JPH09503526A - 新規な皮膚疾患用医薬組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、新規な皮膚疾患用医薬組成物、特に火傷、創傷、一般的な手術による創傷、凍瘡、床ずれ、毛包炎、膿痴疹、間擦疹、放射線による潰瘍、尋常性座疹または湿疹様感染性皮膚炎のような皮膚疾患の治療に有用であり、有効成分として、組織再生活性を有する子牛血液の除タンパク透析物および細菌感染抑制活性を有するアミノ配糖体抗生物質を含有する新規な医薬組成物に関するものである。

Description

【発明の詳細な説明】 新規な皮膚疾患用医薬組成物発明の分野 本発明は、新規な皮膚疾患用医薬組成物、特に有効成分として子牛血液の除タ ンパク透析物およびアミノ配糖体抗生物質を含有する皮膚疾患用医薬組成物に関 するものである。発明の背景 よく知られているように、皮膚疾患、例えば、火傷、創傷、一般的な手術によ る創傷、凍瘡、床ずれ、毛包炎、膿痂疹、間擦疹、放射線による潰瘍、尋常性座 疹または湿疹様感染性皮膚炎は、紅斑、腫脹、水庖、びらん、または潰瘍等を生 じ、細菌感染を伴う。 これらの皮膚疾患を治療するために、壊死組織の再生および繊維芽細胞の増殖 を促進することがきる組織再生活性化剤が開発されている〔「アクタ．セラポイ ティカ（Acta．Therapeutica）」第１０巻、第１０７〜１１５頁（１９８４）〕 。しかし、これらの活性化剤は治療中に病巣における細菌感染を適切に防止する ことができないことが指摘されている。 さらに、抗生物質を含有しかつ適当な皮膚保護基剤が配合されている局所投与 形態のものが同じ目的で開発されている〔ジャーナル・オブ・アンチミクロバイ アル・ケモセラピー(Journal of Antimicrobial Chemotherapy)」第１６巻、第 ５１９〜５２６頁（１９８５）〕。これらの調剤は病巣における細菌感染を部分 的に防止することができたが、壊死組織の再生および繊維芽細胞の増殖を促進す る能力に欠けているために最も好ましい治療を達成することができなかった。発明の概要 本発明者等は、異なる作用機構を有する２種の薬剤を組み合わせて、２種の成 分の溶解が細菌感染の可能性のある火傷のような皮膚疾患の治療に使用されてい る従来の軟膏またはクリームからのこれら両成分の溶解より優れている投与形態 を処方した場合には、これらの２種の薬剤の相乗作用によって皮膚機能を一層効 果的に正常化することができる、ことに着目した。そこで、本発明者等は、皮膚 疾患を治療するために、組織の再生を促進すると同時に抗細菌活性を有する有用 な医薬組成物を開発するために広範囲な研究を行ない、その結果、子牛血液の除 タンパク透析物とアミノ配糖体抗生物質とを組み合わせて皮膚疾患を治療した場 合に、皮膚疾患の優れた治療および急性皮膚疾患の発現の減少が達成されること 、を見い出した。子牛血液の除タンパク透析物は組織の再生を促進する能力を有 し、アミノ配糖体抗生物質は抗微生物活性を有し、また、子牛血液の除タンパク 透析物とアミノ配糖体抗生物質とを組み合わせると各成分の欠点が補われる。 従って、本発明の目的は、明瞭な組織再生作用および有効な抗菌作用によって 直ちに治療効果を与えることができ、かつ治療期間を短くすることができる、皮 膚疾患の治療に有用な新規な医薬組成物を提供することにある。発明の詳説 本発明は、有効成分として子牛血液の除タンパク透析物およびアミノ配糖体抗 生物質を含有する皮膚疾患の治療に有用な新規な医薬組成物を提供する。 本発明組成物の組織再生成分である子牛血液の除タンパク透析物は、特定の臓 器を摘出することによって得られる充分に生育した若い子牛の細網内皮系から血 液を抜き取り、次いで透析によってタンパク質を完全に除去することによって得 られるタンパク質を含有していない血液透析物である。子牛血液の除タンパク透 析物は、ソルコセリル（Solcoseryl）という登録商標（スイス国、ソルコ・バス ツル（Solco Bastle）社）で販売されている。この子牛血液の除タンパク透析物 は、アミノ酸、ケトン酸、オキシ酸、デオキシリボシド、プリン、未知のポリペ プチド等のような有機化合物、およびＮａ，Ｋ，Ｃａ，Ｆｅ，Ｃｏ，Ｐ，塩化物 およびＮのような無機化合物を含有していて、細胞内における酸素の利用を増加 させ、壊死組織の再生ならびに繊維芽細胞および上皮組織の形成を促進する、こ とが知られている〔「Arzneim-Forsch(Drug Res.)」第１５巻、第７５０〜７５ ４頁（１９６５）；「VASA Band」第２巻、第８１〜８３頁（１９７３）〕。 本発明組成物の細菌感染抑制成分であるアミノ配糖体抗生物質としては、硫酸 ネオマイシン、硫酸ゲンタマイシン、硫酸ミノクロマイシン、硫酸アミカシン、 硫酸カナマイシン、硫酸トブラマイシン、硫酸ネチルマイシン（netilmicin）、 硫酸ジベカシン、硫酸シソマイシン、または硫酸アストロマイシン(astromicin) があり、一層好ましいのは硫酸ミクロノマイシンである。 硫酸ミクロノマイシンはグラム陰性および陽性の両方の細菌、例えば、ブドウ 球菌属細菌、緑膿菌、プロテウス属細菌、セラチア属細菌、大腸菌、肺炎桿菌、 エンテロバクター属細菌等に対して、広範囲の抗菌活性を有するアミノ配糖体抗 生物質であり、種々の抗生物質、例えば、カナマイシンに対して耐性を有する菌 株による感染に対して有効な殺菌活性を有し、副作用も比較的小さい〔「ケモセ ラピー（Chemotherapy）」第２５巻、第１８４４〜１８５０頁（１９７７）；「 ケモセラピー」第２５巻、第１９４３〜１９５１頁（１９７７）〕。 本発明において、子牛血液の除タンパク透析物とアミノ配糖体抗生物質とを組 み合わせて投与することによって生じる治療効果は、各成分を別個に投与するこ とによって生じる治療効果より大きい。特に、本発明の医薬組成物における各成 分の量を制御することによって、組織再生の促進中に繊維芽細胞の増殖と上皮組 織の形成とをバランスさせて、痕跡を最小にすることができる。 本発明において、子牛血液の除タンパク透析物およびアミノ配糖体抗生物質の 含有量は、それぞれ、全組成物の１〜３０w/w％および0.1 〜２w/w％である。子 牛血液の除タンパク透析物およびアミノ配糖体抗生物質の含有量は、それぞれ、 全組成物の５〜２０w/w％および0.3 〜１w/w％であるのが一層好ましい。 本発明の医薬組成物は、該組成物の安定性を大きくするため、およびゲル、ゲ ル−クリーム、または局所用液体溶液にするために、ベース剤（base）のような 医薬として許容できる担体の１種または２種以上、安定剤、乳化剤を含有するこ とができる。 本発明の医薬組成物は、ベース剤としてポロキサマー(poloxamer)、カルボキ シメチルセルロース・ナトリウム、またはカルボマー（carbomer）を、安定剤と して塩化ナトリウムまたは水酸化ナトリウムを、乳化剤としてセテアリル(cetea ry）オクタノエートのようなＷ／Ｏ型界面活性剤、Ｏ／Ｗ型界面活性剤、または これらの混合物を、湿潤剤としてプロピレングリコールまたはグリセリンを含有 することができる。 本発明の医薬組成物は、ポロキサマー１８〜２２w/w％、プロピレングリコー ル１〜５w/w％、および塩化ナトリウム0.5 〜３w/w％を含有するゲルにすること ができる。 本発明の医薬組成物は、ポロキサマー１８〜２２w/w％、プロピレングリコー ル１〜５w/w％およびセテアリルオクタノエート５〜１５w/w％を含有するゲル− クリームにすることができる。 本発明の医薬組成物は、プロピレングリコール５〜１５w/w％を含有する局所 用液体溶液にすることができる。 しかし、本発明の医薬組成物中の上述の担体の量は、溶解速度および硫酸ミク ロノマイシンの外観に応じて、変えることができる。 本発明の医薬組成物は、従来の局所用投与形態で、皮膚疾患の病巣に１〜２回 ／日適用することができる。 本発明の医薬組成物の優れた活性を立証するために、本発明者等は長期間の研 究を行って成分比を規定し、次いで最適比を適用して、創傷のような皮膚疾患を 一層有効に治癒することができる医薬組成物を得ることができた。 特に、本発明者等は、本発明組成物の成分比を変えることによって、組織再生 に関する研究および局所的抗菌活性に関する研究を行った。本発明者等は、組織 再生の研究を行うために動物モデル〔「薬剤学(YAKUZAIGAKU)」第５３巻、第３ 号、第１８５〜１９０頁（１９９３）〕を、また局所的抗菌活性の研究を行うた めに動物モデル〔「アンチミクロビアル・エイジエンツ・アンド・ケモセラピー (Antimicrobial Agents and Chemotherapy)」第１０巻、第１号、第３８〜４４ 頁（１９７６）〕を、そのままあるいは修正して使用した。 その結果、子牛血液の除タンパク透析物と硫酸ミクロノマイシンとの組み合わ せを使用して治療したグループは、子牛血液の除タンパク透析物または硫酸ミク ロノマイシンを単独使用して治療したグループより、組織再生活性および局所的 抗菌活性に関して、良好な結果を示した。この結果は、子牛血液の除タンパク透 析物および硫酸ミクロノマイシンを含有する本発明の医薬組成物が、個々の成分 を含有する医薬組成物より大きい活性を有することを立証するものである。従っ て、これらの実験は、本発明の医薬組成物が皮膚組織の再生を促進するとともに 、強力な治療効果を有することを示している。さらに、本発明の医薬組成物は治 療期間を短縮することができる。 本発明者等は、医薬組成物中の成分間の医薬としての不適合性についての実験 および経時変化における安定性の試験を行った。その結果、本発明の医薬組成物 の成分は、医薬としての不適合性を有しておらず、長期間貯蔵中安定である、こ とが明らかになった。 以下の試験例および実施例は本発明のつくつかの面を例示するためのものであ って、本発明の範囲を限定するものであると解釈すべきではない。 以下の試験例、実施例および比較例において使用する用語および略語は、特記 しない限り、その通常の意味を有し、例えば「℃」は摂氏温度計の温度を示し、 「ｇ」はグラムを示し、「ｍｌ」はミリリットルを意味する。試験例１ 組織再生活性の検討 雄ＩＣＲマウスの背面に複数の創傷（直径１ｃｍ）を作った。 これらの開放創傷を医薬組成物で２週間の間１日に２回局所的に治療した。 特記しない限り用量は０．３ｇ／創傷とした。医薬組成物を使用した組成再生 活性試験の結果を表１に示す。 表１は、子牛血液の除タンパク透析物および硫酸ミクロノマイシンの両方を含 有する医薬組成物が、子牛血液の除タンパク透析物を単独で含有するか、あるい は硫酸ミクロノマイシンを単独で含有する医薬組成物より大きい創傷治癒活性を 有する、ことを示す。特に、グループ４はグループ１と比較して有意に優れた治 癒効果を示すが、グループ５はグループ１と比較して顕著な治療効果を示さなか った。 これは、上述の結果が繊維芽細胞の壊死と上皮組織の形成とのアンバランスに 起因することを示唆している。 結果として、子牛血液の除タンパク透析物（１５〜２０w/w％）と硫酸ミクロ ノマイシン（０．５ｗ／ｗ％）との組み合わせを使用した場合に、治療効果を得 ることができる。特に、子牛血液の除タンパク透析物１０w/w％および硫酸ミク ロノマイシン０．５w/w％を含有する医薬組成物が最大の治療効果を示す。試験例２ 局所的抗菌活性の検討 雄ＩＣＲマウスの背面に複数個の創傷（直径１ｃｍ）を作った。 各グループを１０匹のマウスから構成した。創傷を１×１０⁴ ＣＦＵ（Colony Forming Unit（コロニー形成単位））の黄色ブドウ球菌で処理した。直接感染 させてから１日後に、創傷を本発明の医薬組成物によって２週間の間１日２回局 所的に治療した。 本発明組成物の投与前および投与後に創傷におけるＣＦＵの数を算えた。用量 は特記しない限り０．３ｇ／創傷とした。本発明組成物を使用した局所的抗菌活 性試験の結果を表２に示す。 表２は、子牛血液の除タンパク透析物および硫酸ミクロノマイシンの両方を含 有する医薬組成物が、子牛血液の除タンパク透析物を単独で含有するか、あるい は硫酸ミクロノマイシンを単独で含有する医薬組成物より、局所的抗菌活性の点 においても大きい活性を有する、ことを示す。これらの優れた治療効果は、創傷 における組織再生の増大および細菌感染の減少の両方に起因する。その結果、本 発明の医薬組成物は大きな治療効果を有し、組織修復の促進によって治療期間を 短縮する。実施例１ ゲル 硫酸ミクロノマイシン ０．５ｇ ソルコセリル ５．０ｇ ポロキサマー １８．０ｇ プロピレングリコール ３．０ｇ 塩化ナトリウム ０．９ｇ ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチル ０．１８ｇ ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル ０ ０２ｇ 純水 充分な量 予め５℃より低い温度に冷却した５０ｇの純水中に、硫酸ミクロノマイシン、 ソルコセリルおよび塩化ナトリウムを溶解した。かきまぜながら、この溶液にポ ロキサマーを小部分づつ添加して懸濁液を作った。この懸濁液は、５℃より低い 温度で２４時間静置しておくと、透明溶液（溶液Ａ）になった。保存剤をプロピ レングリコール中に懸濁させた混合物を加熱して透明溶液（溶液Ｂ）とした後、 この溶液を溶液Ａにかきまぜながら添加して均一な溶液を作り、次いで純水を添 加して１００ｇのゲルを作った。従来法を使用して充填プロセスを行った。実施例２ ゲル−クリーム 硫酸ミクロノマイシン ０．５ｇ ソルコセリル ５．０ｇ ポロキサマー ２０．０ｇ プロピレングリコール ３．０ｇ セテアリル オクタノエート １０．０ｇ ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチル ０．１５ｇ ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル ０．０２ｇ 純水 充分な量 予め５℃より低い温度に冷却した５０ｇの純水中に、硫酸ミクロノマイシンお よびソルコセリルを溶解した。かきまぜながら、この溶液にポロキサマーを小部 分づつ添加して懸濁液を作った。この懸濁液は、５℃より低い温度で２４時間静 置しておくと、透明溶液（溶液Ａ）になった。保存剤をプロピレングリコール中 に懸濁させた混合物を加熱して透明溶液（溶液Ｂ）とした後、この溶液を溶液Ａ にかきまぜながら添加して均一な溶液を作り、次いでセテアリルオクタノエート を添加し、かきまぜながら乳化させて１００ｇのゲル−クリームを作った。従来 法を使用して充填プロセスを行った。実施例３ 局所用液体溶液Ｉ 硫酸ミクロノマイシン ０．５ｇ ソルコセリル ５．０ｇ ポロキサマー ８．０ｇ プロピレングリコール ３．０ｇ ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチル ０．１８ｇ ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル ０．０２ｇ 純水 充分な量 予め５℃より低い温度に冷却した５０ｇの純水中に、硫酸ミクロノマイシンお よびソルコセリルを溶解した。かきまぜながら、この溶液にポロキサマーを小部 づつ添加して懸濁液を作った。保存剤をプロピレングリコール中に懸濁させた混 合物を加熱して透明溶液とした後、この溶液を懸濁液にかきまぜながら添加して 均一な溶液を作り、次いで純水を添加して１００ｇの局所用液体溶液を作った。 従来法を使用して充填プロセスを行った。実施例４ 局所用液体溶液II 硫酸ミクロノマイシン ０．５ｇ ソルコセリル ５．０ｇ ポロキサマー ８．０ｇ プロピレングリコール ３．０ｇ エタノール ３．０g ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチル ０．１８ｇ ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル ０．０２ｇ 純水 充分な量 塗布後の液体薄膜形成を促進するために純水の或る部分の代わりにエタノール を使用して、実施例３に記載したと同じ操作を繰り返した。この操作は次に示す 通りである：予め５℃より低い温度に冷却した５０ｇの純水中に硫酸ミクロノマ イシン、ソルコセリルおよびエタノールを溶解した。かきまぜながらこの溶液に ポロキサマーを小部分づつ添加して懸濁液を作った。保存剤をプロピレングリコ ール中に懸濁させた混合物を加熱して透明溶液とした後、この溶液を懸濁液にか きまぜながら添加して均一な溶液を作り、次いで純水を添加して１００ｇの局所 用液体溶液を作った。従来法を使用して充填プロセスを行った。比較例１ 軟膏 硫酸ミクロノマイシン ０．５ｇ ソルコセリル ５．０ｇ 白色ワセリン ７０．６４ｇ 無水ラノリン １７．６６ｇ 液体パラフィン ６．０ｇ ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチル ０．１８ｇ ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル ０．０２ｇ 白色ワセリン、無水ラノリン、液体パラフィン、ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチ ルおよびｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピルの混合物を容器に入れて８０〜８５℃ で加熱して透明溶液を得た。 この溶液を均一に混合した後、この溶液を５０℃に冷却した（溶液Ａ）。硫酸 ミクロノマイシンをソルコセリル中に溶解し、この溶液を溶液Ａに添加した後、 さらに混合して１００ｇの軟膏を得た。従来法を使用して充填プロセスを行った 。比較例２ クリーム 硫酸ミクロノマイシン ０．５ｇ ソルコセリル ５．０ｇ ワックス ６．７ｇ キサンタンガム ０．３ｇ ステアリルアルコール ６．７ｇ 液体パラフィン ４．７ｇ オクチルドデシルミリステート ６．０ｇ ブチル化ヒドロキシアニソール ０．０５ｇ ブチル化ヒドロキシトルエン ０．０５ｇ シクロデキストリン溶液 １．０ｇ クエン酸ナトリウム ０．０３ｇ プロピレングリコール ３．３ｇ コロイド状二酸化ケイ素 ０．５ｇ 微結晶セルロース ０．５ｇ ポリエチレングリコールモノステアレート ２．０ｇ アルラセル(Arlacel)１６５ １．０ｇ ソジウムエデテート(Sodium edetate) ０．１ｇ シメシコン(Simethicone) ０．５ｇ ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチル ０．１５ｇ ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル ０．０５ｇ 純水 充分な量 ワックス、ステアリルアルコール、アルラセル１６５、プロピレングリコール モノステアレート、ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル、シメシコン、ブチル化ヒ ドロキシトルエン、ブチル化ヒドロキシアニソール、オクチルドデシルミリステ ートおよび液体パラフィンの混合物を、真空乳化装置において７５〜８０℃で加 熱し、均一に溶解して溶液（溶液Ａ）とした。コロイド状二酸化ケイ素、キサン タンガム、ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチル、および微結晶セルロースを或る量の 純水中において７５〜８０℃で加熱し、均一に溶解して透明溶液（溶液Ｂ）とし た。真空乳化装置において溶液Ａに溶液Ｂを小部分づつ添加し、乳化させた（乳 濁液Ｃ）。硫酸ミクロノマイシン、プロピレングリコール、ソジウムエデテート 、液体パラフィン、およびクエン酸ナトリウムを別の容器内で或る量の純水中に 添加し、次いで均一に溶解した（溶液Ｄ）。 乳化完了後に乳濁液Ｃを５０℃に冷却し、乳濁液Ｃに溶液Ｄをかきまぜながら 添加して１００ｇのクリームを作った。試験例３ 硫酸ミクロノマイシンのインビトロ溶解 実施例および比較例で製造したゲル、ゲル−クリーム、局所用液体溶液、軟膏 およびクリームのような種々の調剤からの硫酸ミクロノマイシンの放出速度を測 定するために、１ループ(loop)の枯草菌ＡＴＣＣ６６３３をミュラー(Muller)・ ヒルトン(Hilton)肉汁中で３７℃において１８時間培養し、次いで培養肉汁をミ ュラー・ヒルトン寒天で１：１００に希釈した。この混合物をバイオアッセイ用 トレー（２４５×２４５×２０ｍｍ）中に注ぎ、固化した。この固化した培地上 に、標準硫酸ミクロノマイシン溶液および上述の前記調剤を、円板状紙（直径６ ｍｍ）を使用して載置した。この培地を室温に１時間維持した後、この培地を３ ７℃で１８時間培養し、抑制部分の直径を測定した。硫酸ミクロノマイシンの放 出 量は標準硫酸ミクロノマイシンの検量線から計算した。その結果を表３に示す。 表３は、ゲル、ゲル−クリーム、および局所用液体溶液における放出速度がク リームまたは軟膏における放出速度より大きい、ことを示す。これらの結果によ って、本発明組成物のゲル、ゲル−クリーム、および局所用液体溶液は一層望ま しい投与形態であることが証明される。試験例４ 投写形態の安定性試験 実施例および比較例で製造したゲル、ゲル−クリーム、局所用液体溶液、軟膏 およびクリームのような種々の調剤中での安定性を測定するために、軟膏、クリ ーム、ゲルおよびゲル−クリームを密閉アルミニウム管のなかに入れ、局所用液 体溶液を密閉プラスチック容器のなかに入れ、次いでこれらの容器を４０±１℃ 、７５±５％ＲＨ（相対湿度）で６ケ月間維持した。抗生物質に関する仕様書お よびアッセイ法のなかの硫酸ミクロノマイシン注射部分の実験法（韓国厚生省が 告示した通告番号第１９９２−７０号）によって硫酸ミクロノマイシンを分析し 、混合Ｌ−トレオニン、ソルビトール、バリン、アミノ酸注射部分の実験法（１ ９８５年１０月１０日付けで韓国厚生省が告示した通告番号第８５−９号）によ ってソルコセリルを分析した。 これらの結果を表４に示す。 表４は、本発明組成物が、ゲル、ゲル−クリーム、局所用液体溶液、軟膏、お よびクリーム中で３年以上の安定性を有する、ことを示す。 しかし、製造の際の経済性、有効成分の溶解、塗布の際の便宜性、優れた付着 力、有効成分の連続する効果、薄膜除去の容易さの点で、ゲルの形態が一層好ま しい。その理由は、従来の軟膏またはクリームとは異なり、塗布した際に薄膜が 形成することによって創傷が汚染物質から保護されるとともに、湿潤作用を受け ることにより、また有効成分の主効果により、治療効果を増大することができる からである。連続する治療効果および便宜性の両方を有する局所用液体溶液は、 従来のキャタプラスマ（cataplasma）より好ましい。試験例５ 担体の比率に関す硫酸ミクロノマイシンの溶出試験 実施例および比較例において同様な方法で製造され、ポロキサマー、塩化ナト リウム、プロピレングリコールおよびセテアリルオクタノエートの含有量の異な る種々の医薬組成物について、硫酸モノクロノマイシンの放出速度および外観を 試験例３におけにと同じ方法によって試験した。その結果を表５に示す。 試験例６ 毒性の検討 １．急性毒性の検討 １）供試物質 ２０：１の重量比の子牛血液の除タンパク透析物と硫酸ミクロノマイシン とからなる医薬組成物。 ２）動物 生後９週間の雄および雌のＳＤラット。 ３）供試物質の調剤 子牛血液の除タンパク透析物の溶液中で硫酸ミクロノマイシンを可溶化し た。 ４）方法 試験動物を１８時間断食させ、次いで供試物質の調剤を３３ｍｌ／ｋｇの 用量で試験動物の体幹の背面区域に皮下投与した。供試物質の投与直前に測定し た体重に対する治療程度を計算した。全動物を中毒症状または死亡について７日 間連続して注意して観察した。 ５）結果 （１）臨床的動向 ３３，２００ｍｌ／ｋｇの用量で供試物質を皮下投与した後、雄 （６匹のマウス）および５匹の雌のすべてが死亡した。２７，６６ ０ｍｌ／ｋｇの用量では５匹の雄およびすべての雌が死亡し、２３ ，１００ｍｌ／ｋｇの用量では雄の３匹のマウスおよび雌の３匹の マウスが死亡し、１９，２００ｍｌ／ｋｇの用量では雄の１匹のマ ウスおよび雌の１匹のマウスが死亡した。 死亡の場合には、活動および呼吸速度が著しく低下した。死亡時 間は２４時間以内であった。生存の場合には、時たま、活動および 呼吸速度の低下、サイベーション(saivation)、震え、および意識 の喪失が観察されることがあった。しかし、これらの動物は投与し たから１日後に正常状態に回復した。 （２）体重 供試物質を使用した治療による有意な体重変化は認められなかっ た。、 （３）全体的所見 供試物質に起因する異常な所見は認められなかった。 皮下投与による上述の毒性検討結果から考えて、全般的動向、体 重、および全体的所見には、供試物質に関連する毒性は認められな かった。ＬＤ₅₀は２３，０４７ｍｌ／ｋｇより大きいと判断された。 従って、試験した供試物質は毒性が極めて低い物質であると考えら れた。その結果を表６に示す。 ２．亜急性毒性の検討 １）供試物質 ２０：１の重量比の子牛血液の除タンパク透析物と硫酸ミクロノマイシン とからなる医薬組成物。 ２）動物 生後５週間の雄および雌のＳＤラット。 ３）供試物質の調剤 組成物における担体の比率を変えて供試物質を蒸留水に溶解した。 ４）試験条件 試験の約２４時間前に、動物の体幹の背面区域から毛髪をそって取り除 いた。供試物質を動物に、１日１回３０日間、それぞれ１．９７ｇ／ｋｇ、３． ９４ｇ／ｋｇおよび７．８８ｇ／ｋｇの用量で、２．５×２．５ｃ ｍの区域にわたって均一に塗布した。安全パラメーターとして治療期間中に行っ た検査は、臨床的動向、眼科分野、体重、食物および水の摂取量についてであっ た。 観察期間の終了後に、すべての動物について剖険を行た。そして、全体 的所見、臓器の重量測定、血液学的検査、血液の化学的検査、尿分析および組織 病理学的検査を行った。 ５）結果 供試物質をＳＤラットに、１日１回３０日間、それぞれ１．９７ｇ／ｋｇ 、３．９４ｇ／ｋｇおよび７．８８ｇ／ｋｇの用量で投与した場合に、次の結果 が観察された。 （１）臨床的動向、体重変化、および食物および水の摂取量には、供試物 質に関連する変化は認められなかった。 （２）血液学的検査、血液の化学的検査、および尿分析には、供試物質に 関連する変化は認められなかった。 （３）組織病理学的検査には、供試物質に関連する異常は認められなかっ た。 以上の結果から考えて、作用の認められないレベル（ＮＯＶＥＬ）は、 この検討の条件下では、７．８８ｇ／ｋｇの用量にわたる範囲であると判断した 。 ３．皮膚刺激についての検討 １）供試物質 ２０：１の重量比の子牛血液の除タンパク透析物と硫酸ミクロノマイシン とからなる医薬組成物。 ２）動物 体重が１．３ｋｇ〜１．８ｋｇの範囲である雄のニュージーランド白色ウ サギ。 ３）供試物質の調剤 組成物における担体の比率を変えて供試物質を蒸留水に溶解した。 ４）試験法 試験の約２４時間前に、試験動物の体幹の背面区域から毛髪をそって取 り除いた。各動物において４つの皮膚区域をそり、２つの区域を治療区域に割り 当てた。用量０．５ｇの供試物質を各動物に２４時間の間塗布しておいた。この 期間の終了後に残っている供試物質を取り除き、すべての動物について紅斑およ び浮腫の徴候を検査し、７日間にわたりドライゼ法(Draize's method)によって 応答に評点をつけた。 ５）結果 ０．５ｇの供試物質を２４時間塗布した後に、臨床的動向および体重測定 の観察を行った。 （１）全般的動向 ４時間間隔で検査した場合に、２４時間の観察期間中に供試物質 に関連すると思われる死亡または徴候は認められなかった。すべて の動物は、毒性をあとから示すことなく、正常な状態に回復した。 （２）体重 動物は治療してから１日目および２日目に僅かな体重の減少を示 したが、その後何の問題もなく正常になった。従って、この結果は 供試物質に起因する僅かな作用であり、毒作用であるとは考えられ なかった。 （３）皮膚の反応 一次刺激指数は０．３５と計算された。 この結果から考えて、試験した供試物質はウサギモデルにおいて 刺激の僅小な物質として部類分けすることができた。

【手続補正書】特許法第１８４条の８ 【提出日】１９９５年１０月１８日 【補正内容】 明細書 新規な皮膚疾患用医薬組成物発明の分野 本発明は、新規な皮膚疾患用医薬組成物、特に有効成分として子牛血液の除タ ンパク透析物およびアミノ配糖体抗生物質を含有する皮膚疾患用医薬組成物に関 するものである。発明の背景 よく知られているように、皮膚疾患、例えば、火傷、創傷、一般的な手術によ る創傷、凍瘡、床ずれ、毛包炎、膿痂疹、間擦疹、放射線による潰瘍、尋常性座 疹または湿疹様感染性皮膚炎は、紅斑、腫脹、水庖、びらん、または潰瘍等を生 じ、細菌感染を伴う。 これらの皮膚疾患を治療するために、壊死組織の再生および繊維芽細胞の増殖 を促進することがきる組織再生活性化剤が開発されている〔「アクタ．セラポイ ティカ（Acta．Therapeutica）」第１０巻、第１０７〜１１５頁（１９８４）〕 。しかし、これらの活性化剤は治療中に病巣における細菌感染を適切に防止する ことができないことが指摘されている。 さらに、米国特許第４１７７２６１号は、血液の流れを刺激しかつ創傷を回復 するのに有用な医薬組成物に関するものであって、子牛血液の除アルブミン透過 物を静脈拡張剤および非吸収性抗生物質と一緒に低濃度で局所用液体溶液として 使用した場合に、子牛血液の除アルブミン透過物が副作用を示すことなく創傷の 治療に良好な薬効を示す、ことを教示している。しかし、この米国特許は、局所 用液体溶液中における医薬放出性については全く開示していない。また、この米 国特許は、静脈拡張剤として使用されるカリジン（ペプチドの１種）の局所用液 体溶液中における医薬放出性、カリジンの吸収および皮膚に与える刺激について は全く開示していない。 しかも、抗生物質を含有しかつ適当な皮膚保護基剤が配合されている局所投与 形態のもの〔ジャーナル・オブ・アンチミクロバイアル・ケモセラピー(Journa l of Antimicrobial Chemotherapy)」第１６巻、第５１９〜５２６頁（１９８５ ）〕および抗酸化剤、キレート化剤および抗生物質を含有する局所用液体溶液〔 ヨーロッパ特許（ＥＰ）−０５３５４４６号Ａ１〕が同じ目的で開発されている 。これらの調剤は病巣における細菌感染を部分的に防止することができるが、壊 死組織の再生および繊維芽細胞の増殖を促進する能力に欠けているために最も好 ましい治療を達成することができない。発明の概要 本発明者等は、異なる作用機構を有する２種の薬剤を組み合わせて、２種の成 分の溶解が細菌感染の可能性のある火傷のような皮膚疾患の治療に使用されてい る従来の軟膏またはクリームからのこれら両成分の溶解より優れている投与形態 を処方した場合には、これらの２種の薬剤の相乗作用によって皮膚機能を一層効 果的に正常化することができる、ことに着目した。そこで、本発明者等は、皮膚 疾患を治療するために、組織の再生を促進すると同時に抗細菌活性を有する有用 な医薬組成物を開発するために広範囲な研究を行ない、その結果、子牛血液の除 タンパク透析物とアミノ配糖体抗生物質とをゲル、ゲル−クリームまたは局所用 液体溶液の形態において最適組成で組み合わせて皮膚疾患を治療した場合に、皮 膚疾患の優れた治療、急性皮膚疾患の発現の減少および皮膚刺激に起因する副作 用の減少が達成されること、を見い出した。子牛血液の除タンパク透析物は組織 の再生を促進する能力を有し、アミノ配糖体抗生物質は抗微生物活性を有し、ま た、子牛血液の除タンパク透析物とアミノ配糖体抗生物質とを組み合わせると各 成分の欠点が補われる。 従って、本発明の目的は、明瞭な組織再生作用および有効な抗菌作用によって 直ちに治療効果を与えることができ、かつ治療期間を短くすることができる、皮 膚疾患の治療に有用な新規な医薬組成物を提供することにある。発明の詳説 本発明は、子牛血液の除タンパク透析物およびアミノ配糖体抗生物質を、ゲル 、ゲル−クリームまたは局所用液体溶液の形態において最適組成で含有する皮膚 疾患の治療に有用な新規な医薬組成物を提供する。 本発明組成物の組織再生成分である子牛血液の除タンパク透析物は、乾燥した 場合に約４２ｍｇ／mlの活性剤を含有しており、特定の臓器を摘出することによ って得られる充分に生育した若い子牛の細網内皮系から血液を抜き取り、次いで 透析によってタンパク質を完全に除去することによって得られるタンパク質を含 有していない血液透析物である。子牛血液の除タンパク透析物は、ソルコセリル （Solcoseryl）という登録商標（スイス国、ソルコ・バスツル（Solco Bastle） 社）で販売されている。この子牛血液の除タンパク透析物は、アミノ酸、ケトン 酸、オキシ酸、デオキシリボシド、プリン、未知のポリペプチド等のような有機 化合物、およびＮａ，Ｋ，Ｃａ，Ｆｅ，Ｃｏ，Ｐ，塩化物およびＮのような無機 化合物を含有していて、細胞内における酸素の利用を増加させ、壊死組織の再生 ならびに繊維芽細胞および上皮組織の形成を促進する、ことが知られている〔「 Arzneim-Forsch(Drug Res.)」第１５巻、第７５０〜７５４頁（１９６５）；「V ASA Band」第２巻、第８１〜８３頁（１９７３）〕。 本発明組成物の細菌感染抑制成分であるアミノ配糖体抗生物質としては、硫酸 ネオマイシン、硫酸ゲンタマイシン、硫酸ミノクロマイシン、硫酸アミカシン、 硫酸カナマイシン、硫酸トブラマイシン、硫酸ネチルマイシン（netilmicin）、 硫酸ジベカシン、硫酸シソマイシン、または硫酸アストロマイシン(astromicin) があり、一層好ましいのは硫酸ミクロノマイシンである。 硫酸ミクロノマイシンはグラム陰性および陽性の両方の細菌、例えば、ブドウ 球菌属細菌、緑膿菌、プロテウス属細菌、セラチア属細菌、大腸菌、肺炎桿菌、 エンテロバクター属細菌等に対して、広範囲の抗菌活性を有するアミノ配糖体抗 生物質であり、種々の抗生物質、例えば、カナマイシンに対して耐性を有する菌 株による感染に対して有効な殺菌活性を有し、副作用も比較的小さい〔「ケモセ ラピー（Chemotherapy）」第２５巻、第１８４４〜１８５０頁（１９７７）；「 ケモセラピー」第２５巻、第１９４３〜１９５１頁（１９７７）〕。 本発明において、子牛血液の除タンパク透析物とアミノ配糖体抗生物質とを組 み合わせて投与することによって生じる治療効果は、各成分を別個に投与するこ とによって生じる治療効果より大きい。特に、本発明の医薬組成物における各成 分の量を制御することによって、組織再生の促進中に繊維芽細胞の増殖と上皮組 織の形成とをバランスさせて、痕跡を最小にすることができる。 本発明において、子牛血液の除タンパク透析物およびアミノ配糖体抗生物質の 含有量は、それぞれ、全組成物の１〜３０w/w％および0.1 〜２w/w％である。ま た、子牛血液の除タンパク透析物およびアミノ配糖体抗生物質の含有量は、それ ぞれ、全組成物の５〜２０w/w％および0.3 〜１w/w％であるのが好ましい。最も 好ましいのは、子牛血液の除タンパク透過物および硫酸モノクロノマイシンの含 有量が、それぞれ、全組成物の約１０w/w％および約０．５w/w％である場合であ る。 本発明の医薬組成物は、該組成物の安定性を大きくするため、および従来の軟 膏またはクリームより溶出速度の優れているゲル、ゲル−クリーム、または局所 用液体溶液にするために、ベース剤（base）のような医薬として許容できる担体 の１種または２種以上、安定剤、乳化剤を含有することができる。 本発明の医薬組成物は、ベース剤としてポロキサマー(poloxamer)、カルボキ シメチルセルロース・ナトリウム、またはカルボマー（carbomer）を、安定剤と して塩化ナトリウムまたは水酸化ナトリウムを、乳化剤としてセテアリル(cetea ry)オクタノエートのようなＷ／Ｏ型界面活性剤、Ｏ／Ｗ型界面活性剤、または これらの混合物を、湿潤剤としてプロピレングリコールまたはグリセリンを含有 することができる。 本発明の医薬組成物は、ポロキサマー１８〜２２w/w％、プロピレングリコー 表１は、子牛血液の除タンパク透析物および硫酸ミクロノマイシンの両方を含 有する医薬組成物が、子牛血液の除タンパク透析物を単独で含有するか、あるい は硫酸ミクロノマイシンを単独で含有する医薬組成物より大きい創傷治癒活性を 有する、ことを示す。特に、グループ４はグループ１と比較して有意に優れた治 癒効果を示すが、グループ５はグループ１と比較して顕著な治療効果を示さなか った。 これは、上述の結果が繊維芽細胞の壊死と上皮組織の形成とのアンバランスに 起因することを示唆している。換言すれば、子牛血液の除タンパク透過物とアミ ノ配糖体抗生物質とを組み合わせて投与することによって生じる治療効果は、各 成分を別々に投与することによって生じる治療効果より大きい。特に、本発明の 医薬組成物中の諸成分の量を制御することによって、組織再生の促進中に、繊維 芽細胞の増殖と上皮組織の形成とをバランスさせて瘢痕を最小にすることができ る。 結果として、子牛血液の除タンパク透析物（１５〜２０w/w％）と硫酸ミクロ ノマイシン（０．５ｗ／ｗ％）との組み合わせを使用した場合に、治療効果を得 ることができる。特に、子牛血液の除タンパク透析物１０w/w％および硫酸ミク ロノマイシン０．５w/w％を含有する医薬組成物が最大の治療効果を示す。試験例２ 局所的抗菌活性の検討 雄ＩＣＲマウスの背面に複数個の創傷（直径１ｃｍ）を作った。 各グループを１０匹のマウスから構成した。創傷を１×１０⁴ ＣＦＵ（Colony Forming Unit（コロニー形成単位））の黄色ブドウ球菌で処理した。直接感染 させてから１日後に、創傷を本発明の医薬組成物によって２週間の間１日２回局 所的に治療した。 本発明組成物の投与前および投与後に創傷におけるＣＦＵの数を算えた。用量 は特記しない限り０．３ｇ／創傷とした。本発明組成物を使用した局所的抗菌活 性試験の結果を表２に示す。 請求の範囲 １．全組成物の５〜２０w/w％の子牛血液の除タンパク透析物および０．３〜１w /w％のアミノ配糖体抗生物質を有効成分とすることを特徴とす皮膚疾患用医薬組 成物。 ２．子牛血液の除タンパク透析物の含有量が約１０w/w％であり、アミノ配糖体 抗生物質の含有量が約０．５w/w％であることを特徴とする請求の範囲第１項記 載の医薬組成物。 ３．アミノ配糖体抗生物質が硫酸ネオマイシン、硫酸ゲンタマイシン、硫酸ミク ロノマイシン、硫酸アミカシン、硫酸カナマイシン、硫酸トブラマイシン、硫酸 ネチルマイシン、硫酸ジベカシン、硫酸シソマイシンおよび硫酸アストロマイシ ンからなる群から選択したものであることを特徴とする請求の範囲第１項または 第２項記載の医薬組成物。 ４．アミノ配糖体抗生物質が硫酸ミクロノマイシンであることを特徴とする請求 の範囲第３項記載の医薬組成物。 ５．全組成物の１８〜２２w/w％のポロキサマー、１〜５w/w％のプロピレングリ コールおよび０．５〜３w/w％の塩化ナトリウムを担体として含有するゲルであ ることを特徴とする請求の範囲第１項記載の医薬組成物。 ６．全組成物の１８〜２２w/w％のポロキサマー、１〜５w/w％のプロピレングリ コールおよび５〜１５w/w％のセテアリルオクタノエートを担体として含有する ゲル−クリームであることを特徴とする請求の範囲第１項記載の医薬組成物。 ７．全組成物の５〜１５w/w％のポロキサマーおよび１〜５w/w％のプロピレング リコールを含有する局所用液体溶液であることを特徴とする請求の範囲第１項記 載の医薬組成物。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 チュン イョン オク 大韓民國 キュンキ−ドー 441−090 ス ウォン−シ クウォンスン−ク コデュン −ドン 38−３ (72)発明者 チュン イェ クァン 大韓民國 キュンキ―ドー 435―042 ク ンポ−シ サンボン―２―ドン イュルジ ー アパートメント 622―901 (72)発明者 チョイ ワン ソー 大韓民國 ソウル 156−092 ドンジャク −ク サダン−２−ドン 144−７ (72)発明者 キム スン チュル 大韓民國 キュンキ−ドン 440−330 ス ウォン−シ イャンガン−ク チュンチュ ン−ドン 333 ジュゴン アパートメン ト 137−507

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．子牛血液の除タンパク透析物およびアミノ配糖体抗生物質を有効成分とする ことを特徴とす皮膚疾患用医薬組成物。 ２．子牛血液の除タンパク透析物の含有量が全組成物の５〜２０w/w％であるこ とを特徴とする請求の範囲第１項記載の医薬組成物。 ３．アミノ配糖体抗生物質の含有量が全組成物の０．３〜１w/w％であることを 特徴とする請求の範囲第１項記載の医薬組成物。 ４．アミノ配糖体抗生物質が硫酸ネオマイシン、硫酸ゲンタマイシン、硫酸ミク ロノマイシン、硫酸アミカシン、硫酸カナマイシン、硫酸トブラマイシン、硫酸 ネチルマイシン、硫酸ジベカシン、硫酸シソマイシンおよび硫酸アストロマイシ ンからなる群から選択したものであることを特徴とする請求の範囲第１〜３項の いずれか一つの項に記載の医薬組成物。 ５．アミノ配糖体抗生物質が硫酸ミクロノマイシンであることを特徴とする請求 の範囲第４項記載の医薬組成物。 ６．全組成物の２２w/w％のポロキサマー、１〜５w/w％のプロピレングリコール および０．５〜３w/w％の塩化ナトリウムを担体として含有するゲルであること を特徴とする請求の範囲第１項記載の医薬組成物。 ７．全組成物の１８〜２２w/w％のポロキサマー、１〜５w/w％のプロピレングリ コールおよび５〜１５w/w％のセテアリルオクタノエートを担体として含有する ゲル−クリームであることを特徴とする請求の範囲第１項記載の医薬組成物。 ８．全組成物の５〜１５w/w％のポロキサマーおよび１〜５w/w％のプロピレング リコールを含有する局所用液体溶液であることを特徴とする請求の範囲第１項記 載の医薬組成物。