JPH10151191A - 抗菌性付与抗血栓性組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 簡便性、汎用性に加え長期間の抗血栓性と優
れた抗血栓性を発揮することが可能な抗菌性付与抗血栓
性組成物を提供する。 【解決手段】 抗凝血作用を有する少なくとも１種のム
コ多糖類と第４級ホスホニウムのイオン性複合体、およ
び無機系抗菌剤を必須の成分として少なくとも含有して
成ることを特徴とする抗菌性付与抗血栓性組成物。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、ムコ多糖類と第４
級ホスホニウムのイオン性複合体および無機系抗菌剤を
必須成分として少なくとも含有して成る抗菌性付与抗血
栓性組成物に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】加工性、弾性、可撓性に優れた人工材料
は、近年医療用材料として広く利用されるようになって
きているが、人工腎臓、人工肺、補助循環装置、人工血
管等の人工臓器や、注射器、血液バッグ、心臓カテーテ
ル等のディスポーザブル製品として今後ますます利用範
囲が拡大することが予想される。これらの医用材料とし
ては、充分な機械的強度や耐久性に加えて、生体に対す
る安全性、特に血液と接触した場合に血液が凝固しない
こと、すなわち抗血栓性が要求される。

【０００３】従来、医療用材料に抗血栓性を付与する手
法としては、（１）材料表面にヘパリン等のムコ多糖類
やウロキナーゼ等の線溶活性因子を固定させたもの、
（２）材料表面を修飾して陰電荷や親水性などを付与し
たもの、（３）材料表面を不活性化したものの３通りに
大別できる。このうち（１）の方法（以下、表面ヘパリ
ン法と略記する）はさらに、（Ａ）ポリマーと脂溶化し
たヘパリンのブレンド法、（Ｂ）脂溶化したヘパリンで
の材料表面被覆法、（Ｃ）材料中のカチオン性基にヘパ
リンをイオン結合させる方法、（Ｄ）材料とヘパリンを
共有結合させる方法に細分類される。

【０００４】上記の方法のうち（２）、（３）の方法は
長期的に体液と接触した場合には、材料表面にタンパク
が吸着して生体膜類似表面を形成し、安定した抗血栓性
を得ることが可能である。しかし、材料を生体内（血液
接触部位）に導入した初期段階では、生体内において種
々の凝固因子等が活性化された状態にあるため、ヘパリ
ン投与などの抗凝血療法を施すことなしに充分な抗血栓
性を得るのは困難である。

【０００５】これに対して（１）は、導入初期段階には
表面上のヘパリンやウロキナーゼによって抗血栓性また
は生成した血栓の溶解性能が発揮されるが、長期間の使
用によって一般的に性能が低下する傾向にある。すなわ
ち（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）では通常、生理条件下での長
期の使用によってヘパリン類が脱離し易く、生体内に固
定して用いる医療用材料としては充分な性能が得られに
くい。（Ｄ）で得られる材料では、ヘパリンが共有結合
されているため脱離しにくいという利点を有するが、従
来の結合方法では往々にして、ヘパリン構成成分である
Ｄ−グルコサミンやＤ−グルクロン酸のコンフォメーシ
ョンに変化を与えてしまい、抗凝血効果を低下させてし
まうという欠点がある。

【０００６】また（Ｃ）、（Ｄ）の方法では、ヘパリン
の固定化に利用できる官能基を含む材料を選択するか、
あるいは新たに導入する必要がある。このため材料の選
択の幅が狭められたり、官能基の導入によって材料の機
械的強度が低下する可能性がある。また操作の煩雑化に
よって、医療用材料を得る工程数が増加するという問題
もある。

【０００７】このように、材料の抗血栓化の容易さ、適
用できる材料の選択の幅の広さから考えると、（Ａ）ポ
リマーと脂溶化したヘパリンのブレンド法、もしくは
（Ｂ）脂溶化したヘパリンでの材料表面被覆法が最も優
れた方法であるといえる。しかしながら、この方法の致
命的欠点は既述の通り、生理条件下での長期の使用によ
ってヘパリン類が脱離し易いという点である。逆に言え
ば、この欠点を克服することによって簡便性、汎用性に
富む優れた抗血栓化を提供することが可能になる。

【０００８】この問題を解決する手段として、特開平２
−２７０８２３に開示されている方法がある。この方法
は天然ムコ多糖類と天然脂質もしくは合成脂質との複合
体を形成させることを特徴としており、ヘパリンと生体
内リン脂質の複合体で材料表面を被覆する技術が好まし
い例として挙げられている。

【０００９】しかしながら、この方法はヘパリン溶出に
伴って同時に溶出されるカチオン性物質（脂溶化剤）が
天然脂質もしくは合成脂質であるため、生体に悪影響を
及ぼしにくいという点においてのみ有用であると言え
る。すなわち、この方法によって、長期間使用時のヘパ
リンの溶出による抗凝血性の低下が解決されたとは言い
難い。

【００１０】また高栄養輸液カテーテル（以下ＩＶＨと
略記する）など、長期間体内に留置する必要のある医用
デバイスでは、生体−材料界面からの感染が問題であっ
た。血液と材料の接触によって生成した血栓に細菌が繁
殖し、これが体内に入り込んで感染を引き起こす。した
がって、このような医用デバイスに使用される材料には
抗血栓性と抗菌性を同時に持つことが必要である。抗菌
性付与抗血栓性素材が強く望まれていたにもかかわら
ず、この分野に応用可能な素材はほとんど報告されてい
ないのが現状である。

【００１１】一方、抗菌性材料に関しては種々の技術が
報告されている。抗菌剤としてアンモニウム塩を含有す
る抗菌性材料については、例えば特公平４−２５３０
１、特公平３−６４１４３、ビグアニドを含有する抗菌
性材料に関しては、例えば特公平５−８０２２５、特公
平２−６１２６１、特公平３−１０３４１、アクリジン
化合物を含有する抗菌性材料については、例えば特公平
３−７６３４３などに開示されている。また特開平７−
８２５１１、特開平７−５３３１６、特開平４−２６６
９１２、特開平５−３１０８２０などにはホスホニウム
塩を含有する抗菌性材料について開示されている。さら
に特公平６−５５８９２にはプロテイン銀を抗菌有効成
分として含有する抗菌性材料が開示されている。

【００１２】これらの技術では、抗菌性は１種の抗菌性
物質によって発揮されているため、数多くの菌種に対し
て十分な抗菌活性を発揮するのは困難である。特にアン
モニウム、ホスホニウムを有効成分とする有機系の抗菌
剤では、グラム陰性菌に対する効果が不十分であること
が多い。またこれらの素材は抗血栓性に対する配慮がな
されていないため、長期留置用医用デバイス等に応用可
能な抗菌性付与抗血栓性素材として利用するのは困難で
ある。

【００１３】

【発明が解決しようとする課題】本発明は上記従来技術
の欠点を解決し、簡便性、汎用性に加え長期間の抗血栓
性を発揮することが可能であると同時に広い抗菌スペク
トルを持ち、優れた抗菌性を発揮する抗菌性付与抗血栓
性組成物を提供することを目的としている。

【００１４】

【課題を解決するための手段】本発明の抗菌性付与抗血
栓性組成物は、少なくとも１種のムコ多糖類と第４級ホ
スホニウムのイオン性複合体および無機系抗菌剤を必須
成分として少なくとも含有することを特徴とする。本発
明の抗菌性付与抗血栓性組成物は上記ムコ多糖類がヘパ
リンであることを特徴とする。本発明の抗菌性付与抗血
栓性組成物は上記第４級ホスホニウムが前記化１の構造
であることを特徴とする。

【００１５】本発明の抗菌性付与抗血栓性組成物を基材
となる一般的なポリマー材料に導入することによって、
容易に材料の抗血栓化、抗菌化が可能である。また、本
発明の抗菌性付与抗血栓性組成物を使用することによっ
て、長期間の溶出後も非常に優れた抗血栓性、抗菌性を
維持することが可能である。さらに添加された無機系抗
菌剤と脂溶化剤として機能する第４級ホスホニウムとの
相乗効果によって、優れた抗菌性、広い抗菌スペクトル
を材料に導入することが可能である。

【００１６】本発明の抗菌性付与抗血栓性組成物を導入
する基材ポリマーは特に限定されるものではなく、例え
ばポリエーテルウレタン、ポリウレタン、ポリウレタン
ウレア、ポリ塩化ビニル、ポリエステル、ポリプロピレ
ン、ポリエチレン等、従来より使用されている材質、ま
た将来使用されるであろう材質が広く適用できるが、中
でもポリ塩化ビニル、ポリウレタン、ポリエーテルウレ
タンが好ましい。また、既存および新規の材質からなる
血液透析膜、血漿分離膜、吸着剤等の血液処理剤に抗血
栓性や抗菌性を付与する目的で導入することも可能であ
る。

【００１７】基材への導入方法も特に限定されないが、
例えば通常のブレンド法、コーティング法の他、本発明
の抗菌性付与抗血栓性組成物をポリマーにブレンドした
後、このブレンド材料をコーティングする方法なども例
示される。これらの方法のうち生理活性物質であるムコ
多糖類に熱履歴を与えることのないコーティング法が好
ましい。コーティング方法についても、塗布法、スプレ
ー法、ディップ法等、特に制限なく適用できる。

【００１８】本発明の抗菌性付与抗血栓性組成物をブレ
ンドによって基材に導入する場合の添加量については特
に制限されるものではないが、基材１００重量部に対し
て脂溶化ムコ多糖を好ましくは１〜１００重量部、さら
に好ましくは１〜５０重量部程度の量を添加するのが推
奨される（以下、基材１００重量部に対して添加剤１重
量部を加えた場合、添加剤添加量は１phr であると表現
する）。また、無機系抗菌剤の添加量は基材に対し好ま
しくは１〜５０phr 、さらに好ましくは１〜３０phr 程
度の量で添加するのが推奨され、脂溶化ムコ多糖と無機
抗菌剤の添加量比は４０：１〜１：４が好ましく、２
０：１〜１：１がさらに好ましい。

【００１９】本発明の抗菌性付与抗血栓性組成物の必須
成分である第４級ホスホニウムは、前記化１の構造を有
することを特徴としているが、この第４級ホスホニウム
は１種類だけ使用しても、何種類かを同時に使用しても
よい。第４級ホスホニウムのリン原子に結合する４つの
炭化水素鎖のうち、一つは炭素数１〜２５、好ましくは
３〜２０、さらに好ましくは６〜２０のアルキル基であ
る。他の３つの炭化水素鎖は、炭素数１〜１２、好まし
くは１〜８のアルキル基、または炭素数６〜１２、好ま
しくは６〜１０のアリール基、または炭素数７〜２０、
好ましくは７〜１２のアラルキル基である。

【００２０】第４級ホスホニウムとしては具体的に、例
えばトリブチルラウリルホスホニウム、トリブチルミリ
スチルホスホニウム、トリブチルセチルホスホニウム、
トリブチルステアリルホスホニウム、トリフェニルラウ
リルホスホニウム、トリフェニルミリスチルホスホニウ
ム、トリフェニルセチルホスホニウム、トリフェニルス
テアリルホスホニウム、ベンジルジメチルラウリルホス
ホニウム、ベンジルジメチルミリスチルホスホニウム、
ベンジルジメチルセチルホスホニウム、ベンジルジメチ
ルステアリルホスホニウムなどが例示されるが、化１に
よって示される構造の化合物であれば、特にこれらに限
定されない。

【００２１】本発明の抗菌性付与抗血栓性組成物はムコ
多糖類の使用を必須としているが、このムコ多糖類とし
ては例えばヘパリン、コンドロイチン硫酸、ヒアルロン
酸、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸等が挙げられ、中で
もヘパリンもしくはヘパリン金属塩が特に優れた抗血栓
能を有しており、また多くの実施例が報告されており好
ましい。

【００２２】ムコ多糖類と第４級ホスホニウムとのイオ
ン性複合体を得る方法は特に限定されないが、例えばム
コ多糖類の水溶液もしくは水分散液と第４級ホスホニウ
ム塩の水溶液もしくは水分散液を混合し、得られた沈澱
を回収、凍結乾燥する方法などが挙げられる。この際に
使用する水に替えて、弱酸性緩衝液を使用することも可
能である。緩衝液に使用される溶質としては、例えば２
−（Ｎ−モルホリノ）エタンスルホン酸、ピペラジン−
１，４−ビス（２−エタンスルホン酸）、Ｎ−（２−ア
セトアミド）−２−アミノエタンスルホン酸、Ｎ，Ｎ−
ビス（２−ヒドロキシエチル）−２−アミノエタンスル
ホン酸、３−（Ｎ−モルホリノ）プロパンスルホン酸、
３−（Ｎ−モルホリノ）−２−ヒドロキシプロパンスル
ホン酸、２−［４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピ
ペラジニル］エタンスルホン酸が好ましく、特に好まし
くは２−（Ｎ−モルホリノ）エタンスルホン酸（以下Ｍ
ＥＳと略記する）、ピペラジン−１，４−ビス（２−エ
タンスルホン酸）（以下ＰＩＰＥＳと略記する）、３−
（Ｎ−モルホリノ）プロパンスルホン酸（以下ＭＯＰＳ
と略記する）である。

【００２３】本発明の抗菌性付与抗血栓性組成物はムコ
多糖類と第４級ホスホニウムとのイオン性複合体の他、
無機系抗菌剤が必須成分として含有されて成る。無機系
抗菌剤としては、例えば、銀、銅、亜鉛等の金属を有効
成分とする抗菌剤や抗菌性ガラス等が使用できる。銀を
有効成分とする抗菌剤として具体的には、例えば銀ゼオ
ライト、銀−リン酸ジルコニウム複合体、銀セラミック
スなどを利用することが可能である。またプロテイン銀
やスルファジアジン銀など、金属の有機化合物錯体も本
発明において無機系抗菌剤として使用することが可能で
ある。これらの無機系抗菌剤のうち、本発明においては
銀系抗菌剤もしくは抗菌性ガラスが好ましく用いられ、
中でも銀ゼオライトがさらに好ましく用いられる。

【００２４】詳細な機構は明かではないが、本発明の抗
菌性付与抗血栓性組成物等をブレンド、コーティングな
どの手法で導入した材料は生体成分との接触初期段階で
はもちろん、接触が長期にわたった後も良好な抗凝血性
が維持できる。また、第４級ホスホニウムと無機系抗菌
剤の相乗効果によって抗血栓性と同時に優れた抗菌性を
も導入することができる。このような利点を活かして、
本発明の抗菌性付与抗血栓性組成物は各種の医療用器具
あるいは機器類に使用される素材の抗血栓化に広く適用
できる。具体的には、例えば血液透析膜や血漿分離膜お
よびこれらのコーティング剤、血液中老廃物の吸着用コ
ーティング剤に適用できる。また、人工肺用の膜素材
（血液と酸素の隔壁）や人工心肺におけるシート肺のシ
ート材料、大動脈バルーン、血液バッグ、カテーテル、
カニューレ、シャント、血液回路等広範な分野に用いら
れ得る。本発明の抗菌性付与抗血栓性組成物が抗菌性を
同時に有する特長を利用し、従来生体−材料界面からの
感染が問題であったＩＶＨなどに適用することも特に好
ましい。

【００２５】

【実施例】以下、実施例を用いて本発明を説明するが、
本発明は特にこれらに限定されるものではない。

【００２６】〈実施例１〉ヘパリンナトリウム塩１０．
００ｇをイオン交換水に溶解させ、全量で１００mlとし
た。塩化トリ（ｎ−ブチル）セチルホスホニウム（以下
ＴＢＣＰ・Ｃｌと略記する）１９．０７ｇをイオン交換
水に溶解させ、全量で１９１mlとした。双方の溶液を氷
冷下で混合し、そのまま４℃で１５時間静置して懸濁液
を得た。この懸濁液を３３００rpm で遠心沈降させて回
収し、さらに蒸留水を加え懸濁させた後遠心分離によっ
て沈殿を洗浄する操作を３回繰り返し、その後沈殿を乾
燥させてＴＢＣＰ・Ｃｌとヘパリンの複合体（以下ＴＢ
ＣＰ−Ｈｅｐと略記する）を得た。このＴＢＣＰ−Ｈｅ
ｐはベンゼン、ＤＭＦ、ＴＨＦ、クロロホルム等の有機
溶媒に可溶であった。

【００２７】市販ポリウレタン（Pellethane（商品
名）、以下ＰＵと略記する）をＴＨＦに溶解して５％溶
液とした。このＰＵ溶液１０００ｇに対し、上記で得た
ＴＢＣＰ−Ｈｅｐ５．００ｇ、および市販抗菌剤である
銀ゼオライト（品川燃料株式会社製、ゼオミック（商品
名）、以下ＡｇＺｅｏと略記する）１．００ｇを加え
て、一様な懸濁液とした。このＴＢＣＰ−Ｈｅｐ，Ａｇ
Ｚｅｏ／ＰＵブレンド懸濁液２０ｇを水平に保った１２
cm×１２cmのガラス板上に均一に載せ、４０℃で８時間
窒素気流下で乾燥後、４０℃で減圧乾燥を１５時間行
い、厚さ約６０μｍのフィルムを得た（以下このＴＢＣ
Ｐ−Ｈｅｐ，ＡｇＺｅｏ／ＰＵブレンド材料を材料Ａ、
材料Ａから得たフィルムをフィルムＡと略記する）。フ
ィルムＡには、ＴＢＣＰ−Ｈｅｐが１０phr 、ＡｇＺｅ
ｏが２phr 添加されていることになる。

【００２８】上記で得たフィルムＡ上での血漿相対凝固
時間について以下の方法で評価を行った。フィルムＡを
直径約３cmの円形に切り抜き、直径１０cmの時計皿の中
央にはりつけた。このフィルム上にウサギ（日本白色
種）のクエン酸加血漿２００μｌを取り、０．０２５mo
l ／ｌの塩化カルシウム水溶液２００μｌを加え、時計
皿を３７℃の恒温槽に浮かせながら液が混和するように
穏やかに振盪した。塩化カルシウム水溶液を添加した時
点から血漿が凝固（血漿が動かなくなる時点）までの経
過時間を測定し、同様の操作をガラス上で行った場合の
血漿凝固に要した時間で割り、相対凝固時間として表し
た。ただし、ガラス板上での凝固時間の１２倍を超えて
も血漿が凝固しない場合には評価を中断し、相対凝固時
間は＞１２と表した。結果は後記表１に示した。

【００２９】材料Ａ懸濁液をＴＨＦで希釈して２％と
し、この溶液に４０〜６０メッシュのガラスビーズを３
０分浸漬した後ガラスフィルターで濾過し、窒素気流下
４０℃で８時間、４０℃で減圧乾燥を１５時間行ってガ
ラスビーズ表面に材料Ａをコートした。ヒト血清のＰＢ
Ｓ(-) ２倍希釈液１mlにこのコーティングビーズ１００
mgを浸漬し、穏やかに振盪しながら３７℃で３０分間イ
ンキュベートした。この液をサンプルとしてＭａｙｅｒ
法（Mayer,M.M.，"Complement and complementfixatio
n" Experimental Immunochemistry 2nd Ed. ，p133〜24
0 ，C.C.ThomasPublisher，1961）により溶血補体価
（ＣＨ５０）を測定した。結果は、ビーズを加えない上
記希釈血清１mlにおける補体価を１００％とし、百分率
によって表１に示した。

【００３０】フィルムＡの抗菌性を以下の方法で評価し
た。なお、一連の操作は全て無菌的に行った。ブロース
液（滅菌生理食塩水で５０倍希釈）により、約１×１０
⁷ 個／mlの細菌数とした緑膿菌液（以下この菌液を菌原
液と呼ぶ）を調製した。この菌原液の菌数は次のように
して測定した。菌原液を１０⁴ 倍に希釈した後１００μ
ｌを普通寒天培地上にまき、２４時間後に形成された緑
膿菌のコロニー数を計測した。このコロニー数をＮ個と
すると、菌原液の菌数Ｃは Ｃ＝１０⁴ ×Ｎ／０．１＝１０⁵ ×Ｎ［個／ｍｌ］ と示される。この菌原液１００μｌをブロース液（滅菌
生理食塩液で４０倍希釈）で希釈して全量で４０mlに調
製した（以下この液を浸漬原液と呼ぶ）。浸漬原液に、
あらかじめ５cm×５cmに裁断してＥＯＧ滅菌したフィル
ムＡ上を浸漬し、３７℃で２４時間培養した。培養後、
浸漬原液を滅菌生理食塩水で１０倍系列で１０⁴ 倍まで
希釈した（以下１０ⁿ 倍希釈液と略記する）。それぞれ
の希釈液１００μｌを普通寒天培地上にまき、２４時間
後普通寒天板上に形成された緑膿菌のコロニー数が３０
〜３００のプレートについて計測を行なった。計測して
得られたコロニー数をＮ_n 個とすると、２５cm² フィル
ムＡとの接触後の菌数Ｎ_a は次の式で与えられる。 Ｎ_a ＝４０×１０ⁿ ×Ｎ₁ ／０．１ フィルムＡと接触する前の菌原液の濃度は前記Ｃの通り
であり、使用した原液量は１００μｌであるから、フィ
ルムＡ接触前の菌数Ｎ_b Ｎ_b ＝１０⁴ ×Ｎ 浸漬原液４０ml中での２５cm² の大きさのフィルムとの
接触によるＮ_b →Ｎ_aの個数変化を表１に示した。接触
によって菌数が減少するということはフィルムの抗菌性
が発揮されていることを示すものである。

【００３１】材料ＡのＴＨＦ４％懸濁液を調製し、これ
に既存の人工肺用ポリプロピレン製多孔質ホローファイ
バーを浸漬して引き揚げ、４０℃で１２時間乾燥するこ
とによってホローファイバーへのコーティングを行っ
た。このホローファイバーを使用しin vivo で抗血栓性
を評価した。実験方法は次の通りである。ペントバルビ
タール麻酔下でウサギ（日本白色種、♂、２．５〜３．
０kg）の大腿静脈を剥離して、末梢側を糸で結紮し、糸
から２〜３cmのところを血管鉗子でクランプした。結紮
部分の中枢側を眼下剪刀で血管径の１／４〜１／３切
り、そこから試料であるホローファイバーを１０cm、中
枢側に向かって挿入した。挿入位置から１cmほどのとこ
ろで、血管外に出ているホローファイバーの端部を縫い
つけ、ホローファイバーが流されるのを防止した。切開
部分を縫合し、抗生物質を投与して、以後試料を取り出
すまで２週間にわたって飼育した。２週間後、ヘパリン
加ペントバルビタールで麻酔下、正中切開を施し、腹部
大動脈より適当なチューブを用いて脱血してウサギを犠
死させた後、ホローファイバーを挿入した部分の血管を
切断した。血管を切開してホローファイバーと血管内部
を写真に撮るとともに、目視で観察し５段階評価を行っ
た。結果は表１に示した。

【００３２】フィルムＡをＰＢＳ(-) に浸漬し、３７℃
の振盪恒温槽で２週間にわたって溶出を行った。ＰＢＳ
(-) は毎日交換した。以下溶出後のフィルムをフィルム
Ａ’と呼ぶ。フィルムＡと同様の方法でフィルムＡ’で
の血漿相対凝固時間、抗菌性について評価を行った。結
果は表１に示した。

【００３３】

【表１】

【００３４】表１におけるin vivo 抗血栓性の５段階評
価とは次の通りである。 ａ：血小板凝集、血栓生成、フィブリン生成いずれも観
察されない ｂ：フィブリン生成または血小板凝集は見られるが血栓
生成は観察されない ｃ：フィブリン生成または血小板凝集が見られ血栓生成
がわずかに観察される ｄ：フィブリン生成または血小板凝集が見られ血栓生成
がかなり観察される ｅ：フィブリン生成または血小板凝集が見られ大量の血
栓生成が観察される

【００３５】〈実施例２〉実施例１で得たＴＢＣＰ−Ｈ
ｅｐ１００mg、およびＡｇＺｅｏ２０mgにベンゼンを加
えて全量で１００ｇとし、ＴＢＣＰ−Ｈｅｐ，ＡｇＺｅ
ｏ／ベンゼン懸濁液を得た。１２cm×１２cmのＰＵフィ
ルム上にこの懸濁液３．００ｇを均一に載せ、４０℃で
８時間窒素気流下で乾燥後、４０℃で減圧乾燥を１５時
間行い、厚さ約６０μｍのフィルムを得た（以下このＴ
ＢＣＰ−Ｈｅｐ，ＡｇＺｅｏ／ＰＵコーティングフィル
ムをフィルムＢと略記する）。

【００３６】実施例１と同様の方法でフィルムＢの血漿
相対凝固時間および抗菌性を測定した。また、実施例１
と同様の方法でフィルムＢの溶出試験を実施し、得られ
た溶出フィルムＢ’の血漿相対凝固時間および抗菌性に
ついても測定した。結果は表１に示した。

【００３７】〈実施例３〉ヘパリンナトリウム塩１０．
００ｇをイオン交換水に溶解させ、全量で１００mlとし
た。塩化トリ（ｎ−ブチル）ラウリルホスホニウム（以
下ＴＢＬＰ・Ｃｌと略記する）１６．７６ｇをイオン交
換水に溶解させ、全量で１６８mlとした。双方の溶液を
氷冷下で混合し、そのまま４℃で１５時間静置して懸濁
液を得た。この懸濁液を３３００rpm で遠心沈降させて
回収し、さらに蒸留水を加え懸濁させた後遠心分離によ
って沈殿を洗浄する操作を３回繰り返し、その後沈殿を
乾燥させてＴＢＬＰ・Ｃｌとヘパリンの複合体（以下Ｔ
ＢＬＰ−Ｈｅｐと略記する）を得た。このＴＢＬＰ−Ｈ
ｅｐはベンゼン、ＤＭＦ、ＴＨＦ、クロロホルム等の有
機溶媒に可溶であった。

【００３８】脂溶化ヘパリンをＴＢＣＰ−ＨｅｐからＴ
ＢＬＰ−Ｈｅｐに変えた以外は実施例１と同様の方法
で、ＴＢＬＰ−Ｈｅｐ，ＡｇＺｅｏ／ＰＵブレンド材料
Ｃ、および材料Ｃから成るフィルムＣを得た。この材料
ＣおよびフィルムＣを用いて、実施例１と同様の方法で
血漿相対凝固時間、補体価、抗菌性、in vivo 抗血栓性
を評価した。また実施例１と同様の方法でフィルムＣの
溶出試験を実施し、得られた溶出フィルムＣ’の血漿相
対凝固時間、抗菌性についても評価した。結果は表１に
示した。

【００３９】〈実施例４〉実施例３で得たＴＢＬＰ−Ｈ
ｅｐ１００mg、およびＡｇＺｅｏ２０mgにベンゼンを加
えて全量で１００ｇとし、ＴＢＬＰ−Ｈｅｐ，ＡｇＺｅ
ｏ／ベンゼン懸濁液を得た。１２cm×１２cmのＰＵフィ
ルム上にこの懸濁液３．００ｇを均一に載せ、４０℃で
８時間窒素気流下で乾燥後、４０℃で減圧乾燥を１５時
間行ない、厚さ約６０μｍのフィルムを得た（以下この
ＴＢＬＰ−Ｈｅｐ，ＡｇＺｅｏ／ＰＵコーティングフィ
ルムをフィルムＤと略記する）。

【００４０】実施例１と同様の方法でフィルムＤの血漿
相対凝固時間および抗菌性を評価した。また、実施例１
と同様の方法でフィルムＤの溶出試験を実施し、得られ
た溶出フィルムＤ’の血漿相対凝固時間および抗菌性に
ついても評価した。結果は前記表１に示した。

【００４１】〈比較例１〉ＰＵをＴＨＦに溶解して５％
溶液とした。このＰＵ溶液１０００ｇに対し、実施例１
で得たＴＢＣＰ−Ｈｅｐ５．００ｇを加えて均一溶液と
した。このＴＢＣＰ−Ｈｅｐ／ＰＵブレンド溶液２０ｇ
を水平に保った１２cm×１２cmのガラス板上に均一に載
せ、４０℃で８時間窒素気流下で乾燥後、４０℃で減圧
乾燥を１５時間行い、厚さ約６０μｍのフィルムを得た
（以下このＴＢＣＰ−Ｈｅｐ／ＰＵブレンド材料を材料
Ｅ、材料Ｅから得たフィルムをフィルムＥと略記す
る）。フィルムＥにはＴＢＣＰ−Ｈｅｐが１０phr 添加
されていることになる。

【００４２】この材料ＥおよびフィルムＥを用いて、実
施例１と同様の方法で血漿相対凝固時間、補体価、抗菌
性、in vivo 抗血栓性を評価した。また、実施例１と同
様の方法で実施例１と同様の方法でフィルムＥの溶出試
験を実施し、得られた溶出フィルムＥ’の血漿相対凝固
時間および抗菌性についても評価した。結果は表１に示
した。

【００４３】〈比較例２〉実施例１で得たＴＢＣＰ−Ｈ
ｅｐ１００mgにベンゼンを加えて全量で１００ｇとし、
ＴＢＣＰ−Ｈｅｐ／ベンゼン溶液を得た。１２cm×１２
cmのＰＵフィルム上にこの溶液３．００ｇを均一に載
せ、４０℃で８時間窒素気流下で乾燥後、４０℃で減圧
乾燥を１５時間行い、厚さ約６０μｍのフィルムを得た
（以下このＴＢＣＰ−Ｈｅｐ／ＰＵコーティングフィル
ムをフィルムＦと略記する）。

【００４４】実施例１と同様の方法でフィルムＦの血漿
相対凝固時間および抗菌性を評価した。また、実施例１
と同様の方法でフィルムＦの溶出試験を実施し、得られ
た溶出フィルムＦ’の血漿相対凝固時間および抗菌性に
ついても評価した。結果は前記表１に示した。

【００４５】〈比較例３〉ＰＵをＴＨＦに溶解して５％
溶液とした。このＰＵ溶液１０００ｇに対し、ＡｇＺｅ
ｏ１．００ｇを加えて、一様な懸濁液とした。このＡｇ
Ｚｅｏ／ＰＵブレンド懸濁液２０ｇを水平に保った１２
cm×１２cmのガラス板上に均一に載せ、４０℃で８時間
窒素気流下で乾燥後、４０℃で減圧乾燥を１５時間行な
い、厚さ約６０μｍのフィルムを得た（以下このＡｇＺ
ｅｏ／ＰＵブレンド材料を材料Ｇ、材料Ｇから得たフィ
ルムをフィルムＧと略記する）。フィルムＧには、Ａｇ
Ｚｅｏが２phr 添加されていることになる。

【００４６】この材料ＧおよびフィルムＧを用いて、実
施例１と同様の方法で血漿相対凝固時間、抗菌性、in v
ivo 抗血栓性を評価した。また、実施例１と同様の方法
でフィルムＧの溶出試験を実施し、得られた溶出フィル
ムＧ’の血漿相対凝固時間および抗菌性についても評価
した。結果は表１に示した。

【００４７】〈比較例４〉ＡｇＺｅｏ２０mgにベンゼン
を加えて全量で１００ｇとし、ＡｇＺｅｏ／ベンゼン懸
濁液を得た。１２cm×１２cmのＰＵフィルム上にこの懸
濁液３．００ｇを均一に載せ、４０℃で８時間窒素気流
下で乾燥後、４０℃で減圧乾燥を１５時間行ない、厚さ
約６０μｍのフィルムを得た（以下このＡｇＺｅｏ／Ｐ
ＵコーティングフィルムをフィルムＨと略記する）。

【００４８】実施例１と同様の方法でフィルムＨの血漿
相対凝固時間および抗菌性を評価した。また、実施例１
と同様の方法でフィルムＨの溶出試験を実施し、得られ
た溶出フィルムＨ’の血漿相対凝固時間および抗菌性に
ついても評価した。結果は前記表１に示した。

【００４９】〈実施例５〉ヘパリンナトリウム塩１０．
００ｇをイオン交換水に溶解させ、全量で１００mlとし
た。この溶液と、塩化ベンザルコニウム１０％水溶液
（以下Ｂｅｎ・Ｃｌと略記する）１４２mlを氷冷下で混
合し、そのまま４℃で１５時間静置して懸濁液を得た。
この懸濁液を３３００ｒｐｍで遠心沈降させて回収し、
さらに蒸留水を加え懸濁させた後遠心分離によって沈殿
を洗浄する操作を３回繰り返し、その後沈殿を乾燥させ
てＢｅｎ・Ｃｌとヘパリンの複合体（以下Ｂｅｎ−Ｈｅ
ｐと略記する）を得た。このＢｅｎ−Ｈｅｐはベンゼ
ン、ＤＭＦ、クロロホルム等の有機溶媒に可溶であっ
た。

【００５０】脂溶化ヘパリンをＴＢＣＰ−ＨｅｐからＢ
ｅｎ−Ｈｅｐに変えた以外は実施例１と同様の方法で、
ＴＢＬＰ−Ｈｅｐ／ＰＵブレンド材料Ｉおよび材料Ｉか
ら成るフィルムＩを得た。この材料ＩおよびフィルムＩ
を用いて、実施例１と同様の方法で血漿相対凝固時間、
補体価、抗菌性、in vivo 抗血栓性を評価した。また実
施例１と同様の方法でフィルムＩの溶出試験を実施し、
得られた溶出フィルムＩ’の血漿相対凝固時間、抗菌性
についても評価した。結果は表１に示した。

【００５１】〈比較例６〉比較例５で得たＢｅｎ−Ｈｅ
ｐをベンゼンに溶解させて０．１％溶液とし、１２cm×
１２cmのＰＵフィルム上にこの溶液３．００ｇを均一に
載せ、４０℃で８時間窒素気流下で乾燥後、４０℃で減
圧乾燥を１５時間行い、厚さ約６０μｍのフィルムを得
た（以下このＢｅｎ−Ｈｅｐ／ＰＵコーティングフィル
ムをフィルムＪと略記する）。

【００５２】実施例１と同様の方法でフィルムＪの血漿
相対凝固時間および抗菌性を評価した。また、実施例１
と同様の方法でフィルムＪの溶出試験を実施し、得られ
た溶出フィルムＪ’の血漿相対凝固時間および抗菌性に
ついても評価した。結果は前記表１に示した。

【００５３】〈比較例７〉脂溶化ヘパリンを導入してい
ないＰＵフィルム（フィルムＫ）を用いて血漿相対凝固
時間、補体価、抗菌性を評価した。また、実施例１と同
様の方法でフィルムＫの溶出試験を実施し、得られた溶
出フィルムＫ’の血漿相対凝固時間、抗菌性についても
評価した。結果は表１に示した。

【００５４】表１に示した結果からわかるように、本発
明の抗菌性付与抗血栓性組成物を導入した材料は優れた
抗血栓性、抗菌性を示しており、溶出後も性能が維持さ
れている。無機系抗菌剤を添加していない比較例１、２
の材料は、抗血栓性は比較的優れているものの抗菌性は
劣っており、特に溶出後の抗菌性低下が大きい。ヘパリ
ンと第４級ホスホニウムのイオン性複合体が含まれてい
ない比較例３、４では抗血栓性が著しく劣るのに加え
て、抗菌性も本発明の抗菌性付与抗血栓性組成物を導入
した材料には及ばない。抗血栓性が脂溶化されたヘパリ
ンによって発揮されていることを示すとともに、第４級
ホスホニウムと無機系抗菌剤の相乗効果によって抗菌性
が向上していることも示唆している。また、脂溶化剤と
してベンザルコニウムを使用した比較例５、６の材料
は、溶出後の抗血栓性低下が顕著に見られる。

【００５５】

【発明の効果】本発明の抗菌性付与抗血栓性組成物は基
材となるポリマーに簡便に抗血栓性、抗菌性を付与する
ことができ、その性能は材料調製直後のみならず、長期
間の溶出操作後も維持される。したがって、本発明の抗
菌性付与抗血栓性組成物は医療用材料の抗血栓化、抗菌
化を行なう材料として優れた適性を有している。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 有森 奏 滋賀県大津市堅田二丁目１番１号 東洋紡 績株式会社総合研究所内 (72)発明者 田中 昌和 滋賀県大津市堅田二丁目１番１号 東洋紡 績株式会社総合研究所内

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 下記（ａ）および（ｂ）を少なくとも含
   有することを特徴とする抗菌性付与抗血栓性組成物。 （ａ）少なくとも１種のムコ多糖類と第４級ホスホニウ
   ムのイオン性複合体から成る脂溶化ムコ多糖 （ｂ）無機系抗菌剤
2. 【請求項２】 ムコ多糖類がヘパリンもしくはヘパリン
   金属塩である請求項１記載の抗菌性付与抗血栓性組成
   物。
3. 【請求項３】 第４級ホスホニウムが下記化１の構造で
   ある請求項１または２に記載の抗菌性付与抗血栓性組成
   物。 【化１】 化１においてＲ¹ 、Ｒ² 、Ｒ³ は炭素数１〜１２のアル
   キル基または炭素数６〜１２のアリール基または炭素数
   ７〜２０のアラルキル基を示す。Ｒ⁴ は炭素数１〜２５
   のアルキル基を示す。Ｒ¹ 、Ｒ² 、Ｒ³ 、Ｒ⁴ はそれぞ
   れ同じでも異なっていてもよい。