第2図
の形態及び機能画像化装地の変形例の光路図である。 1:レーザー装置  2:ミラー  3:ビームスプリ
ッタ−4=周波数変換器  5:ハーフミラ−6:対物
レンズ  7:試料8.8−1:L/:/ズ  9:r
A口板  10:ビームスプリッタ−11=ミラー  
12.12−2=レンズ  13:光電検出器  14
:増幅器  15:選択レベル測定器  16:試料台
  17:移動用モーター  18ニドライパー  1
9:演算器  20:フレームメモリー  21:モニ
ター  22二ランプ  23:コンデンサーレンズ 
 24:ハーフミラ−25ニブリズム  26:接眼レ
ンズ  31:第1のレーザー装置  32:第2のレ
ーザー装置  33:ミラー  34:ビームスプリッ
タ−35=第1の周波数変換器  36:ミラー  3
7:ビームスプリッタ−38=第2の周波数変換器  
39:ミラー  40:ダイクロイックミラ−41:ハ
ーフミラ−42:対物レンズ  43:試料  44.
44−1=レンズ45:開口板  46:ミラー  4
7:ダイクロイックミラー  48.48−2:レンズ
  49:ビームスプリッタ−50:第1の光電検出器
  51:第2の先出ん検出器52:第1の増幅器  
53:第1の選択レベル測定器  54:第2の増幅器
  55:第2の選択レベル測定器  56:演算器 
 57:試料台  58:移動用モーター  59ニド
ライバー  60:CRT   61:ランプ  62
:コンデンサーレンズ  63:ハーフミラ−64ニブ
リズム  65:接眼レンズ 第 図 特許出顕人  新技術開発事業団 出願人代理人 弁理士 佐藤文男 第 図

Claims (5)

    【特許請求の範囲】
  1. (1)2以上の異なる波長のレーザー光について、光散
    乱体試料の各点から散乱された透過光のみを選択的に取
    り出すように構成した光学系により取り出された散乱透
    過光を、光ヘテロダイン検波出力によつて測定し、計測
    対象物質に無吸収な又は吸収の少ない波長の光での光ヘ
    テロダイン検波出力と測定点の位置データーとから試料
    内部の形態を画像化し、かつ、計測対象物質に吸収され
    ない又は吸収の少ない波長の光での光ヘテロダイン検波
    出力と計測対象物質に吸収される波長の光での光ヘテロ
    ダイン検波出力との差をとり、この差分データーと測定
    点の位置データーとから試料内部の計測対象物質分布を
    画像化するように構成したことを特徴とする形態及び機
    能画像化装置。
  2. (2)時間的にレーザーの波長を変化させて、各波長の
    光についての画像データーを記憶し、記憶された無吸収
    な又は吸収の少ない波長の光についての画像データーか
    ら吸収波長光についての画像データーの差をとって試料
    内部の機能を画像化するように構成したことを特徴とす
    る請求項1記載の機能の画像化装地。
  3. (3)波長の異なる複数のレーザーを同時に用い、各波
    長についての光ヘテロダイン検波出力の差分データーか
    ら試料内部の機能を画像化するように構成したことを特
    徴とする請求項1記載の形態及び機能画像化装置。
  4. (4)測定試料を2次元走査することによって画像化す
    ることを特徴とする請求項1から3のいずれかに記載の
    機能画像化装置。
  5. (5)測定試料を3次元走査することによって画像化す
    ることを特徴とする請求項1から3のいずれかに記載の
    機能画像化装置。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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