JPH10251280A - 脂質類化合物およびその製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 不飽和型のイノシトールリン脂質類化合物を
合成する方法を提供すること。 【解決手段】 リン酸保護基としてフルオレニルメチル
基を用いて不飽和型ホスファチジルイノシトールポリリ
ン酸類化合物を合成する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、脂質類化合物、特
にイノシトールリン脂質類、即ちホスファチジルイノシ
トールポリリン酸（ポリホスホイノシチド）類化合物の
新規な製造方法、および最終化合物に至る途中の新規な
中間化合物およびその製造方法に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】生体のイノシトールリン脂質代謝の主要
経路は、細胞膜の微量成分であるホスファチジルイノシ
トール−４，５−ビスホスフェート（ＰＩ−４，５−Ｐ
₂、ＰＩＰ₂）がホスホリパーゼＣ（ＰＬＣ）で分解を受
け、イノシトール−三リン酸（ＩＰ₃）とジアシルグリ
セロール（ＤＡＧ）が生成される行程であり、これらセ
カンドメッセンジャーは、それぞれ細胞内のＣａ²⁺濃度
の上昇、プロティンキナーゼＣ（ＰＫＣ）の活性化をひ
きおこし、ホルモン作用のみならず、細胞増殖・分化や
癌化の情報伝達において主要な役割を果たす。またＰＩ
Ｐ₂自身がα−アクチニンやビンキュリン、Ｈ１ヒスト
ンなどと結合して様々な生理作用を有することも明らか
にされてきた。

【０００３】ポリホスホイノシチドの代謝では、ホスフ
ァチジルイノシトール（ＰＩ）からＰＩ−４−キナーゼ
によってホスファチジルイノシトール−４−モノホスフ
ェート（ＰＩ−４−Ｐ）が生成し、さらにＰＩＰキナー
ゼによってＰＩ−４，５−Ｐ₂（ＰＩＰ₂）が生成する行
程が主要経路であるが、最近、ＰＩからＰＩ−３キナー
ゼによりＰＩ−３−Ｐが、ＰＩ−４−ＰからＰＩ−３キ
ナーゼによりＰＩ−３，４−Ｐ₂が、そしてＰＩ−４，
５−Ｐ₂からＰＩ−３キナーゼによりＰＩ−３，４，５
−トリホスフェート（Ｐ₃）が生成する経路等が発見さ
れてきた。これらＰＩ−３−Ｐ、ＰＩ−３，４−Ｐ₂、
ＰＩ−３，４，５−Ｐ₃等のリン脂質の生理作用は明ら
かではないが、細胞増殖時や癌において増加していると
いう（蛋白質、核酸、酵素、３６（３）、２６３、１９
９１）。

【０００４】ところが、これらリン脂質類化合物はごく
微量しか生体内にはなく、またこれらの化合物を生合成
するＰＩ−キナーゼ類、特にＰＩ−３キナーゼなどはcr
udeなものが微量しかなく、生合成させることも困難な
現状において、化学的にこれらリン脂質類を全合成し、
量的に確保しその機能を明らかにすることが強く要求さ
れている。

【０００５】そこで本発明者らはイノシトールを出発原
料として、イノシトールリン脂質類化合物を全合成する
ことを企て、鋭意研究を進め、その結果特開平５−２７
１２５６特許出願を出願した。ついで研究を進め、本発
明の下記の合成中間体3から1位をリン酸化後3,4,5位を
リン酸エステルとするPIP₃の合成法につき報文を報告し
た（Synthesis of 1D distearoyl phosphatidyl-myo-in
ositol 3,4,5-tris(dihydrogen phosphate), Yutaka Wa
tanabe, Masaya Tomioka and Shoichiro Ozaki, Tetrah
edron,51(33), 8969-8976(1995)）。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】本発明者らのこれら研
究において、所望の低級、高級の飽和型の脂肪酸からな
るリン脂質類化合物は合成しうることが明らかとなった
が、不飽和型のリン脂質類化合物の合成は、イノシトー
ルの糖水酸基やリン酸残基の保護基を種々組み合わせて
遂行しようとしても困難で、目的とする化合物を取得す
るには至らなかった。

【０００７】

【課題を解決するための手段】そこで、本発明者らは鋭
意研究を続け、不飽和脂肪酸を有するホスファチジルイ
ノシトールの合成に有用なリン酸残基の保護基をかたっ
ぱしから広く検討し、９−フルオレニルメチル基を利用
することに思いあたった。そしてこのフルオレニルメチ
ル基をリン酸残基の保護基として採用することにより、
所望の不飽和型イノシトールリン脂質類化合物の合成に
成功し、本発明を完成した。

【０００８】

【発明の実施の形態】本発明によれば、イノシトールを
出発原料として３、６位を proximately assisted clea
vable ２−［２−（レブリノイルオキシ）エチル］ベン
ゾイル（ＰＡＣ_Lev）基で保護し、４、５位水酸基をテ
トラゾール存在下Difluorenylmethy N,N-disopropylpho
sphoramiditeによりリン酸化し、１、２−ジオールに導
き、ついでこの１位水酸基をホスファイトとピリジニウ
ムトリブロミド（ＰｙＨＢｒ₃）による位置選択的リン
酸化により１−リン酸エステル２８を得た。ＮａＩによ
り１位リン酸保護基の除去後、塩基を作用させ４、５位
リン酸保護基を除去し、引き続きヒドラジンを作用させ
ることにより３、６位ＰＡＣレブリニル基を除去する。
生成するヒドロキシエチル体を、ピリジン溶媒中、加熱
処理することによりグリセロエステル部を損なうことな
くＰＡＣ基の除去ができ、目的の不飽和脂肪酸を有する
リン脂質の合成に到達した。

【０００９】ホスファチジルイノシトール 3,4,5-三リ
ン酸（PIP₃）の合成を図１に従って行った。まず、光学
的に純粋な、あるいはラセミ体の１から４に誘導した。
このトリオールをアミダイト法によりリン酸ジ9-フルオ
レニルメチルエステル５に誘導した。ついで５を1,2-ジ
オールにし、順次トリエチルシリル化し、本発明ではこ
れまで殆ど実用的に使われたことのない9-フルオレニル
メチル基をリン酸保護基として利用することを検討し
た。その結果、これまでの既知法と異なり、不飽和脂肪
酸を有するホスファチジルイノシトール類の合成も可能
となった。グリセロール部の脂肪酸としては炭素数２の
酢酸から炭素数３０までの飽和、不飽和のカルボン酸類
が利用できる。たとえば、パルミチン酸、ステアリン
酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、アラキドン
酸などの天然の脂肪酸や、他の天然にはない脂肪酸など
である。

【００１０】図２に示すメントキシ酢酸を用いても、化
合物15に誘導後、これをシリカゲルクロマトグラフィー
により光学分割できる。これから、化合物４に誘導し、
図１に従ってPIP₃ の合成ができる。一方、グリセリル
ホスファイトをピリジニウムトリブロミドの存在下18に
作用させ、１位をリン酸化後20a あるいは20b とし、脱
シリル化に続くリン酸化により10 あるいは22b を得
た。これより図１と同様の脱保護の工程を行い、PIP₃
の合成ができる。なお、20b の場合には、11 から12 へ
の工程は不要である。

【００１１】ホスファチジルイノシトール 4,5-二リン
酸（PIP₂）の合成法を図３に示す。ここでは、新しいリ
ン酸の保護基に加え、最近開発した水酸基の保護基（Pr
oximately Assisted and Chemoselectivity Cleavable
Protecting Groups for Alcohols, 2-[2-(Arylmethylox
y)ethylbenzoic Esters: Yutaka Watanabe, MasanoriIs
himaru, and Shoichiro Ozaki, Chem. Lett., 1994(1
1), 2163-2166)の類縁体であるPACLev 基（2-[2-(レブ
リノイルオキシ)エチル]ベンゾイル基）を活用した。こ
の基の導入に必要なカルボン酸38 の合成法は図５に示
すように、市販の34から４工程で、容易に得られた。こ
の保護基により、図４に示すように、酒石酸誘導体32を
アシル化剤とする速度論的分割（ラセミ体の一方の光学
異性体＝エナンチオマーとより早く反応し、一方の生成
物を優先して得る光学分割の方法）により化合物27の光
学活性体（98％ee）が効率良く得られた。化合物27
は、汎用される23にPAC基を導入後、ケタール交換、リ
ン酸化、及び加水分解により得られる。その後、リン酸
化により28を得、順次脱保護を行いPIP₂を得た。

【００１２】PIP₃ の場合と同じように、6に相当する27
から1位をシリル化後2位を保護してから1位をリン酸化
するルートでもPIP₂ が得られる。図１から４の中で、
化合物14,15,16,26,27,28,29,30,31は本発明で新規に合
成された化合物である。

【００１３】

【実施例】以下詳細に実施例をもって本発明を説明する
が、本発明はこれらに限定されるものではない。

【００１４】実施例１ ［化合物５の合成］窒素雰囲気下、1,2-O-Cyclohexylid
ene-6-O-levulinoyl-myo-inositol (4, 3.0 g, 8.4 mmo
l)をdry CHCl₃(80 ml)に溶解させ、0 ℃に冷やしておき
di-9-fluorenylmethyl N,N-Diisopropylphosphoroamidi
te (18.3 g, 35.1 mmol)、Tetrazole (2.5 g, 35.7 mmo
l)を加え、室温で2時間攪拌した。その後、-72℃に冷や
しmCPBA (6.5 g, 37.7 mmol)を加え、室温で1時間攪拌
した。10% Na₂SO₃を加え室温で1時間攪拌しAcOEtで抽出
した後に有機層を順次、sat.NaHCO₃、sat.NaCl で洗浄
しNa₂SO₄で乾燥させた。濾過、濃縮後、フラッシュカラ
ムクロマトグラフィー(AcOEt/CHCl₃=1/2)により1,2-O-C
yclohexylidene 3,4,5-tri-O-(bis-9-fluorenylmethyl
phosphoryl) 6-O-levulinoyl-myo- inositol (５, 12.
5 g, 90%)で得た。

【００１５】¹H NMR (CDCl₃, 270 MHz) δ=1.20-1.73(1
0H, complex, Cyclohexylidene H),2.01(3H, s, -CH₃),
2.39-2.64(4H, complex, -OC(O)CH₂CH₂C(O)-), 3.94-
4.39(22H, complex, Ins-H₁, H₂, H₃, H₅, -OCH₂CH-*
6), 4.90(1H, q, J _4-3=J _4-5=J _{H -P}=7.6 Hz, Ins-H₄), 5.
26(1H, t, J _6-1=J _6-5=6.4 Hz, Ins-H₆), 7.01-7.67(48
H, complex, Aromatic H)³¹ P NMR(CDCl₃, 109 MHz) d=-0.98(1P), -0.55(1P), -
0.10(1P)

【００１６】実施例２ ［化合物6の合成］1,2-O-Cyclohexylidene 3,4,5-tri-O
-(bis-9-fluorenylmethyl phosphoryl) 6-O-levulinoyl
-myo-inositol (5, 12.5 mg, 7.5 mmol)をdry CHCl₃(12
0 ml)に溶解させ、-5℃に冷やしCH₃OH (1.27 g, 37.2 m
mol)、TFA (21.5 g, 292.1 mmol)を加え、-5〜0℃で8時
間攪拌した。これをAcOEtで抽出し、有機層を順次H₂O、
sat.NaHCO₃、sat.NaClで洗浄しNa₂SO₄で乾燥させた。濾
過、濃縮後、フラシュカラムクロマトグラフィー(AcOEt
/CHCl₃=4/1)により3,4,5-Tri-O-(bis-9-fluorenylmethy
l phosphoryl) 6-O-levulinoyl-myo-inositol (6, 10.3
g, 87%)を得た。

【００１７】¹H NMR (CDCl₃, 270 MHz) δ=2.07(3H, s,
-CH₃), 2.13-2.73(4H, complex, -OC(O)CH₂CH₂C(O)-),
2.83(1H, br, -OH), 3.03(1H, br, -OH), 3.22(1H, b
r, Ins-H₁), 3.75(1H, ddd, J _3-2=2.7 Hz, J _3-4=7.0 H
z, J _H-P=6.4 Hz, Ins-H₃), 3.82(1H, br, Ins-H₂), 3.
83-4.36(19H, complex, Ins-H₅, -OCH₂CH-*6), 4.75(1
H, q, J _4-3=J _4-5=J _H-P=7.0 Hz, Ins-H₄), 5.24(1H, t,
J _6-1=J _6-5=9.8 Hz, Ins-H₆), 6.91-7.72(48H, complex,
Aromatic H)³¹ P NMR (CDCl₃, 109 MHz) δ=-1.75(1P), -0.66(1P),
-0.49(1P)

【００１８】実施例３ ［化合物7の合成］窒素雰囲気下、Benzene共沸した3,4,
5-Tri-O-(bis-9-fluorenylmethyl phosphoryl)-6-O-lev
ulinoyl-myo-inositol (6, 9.8 g, 6.2 mmol)をdry CHC
l₃ (100 ml)に溶解させ-42℃に冷やし2,6-t-Butyl-4-me
thylpyridine (3.2 g, 15.6 mmol)、Triethylsilyl tri
fluoromethylsulfonate (2.45 g, 9.3 mmol)を加え-20
℃で2時間攪拌した。これにMethanolを加え室温で30分
攪拌し、この溶液をAcOEtで抽出し有機層を順次、H₂O、
sat.KHSO₄、H₂O、sat.NaHCO₃、sat.NaClで洗浄しNa₂SO₄
で乾燥させた。濾過、濃縮後、フラシュカラムクロマト
グラフイー(Acetone/CHCl₃=1/10→1/3)により1-O-Triet
hylsilyl 3,4,5-tri-O-(bis-9-fluorenylmethylphospho
ryl) 6-O-levulinoyl-myo-inositol (７、7.1 g, 68
%)、原料 (2.1 g, 22%)で得た。

【００１９】¹H NMR (CDCl₃, 270 MHz) δ=0.58(6H, q,
JCH₂CH₃=7.9 Hz, -Si(CH₂ CH₃)₃),0.91(9H, t, JCH₂CH₃
=7.9 Hz, -Si(CH ₂CH₃ )₃), 1.98(3H, s, Levulinyl-C
H₃),2.25-2.62(4H, complex, -OC(O)CH₂CH₂ C(O)-), 3.
60(1H, J _1-2=2.7 Hz, J _1-6=9.8 Hz, Ins-H₁), 3.87-4.3
8(21H, complex, Ins-H₂, H₃, H₅, -OCH₂CH-*6), 4.97
(1H, q, J _4-3=J _4-5=J _H-P=9.8 Hz, Ins-H₄), 5.38(1H,
t, J _6-1=J _6-5=9.8 Hz, Ins-H₆), 6.91-7.72(48H, compl
ex, Aromatic H)³¹ P NMR(CDCl₃, 109 MHz) δ=-1.71(1P), -1.29(1P), -
1.15(1P)

【００２０】実施例４ ［化合物8の合成］窒素雰囲気下、1-O-Triethylsilyl-
3,4,5-tri-O-(bis-9-fluorenylmethyl phosphoryl)-6-O
-levulinoyl-myo-inositol (7, 7.0 g, 4.1 mmol)をdry
CHCl₃ (70ml)に溶解させ0℃に冷やしピリジン (3.2 g,
4.95 mmol)、Chloroacetic anhydride (4.2 g, 24.6 m
mol)、DMAP (100.3 mg, 0.8 mmol)を加え室温で30分攪
拌した。この溶液をAcOEtで抽出し有機層を順次、H₂O、
sat.KHSO₄、H₂O、sat.NaHCO₃、sat.NaClで洗浄しMgSO₄
で乾燥させた。濾過、濃縮後、2-O-Chloroacetyl-1-O-t
riethylsilyl-3,4,5-tri-O-(bis-9-fluorenylmethyl ph
osphoryl)-6-O-levulinoyl-myo-inositol (8, 6.8 g, 9
3%)で得た。

【００２１】¹H NMR (CDCl₃, 270 MHz) δ=0.62(6H, q,
JCH₂CH₃=8.2 Hz, -Si(CH₂ CH₃)₃),0.92(9H, t, JCH₂CH₃
=8.2 Hz, -Si(CH ₂CH₃ )₃), 2.20(3H, s, -CH₃), 2.60(2
H,t, J _CH2CH2=6.1 Hz, -OC(O)CH₂ CH₂C(O)-), 2.87(2H,
t, J _CH2CH2=6.1 Hz, -OC(O)CH ₂CH₂ C(O)-), 3.69(1H, d
d, J _1-2=2.3 Hz, J _1-6=9.8 Hz, Ins-H₁), 3.77-4.41(22
H, complex, Ins-H₃, H₅, -OCH₂CH-*6, -CH₂Cl), 4.76
(1H, q, J _4-3=J _4-5=J _{H -P}=9.8 Hz, Ins-H₄), 5.29(1H,
t, J _6-1=J _6-5=9.8 Hz, Ins-H₆), 5.74(1H, t, J _2-1=J
_2-3=2.3 Hz, Ins-H₂), 7.00-7.65(48H, complex, Aroma
tic H)³¹ P NMR(CDCl₃, 109 MHz) δ=-0.10(1P), -0.08(1P), -
0.03(1P)

【００２２】実施例５ ［化合物9の合成］2-O-Chloroacetyl-1-O-triethylsily
l-3,4,5-tri-O-(bis-9-fluorenylmethylphosphoryl)-6-
O-levulinoyl-myo-inositol (8, 5.3 g, 3.0 mmol)をdr
y CHCl₃(15 ml)に溶解させ0℃に冷やし80％ 酢酸(30 m
l)、TsOH・H₂O (2.9 g, 15.0 mmol)を加え室温で7時間
攪拌した。この溶液を再び0℃に冷やし、AcOEtで抽出し
有機層をH₂O、sat.NaHCO₃で、sat.NaClで洗浄しMgSO₄で
乾燥させた。濾過、濃縮後、フラシュカラムクロマトグ
ラフィ−(Acetone/CHCl₃=1/5)により2-O-Chloroacetyl-
3,4,5-tri-O-(bis-9-fluorenylmethyl phosphoryl)-6-O
-levulinoyl-myo-inositol (9, 4.3 g, 88%)で得た。

【００２３】¹H NMR (CDCl₃, 270 MHz) δ=2.09(3H, s,
-CH₃), 2.18-2.78(4H, complex, -OC(O)CH₂CH₂C(O)-),
3.56(1H, J _1-2=2.4 Hz, J _1-6=9.8 Hz, Ins-H₁), 3.64
(1H,br, -OH, disappear after D₂O-treatment), 3.79-
4.41(22H, complex, Ins-H₃,H₅, -OCH₂CH-*6, -CH₂Cl),
4.75(1H, q, J _4-3=J _4-5=J _H-P=9.8 Hz, Ins-H₄), 5.28
(1H, t, J _6-1=J _6-5=9.8 Hz, Ins-H₆), 5.61(1H, t, J
_2-1=J _2-3=2.4 Hz, Ins-H₂), 6.99-7.72(48H, complex,
Aromatic H)¹³ C NMR (CDCl₃, 68 MHz) δ=28.07 (-OC(O)CH₂ CH₂C(O)
-), 29.62(-CH₃), 38.25 (-OC(O)CH ₂CH₂ C(O)-), 40.68
(-CH₂Cl), 47.42-47.75 (6C, complex, -OCH ₂CH-), 67.
94 (Ins-H₆), 68.87 (d, J _C-P=5.5 Hz, -OCH₂ CH-), 69.
26-69.63 (5C,complex, -OCH₂ CH), 72.39 (Ins-C₂), 7
2.55 (Ins-C₁), 73.28 (Ins-C₃), 75.17(m,Ins-C₄), 7
6.08 (Ins-C₅), 119.70-119.90 (12C, Aromatic-C₅), 1
24.67 (29%), 124.90(354%), 124.94 (36%), 125.02 (4
1%), 125.08(76%), 125.19(68%)&125.34(32%) (12C, Ar
omatic-C₂), 126.75 (36%), 126.85 (87%), 126.96 (10
0%), 127.01 (76%), 127.13 (32%), 127.56 (85%), 12
7.57 (88%), 127.66 (51%),127.74 (94%) & 127.95 (4
%) (24C, Aromatic-C₃, C₄), 141.03 (39%), 141.07
(60%), 141.12 (47%), 141.14 (50%), 141.16 (66%), 1
41.19 (46%), 141.27(38%), 141.31 (37%) & 141.35 (3
3%) (12C, Aromatic-C₆), 142.60 (38%), 142.68 (37
%), 142.73 (42%), 142.76 (42%), 142.83 (91%), 142.
86 (50%), 142.88 (46%), 142.96 (33%), 143.10 (39%)
& 143.22 (41%) (12C, Aromatic-C₁),166.34 (-OC(O)
CH₂Cl), 172.35 (Levulinyl -OC(O)-), 208.18 ( -C(O)
-)³¹ P NMR(CDCl₃, 109 MHz) δ=-0.90(1P), -0.51(1P), -
0.21(1P)

【００２４】実施例６ ［化合物10の合成］窒素雰囲気下、2-O-Chloroacetyl-
3,4,5-tri-O-(bis-9-fluorenylmethyl phosphoryl)-6-O
-levulinoyl-myo-inositol (9, 704.8 mg, 0.42 mmol)
をdry CHCl₃(8.0 ml)に溶解させN,N-Diisopropyl cyano
ethyl a,b-Di-O-Oleoylgleceryl phosphoroamidite (52
3.5 mg, 0.64 mmol)、Tetrazole (51.2 mg, 0.73 mmol)
を加え室温で3時間攪拌した。この溶液を-72℃に冷や
し、mCPBA (41.2 mg, 0.24 mmol)を加え室温で1時間攪
拌した。この溶液をAcOEtで抽出し有機層を10% Na₂SO₃,
H₂O、sat.NaHCO₃、sat.NaClで洗浄しMgSO₄で乾燥させ
た。濾過、濃縮後、フラシュカラムクロマトグラフィ−
(AcOEt/CHCl₃=1/4→Acetone/CHCl₃=1/4)により1-O-(a,b
-Di-O-Oleoylgleceryl cyanoethyl phosphoryl) 2-O-ch
loroacetyl-3,4,5-tri-O-(bis-9-fluorenylmethyl phos
phoryl)-6-O-levulinoyl-myo-inositol (10,905.8 mg,
89%)で得た。

【００２５】¹H NMR (CDCl₃, 270 MHz) δ=0.89(6H, t,
J=6.56 Hz, Oleoyl-CH₃), 1.22(40H, br, Oleoyl-CH
₂-), 1.50(4H, br, Oleoyl-OC(O)CH ₂CH₂ -), 1.95(8H, b
r, Allylic H), 1.98&1.99(3H, s*2, Levulinyl -CH₃),
2.15-2.91(10H, complex, -C(O)CH₂-, Levulinyl -CH₂
-, OCH ₂CH₂ CN), 3.68-4.34(26H, complex, Ins-H₃,
H₅, Glyceryl Hα, Hγ,-OCH₂CH-*6, -OCH₂ CH₂CN), 4.4
6(1H, m, Ins-H₁), 4.70(1H, m, Ins-H₄), 5.20-5.39
(6H, complex, Ins-H₆, Glyseryl Hβ, Vinylic H),5.9
6&6.00(1H, t*2, J _2-3=J _2-1=2.3 Hz, Ins-H₂), 6.96-7.
73(48H, complex, Aromatic H)¹³ C NMR (CDCl₃, 68 MHz) δ=14.05(2C, -CH ₂CH₃ ), 19.
28&19.35(-OCH ₂CH₂ CN), 22.48&22.59(2C, -CH₂ CH₃), 2
7.25(2C, Allylic C), 27.76(-OC(O)CH₂ CH₂C(O)-), 28.
92-29.74(16C, complex, Oleoyl-CH₂-), 31.70, 31.83&
32.05(-C(O)CH₃ ), 32.45&32.52(2C, -CH₂ CH₂CH₃), 33.8
2&34.02(2C, -OC(O)CH₂ -), 36.89&37.04(-OC(O)CH ₂CH₂ C
(O)-), 40.37(-C(O)CH₂ Cl), 47.52, 47.67&47.74(6C, -
OCH ₂CH-),61.52&61.61(d*2, J _C-P=9.2 Hz, -OCH₂ CH₂C
N), 62.47, 62.58, 62.87&62.94(d*4, J _C-P=5.5 Hz, Gl
yceryl-Cα), 66.34&66.63(br*2, Glyceryl-Cγ), 69.2
5(d,J _C-P=7.3 Hz, Glyceryl-Cβ), 69.54-69.65(7C, co
mplex, Ins-C₆, -OCH₂ CH-*6), 71.06(Ins-C₂), 72.41(I
ns-C₃), 72.72(Ins-C₁), 74.50(m,Ins-C₄), 75.39(Ins-
C₅), 116.36&116.43(-CN), 119.74(38%), 119.87(49%),
120.1(12%)&120.14(12%)(12C, Aromatic-C₅), 124.82
(21%), 124.90(10%), 125.06(45%), 125.17(32%)&125.3
1(27%)(12C, Aromatic-C₂), 126.76(21%), 126.82(36
%), 126.91(21%),127.04(77%), 127.11(24%), 127.21(5
%), 127.59(46%), 127.73(49%)&127.77(44%)(24C, Arom
atic-C₃, C₄), 129.63 (10%), 129.76(3%), 129.89(12
%), 129.98(5%), 130.11(4%), 130.18(4%), 130.33(5%)
& 130.44(3%)(4C, Vinylic-C), 141.12(42%), 141.19(2
3%)&141.34(26%)(12C, Aromatic-C₆), 142.60(17%), 14
2.67(25%), 142.76(25%), 142.84(19%), 142.97(19%),
143.13(18%)(12C, Aromatic-C₁), 166.14&166.28(Chlo
roacetyl-OC(O)-), 171.88&171.92 (Levulinyl -OC(O)
-), 172.76&173.10 (2C, Oleoyl-OC(O)-), 205.84, 20
5.89&206.28 ( -C(O)-)³¹P NMR(CDCl₃, 109 MHz) δ=-1.85(41%), -1.74(36%), -1.49(95%) -1.09(96%)&-
1.06(100%)

【００２６】実施例７ ［化合物11の合成］窒素雰囲気下、Benzene共沸した1-O
-(a,b-Di-O-oleoylglyceryl cyanoethyl phosphoryl)-2
-O-chloroacetyl 3,4,5-tri-O-(bis-9-fluorenylmethyl
phosphoryl) 6-O-levulinoyl-myo-inositol (10, 724.
3 mg, 0.30 mmol)をdry CH₃CN (8.0ml) に溶解させ、0
℃に冷やしておいてTriethyl amine (914.9 mg, 9.04 m
mol)を加えて室温で20時間攪拌する。溶媒留去を行い残
査をHexeneによって洗浄し1-O-(a,b-Di-O-oleoylglycer
yl phosphoryl) 2-O-chloroacetyl-3,4,5-tri-O-phosph
oryl-6-O-levulinoyl-myo-inositol (11, 420.2 mg, 8
3%) で得た。

【００２７】¹H NMR (270 MHz, 47.3 mg, CDCl₃/CD₃OD=
10/1)) δ=0.90(6H, br, Oleoyl-CH₃), 1.31(76H, br,
Oleoyl-CH₂-*20, N(CH ₂CH₃ )₃*4), 1.59(4H, br, Oleoyl
-OC(O)CH ₂CH₂ -), 2.01(8H, br, Allylic H), 2.17(3H,
s, Levulinyl-CH₃), 2.30&2.33(4H, t*2, J=5.4 Hz, Ol
eoyl-C(O)CH₂-), 2.68~2.95(4H, complex, Levulinyl-C
H₂-), 3.16(24H, br, N(CH₂ CH₃)₃), 3.97(3H, br, Gly
ceryl Hα, Hγ*2), 4.16(1H, br, Glyceryl Hα), 4.3
1-4.49(5H, complex, Ins-H₁, H₃, H₅), 4.60(1H, q, J
_4-3=J _4-5=J _H-P=9.8 Hz, Ins-H₄), 5.23(1H,br, Glycery
l Hβ), 5.30-5.42(5H, complex, Ins-H₆, Vinylic H*
4), 5.91(1H, br, Ins-H₂)³¹ P NMR(109 MHz, 47.3 mg, CDCl₃/CD₃OD=10/1+NEt₃, p
H=ca.9 ) d=-0.80(1P), 0.64(1P), 0.99(1P), 3.04(1P)

【００２８】実施例８ ［化合物12の合成］窒素雰囲気下、Benzene共沸をした1
-O-(a,b-Di-O-oleoylglyceryl phosphoryl) 2-O-chloro
acetyl 3,4,5-tri-O-phosphoryl 6-O-levulinoyl-myo-i
nositol (11, 382.5 mg, 0.23 mmol)をdry CHCl₃に溶解
し0℃に冷やしておきHDTCのEtOH溶液(4.5 mmol)を加え
て、室温で4時間攪拌した。この溶液を0℃に冷やしsat.
KHSO₄を加えquenchし酸性であるのを確認後CHCl₃で逆抽
出した。有機層をNa₂SO₄で乾燥させ、濾過、濃縮後、少
量のCHCl₃で溶解させCH₃CNを加えることにより沈殿し、
1-O-(a,b-Di-O-Oleoylglyceryl phosphoryl)-3,4,5-tri
-O-phosphoryl-6-O-levulinoyl-myo -inositol (12, 16
8.2 mg, 46%)を得た。³¹ P NMR(109 MHz, 115.6 mg, CDCl₃/CD₃OD=10/1, pH=c
a.7 ) d=0.89(1P), 1.48(1P), 2.27(1P), 2.52(1P)

【００２９】実施例９ ［PIP3 の合成］1-O-(1,2-Di-O-Oleoylgleceryl phosph
oryl)-3,4,5-tri-O-phosphoryl-6-O-levulinoyl-myo- i
nositol (128.2 mg, 0.09 mmol)をPy/CH₃CO₂H=4/1(3.0
ml)に溶解させ0 ℃に冷やしておきHydrazine hydrate
(38.7 mg, 0.77 mmol)を加え室温で3時間攪拌した。溶
媒留去後、CHCl₃を加えて、この溶液を0 ℃に冷やしsa
t.KHSO₄を加え酸性であるのを確認後CHCl₃で逆抽出し
た。有機層をNa₂SO₄で乾燥させ、濾過、濃縮後、少量の
CHCl₃で溶解させCH₃CNを加えることにより沈殿を誘起
し、1-O-(1,2-Di-O-oleoylglyceryl phosphoryl)-3,4,5
-tri-O-phosphoryl-myo-inositol (94.5 mg, 78%)を得
た。R f=0.4(CHCl₃/Acetone/CH₃OH/CH₃COOH/H₂O=25/12/13/7/
10)

【００３０】実施例１０ ［化合物24 の合成］窒素雰囲気下、1,2:4,5-dicyclohe
xylidene-myo-inositol (23, 2.15 g , 6.32 mmol )
、PACLev-OH (4.00 g, 15.1 mmol, 2.4 eq.) 、DCC
(4.06 g, 19.7 mmol, 3.0 eq.) を無水塩化メチレン 1
5 mlに溶解する。反応系を0℃に冷却しDMAP (310.0 mg,
2.54 mmol, 0.4 eq) を加え、一晩攪拌する。反応終了
後、ジエチルエーテルを加え、飽和硫酸水素カリウム、
飽和炭酸水素ナトリウム、飽和食塩水で洗浄する。有機
層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過、濃縮後、残査
を得た。その残査を、フラッシュカラムクロマトグラフ
ィー (AcOEt/Hex.=1/1)により単離し 目的物1,2:4,5-O-
dicyclohexylidene-3,6-O- {2-[2-(levulinoyloxy)ethy
l]benzoyl}-myo-inositol (24, 5.26 g, 95%)を得た。R f 0.7 (AcOEt/Hex.=2/1)

【００３１】¹H-NMR (270 MHz, CDCl₃) δ= 1.30-1.96
(20H, complex, cyclohexylidene*2), 2.17(3H, s, C
H₃), 2.18(3H, s, CH₃), 2.556 & 2.559(4H, t*2, J=7.
02 Hz,OC(O)CH₂ CH₂-), 2.71 & 2.73(4H, t, J=7.02 Hz,
OC(O)CH2CH2- ), 3.32(4H, complex, Ar-CH₂ CH₂), 3.7
2(1H, dd, J ₅₆ =10.99, J ₅₄=9.46 Hz, Ins-H₅), 4.37(6
H, complex, CH₂O-*2, Ins-H_1,4), 4.79(1H, t, J ₂₁=J
₂₃=4.43 Hz, Ins-H₂), 5.42 (1H, dd, J ₃₄ =10.37, J ₃₂
=4.43 Hz, Ins-H₃), 5.59 (1H, dd, J ₆₅ =10.99,J ₆₁=6.
87 Hz, Ins-H₆), 7.23-7.38[4H, complex, (Aromatic H
_3,5)*2], 7.47(1H, td, J=6.72, 1.42 Hz, Aromatic
H₄), 7.51(1H, td, J=6.72, 1.42 Hz, Aromatic H₄),
7.98(1H, dd, J=6.72, 1.42 Hz, Aromatic H₆), 8.03(1
H, dd, J=6.72, 1.42 Hz, Aromatic H6'),¹³C-NMR (CDC
l₃, 100.5 MHz) δ =23.55, 23.61, 23.65, 23.84, 24.
82, 24.84(6C, cyclohexylidene C_{3,3',4,4',5,5'}), 2
7.87[2C, s, OC(O)CH₂ *2], 29.74, 29.76(2C, CH₃ *
2), 33.67, 33.78(2C, PhCH₂ *2), 35.00, 36.20, 36.2
6, 37.42(4C, cyclohexylidene C_2,2',6,6'), 37.82, 3
7.85[2C, OC(O)CH ₂CH₂ *2], 65.30, 65.35(2C, CH₂O *
2), 71.64(C₃), 75.08(C₁), 75.23(C₂), 75.50(C₆), 7
6.32(C₅), 79.29(C₄), 111.58, 113.96(2C, cyclohexyl
idene C_1,1'), 126.96,127.05(2C, Aromatic C_5,5'), 1
29.93, 130.26(2C, Aromatic C_1,1'), 131.30,131.72(2
C, Aromatic C_6,6'), 132.14, 132.21(2C, Aromatic C
_3,3'), 132.36,132.61(2C, Aromatic C_4,4'), 139.51,
139.82(2C, Aromatic C_2,2'), 166.50,167.16[2C, OC
(O) * 2], 172.77[2C, OC(O) * 2 in Levulinyl], 206.
63, 206.72[2C, C(O) * 2] IR (cm^-1, neat ) 1720, 1160, 1124, 1085, 754 cm^-1 FAB-MAS (positive, m-nitrobenzyl alcohol) m/z 833
[M(C₄₆H₅₆O₁₄)+1], 735 [M-cyclohexylid- ene+1], 471
[M-(cyclohexylidene*2+PAC_Lev)+1]

【００３２】実施例１１ ［化合物25の合成］1,2:4,5-dicyclohexylidene-3,6-{2
-[2-(levulinoyloxy) ethyl] benzoate}-myo-inositol
(24, 936.8 mg, 1.12 mmol)を塩化メチレン 15 mlに溶
解する。反応系を0 ℃に冷却し、TFA(860 ml, 10.1 mmo
l, 10 eq.)を加え、室温で14時間攪拌する。その後、飽
和炭酸水素ナトリウムで quenchする。酢酸エチルを加
え飽和炭酸水素ナトリウム、飽和食塩水で洗浄する。有
機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過、濃縮後、残
査を得た。その残査を、フラッシュカラムクロマトグラ
フィー (AcOEt/Hex.=3/2)により単離し目的物1,2-O-cyc
lohexylidene-3,6-di-O-{2-[2-(levulinoyloxy)ethyl]b
enzoate}-myo-inositol (25, 654.3 mg, 77%)、3,6-{2-
[2-(levulinoyloxy) ethyl] benzoate}-myo-inositol
(115.7 mg, 12%)を得た。

【００３３】Rf 0.4 (AcOEt/Hex.=3/1)¹ H-NMR (270 MHz, CDCl3) δ= 1.30-1.96(10H, comple
x, cyclohexylidene),2.17(3H, s, CH₃), 2.18(3H, s,
CH₃), 2.53(2H, t, J=6.41 Hz, OC(O)CH₂ CH₂-), 2.53(2
H, complex, OC(O)CH₂ CH₂-), 2.71(2H, t, J=6.41 Hz,
OC(O)CH₂CH₂ -),2.71(2H, complex, OC(O)CH₂CH₂ - ), 3.
20-3.48[4H, complex, (Ar-CH₂ CH₂O-)*2], 3.62(1H, t,
J ₅₄=J ₅₆=9.92 Hz, Ins-H₅ ), 4.21(1H, t, J ₄₃=J ₄₅=9.
92 Hz,Ins-H₄ ), 4.27-4.49(4H, complex, CH₂O- *2),
4.36(1H, dd, J ₁₆=7.78, J ₁₂=4.28 Hz, Ins-H₁), 4.67
(1H, t, J ₂₁=J ₂₃=4.28 Hz, Ins-H₂), 5.32(1H, dd, J ₃₄
=9.92, J ₃₂=4.28 Hz, Ins-H₃), 5.47 (1H, dd, J ₆₅ =9.
92, J ₆₁=7.78 Hz, Ins-H₆), 7.29(2H, td, J=7.63, 1.2
2 Hz, Aromatic H_3,5), 7.35(2H, td, J=7.63,1.22 Hz,
Aromatic H_3',5'), 7.45(1H, td, J=7.63, 1.22 Hz, A
romatic H₄), 7.48(1H, td, J=7.63, 1.22 Hz, Aromati
c H_4'), 7.96(1H, dd, J=7.63, 1.22 Hz, Aromatic
H₆), 8.01(1H, dd, J=7.63, 1.22 Hz, Aromatic H_6')¹³ C-NMR (CDCl3, 67.9 MHz) δ =23.66, 23.79, 24.80
(3C, cyclohexylideneC_3,4,5), 27.81, 27.85[2C, OC
(O)CH₂ * 2], 29.74, 29.76(2C, CH₃ *2), 33.67(2C,
s, PhCH₂ *2), 35.09, 37.54(2C, cyclohexylidene C
_2,6), 37.78, 37.82[2C, OC(O)CH ₂CH₂ *2], 64.92, 65.
16(2C, CH₂O *2), 70.82(C₆), 72.12(C₁), 72.34(C₂),
73.32(C₃), 76.11(C₅), 76.28(C₄), 111.21(cyclohexyl
idene C₁), 126.67, 126.79(2C, Aromatic C_5,5'), 12
9.82, 130.05(2C, Aromatic C_1,1'), 130.94, 131.41(2
C, Aromatic C_6,6'), 131.73, 131.91(2C, Aromatic C
_3,3'), 131.98, 132.25(2C, Aromatic C_4,4'), 138.85,
139.05(2C, Aromatic C_2,2'), 167.11, 167.21[2C, OC
(O) * 2], 172.74, 172.78[2C, OC(O) in Levulinyl *
2],207.30, 207.49[2C, C(O) *2] IR (cm^-1, neat ) 3487, 2937, 1720, 1259, 1160, 109
0 cm^-1 元素分析 Calcd for C₄0H₄₈O₁₄ (mol wt 752.6); C, 63.82; H, 6.43 found ; C, 63.88; H, 6.54

【００３４】実施例１２ ［化合物26の合成］窒素雰囲気下、 1,2-O-cyclohexyli
dene-3,6-di-O- {2-[2-(levulinoyloxy)ethyl]benzoat
e}-myo-inositol (25, 2.1 g, 2.79 mmol)とdi-9-fluo
renylmethyl N,N-diisopropylphosphoroamidite (3.5
g, 6.71 mmol, 2.4 eq.)をクロロホルム50 mlに溶解
し、 室温で攪伴しながら 1H-Tetrazole (596.1 mg,
9.56 mmol, 3.0 eq.)を加える。1.5 時間攪拌後、- 72
℃に冷却し mCPBA (1.65 g, 9.56mmol, 3.3 eq.) を加
え室 温にもどし1.5 時間攪拌する。10% Na₂SO₃で quen
chし、酢酸エチルを抽出溶媒として、飽和炭酸水素ナト
リウム、 飽和食塩水で洗浄する。有機層を無水硫酸ナ
トリウムで乾燥し、濾過、濃縮、残査を得た。フラッシ
ュカラムクロマトグラフィー(AcoEt/Hex=3/2)で単離
し、目的物 1,2-O-cyclohexylidene-3,6-di-O-{2-[2-(l
evulinoyloxy)ethyl]-benzoate}- 4,5-bis-O-(difluore
nylmethyloxyphosphate)-myo-inositol (26, 4.20 g, 9
3%)を得た。

【００３５】Rf 0.4 (AcOEt/Hex.=3/2)¹ H-NMR (270 MHz,CDCl₃) δ = 1.38-1.96(10H, comple
x, cyclohexylidene),2.10 & 2.12(3H, s*2, CH₃), 2.3
7 & 2.40[4H, t*2, J=6.7 Hz, OC(O)CH₂ CH₂-],2.58 &
2.60[4H, t*2, J=6.7 Hz, OC(O)CH₂CH₂ -], 3.10-3.43[6
H, complex, Ar-CH₂ CH₂O- & OCH₂CH in Fm), 3.62-4.57
(10H, complex, OCH₂ CH*4 & OCH₂CH*2 in Fm), 4.30(4
H, complex, Ar-CH₂CH₂ O-), 4.40(1H, dd, J ₁₆=6.9, J
₁₂=4.9 Hz,Ins-H₁), 4.68(1H, t, J ₂₁=J ₂₃=4.9 Hz, Ins
-H₂), 4.77(1H, q, J=8.7 Hz, Ins-H₅), 5.26(1H, q, J
=8.7 Hz, Ins-H₄), 5.66(1H, dd, J ₃₄ =8.7, J ₃₂=4.9 H
z,Ins-H₃), 5.77(1H, dd, J ₆₅ =8.7, J ₆₁=6.9 Hz, Ins-
H₆), 6.94-7.48(30H, complex, Aromatic H_3,4,5 in PA
C & Aromatic H_2-4,9-11 in Fm), 7.52, 7.54, 7.58 &
7.61(8H, d*4, J=7.8 Hz, Aromatic H_5,8 in Fm), 8.1
7(2H, d, J=7.8 Hz,Aromatic H₆ in PAC)¹³ C-NMR(100.5 MHz, CDCl₃), δ = 23.54, 23.83, 24.8
7(3C, cyclohexylidene C_3,4,5), 27.74[2C, C(O)CH₂],
29.66 & 29.70(2C, CH₃), 33.67, 33.87(2C,ArCH₂), 3
4.67 & 36.85(2C, cyclohexylidene C_2,6), 37.75[2C,
OC(O)CH ₂CH₂],46.04 & 47.13(2C, d*2, J=9.7 Hz, OCH₂
CH in Fm), 47.37, 47.47(2C, d*2,J=7.4 Hz, OCH ₂CH
in Fm), 64.64, 64.73(2C, ArCH ₂CH₂), 69.26, 69.3
4, 69.49 & 69.56(2C, d*4, J=6.4 Hz, OCH₂ in Fm),
69.70(Ins. C₃), 72.73(Ins.C₂), 72.84(Ins. C₆),
75.27(Ins. C₁), 76.02 & 76.32(d*2, J=6.5 Hz, Ins.C
₄), 77.19(m, Ins. C₅), 111.87(cyclohexylidene C₁),
119.58(37%), 119.63(47%) & 119.68 (8C, Aromatic C
_5,8 in Fm), 124.80, 124.85, 124.89, 125.01, 125.0
5, 125.16, 125.25 & 125.30 (8C, Aromatic C_2,11 in
Fm), 12.73(45%), 126.76(100%), 126.81(97%), 126.
91(67%), 127.45(60%), 127.47(57%) &127.58(67%) (18
C, Aromatic C₅ in PAC &Aromatic C_3,4,9,10 in Fm),
128.36& 128.67(2C, Aromatic C₁ in PAC ), 131.61(2
1%), 131.91(48%) & 132.07(29%) (4C, Aromatic C_3,6
in PAC ), 132.47, 132.57(2C, Aromatic C₄ in PAC
), 140.37(2C, Aromatic C₂ in PAC ), 140.82, 140.8
6, 140.94, 141.04, 141.06, 141.09, 141.13 & 141.28
(8C, Aromatic C_6,7 in Fm ), 142.42, 142.48, 142.6
1, 142.68, 142.96, 142.99, 143.03 & 143.09(8C, Aro
matic C_1,12 in Fm ), 165.25, 165.84[2C, OC(O) in
PAC], 172.34 & 172.36[2C, OC(O) in Levulinoyl], 20
6.37 & 206.44[2C, OC(O) in Levulinoyl] 31P-NMR(109.4 MHz, CDCl₃), d = 0.28, 0.33 元素分析 Calcd for C₉₆H₉₀O₂₀P₂ (mol wt 1625.7); C, 70.93; H, 5.76 found ; C, 70.56; H, 5.60

【００３６】実施例１３ ［化合物27の合成］1,2-O-cyclohexylidene-3,6-di-O-
{2-[2-(levulinoyloxy)- ethyl]benzoate}-4,5-bis-O-
(difluorenyl- methyloxyphosphate)-myo-inositol (2
6, 1.05 g, 0.646 mmol)を 80 % 酢酸 20 ml に溶解し
２時間還流する。その後、酢酸エチルを抽出溶媒とし
て、水、sat. NaHCO₃ 、 sat. NaClで洗浄する。有機層
を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過、濃縮、残査を得
た。フラッシュカラムクロマトグラフィー(AcoEt/Et2O=
1/3)で単離し、目的物3,6-di-O-{2-[2-(levulinoyloxy)
ethyl]benzoate}-4,5-bis-O-(difluorenylmethyloxy- p
hosphate)-myo- inositol (27, 783.8 mg, 79%)を得
た。R f 0.4 (AcOEt/Hex.=2/1)

【００３７】¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ = 2.09(6H,
s, CH₃), 2.32[4H, complex, OC(O)CH₂ CH₂-], 2.54[4
H, complex, OC(O)CH₂CH₂ -], 3.06-3.46[6H, complex,
Ar-CH₂ CH₂O- & OCH₂CH *2 in Fm), 3.57-3.97(9H, comp
lex, Ins. H₁, OCH₂ CH*3 & OCH₂CH*2 in Fm), 4.18-4.2
7(2H, complex, OCH₂ CH in Fm), 4.28-4.40(4H, compl
ex, Ar-CH₂CH₂ O-), 4.42(1H, br, Ins-H₂), 4.91(1H,
brq, J=9.8 Hz, Ins-H₅), 5.35(2H, complex, Ins-
H_3,4), 5.88(1H, t, J=9.8 Hz, Ins-H₆), 6.88-7.53(34
H, complex, Aromatic H_3,4,5 in PAC & Aromatic H in
Fm), 7.57-7.62(4H,complex, Aromatic H_5,8 in Fm),
8.24 & 8.27(2H, dd*2, J=7.1, 1.5 Hz, Aromatic H₆
in PAC)¹³ C-NMR(67.9 MHz, CDCl₃), δ =27.64 & 27.70[2C, C
(O)CH₂ in Levulinoyl], 29.67(2C, CH₃ in Levulinoy
l), 33.66 & 33.82(2C, ArCH₂ in PAC), 37.69 &37.74
[2C, OC(O)CH ₂CH₂ in Levulinoyl], 46.76 & 46.88(2C,
d*2, J=8.4 Hz,OCH ₂CH in Fm), 47.27(2C, d, J=8.4
Hz, OCH ₂CH in Fm), 64.30 & 64.46(2C, ArCH ₂CH₂ in
PAC), 69.16 & 69.24(2C, d*2, J=6.0 Hz, OCH₂ in F
m), 69.52(2C, d, J=6.0 Hz, OCH₂ in Fm), 70.05(In
s. C₂), 70.25(Ins. C₁), 72.15(Ins. C₃), 72.94(I
ns. C₆), 76.66 & 76.74(d*2, J=5.5 Hz, Ins. C₄), 7
7.47(m, Ins. C₅), 119.58(52%) & 119.68(78%) (8C, A
romatic C_5,8 in Fm), 124.72, 124.78, 124.99, 125.
00, 125.12, 125.20, 125.23 & 125.35(8C, AromaticC
_2,11 in Fm), 12.66(36%), 126.78(100%), 126.91(34
%), 127.42(57%), 127.56(56%) & 127.59(58%)(18C, Ar
omatic C₅ in PAC & Aromatic C_3,4,9,10 in Fm), 12
8.48 & 128.89(2C, Aromatic C₁ in PAC ), 131.82, 13
1.99, 132.03 & 132.11(4C, Aromatic C_3,6 in PAC ),
132.43 & 132.61(2C, Aromatic C₄ in PAC ), 140.20
& 140.24(2C, Aromatic C₂ in PAC ), 140.71(24%), 14
0.75(31%),140.82(28%), 140.85(31%), 141.00(58%) &
141.07(33%)(8C, Aromatic C_6,7 in Fm ), 142.31(51
%), 142.43(29%), 142.52(30%), 1442.96(46%), 143.01
(34%)& 143.05(32%)(8C, Aromatic C_1,12 in Fm ), 16
5.83 & 166.42[2C, OC(O) inPAC], 172.52 & 172.55[2
C, OC(O) in Levulinoyl], 206.96 & 207.14[2C, OC(O)
in Levulinoyl]³¹ P-NMR(109.4 MHz, CDCl₃), δ = 0.79, 0.89 元素分析 Calcd for C₉₀H₈₂O₂₀P₂ (mol wt 1545.6); C, 69.94; H, 5.35 found ; C, 69.54; H, 5.43

【００３８】実施例１４ ［化合物28の合成］1,2-Dioleoyl glycerol (1.72 mg,
2.77 mmol, 5.0 eq.) を 窒素雰囲気下、無水クロロホ
ルム 10 ml に溶解し攪拌する。これに N,N-diisopropy
l-O-dimethyloxy phosphroamidite (530 ml, 3.34 mmo
l, 6.0 eq.) と 1H-Tetrazole (355.4 mg, 5.07 mmol,
9.0 eq.) を加え 30分間攪拌する。反応終了後ジエチル
エーテルで抽出し、飽和炭酸水素ナトリウム、飽和食塩
水で洗う。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過、
濃縮し、ホスファイトを得た。ひきつづき、ホスファイ
トと3,6-di-O-{2-[2-(levulinoyloxy)ethyl]benzoate}
-4,5-bis-O-(difluorenylmethyloxyphosphate)-myo-ino
sitol (27, 867.9 mg, 0.562 mmol, 1.0 eq.)を窒素雰
囲気下、無水クロロホルム 20 ml に溶解し、2,6-Lutid
ine (490 ml, 4.21 mmol, 7.5 eq.)を加える。さらに、
-72 ℃で PyHBr3 (1060.0 mg, 3.31 mmol, 6.0 eq.) を
加え、0℃で 30分間攪拌する。その後、水を加え１時間
攪拌しquench. し、酢酸エチルを加え、飽和硫酸水素カ
リウム、飽和炭酸水素ナトリウム、飽和食塩水で洗い、
有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過、濃縮する。
フラッシュカラムクロマトグラフィ−(AcOEt/Hex.=1/
1：Rf値0.3)で精製し、目的物1-O-(1,2-Dioleoylglycer
yl methyl phospholyl)-3,6-di-O-{2-[2-(levulinoylox
y)ethyl]benzoate}-4,5-bis-O-(difluorenylmethyloxyp
hosphate)-myo-inositol (28, 1131.0 mg, 90%) を得
た。

【００３９】Rf 0.4 (AcOEt/Hex.=3/2)¹ H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ = 0.88(6H, t, J=6.8 Hz,
CH₃ in Oleoyl), 1.25(40H, br, CH₂ in Oleoyl), 1.5
4(4H, br, b-CH₂ in Oleoyl), 2.00(8H, br ,Allylic H
in Oleoyl), 2.08(6H, s, CH₃ in Levulinoyl), 2.21-
2.34[8H, complex, a-CH₂ in Oleoyl & OC(O)CH₂ in L
evulinoyl], 2.53[4H, t, J=6.8 Hz, OC(O)CH₂CH₂ in
Levulinoyl], 3.08-3.38(6H, complex, ArCH₂ in PAC &
OCH₂CH*2 in Fm), 3.29, 3.31, 3.667, 3.674(3H, d*
4, J=11.2 Hz each, OCH₃), 3.43-4.39(14H, complex,
CH₂ O in PAC, OCH₂ CH*4 & OCH₂CH*2 in Fm), 3.80-4.20
(2H, complex, Hγ in Glyceryl), 4.02-4.38(2H, comp
lex, Hα in Glyceryl), 4.47 & 4.63(1H, br*2, Ins.
H₂), 4.60-4.75(1H, br, Ins. H₁), 4.97 & 5.14-5.27
(1H, br, Hβ in Glyceryl), 5.35(7H, br, Ins. H_3,4
& HC=CH), 6.09 & 6.10(1H, t*2, J=11.2 Hz, Ins.
H₆), 6.82-7.59(38H, complex, Aromatic H_3,4,5in PAC
& Aromatic H in Fm), 8.25(2H, complex, Aromatic H
₆ in PAC)¹³ C-NMR(100.5 MHz, CDCl₃), δ =14.10(2C, CH₃ in
Oleoyl), 22.66(2C, CH₂CH₃ in Oleoyl), 24.70[2C, O
C(O)CH₂CH₃], 27.13 & 27.17[2C, C(O)CH₂ inLevulinoy
l], 27.64 & 27.73(2C, Allylic C), 29.09-29.65(18C,
complex, CH₂in Oleoyl & CH₃ in Levulinoyl), 31.8
5(2C, CH₂CH₂CH₃ in Oleoyl), 32.54[2C, C(O)CH₂ in O
leoyl], 33.68, 33.88 & 33.97(2C, br, ArCH₂ in PA
C), 37.77[2C, OC(O)CH ₂CH₂ in Levulinoyl], 46.84 &
47.00(2C, d*2, J=9.2 Hz, OCH ₂CH in Fm), 47.39(2C,
d, J=9.2 Hz, OCH ₂CH in Fm), 61.32 & 61.80(1C, C
αin Glyceryl), 64.41, 64.47, 64.54 & 64.58(2C, Ar
CH ₂CH₂ in PAC), 65.51 &65.80(1C, complex, Cγ in G
lyceryl), 68.76, 69.00, 69.09 & 69.15(2C, complex,
Ins. C₃ & Cγ in Glyceryl), 69.30 & 69.60(4C, d*
2, J=5.6 Hz, OCH₂in Fm), 70.50(Ins. C₂), 71.13
(m, Ins. C₆), 75.80-76.26(3C, complex, Ins. H1,4,
5), 119.64(18%) & 119.73(28%)(8C, Aromatic C_5,8 in
Fm), 124.74(8%), 124.89(8%), 125.04(br, 10%), 12
5.22(15%), 125.33(9%) & 125.47(7%)(8C, Aromatic
C₂, 11 in Fm), 126.74(13%), 126.85(32%), 126.92
(17%), 127.03(11%), 127.45(15%), 127.50(19%), 127.
65(br, 16%) & 127.72(11%)(18C, Aromatic C₅ in PAC
&Aromatic C_3,4,9,10 in Fm), 128.42 & 128.47(2C, A
romatic C₁ in PAC ), 129.69(9%), 129.97(10%), 130.
16(4%), 130.23(4%), 130.39(4%), 130.45(4%) & 130.5
4(3%)(4C, Vinyl C), 131.93(3%), 132.11(10%), 132.3
7(4%), 132.48(4%) & 132.72(4C, Aromatic C_3,4,6 in
PAC ), 140.42(3%), 140.56(2%), 140.76(6%), 140.85
(11%), 140.91(11%), 141.09(14%) & 141.20(7%)(9C, A
romatic C₂ in PAC & Aromatic C₆, 7 in Fm ), 142.3
0, 142.46, 142.52, 142.67, 142.96, 143.01, 143.10
& 143.18(8C, Aromatic C_1,12 in Fm ), 165.23(4%),
165.31(2%), 165.58(4%) & 165.71(3%)[2C, OC(O) in P
AC], 172.36(7%), 172.46(5%), 172.53(5%), 172.73(3
%), 173.10(2%), 173.17(2%) & 173.46(2%)[4C, OC(O)
in Oleoyl & OC(O) in Levulinoyl], 206.53, 206.58,
206.76& 206.89[2C, OC(O) in Levulinoyl]³¹ P-NMR(109.4 MHz, CDCl₃), δ = -0.76(74%), -0.71
(64%), 0.52(100%), 0.42(32%), 0.47(35%), 1.05(21
%), 1.19(35%) 元素分析 Calcd for C₁₃₀H₁₅₅O₂₇P₃ (mol wt 1545.6); C, 69.63; H, 69.63 C₁₃₀H₁₅₅O₂₇P₃・2H₂O(mol wt 1563.6); C, 68.53; H, 7.03 found ; C, 68.55; H, 7.15

【００４０】実施例１５ ［化合物29の合成］窒素雰囲気下、1-O-(1,2-Dioleoylg
lyceryl methyl phospholyl)-3,6-di-O-{2-[2-(levulin
oyloxy) ethyl]benzoate}-4,5 -bis-O-(difluorenylmet
hyloxy- phosphate)-myo-inositol (28, 573.5 mg, 0.2
56 mmol) を特級アセトンに溶解する。ヨウ化ナトリウ
ム (191.5 mg, 1.28 mmol, 5.0 eq.) を加え、4.5時間
還流する。その後、フラッシュカラムクロマトグラフィ
ー (AcOEt/Hex.=4/1→CHCl3/MeOH/Acetone=4/2/1) で精
製し目的物 1-O-(1,2-Dioleoylglyceryl-phospholyl)-
3,6-di- O-{2-[2-(levulinoyloxy)ethyl]- benzoate}-
4,5-bis-O- (difluorenylmethyloxyphosphate)-myo-ino
sitol (29, 483.6 mg, 84%) を得た。

【００４１】Rf 0.5 (CHCl3/Acetone/MeOH=3/2/1)¹ H-NMR (270 MHz, CDCl₃) δ = 0.88(6H, t, J=6.6 Hz,
CH₃ in Oleoyl), 1.26(40H, br, CH₂ in Oleoyl), 1.5
3(4H, br, b-CH₂ in Oleoyl), 2.04(14H, br ,Allylic
H in Oleoyl & CH₃ in Levulinoyl), 2.18(4H, br, a-C
H₂ in Oleoyl), 2.31[4H, br, OC(O)CH₂ in Levulinoy
l], 2.55[4H, complex, OC(O)CH₂CH₂ in Levulinoyl],
2.84-4.40(25H, complex, Ins. H₁, Hα, γ' in Glyc
eryl,OCH₂ CH*2 in Fm, ArCH₂ CH₂ in PAC & OCH₂CH*2 i
n Fm), 4.80(1H, br, Ins. H₂), 4.96(1H, br, Ins.
H₅), 5.36(7H, br, Ins. H_3,4, Hβ in Glyceryl & HC=
CH), 5.90(1H, brt, J=5.8 Hz, Ins. H₆), 6.81-7.60(3
8H, complex, Aromatic H_3,4,5 in PAC & Aromatic H i
n Fm), 8.20 & 8.38(2H, complex, Aromatic H₆ in PA
C)³¹ P-NMR(109.4 MHz, CDCl₃), δ = -1.16(1P, s), -0.2
5(1P, br), 3.55(1P,br)

【００４２】実施例１６ ［化合物30の合成］1-O-(1,2-Dioleoylglyceryl-phosph
olyl)-3,6-di-O-{2- [2-(levulinoyloxy)ethyl]benzoat
e}-4,5-bis-O-(difluorenylmethyloxyphosphate)-myo-i
nositol (29, 481.0 mg, 0.214 mmol) をプロピオニト
リルで共沸し水を除き、プロピオニトリル 2.5 ml 、ア
セトニトリル 7.5 ml 、トリエチルアミン (4 ml, 28.7
mmol, 130 eq.) を加える。室温で一晩攪拌した後、7
時間還流する。溶媒留去した後、ヘキサンに溶けるもの
を除き精製する。この時、３位のPAC基が２位に転移し
た1-O-(1,2-Dioleoylglyceryl phosphoryl)-3,6-di-O-
{2-[2-(levulinoyloxy)ethyl] benzoate}-myo-inositol
4,5-bis-phosphate (30) (30, 321.3 mg, 86%)を得
た。

【００４３】Rf 0.4 (CHCl3/Acetone/MeOH/AcOH/H2O=4
0/15/13/12/8)¹ H-NMR (270 MHz, NEt₃ salt, 20.0 mg in 2.5 ml CDCl
₃ & 0.3 ml CD₃OD & 1drop D₂O, pH ca. 7) δ = 0.88
(6H, t, J=5.4 Hz, CH₃ in Oleoyl), 1.12(18H,t, J=7.
3 Hz, NCH₂CH₃ ), 1.26(40H, br, CH₂ in Oleoyl), 1.5
3(4H, br, b-CH2 in Oleoyl), 1.98(8H, br , Allylic
H in Oleoyl), 2.16 & 2.17(6H, s*2, CH₃ in Levulino
yl), 2.19(4H, complex, α-CH₂ in Oleoyl), 2.52[4H,
t, J=6.4 Hz, OC(O)CH₂ in Levulinoyl], 2.73[4H, b
rt, J=6.4 Hz, OC(O)CH₂CH₂ inLevulinoyl], 2.91(12H,
q, J=7.3 Hz, NCH₂ ), 3.15-3.38(4H, complex, 29ArC
H₂ in PAC), 3.60-3.91(3H, complex, Hα,γ,γ' in
Glyceryl), 4.07(1H, brdd, Ins. H₃), 4.11(1H, brt,
J=10.7 Hz, Hα' in Glyceryl), 4.34(4H, complex, CH
₂ O in PAC), 4.40-4.62(3H, complex, Ins. H_1,4,5),
5.01(1H, br, Hβin Glyceryl), 5.35(4H, br, HC=CH),
5.74(1H, t, J=9.3 Hz, Ins. H₆), 5.98(1H, br, Ins.
H₂), 7.25(1H, d, J=7.3 Hz, Aromatic H₃), 7.32(2H,
complex,Aromatic H_3',5), 7.41(2H, t, J=7.3 Hz, Ar
omatic H_4,5'), 7.49(1H, t, J=7.3 Hz, Aromatic
H_4'), 8.06 & 8.27(2H, d*2, J=7.3 Hz, Aromatic H
_6,6') ³¹ P-NMR (109.4 MHz, NEt₃ salt, 20.0 mg in 2.5 ml C
DCl₃ & 0.3 ml CD₃OD& 1drop D₂O, pH ca. 9) δ =0.08
(1P, s), 0.8.4(1P, br), 6.96(1P, br)

【００４４】実施例１７ ［化合物31の合成］1-O-(1,2-Dioleoylglyceryl phosph
oryl)-3,6-di-O-{2- [2-(levulinoyloxy)ethyl]benzoat
e}-myo- inositol 4,5-bis-phosphate (30, 144.3 mg,
0.083 mmol) をピリジン/酢酸＝4/1 溶媒 3 ml に溶解
し、反応系を０ ℃に冷却しヒドラジン・1水和物 (28 m
l, 0.58 mmol, 6 eq.) を加える。室温で３時間攪拌し
た後、溶媒を留去する。クロロホルム/メタノール＝2/1
溶媒に溶解し0.5N 塩酸で洗浄し、有機層を無水硫酸ナ
トリウムで乾燥し、ろ過、濃縮後、残査を得た。この残
査をエーテルに溶けるものを除き、精製し、目的物 1-O
-(1,2-Dioleoylglycerylphosphoryl)-3,6-di-O-[2-(2-h
ydroxyethyl)benzoate]- myo-inositol 4,5- bis-phosp
hate (31, 118.1 mg, 88%) を得た。

【００４５】Rf 0.3 (CHCl₃/Acetone/MeOH/AcOH/H2O=4
0/15/13/12/8)¹ H-NMR (270 MHz, NEt₃ salt, 20.1 mg in 2.5 ml CDCl
₃ & 0.3 ml CD₃OD & 1drop D₂O, pH ca. 7) δ = 0.88
(6H, t, J=6.8 Hz, CH₃ in Oleoyl), 1.26(67H,br, CH₂
in Oleoyl & NCH₂CH₃ ), 1.55(4H, br, b-CH₂ in Oleoy
l), 1.99(8H, br , Allylic H in Oleoyl), 2.23(4H, b
r, a-CH₂ in Oleoyl), 2.90-3.37(22H,br, ArCH₂ in PA
C & NCH₂ ), 3.63-4.26(9H, br, Ins. H₃, CH₂ OH in PAC
& Hα,γ in Glyceryl), 4.40-4.58(3H, complex, In
s. H_1,4,5), 5.03(1H, br, Hβ in Glyceryl), 5.36(4
H, br, HC=CH), 5.74(1H, brt, J=10.6 Hz, Ins. H₆),
6.07(1H, br, Ins. H₂), 7.28-7.46(6H, complex, Arom
atic H_3,4,5), 7.82(1H, brd, J=6.8 Hz, Aromatic
H₆), 8.10(1H, brd, J=6.8 Hz, Aromatic H_6')³¹ P-NMR (109.4 MHz, NEt₃ salt, 20.1 mg in 2.5 ml C
DCl₃ & 0.3 ml CD₃OD& 1drop D₂O, pH ca. 8) δ = -0.
13, 0.31, 7.04

【００４６】実施例１８ ［PIP₂の合成］1-O-(1,2-Dioleoylglyceryl phosphory
l)-3,6-di-O-[2-(2-hydroxyethyl)- benzoate]-myo-ino
sitol 4,5- bis-phosphate (31, 86.8 mg, 0.053 mmol)
を念入りにピリジン共沸し、完全に水を除く。その後、
無水塩化メチレン 3 ml に溶解し、反応系を０℃ に冷
却する。t-BuOK (45.3 mg, 0.404 mmol, 7.0 eq.) を加
え、室温に戻し4.5時間攪拌する。クロロホルム/メタノ
ール＝2/1 を抽出溶媒とし飽和硫酸水素カリウムで洗浄
する。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過、濃
縮後、残査を得た。この残査をエーテルに溶けるものを
除き、精製し、目的物 1-O-(1,2-Dioleoylglyceryl pho
sphoryl)-myo-inositol 4,5- bis-phosphate (32, 22.
2 mg, ) を得た。

【００４７】Rf 0.2 (CHCl₃/Acetone/MeOH/AcOH/H2O=4
0/15/13/12/8)¹ H-NMR (400 MHz, NEt₃ salt, 22.2 mg in 2.5 ml CDCl
3 & 0.3 ml CD3OD & 1drop D2O, pH ca. 7 ) δ = 0.88
(6H, t, J=7.7 Hz, CH₃ in Oleoyl), (67H, br, CH₂ in
Oleoyl & NCH2CH3), 1.59(4H, br, β-CH ₂ in Oleoy
l), 1.98(8H, br, Allylic H in Oleoyl), 2.15(4H, b
r, α-CH₂ in Oleoyl), 4.39(1H, br, H α,γ in Glyce
ryl), 5.36(5H, br, Hβ in Glyceryl & HC=CH), Ins.H
s unclear(3.0-4.35)¹³ C-NMR (100.4 MHz, NEt₃ salt, 22.2 mg in 0.5 ml C
DCl₃ & 50 ml CD₃OD &1drop D₂O, pH ca. 7 ) δ = 8.3
8(9C, NCH ₂CH₃), 13.98(2C, CH₂ in Oleoyl),24.75(2C,
β-CH in Oleoyl), 27.11 & 27.71(2C, Allylic C), 2
9.10-29.60(16C, CH₂ in Oleoyl), 31.81 & 32.51(2C,
CH₂CH₂CH₃ in Oleoyl), 33.97(2C, α-CH₂ in Oleoyl),
64.80(2C, br, Cα,γ in Glyceryl), 68.50(2C, br,
Ins. C_2,6), 70.00-71.50(2C, br, Ins. C₃ & Cβ in G
lyceryl), 127.20, 127.67, 129.90 & 130.35(4C, Viny
l C), 174.05[2C, OC(O) in Oleoyl], Ins. C_1,4,5 car
bons were hidden by CDCl₃.³¹ P-NMR (109.4 MHz, NEt₃ salt, 53.5 mg in 2.5 ml C
DCl₃ & 0.3 ml CD₃OD& 1drop D₂O, pH ca. 7 ) δ = 2.
04(1P, m), 4.12(1P, m), 5.30(1P, m)

【００４８】

【発明の効果】本発明の到達により、従来天然の資源を
大量に採取・収集し、数多くの行程を経て、抽出・単離
していた天然型の不飽和型リン脂質類のＰＩＰやＰＩＰ
₂やＰＩＰ₃などを、化学合成的に全合成し、手にするこ
とができるようになった。本発明が化学合成操作による
不飽和型リン脂質類の製造に関するものであることか
ら、天然には知られていない、ＰＩＰやＰＩＰ₂やＰＩ
Ｐ₃などのアナローグを自在に合成・取得することがで
きる。また天然には微量しか存在しないＰＩ−３−Ｐや
ＰＩ−３，４−Ｐ₂などの不飽和型リン脂質類も製造す
ることができる。天然での存在が知られていない新規合
成の不飽和型リン脂質は、ヒトや動物に投与しうる薬剤
（アゴニスト、アンタゴニスト）として用いることがで
きる。またＰＩＰやＰＩＰ₂やＰＩＰ₃などの抗体を製造
する抗原としても用いることができ、ＰＩＰやＰＩＰ₂
やＰＩＰ₃などに由来・関連するする疾患の診断方法の
開発、診断薬の創製に道を開く。本発明により上記の様
々なアゴニスト、アンタゴニストを創製・提供すること
によって、ＰＩＰやＰＩＰ₂やＰＩＰ₃などの不飽和型リ
ン脂質類の生体内での未知の役割を解明するtoolとし
て、これら化合物は大いに役立ち、新たな医学生物学的
知見を人類が取得することに寄与しよう。

【図面の簡単な説明】

【図１】ＰＩＰ_３の合成ルートを表した図である。

【図２】メントキシ酢酸誘導体による光学分割法を表し
た図である。

【図３】ＰＩＰ_２の合成ルートを表した図である。

【図４】酒石酸を用いるイノシトール誘導体の光学分割
法を表した図である。

【図５】安息香酸誘導体３８の合成ルートを表した図で
ある

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 リン酸保護基としてのフルオレニルメチ
   ル基を用いることを特徴とする、不飽和型ホスファチジ
   ルイノシトールポリリン酸類化合物の製造方法。
2. 【請求項２】 イノシトールリン酸化合物の糖水酸基が
   ２−［２−（レブリノイルオキシ）エチル］ベンゾイル
   （Ｌｅｖ）基で置換され、リン酸の水酸基がフルオレニ
   ルメチル基で保護された新規な化合物。
3. 【請求項３】 イノシトールリン酸化合物がホスファチ
   ジルイノシトールポリリン酸類化合物である請求項２の
   新規な化合物。