JPH10195075A - Ｚ−バラシクロビルの製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 抗ヘルペス剤バラシクロビルの中間体である
Ｚ−バラシクロビルの産業上有用な製造方法を提供す
る。 【解決手段】 アシクロビルとＺ−Ｌ−バリンとの縮合
反応において、試薬及び溶媒の量、試薬添加方法、反応
温度等を特定する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、抗ウイルス剤とし
て世界中で広く用いられているアシクロビルのプロドラ
ッグで、現在ヘルペス、帯状疱疹等の治療薬として認可
されているバラシクロビルの合成前駆体である２−
［（２−アミノ−１，６−ジヒドロ−６−オキソ−９Ｈ
−プリン−９−イル）メトキシ］エチル Ｎ−［（ベン
ジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−バリネート（以下Ｚ−
バラシクロビルと略す）の製造方法に関するものであ
る。

【０００２】

【従来の技術】アシクロビルとして知られる９−［（２
−ヒドロキシエトキシ）メチル］−グアニンは、とりわ
けヘルペス群ウイルスに対して強力な抗ウイルス活性を
有し、現在ヘルペス、帯状疱疹等の治療薬として世界中
で広く用いられている。しかしながら、アシクロビルは
水溶性、経口吸収性共に低く、血漿中の有効抗ウイルス
濃度を維持するためには大量の薬剤の投与が必要である
ことが問題であった。これらの性質を改善するため、ア
シクロビルの誘導体化の様々な試みがなされ、例えば、
アシクロビルのＯ−アルキル誘導体、Ｏ−バレリル誘導
体、Ｏ−グリシン及びアラニン誘導体（特公平４−９９
０）、アシクロビルのＯ−バリン及びイソロイシン誘導
体（特開昭６４−６８３７３号報）等の合成が報告され
ている。これらのアシクロビルの様々な誘導体化の試み
のなかで、アミノ酸のエステル、特にＬ−バリンのエス
テルが経口吸収性等の点で最も良いことが明らかとなっ
た（Antiviral Chemistry & Chemotherapy(1992 3(3) p
157-164)）。このアシクロビルのＬ−バリンエステル
（バラシクロビル）は既にアシクロビルのプロドラッグ
として米英で認可され、アシクロビルに替わる抗ヘルペ
ス剤としての期待が大きい。

【０００３】これらのことから、アミノ酸とアシクロビ
ルの様な疑似糖部位を持つ抗ウイルス剤とのエステルの
需要が高まってきているが、その合成法は必ずしも満足
のいくものとなっていない。特開昭６４−６８３７３号
報やAntiviral Chemistry &Chemotherapy(1992 3(3) p1
57-164)によれば、Ｌ−バリン等のアミノ酸とアシクロ
ビルのエステルを合成するにあたっては、Ｎ保護アミノ
酸とアシクロビルを出発原料とし、縮合剤としてジシク
ロヘキシルカルボジイミドを用いて縮合を行い、その後
アミノ保護基の脱保護を行っているが、特に、この縮合
工程においては、必要試薬量及び溶媒量が多く、製品の
単離にシリカゲルカラム精製等の煩雑な工程を要すると
いった問題があり、産業上適していないのが現状であっ
た。

【０００４】具体的には、バラシクロビルの合成前駆体
であるＺ−バラシクロビルの場合、アシクロビル１．０
当量、Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−バ
リン（以下Ｚ−Ｌ−バリンと略す）１．３５当量、ジシ
クロヘキシルカルボジイミド１．６４当量、４−ジメチ
ルアミノピリジン０．１４当量をジメチルホルムアミド
（以下ＤＭＦと略す）溶媒に加熱溶解させた後、室温に
冷却しながら反応させ、さらにＺ−Ｌ−バリン１．３５
当量、ジシクロヘキシルカルボジイミド１．６４当量、
４−ジメチルアミノピリジン０．１４当量を追加して縮
合反応を行っている。この反応に於いては、アシクロビ
ルの溶解度が非常に低いために、アシクロビルを溶解さ
せるために大量のＤＭＦ溶媒を必要としている（１７Ｌ
／ｍｏｌ）。また、Ｚ−Ｌ−バリン、ジシクロヘキシル
カルボジイミドといった試薬を大過剰（Ｚ−Ｌ−バリン
２．７当量、ジシクロヘキシルカルボジイミド３．３当
量）に用いており、反応により副生するジシクロヘキシ
ルウレアを初めとした不純物が大量に生成し、或いは未
反応でこれらの試薬が残存し、これらをを淘汰するの
に、シリカゲルカラムや数回に及ぶ再結晶という煩雑な
精製工程が必要であった（特開昭６４−６８３７３号
報）。さらには、反応中にＺ−Ｌ−バリンがラセミ化
し、Ｄ異性化Ｚ−バラシクロビルが２〜３％生成するこ
とが知られており、ラセミ化率をいかに低く抑えるかも
課題であった（Antiviral Chemistry&Chemotherapy(199
2 3(3) p157-164）。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、抗ヘルペス
剤として有用なバラシクロビルの合成前駆体であるＺ−
バラシクロビルを合成するのに際し、特に生産性及び製
品品質の面で、産業上有用な製造方法を提供するもので
ある。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、Ｚ−バラ
シクロビルの製造方法について、アシクロビルとＺ−Ｌ
−バリンとの縮合反応を詳細に検討した。その結果、Ｚ
−Ｌ−バリン、ジシクロヘキシルカルボジイミドを約１
／２量まで削減し、ＤＭＦ溶媒も約１／１４量まで大幅
に削減し、低温の条件下で初めからスラリー状態でも反
応が問題なく進行することを見出した。また、この反応
条件においては、不純物の生成が低く抑えられ、スラリ
ーのろ過と濾液からの晶析のみの単純な工程で高純度の
Ｚ−バラシクロビルを従来知られていた方法と比べて遜
色のない収率で得ることができることを見出だし、本発
明を完成するに到った。

【０００７】すなわち本願発明は、下式（１）で示され
る２−［（２−アミノ−１，６−ジヒドロ−６−オキソ
−９Ｈ−プリン−９−イル）メトキシ］エチル Ｎ−
［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−バリネートを
製造する方法に於いて、

【０００８】

【化４】

【０００９】下式（２）で示されるアシクロビル１．０
当量に対し

【００１０】

【化５】

【００１１】下式（３）で示されるＮ−［（ベンジルオ
キシ）カルボニル］−Ｌ−バリン１．１〜２．０当量、

【００１２】

【化６】

【００１３】ジシクロヘキシルカルボジイミド１．３〜
２．０当量、４−ジメチルアミノピリジン０．０２〜
０．１５当量をジメチルホルムアミド１．０〜１．５Ｌ
中、反応温度−２℃〜１０℃で反応させる製造方法であ
る。

【００１４】

【発明の実施の形態】本発明において用いる試薬の当量
は、上記範囲内であれば問題ないが、Ｚ−Ｌ−バリン
１．２当量、ジシクロヘキシルカルボジイミド１．５〜
１．６当量、４−ジメチルアミノピリジン０．１当量の
条件下では反応が良好に進行する。

【００１５】上記試薬の添加方法は、任意の比率で分割
し、一定の間隔をおいて添加していくか、あるいはＤＭ
Ｆ溶液として連続的に滴下していく。具体的には、Ｚ−
Ｌ−バリンを０．４当量ずつに３分割（計１．２当
量）、それに対応してジシクロヘキシルカルボジイミド
は０．４４当量ずつと、更に０．１８当量に４分割（計
１．５当量）にし、まずアシクロビル１．０当量のＤＭ
Ｆ懸濁液に、４−ジメチルアミノピリジン０．１当量、
Ｚ−Ｌ−バリン０．４当量、ジシクロヘキシルカルボジ
イミド０．４４当量を加えて反応させ、適宜Ｚ−Ｌ−バ
リン、ジシクロヘキシルカルボジイミドを追加して反応
を終結させる。または、アシクロビル１．０当量のＤＭ
Ｆ懸濁液にＺ−Ｌ−バリン１．２当量を加え、この懸濁
液にジシクロヘキシルカルボジイミドのＤＭＦ溶液（ジ
シクロヘキシルカルボジイミド１．６当量分）を連続的
に滴下していき反応を終結させる。

【００１６】試薬添加の間隔は、５時間から２４時間程
度で、望ましくは１０時間前後である。ＤＭＦ溶液状態
で連続的に滴下する場合はその限りではないが、非常に
ゆっくりと１〜２日間かけて滴下するのが望ましい。

【００１７】溶媒として用いるＤＭＦの量は、１モルの
アシクロビルに対し、１．０〜１．５Ｌ望ましくは、
１．２５Ｌである。これよりも少ない場合には、反応中
或いは後処理の操作性が悪くなることがある。また多い
場合には、反応速度の低下が顕著で、ジシクロヘキシル
ウレアをはじめとする副生成物或いはその他の不純物の
スラリー濾過による淘汰性も悪くなる。

【００１８】反応温度は−２℃〜１０℃の低温域が良
い。それより低ければ反応速度が低下し、高い温度で
は、ラセミ化率が飛躍的に高くなる。

【００１９】結晶の単離は以下の手順で行う。反応液を
ろ過してジシクロヘキシルウレアを除去した後、そのろ
過液に適当な貧溶媒を加える。得られた懸濁液を一旦加
熱溶解させた後、冷却晶析を行い、析出した目的化合物
の結晶を濾過或いは遠心分離により単離する。また、必
要であれば、ジシクロヘキシルウレアをろ過する前に未
反応のジシクロヘキシルカルボジイミドを反応系に酢酸
を添加することによって分解し、その後、ろ過、晶析を
行い結晶を単離しても良い。

【００２０】添加する貧溶媒としては、水、アセトニト
リル、アルコール類（例えば、メタノール、エタノー
ル、イソプロピルアルコール等）、エステル類（例え
ば、酢酸エチル、酢酸イソプロピル等）、芳香族系炭化
水素（例えば、トルエン、キシレン等）、ハロゲン系溶
媒（例えば、塩化メチレン、クロロホルム等）、或いは
これらを任意の比率で混合した溶媒を用いることができ
るが、望ましくは、メタノール、エタノール、イソプロ
ピルアルコール等のアルコール或いはそれらと水の混合
溶媒を用いると良好な結晶が得られる。

【００２１】以上、本発明により、抗ヘルペス剤バラシ
クロビルの前駆体であるＺ−バラシクロビルを高効率的
に製造することが可能となった。以下、実施例により詳
細に説明する。

【００２２】

【実施例】

（実施例１）２−［（２−アミノ−１，６−ジヒドロ−
６−オキソ−９Ｈ−プリン−９−イル）メトキシ］エチ
ル Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−バリ
ネートの合成（特開昭６４−６８３７３号報 追実験） アシクロビル（２．００ｇ，８．８８ｍｍｏｌ）をジメ
チルホルムアミド（ＤＭＦ）（１５０ｍｌ）に懸濁した
後、６０℃に加熱して均一溶液を得た。Ｚ−Ｌ−バリン
（３．０１ｇ，１２．０ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミ
ノピリジン（ＤＭＡＰ）（０．１５ｇ，１．２６ｍｍｏ
ｌ）、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）
（３．００ｇ，１４．５ｍｍｏｌ）をその溶液に加え、
室温まで放冷しながら一晩攪拌した。反応混合物に、上
記量のＺ−Ｌ−バリン、ＤＭＡＰ、ＤＣＣを再び加え、
室温で３日間攪拌した。この懸濁液を濾過して白色固体
を除いた後、ろ過液を濃縮して油状物質を得た。ジクロ
ロメタン中メタノールの勾配（０〜１５％）で溶離する
シリカゲルクロマトグラフィーによりこの油状物質を精
製し、表題化合物３．３９ｇ（８３．３％）を白色固体
として得た。

【００２３】１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−
ｄ６）：０．８３（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，６Ｈ），１．
８５−２．０５（ｍ，１Ｈ），３．５８−３．７２
（ｍ，２Ｈ），３．８５−３．９５（ｍ，１Ｈ），４．
０７−４．２９（ｍ，２Ｈ），５．０３（ｓ，２Ｈ），
５．３５（ｓ，２Ｈ），６．５１（ｂｒ ｓ，２Ｈ），
７．２８−７．４０（ｍ，５Ｈ），７．６４（ｄ，Ｊ＝
８．１Ｈｚ，１Ｈ），７．８１（ｓ，１Ｈ），１０．６
２（ｂｒ ｓ，１Ｈ）

【００２４】（実施例２）２−［（２−アミノ−１，６
−ジヒドロ−６−オキソ−９Ｈ−プリン−９−イル）メ
トキシ］エチル Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニ
ル］−Ｌ−バリネートの合成（分割投入法） アシクロビル（４．２９ｋｇ，１８．１１ｍｏｌ）をＤ
ＭＦ（２０．６Ｌ）に懸濁させ、０℃に冷却した。ここ
に、Ｚ−Ｌ−バリン（１．８２ｋｇ，７．２４ｍｏ
ｌ）、ＤＭＡＰ（２２１．４ｇ，１．８１ｍｏｌ）、Ｄ
ＣＣ（１．６４ｋｇ，７．９７ｍｏｌ）のＤＭＦ（０．
５Ｌ）溶液を加え、１６時間攪拌した。この反応液に、
Ｚ−Ｌ−バリン（１．８２ｋｇ，７．２４ｍｏｌ）、Ｄ
ＣＣ（１．６４ｋｇ，７．９７ｍｏｌ）のＤＭＦ（０．
５Ｌ）溶液を追加し、０℃で８時間攪拌した。更に、Ｚ
−Ｌ−バリン（１．８２ｋｇ，７．２４ｍｏｌ）、ＤＣ
Ｃ（１．６４ｋｇ，７．９７ｍｏｌ）のＤＭＦ（０．５
Ｌ）溶液を再度追加し、１６時間攪拌した後、ＤＣＣ
（０．６７ｋｇ，３．２６ｍｏｌ）のＤＭＦ（０．５
Ｌ）溶液を加え、２４時間反応させた。析出した固体を
ろ過し、固体をＤＭＦ及びイソプロピルアルコール（Ｉ
ＰＡ）−水（１：１ ｖ／ｖ）の混合液で洗浄した。ろ
過液と洗浄液を合わせ、そこにＩＰＡ−水（１：１ ｖ
／ｖ）の混合液を加えて得られた懸濁液を加熱し均一溶
液とした後、冷却する事により析出した結晶を遠心分離
した。結晶をＩＰＡ−水（１：１ ｖ／ｖ）の混合液、
続いてメタノールで洗浄した後、減圧下５０℃で加熱乾
燥して、目的のＺ−バラシクロビルを７．５ｋｇ（９
０．５％）得た。この結晶を高速液体クロマトグラフィ
ーを用いて分析したところ９５．０ｗｔ％と高純度のも
のであり、Ｄ異性体も１％程度であった。

【００２５】（実施例３）２−［（２−アミノ−１，６
−ジヒドロ−６−オキソ−９Ｈ−プリン−９−イル）メ
トキシ］エチル Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニ
ル］−Ｌ−バリネートの合成（連続滴下法） ５℃に冷却したＤＭＦにＺ−Ｌ−バリン（４１．１ｋ
ｇ，１６３．６ｍｏｌ）とＤＭＡＰ（１．６７ｋｇ，１
３．６ｍｏｌ）を溶解させた。アシクロビル（２／３水
和物相当 ３２．３４ｋｇ，１３６．３ｍｏｌ）をこの
溶液に加えて懸濁させ、ＤＣＣを６０％含有するＤＭＦ
溶液を（４．７ｋｇ，１３．６ｍｏｌ）を添加した。更
に６０％のＤＣＣのＤＭＦ溶液（７０．３ｋｇ，２０
４．５ｍｏｌ）を約３０時間かけてゆっくりと滴下しな
がら攪拌した。滴下終了後、高速液体クロマトグラフィ
ーにより反応液を分析したところ、原料のアシクロビル
の残量はすでに３％程度であった。反応を完結させるた
め、さらに５℃で１０時間攪拌した後、高速液体クロマ
トグラフィーで分析したところ、反応はほぼ定量的に進
行していた。反応液に酢酸（４．１ｋｇ，６８．２ｍｏ
ｌ）を加え、未反応のＤＣＣを分解した後、析出してい
る白色固体を濾過により除去し、ＤＭＦ（１２Ｌ）及び
ＩＰＡ−水（６：４ ｖ／ｖ）の混合液（５５Ｌ）で洗
浄した。ろ過液と洗浄液をあわせ、そこにＩＰＡ−水
（６：４ ｖ／ｖ）の混合液（５０４Ｌ）を加え、スラ
リーを加熱溶解させた。この溶液を冷却する事により析
出した結晶を遠心分離し、上記混合比のＩＰＡ−水（２
４５Ｌ）で洗浄後、乾燥して、表題化合物を白色固体と
して得た。高速液体クロマトグラフィーによる分析の結
果、９４．４ｗｔ％と高純度でありＤ異性体は１．６％
程度であった。

【００２６】（実施例４）２−［（２−アミノ−１，６
−ジヒドロ−６−オキソ−９Ｈ−プリン−９−イル）メ
トキシ］エチル Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニ
ル］−Ｌ−バリネートの合成（溶媒量の反応への影響確
認） Ａ）ＤＭＦ１．２５Ｌ／ｍｏｌのケース アシクロビル（５．９８ｇ，２５．０ｍｍｏｌ）をＤＭ
Ｆ（３１．２５ｍｌ）に懸濁させ、０℃に冷却した後、
Ｚ−Ｌ−バリン（２．５１ｇ，１０．０ｍｍｏｌ）、Ｄ
ＭＡＰ（３０５ｍｇ，２．５ｍｍｏｌ）、ＤＣＣ（２．
２９ｇ，１１．０ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１７．５時
間攪拌した。上記量のＺ−Ｌ−バリン、ＤＣＣを再び反
応液に加えて２３．５時間攪拌し、更に上記量のＺ−Ｌ
−バリン、ＤＣＣを追加して２４．５時間攪拌した。こ
の反応液にＤＣＣ（０．９２ｇ，４．４ｍｍｏｌ）を追
加して、更に１７時間攪拌し反応させた。反応液を高速
液体クロマトグラフィーで分析したところ、反応収率は
９６．５％であった。反応懸濁液を濾過することによ
り、白色固体を濾別し、その固体をＤＭＦ及びＩＰＡ−
水（１：１ ｖ／ｖ）の混合液で洗浄した。ろ過液と洗
浄液をあわせ、そこにＩＰＡ−水（１：１ ｖ／ｖ）の
混合液を加えて、スラリーを加熱溶解した後、冷却晶析
した。この結晶を濾取し、表題化合物をウェットで１
３．７６ｇ得た。

【００２７】Ｂ）ＤＭＦ６．２５Ｌ／ｍｏｌのケース アシクロビル（４．７８ｇ，２０．０ｍｍｏｌ）をＤＭ
Ｆ（１２５ｍｌ）に懸濁させ、０℃に冷却した後、Ｚ−
Ｌ−バリン（２．０１ｇ，８．０ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ
（２４４．３ｍｇ，２．０ｍｍｏｌ）、ＤＣＣ（１．８
２ｇ，８．８ｍｍｏｌ）を加えて２１時間反応させた。
続いて上記量のＺ−Ｌ−バリン、ＤＣＣを反応液に添加
し、３０時間反応させ、更に上記量のＺ−Ｌ−バリン、
ＤＣＣを加えて２２．５時間攪拌した。更にＤＣＣ
（０．７４ｇ，３．６ｍｍｏｌ）を加えて２４時間攪拌
した。この反応液を高速液体クロマトグラフィーで分析
したところ反応収率は８３％であり、明らかに反応速度
が低下していることが確認された。

【００２８】（実施例５）２−［（２−アミノ−１，６
−ジヒドロ−６−オキソ−９Ｈ−プリン−９−イル）メ
トキシ］エチル Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニ
ル］−Ｌ−バリネートの合成（反応温度の効果確認） Ａ）反応温度が０℃設定のケース アシクロビル（４．６３ｇ，２０．０ｍｍｏｌ）をＤＭ
Ｆ（２５．０ｍｌ）に懸濁し、Ｚ−Ｌ−バリン（２．５
１ｇ，１０．０ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（４９ｍｇ，０．
４ｍｍｏｌ）、ＤＣＣ（２．２９ｇ，１１．０ｍｍｏ
ｌ）を加えて０℃で１７．５時間攪拌した。反応液に上
記量のＺ−Ｌ−バリン、ＤＣＣを加えて２３時間反応さ
せ、更に同量のＺ−Ｌ−バリン、ＤＣＣを加えて２５．
５時間攪拌した。この反応液段階の反応収率は８９．２
％であり、Ｄ体に異性化したＺ−バラシクロビルは高速
液体クロマトグラフィーのエリアで２．６７％であっ
た。反応懸濁液を濾過し、そのろ過液にＩＰＡ−水
（１：１ ｖ／ｖ）の混合液を加え、加熱して均一溶液
とした。この溶液から冷却晶析して析出した結晶を濾取
し、表題化合物の白色結晶をウェットで１９．３ｇ得
た。

【００２９】Ｂ）反応温度が室温設定のケース アシクロビル（２．３２ｇ，１０．０ｍｍｏｌ）をＤＭ
Ｆ（１２．５ｍｌ）に懸濁し、室温（約２８℃）のまま
Ｚ−Ｌ−バリン（１．２６ｇ，５．０ｍｍｏｌ）、ＤＭ
ＡＰ（２４．４ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）、ＤＣＣ（１．
１５ｇ，５．５ｍｍｏｌ）を加えて１８時間反応させ
た。この反応液に、上記量のＺ−Ｌ−バリン、ＤＣＣを
加えて２４時間反応させ、更に同量のＺ−Ｌ−バリン、
ＤＣＣを加え、７時間反応させた。この反応液での反応
収率は８３．４％であり、０℃設定の場合と比べそれ程
変わらなかった。しかし、Ｄ体に異性化したＺ−バラシ
クロビルの分析をおこなったところ、高速液体クロマト
グラフィーのエリアで６．０６％とかなり異性化が進行
していることが確認された。

【００３０】

【発明の効果】バラシクロビル中間体として極めて重要
なＺ−バラシクロビルの製造において、反応条件の効率
化と単離精製法の単純化により、生産性が著しく向上し
た。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 井澤 邦輔 神奈川県川崎市川崎区鈴木町１−１ 味の 素株式会社中央研究所内 (72)発明者 古口 良仁 三重県四日市市大字日永1730番地 味の素 株式会社東海工場内

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 下式（１）で示される２−［（２−アミ
   ノ−１，６−ジヒドロ−６−オキソ−９Ｈ−プリン−９
   −イル）メトキシ］エチル Ｎ−［（ベンジルオキシ）
   カルボニル］−Ｌ−バリネートを製造する方法に於い
   て、 【化１】 下式（２）で示されるアシクロビル１．０当量に対し 【化２】 下式（３）で示されるＮ−［（ベンジルオキシ）カルボ
   ニル］−Ｌ−バリン１．１〜２．０当量、 【化３】 ジシクロヘキシルカルボジイミド１．３〜２．０当量、
   ４−ジメチルアミノピリジン０．０２〜０．１５当量を
   ジメチルホルムアミド１．０〜１．５Ｌ中、反応温度−
   ２℃〜１０℃で反応させる製造方法。
2. 【請求項２】 請求項１に記載の製造方法において、Ｎ
   −［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−バリン及び
   ジシクロヘキシルカルボジイミドを一定量ずつ分割し、
   一定間隔でそれらを反応系に添加していくか或いは所定
   量のＮ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−バリ
   ンを系内にあらかじめ加えておき、ジシクロヘキシルカ
   ルボジイミドのジメチルホルムアミド溶液を連続的に滴
   下する事により反応せしめる製造方法。
3. 【請求項３】 反応で副生するジシクロヘキシルウレア
   を濾過により除去し、或いは必要であれば未反応で残留
   しているジシクロヘキシルカルボジイミドを酢酸を添加
   して分解せしめた後にウレアをろ過し、ろ過液に対し適
   当な貧溶媒を添加することにより、２−［（２−アミノ
   −１，６−ジヒドロ−６−オキソ−９Ｈ−プリン−９−
   イル）メトキシ］エチル Ｎ−［（ベンジルオキシ）カ
   ルボニル］−Ｌ−バリネートの結晶を単離する請求項１
   及び請求項２に記載の製造方法。
4. 【請求項４】請求項３に記載の製造方法において、貧溶
   媒として、メチルアルコール、エチルアルコール、イソ
   プロピルアルコール、またはそれらのアルコールと水を
   任意の比率で混合した溶媒を用いた製造方法。