JPH10287543A - 色素沈着防止剤並びにこれを含有する皮膚化粧料および皮膚外用剤 - Google Patents
色素沈着防止剤並びにこれを含有する皮膚化粧料および皮膚外用剤Info
- Publication number
- JPH10287543A JPH10287543A JP9108352A JP10835297A JPH10287543A JP H10287543 A JPH10287543 A JP H10287543A JP 9108352 A JP9108352 A JP 9108352A JP 10835297 A JP10835297 A JP 10835297A JP H10287543 A JPH10287543 A JP H10287543A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- skin
- pigmentation
- weight
- melanin
- cosmetic
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Cosmetics (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 従来提供されたものに比べ、よりすぐれたメ
ラニン生成抑制作用や樹状突起形成抑制作用を有し、し
かも安定性、安全性の優れた色素沈着防止剤および化粧
料を提供すること。 【解決手段】 アマチャ抽出物を有効成分として含有
し、このもののチロシナーゼ阻害作用、樹状突起形成抑
制作用もしくはメラニン生成抑制作用を利用する色素沈
着防止剤並びにこれを含む皮膚化粧料および皮膚外用
剤。
ラニン生成抑制作用や樹状突起形成抑制作用を有し、し
かも安定性、安全性の優れた色素沈着防止剤および化粧
料を提供すること。 【解決手段】 アマチャ抽出物を有効成分として含有
し、このもののチロシナーゼ阻害作用、樹状突起形成抑
制作用もしくはメラニン生成抑制作用を利用する色素沈
着防止剤並びにこれを含む皮膚化粧料および皮膚外用
剤。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、ヒトの表皮におけ
るチロシナーゼを阻害し、メラニン細胞の樹状突起形成
およびメラニン生成を抑制することにより皮膚の黒化を
防止する、色素沈着防止剤並びにこれを含有する皮膚化
粧料および皮膚外用剤に関するものである。
るチロシナーゼを阻害し、メラニン細胞の樹状突起形成
およびメラニン生成を抑制することにより皮膚の黒化を
防止する、色素沈着防止剤並びにこれを含有する皮膚化
粧料および皮膚外用剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】しみ、そばかすおよび日焼け後の皮膚の
色素沈着は、加齢に伴いその発生が増加し、また、消失
しにくくなるため、中高年齢者では大きな悩みである。
これら色素沈着症の詳細な発症機構は、未だ明確にさ
れていないが、日光からの紫外線の刺激、ホルモン分泌
の異常、遺伝的素因が原因でメラニン細胞が活性化さ
れ、メラニン色素が過剰に合成されることで生じるもの
と考えられている。 メラニン色素は表皮の基底層に存
在するメラニン細胞中でアミノ酸のチロシンからチロシ
ナーゼの作用で合成される。 合成されたメラニン色素
は、メラニン細胞の樹状突起を介して隣接した表皮細胞
に渡され、表皮細胞の角化と共に皮膚が黒化すると考え
られている。
色素沈着は、加齢に伴いその発生が増加し、また、消失
しにくくなるため、中高年齢者では大きな悩みである。
これら色素沈着症の詳細な発症機構は、未だ明確にさ
れていないが、日光からの紫外線の刺激、ホルモン分泌
の異常、遺伝的素因が原因でメラニン細胞が活性化さ
れ、メラニン色素が過剰に合成されることで生じるもの
と考えられている。 メラニン色素は表皮の基底層に存
在するメラニン細胞中でアミノ酸のチロシンからチロシ
ナーゼの作用で合成される。 合成されたメラニン色素
は、メラニン細胞の樹状突起を介して隣接した表皮細胞
に渡され、表皮細胞の角化と共に皮膚が黒化すると考え
られている。
【０００３】従来、チロシナーゼの活性を阻害する物質
を用い、メラニン細胞中でのチロシンからのメラニン生
成を抑制し皮膚の黒化を防止する試みがなされていた。
そして、その結果、ビタミンＣ、グルタチオン、アル
ブチン、コウジ酸、ハイドロキノン、種々の植物抽出物
や胎盤抽出物等、天然物からの抽出物などの有効性が確
認されている。 また、樹状突起形成を抑制する物質と
してアルブチンも知られている。
を用い、メラニン細胞中でのチロシンからのメラニン生
成を抑制し皮膚の黒化を防止する試みがなされていた。
そして、その結果、ビタミンＣ、グルタチオン、アル
ブチン、コウジ酸、ハイドロキノン、種々の植物抽出物
や胎盤抽出物等、天然物からの抽出物などの有効性が確
認されている。 また、樹状突起形成を抑制する物質と
してアルブチンも知られている。
【０００４】しかしながら、これらの物質は、メラニン
生成抑制作用や樹状突起形成抑制作用が不十分で、ま
た、安全性、安定性に問題があるものもあり、色素沈着
防止剤として使用するには必ずしも満足できるものでは
なかった。
生成抑制作用や樹状突起形成抑制作用が不十分で、ま
た、安全性、安定性に問題があるものもあり、色素沈着
防止剤として使用するには必ずしも満足できるものでは
なかった。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】したがって本発明の課
題は、安定性、安全性およびメラニン生成抑制作用等の
いずれにおいても優れ、従来のものよりも優れた色素沈
着防止剤を提供することにある。
題は、安定性、安全性およびメラニン生成抑制作用等の
いずれにおいても優れ、従来のものよりも優れた色素沈
着防止剤を提供することにある。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者は、よりすぐれ
たメラニン生成抑制作用を有する物質について、天然物
を中心に検索を行っていたところ、日本薬局方に記載さ
れた生薬アマチャの抽出物中に、チロシナーゼ阻害作
用、樹状突起形成抑制作用およびメラニン生成抑制作用
を有する成分が含まれていることを見出した。 そし
て、このものを皮膚に適用することによりメラニンの生
成が抑制され、色素沈着を防止できることおよびこのも
のの安全性が高いことを見出し、本発明を完成した。
たメラニン生成抑制作用を有する物質について、天然物
を中心に検索を行っていたところ、日本薬局方に記載さ
れた生薬アマチャの抽出物中に、チロシナーゼ阻害作
用、樹状突起形成抑制作用およびメラニン生成抑制作用
を有する成分が含まれていることを見出した。 そし
て、このものを皮膚に適用することによりメラニンの生
成が抑制され、色素沈着を防止できることおよびこのも
のの安全性が高いことを見出し、本発明を完成した。
【０００７】すなわち、本発明はアマチャ抽出物を有効
成分として含有することを特徴とする色素沈着防止剤並
びにこれを含有する皮膚化粧料および皮膚外用剤を提供
するものである。
成分として含有することを特徴とする色素沈着防止剤並
びにこれを含有する皮膚化粧料および皮膚外用剤を提供
するものである。
【０００８】
【発明の実施の形態】本発明の色素沈着防止剤の有効成
分であるアマチャ抽出物は、生薬アマチャを水、親水性
有機溶媒またはこれらの混合物で抽出することにより得
られるものである。
分であるアマチャ抽出物は、生薬アマチャを水、親水性
有機溶媒またはこれらの混合物で抽出することにより得
られるものである。
【０００９】生薬アマチャは、ユキノシタ科（Saxifrag
aceae）のアマチャ（Hydrangea macrophylla Seringe）
の葉をもんで乾燥したものであり、このものは甘味、矯
味薬として、また、口腔清涼剤などにすでに用いられて
いる。 しかしながら、この生薬の抽出物中に、チロシ
ナーゼ阻害作用、樹状突起形成抑制作用およびメラニン
生成抑制作用を有する物質が含まれていることは知られ
ておらず、本発明者らが初めて見いだしたものである。
aceae）のアマチャ（Hydrangea macrophylla Seringe）
の葉をもんで乾燥したものであり、このものは甘味、矯
味薬として、また、口腔清涼剤などにすでに用いられて
いる。 しかしながら、この生薬の抽出物中に、チロシ
ナーゼ阻害作用、樹状突起形成抑制作用およびメラニン
生成抑制作用を有する物質が含まれていることは知られ
ておらず、本発明者らが初めて見いだしたものである。
【００１０】アマチャ抽出物を製造する場合、原料の生
薬アマチャとしては漢方処方薬等に通常使用されている
ものをそのまま利用することができる。 また、抽出に
使用される溶媒のうち、親水性有機溶媒の好ましい具体
例としては、メタノール、エタノール等の低級脂肪族ア
ルコール、１,３−ブチレングリコール、グリセリン等
の多価アルコール、アセトン等が挙げられる。 抽出に
おいては、水および親水性有機溶媒をそれぞれ単独で使
用するほか、これを混合物にして用いることができる。
抽出に使用される溶媒として最も好ましいものは、エ
タノールである。
薬アマチャとしては漢方処方薬等に通常使用されている
ものをそのまま利用することができる。 また、抽出に
使用される溶媒のうち、親水性有機溶媒の好ましい具体
例としては、メタノール、エタノール等の低級脂肪族ア
ルコール、１,３−ブチレングリコール、グリセリン等
の多価アルコール、アセトン等が挙げられる。 抽出に
おいては、水および親水性有機溶媒をそれぞれ単独で使
用するほか、これを混合物にして用いることができる。
抽出に使用される溶媒として最も好ましいものは、エ
タノールである。
【００１１】上記溶媒を用いる抽出は、例えば次のごと
くして行うことができる。 すなわち、まず生薬を細切
りした後抽出溶媒に浸漬し、数時間ないし数日間、必要
に応じて加熱して行う。 その後、濾過または遠心分離
して固形物を分離し得られた抽出液から抽出溶媒を留去
する。 得られた抽出物は、そのままでも本発明の色素
沈着防止剤に使用することができるが、必要ならば、そ
の作用を著しく損なわない範囲で、脱色、脱臭等のため
の精製処理を施してから使用してもよい。
くして行うことができる。 すなわち、まず生薬を細切
りした後抽出溶媒に浸漬し、数時間ないし数日間、必要
に応じて加熱して行う。 その後、濾過または遠心分離
して固形物を分離し得られた抽出液から抽出溶媒を留去
する。 得られた抽出物は、そのままでも本発明の色素
沈着防止剤に使用することができるが、必要ならば、そ
の作用を著しく損なわない範囲で、脱色、脱臭等のため
の精製処理を施してから使用してもよい。
【００１２】このようにして得られるアマチャ抽出物
は、そのままで色素沈着防止剤とすることができるが、
更に凍結乾燥等の手段で乾燥させた粉末としてもしくは
適切な担体で希釈してメラニン生成抑制剤とすることが
できる。 希釈に用いることのできる担体としては、ア
ルコール、植物油、ワセリン等が挙げられ、これに更に
乳化剤等を添加してもよい。
は、そのままで色素沈着防止剤とすることができるが、
更に凍結乾燥等の手段で乾燥させた粉末としてもしくは
適切な担体で希釈してメラニン生成抑制剤とすることが
できる。 希釈に用いることのできる担体としては、ア
ルコール、植物油、ワセリン等が挙げられ、これに更に
乳化剤等を添加してもよい。
【００１３】本発明の色素沈着防止剤を添加し、美白作
用を有する皮膚化粧料や皮膚外用剤を製造する場合は、
常法による化粧料や外用剤の製造の任意の段階で、本発
明の色素沈着防止剤を適量添加すれば良い。 色素沈着
防止剤の添加量は、用いるアマチャ抽出物の効果の強さ
や、化粧料や外用剤の種類によって異なるが、多くの場
合、アマチャ抽出物として０.０００１〜５０重量％程
度、望ましくは０.００１〜１０重量％程度を添加する
ことにより好結果を得ることができる。
用を有する皮膚化粧料や皮膚外用剤を製造する場合は、
常法による化粧料や外用剤の製造の任意の段階で、本発
明の色素沈着防止剤を適量添加すれば良い。 色素沈着
防止剤の添加量は、用いるアマチャ抽出物の効果の強さ
や、化粧料や外用剤の種類によって異なるが、多くの場
合、アマチャ抽出物として０.０００１〜５０重量％程
度、望ましくは０.００１〜１０重量％程度を添加する
ことにより好結果を得ることができる。
【００１４】本発明の皮膚化粧料の例としては、クリー
ム、乳液、化粧水、その他各種の油性化粧料、粉末化粧
料、パック剤、浴用剤等が挙げられる。また、皮膚外用
剤の例としては、軟膏剤、硬膏剤、液剤（酒精剤、チン
キ剤、ローション剤等）、湿布剤（パップ剤、パスター
剤）、リニメント剤、クリーム剤、乳剤等が挙げられ
る。
ム、乳液、化粧水、その他各種の油性化粧料、粉末化粧
料、パック剤、浴用剤等が挙げられる。また、皮膚外用
剤の例としては、軟膏剤、硬膏剤、液剤（酒精剤、チン
キ剤、ローション剤等）、湿布剤（パップ剤、パスター
剤）、リニメント剤、クリーム剤、乳剤等が挙げられ
る。
【００１５】なお、本発明の皮膚化粧料を製造する場
合、上記の色素沈着防止剤の他、化粧料製造に通常使用
される非イオン界面活性剤、陰イオン界面活性剤、両性
界面活性剤等の乳化剤；植物油、動物油、高級脂肪酸、
高級アルコール、合成エステル油、ワックス類、シリコ
ーン油等の油性物質；水、香料、防腐剤、顔料、皮膚栄
養剤、皮膚賦活剤、保湿剤、紫外線防止剤、ｐＨ調節剤
等を、ほとんどの場合、そのまま使用することができ、
基本的な化粧料処方の変更を必要とすることはない。
合、上記の色素沈着防止剤の他、化粧料製造に通常使用
される非イオン界面活性剤、陰イオン界面活性剤、両性
界面活性剤等の乳化剤；植物油、動物油、高級脂肪酸、
高級アルコール、合成エステル油、ワックス類、シリコ
ーン油等の油性物質；水、香料、防腐剤、顔料、皮膚栄
養剤、皮膚賦活剤、保湿剤、紫外線防止剤、ｐＨ調節剤
等を、ほとんどの場合、そのまま使用することができ、
基本的な化粧料処方の変更を必要とすることはない。
【００１６】
【作用】本発明の色素沈着防止剤は、生薬アマチャの抽
出物中に存在する、チロシナーゼ阻害作用、樹状突起形
成抑制作用およびメラニン生成抑制作用を有する物質の
働きによりメラニンの生成を阻害し、また、生成された
メラニンの表皮細胞への移動を阻害することにより、色
素の沈着を総合的に防止するものである。
出物中に存在する、チロシナーゼ阻害作用、樹状突起形
成抑制作用およびメラニン生成抑制作用を有する物質の
働きによりメラニンの生成を阻害し、また、生成された
メラニンの表皮細胞への移動を阻害することにより、色
素の沈着を総合的に防止するものである。
【００１７】
【実施例】以下、実施例を示し、本発明を更に詳しく説
明するが、本発明はこれら実施例によりなんら制約され
るものではない。
明するが、本発明はこれら実施例によりなんら制約され
るものではない。
【００１８】実 施 例 １ 細切りした生薬アマチャ １００ｇにエタノール １００
０ｍｌを加え、室温、暗所での浸漬による抽出を１週間
行い、その後、固形物を除き、減圧下で加熱してエタノ
ールを留去した。 その結果、９.１ｇの抽出物を得た。
０ｍｌを加え、室温、暗所での浸漬による抽出を１週間
行い、その後、固形物を除き、減圧下で加熱してエタノ
ールを留去した。 その結果、９.１ｇの抽出物を得た。
【００１９】実 施 例 ２ チロシナーゼ活性の阻害効果試験：アマチャ抽出物と、
比較対照のコウジ酸、（シグマケミカル社製）およびア
ルブチン（和光純薬社製）のチロシナーゼ活性の阻害効
果、樹状突起形成の抑制効果およびメラニン生成の抑制
効果を下記の試験方法で測定した。
比較対照のコウジ酸、（シグマケミカル社製）およびア
ルブチン（和光純薬社製）のチロシナーゼ活性の阻害効
果、樹状突起形成の抑制効果およびメラニン生成の抑制
効果を下記の試験方法で測定した。
【００２０】（ 試 験 方 法 ）マウス由来のＢ１６メ
ラノーマ培養細胞（Ｂ１６−Ｆ１細胞、大日本製薬より
購入）を、培養ディッシュ（直径、１５０ｍｍ）に６×
１０5 個分注し、１０％牛胎児血清（ベーリンガーマン
ハイム社製）、ペニシリン（１００Ｕ／ｍｌ）、ストレ
プトマイシン（１００μｇ／ｍｌ）およびアンホテリシ
ンＢ（０.２５μｇ／ｍｌ）を含むダルベッコ変法ＭＥ
Ｍ培地（以上、シグマケミカル社製）中でＣＯ2 インキ
ュベーター（９５％空気、５％ＣＯ2 ）内、３７℃条件
下で培養した。 培養２４時間後に０.５ｍＭテオフィリ
ン（シグマケミカル社製）を含む新鮮な上記培地に交換
し、さらに３日間培養した。 トリプシン処理、ＰＢＳ
による洗浄後、集めた細胞（２×１０7 ）を０.５ｍｌ
の０.１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６.８）に懸濁し、凍結融
解、超音波処理で得られた細胞ホモジネートの遠心分離
（１２０００ｇ、１０分間、４℃）上清をチロシナーゼ
粗酵素液とした。
ラノーマ培養細胞（Ｂ１６−Ｆ１細胞、大日本製薬より
購入）を、培養ディッシュ（直径、１５０ｍｍ）に６×
１０5 個分注し、１０％牛胎児血清（ベーリンガーマン
ハイム社製）、ペニシリン（１００Ｕ／ｍｌ）、ストレ
プトマイシン（１００μｇ／ｍｌ）およびアンホテリシ
ンＢ（０.２５μｇ／ｍｌ）を含むダルベッコ変法ＭＥ
Ｍ培地（以上、シグマケミカル社製）中でＣＯ2 インキ
ュベーター（９５％空気、５％ＣＯ2 ）内、３７℃条件
下で培養した。 培養２４時間後に０.５ｍＭテオフィリ
ン（シグマケミカル社製）を含む新鮮な上記培地に交換
し、さらに３日間培養した。 トリプシン処理、ＰＢＳ
による洗浄後、集めた細胞（２×１０7 ）を０.５ｍｌ
の０.１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６.８）に懸濁し、凍結融
解、超音波処理で得られた細胞ホモジネートの遠心分離
（１２０００ｇ、１０分間、４℃）上清をチロシナーゼ
粗酵素液とした。
【００２１】９６ウェルプレートの各ウェルに蒸留水を
２５μｌ、チロシナーゼ粗酵素液を２５μｌ、エタノー
ルを２５μｌ、および段階的濃度で調製した試料を取
り、これらを混合した。 あらかじめ３７℃でインキュ
ベートした０.４Ｍ−ＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ６.８）を
３７.５μｌ、１０ｍＭ−Ｌ−ドーパ溶液を３７.５μｌ
を各ウェル添加し、撹拌後、３７℃で１５分間インキュ
ベートした。 反応前後に４７５ｎｍの吸光度をマイク
ロプレートリーダー（Ｂｉｏ−ｔｅｋ社製）で測定し、
下式（１）よりチロシナーゼ阻害率を算出した。 チロ
シナーゼ活性の阻害効果は、算出された阻害率から更に
５０％阻害濃度（ＩＣ50）を求め、この値で表した。
この結果を表１に示す。
２５μｌ、チロシナーゼ粗酵素液を２５μｌ、エタノー
ルを２５μｌ、および段階的濃度で調製した試料を取
り、これらを混合した。 あらかじめ３７℃でインキュ
ベートした０.４Ｍ−ＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ６.８）を
３７.５μｌ、１０ｍＭ−Ｌ−ドーパ溶液を３７.５μｌ
を各ウェル添加し、撹拌後、３７℃で１５分間インキュ
ベートした。 反応前後に４７５ｎｍの吸光度をマイク
ロプレートリーダー（Ｂｉｏ−ｔｅｋ社製）で測定し、
下式（１）よりチロシナーゼ阻害率を算出した。 チロ
シナーゼ活性の阻害効果は、算出された阻害率から更に
５０％阻害濃度（ＩＣ50）を求め、この値で表した。
この結果を表１に示す。
【００２２】算 出 式： Ａ： 試料を添加した場合のインキュベート前の吸光度 Ｂ： 試料を添加した場合のインキュベート後の吸光度 Ｃ： 試料を添加していない場合のインキュベート前の
吸光度 Ｄ： 試料を添加していない場合のインキュベート後の
吸光度
吸光度 Ｄ： 試料を添加していない場合のインキュベート後の
吸光度
【００２３】
【表１】 --------------------------------------------------- 試 料 チロシナーゼ活性の阻害効果 （ＩＣ50、μｇ／ｍｌ） --------------------------------------------------- アマチャ抽出物 １８６ コ ウ ジ 酸 ３６ アルブチン １２４６ ---------------------------------------------------
【００２４】実 施 例 ３ 樹状突起形成抑制効果試験：マウス由来のＢ１６メラノ
ーマ培養細胞を、培養用６ウェルプレートの各ウェルに
１×１０5 個分注し、１０％牛胎児血清、ペニシリン
（１００Ｕ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００μｇ
／ｍｌ）およびアンホテリシンＢ（０.２５μｇ／ｍ
ｌ）を含むダルベッコ変法ＭＥＭ培地中、ＣＯ2 インキ
ュベーター（９５％空気、５％ＣＯ2 ）内、３７℃条件
下で培養した。 培養５時間後に牛胎児血清を含まない
新鮮な上記培地に交換し、種々の濃度の試料（エタノー
ル溶液）および対照のエタノール（最終濃度１％）を添
加した。 さらに１９時間培養した後、位相差顕微鏡
（オリンパス社製）で細胞の写真を撮り、樹状突起保有
細胞（細胞の直径または短径より長い樹状突起をもつ細
胞）の数を数え、樹状突起保有細胞数／総細胞数を求め
た。 なお、写真撮影後、トリプシン処理で集めた細胞
の数をコールターカウンター（コールター社製）で測定
し、細胞毒性のないことを確認した。 結果は対照の測
定値を１００とした時の数字で示した。 この結果を表
２に示す。
ーマ培養細胞を、培養用６ウェルプレートの各ウェルに
１×１０5 個分注し、１０％牛胎児血清、ペニシリン
（１００Ｕ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００μｇ
／ｍｌ）およびアンホテリシンＢ（０.２５μｇ／ｍ
ｌ）を含むダルベッコ変法ＭＥＭ培地中、ＣＯ2 インキ
ュベーター（９５％空気、５％ＣＯ2 ）内、３７℃条件
下で培養した。 培養５時間後に牛胎児血清を含まない
新鮮な上記培地に交換し、種々の濃度の試料（エタノー
ル溶液）および対照のエタノール（最終濃度１％）を添
加した。 さらに１９時間培養した後、位相差顕微鏡
（オリンパス社製）で細胞の写真を撮り、樹状突起保有
細胞（細胞の直径または短径より長い樹状突起をもつ細
胞）の数を数え、樹状突起保有細胞数／総細胞数を求め
た。 なお、写真撮影後、トリプシン処理で集めた細胞
の数をコールターカウンター（コールター社製）で測定
し、細胞毒性のないことを確認した。 結果は対照の測
定値を１００とした時の数字で示した。 この結果を表
２に示す。
【００２５】
【表２】 --------------------------------------------------------------- 試 料（濃度、μｇ／ｍｌ） 樹状突起保有細胞数／総細胞数 --------------------------------------------------------------- 対 照 ０.０ １００± ４ アマチャ抽出物 ３.３ ８２±１３ ６.６ ７２±１３ コウジ酸 １４.２ ８４± ５ ２８.４ ７３± ６ アルブチン ２７.２ ８９± ４ ５４.４ ８６± １ --------------------------------------------------------------- 数値は平均値±標準偏差（Ｎ＝３）
【００２６】実 施 例 ４ メラニン生成抑制効果試験：マウス由来のＢ１６メラノ
ーマ培養細胞を、培養用６ウェルプレートの各ウェルに
１×１０5 個分注し、１０％牛胎児血清、ペニシリン
（１００Ｕ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００μｇ
／ｍｌ）およびアンホテリシンＢ（０.２５μｇ／ｍ
ｌ）を含むダルベッコ変法ＭＥＭ培地中、ＣＯ2 インキ
ュベーター（９５％空気、５％ＣＯ2 ）内、３７℃条件
下で培養した。 培養２４時間後に０.５ｍＭテオフィリ
ンを含む新鮮な上記培地に交換し、種々の濃度の試料
（エタノール溶液）および対照のエタノール（最終濃度
１％）を添加した。 さらに３日間培養し、以下の方法
で総メラニン量、細胞のタンパク量を測定した。
ーマ培養細胞を、培養用６ウェルプレートの各ウェルに
１×１０5 個分注し、１０％牛胎児血清、ペニシリン
（１００Ｕ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００μｇ
／ｍｌ）およびアンホテリシンＢ（０.２５μｇ／ｍ
ｌ）を含むダルベッコ変法ＭＥＭ培地中、ＣＯ2 インキ
ュベーター（９５％空気、５％ＣＯ2 ）内、３７℃条件
下で培養した。 培養２４時間後に０.５ｍＭテオフィリ
ンを含む新鮮な上記培地に交換し、種々の濃度の試料
（エタノール溶液）および対照のエタノール（最終濃度
１％）を添加した。 さらに３日間培養し、以下の方法
で総メラニン量、細胞のタンパク量を測定した。
【００２７】（ メラニン量、タンパク量の測定方法 ）
ウェルより培地を除去し、トリプシン処理、ＰＢＳによ
る洗浄、エタノールによる洗浄を行った後、風乾した細
胞を１Ｍ−ＮａＯＨ中、８０℃で３０分間、加熱溶解し
た。 本溶液および同様に溶解した合成メラニン（シグ
マケミカル社製）溶液の４７５ｎｍ−６６０ｎｍの吸光
度より細胞内メラニン量を求めた。 また、ＢＣＡプロ
テインアッセイキット（ピアース社製）を用い測定した
本溶液のタンパク量より細胞のタンパク量を求めた。
さらに、ウェルより除去した培地を遠心分離（７００
ｇ、１０分間、４℃）し、得られた上清に等量の１０％
エタノール含有０.３６Ｍ−ＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ６.
８）を加えｐＨ調整した後、本溶液および同様にｐＨ調
整した合成メラニン溶液の４７５ｎｍ−６６０ｎｍの吸
光度より細胞外メラニン量を求めた。 細胞内メラニン
量および細胞外メラニン量の合計を総メラニン量とし
た。 結果は対照の測定値を１００とした数字で示し
た。 この結果を表３に示す。
ウェルより培地を除去し、トリプシン処理、ＰＢＳによ
る洗浄、エタノールによる洗浄を行った後、風乾した細
胞を１Ｍ−ＮａＯＨ中、８０℃で３０分間、加熱溶解し
た。 本溶液および同様に溶解した合成メラニン（シグ
マケミカル社製）溶液の４７５ｎｍ−６６０ｎｍの吸光
度より細胞内メラニン量を求めた。 また、ＢＣＡプロ
テインアッセイキット（ピアース社製）を用い測定した
本溶液のタンパク量より細胞のタンパク量を求めた。
さらに、ウェルより除去した培地を遠心分離（７００
ｇ、１０分間、４℃）し、得られた上清に等量の１０％
エタノール含有０.３６Ｍ−ＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ６.
８）を加えｐＨ調整した後、本溶液および同様にｐＨ調
整した合成メラニン溶液の４７５ｎｍ−６６０ｎｍの吸
光度より細胞外メラニン量を求めた。 細胞内メラニン
量および細胞外メラニン量の合計を総メラニン量とし
た。 結果は対照の測定値を１００とした数字で示し
た。 この結果を表３に示す。
【００２８】
【表３】 -------------------------------------------------------------------- 試 料（濃度、μｇ／ｍｌ） 総メラニン量 細胞の （％） タンパク量（％） -------------------------------------------------------------------- 対 照 ０.０ １００± ２ １００±１１ アマチャ抽出物 ３.３ ８４± ８ １０６± ５ ６.６ ７５± ２ ９８±１２ １６.５ ５６± ７ ８９±１６ コ ウ ジ 酸 １４.２ ９０± ４ １０８± ４ ２８.４ ８３± ７ １０８± ６ ７１.１ ３０±１３ １０７± ８ アルブチン １３.６ ８１± ７ １０３± ８ ２７.２ ７４± ４ １０６± ９ ５４.４ ７２±１１ １００± ７ -------------------------------------------------------------------- 数値は平均値±標準偏差（Ｎ＝４〜６）
【００２９】以上のように、アマチャ抽出物にチロシナ
ーゼ活性の阻害効果が認められた。しかし、本効果は比
較対照のコウジ酸より約５倍低かったが、アルブチンよ
り約７倍高かった（実施例２）。 一方、Ｂ１６マウス
メラノーマ培養細胞を用い測定したアマチャ抽出物のメ
ラニン生成抑制効果、およびメラニンの細胞外分泌に関
与する樹状突起形成の抑制効果は、比較対照のコウジ
酸、アルブチンより４倍以上高かった（実施例３および
４）。
ーゼ活性の阻害効果が認められた。しかし、本効果は比
較対照のコウジ酸より約５倍低かったが、アルブチンよ
り約７倍高かった（実施例２）。 一方、Ｂ１６マウス
メラノーマ培養細胞を用い測定したアマチャ抽出物のメ
ラニン生成抑制効果、およびメラニンの細胞外分泌に関
与する樹状突起形成の抑制効果は、比較対照のコウジ
酸、アルブチンより４倍以上高かった（実施例３および
４）。
【００３０】この結果から明らかなように、アマチャ抽
出物は、チロシナーゼ活性阻害作用においては、コウジ
酸に若干劣るが、メラニン生成抑制効果、およびメラニ
ンの細胞外分泌に関与する樹状突起形成の抑制効果では
コウジ酸およびアルブチンに比べ優れており、総合的な
色素沈着防止効果では、アマチャ抽出物はアルブチン、
コウジ酸より優れていた。
出物は、チロシナーゼ活性阻害作用においては、コウジ
酸に若干劣るが、メラニン生成抑制効果、およびメラニ
ンの細胞外分泌に関与する樹状突起形成の抑制効果では
コウジ酸およびアルブチンに比べ優れており、総合的な
色素沈着防止効果では、アマチャ抽出物はアルブチン、
コウジ酸より優れていた。
【００３１】実 施 例 ５ 下記組成の化粧水を常法により製造した。 アマチャ抽出物 ０.５重量％ エタノール １０.０重量％ １,３−ブチレングリコール ２.０重量％ ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（５０Ｅ.Ｏ.） ０.０５重量％ パラオキシ安息香酸メチル ０.１重量％ 香 料 ０.１重量％ 精 製 水 残 部
【００３２】得られた化粧水は美白作用に優れ、且つさ
っぱりした使用感のものであった。また、保存安定性も
良好であった。
っぱりした使用感のものであった。また、保存安定性も
良好であった。
【００３３】実 施 例 ６ 下記組成の乳液を常法により製造した。 アマチャ抽出物 １.０重量％ ステアリン酸 ２.０重量％ 流動パラフィン ６.０重量％ スクワラン ２.０重量％ ソルビタンモノステアレート １.５重量％ ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート ２.０重量％ （２０Ｅ.Ｏ.） パラオキシ安息香酸メチル ０.０５重量％ １,３−ブチレングリコール ０.１重量％ 香 料 ０.１５重量％ 精 製 水 残 部
【００３４】得られた乳液は美白作用にすぐれ、しっと
りした使用感のものであった。また保存安定性にもすぐ
れていた。
りした使用感のものであった。また保存安定性にもすぐ
れていた。
【００３５】実 施 例 ７ 下記組成のクリームを常法により製造した。 アマチャ抽出物 １.０重量％ 流動パラフィン ２３.０重量％ ワセリン ７.０重量％ ベヘニルアルコール １.０重量％ ステアリン酸 ２.０重量％ ミツロウ ２.０重量％ ソルビタンモノステアレート １.５重量％ ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート ２.５重量％ （２０Ｅ.Ｏ.） パラオキシ安息香酸ブチル ０.０５重量％ １,３−ブチレングリコール ３.０重量％ パラオキシ安息香酸メチル ０.１重量％ 香 料 ０.１５重量％ 精 製 水 残 部
【００３６】得られたクリームは美白作用に優れ、使用
感も良好であった。また保存安定性にも優れていた。
感も良好であった。また保存安定性にも優れていた。
【００３７】実 施 例 ８ 下記組成の軟膏を常法により製造した。 アマチャ抽出物 ５.０重量％ 日本薬局方親水軟膏 ９５.０重量％
【００３８】本軟膏を一日２回シミの部位に塗布（２ｍ
ｇ／ｃｍ2）したところ、優れた美白作用が見られ、ま
た、保存安定性も良好であった。
ｇ／ｃｍ2）したところ、優れた美白作用が見られ、ま
た、保存安定性も良好であった。
【００３９】
【発明の効果】アマチャ抽出物を有効成分とする本発明
の色素沈着防止剤は、チロシナーゼ阻害作用および樹状
突起形成抑制作用に基づく優れた美白作用を有する。ま
た、アマチャが古くから飲用されていたことから明らか
なごとく、本発明の色素沈着防止剤は安全性に優れ、ま
た、使用感および安定性にも優れているものである。従
って、この色素沈着防止剤は、これを美白効果を目的と
する皮膚化粧料や皮膚外用剤の添加、配合成分として有
利に利用することができるものである。 以 上
の色素沈着防止剤は、チロシナーゼ阻害作用および樹状
突起形成抑制作用に基づく優れた美白作用を有する。ま
た、アマチャが古くから飲用されていたことから明らか
なごとく、本発明の色素沈着防止剤は安全性に優れ、ま
た、使用感および安定性にも優れているものである。従
って、この色素沈着防止剤は、これを美白効果を目的と
する皮膚化粧料や皮膚外用剤の添加、配合成分として有
利に利用することができるものである。 以 上
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 大脇 真 東京都港区東新橋１丁目１番19号 株式会 社ヤクルト本社内
Claims (5)
- 【請求項１】 アマチャ抽出物を有効成分として含有す
ることを特徴とする色素沈着防止剤。 - 【請求項２】 チロシナーゼ阻害作用、樹状突起形成抑
制作用もしくはメラニン生成抑制作用によるものである
請求項第１項記載の色素沈着防止剤。 - 【請求項３】 請求項第１項または第２項記載の色素沈
着防止剤を含有することを特徴とする皮膚化粧料。 - 【請求項４】 美白化粧料である請求項第３項記載の皮
膚化粧料。 - 【請求項５】 請求項第１項または第２項記載の色素沈
着防止剤を含有することを特徴とする皮膚外用剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9108352A JPH10287543A (ja) | 1997-04-11 | 1997-04-11 | 色素沈着防止剤並びにこれを含有する皮膚化粧料および皮膚外用剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9108352A JPH10287543A (ja) | 1997-04-11 | 1997-04-11 | 色素沈着防止剤並びにこれを含有する皮膚化粧料および皮膚外用剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH10287543A true JPH10287543A (ja) | 1998-10-27 |
Family
ID=14482544
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9108352A Pending JPH10287543A (ja) | 1997-04-11 | 1997-04-11 | 色素沈着防止剤並びにこれを含有する皮膚化粧料および皮膚外用剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH10287543A (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007269705A (ja) * | 2006-03-31 | 2007-10-18 | Naris Cosmetics Co Ltd | ｃ−ｋｉｔ遺伝子発現抑制剤 |
| JP2011105644A (ja) * | 2009-11-17 | 2011-06-02 | Maruzen Pharmaceut Co Ltd | メラニン取込抑制剤 |
| JP2011184392A (ja) * | 2010-03-10 | 2011-09-22 | Maruzen Pharmaceut Co Ltd | メラニン産生抑制剤、エンドセリン−１ｍＲＮＡ発現抑制剤、幹細胞増殖因子（ＳＣＦ）ｍＲＮＡ発現抑制剤、塩基性線維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）ｍＲＮＡ発現抑制剤、グルタチオン産生促進剤、過酸化水素に対するダメージ抑制剤、及びフィラグリン産生促進剤 |
| JP2011219403A (ja) * | 2010-04-08 | 2011-11-04 | Pola Chemical Industries Inc | 細胞賦活剤 |
| JP2014214139A (ja) * | 2013-04-26 | 2014-11-17 | ポーラ化成工業株式会社 | Ｎａｄｈ産生促進剤 |
-
1997
- 1997-04-11 JP JP9108352A patent/JPH10287543A/ja active Pending
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007269705A (ja) * | 2006-03-31 | 2007-10-18 | Naris Cosmetics Co Ltd | ｃ−ｋｉｔ遺伝子発現抑制剤 |
| JP2011105644A (ja) * | 2009-11-17 | 2011-06-02 | Maruzen Pharmaceut Co Ltd | メラニン取込抑制剤 |
| JP2011184392A (ja) * | 2010-03-10 | 2011-09-22 | Maruzen Pharmaceut Co Ltd | メラニン産生抑制剤、エンドセリン−１ｍＲＮＡ発現抑制剤、幹細胞増殖因子（ＳＣＦ）ｍＲＮＡ発現抑制剤、塩基性線維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）ｍＲＮＡ発現抑制剤、グルタチオン産生促進剤、過酸化水素に対するダメージ抑制剤、及びフィラグリン産生促進剤 |
| JP2011219403A (ja) * | 2010-04-08 | 2011-11-04 | Pola Chemical Industries Inc | 細胞賦活剤 |
| JP2014214139A (ja) * | 2013-04-26 | 2014-11-17 | ポーラ化成工業株式会社 | Ｎａｄｈ産生促進剤 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP2467134B1 (en) | Skin clarifying complex, use of said complex, cosmestic or pharmaceutical composition comprising said complex and method for application thereof | |
| JP2010514774A (ja) | 肌の状態および外観を改善するための組成物およびその使用方法 | |
| JPH06227960A (ja) | メラニン生成抑制剤および皮膚化粧料 | |
| KR102343705B1 (ko) | 천연 복합 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물 | |
| JP2014051441A (ja) | メラノソーム輸送阻害剤及びこれを含有する皮膚外用剤 | |
| JPH10287544A (ja) | 色素沈着防止剤並びに皮膚化粧料および皮膚外用剤 | |
| JP2952636B2 (ja) | メラニン生成抑制剤、その製造方法およびそれを含有する美白化粧料 | |
| ES2567131T3 (es) | Extracto de Vanilla planifolia, procedimiento para su obtención, y composición cosmética o dermatológica que locontiene | |
| JPH10287543A (ja) | 色素沈着防止剤並びにこれを含有する皮膚化粧料および皮膚外用剤 | |
| JP2000007546A (ja) | 色素沈着防止剤並びにこれを利用する皮膚化粧料および皮膚外用剤 | |
| JP2009084212A (ja) | インボルクリン産生促進剤 | |
| KR102171980B1 (ko) | 피부 개선용 화장료 조성물 | |
| US8709502B2 (en) | Extract of Vanilla planifolia | |
| KR20220031274A (ko) | 엘루테로사이드 e를 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물 | |
| JPH0578222A (ja) | 白髪防止剤 | |
| JPH10120546A (ja) | 美白用皮膚外用剤 | |
| EP2561883A2 (en) | Novel vascular endothelial growth factor expression inhibitors | |
| KR102552616B1 (ko) | 아토피 등 극건성 피부의 보습과 진정, 피부장벽강화 효과를 지니는 흰민들레 태좌 배양 추출물 함유 피부개선용 화장료 조성물 | |
| KR102034436B1 (ko) | 베트남 후피향 추출물을 포함하는 아토피 피부염 치료 및 예방용 조성물 | |
| JP2778855B2 (ja) | 化粧料 | |
| KR20160004567A (ko) | 조직배양한 라울리아 오스트라리스 신초 추출물을 포함하는 화장료 조성물 | |
| EP3890691A1 (en) | White pine bark extract for decreasing endothelin-1 secretion, stem cell factor synthesis and protein carbonylation | |
| JPH05271045A (ja) | 化粧料 | |
| JP2755783B2 (ja) | 化粧料 | |
| JP7849878B2 (ja) | １２ｒ－リポキシゲナーゼ産生促進剤 |