JPH10168095A - 炎症性腸疾患予防および治療剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 安全かつ少用量で患部に効果的に作用し、炎
症性腸疾患を予防、治療しうる新規な炎症性腸疾患の予
防および治療剤を提供する。 【解決手段】 下記一般式（１） 【化１】 ［ただし、式中、Ｒ¹ 、Ｒ² 、Ｒ³ およびＲ⁴ は同一ま
たは異なる水素原子または低級アルキル基を表し、Ｒ⁵
は水素原子、低級アルキル基または低級アシル基を表
し、Ｘは糖残基中の水酸基の水素原子が低級アルキル基
または低級アシル基で置換されていてもよい単糖残基ま
たはオリゴ糖残基を表し、ｎは０〜６の整数であり、お
よびｍは１〜６の整数である］で表されるクロマノール
配糖体を有効成分とする炎症性腸疾患予防および治療剤
である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、新規な炎症性腸疾
患予防および治療剤に関する。詳しくは、水溶性のクロ
マノール配糖体を有効成分とする炎症性腸疾患予防およ
び治療剤に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】生体内には、フリーラジカルが病的に過
剰に生じるのを予防したり生じたフリーラジカルを消去
する働きを有する抗酸化酵素および抗酸化物質が存在す
るが、潰瘍性大腸炎やクローン病等の炎症性腸疾患の患
者の腸粘膜では、スーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯ
Ｄ）、グルタチオン、α−トコフェロール等の抗酸化酵
素や抗酸化物質が消費され減少していることが知られて
おり（Ｇ．Ｄ．Ｂｕｆｆｉｎｔｏｎ，Ｗ．Ｆ．Ｄｏｅ：
Ｆｒｅｅ．Ｒａｄｉｃ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．，１９（１
９９５）９１１−９１８）、これらの疾患の予防および
治療には抗酸化作用をもつ薬剤を投与し抗酸化防御系を
強化する方法が有効と考えられている。

【０００３】しかし、フリーラジカルは「諸刃の剣」と
いわれるように、病態形成にのみ働くのではなく生体防
御系としても非常に重要であり、単にすべてのフリーラ
ジカルを消去する訳にはいかず、これが抗フリーラジカ
ル療法の臨床応用を困難にしている最大の原因である。

【０００４】抗酸化作用をもつ薬剤で、潰瘍性大腸炎や
クローン病に対する内科的治療薬としてすでに臨床応用
されているものとして、古くからステロイド剤とサラゾ
スルファピリジン（ＳＡＳＰ、サラゾピリン）があり、
また、基礎的検討がなされているものとして、Ｍｎ−Ｓ
ＯＤ、ＣｕＺｎ−ＳＯＤ等のＳＯＤ、アロプリノール、
ポラプレジンク等の亜鉛、α−トコフェロール、グルタ
チオン、グルタチオンペルオキシダーゼ、２１−アミノ
ステロイド、四逆散等の漢方薬、レバミピド等がある。

【０００５】このうち、α−トコフェロールは代表的な
ビタミンＥであり、クロマン環の６位の水酸基から水素
原子を供与してフリーラジカルを消去する機能を有し、
抗酸化剤として知られている。

【０００６】しかしながら、ビタミンＥは、その分子内
に長鎖の炭化水素基（フィチル基）を有するために、水
に溶けない粘稠性の油状物である。このため、生体内の
フリーラジカルを抑制、調節する目的でビタミンＥを投
与する場合には、内服液や注射剤などの溶液の形態での
使用はできないという致命的な欠点がある。このような
欠点を克服するために、２位のフィチル基をカルボキシ
ル基で置換することにより水溶性が付与された６−ヒド
ロキシ−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−２−
カルボン酸が開発され、トロロックス（Ｔｒｏｌｏｘ）
という名称で水溶性の抗酸化剤として市販されている
が、その水溶性は極めて低く（１６ｍｇ／１００ｍ
ｌ）、いまだ満足できるものではない。また、同様にし
て、２位のフィチル基をアルコールで置換した２−ハイ
ドロキシメチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマ
ン−６−オール（以下、「ＴＭＣ−２−置換メタノー
ル」という）も開発された。このＴＭＣ−２−置換メタ
ノールは、１０１ｍｇ／１００ｍｌの水溶性を有し、ト
ロロックスの約６．３倍の水溶性を示すが、このような
比較的高い水溶性をもってしても、例えば、患者に１ｇ
を投与するためには、１リットルという多量の水に溶解
して用いなければならず、水溶性がなお不十分であると
いう問題があった。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】本発明は上記従来技術
の有する問題点に鑑みなされたものであり、その目的と
するところは、副作用を伴うことなく少用量で効果的に
作用し、炎症性腸疾患を予防、または病態を改善、治癒
しうる新規な炎症性腸疾患予防および治療剤を提供する
ことにある。

【０００８】本発明の他の目的は、優れた抗酸化作用を
有し炎症性腸疾患患部の腸粘膜におけるフリーラジカル
反応を効果的に抑制、調節しうる新規な炎症性腸疾患予
防および治療剤を提供することにある。

【０００９】本発明のさらに他の目的は、有効成分を高
濃度で含有する水性製剤とすることができる新規な炎症
性腸疾患予防および治療剤を提供することにある。

【００１０】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、先に、水
溶性が不十分なＴＭＣ−２−置換アルコールの２位の水
酸基に糖を結合させることによって高い水溶性を有する
クロマノール配糖体を合成することに成功していたが
（特開平７−１１８２８７号公報）、今回、驚くべきこ
とに、該クロマノール配糖体を有効成分とする炎症性腸
疾患予防および治療剤が、優れた抗酸化作用、抗フリー
ラジカル作用を有し、潰瘍性大腸炎やクローン病等の炎
症性腸疾患の予防、治療に極めて有効であることを見出
し本発明を完成した。

【００１１】即ち、本発明は、下記一般式（１）

【００１２】

【化２】

【００１３】［ただし、式中、Ｒ¹ 、Ｒ² 、Ｒ³ および
Ｒ⁴ は同一または異なる水素原子または低級アルキル基
を表し、Ｒ⁵ は水素原子、低級アルキル基または低級ア
シル基を表し、Ｘは糖残基中の水酸基の水素原子が低級
アルキル基または低級アシル基で置換されていてもよい
単糖残基またはオリゴ糖残基を表し、ｎは０〜６の整数
であり、およびｍは１〜６の整数である］で表されるク
ロマノール配糖体を有効成分とする炎症性腸疾患予防お
よび治療剤である。

【００１４】本発明はまた、前記クロマノール配糖体は
２−（α−Ｄ−グルコピラノシル）メチル−２，５，
７，８−テトラメチルクロマン−６−オールである前記
炎症性腸疾患予防および治療剤である。

【００１５】本発明はさらに、前記炎症性腸疾患は潰瘍
性大腸炎またはクローン病である前記炎症性腸疾患予防
および治療剤である。

【００１６】また、本発明は、水性製剤である前記炎症
性腸疾患予防および治療剤である。

【００１７】

【発明の実施の形態】本発明の炎症性腸疾患予防および
治療剤は、前記一般式（１）で表されるクロマノール配
糖体を有効成分とすることを特徴とするものである。

【００１８】前記一般式（１）において、Ｒ¹ 、Ｒ² 、
Ｒ³ 、Ｒ⁴ およびＲ⁵ の低級アルキル基としては、炭素
原子数が１〜８、好ましくは１〜６の低級アルキル基が
よく、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソ
プロピル基、ブチル基、イソブチル基、ペンチル基、イ
ソペンチル基、ヘキシル基、ヘプチル基、オクチル基等
が挙げられる。これらの中では、メチル基またはエチル
基が好ましい。また、Ｒ⁵ の低級アシル基としては、炭
素原子数が１〜８、好ましくは１〜６の低級アシル基が
よく、例えば、ホルミル基、アセチル基、プロピオニル
基、ブチリル基、イソブチリル基、バレリル基、イソバ
レリル基、ピバロイル基、ヘキサノイル基、ヘプタノイ
ル基、オクタノイル等が挙げられる。これらの中では、
アセチル基、プロピオニル基またはブチリル基が好まし
い。また、Ｘの糖残基中の水酸基の水素原子は低級アル
キル基、好ましくは炭素原子数が１〜８の低級アルキル
基、または低級アシル基、好ましくは炭素原子数が１〜
１０の低級アシル基で置換されていてもよい。これらの
うち、Ｘとしてグルコースやガラクトース等の単糖が好
ましく使用される。さらに、ｎは、０〜６、好ましくは
１〜４の整数であり、ｍは、１〜６、好ましくは１〜３
の整数である。一般式（１）で表されるクロマノール配
糖体の好ましい例としては、２−（α−Ｄ−グルコピラ
ノシル）メチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマ
ン−６−オール、２−（α−Ｄ−ガラクトピラノシル）
メチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−
オール等が挙げられる。

【００１９】本発明によるクロマノール配糖体は、例え
ば特開平７−１１８２８７号公報に記載の方法により、
下記一般式（２）：

【００２０】

【化３】

【００２１】（ただし、式中、Ｒ¹ ，Ｒ² ，Ｒ³ 、
Ｒ⁴ 、Ｒ⁵ 及びｎは前記と同義である）で表される２−
置換アルコール及びオリゴ糖類、可溶性澱粉、澱粉また
はシクロデキストリンを相当する糖転位作用を触媒する
酵素の存在下に反応させ、２−置換アルコールの２位の
水酸基に対して特異的に糖の特定の水酸基を結合させる
ことからなる酵素反応によって製造される。

【００２２】上記反応において原料として用いられる一
般式（２）で表される２−置換アルコール（以下、単に
「２−置換アルコール」という）は公知の物質であり、
例えば、特公平１−４３７５５号公報や特公平１−４９
１３５号公報等に開示された方法により得ることができ
る。また、例えば、一般式（２）中、Ｒ¹ 、Ｒ² 、Ｒ³
及びＲ⁴ がメチル基、Ｒ⁵ が水素原子であり、ｎが１で
ある２−置換アルコールは、トロロックスを水素化リチ
ウムアルミニウムの存在下においてジエチルエーテル中
で加熱還流処理すること等により容易に得ることができ
る。

【００２３】上記反応において使用される糖転位作用を
触媒する酵素は、当該反応に用いる糖の種類によって以
下のように使い分けることが好ましい。

【００２４】（１）２−置換アルコールにα−結合でグ
ルコース残基を結合させる場合： （ａ）マルトースからマルトテトラオース位のマルトオ
リゴ糖に対してはα−グルコシダーゼ（α−ｇｌｕｃｏ
ｓｉｄａｓｅ，ＥＣ３．２．１．２０）を作用させるこ
とが望ましい。α−グルコシダーゼとしては、ほぼ全て
の起源由来のものを用いることができ、具体的には、東
洋紡績株式会社製のサッカロマイセス属（Ｓａｃｃｈａ
ｒｏｍｙｃｅｓ ｓｐ．）由来のα−グルコシダーゼ、
オリエンタル酵母工業株式会社製のサッカロマイセス
セロビイシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅ
ｖｉｓｉａｅ）由来のα−グルコシダーゼ、天野製薬株
式会社製のアスペルギルス ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌ
ｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）由来のα−グルコシダーゼ、和光
純薬工業株式会社製のサッカロマイセス属（Ｓａｃｃｈ
ａｒｏｍｙｓｅｓ ｓｐ．）由来のα−グルコシダー
ゼ、シグマ（ＳＩＧＭＡ）製のベーカー イースト（Ｂ
ａｋｅｒｓ ｙｅａｓｔ）由来のα−グルコシダーゼ、
バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）由来のα−グルコシダ
ーゼ等が挙げられる。 （ｂ）可溶性澱粉または澱粉に対しては４−α−グルカ
ノトランスフェラーゼ（４−α−Ｄ−ｇｌｕｃａｎｏｔ
ｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＥＣ２．４．１．２５）を作用
させることが望ましい。

【００２５】（２）２−置換アルコールにα−結合でグ
ルコース残基またはマルトオリゴ糖残基を結合させる場
合：マルトオリゴ糖、可溶性澱粉、澱粉またはシクロデ
キストリン（α、β、γ）などに対してはシクロデキス
トリングルカノトランスフェラーゼ（ｃｙｃｌｏｄｅｘ
ｔｒｉｎ ｇｌｕｃａｎｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，Ｅ
Ｃ２．４．１．１９）を作用させることが望ましい。代
表的な例としては、天野製薬株式会社製のバチルス マ
セランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍａｃｅｒａｎｓ）由来
のシクロデキストリングルカノトランスフェラーゼ、株
式会社林原生物化学研究所製のバチルス ステアロサー
モフィラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒ
ｍｏｐｈｉｌｕｓ）由来のシクロデキストリングルカノ
トランスフェラーゼ、その他にはバチルス メガテリウ
ム（Ｂａｃｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）、バ
チルス サーキュランス ＡＴＣＣ ９９９５（Ｂａｃ
ｉｌｌｕｓ ｃｉｒｃｕｌａｎｓ ＡＴＣＣ ９９９
５）由来のシクロデキストリングルカノトランスフェラ
ーゼなどが挙げられる。

【００２６】（３）２−置換アルコールにβ−結合でグ
ルコース残基を結合させる場合： （ａ）セロビオース、カードランまたはラミナランなど
のβ−結合よりなるオリゴ糖に対してはβ−グルコシダ
ーゼ（β−ｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅ，ＥＣ３．２．１．
２１）を作用させることが望ましい。 （ｂ）リン酸存在下のセロビオースに対してはセロビオ
ース ホスホリラーゼ（ｃｅｌｌｏｂｉｏｓｅ ｐｈｏ
ｓｐｈｏｒｙｌａｓｅ，ＥＣ２．４．１．２０）を作用
させることが望ましい。

【００２７】（４）２−置換アルコールにα−結合でガ
ラクトース残基を結合させる場合： （ａ）メリビオースまたはラフィノースなどに対しては
α−ガラクトシダーゼ（α−ｇａｌａｃｔｏｓｉｄａｓ
ｅ，ＥＣ３．２．１．２２）を作用させることが望まし
い。

【００２８】（５）２−置換アルコールにβ−結合でガ
ラクトース残基を結合させる場合： （ａ）ラクトースなどに対してはβ−ガラクトシダーゼ
（β−ｇａｌａｃｔｏｓｉｄａｓｅ，ＥＣ３．２．１．
２３）を作用させることが望ましい。

【００２９】（ｂ）アラビノガラクタンなどに対しては
エンド−１，４−β−ガラクタナーゼ（Ｅｎｄｏ−１，
４−β−ｇａｌａｃｔａｎａｓｅ，ＥＣ３．２．１．８
９）を作用させることが望ましい。

【００３０】（６）２−置換アルコールにβ−結合でフ
ラクトース残基を結合させる場合： （ａ）ショ糖、ラフィノースまたはメリビオースなどに
対してはレバンシュークラーゼ（ｌｅｖａｎｓｕｃｒａ
ｓｅ，ＥＣ２．４．１．１０）を作用させることが望ま
しい。 （ｂ）ショ糖に対してはβ−フルクトフラノシダーゼ
（β−ｆｒｕｃｔｏｆｕｒａｎｏｓｉｄａｓｅ，ＥＣ
３．２．１．２６）を作用させることが望ましい。

【００３１】（ｃ）イヌリンなどに対してはイヌリンフ
ルクトトランスフェラーゼ（ｉｎｕｌｉｎ ｆｒｕｃｔ
ｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＥＣ２．４．１．９３）を
作用させることが望ましい。

【００３２】上記反応における反応条件は、使用するク
ロマノール配糖体や酵素の種類によって異なるが、例え
ば、一般式（１）中のｍが１であるクロマノール配糖体
をα−グルコシダーゼを用いて合成する場合には、２−
置換アルコールを糖溶液に溶解させることが望ましい。
そのためには有機溶媒の添加が望ましく、例えば、ジメ
チルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、メ
タノール、エタノール、アセトン、及びアセトニトリル
などが挙げられ、α−グルコシダーゼの転移活性を高め
る点を考慮すると、ジメチルスルホキシドやＮ，Ｎ−ジ
メチルホルムアミドが好ましく使用される。有機溶媒の
添加濃度は、１〜５０（ｖ／ｖ）％であり、反応効率を
考えると５〜３５（ｖ／ｖ）％であることが好ましい。

【００３３】２−置換アルコールの濃度は、反応液中に
おいて飽和濃度若しくはそれに近い濃度にすることが望
ましい。用いる糖の種類はマルトースからマルトテトラ
オース位の低分子のものが良く、好ましくはマルトース
である。糖の濃度は１〜７０（ｗ／ｖ）％、好ましくは
３０〜６０（ｗ／ｖ）％である。ｐＨは４．５〜７．
５、好ましくは５．０〜６．５である。反応温度は１０
〜７０℃、好ましくは３０〜６０℃である。反応時間は
１〜４０時間、好ましくは２〜２４時間である。但し、
これらの条件は使用する酵素量等により影響をうけるこ
とはいうまでもない。反応終了後、反応液をＸＡＤ（オ
ルガノ株式会社）を担体として用いたカラムクロマトグ
ラフィーで処理することにより、目的とするクロマノー
ル配糖体が高純度で得られる。

【００３４】また、例えば、一般式（１）中のｍが１で
あるクロマノール配糖体をシクロデキストリングルカノ
トランスフェラーゼを用いて合成する場合の反応条件と
しては、２−置換アルコールを糖溶液に溶解させること
が望ましい。そのためには有機溶媒の添加が望ましく、
ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミ
ド、メタノール、エタノール、アセトン及びアセトニト
リルなどが挙げられる。添加する有機溶媒の濃度は１〜
５０（ｖ／ｖ）％、好ましくは反応効率を考えると５〜
３５（ｖ／ｖ）％である。２−置換アルコールの濃度は
反応液中において、飽和濃度もしくはそれに近い高い濃
度にすることが望ましい。

【００３５】上記反応において用いられる糖の種類とし
ては、マルトトリオース以上の重合度を持つマルトオリ
ゴ糖、可溶性澱粉、澱粉およびシクロデキストリン
（α、β、γ）などが好ましく挙げられる。糖の濃度は
１〜７０（ｗ／ｖ）％、好ましくは５〜５０（ｗ／ｖ）
％である。ｐＨは４．５〜８．５、好ましくは５．０〜
７．５である。反応温度は１０〜７０℃、好ましくは３
０〜６０℃である。反応時間は１〜６０時間、好ましく
は２〜５０時間である。但し、これらの条件は使用する
酵素量により影響を受ける。このような反応により得ら
れたクロマノール配糖体はｍの数が１から８位の混合物
となる。そこで、この混合物をグルコアミラーゼ（ＥＣ
３．２．１．３）を用いて処理することによって、一般
式（１）中のｍが１であるクロマノール配糖体だけを得
ることができる。この際の反応温度は２０〜７０℃、好
ましくは３０〜６０℃であり、反応時間は０．１〜４０
時間、好ましくは１〜２４時間である。但し、これらの
条件は使用する酵素の量により影響を受ける。次に、上
記グルコアミラーゼ処理後の液を、ＸＡＤ（オルガノ株
式会社）を担体として用いたカラムクロマトグラフィー
処理することにより、一般式（１）中のｍが１であるク
ロマノール配糖体が高純度で得られる。

【００３６】一般式（１）中のｍが２であるクロマノー
ル配糖体を得る場合には、上記と同様の条件下で、シク
ロデキストリングルカノトランスフェラーゼによって得
られる一般式（１）におけるｍが１から８位の混合物の
形態を有するクロマノール配糖体にβ−アミラーゼ（Ｅ
Ｃ３．２．１．２）を作用させることにより、一般式
（１）におけるｍが１または２であるクロマノール配糖
体のみが得られる。この時の反応温度は２０〜７０℃、
好ましくは３０〜６０℃であり、反応時間は０．１〜４
０時間、好ましくは１〜２４時間である。但し、これら
の条件は使用する酵素量により影響を受ける。β−アミ
ラーゼ処理後の液は、ＸＡＤ（オルガノ株式会社）を担
体として用いたカラムクロマトグラフィー処理により、
一般式（１）におけるｍが２であるクロマノール配糖体
が高純度で得られると同時に、一般式（１）におけるｍ
が１であるクロマノール配糖体も得られる。

【００３７】一般式（１）におけるｍが３以上であるク
ロマノール配糖体を得る場合には、上記と同様の条件下
で、シクロデキストリングルカノトランスフェラーゼに
よって得られる一般式（１）におけるｍが１から８位の
混合物の形態を有するクロマノール配糖体を、ＨＰＬＣ
を用いた分取クロマトグラフィーなどで処理することに
より、高純度のクロマノール配糖体が各ｍ毎に得ること
ができる。

【００３８】上記実施態様では２−置換アルコールにグ
ルコース残基やマルトオリゴ糖残基を糖残基として結合
させる場合の態様を記載したが、ガラクトース残基を糖
残基として２−置換アルコールに結合させることによる
態様も本発明では好ましく使用できる。このような態様
においては、上記糖転位作用を触媒する酵素の項におい
て説明したように、ラクトース（乳糖）等を糖として使
用する際にはβ−ガラクトシダーゼを酵素として使用
し、アラビノガラクタン等を糖として使用する際にはエ
ンド−１，４−β−ガラクタナーゼを酵素として使用す
る以外は上記実施態様と同様の操作を行うことによっ
て、目的とするクロマノール配糖体が高純度で得られ
る。

【００３９】このようにして得られたクロマノール配糖
体は、一般的に、極めて高い水溶性（約１００ｇ／１０
０ｍｌ）を有し、かつ油溶性にも富む（オクタノール／
水系分配係数＞３）両親媒性分子である。いいかえる
と、本発明によるクロマノール配糖体は、高い脂質親和
性を備えた水溶性ビタミンＥであるということができ
る。したがって、本発明によるクロマノール配糖体は、
従来の水に不溶性あるいは貧溶性のビタミンＥ誘導体と
は異なり、水に溶解して使用しても高い脂質親和性を保
つので、細胞膜を透過しさらに細胞内にも入ることがで
き、生体内の抗酸化防御系を補強し、患部腸粘膜におけ
るフリーラジカル反応を効果的に抑制、調節して、炎症
性腸疾患の病態を飛躍的に改善する。また、上記反応に
より得られたクロマノール配糖体は、熱安定性およびｐ
Ｈ安定性に関してもトコフェロール、トロロックスまた
は２−置換アルコールに比べて著しく向上するものであ
る。

【００４０】本発明の炎症性腸疾患の予防および治療剤
は、前記クロマノール配糖体に製薬上許容される担体を
配合して経口投与用または非経口投与用組成物として患
者に投与できる。本剤を経口投与用とする場合には、前
記クロマノール配糖体を適当な添加剤、例えば、乳糖、
ショ糖、マンニット、トウモロコシデンプン、合成もし
くは天然ガム、結晶セルロース等の賦形剤、デンプン、
セルロース誘導体、アラビアゴム、ゼラチン、ポリビニ
ルピロリドン等の結合剤、カルボシキメチルセルーロー
スカルシウム、カルボシキメチルセルーロースナトリウ
ム、デンプン、コーンスターチ、アルギン酸ナトリウム
等の崩壊剤、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステ
アリン酸ナトリウム等の滑沢剤、炭酸カルシウム、炭酸
ナトリウム、リン酸カルシウム、リン酸ナトリウム等の
充填剤または希釈剤等と適宜混合して、錠剤、散剤（粉
末）、丸剤、および顆粒剤等の固型製剤にすることがで
きる。また、硬質または軟質のゼラチンカプセル等を用
いてカプセル剤としてもよい。これらの固型製剤には、
ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、ヒド
ロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネー
ト、セルロースアセテートフタレート、メタアクリレー
トコポリマー等の被覆用基剤を用いて腸溶性被覆を施し
てもよい。さらに、前記クロマノール配糖体を、精製水
等の一般的に用いられる不活性希釈剤に溶解して、必要
に応じて、この溶液に浸潤剤、乳化剤、分散助剤、界面
活性剤、甘味料、フレーバー、芳香物質等を適宜添加す
ることにより、シロップ剤、エリキシル剤等の液状製剤
とすることもできる。

【００４１】また、本発明の炎症性腸疾患の予防および
治療剤を非経口投与用とする場合には、前記クロマノー
ル配糖体を精製水、リン酸緩衝液等の適当な緩衝液、生
理的食塩水、リンガー溶液、ロック溶液等の生理的塩類
溶液、エタノール、グリセリン及び慣用される界面活性
剤等と適当に組み合わせた滅菌された水溶液、非水溶
液、懸濁液、リポソームまたはエマルジョンとして、好
ましくは注射用滅菌水溶液として、静脈内、皮下、筋肉
内、腹腔内、腸内等に投与される。この際、液状製剤
は、生理学的なｐＨ、好ましくは６〜８の範囲内のｐＨ
を有することが好ましい。

【００４２】さらに、本発明の炎症性腸疾患の予防およ
び治療剤は、ペレットによる埋め込み、または坐薬用基
剤を用いた坐薬として投与されることも可能である。

【００４３】上述したうち、好ましい投与形態や投与経
路などは、担当の医師によって選択される。

【００４４】本発明の炎症性腸疾患の予防および治療剤
に含まれるクロマノール配糖体の濃度は、投与時の形
態、病気の種類や重篤度や目的とする投与量などによっ
て様々であるが、一般的には、原料の全重量に対して
０．１〜１００重量％、好ましくは２０〜９０重量％で
ある。特に、本発明の製剤が経口投与される場合には、
原料の全重量に対して１０〜１００重量％、好ましくは
２０〜９０重量％であり、非経口投与される場合には、
原料の全容量に対して０．１〜９０容量％、好ましくは
１〜８０容量％であることが好ましい。この際、クロマ
ノール配糖体の濃度が前記上限値を超えると、過剰な投
与量に見合った病態改善効果が得られず好ましくなく、
クロマノール配糖体の濃度が前記下限値未満であると、
病態改善効果が十分に期待できずやはり好ましくない。

【００４５】本発明の炎症性腸疾患の予防および治療剤
の投与量は、患者の年齢、体重及び症状、目的とする投
与形態や方法、治療効果、および処置期間等によって異
なり、正確な量は医師により決定されるものであるが、
通常、０．０１〜１００００ｍｇ／ｋｇ体重／日のクロ
マノール配糖体の投与量の範囲である。本発明の炎症性
腸疾患の予防および治療剤が経口投与される場合には、
クロマノール配糖体の投与量換算で、０．１〜１０００
０ｍｇ／ｋｇ体重／日の投与量の範囲で１日に１〜３回
分けて投与される。この際、１日当たりの経口投与量が
多い場合には、１回に複数個の錠剤等の製剤を投与して
もよい。また、本発明の炎症性腸疾患の予防および治療
剤を非経口投与する場合には、クロマノール配糖体の投
与量換算で、０．０１〜１０００ｍｇ／ｋｇ体重／日の
投与量になるように１日に１〜３回分けて投与される。

【００４６】

【実施例】次に本発明の炎症性腸疾患の予防および治療
剤の薬理効果を、動物を用いた薬理試験によりさらに詳
細に説明する。

【００４７】ＴＮＢ惹起性大腸炎における病変抑制効果 トリニトロベンゼンスルホン酸（ＴＮＢ）惹起性大腸炎
はヒトの炎症性腸疾患、特にクローン病に類似している
といわれている。このモデルでは、組織中への好中球浸
潤の指標であるｍｙｅｌｏｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ（ＭＰ
Ｏ）活性がＴＮＢ投与初期より大腸粘膜中において著名
に増加し、その後腸管の浮腫、びらん、壊死を含む全層
性炎症が生じる。この粘膜病変においては、脂質過酸化
の指標であるチオバルビツール酸（ＴＢＡ）反応物質も
増加し、逆にＳＯＤ活性、グルタチオンペルオキシダー
ゼ（ＧＰｘ）活性、α−トコフェロールといった抗酸化
物質が低下している。同モデルを用いて、クロマノール
配糖体によるＴＮＢ惹起性大腸炎の病変抑制効果を調べ
た。

【００４８】クロマノール配糖体として、特開平７−１
１８２８７号公報の実施例１に記載の方法で製造した下
記式（３）で示される２−（α−Ｄ−グルコピラノシ
ル）メチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−
６−オール（ＴＭＧ）を、水溶液中に２０ｍｇ／ｍｌ、
２ｍｇ／ｍｌおよび０．２ｍｇ／ｍｌの濃度で完全に溶
解して注腸用製剤とした。

【００４９】

【化４】

【００５０】７週令の１９０〜２１０ｇのウイスター系
雄性ラットを１群６匹として使用し、４８時間絶食後、
５０％エタノールに溶解した１２０ｍｇ／ｍｌのＴＮＢ
を１ｍｌ／ｋｇ注腸投与した。その後、上記で調整した
ＴＭＧ製剤を毎日１ｍｌ腹腔内投与し、１週間後の体重
増加量、ならびに肛門側８ｃｍ領域の大腸のＤａｍａｇ
ｅ Ｓｃｏｒｅ、湿重量、ＴＢＡ反応物質およびＭＰＯ
活性を評価した。

【００５１】これらの結果を、ＴＮＢの代わりに生理食
塩水を同量投与したノーマル群、およびＴＮＢ大腸炎惹
起後ＴＭＧ製剤の代わりに生理食塩水を同量ずつ投与し
たコントロール群の結果とともに表１および２に示す。
なお、上記評価項目のうち、Ｄａｍａｇｅ Ｓｃｏｒ
ｅ、ＴＢＡ反応物質およびＭＰＯ活性は、以下の方法に
より測定した。

【００５２】Ｄａｍａｇｅ Ｓｃｏｒｅ評価法 大腸粘膜面の病変をＭｏｒｒｉｓの分類（Ｇ．Ｐ．Ｍｏ
ｒｒｉｓ，ｅｔ ａｌ．：Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ
ｏｇｙ，９６（１９８９）７９５−８０３）に従い、０
〜５点に分類し、さらに大腸粘膜側癒着の程度を０〜３
点（０：癒着なし、１：非連続性の癒着あり、２：連続
性の癒着あり、３：塊状の癒着あり）に分類し両者を合
計して評価した。

【００５３】ＴＢＡ反応物質測定法 Ｏｈｋａｗａ法により測定した（Ｈ．Ｏｈｋａｗａ，ａ
ｔ ａｌ．：Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，９５（１９
７９）３５１−３５８）。大腸８ｃｍ分の粘膜を（１０
ｍＭリン酸緩衝液＋３０ｍＭ塩化カリウム溶液）１．５
ｍｌでホモジネートしそのうち０．２ｍｌに蒸留水０．
６ｍｌおよび８．１％ナトリウムジサルフェート０．２
ｍｌを加え、ｐＨ３．５の２０％酢酸緩衝液１．５ｍ
ｌ、０．８％ＴＢＡ１．５ｍｌおよび１％ＢＨＴ４０μ
ｌを加え、９５℃で１時間加熱した後１０分間冷却す
る。さらに、蒸留水１．０ｍｌおよびブタノールピリジ
ン（ブタノール：ピリジン＝１５：１）５．０ｍｌを加
え撹拌した。これを室温で３０００ｒｐｍで１０分間遠
心し、得られた上清を波長５３５ｎｍにて分光光度計で
吸光度を測定した。大腸粘膜ホモジネート０．２ｍｌお
よび蒸留水０．６ｍｌの代わりに蒸留水０．８ｍｌとし
たものをブランク、蒸留水０．３ｍｌおよびＴＥＰ０．
５ｍｌとしたものを標準として、両者から検量曲線を得
て検体のＴＢＡ反応物質を測定した。

【００５４】ＭＰＯ活性測定法 ｏ−ジアニシジン−過酸化水素反応により測定した
（Ｊ．Ｅ．Ｋｒｒａｗｉｓｚ，ｅｔ ａｌ．：Ｇａｓｔ
ｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，８７（１９８４）１３４４
−１３５０）。大腸８ｃｍ分の粘膜を（１０ｍＭリン酸
緩衝液＋３０ｍＭ塩化カリウム溶液）１．５ｍｌでホモ
ジネートし、そのうち１．０ｍｌを４℃、１５０００ｒ
ｐｍで１５分間超遠心分離し、得られた沈殿物に３００
μｌの０．５％ＨＴＡＢ（５０ｍＭリン酸緩衝液）を加
え、再溶解する。これをさらに４℃、１５０００ｒｐｍ
で１５分間超遠心分離し、得られた上清を検体とした。
ｐＨ６．０の５０ｍＭリン酸カリウム緩衝液に１６．７
ｍｇのｏ−ジアニシジンジヒドロクロライドを溶解し、
さらに０．５％過酸化水素水１００μｌを混合して調製
した反応溶液９５０μｌに、検体５０μｌを加え、波長
４６０ｎｍにおける吸光度変化を分光光度計で測定し
た。２５℃で１分間あたり１μｍｏｌの過酸化水素水を
変化させるＭＰＯの量を１単位（Ｕ）とした。

【００５５】

【表１】

【００５６】

【表２】

【００５７】表１より明らかなように、１週間の体重増
加は、ＴＮＢ惹起大腸炎モデル（コントロール群）で顕
著に抑制されるが、ＴＭＧ製剤投与群ではかかる現象が
改善された。また、ＴＮＢ惹起大腸炎モデルでは、Ｄａ
ｍａｇｅ Ｓｃｏｒｅ、湿重量、ＴＢＡ反応物質および
ＭＰＯ活性のいずれも顕著に上昇するが、ＴＭＧ製剤投
与群では、これらを有意に抑制した。

【００５８】急性毒性試験 本発明の炎症性腸疾患の予防および治療剤について急性
毒性試験を行い、その安全性を確認した。４〜５週令の
ＩＣＲ系マウスを１群３匹として用い、クロマノール配
糖体として上記と同じＴＭＧを５％アラビアゴム液に懸
濁した後、ＴＭＧ換算で５００ｍｇ／ｋｇを経口投与し
て１週間観察した。この際、コントロール群として５％
アラビアゴム液を０．３ｍｌ経口投与した。その結果、
いずれの投与群においてもマウスの死亡例は認められな
かった。

【００５９】

【発明の効果】上述したように、本発明の炎症性腸疾患
の予防および治療剤は、水溶性で優れた抗酸化作用、抗
フリーラジカル作用を有するクロマノール配糖体を有効
成分とするので、炎症性腸疾患における病変を顕著に抑
制し、病態を飛躍的に改善することができる。

【００６０】また、本発明は、高い水溶性を有するクロ
マノール配糖体を有効成分とするので、固形製剤として
用いるほか、有効成分を高濃度で含有する水性製剤とす
ることができ、少用量で患部に効果的に作用し、炎症性
腸疾患を予防、治療することができるとともに、副作用
を伴わないので極めて安全に使用することができる。

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 下記一般式（１） 【化１】 ［ただし、式中、Ｒ¹ 、Ｒ² 、Ｒ³ およびＲ⁴ は同一ま
   たは異なる水素原子または低級アルキル基を表し、Ｒ⁵
   は水素原子、低級アルキル基または低級アシル基を表
   し、Ｘは糖残基中の水酸基の水素原子が低級アルキル基
   または低級アシル基で置換されていてもよい単糖残基ま
   たはオリゴ糖残基を表し、ｎは０〜６の整数であり、お
   よびｍは１〜６の整数である］で表されるクロマノール
   配糖体を有効成分とする炎症性腸疾患予防および治療
   剤。
2. 【請求項２】 前記クロマノール配糖体は２−（α−Ｄ
   −グルコピラノシル）メチル−２，５，７，８−テトラ
   メチルクロマン−６−オールである請求項１記載の炎症
   性腸疾患予防および治療剤。
3. 【請求項３】 前記炎症性腸疾患は潰瘍性大腸炎または
   クローン病である請求項１または２記載の炎症性腸疾患
   予防および治療剤。
4. 【請求項４】 水性製剤である請求項１〜３記載の炎症
   性腸疾患予防および治療剤。