JPH09224672A - 新規なｄｎａ結合タンパク質をコードするｄｎａ - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 ジャスモン酸を用いた遺伝子の発現制御を行
うために、ジャスモン酸により誘導されるＤＮＡ結合タ
ンパク質をコードする遺伝子を単離する。 【解決手段】 大豆の培養細胞にジャスモン酸処理を行
い、ジャスモン酸処理細胞と無処理の培養細胞から調製
したＲＮＡからｃＤＮＡを合成し、各々をゲル電気泳動
し、ジャスモン酸処理細胞由来のｃＤＮＡのみに認めら
れ、無処理の培養細胞由来のｃＤＮＡには認められない
バンドをゲルから抽出することによって、ＤＮＡ結合タ
ンパク質をコードしているＤＮＡを得る。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、新規なＤＮＡ結合
タンパク質遺伝子に関し、詳しくは、ジャスモン酸で特
異的に誘導されるシステイン−リッチなＤＮＡ結合タン
パク質遺伝子およびその利用に関する。

【０００２】

【従来の技術】ジャスモン酸は、ジャスミンの花から得
られるジャスミン油の香気成分の一つとして単離された
物質であり、ジャガイモの塊茎形成、果実の成熟、植物
の病原菌に対する抵抗反応、植物の成長阻害や葉の老化
促進、気孔開閉制御などの生理作用を有することが知ら
れている。また、ジャスモン酸によって発現が誘導され
る多くのタンパク質（jasmonate induced protein;JI
P）が見い出され、遺伝情報物質としても知られてお
り、ジャスモン酸を用いた遺伝子発現制御に関する研究
も進められている。

【０００３】上記のようなジャスモン酸によって誘導さ
れる遺伝子産物のなかには、プロテイナーゼインヒビタ
ー(Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87, 7713 (1990))、リ
ボゾーム不活性化タンパク質(Proc. Natl. Acad. Sci.
USA 91, 7012 (1994))、植物貯蔵タンパク質（vegetati
ve storage protein (Plant Sci. 62, 45 (1989))、リ
ポキシゲナーゼ(Plant Cell Physiol. 34, 1063 (199
3))、病原菌の攻撃に対する防御機構に関するタンパク
質(Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 44,
569 (1993))等のほか、植物の二次代謝産物(Proc. Nat
l. Acad. Sci. USA92, 12505 (1995))が存在することが
知られている。

【０００４】そこで、これらのジャスモン酸で誘導され
る遺伝子の発現を制御することができれば、病原菌に対
する防御物質を蓄積させたり、二次代謝産物の合成量を
増大もしくは減少させたりすることが可能となると考え
られる。

【０００５】ところで、遺伝子の発現調節には、プロモ
ーター領域に結合するＤＮＡ結合タンパク質が関与する
と考えられている。そこで遺伝子の発現を制御する１つ
の方法として、このようなＤＮＡ結合タンパク質遺伝子
を操作することが考えられる。すなわち、ＤＮＡ結合タ
ンパク質遺伝子の発現を自由にコントロールすることが
できれば、それによって調節されているさまざまな遺伝
子の発現をコントロールすることができ、いろいろな現
象を引き起こすことも可能になると思われる。

【０００６】従って、ジャスモン酸により発現が誘導さ
れるＤＮＡ結合タンパク質の遺伝子が単離されれば、そ
れを利用することによって、ジャスモン酸により誘導を
うける遺伝子の発現をコントロールすることが可能とな
り、病原菌に強い植物あるいは二次代謝産物の量を増大
・減少させた植物を作出することができると考えられ
る。

【０００７】しかしながら、ジャスモン酸によって誘導
されるＤＮＡ結合タンパク質及びその遺伝子は取得され
て知られておらず、そのような遺伝子を利用してジャス
モン酸により二次代謝産物の量を制御しようとする試み
も当然なされていなかった。

【０００８】

【発明が解決しようとする課題】本発明は上記観点から
なされたものであり、ジャスモン酸による遺伝子の発現
機構の解析、及びジャスモン酸を用いた遺伝子の発現制
御を課題とする。

【０００９】

【課題を解決するための手段】本発明者は、ジャスモン
酸処理した後に特異的に出現する遺伝子について研究を
行ったところ、そのような遺伝子の一つを単離すること
に成功し、その遺伝子がＤＮＡ結合タンパク質遺伝子で
あることを見出した。

【００１０】具体的には、大豆の培養細胞にジャスモン
酸処理を行い、ディファレンシャルディスプレイ法によ
りジャスモン酸で誘導される複数のｃＤＮＡクローンを
単離し、塩基配列を決定した。そして、これらの内の１
つは、ヒトのＭＨＣクラスII遺伝子のプロモーター領域
に保存されているX-boxに結合するシステイン−リッチ
ＤＮＡ結合タンパク質（Cystein-rich DNA-binding pro
tein；NF-X1）とホモロジーがあることを明らかにし、
本発明を完成するに至った。

【００１１】すなわち本発明は、配列表の配列番号２に
示すアミノ酸配列を有し、ＤＮＡ結合活性を実質的に害
さない限り１以上のアミノ酸の置換、欠失、挿入、付加
又は転移を有してもよいＤＮＡ結合タンパク質、及びこ
れをコードするＤＮＡである。ここで、「ＤＮＡ結合活
性」とは、具体的には、本発明のＤＮＡ結合タンパク質
が遺伝子のプロモーター領域に結合して、その遺伝子の
発現制御に関与する性質である。

【００１２】上記ＤＮＡとして具体的には、例えば配列
表の配列番号１に示す塩基配列において、塩基番号４５
０〜３４８０で表される塩基配列を有するＤＮＡが挙げ
られる。尚、上記塩基配列に限らず、遺伝暗号の縮重に
よる同一のアミノ酸配列をコードする異なった塩基配列
を有するＤＮＡも本発明のＤＮＡに含まれる。

【００１３】本発明はまた、配列番号１に示す塩基配列
（センス配列）に相補的な塩基配列（アンチセンス配
列）の少なくとも一部を有するＤＮＡを提供する。さら
に本発明は、上記センス配列またはアンチセンス配列を
有するＤＮＡで形質転換された植物体を提供する。

【００１４】本発明のＤＮＡ結合タンパク質は、ＮＦ−
Ｘ１タンパク質と相同性を有している。ＮＦ−Ｘ１タン
パク質は、ヒトのＭＨＣ（major histocompatibility c
omplex, MHC: 主要組織適合遺伝子複合体）クラスII遺
伝子のプロモーター領域に保存されているＸ−ｂｏｘに
結合するタンパク質であり、同遺伝子を制御するリプレ
ッサーとして働いていることが報告されている(J. Exp.
Med. 180, 1763 (1994))。尚、上記ＭＨＣクラスII遺
伝子は、初めには同種移植片生着の可否を支配する遺伝
子として同定され、ついで個体や系の免疫応答性の差を
決定する遺伝子であることが証明されており、動物の免
疫システムにおいて重要な役割を果たしていることが明
らかになっている。

【００１５】本発明のＤＮＡ結合タンパク質の遺伝子
は、ｃＤＮＡをプローブとして発現解析を行ったとこ
ろ、ジャスモン酸によって特異的に誘導されることが確
認された。

【００１６】ジャスモン酸は、二次代謝産物の生合成な
どさまざまな植物の反応に関与しており、多くの遺伝子
の発現を制御する情報伝達物質としての機能を有してい
る。本発明のＤＮＡ結合タンパク質は、これらのジャス
モン酸で誘導される遺伝子の発現を調節する因子である
と考えられる。したがって、それらの遺伝子の発現をコ
ントロールすることが可能となり、病原菌に対する防御
物質を蓄積させたり、二次代謝産物の合成量を増大、減
少させたりすることできると考えられる。具体的には、
本発明のＤＮＡを植物中で発現させたり、本発明のＤＮ
Ａのアンチセンス遺伝子を植物中で発現させることによ
って、病原菌に強い植物の作出、有用な二次代謝産物の
生産、有毒な二次代謝産物の生成の抑制などを行うこと
が可能であると期待される。

【００１７】本発明により、ジャスモン酸によって誘導
されるＤＮＡ結合タンパク質をコードするＤＮＡが得ら
れたので、この配列もしくはこの配列を基に作製したオ
リゴヌクレオチドをプローブに用いたハイブリダイゼー
ション法、あるいは前記オリゴヌクレオチドをプライマ
ーとするＰＣＲ（ポリメラーゼ・チェイン・リアクショ
ン）法によって、植物染色体ＤＮＡから、ＤＮＡ結合タ
ンパク質遺伝子を単離することができる。この遺伝子自
体も、ジャスモン酸によって発現誘導されるので、該遺
伝子産物のみならず、そのプロモーターも、植物体内に
おける遺伝子発現調節に利用できる。

【００１８】

【発明の実施の形態】次に、本発明の実施の形態を説明
する。本発明のＤＮＡは、塩基配列及びそれによってコ
ードするアミノ酸配列が明らとなったので、そのアミノ
酸配列に基づいて合成し、あるいは前記塩基配列に基づ
いて作製した１組のオリゴヌクレオチドをプライマーと
するＰＣＲ法、あるいは前記塩基配列をもとに作製した
オリゴヌクレオチドをプローブとするハイブリダイゼー
ション法により、植物の染色体ＤＮＡ、ｍＲＮＡ又はｃ
ＤＮＡから単離することができる。尚、染色体ＤＮＡか
らＰＣＲ法による増幅によって本発明のＤＮＡ結合タン
パク質の遺伝子を得た場合には、イントロンが含まれて
いる可能性が高いが、そのような１つあるいは２以上の
イントロンを内部に含むものも、本発明のＤＮＡに含ま
れる。

【００１９】上記の方法の中では、ＰＣＲ法が好ましい
が、本発明を完成するに際しては、本発明のＤＮＡはデ
ィファレンシャルディスプレイ法（Science 257, 967
(1992)）によるｃＤＮＡクローニングによって得られた
ものである。

【００２０】本発明のＤＮＡは、植物細胞、例えば大豆
の培養細胞からジャスモン酸によって特異的に誘導され
るｃＤＮＡを単離することによって得られる。具体的に
は、ジャスモン酸処理した培養細胞と無処理の培養細胞
からＲＮＡを抽出し、ディファレンシャルディスプレイ
法（Science 257, 967 (1992)）を行って、ジャスモン
酸処理した培養細胞のみから得られるｃＤＮＡを単離す
る。すなわち、ジャスモン酸処理細胞と無処理の培養細
胞から調製したＲＮＡからｃＤＮＡを合成し、各々をゲ
ル電気泳動し、ジャスモン酸処理細胞由来のｃＤＮＡの
みに認められ、無処理の培養細胞由来のｃＤＮＡには認
められないバンドをゲルから抽出することによって、ジ
ャスモン酸によって誘導される遺伝子由来のｃＤＮＡが
得られる。

【００２１】上記のようにして得られたｃＤＮＡの塩基
配列を決定し、コード領域全長を含んでいないと認めら
れる場合には、得られたｃＤＮＡをプローブとするコロ
ニーハイブリダイゼーション又はプラークハイブリダイ
ゼーションによって、植物細胞由来のｃＤＮＡライブラ
リーから、ハイブリダイゼーション陽性のクローンをス
クリーニングすればよい。

【００２２】ｃＤＮＡライブラリーは、植物組織からｍ
ＲＮＡを抽出し、逆転写酵素を用いてｃＤＮＡを合成
し、ポリメラーゼ反応によって２本鎖化したものをベク
ターに挿入し、大腸菌等に形質転換することにより作製
することができる。ｃＤＮＡクローニングキットが市販
されているのでこれらを使用してもよい。

【００２３】ライブラリーの作製に用いるベクターは、
多数種市販されており、これらを使用することができ
る。ＤＮＡの切断、連結、形質転換、遺伝子の塩基配列
の決定、ハイブリダイゼーション等一般の遺伝子組換え
に必要な方法は、各操作に使用する市販の酵素等に添付
されている説明書や、Molecular cloning (Maniatis T.
et al. Cold Spring Harbor Laboratory Press)に記載
されている。

【００２４】上記のようにしてハイブリダイゼーション
陽性のクローンが得られたら、その塩基配列決定を行
う。塩基配列の決定は、Maxam-Gilbert法あるいは、ダ
イデオキシ法により行う。ダイデオキシ法による塩基配
列の決定は、市販されているキットを用いて行うことが
でき、配列決定を自動的に行うオートシークエンサーを
使用してもよい。

【００２５】上記のようにして得られた本発明のＤＮＡ
の塩基配列を配列番号１に示す。また、この塩基配列か
ら推定されるアミノ酸配列を、配列番号２に示す。この
アミノ酸配列について、データベース解析を行ったとこ
ろ、このアミノ酸配列の１〜７７１までの部分は、ヒト
のＭＨＣクラスII遺伝子のプロモーター領域に保存され
ているＸ−ｂｏｘに結合するシステイン−リッチＤＮＡ
結合タンパク質（Cystein-rich ＤＮＡ-binding protei
n (NF-X1)）のアミノ酸配列の３４３〜１０８７までの
部分との間で３９．７％のホモロジーがあることがわか
り、ＤＮＡ結合タンパク質であることが示された。尚、
配列番号１において、塩基番号４５０〜４５２のＡＴＧ
を開始コドンとしてコード領域を示してあるが、これ
は、このコドンが開始コドンである可能性が最も高いこ
とを意味するものであり、上流にコード領域が続くこと
を完全に否定するものではない。ただし、NF-X1との相
同性から、配列番号２に示すアミノ酸配列は、ＤＮＡ結
合タンパクとしての活性を示すのに十分であると考えら
れる。

【００２６】上記ＤＮＡ結合タンパク質の遺伝子を、Ｓ
ＪＩＰ−２と命名した。この遺伝子の発現様式を調べる
ために、ノーザン解析を行った。すなわち、ジャスモン
酸処理した細胞と無処理の細胞からＲＮＡを抽出し、ア
ガロースゲル電気泳動を行い、ゲルからＲＮＡをメンブ
ランに移した。先に得られたｃＤＮＡをプローブとして
ハイブリダイゼーションを行ったところ、ＳＪＩＰ−２
は無処理の細胞では発現が見られず、ジャスモン酸処理
した細胞で特異的に発現していることが明らかとなっ
た。したがって、上記ＳＪＩＰ−２は、ジャスモン酸で
特異的に誘導されるＤＮＡ結合タンパク質の遺伝子であ
ることが明らかとなった。

【００２７】本発明により、ジャスモン酸で特異的に誘
導されるＤＮＡ結合タンパク質のｃＤＮＡが得られたの
で、この配列を用いたハイブリダイゼーションにより染
色体ＤＮＡライブラリーから、あるいはこのｃＤＮＡ配
列に基づいて作製したオリゴヌクレオチドをプライマー
とするＰＣＲ法により、染色体ＤＮＡからＳＪＩＰ−２
を単離することができる。

【００２８】本発明のＤＮＡ又はＳＪＩＰ−２の全部あ
るいは一部をカリフラワーモザイクウイルス由来のプロ
モーターなど植物で発現可能なプロモーターと結合し、
これを含む組換えＤＮＡを植物に導入して形質転換する
ことによって、ＤＮＡ結合タンパク質を高発現する植物
を作製することが出来る。また、本発明のＤＮＡ又はＳ
ＪＩＰ−２の全部又は一部を、逆方向にプロモーターに
結合したものを植物に導入し、いわゆるアンチセンスＲ
ＮＡを発現させることによって、ＤＮＡ結合タンパク質
ｍＲＮＡの翻訳を阻害し、発現量を抑制させることがで
きる。

【００２９】植物の形質転換は、パーティクルガン法、
エレクトロポレーション（電気的穿孔法）あるいはアグ
ロバクテリウムのＴｉプラスミドを利用する方法などに
よって、プロトプラストにＤＮＡを導入することによっ
て行うことができる。

【００３０】ＳＪＩＰ−２のセンス又はアンチセンス遺
伝子が導入されたクローンの選択は、形質転換細胞から
得られたカルスあるいは植物体の細胞を採り、サザンハ
イブリダイゼーション等の方法で確認することにより行
えばよい。また、再生後に、植物体の葉からＲＮＡを抽
出し、ＤＮＡ結合タンパク質遺伝子の発現をノーザン解
析等により調べる一方、ＳＪＩＰ−２が導入されている
ことをサザン解析等により確認することが好ましい。

【００３１】

【実施例】以下に本発明を実施例に基づいて詳細に説明
する。 ＜１＞ジャスモン酸処理により特異的に発現するｃＤＮ
Ａのディファレンシャルディスプレイ法による単離 大豆の培養細胞（SB-P cells、Jack M. Widholm教授よ
り提供された。Plant Physiol. 72, 426 (1983)参照）
を２０μＭのジャスモン酸メチルエステルおよび１００
μＭのシクロヘキシミドで３０分間処理し、デ・ノボの
タンパク質合成を阻害しつつジャスモン酸で誘導される
ｍＲＮＡを生成させた後、ジャスモン酸処理細胞および
無処理の細胞から、以下に示すようにしてグアニジンチ
オシアネート／ＣｓＣｌ法によりＲＮＡを抽出した。

【００３２】培養細胞それぞれ約１ｇづつを液体窒素中
で粉砕し、それを１４ｍｌの４Ｍグアニジンチオシアネ
ート、１１７ｍＭメルカプトエタノール、２５ｍＭ酢酸
ナトリウム溶液中に入れ、ポリトロンホモジナイザーで
完全に粉砕した。これを、１３，０００×ｇで２５分間
遠心したのち、上清を遠心チューブ内の１．５ｍｌの
５．７Ｍ ＣｓＣｌ溶液上に重層した。これを、１８
２，０００×ｇで２０時間遠心した後、上清を除いた。
沈殿をＴＥ緩衝液に溶かして全ＲＮＡとした。

【００３３】次に、それぞれのＲＮＡを用いて、Ｇｎｅ
Ｈｕｎｔｅｒ社のＲＮＡｍａｐキットを用いてディファ
レンシャルディスプレイ法を行った。ＰＣＲのプライマ
ーは配列番号３〜６に示す４種類のオリゴｄＴプライマ
ー（各配列において、ＶはＧ、Ａ、Ｃが混合されている
ことを示す）と、２０種類の１０マーのランダム配列を
有するプライマーを組み合わせて使用した。これらのプ
ライマーはいずれも前記キットに含まれている。

【００３４】上記のＲＮＡ ０．２μｇを鋳型として、
逆転写酵素（MMLV(Moloney Murine Leukemia Virus) re
verse transcriptase）を用いてｃＤＮＡを合成した
後、上記のプライマーを加え、９４℃ ３０秒、４０℃
２分、７２℃ ３０秒からなる増幅反応を４０サイクル
行った。尚、反応液に、[³⁵S]−ｄＡＴＰを加えて、増
幅産物に[³⁵S]−ｄＡＴＰを取り込ませた。

【００３５】それぞれの反応産物を、シークエンスゲル
（塩基配列決定用ゲル）を用いて電気泳動を行い、オー
トラジオグラムをとった後、ジャスモン酸処理に特異的
に出現するバンドを調べた。ジャスモン酸処理した細胞
由来のＲＮＡから増幅され、無処理の細胞由来のＲＮＡ
からは増幅されなかったＤＮＡのバンドをゲルから切り
出し、ＴＥ緩衝液中でボイリングしてゲル断片からＤＮ
Ａを抽出した。得られたＤＮＡをもとに、初めの反応と
同じプライマーを用いてＰＣＲを行い、ＤＮＡを増幅し
た。増幅されたＤＮＡは、ｐＣＲIIベクター(Invitroge
n社製)にサブクローニングし、以後の解析に用いた。

【００３６】＜２＞長鎖ｃＤＮＡの単離 大豆の培養細胞を５０μＭのジャスモン酸で１時間処理
し、グアニジンチオシアネート／ＣｓＣｌ法により全Ｒ
ＮＡを抽出した。得られた全ＲＮＡからｍＲＮＡ調製キ
ット（mRNA Purification Kit(Pharmacia社製)）を用い
てポリＡ⁺ＲＮＡを調製した。次いで、４μｇのポリＡ⁺
ＲＮＡからcＤＮＡ合成キット（cDNA Synthesis Kit (P
harmacia社製) ）を用いてｃＤＮＡを合成した。

【００３７】得られたｃＤＮＡを、λＺＡＰII ベクタ
ー(Stratagene社製)に挿入し、インビトロ・パッケージ
ングを行ってλファージによるｃＤＮＡライブラリーを
作製した。

【００３８】前記＜１＞ のディファレンシャルディス
プレイ法により単離した１つのクローンＴ６−１を³²Ｐ
で標識し、上記のｃＤＮＡライブラリー８０，０００プ
ラークをプラークハイブリダイゼーション法によりスク
リーニングして、陽性クローンを得た。ハイブリダイゼ
ーションを６０℃で１６時間行った後、０．２×ＳＳＣ
／０．１％ ＳＤＳ溶液中６０℃で１０分間洗浄した。
得られたクローンのうち最も長いクローンをＴ６−１−
２０とし、さらに解析を行った。

【００３９】＜３＞塩基配列の決定 Ｔ６−１−２０の塩基配列を、塩基配列決定キット（Bc
aBEST Dideoxy Sequence Kit (宝酒造(株)製）を用いて
ジデオキシ法により決定したところ、このｃＤＮＡは
３，５２８ｂｐからなり、９７７アミノ酸をコードする
１つのオープンリーディングフレームが見出された。そ
して、このｃＤＮＡがコードするアミノ酸配列について
データベース検索を行ったところ、このアミノ酸配列の
１〜７７１までの部分と、ヒトのＭＨＣクラスII遺伝子
のプロモーター領域に保存されているＸ−ｂｏｘに結合
するシステイン−リッチＤＮＡ結合タンパク質（Cystei
n-rich ＤＮＡ-binding protein (NF-X1)）のアミノ酸
配列の３４３〜１０８７までの部分との間で３９．７％
のホモロジーがあることがわかった。

【００４０】このＮＦ−Ｘ１は、ＭＨＣクラスII遺伝子
の発現を調節しているリプレッサーとして機能している
ことが示されており、遺伝子の中央部分にシステインに
富む７回の繰り返し構造をもつ新たなファミリーである
として報告されている。今回単離した大豆の遺伝子は、
システインに富む７回の繰り返し構造を有しており（図
１）、システイン−リッチＤＮＡ結合タンパク質をコー
ドしていることが示された。このｃＤＮＡが由来する遺
伝子を、ＳＪＩＰ−２とした。

【００４１】＜４＞ＳＪＩＰ−２の発現解析 システイン−リッチＤＮＡ結合タンパク質をコードする
遺伝子（ＳＪＩＰ−２）の発現様式を調べるために、ジ
ャスモン酸処理した大豆培養細胞と無処理の細胞からＲ
ＮＡを抽出し、Ｔ６−１（２００ｂｐ）をプローブとし
てハイブリダイゼーションを行った。

【００４２】ＲＮＡの抽出は、グアニジンチオシアネー
ト／フェノールクロロホルム法により行った。１．６ｍ
ｌの４．２３Ｍグアニジンチオシアネート，２５ｍＭク
エン酸ナトリウム溶液と、０．２ｍｌの２０％サルコシ
ル溶液と、０．２ｍｌの２−メルカプトエタノール溶液
と、２ｍｌのフェノール／クロロホルム溶液とを混合
し、この混合溶液に培養細胞約１．５ｇを加え、培養細
胞を粉砕した。これを、３，０００ｒｐｍで１０分間遠
心を行い、上清をフェノール／クロロホルムで抽出した
後、さらにクロロホルムで抽出を行った。得られた溶液
にエタノールを加えてＲＮＡを沈殿させた後、沈殿を１
ｍｌの水に溶解し、２５０μｌの１０ＭＬｉＣｌ溶液を
加えて４℃で２時間以上静置した。これを遠心してＲＮ
Ａの沈殿を回収した。

【００４３】上記のようにして得られたＲＮＡ ２０μ
ｇをアガロースゲルで電気泳動した後、ＲＮＡをナイロ
ンメンブランに移した。Ｔ６−１を³²Ｐで標識してプロ
ーブとし、ノーザンハイブリダイゼーションを行った。
ハイブリダイゼーションを６０℃で１６時間行い、０．
２×ＳＳＣ／０．１％ ＳＤＳ溶液中６０℃で３０分間
洗浄を行った後、Ｘ線フィルムを用いてオートラジオグ
ラムをとった。

【００４４】その結果、ＳＪＩＰ−２は、ジャスモン酸
無処理の細胞では発現が見られず、ジャスモン酸処理し
た細胞で特異的に発現していることが明らかとなった。
したがってこのＳＪＩＰ−２は、ジャスモン酸で特異的
に誘導されるＤＮＡ結合タンパク質の遺伝子であること
が明らかとなった。

【００４５】

【発明の効果】本発明のＤＮＡは、ジャスモン酸で誘導
されるＤＮＡ結合タンパク質をコードする。このＤＮＡ
結合タンパク質は、ジャスモン酸で誘導される遺伝子の
発現を調節する因子であると考えられる。したがって、
それらの遺伝子の発現をコントロールすることが可能と
なり、病原菌に強い植物の作出、有用な二次代謝産物の
生産、有毒な二次代謝産物の生成の抑制などに利用する
ことができると期待される。

【００４６】

【配列表】

配列番号：１ 配列の長さ：3528 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA 起源 生物名：ダイズ 株名：SB-P 配列の特徴 特徴を表す記号：CDS 存在位置：450..3480 特徴を決定した方法：Ｐ 配列 TCACACAGCG CAACTTTCGT CTTCTATCCC CAACCCTAAC CAGGTATCAT CTTCCTATCT 60 TTCCTAAATT TCAGTCAGTC AGAATATTTG TCACTTAATT TGGAATTTTC ATTTCGAGAG 120 TTGAGACTTA GACATGTTAA TTTGACTTTT AGGGTTGAGG TTATCATCAA TCTTTCCATT 180 TTCAATCTGA TGAATTGGAT TTGAATTTTC ATGTGTCAGT TAGCGAACGA TCGATTAGAG 240 TTTCGACGCA GGATGAGTTC GAAAGAGCGA AGCAGCAGCC GCATTCGAGG GTTCCTCGTC 300 GTCAGGAGTG GATTCGTAGA GATGTTGGTG GTTGCTCCAA TCCAAGAAAG CCCAAGAAGG 360 GATCATCTTC GAATTCGAGG GAGGAGTCTA ATTTGCCTCA GCTGCTGCAA GAGATTCAGG 420 ACAAGCTCGT CAAAGGAGCT GTCGAATGC ATG ATT TGT TAT GAC ATG GTG CGC 473 Met Ile Cys Tyr Asp Met Val Arg 1 5 AGG TCT GCG CCT ATC TGG TCT TGC TCC GGT TGC TTC TCT ATC TTT CAC 521 Arg Ser Ala Pro Ile Trp Ser Cys Ser Gly Cys Phe Ser Ile Phe His 10 15 20 CTC ACT TGT ATC AAG AAG TGG GCT CGT GCA CCC ATT TCT GTG GAT TTG 569 Leu Thr Cys Ile Lys Lys Trp Ala Arg Ala Pro Ile Ser Val Asp Leu 25 30 35 40 TCC GTT GAG AAG AAC CAG GGC GGC TTC AAT TGG CGT TGC CCT GGT TGC 617 Ser Val Glu Lys Asn Gln Gly Gly Phe Asn Trp Arg Cys Pro Gly Cys 45 50 55 CAG TCT GTG CAG CTC ACT TCA TCC AAG GAT ATT AGG TAT CTA TGC TTC 665 Gln Ser Val Gln Leu Thr Ser Ser Lys Asp Ile Arg Tyr Leu Cys Phe 60 65 70 TGT GGA AAG AGG CCA GAT CCA CCC TCT GAT TTG TAT CTC ATG CCA CAT 713 Cys Gly Lys Arg Pro Asp Pro Pro Ser Asp Leu Tyr Leu Met Pro His 75 80 85 TCC TGT GGA GAA CCA TGT GGC AAG CCT CTT GAG AGG GAC CTT CAA GGG 761 Ser Cys Gly Glu Pro Cys Gly Lys Pro Leu Glu Arg Asp Leu Gln Gly 90 95 100 GAT AAG GAG CTT CTT TGC CCT CAT CTT TGT GTC TTG CAA TGC CAT CCC 809 Asp Lys Glu Leu Leu Cys Pro His Leu Cys Val Leu Gln Cys His Pro 105 110 115 120 GGC CCC TGT CCT CCT TGC AAA GCA TTT GCC CCT CCA CGT CTG TGT CCT 857 Gly Pro Cys Pro Pro Cys Lys Ala Phe Ala Pro Pro Arg Leu Cys Pro 125 130 135 TGT GGG AAG AAA AAT ATT ACC ACT CGT TGC TCT GAC CGC CAG TCT GTT 905 Cys Gly Lys Lys Asn Ile Thr Thr Arg Cys Ser Asp Arg Gln Ser Val 140 145 150 CTT ACC TGT GGC CAG CGC TGC CAA AAG CTT CTT CAA TGT GGC CGT CAT 953 Leu Thr Cys Gly Gln Arg Cys Gln Lys Leu Leu Gln Cys Gly Arg His 155 160 165 CGC TGT CAG CAA ATC TGT CAT CTG GGT CCT TGT CAT CCT TGT CAA GTT 1001 Arg Cys Gln Gln Ile Cys His Leu Gly Pro Cys His Pro Cys Gln Val 170 175 180 CCA ATC AAT GCC TCT TGC TTT TGT GCC CAA AAG ATG GAG GTA ATT CTT 1049 Pro Ile Asn Ala Ser Cys Phe Cys Ala Gln Lys Met Glu Val Ile Leu 185 190 195 200 TGT GGG GAG ATG GCT GTC AAG GGT GAA ATC AGA GCA GAT GGT GGA GTA 1097 Cys Gly Glu Met Ala Val Lys Gly Glu Ile Arg Ala Asp Gly Gly Val 205 210 215 TTC TCT TGT GGT TCC ACT TGT CAA AAG AAA CTT AAT TGT GGT AAT CAT 1145 Phe Ser Cys Gly Ser Thr Cys Gln Lys Lys Leu Asn Cys Gly Asn His 220 225 230 ATC TGT ATC GAG ACT TGT CAT CCA GGT AGC TGT GGG GAC TGT GAA TTA 1193 Ile Cys Ile Glu Thr Cys His Pro Gly Ser Cys Gly Asp Cys Glu Leu 235 240 245 TTA CCA TCC CGT ATT AAG ACA TGC TGT TGT GGG AAA ACT AGA TTG GAG 1241 Leu Pro Ser Arg Ile Lys Thr Cys Cys Cys Gly Lys Thr Arg Leu Glu 250 255 260 GAG AAA CGC CAC AGT TGT TTA GAC CCA ATT CCT ACC TGT TCA CAA GTA 1289 Glu Lys Arg His Ser Cys Leu Asp Pro Ile Pro Thr Cys Ser Gln Val 265 270 275 280 TGT GGC AAG TAC CTT CCT TGC GGG ATT CAT CAT TGT GAA GAG CCA TGC 1337 Cys Gly Lys Tyr Leu Pro Cys Gly Ile His His Cys Glu Glu Pro Cys 285 290 295 CAT GCT GGG GAT TGT TCT CCT TGT CTG GTT CTA GTT TCT CAG AAG TGT 1385 His Ala Gly Asp Cys Ser Pro Cys Leu Val Leu Val Ser Gln Lys Cys 300 305 310 AGA TGT GGC TCG ACT TCC CGA ACT GTG GAG TGT TGC AAG ACA AAA ATG 1433 Arg Cys Gly Ser Thr Ser Arg Thr Val Glu Cys Cys Lys Thr Lys Met 315 320 325 GAA AAT GAG AAA TTT ACT TGT GAA AGG CCT TGT GGG CAG AAA AAG AAT 1481 Glu Asn Glu Lys Phe Thr Cys Glu Arg Pro Cys Gly Gln Lys Lys Asn 330 335 340 TGT GGA AGG CAT CGA TGT AGT GAA AGG TGT TGT CCA CTT TCT AAT CCA 1529 Cys Gly Arg His Arg Cys Ser Glu Arg Cys Cys Pro Leu Ser Asn Pro 345 350 355 360 AAT AAT ATT CTA AAT GCA GAT TGG GAT CCA CAC TTC TGT CAA TTG CCG 1577 Asn Asn Ile Leu Asn Ala Asp Trp Asp Pro His Phe Cys Gln Leu Pro 365 370 375 TGT GGA AAG AAG TTA AGG TGT GGG CAG CAT GCA TGT GAA TCC CTG TGC 1625 Cys Gly Lys Lys Leu Arg Cys Gly Gln His Ala Cys Glu Ser Leu Cys 380 385 390 CAC AGT GGT CAT TGT CCA CCT TGT CTT GAA ACT ATA TTT ACT GAT TTG 1673 His Ser Gly His Cys Pro Pro Cys Leu Glu Thr Ile Phe Thr Asp Leu 395 400 405 ACA TGT GCT TGT GGT AAG ACT TCA ATC CCT CCT CCA TTG CCT TGT GGC 1721 Thr Cys Ala Cys Gly Lys Thr Ser Ile Pro Pro Pro Leu Pro Cys Gly 410 415 420 ACA CCG CCT CCC TCA TGT CAG CTT CCA TGT TCA GTT CCT CAG CCT TGT 1769 Thr Pro Pro Pro Ser Cys Gln Leu Pro Cys Ser Val Pro Gln Pro Cys 425 430 435 440 TCG CAT CCA GCC TCT CAC AGC TGT CAT TTT GGA GAT TGC CCT CCT TGT 1817 Ser His Pro Ala Ser His Ser Cys His Phe Gly Asp Cys Pro Pro Cys 445 450 455 TCA ATG CCC ATA GCA AAA GAA TGT ATT GGT GGA CAT GTA GTT CTT AGG 1865 Ser Met Pro Ile Ala Lys Glu Cys Ile Gly Gly His Val Val Leu Arg 460 465 470 AAC ATA CCT TGT GGT TCG AAG GAT ATT AAA TGC AAT AAA CTC TGT GGG 1913 Asn Ile Pro Cys Gly Ser Lys Asp Ile Lys Cys Asn Lys Leu Cys Gly 475 480 485 AAG ACC AGA CAG TGT GGT TTA CAT GCA TGT GGC AGA ACA TGT CAC CTC 1961 Lys Thr Arg Gln Cys Gly Leu His Ala Cys Gly Arg Thr Cys His Leu 490 495 500 CCC CCT TGT GAT AAT CTG TCA GCT GTG CCA GGT ATC CGA GCC TCT TGT 2009 Pro Pro Cys Asp Asn Leu Ser Ala Val Pro Gly Ile Arg Ala Ser Cys 505 510 515 520 GGG CAA ACA TGT GGT GCT CCT AGG AGA GAC TGC CGG CAT ACA TGT ACA 2057 Gly Gln Thr Cys Gly Ala Pro Arg Arg Asp Cys Arg His Thr Cys Thr 525 530 535 GCT CCT TGT CAC CCT TCA ACT CCA TGT CCA GAT ACA AGA TGC AAA TTC 2105 Ala Pro Cys His Pro Ser Thr Pro Cys Pro Asp Thr Arg Cys Lys Phe 540 545 550 CCT GTC ACA ATT ACT TGT TCT TGT GGC CGA ATA ACA GAA AAT GTT CCT 2153 Pro Val Thr Ile Thr Cys Ser Cys Gly Arg Ile Thr Glu Asn Val Pro 555 560 565 TGT GAT GCT GGT GGC AGT TGT GCT AAT TAT GAT GCT GAT ACT GTA CAT 2201 Cys Asp Ala Gly Gly Ser Cys Ala Asn Tyr Asp Ala Asp Thr Val His 570 575 580 GAA GCT TCC ATT ATT CAA AAG TTG CCT GTG CTT CTT CAA CCC GTG GCT 2249 Glu Ala Ser Ile Ile Gln Lys Leu Pro Val Leu Leu Gln Pro Val Ala 585 590 595 600 GCA AAT GGC AAA AAA GTC CCC CTC GGA CAA AGA AAA CTG ATG TGT AAT 2297 Ala Asn Gly Lys Lys Val Pro Leu Gly Gln Arg Lys Leu Met Cys Asn 605 610 615 GAT GAC TGT GCT AAG TTA GAG CGG AAA AGG GTT CTT GCA GAT GCT TTT 2345 Asp Asp Cys Ala Lys Leu Glu Arg Lys Arg Val Leu Ala Asp Ala Phe 620 625 630 GAG ATT ACC GCT CCA AAT CTG GAT TCA CTC CAT TTT GGT GAG AAT TCG 2393 Glu Ile Thr Ala Pro Asn Leu Asp Ser Leu His Phe Gly Glu Asn Ser 635 640 645 GTT GCT TCT GAA TTG CTG GCT GAC ATG TTG AGA CGT GAT TCT AAA TGG 2441 Val Ala Ser Glu Leu Leu Ala Asp Met Leu Arg Arg Asp Ser Lys Trp 650 655 660 GTT TTA TCT GTT GAA GAG AGA TGC AAG TTT TTA GTA CTT GGC AAG AGC 2489 Val Leu Ser Val Glu Glu Arg Cys Lys Phe Leu Val Leu Gly Lys Ser 665 670 675 680 AGA GGA AAT GCA CAT GGT CCA AAA GTC CAT GTT TTC TGT CCT ATG TTA 2537 Arg Gly Asn Ala His Gly Pro Lys Val His Val Phe Cys Pro Met Leu 685 690 695 AAG GAC AAA AGA GAT GCA GTG AGG GTG ATT GCT GAG AGA TGG AAG CTT 2585 Lys Asp Lys Arg Asp Ala Val Arg Val Ile Ala Glu Arg Trp Lys Leu 700 705 710 GCA GTG AAT GCA GCT GGT CGG GAG CCA AAG CAT TTC GTA GTT GTT CAT 2633 Ala Val Asn Ala Ala Gly Arg Glu Pro Lys His Phe Val Val Val His 715 720 725 GTT ACA CCA AAA TCA AGA GCT CCT GCT CGT GTG CTA GGG TTT AAG GGT 2681 Val Thr Pro Lys Ser Arg Ala Pro Ala Arg Val Leu Gly Phe Lys Gly 730 735 740 ACT ACA ACT GTA AAT GTA CCC CTT CCT CCG GCA TTT GAT CCT TTG GTT 2729 Thr Thr Thr Val Asn Val Pro Leu Pro Pro Ala Phe Asp Pro Leu Val 745 750 755 760 GAT ATG GAT CCT CGA CTT GTT GTC TCT TTT ATA GAC TTA CCA ATG GAT 2777 Asp Met Asp Pro Arg Leu Val Val Ser Phe Ile Asp Leu Pro Met Asp 765 770 775 GCA GAT ATT AGT GCA TTG GTG TTG AGA TTT GGT GGT GAG TGT GAA CTT 2825 Ala Asp Ile Ser Ala Leu Val Leu Arg Phe Gly Gly Glu Cys Glu Leu 780 785 790 GTT TGG TTA AAT GAC AAA AAT GCA TTG GCC GTT TTT AAT GAC CCT GCC 2873 Val Trp Leu Asn Asp Lys Asn Ala Leu Ala Val Phe Asn Asp Pro Ala 795 800 805 CGT GCT GCA ACT GCA ATG AGG AGG TTG GAT CAT GGT ACG GTT TAT CAG 2921 Arg Ala Ala Thr Ala Met Arg Arg Leu Asp His Gly Thr Val Tyr Gln 810 815 820 GGA GCT GTG GTG GTG GTT GTT CCA AAT GTC GGG GCA TCA GTA GCA TCT 2969 Gly Ala Val Val Val Val Val Pro Asn Val Gly Ala Ser Val Ala Ser 825 830 835 840 TCA GCT ACC AAT GCC TGG GGA GGA TCT GGG ACA ATG AAA GGA GGA GCA 3017 Ser Ala Thr Asn Ala Trp Gly Gly Ser Gly Thr Met Lys Gly Gly Ala 845 850 855 CTG GCA GCA TTA AAG AGT AAT CCA TGG AAA AAG GAT GTT ATT CAA GAG 3065 Leu Ala Ala Leu Lys Ser Asn Pro Trp Lys Lys Asp Val Ile Gln Glu 860 865 870 CCA GGT TGG AGA GAA GAT GCT TGG GGT GAT GAG GAG TGG GCT ACT GGT 3113 Pro Gly Trp Arg Glu Asp Ala Trp Gly Asp Glu Glu Trp Ala Thr Gly 875 880 885 TCT GCT AAT GTC AAA TTG CCT ATT CAG AAG AAA GAA GCC CGA ATA TCT 3161 Ser Ala Asn Val Lys Leu Pro Ile Gln Lys Lys Glu Ala Arg Ile Ser 890 895 900 GCT TCA GTA AAT CCT TGG AGT GTC CTA AAT CAA GAA TCG TCT TCA AGT 3209 Ala Ser Val Asn Pro Trp Ser Val Leu Asn Gln Glu Ser Ser Ser Ser 905 910 915 920 TCA TCT GTT GCA GCC ATT AAA ATT GAT GGT TCT AGG AAA CAC TCT GAA 3257 Ser Ser Val Ala Ala Ile Lys Ile Asp Gly Ser Arg Lys His Ser Glu 925 930 935 AGT AGT GTT ATC ACA AAG TTG GAG CCT CGT GAT GGT GGT TCA AAT CTA 3305 Ser Ser Val Ile Thr Lys Leu Glu Pro Arg Asp Gly Gly Ser Asn Leu 940 945 950 GGA GGG CAG CCT GCA GGA AAC TTT GAT GCT TTG GAA GCT TCT GAT GTA 3353 Gly Gly Gln Pro Ala Gly Asn Phe Asp Ala Leu Glu Ala Ser Asp Val 955 960 965 GTA GAT GAT TGG GAG AAG GCT TGT GAA TAGCAAGGAG TAAACATTTT 3400 Val Asp Asp Trp Glu Lys Ala Cys Glu 970 975 TCATTTTATT TTGTTGAGAA GGAGGCAGAT TTTGACTAGT GAAATGTCTA AGGCTCTTTT 3460 TGTCCACTAG ATGTATCTCT TTTCATGTTT TATCCCCCTG ATTTTAATCA ATTTCGATGT 3520 TATTCTAA 3528

【００４７】配列番号：２ 配列の長さ：977 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：タンパク質 配列 Met Ile Cys Tyr Asp Met Val Arg Arg Ser Ala Pro Ile Trp Ser Cys 1 5 10 15 Ser Gly Cys Phe Ser Ile Phe His Leu Thr Cys Ile Lys Lys Trp Ala 20 25 30 Arg Ala Pro Ile Ser Val Asp Leu Ser Val Glu Lys Asn Gln Gly Gly 35 40 45 Phe Asn Trp Arg Cys Pro Gly Cys Gln Ser Val Gln Leu Thr Ser Ser 50 55 60 Lys Asp Ile Arg Tyr Leu Cys Phe Cys Gly Lys Arg Pro Asp Pro Pro 65 70 75 80 Ser Asp Leu Tyr Leu Met Pro His Ser Cys Gly Glu Pro Cys Gly Lys 85 90 95 Pro Leu Glu Arg Asp Leu Gln Gly Asp Lys Glu Leu Leu Cys Pro His 100 105 110 Leu Cys Val Leu Gln Cys His Pro Gly Pro Cys Pro Pro Cys Lys Ala 115 120 125 Phe Ala Pro Pro Arg Leu Cys Pro Cys Gly Lys Lys Asn Ile Thr Thr 130 135 140 Arg Cys Ser Asp Arg Gln Ser Val Leu Thr Cys Gly Gln Arg Cys Gln 145 150 155 160 Lys Leu Leu Gln Cys Gly Arg His Arg Cys Gln Gln Ile Cys His Leu 165 170 175 Gly Pro Cys His Pro Cys Gln Val Pro Ile Asn Ala Ser Cys Phe Cys 180 185 190 Ala Gln Lys Met Glu Val Ile Leu Cys Gly Glu Met Ala Val Lys Gly 195 200 205 Glu Ile Arg Ala Asp Gly Gly Val Phe Ser Cys Gly Ser Thr Cys Gln 210 215 220 Lys Lys Leu Asn Cys Gly Asn His Ile Cys Ile Glu Thr Cys His Pro 225 230 235 240 Gly Ser Cys Gly Asp Cys Glu Leu Leu Pro Ser Arg Ile Lys Thr Cys 245 250 255 Cys Cys Gly Lys Thr Arg Leu Glu Glu Lys Arg His Ser Cys Leu Asp 260 265 270 Pro Ile Pro Thr Cys Ser Gln Val Cys Gly Lys Tyr Leu Pro Cys Gly 275 280 285 Ile His His Cys Glu Glu Pro Cys His Ala Gly Asp Cys Ser Pro Cys 290 295 300 Leu Val Leu Val Ser Gln Lys Cys Arg Cys Gly Ser Thr Ser Arg Thr 305 310 315 320 Val Glu Cys Cys Lys Thr Lys Met Glu Asn Glu Lys Phe Thr Cys Glu 325 330 335 Arg Pro Cys Gly Gln Lys Lys Asn Cys Gly Arg His Arg Cys Ser Glu 340 345 350 Arg Cys Cys Pro Leu Ser Asn Pro Asn Asn Ile Leu Asn Ala Asp Trp 355 360 365 Asp Pro His Phe Cys Gln Leu Pro Cys Gly Lys Lys Leu Arg Cys Gly 370 375 380 Gln His Ala Cys Glu Ser Leu Cys His Ser Gly His Cys Pro Pro Cys 385 390 395 400 Leu Glu Thr Ile Phe Thr Asp Leu Thr Cys Ala Cys Gly Lys Thr Ser 405 410 415 Ile Pro Pro Pro Leu Pro Cys Gly Thr Pro Pro Pro Ser Cys Gln Leu 420 425 430 Pro Cys Ser Val Pro Gln Pro Cys Ser His Pro Ala Ser His Ser Cys 435 440 445 His Phe Gly Asp Cys Pro Pro Cys Ser Met Pro Ile Ala Lys Glu Cys 450 455 460 Ile Gly Gly His Val Val Leu Arg Asn Ile Pro Cys Gly Ser Lys Asp 465 470 475 480 Ile Lys Cys Asn Lys Leu Cys Gly Lys Thr Arg Gln Cys Gly Leu His 485 490 495 Ala Cys Gly Arg Thr Cys His Leu Pro Pro Cys Asp Asn Leu Ser Ala 500 505 510 Val Pro Gly Ile Arg Ala Ser Cys Gly Gln Thr Cys Gly Ala Pro Arg 515 520 525 Arg Asp Cys Arg His Thr Cys Thr Ala Pro Cys His Pro Ser Thr Pro 530 535 540 Cys Pro Asp Thr Arg Cys Lys Phe Pro Val Thr Ile Thr Cys Ser Cys 545 550 555 560 565 570 575 Asn Tyr Asp Ala Asp Thr Val His Glu Ala Ser Ile Ile Gln Lys Leu 580 585 590 Pro Val Leu Leu Gln Pro Val Ala Ala Asn Gly Lys Lys Val Pro Leu 595 600 605 Gly Gln Arg Lys Leu Met Cys Asn Asp Asp Cys Ala Lys Leu Glu Arg 610 615 620 Lys Arg Val Leu Ala Asp Ala Phe Glu Ile Thr Ala Pro Asn Leu Asp 625 630 635 640 Ser Leu His Phe Gly Glu Asn Ser Val Ala Ser Glu Leu Leu Ala Asp 645 650 655 Met Leu Arg Arg Asp Ser Lys Trp Val Leu Ser Val Glu Glu Arg Cys 660 665 670 Lys Phe Leu Val Leu Gly Lys Ser Arg Gly Asn Ala His Gly Pro Lys 675 680 685 Val His Val Phe Cys Pro Met Leu Lys Asp Lys Arg Asp Ala Val Arg 690 695 700 Val Ile Ala Glu Arg Trp Lys Leu Ala Val Asn Ala Ala Gly Arg Glu 705 710 715 720 Pro Lys His Phe Val Val Val His Val Thr Pro Lys Ser Arg Ala Pro 725 730 735 Ala Arg Val Leu Gly Phe Lys Gly Thr Thr Thr Val Asn Val Pro Leu 740 745 750 Pro Pro Ala Phe Asp Pro Leu Val Asp Met Asp Pro Arg Leu Val Val 755 760 765 Ser Phe Ile Asp Leu Pro Met Asp Ala Asp Ile Ser Ala Leu Val Leu 770 775 780 Arg Phe Gly Gly Glu Cys Glu Leu Val Trp Leu Asn Asp Lys Asn Ala 785 790 795 800 Leu Ala Val Phe Asn Asp Pro Ala Arg Ala Ala Thr Ala Met Arg Arg 805 810 815 Leu Asp His Gly Thr Val Tyr Gln Gly Ala Val Val Val Val Val Pro 820 825 830 Asn Val Gly Ala Ser Val Ala Ser Ser Ala Thr Asn Ala Trp Gly Gly 835 840 845 Ser Gly Thr Met Lys Gly Gly Ala Leu Ala Ala Leu Lys Ser Asn Pro 850 855 860 Trp Lys Lys Asp Val Ile Gln Glu Pro Gly Trp Arg Glu Asp Ala Trp 865 870 875 880 Gly Asp Glu Glu Trp Ala Thr Gly Ser Ala Asn Val Lys Leu Pro Ile 885 890 895 Gln Lys Lys Glu Ala Arg Ile Ser Ala Ser Val Asn Pro Trp Ser Val 900 905 910 Leu Asn Gln Glu Ser Ser Ser Ser Ser Ser Val Ala Ala Ile Lys Ile 915 920 925 Asp Gly Ser Arg Lys His Ser Glu Ser Ser Val Ile Thr Lys Leu Glu 930 935 940 Pro Arg Asp Gly Gly Ser Asn Leu Gly Gly Gln Pro Ala Gly Asn Phe 945 950 955 960 Asp Ala Leu Glu Ala Ser Asp Val Val Asp Asp Trp Glu Lys Ala Cys 965 970 975 Glu

【００４８】配列番号：３ 配列の長さ：14 配列の型：核酸 鎖の数：一本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：他のＤＮＡ．．合成ＤＮＡ 配列 TTTTTTTTTT TTVG 14

【００４９】配列番号：４ 配列の長さ：14 配列の型：核酸 鎖の数：一本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：他のＤＮＡ．．合成ＤＮＡ 配列 TTTTTTTTTT TTVA 14

【００５０】配列番号：５ 配列の長さ：14 配列の型：核酸 鎖の数：一本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：他のＤＮＡ．．合成ＤＮＡ 配列 TTTTTTTTTT TTVT 14

【００５１】配列番号：６ 配列の長さ：14 配列の型：核酸 鎖の数：一本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：他のＤＮＡ．．合成ＤＮＡ 配列 TTTTTTTTTT TTVC 14

【００５２】

【図面の簡単な説明】

【図１】 本発明のＤＮＡ結合タンパク質をコードする
ｃＤＮＡ（ＮＦ−Ｘ１）が有するシステインに富む７回
の繰り返し構造を示す図。各段の左右の数字はＮ−末端
からのアミノ酸番号を表す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｑ 1/68 Ｃ１２Ｎ 5/00 Ｃ (72)発明者 太田 啓之 神奈川県横浜市緑区長津田4259 東京工業 大学生命理工学部内

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 配列表の配列番号２に示すアミノ酸配列
   を有し、ＤＮＡ結合活性を実質的に害さない限り１以上
   のアミノ酸の置換、欠失、挿入、付加又は転移を有して
   もよいＤＮＡ結合タンパク質をコードするＤＮＡ。
2. 【請求項２】 配列表の配列番号１に示す塩基配列にお
   いて、塩基番号４５０〜３４８０で表される塩基配列を
   有する請求項１記載のＤＮＡ。
3. 【請求項３】 配列番号１に示す塩基配列に相補的な塩
   基配列の少なくとも一部を有するＤＮＡ。
4. 【請求項４】 請求項１記載のＤＮＡで形質転換された
   植物体。
5. 【請求項５】 請求項３記載のＤＮＡで形質転換された
   植物体。
6. 【請求項６】 配列表の配列番号２に示すアミノ酸配列
   を有し、ＤＮＡ結合活性を実質的に害さない限り１以上
   のアミノ酸の置換、欠失、挿入、付加又は転移を有して
   もよいＤＮＡ結合タンパク質。