JPH09500103A

JPH09500103A - シクロヘキサペプチジルアミノアルキルエーテル

Info

Publication number: JPH09500103A
Application number: JP6524565A
Authority: JP
Inventors: バルコベク，ジエームズ・エム; ブーフアード，フランシス・アイリーン; ドロピンスキー，ジエームズ・エフ
Original assignee: メルクエンドカンパニーインコーポレーテッド
Priority date: 1993-05-04
Filing date: 1994-04-29
Publication date: 1997-01-07
Also published as: AU674233B2; AU6778194A; WO1994025045A1; US5741775A; EP0697879A4; EP0697879A1; CA2161149A1

Abstract

(57)【要約】式（Ｉ）〔式中Ｒ₁はアミノアルキル基であり、（ａ）はアシル基である〕を有する化合物とその塩。この化合物は抗生活性を有する。

Description

【発明の詳細な説明】発明の名称シクロヘキサペプチジルアミノアルキルエーテル発明の背景本発明は、優れた特性の組み合わせを有する抗生化合物に係わる。エキノカンジンＢ（ｅｃｈｉｎｏｃａｎｄｉｎＢ）及び関連する発酵代謝物は、ｉｎｖｉｔｒｏ試験時に抗真菌特性を示すことが知られている。しかし、これら化合物の或るものはｉｎｖｉｖｏで試験すると有毒であり、また或るものはヒト赤血球に対して溶解活性を示し、これらのことが該化合物を治療用には望ましくないものとする。ヒトの治療により有用な化合物として幾つかの誘導体が報告されている。これらの誘導体のほとんどは、ヒドロキシオルニチン残基のα−アミノ−窒素の位置の親油性側鎖類似体かまたはヘミアミナール位（ｈｅｍｉａｍｉｎａｌｐｏｓｉｔｉｏｎ）のエーテルである。数種のアミノアルキルエーテルが製造されたが、これらはベルギー特許第８５９，０６７号（１９７８）及び同第８５１，３１０号（１９７７）の主題となっている。本発明によれば、アミノアルキルエーテルがエキノカンジンＢに由来するものでなく、１個の核アミノ酸がトレオニンである替わりにグルタミンであるシクロヘキサペプチド化合物に由来するものである場合、この化合物はｉｎｖｉｖｏで優れた抗生活性を有することが発見された。そのうえ、上記化合物は実質的に無毒で、かつヒト血球に対して非溶解性であり、従ってこの化合物は、これまで多くの化合物によって、たとえそれが活性であったとしても行なえなかったヒトの治療に適合可能である。本発明の化合物は、シクロペプチド核中のオルニチンの５位のアミノアルキルエーテル、及び前記オルニチンのＮ²位のアシル誘導体であり、式（Ｉ）によって表わされ得る（配列番号１）。上記及び後出式中、Ｒ_Iは −ＣＨ₂ＣＨ（ＮＨ₂）ＣＨ₂Ｒ^I、 −Ｃ_nＨ_2nＮＲ^IIＲ^III、 −（ＣＨ₂）_1〜3ＣＨ（ＮＨ₂）Ｒ^IV、または −Ｃ_nＨ_2nＮＨＲ^V であり、その際ｎは２〜６であり、Ｒ₂はであり、前記式中Ｒ^aはＣ₁〜Ｃ₁₀アルキルまたは（ＣＨ₂）_qＮＲ^bＲ^cであり、その際Ｒ^b及びＲ^cは互いに独立にＨ、もしくはＣ₁〜Ｃ₁₀アルキルであるか、またはＲ^b及びＲ^cは一緒になってを構成し、前記式中Ｒ^dはＣ₁〜Ｃ₁₆アルキル、フェニル、またはベンジルであり、Ｒ^Iは −ＯＨ、 −ＮＨ₂、 −ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ₂、または −ＮＨＣ（＝ＮＨ）（ＣＨ₂）_0〜3Ｈであり、Ｒ^IIは −Ｈ、 −Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル、または −ベンジルであり、Ｒ^IIIは −Ｈ、 −Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル、または −ベンジルであり、あるいはＲ^IIとＲ^IIIとは一緒になって−（ＣＨ₂）₄−、または−（ＣＨ₂）₅−を構成し、Ｒ^IVは −Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル、または −ＣＯＮＨ₂ であり、Ｒ^Vは −Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ₂、 −Ｃ（＝ＮＨ）（ＣＨ₂）_0〜3Ｈ、 −（ＣＨ₂）_2〜4ＮＨ₂、 −（ＣＨ₂）_2〜4ＯＨ、 −ＣＯ（ＣＨ₂）_1〜3ＮＨ₂、 −（ＣＨ₂）_2〜4ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ₂、 −（ＣＨ₂）_2〜4ＮＨＣ（＝ＮＨ）（ＣＨ₂）_0〜3Ｈ、またはであり、ｐは整数１または２であり、ｑは整数２〜４である。 “アルキル”という語は分枝鎖基も、環鎖基も、直鎖基も包含するものとする。上記化合物の塩も本発明の範囲内である。この塩には酸付加塩及び第四アンモニウム塩が含まれる。これらの塩はアミノアルキル基のアミノ官能基において形成される。“化合物Ｉ”という語を用いる時は塩を包含するものとする。酸付加塩として医薬に許容可能な塩は、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸、マレイン酸、クエン酸、酢酸、酒石酸、琥珀酸、蓚酸、リンゴ酸、グルタミン酸、サリチル酸、乳酸、グルコン酸、重炭酸等、及びＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅ６６，ｐ．２，１９７７に列挙された医薬に許容可能な塩に関連する他の酸などの酸に由来する塩である。本発明の範囲内に有る化合物で、有効性が高く、及び／または毒性が低く、かつその他の不利な副反応も僅かであるというきわめて望ましい特性の組み合わせを有するものは総て、シクロペプチドの４，５−ジヒドロキシオルニチン部分の５−ヒドロキシ位のアミノアルキルエーテルである。アミノ基を置換したり、アルキル部分に他の置換基を保有させたりすることは可能であるが、基の塩基性アミノ特性を維持することが重要である。オルニチン窒素上のアシル置換基は、少なくとも２個のフェニル基から成る芳香環鎖である点、及びパラ位の置換基によって更に延長される点で天然産物及び既知の化合物と相違する。幾つかの化合物をエキノカンジンまたはニューモカンジン（ｐｎｅｕｍｏｃａｎｄｉｎ）と呼称し得る。環状ペプチドの１個のアミノ酸が第二のトレオニンである替わりにグルタミンであり、かつオルニチン窒素上の側鎖が１０，１２−ジメチルミリストイルである化合物がＳｃｈｗａｒｔｚ等，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔ．４５，Ｎｏ．１２，ｐｐ．１８５３−１８６６，１９９２によってニューモカンジンと呼称されており、Ｊ．Ｍ．Ｂａｌｋｏｖｅｃ等，ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔ．３３，ｐｐ．４５２９− ４５３２，１９９２にも言及がみられる。即ち、核が４，５−ジヒドロキシオルニチン、トレオニン、４−ヒドロキシプロリン、３，４−ジヒドロキシ−ホモチロシン、３−ヒドロキシグルタミン及び３−ヒドロキシプロリンであり、側鎖が１０，１２−ジメチルミリストイルである天然産物をニューモカンジンＢ。と呼称する。オルニチンの５−ヒドロキシに位置する置換基と、側鎖アシルとにおいて相違する本発明の化合物はニューモカンジンＢ。の誘導体と呼称し得る。本発明の化合物は白色の固体であり、メタノール、エタノール、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）等といった様々な有機溶媒に溶解し、また水にも溶解する。抗生特性は、Ｃａｎｄｉｄａａｌｂｉｃａｎｓ、Ｃａｎｄｉｄａｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ等、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｆｕｍｉｇａｔｕｓ及び他のＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ属種などの、病原真菌感染を惹起する真菌に対して用い得る。加えて、本発明の化合物は免疫低下患者に蔓延する、これまで普通致命的であったＰｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓｃａｒｉｎｉｉ感染を抑制または緩和することへの使用に適合する。本発明の化合物を際立たせる構造上の特徴は、シクロペプチド核の５−ヒドロキシオルニチン上のアミノアルキル基と、核アミノ酸のグルタミンから生じるカルボキサミド基と、側鎖のアシル基との組み合わせである。所望の特性の組み合わせのために、核のアミノ酸は変化させない。アミノアルキル基は、アミノアルキルが常に塩基性アミノ基を有することを条件に変更可能である。このような変更はシクロペプチドの基幹を成す必須のアミノ酸には影響しない。本発明の化合物は、式（Ａ）によって表わされる天然産物の誘導体（配列番号１）をアミノアルカノール（即ちアルカノールアミン）または置換アミノアルカノールＲ₁ＯＨでアミノアルキル化することによって製造し得、前記式中Ｒ₁はアミノアルキル基または置換アミノアルキル基であり、そのアミノは置換されてもされなくてもよい。アミノが置換アミノ基である場合、置換基は塩基性アミノ基を中和しないものである。アミノアルキル化は非プロトン性極性溶媒中で強酸の存在下に行ない、反応混合物から生成物を、好ましくは逆相高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用いることによって単離する。アミノアルキルエーテルの核と出発物質の核とは同じであり、なぜならペプチド核のアミノ酸を変更しないからである。即ち、生成物と出発物質との両方が同じ配列番号を有する。Ｒ₁ＯＨは置換してもしなくてもよい。置換しない場合は、後段に詳述するように反応を生起させる前にアミノ基上に保護基を配置してもよく、かつ前記保護基はエーテル化完了後に除去する。Ｒ₁が置換アミノ基を有する場合は置換アミノアルコールを反応物とし得、あるいは他の場合には非置換アミノアルコールを用い、後からアミノ基上に置換基を配置し得る。アミノアルコールは通常酸付加塩の形態で、約２０〜２００当量の量で用いる。反応は強酸の存在下に生起させる。強有機酸の例に樟脳スルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸が有り、無機酸には塩酸や臭化水素酸などが有る。塩酸及び樟脳スルホン酸が好ましい。約１当量の酸を用いる。反応を生起させるのに溶媒を用いる。適当な溶媒は非プロトン性溶媒であり、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、１−メチル−２−ピロリジノン、ヘキサメチルリン酸トリアミド（ＨＭＰＡ）、ジオキサン、またはこれらの組み合わせを含む。ジメチルスルホキシド及びジメチルホルムアミドが好ましい。アミノアルコールが第一級アミノ基を有する場合、この基をアミノアルコール使用前に保護し得る。通常の保護基を用いる。カルボベンジルオキシ基（ＣＢｚ）が好ましい基である。カルボベンジルオキシ基でのアミノ基の保護の場合には、カルボベンジルオキシ基をＲ₁ＯＨのアミノ基上に通常の手段で配置し、このように保護したＲ₁ＯＨと、エーテル化するべきシクロペプチドと、保護しないＲ₁ＯＨを用いるエーテル化でも用いる強酸とを、保護しないアミノアルコールを用いる反応においてと同じ溶媒に共に加え、反応が実質的に完了するまで攪拌する。反応の進行はＨＰＬＣで監視し得る。反応完了後、反応混合物を中和し、水で稀釈し、その後ＨＰＬＣで精製してＮ−ベンジルオキシカルボニルアミノアルキルエーテル中間体を得る。所望のアミノアルキルエーテルを得るには、保護したエーテルを酢酸中でパラジウム−炭の存在下に気球圧（ｂａｌｌｏｏｎｐｒｅｓｓｕｒｅ）の下で、好ましくは０．１％のトリフルオロ酢酸を含有する３０→４０％水性アセトニトリル溶媒系を用いる分析ＨＰＬＣによって監視しながら、１時間から数時間水素化する。その後生成物を、まず触媒を除去してから濾液を凍結乾燥することによって回収し、それによって所望の生成物をトリフルオロ酢酸塩として得る。このトリフルオロ酢酸塩は、その最少量水溶液をアニオン交換カラムに通すことによって塩酸塩に変換可能である。アミノを置換アミノ基とする時、置換基が既にアミノアルコール上に有るのでない場合はエーテル生成後に置換基をアミノ基上に、当該基に適した、当業者の知識の範囲内の方法で配置し得る。エーテル生成物を反応混合物から単離し、逆相カラムの使用を含むＨＰＬＣ技術を用いて好ましく精製する。ＨＰＬＣから得られた溶出物を後段に詳述するように濃縮及び凍結乾燥する。溶離は様々な濃度のアセトニトリル／水を用いて行ない、その際アセトニトリル量を約１５％から始めて次第に増加させてゆく。溶離剤には通常０．１％のトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）または酢酸を含有させ、単離時の生成物は塩の形態で見出される。本発明の化合物は、Ｃａｎｄｉｄａ属種を含めた多くの真菌の制御に用い得る。抗真菌特性は、１％デキストロース含有酵母窒素塩基培地（ＹＮＢＤ；Ｄｉｆｃｏ）において行なうミクロブイヨン（ｍｉｃｒｏｂｒｏｔｈ）稀釈アッセイでの、幾つかのＣａｎｄｉｄａ属生物に対する最低殺菌濃度（ＭＦＣ）の測定によって例証し得る。アッセイ実施のため、化合物Ｉを１０％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解させ、かつ２５６０μｇ／ｍｌに稀釈する。次に、化合物をＹＮＢＤで２５６μｇ／ｍｌに稀釈する。得られた懸濁液０．１５ｍｌを、（各ウェルが０．１５ｍｌのＹＮＢＤを収容する）９６ウェルプレートの最上行に分配し、その結果薬物濃度は１２８μｇ／ｍｌとなる。上記最上行から２倍ずつに稀釈してゆくと、最終的な薬物濃度は１２８μｇ／ｍｌから０．０６μｇ／ｍｌまでとなる。サブローデキストロース寒天上に維持した酵母培養物をＹＮブイヨン（Ｄｉｆｃｏ）に移し、（２５０ｒｐｍで）振盪しながら３５℃で一晩インキュベートする。インキュベーション後、各培養物を滅菌水で稀釈して最終濃度を１〜５×１０⁶コロニー形成単位（ＣＦＵ）／ｍｌとする。ウェル１個につき１．５μｌを放出してウェル１個当たりの最終接種量を１．５〜７．５×１０³細胞とするよう、ＭＩＣ−２０００（Ｄｙｎａｔｅｃｈ）を用いて、９６ウエルマイクロプレートへの接種を行なう。マイクロプレートを３５℃で２４時間インキュベートする。最低抑制濃度（ＭＩＣ）を、目視できる増殖を生起させない最低薬物濃度として記録する。ＭＩＣ記録後、プレートを振盪して細胞を再懸濁させる。その後、９６ウェルマイクロプレートのウェルから得た１．５μｌ試料を、サブローデキストロース寒天を収容する単一ウェルトレイに移す。このように接種を行なったトレイを３５℃で２４時間インキュベートした後、該トレイから最低殺菌濃度（ＭＦＣ）を読み取る。ＭＦＣは、増殖を生起させない、もしくは１接種当たり４個未満のコロニーしか生じさせない最低薬物濃度と定義する。本発明の化合物の真菌に対するｉｎｖｉｖｏ有効性は、次のように行なう実験によって認め得る。ＣａｎｄｉｄａａｌｂｉｃａｎｓＭＹ１０５５の一晩ＳＤＡ培養物から得た増殖物を滅菌食塩液中に懸濁させ、得られた細胞懸濁液の細胞濃度を血球計計数によって測定し、かつ３．７５×１０⁵細胞／ｍｌに調節する。この懸濁液０．２ｍｌをマウスの尾静脈に、最終接種量が７．５×１０⁴細胞／マウスとなるようにＩ．Ｖ．投与する。次に、上述のようにして予めＣａｎｄｉｄａａｌｂｉｃａｎｓ（ＭＹ１０５５）に感染させた体重１８〜２０ｇの雌のＤＢＡ／２マウスに、様々な濃度の化合物Ｉ（Ｒ₁＝−ＣＨ₂ＣＨ₂ＮＨ₂）の水溶液を連続４日間毎日２回（ｂ．ｉ．ｄ．）腹腔内（Ｉ．Ｐ．）投与することによってアッセイを行なう。対照としてのＣ．ａｌｂｉｃａｎｓ攻撃マウスには蒸留水をＩ．Ｐ．投与する。７日後、マウスを二酸化炭素ガスによって殺し、腎臓対を無菌状態で取り出し、５ｍｌの滅菌食塩液を収容した滅菌ポリエチレン袋に入れる。腎臓を袋内でホモジナイズし、滅菌食塩液で段階的に稀釈し、アリコートをＳＤＡプレートの表面に展延する。プレートを３５℃で４８時間インキュベートし、酵母コロニーを計数して腎臓１ｇ当たりのコロニー形成単位（ＣＦＵ）を決定する。抗生活性を有する幾つかのエキノカンジン化合物を含めた幾種かの薬物がもたらす、有害でかつ場合によっては致命的である副反応に赤血球溶解が有るが、この反応を、本発明の核を有する化合物は惹起せず、このことは本発明の化合物のもう一つの利点である。本発明の化合物は、免疫低下患者のＰｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓｃａｒｉｎｉｉ感染を抑制または緩和するのにも有用である。本発明の化合物が有する治療または抗感染効力は免疫抑制ラットでの試験において実証し得、この試験ではＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（体重約２５０ｇ）を飲用水中のデキサメタゾン（２．０ｍｇ／ｌ）で免疫抑制し、このラットに低タンパク質の食事を７週間与え続けてＰｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ属肺炎潜伏感染からの発症を誘発する。薬物治療前に２匹のラットを殺してＰｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓｃａｒｉｎｉｉ肺炎（ＰＣＰ）の存在を確認する。５匹のラット（体重約１５０ｇ）に、０．２５ｍｌの賦形剤（蒸留水）中の化合物Ｉを毎日２回ずつ４日間皮下（ｓｃ）注射する。賦形剤対照も行なう。治療期間中、総ての動物に飲用水中のデキサメタゾンと低タンパク質の食事とを与え続ける。治療完了時点で総ての動物を殺し、肺を取り出して処理し、嚢胞の存在に関する染色スライドの顕微鏡検査によって疾患の程度を決定する。治療しなかった対照即ち溶媒対照の肺に生じた嚢胞の数に比較すると、治療ラットの肺のスライドでは嚢胞の発生予防または減少が認められる。本発明の化合物を医薬に許容可能なキャリヤと、通常の医薬配合技術に従い配合して新規な医薬組成物を調製すれば、優れた特性を最も有効に利用できる。上記新規な組成物は活性化合物を、少なくとも治療に有効な抗真菌または抗Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ属（ａｎｔｉｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ）量で含有する。この組成物は通常、化合物Ｉ、または成分のうちの１種を少なくとも１重量％含有する。使用前に稀釈するのに適した濃縮組成物は９０重量％以上を含有し得る。組成物には、経口投与、局所投与、（腹腔内、皮下、筋肉内及び静脈内投与を含めた）非経口投与、鼻腔内投与及び坐剤としての投与、または通気に適した組成物が含まれる。組成物は、化合物Ｉを所望の媒質に適した成分と十分混合することによって事前包装可能である。経口投与用に調製した組成物は液体組成物または固体組成物であり得る。液体製剤の場合は治療薬を水、グリコール、油、アルコール等のような液体キャリヤと配合し得、カプセル剤及び錠剤などの固体製剤の場合には、通常結合剤、崩壊剤等と共にステアリン酸カルシウムなどの滑沢剤を伴う澱粉、砂糖、カオリン、エチルセルロース、炭酸カルシウム及び炭酸ナトリウム、リン酸カルシウム、タルク、ラクトースといった固体キャリヤと配合し得る。投与が容易なことから、錠剤及びカプセル剤が最も有利な経口投与形態である。投与が容易となり、かつ投与量が均一となるように組成物を（後段に定義する）単位投与形態に調製すれば特に有利である。単位投与形態の組成物は本発明の一特徴を成し、注射用の場合は油性賦形剤、または０．８５％の塩化ナトリウムもしくは５％のデキストロースを含有する水などの水性賦形剤を媒質とする懸濁液、溶液または乳濁液などの形態とし得、かつ懸濁化剤、安定剤及び／または分散剤などの製剤用薬剤を含有させ得る。緩衝剤、及び食塩液またはグルコースなどの添加物を添加することによって溶液を等張性とすることができる。静脈内点滴投与のために化合物をアルコール／プロピレングリコールまたはポリエチレングリコールに溶解させることも可能である。これらの組成物はまた、好ましくは防腐剤を添加してアンプルまたは多回投与容器に収容した単位投与形態で提供し得る。あるいは他の場合には、活性成分を、投与前に適当な賦形剤で液体に戻すべく粉末状とし得る。本明細書及び請求の範囲の項目中に用いた“単位投与形態”という語は、医薬用キャリヤとの関連で所望の治療効果を上げるべく算出した所定量の活性成分を各々含有する、物理的に別個の単位を意味する。このような単位投与形態の例には、錠剤、カプセル剤、丸剤、分包散剤、カシェ剤を用いる製剤、計量してアンプルまたは多投与容器に収容された単位等が有る。本発明の単位投与形態は通常、本発明の化合物の一つを１０〜２００ｍｇ含有する。化合物が抗真菌用である場合は任意の投与方法を用い得る。真菌感染の治療ではしばしば経口投与が好ましい。化合物をＰｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ属感染の制御に用いる場合は、肺及び気管支を直接治療することが望ましい。この理由から吸入法が好ましい。吸入による投与のためには、本発明の化合物をエアゾル剤型噴霧剤の形態で加圧包装容器または噴霧器から放出すると都合が好い。吸入のために好ましい放出系は計測投与量吸入（ＭＤＩ）エアゾル剤であり、このエアゾル剤は、化合物Ｉをフルオロカーボンや炭化水素といった適当な噴射剤に加えた懸濁液として調製し得る。以下の実施例は、化合物Ｉの製造法並びに化合物Ｉの治療用途への適用に有用な化合物Ｉの組成物を例示するものであるが、これらを制限的なものと看做してはならない。実施例１無水ジメチルスルホキシド中の出発材料である化合物Ａ（式中Ｒ₂＝ｐ−φ− φ−φ−ＯＣ₅Ｈ₁₁−ｎ）、塩酸エタノールアミン（３６当量）及び１，４−ジオキサン中の４．０ＭのＨＣｌ（１当量）の溶液を２５℃で２．５日間撹拌する。反応混合物のＨＰＬＣ分析（ＲＰ−Ｃ１８、ＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏ（０．１％ＣＦ₃ ＣＯＯＨ）、ＵＶ＠２１０及び２７７ｎｍ）によってより極性の大きい生成物への変換が検知される。混合物を水で５倍に希釈する。ＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏ（０．１％のＣＨ₃ＣＯＯＨ）で溶離する、この溶液の分取５％の段階勾配ＲＰ１８− ＨＰＬＣは、２７７ｎｍで紫外線モニターされる。生成物含有画分をあわせ、凍結乾燥し、上記のアミノエチルエーテルをＨＣｌ／ＣＨ₃ＣＯＯＨの混合塩として得る。混合塩を水に溶解し、この溶液をＡＧ２−Ｘ８（Ｃｌ^-）イオン交換カラム（ＢｉｏＲａｄ）に装填する。２倍のカラム量の水で溶離し、溶離液を凍結乾燥して生成物の化合物Ｉａ（配列番号１）を塩酸塩として得る：Ｃ₆₀Ｈ₇₈ＣｌＮ₉Ｏ₁₈、分子量＝１２４８．８。実施例２類似の方法で、無水ジメチルスルホキシド中の、化合物Ａ（式中Ｒ₂＝ｐ，ｐ ′−φ−φ−ＯＣ₈Ｈ₁₇）、塩酸エタノールアミン（３６当量）及び１，４−ジオキサン中の４．０ＭのＨＣｌの溶液（１当量）を２５℃で２．５日間撹拌する。反応混合物のＨＰＬＣ分析（ＲＰ−Ｃ１８、ＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏ（０．１％ＣＦ₃ＣＯＯＨ）、ＵＶ＠２１０及び２７７ｎｍ）によってより極性の大きい生成物への変換が検知されたら、混合物を水で５倍に希釈する。ＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏ（０．１％の酢酸）で溶離する、この溶液の分取５％の段階勾配ＲＰ１８−ＨＰＬＣは、２７７ｎｍで紫外線モニターされる。生成物含有画分を合わせ、凍結乾燥し、上記の化合物ＩｂをＨＣｌ／ＣＨ₃ＣＯＯＨの混合塩として得る。混合塩を水に溶解し、溶液をＡＧ２−Ｘ８（Ｃｌ^-）イオン交換カラム（ＢｉｏＲａｄ）に装填して塩酸塩を得る。２倍のカラム量の水で溶離し、溶離液を凍結乾燥して生成物の化合物Ｉｂ（配列番号１）を塩酸塩として得る：Ｃ₅₇Ｈ₈₀ＣｌＮ₉Ｏ₁₈、分子量＝１２１４．８。実施例３実施例１及び２に記載したのと類似の方法で、化合物Ａ（式中Ｒ₂は）、過剰な塩酸エタノールアミン（３６当量）及び１，４−ジオキサン中の４．０ＭのＨＣｌをすべて無水ジメチルスルホキシド中で約２．５日間又はＨＰＬＣ分析によってより極性の大きい生成物への変換が検知されるまで撹拌する。生じた溶液を水で希釈し、ＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏ（０．１％のＣＨ₃ＣＯＯＨ）で溶離し、２７７ｎｍでモニタリングする分取５％の段階勾配ＲＰ１８−ＨＰＬＣを実施する。生成物含有画分を合わせ、凍結乾燥してアミノエチルエーテルをＨＣｌ／ＣＨ₃ ＣＯＯＨの混合塩として得る。前に記載したようにイオン交換カラムＡＧ２−Ｘ８（Ｃｌ^-）を使用して混合塩を塩酸塩に変換する：Ｃ₆₃Ｈ₉₀Ｃｌ₂Ｎ₁₀Ｏ₁₈、分子量＝１３４６．４。実施例４前記実施例と類似の方法で操作し、化合物Ｉｄ、Ｃ₆₆Ｈ₁₀₀Ｃ₁₃Ｎ₁₁Ｏ₁₈、分子量＝１４４２．０を得る。実施例前記実施例に記載したのと類似の方法で操作し、以下の化合物を製造する：実施例１３実施例１の化合物を各５００ｍｇずつ含む１０００個の堅いゼラチンカプセルを以下の配合から製造する：化合物グラム実施例１の化合物５００澱粉２５０ラクトース７５０タルク２５０ステアリン酸カルシウム１０ブレンドすることによって成分の均一な混合物を製造し、２ピースの固いゼラチンカプセルに装填するのに使用する。実施例１４以下の配合を有するエアロゾル組成物を製造してもよい：１キャニスター実施例１の化合物２４ｍｇレシチンＮＦ濃縮液１．２ｍｇトリクロロフルオロメタン、ＮＦ４．０２６ｇジクロロジフルオロメタン、ＮＦ１２．１５ｇ実施例１５実施例２の化合物を各５００ｍｇずつ含む１０００個の打錠錠剤を以下の配合から製造する：化合物グラム実施例２の化合物５００澱粉７５０含水の第二リン酸カルシウム５０００ステアリン酸カルシウム２．５微粉末の成分をよく混合し、１０％の澱粉糊とともに顆粒化する。顆粒化物を乾燥し、錠剤に打錠する。出発材料の製造米国特許第５，０２１，３４１号、１９９１年６月４日に記載のとおり主要炭素源としてのマンニトールを補強した栄養培地でＺ．ａｒｂｏｒｉｃｏｌａＡＴＣＣ２０８６８をまず培養してｐｎｅｕｍｏｃａｎｄｉｎＢ₀を得ることによって出発材料の化合物Ａを得てもよい。まずＥｘｐｅｒｅｎｔｉａ３４，１６７０（１９７８）、米国特許第４，２９３，４８２号又はＥＰＡ０４５１９５７号１９９１年１０月１６日に記載したようにＰｓｅｕｄｏｍｕｎｄａｃｅａｅ又はＡｃｔｉｎｏｐｌａｎａｃｅａｅの科の微生物を培養することによって脱アシル化酵素を得、実質的な脱アシル化が起こるまでｐｎｅｕｍｏｃａｎｄｉｎＢ₀を該酵素と栄養培地で反応させることによってｐｎｅｕｍｏｃａｎｄｉｎＢ₀を化合物Ａに変換し、その後脱アシル化したシクロペプチドを回収し、慣用の手順を使用して脱アシル化シクロペプチドを適切な活性エステルＲ₂ＣＯＸと混合することで該シクロペプチドをアシル化して所望のアシル基を有する化合物Ｉを得てもよい。活性エステルＲ¹ＣＯＸは以下の例で示されるとおり当業者に既知の方法によって製造し得る。どんな活性エステルでもよいが、ここでは化合物はペンタフルオロフェニルエステルで示されている。アルコキシテルフェニル側鎖の製造：テルフェニルカルボン酸エステルを以下の特定の例で示された以下の反応順序によって製造してもよい：Ａ：ペンチルオキシ置換テルフェニルカルボン酸の製造パートＡ：４−（４−ｎ−ペンチルオキシフェニル）ブロモベンゼンジメチルスルホキシド４００ｍｌ中の４−（４−ブロモフェニル）フェノール（化合物（ａ））２５．５ｇの撹拌溶液に、２．５ＮのＮａＯＨを４０．９ｍｌ、次に臭化ｎ−ペンチルを１２．７ｍｌ添加し、生じた混合物を７０℃で１８時間加熱し、混合物中に化合物（ｂ）を得た。混合物を酢酸エチル１０００ｍｌと水５００ｍｌとに分配し、水とブラインで洗浄し乾燥した後で有機層から化合物（ｂ）３０．９ｇを白い固体として得た。¹ ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ０．９３（ｔ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、３Ｈ）、１．４１（ｍ、４Ｈ）、１．７９（ｍ、２Ｈ）、３．９７（ｔ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、２Ｈ）、６．９４（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、２Ｈ）、７．３９（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、２Ｈ）、７．４５（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、２Ｈ）、７．５１（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、２Ｈ）。パートＢ：４−（４−ｎ−ペンチルオキシフェニル）フェニルボロン酸無水テトラヒドロフラン２０ｍｌ中の化合物（ｂ）１．０ｇの撹拌懸濁液に−７８℃で窒素下でヘキサン中の２．５Ｍのｎ−ブチルリチウム１．３２ｍｌを添加した。１５分後、ホウ酸トリイソプロピル０．７６０ｍｌを添加し、−７８℃で１５分間、次いで２５℃で４０分間撹拌を継続した。混合物を酸性化し、エーテルと水とに分配し、反応混合物中にボロン酸化合物（ｃ）を得た。水及びブラインで洗浄し、乾燥することで化合物を回収し、４−（４ −ｎ−ペンチルオキシフェニル）フェニルボロン酸７５０ｍｇを以下の¹ＨＮＭＲを有する白い固体として得た。¹ ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ０．８９（ｔ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、３Ｈ）、１．３８（ｍ、４Ｈ）、１．７２（ｍ、２Ｈ）、３．９９（ｔ、Ｊ＝６．５Ｈｚ、２Ｈ）、６．９９（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、２Ｈ）、７．５７（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、２Ｈ）、７．６０（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、２Ｈ）、７．８３（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、２Ｈ）。パートＣ：４″−（ｎ−ペンチルオキシ）−［１，１′：４′，１″−テルフェニル］−４−カルボン酸ペンタフルオロフェニル１１ｍｌのエタノール及び３０ｍｌのトルエン中のボロン酸１．０ｇ及び４−ヨード安息香酸０．０８７４ｍｌの撹拌混合物に２Ｍの炭酸ナトリウム水溶液５．３ｍｌ、次いでテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム２０４ｍｇを添加し、反応混合物を還流下（１００℃）で１８時間加熱した。その後、混合物を冷却し、酸性化して酢酸エチルと水とに分配した。有機層を水及びブラインで洗浄し、脱水し、次いでセライト床を通してろ過し、溶剤の除去及びフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーによる精製後に４″− （ｎ−ペンチルオキシ）−［１，１′４′，１″−テルフェニル］−４−カルボン酸を得た。¹ ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ０．８９（ｔ、３Ｈ）、１．３７（ｍ、４Ｈ）、１．７２（ｍ、２Ｈ）、３．９８（ｔ、２Ｈ）、７．０１（ｄ、２Ｈ）。酢酸エチル中の４″−（ｎ−ペンチルオキシ）−［１，１′：４′，１″−テルフェニル］−４−カルボン酸（１０．５ミリモル）及びジシクロヘキシルカルボジイミド（１０．５ミリモル）の混合物に０℃でペンタフルオロフェノール（１１．５ミリモル）を添加する。混合物を２５℃で１８時間撹拌して沈殿物を得る。混合物をろ過する。ろ液を水及びブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水する。溶剤を真空下で除去後、４″−（ｎ−ペンチルオキシ）−［１，１′：４′ ，１″−テルフェニル］−４−カルボン酸ペンタフルオロフェニル、Ｃ₃₀Ｈ₂₃Ｆ₅ Ｏ₃、分子量＝５２６．５を得る。アルコキシビフェニル側鎖の製造ビフェニルカルボン酸エステルを以下に例示の反応順序によって得てもよい：Ａ：オクチルオキシビフェニルカルボン酸の製造臭化ｎ−オクチル（０．１０２モル）を４−（４−ヒドロキシフェニル）安息香酸（０．１０２モル）と２．５Ｎの水酸化ナトリウム（０．１０２モル）の溶液に添加し、混合物を７０℃で１８時間撹拌する。反応混合物を冷却し、次いでｐＨ３に酸性化し、酢酸エチルと水とに分配する。有機層を水及びブラインで洗浄し、次いで溶剤を除去して４′−ｎ−オクチルオキシ［１，１′−ビフェニル］−４−イルカルボン酸Ｃ₂₁Ｈ₂₃Ｏ₃、分子量＝３２６．４を得る。Ｂ：ペンタフルオロフェニルエステルの製造ペンタフルオロフェノール（１１．５ミリモル）を酢酸エチル中の４′−ｎ− オクチルオキシ［１，１′−ビフェニル］−４−イルカルボン酸１０．５ミリモル及びジシクロヘキシルカルボジイミド１０．５ミリモルの混合物に添加する。混合物を２５℃で１８時間撹拌すると沈殿物が形成される。反応混合物をろ過し、ろ液を水及びブラインで洗浄し、溶剤を真空下で除去して４′−ｎ−オクチルオキシ［１，１′−ビフェニル］−４−イルカルボン酸ペンタフルオロフェニル、Ｃ₂₇Ｈ₂₅Ｆ₅Ｏ₃、分子量＝４９２．５を得る。アミノエチルオキシビフェニル側鎖の製造４′−（２−［４−シクロヘキシルメチルピペリジン−１−イル］エトキシ）− ［１，１′−ビフェニル］−４−イルカルボン酸ペンタフルオロフェニルエステルの製造パートＡ：４−シクロヘキシルメチルピペリジンの製造ＰｔＯ₂（約５０重量％）を含む氷酢酸に４−ベンジルピペリジンを溶解する。Ｐａａｒ水素添加器を使用し、反応容器をＨ₂でフラッシュし、３ａｔｍに加圧する。芳香族環を還元するのに十分な時間混合物を震盪し、３モル当量のＨ₂ の消費によって判定して完全に飽和な生成物にする。黒い固体をろ過し、酢酸を減圧下で蒸発によって除去し、酢酸塩として生成物を得る。パートＢ：１−（２−ヒドロキシエチル）−４−シクロヘキシルメチルピペリジンの製造パートＡからの生成物（１．０ｅｑ）を等モル量のジイソプロピルエチルアミンを含むジクロロメタンに溶解する。酸化エチレン（１０ｅｑ）を添加し、出発材料が消費されるまで混合物を撹拌する。溶剤を真空下で除去し、カラムクロマトグラフィーによって精製することによって所望の生成物を得る。パートＣ：４′−（２−［４−シクロヘキシルメチルピペリジン−１−イル］エトキシ）−［１，１′− ビフェニル］−４−イルカルボン酸の製造４′−ヒドロキシ−［１，１′−ビフェニル−４−イルカルボン酸メチルエステル（１．０ｅｑ）をジクロロメタンに溶解し、トリフェニルホスフィン（１．３ｅｑ）とパートＢからのヒドロキシエチル化合物（１．０ｅｑ）を添加する。次にアゾカルボン酸ジエチル（１．３ｅｑ）を添加し、出発材料が消費されるまで混合物を撹拌する。混合物をジクロロメタンで希釈し、水で洗浄する。有機層をＭｇＳＯ₄で脱水し、ろ過する。溶剤を真空下で除去し、残留物をエタノールに溶解する。過剰な３Ｎの水酸化ナトリウムを添加し、混合物を数時間撹拌する。反応物を２ＮのＨＣＩで中和し、酢酸エチルで抽出する。酢酸エチル層をＭｇＳＯ₄で脱水し、ろ過し、溶剤を減圧下で蒸発する。所望の生成物をカラムクロマトグラフィーによって実質的に純粋な形で得る。パートＤ：ペンタフルオロフェニルエステルの製造カルボン酸（１．０ｅｑ）及びジシクロヘキシルカルボジイミド（１．０ｅｑ）を酢酸エチルに溶解し、溶液を０℃に冷却する。ペンタフルオロフェノール（１．０５ｅｑ）を添加し、次いで氷浴を除去し、反応物を周囲温度で１８〜２４時間撹拌する。等量のエーテルを添加し、混合物をろ過し、溶剤を真空下で除去する。生成物（分子量＝５８７．６４）は十分純粋であるので核のアシル化にそのまま使用する。４′−（２−［４−ウンデシルピペラジン−１−イル］エトキシ）［１，１′− ビフェニル］−４−イルカルボン酸ペンタフルオロフェニルエステルの製造パートＡ：４−ウンデシルピペラジンの製造過剰なピペラジン（５ｅｑ）及び１−ブロモウンデカン（１．０ｅｑ）をジクロロメタンに溶解し、一晩反応させる。混合物を重炭酸ナトリウム水で抽出し、有機層を硫酸ナトリウムで脱水する。混合物をろ過し、溶剤を真空下で除去し、残留物をカラムクロマトグラフイーで精製する。パートＢ：１−（２−ヒドロキシエチル）−４−ウンデシルピペラジンの製造上記の置換ピペラジン（１．０ｅｑ）をｎ−プロパノールに溶解し、ブロモエタノール（１．０ｅｑ）をジイソプロピルエチルアミン（１．１ｅｑ）とともに添加する。数時間後、溶剤を真空下で除去し、残留物をジクロロメタンに溶解する。有機層を水、次いで重炭酸ナトリウム水で洗浄する。有機層をＭｇＳＯ₄で脱水し、ろ過する。溶剤を真空下で除去し、次いでカラムクロマトグラフィーで精製する。パートＣ：カルボン酸の製造手順はパートＣの記載と本質的に同じであるが、但し前記からのヒドロキシエチルピペラジンをヒドロキシエチルピペリジンの代わりに使う。パートＤ：ペンタフルオロフェニルエステルの製造手順はパートＤと類似であるが、但しピペラジニル置換ビフェニルカルボン酸を使用する。生成物（分子量＝６４６．７５）は十分純粋であるので核のアシル化にそのまま使用する。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＦＩ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＶ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ (72)発明者ブーフアード，フランシス・アイリーンアメリカ合衆国、ニユー・ジヤージー・ 07076、スコツチ・プレーンズ、クーパー・ロード・1521 (72)発明者ドロピンスキー，ジエームズ・エフアメリカ合衆国、ニユー・ジヤージー・ 08854、ピスカタウエイ、ハンプシヤー・コート・307

Claims

【特許請求の範囲】１．式〔式中Ｒ₁は −ＣＨ₂ＣＨ（ＮＨ₂）ＣＨ₂Ｒ^I、 −Ｃ_nＨ_2nＮＲ^IIＲ^III、 −（ＣＨ₂）₁〜₃ＣＨ（ＮＨ₂）Ｒ^IV、または −Ｃ_nＨ_2nＮＨＲ^V であり、その際ｎは２〜６であり、Ｒ₂はであり、前記式中Ｒ^aはＣ₁〜Ｃ₁₀アルキル、または（ＣＨ₂）_qＮＲ^bＲ^cであり、その際Ｒ^b及びＲ^cは互いに独立にＨ、もしくはＣ₁−Ｃ₁₀アルキルであるか、またはＲ^b及びＲ^cは一緒になってを構成し、前記式中Ｒ^dはＣ₁〜Ｃ₁₆アルキル、フェニル、またはベンジルであり、Ｒ^Iは −ＯＨ、 −ＮＨ₂、 −ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ₂、または −ＮＨＣ（＝ＮＨ）（ＣＨ₂）₀〜₃Ｈであり、Ｒ^IIは −Ｈ、 −Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル、または −ベンジルであり、ＲＮ^IIIは −Ｈ、 −Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル、または −ベンジルであり、あるいはＲ^IIとＲ^IIIとは一緒になって−（ＣＨ₂）₄−または−（ＣＨ₂）₅−を構成し、Ｒ^IVは −Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル、または −ＣＯＮＨ₂ であり、Ｒ^Vは −Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ₂、 −Ｃ（＝ＮＨ）（ＣＨ₂）₀〜₃Ｈ、 −（ＣＨ₂）_2〜4ＮＨ₂、 −（ＣＨ₂）_2〜4ＯＨ、 −ＣＯ（ＣＨ₂）_1〜3ＮＨ₂、 −（ＣＨ₂）_2〜4ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ₂、 −（ＣＨ₂）_2〜4ＮＨＣ（＝ＮＨ）（ＣＨ₂）_0〜3Ｈ、またはであり、ｐは整数１または２であり、ｑは整数２〜４である〕を有する化合物（配列番号１）とその医薬に許容可能な塩。２．式を有することを特徴とする請求項１に記載の化合物。３．式を有することを特徴とする請求項１に記載の化合物。４．式を有することを特徴とする請求項１に記載の化合物。５．式を有することを特徴とする請求項１に記載の化合物。６．医薬に許容可能なキャリヤ中に存在する抗微生物量の請求項１の化合物を含有する抗生組成物。７．単位投与形態において請求項１の化合物を１０〜２００ｍｇの量で含有することを特徴とする請求項６に記載の組成物。８．ヒト以外の動物の真菌感染を治療する方法であって、治療を必要とする被検者に治療量の請求項１の化合物を投与することを含む方法。９．ヒト以外の動物のＰｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓｃａｒｉｎｉｉ感染を治療する方法であって、治療量の請求項１の化合物を投与することを含む方法。１０．Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓｃａｒｉｎｉｉに感染したヒト以外の動物である免疫低下患者の肺に形成された嚢胞を減少させる方法であって、有効量の請求項１の化合物を投与することを含む方法。