JPH10504825A

JPH10504825A - 二環式化合物

Info

Publication number: JPH10504825A
Application number: JP8508273A
Authority: JP
Inventors: クウォン，チェット; ミラー，ウィリアム・ヘンリー
Original assignee: SmithKline Beecham Corp
Current assignee: SmithKline Beecham Corp
Priority date: 1994-08-22
Filing date: 1995-08-22
Publication date: 1998-05-12
Also published as: EP0777657A1; WO1996006087A1; EP0777657A4; US6008214A

Abstract

(57)【要約】本発明は、結晶板凝集および骨吸収を阻害するのに効果的である式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩、かかる活性を有する医薬組成物およびこれらの化合物の使用方法に関する。

Description

【発明の詳細な説明】二環式化合物発明の分野本発明は医薬上活性な二環式化合物、該化合物を含む医薬組成物、および該化合物の使用法に関する。該化合物は血小板凝集を阻害する。これらの化合物はまた、ビトロネクチンレセプターを阻害し、骨粗鬆症の治療にも有用である。発明の背景血小板凝集は、主に、インテグリンと称される接着性レセプター群のメンバーである、フィブリノゲンレセプター、またはＧＰIIｂ−IIIａ血小板レセプター複合体により媒介されると考えられている。インテグリンレセプターの天然のリガンドは、Ａrg-Ｇly-Ａsp配列を含有する蛋白質であることが多いことが判明している。ＧＰIIｂ−IIIａレセプターについての天然のリガンドと考えられる、フォン・ウィルブランド（von Ｗillebrand）因子およびフィブリノゲンは、その一次構造においてＲＧＤ配列（一文字アミノ酸コードではＲＧＤ）を有する。機能的には、これらの蛋白質は隣接する血小板上のＧＰIIｂ−IIIａレセプターと結合し、架橋することが可能であって、その結果、血小板の凝集が起こる。フィブロネクチン、ビトロネクチンおよびトロンボスポンジンも、ＧＰIIｂ− IIIａと結合することが知られているＲＧＤ含有蛋白質である。フィブロネクチンは、血漿中に見られ、細胞内マトリックスにおける構造蛋白質として機能する。構造蛋白質およびＧＰIIｂ−IIIａ間の結合は、血小板を損傷した血管壁に付着させるように機能する。さらに、最近の研究は、破骨細胞の骨マトリックスへの付着が、インテグリンと称される細胞表面接着性レセプターを介してなされることを示している。例えば、Ｄaniesら、Ｊ.Ｃell Ｂiol.１９８９，１０９，１８１７は、骨吸収の調節に関与している破骨細胞の機能的抗原が、生化学的にビトロネクチンレセプターに関連付けされることを開示する。ビトロネクチンレセプター、またはαｖβ₃ インテグリンは、Ａrg−Ｇly−Ａsp（またはＲＧＤ）主要素を含有する、オステオポンチン、骨シアロプロテインおよびトロンボスポンジンのような骨マトリックス蛋白質に結合することが知られている。かくして、Ｈortonらは、Ｅxp．Ｃe ll Ｒes.１９９１，１９５，３６８において、ＲＧＤ含有ペプチドおよび抗ビトロネクチンレセプター抗体（２３Ｃ６）が破骨細胞による象牙質吸収および細胞拡散を阻害すると開示する。加えて、Ｓanoらは、Ｊ.Ｃell Ｂiol.１９９０，１１１，１７１３において、ＲＧＤ配列を含有する、ヘビ毒ペプチドのエチスタチンが組織培養にて骨吸収の強力な阻害剤であり、破骨細胞の骨への付着を阻害することを開示する。Ｆisherらは、Ｅndocrinology １９９３，１３２，１４１１において、さらに、エチスタチンがin vivoにてラットの骨吸収を阻害することを明らかにした。ＥＰ５２８５８７および５２８５８６は破骨細胞介在骨吸収を阻害する置換フェニル誘導体を報告する。本発明は、ＧＰIIｂ−IIIａレセプターの阻害剤であり、血小板凝集を阻害する、ベンズアゼピンおよびベンゾジアゼピンを包含する、新規な二環式化合物を開示する。また、当該化合物はビトロネクチンレセプターの阻害剤である。これらの物質は骨吸収を阻害し、骨粗鬆症の治療に有用である。発明の要約一態様において、本発明は、以下の式（Ｉ）に記載するような、置換７員環に縮合した置換６員環からなる二環式化合物を提供する。本発明はまた、式（Ｉ）の化合物および医薬上許容される担体を含有してなる医薬組成物を提供する。本発明はさらに、有効量の式（Ｉ）の化合物を内服することからなる、血小板凝集の阻害を必要とする哺乳動物における血小板凝集方法を提供する。別の態様において、本発明は、フィブリン溶解療法の後の哺乳動物における動脈または静脈の再閉塞の阻害法であって、有効量のフィブリン溶解剤および式（Ｉ）の化合物を内服することからなる阻害法を提供する。本発明はまた、卒中、一過性虚血発作、または心筋梗塞の治療法を提供する。本発明はまた、ビトロネクチンレセプターに結合するリガンドにより媒介される疾患の治療法を提供する。個々の態様において、本発明の化合物は骨粗鬆症および骨吸収がファクターである疾患の治療に有用である。発明の詳細な記載本発明は、血小板凝集を阻害し、かつ骨吸収を阻害する二環式化合物を開示する。この新規二環式化合物は、芳香族６員環に縮合した７員環からなり、該化合物は６員環に窒素含有置換基を有し、７員環に酸性基を含有する脂肪族置換基を有する。７員環は、窒素、酸素および硫黄のようなヘテロ原子を含有し、６員環は炭素環である。本発明の化合物は、式（Ｉ）：［式中、ＡはＮＲ'、ＣＨＲ'、ＯまたはＳであり；Ｘ¹およびＸ²はＣ＝ＯまたはＣＨ₂である。ただし、Ｘ¹またはＸ²の一方だけがＣ＝Ｏであり；Ｒ¹はＨ、Ｃ_1-6アルキルまたは(ＣＨＲ')_mＹであり；Ｒ²は−(ＣＨ₂)_tＣＯ₂Ｒ³であり；Ｒ³はＨ、Ｃ_1-6アルキルまたは(ＣＨＲ')_mＡrであり；であり；ＹはＨ、Ａr、Ｃ_3-7シクロアルキル、ＣＯ₂Ｒ³またはＴetであり；Ｒ'はＨ、Ｃ_1-6アルキルまたは(ＣＨ₂)mＡrであり；Ａrは、置換されていないか、または１ないし３個のＣ_1-6アルキル、トリフルオロメチル、ハロゲン、ＯＲ'、ＳＲ'、ＣＯＮＲ'Ｒ¹、ＣＯ₂Ｒ¹、ＮＯ₂またはＲ⁵Ｒ¹Ｎで置換されているフェニルまたはナフチルであり；Ｒ⁵はＨ、Ｃ_1-6アルキル、(ＣＨＲ')_mＹまたはＣＯ(ＣＨＲ')_mＹであり；ン、ピラゾール、ピラゾリン、ピラゾリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、ピリジン、ピリジニウム、テトラヒドロピリジン、テトラヒドロアゼピンまたはヘキサヒドロアゼピンであり、ｍは０ないし６であり；ｓは１ないし４であって；ｔは１または２を意味する］で示される化合物またはその医薬上許容される塩である。本発明の化合物の医薬上許容される酸付加塩、複合体またはプロドラッグもまた、本発明に含まれる。プロドラッグは、in vivoにて式（Ｉ）の活性な親薬剤を放出する共有結合した担体であると考えられる。本発明の化合物が１またはそれ以上のキラル中心を有する場合、特に記載しない限り、本発明は通常の技術により合成され、分割される各独自の非ラセミ化合物を包含する。いずれか一にある置換基の意義は、特に記載しない限り、その意義または他にある別の置換基の意義とは独立したものである。式（Ｉ）に関して、適当には、Ｘ¹はＣＨ₂であり、Ｘ²はＣ＝Ｏであって、ＡはＮＲ'である。好ましくは、式（Ｉ）に関して、Ｘ¹はＣＨ₂であり、Ｘ²はＣ＝Ｏであり、ＡはＮＲ'であり、Ｒ¹はＣ_1-4アルキルまたは(ＣＨＲ')_mＹ（ここに、Ｒ'はＨまたはＣ_1-4アルキルであり、ｍは１ないし３であり、ＹはＡrまたはＣ_3-7シクロアルキルである）であり、Ｒ⁴およびジン、ピリジン、ピリジニウムまたはテトラヒドロピリジンである）であり、ｓる。本発明の好ましい化合物は： (±)−７−[[ビス[２−(４−ピリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−４−メチル−３−オキソ−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸、 (±)−８−[[ビス[２−(４−ピリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−３−オキソ−４−(２−フェニルエチル)−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４− ベンゾジアゼピン−２−酢酸、 (±)−７−[[ビス[２−(４−ピペリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−４− メチル−３−オキソ−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸、および (±)−８−[[ビス[２−(４−ピペリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−４− (２−シクロヘキシルエチル)−３−オキソ−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ −１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸、またはその医薬上許容される塩である。本発明の最も好ましい化合物は： (±)−７−[[ビス[２−(４−ピペリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−４− メチル−３−オキソ−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸、および (±)−８−[[ビス[２−(４−ピペリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−４− (２−シクロヘキシルエチル)−３−オキソ−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ −１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸、またはその医薬上許容される塩である。前記の記載において、Ｃ_1-4アルキルは、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチルおよびｔ−ブチルを含むことを意味する。Ｃ_1-6アルキルはさらに、ペンチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチルおよびヘキシルおよびその単純な脂肪族異性体を包含する。Ｃ_3-7シクロアルキルは３ないし７個の炭素原子を有する所望により置換されていてもよい炭素環系をいい、２個までの不飽和炭素−炭素結合を含有していてもよい。典型的なＣ_3-7シクロアルキルは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニルおよびシクロヘプチル、特にシクロヘキシルである。通常の化学合成により得ることができ、安定している、シクロアルキル環上のＣ_1-6アルキル、トリフルオロメチル、ハロゲン、ＯＲ'、ＳＲ'、ＣＯＮＲ'Ｒ¹、ＣＯ₂Ｒ¹、ＮＯ₂またはＲ⁵Ｒ¹Ｎより選択されるような３個までの置換基のいずれの組み合わせも本発明の範囲に含まれる。式（Ｉ）でいう利用できる置換７員環は、（ｉ）２個までのＮ、ＯおよびＳから選択されるヘテロ原子を有し、ここにＳおよびＮは、所望により、酸化されていてもよく、（ii）安定しており、当業者が２個の隣接する環炭素原子を介してフェニルに縮合した形態を合成できる飽和７員環である。典型的な利用可能な７員環は、アゼピン、ジアゼピン、チアゼピンおよびオキサゼピンの一般的な飽和環である。利用可能な７員環とフェニル環を組み合わせることで形成される代表的な二環式環は、ベンズアゼピン、ベンゾジアゼピン、ベンズオキサゼピンおよびベンゾチアゼピン化合物である。ベンゾジアゼピン化合物が、本発明の好ましい二環式化合物である。ある種の基を本明細書にて略語で表す。ｔ−Ｂuは第３ブチル基をいい、Ｂoc はｔ−ブチルオキシカルボニル基をいい、Ｆmocはフルオレニルメトキシカルボニル基をいい、Ｐhはフェニル基をいい、Ｃbzはベンジルオキシカルボニル基をいい、ＢrＺはｏ−ブロモベンジルオキシカルボニル基をいい、ＣlＺはｏ−クロロベンジルオキシカルボニル基をいい、Ｂzlはベンジル基をいい、４−ＭＢzlは４−メチルベンジル基をいい、Ｍeはメチルをいい、Ｅtはエチルをいい、Ａcはアセチルをいい、ＡlkはＣ_1-6アルキルをいい、Ｎphは１−または２−ナフチルをいい、ｃＨexはシクロヘキシルをいう。ＭeＡrgはＮ^α−メチルアルギニンである。Ｔetは５−テトラゾリルをいう。ある種の試薬を本明細書にて略語で表す。ＤＣＣはジシクロヘキシルカルボジイミドをいい、ＤＭＡＰはジメチルアミノピリジンをいい、ＤＩＥＡはジイソプロピルエチルアミンをいい、ＥＤＣはＮ−エチル−Ｎ'(ジメチルアミノプロピル )カルボジイミドをいい、ＨＯＢtは１−ヒドロキシベンゾトリアゾールをいい、ＴＨＦはテトラヒドロフランをいい、ＤＭＦはジメチルホルムアミドをいい、ＮＢＳはＮ−ブロモスクシンイミドをいい、Ｐd／Ｃは炭素上パラジウム触媒をいい、ＰＰＡは１−プロパンホスホン酸環状無水物をいい、ＤＰＰＡはジフェニルホスホリルアジドをいい、ＢＯＰはベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリス(ジメチルアミノ)ホスホニウムヘキサフルオロホスフェートをいい、ＨＦはフッ化水素酸をいい、ＴＥＡはトリエチルアミンをいい、ＴＦＡはトリフルオロ酢酸をいい、ＰＣＣはクロロクロム酸ピリジニウムをいう。式（Ｉ）の化合物は、一般に、式（II）の化合物を、式（III）の化合物と反応させ：［式中、Ｘ¹、Ｘ²、Ｒ¹、Ｒ²、ＡならびにＲ⁴およびＲ^4'は式（Ｉ）において定義したとおりであり、反応性官能基はいずれも保護されている］その後、保護基を除去し、所望により医薬上許容される塩を形成することにより調製される。式（II）の化合物は、１９９３年１月７日付け公開のＢondinellら、ＰＣＴ公開番号ＷＯ９３／０００９５（ＰＣＴ／ＵＳ９２／０５４６３）に記載のベンゾジアゼピン、ベンズアゼピン、ベンズオゼピンおよびベンゾチアゼピンである。そのように公開されている特許出願の開示のすべてを参考にし、それを出典明示により本明細書の一部とする。式（Ｉ）の化合物は、スキームＩおよびIIに記載の一般的方法により調製される。Ｂondinellら（ＷＯ９３／０００９５）の記載にしたがって製造した、(±)− ８−カルボキシ−３−オキソ−４−(２−フェニルエチル)−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸メチル（Ｉ−１）を、例えば、ＥＤＣおよびＨＯＢＴまたはＳＯＣl₂を用いて、カルボン酸の活性形に変え、その後、その活性形をビス[２−(４−ピリジル)エチル]アミンのような適当なトリアミンと反応させて対応するアミンＩ−２を得る。カルボン酸をアミドに変換するのにさらに多くの方法が知られており、“Ｃompendium of Ｏrganic Ｓynthetic Ｍethods”，Ｖol.Ｉ−VI（Ｗiley-Ｉnterscience発行）のような標準的参考書に記載されている。Ｉ−２のメチルエステルを水性塩基、例えば、ＴＨＦ中水性ＬiＯＨまたはメタノール中水性ＮaＯＨを用いて加水分解し、その中間体のカルボン酸塩を適当な酸、例えばＴＦＡまたはＨＣlで酸性化し、そのカルボン酸Ｉ−３を得る。別法として、所望により、その中間体のカルボン酸塩を単離することができる。 II−３のようなピペリジン含有の化合物は、スキームＩに記載の方法にしたがって、適宜Ｎ−保護したピペリジン誘導体より、あるいはII−１のようなピリジン先駆体より製造できる。例えば、II−１のピリジンのサブユニットは、ＨＣl などの酸の存在下、適当な触媒、好ましくはＰtＯ₂で水素添加することにより対応するピペリジン基に還元することができる。これらの条件下では、４−位の置換基にあるような、分子中の他の芳香族環も同時に還元されるかもしれない。ついで、得られたピペリジニウム塩II−２をスキームＩに記載の方法により化合物 II−３に変換する。本発明において用いられるカップリング剤はペプチド結合を形成するのに用いることができる試薬を意味する。典型的なカップリング法は、カルボジイミド、活性化無水物およびエステルおよび酸ハロゲン化物を用いる。ＥＤＣ、ＤＣＣ、ＤＰＰＡ、ＰＰＡ、ＢＯＰ試薬、ＨＯＢt、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドおよび塩化オキサリルなどの試薬が典型的なものである。ペプチド結合を形成するカップリング法は、一般に、当該分野において周知である。Ｂodanskyらがザ・プラクティス・オブ・ペプチド・シンセシス（THE PRA CTICE OF PEPTIDE SYNTHESIS），Springer-Verlag，ベルリン，１９８４にて、Ａliらがジャーナル・オブ・メディカル・ケミストリー（J.Med.Chem.），２９，９８４（１９８６）およびジャーナル・オブ・メディカル・ケミストリー，３０，２２９１（１９８７）にて開示しているペプチド合成法がその一般例であり、その開示を出典明示により本明細書の一部とする。アミドまたはペプチド結合を形成するための溶液合成は、アミド結合を形成するのに用いられる慣用的方法を用いて達成される。典型的には、式（III）：ＨＮＲ⁴Ｒ^4'で示される化合物の遊離アミノ基を、所望により触媒、例えば１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢt）およびジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）の存在下に、適当なカルボジイミドカップリング剤、例えばＮ,Ｎ'−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）を用いて、スキームＩ、式１の化合物のような適当なカルボン酸基質に結合させる。スキームＩ、式１の化合物の遊離カルボキシルの活性化エステル、無水物または酸ハロゲン化物を形成し、その後、式（III）のＨＮＲ⁴Ｒ^4'化合物の遊離アミンを反応させる他の方法も適当である。その化合物の酸付加塩は、適当な溶媒中、親化合物および塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、酢酸、マレイン酸、コハク酸またはメタンスルホン酸のような過剰の酸より標準方法で調製される。ある種の化合物は、許容できる内部塩または双性イオンを形成する。カチオン性塩は、親化合物を、適当なカチオンを含有する水酸化物、炭酸塩またはアルコキシドのような過剰のアルカリ試薬；または適当な有機アミンで処理することにより調製される。Ｌi⁺、Ｎa⁺、Ｋ⁺、Ｃa⁺⁺、Ｍ g⁺⁺およびＮＨ₄ ⁺などのカチオンが、例えば、医薬上許容される塩において存在するカチオンである。本発明はまた、式（Ｉ）の化合物および医薬上許容される担体を含有してなる医薬組成物を提供する。したがって、式（Ｉ）の化合物は医薬の製造において用いられる。前記したように調製した式（Ｉ）の化合物の医薬組成物を非経口投与用溶液または凍結乾燥粉末として処方してもよい。粉末は使用前に適当な希釈剤または他の医薬上許容される担体を添加することにより復元される。液体処方は緩衝等張水性溶液である。適当な希釈剤の例は、通常の等張塩溶液、標準５％水中デキストロースまたは緩衝酢酸ナトリウムまたはアンモニウム溶液である。このような処方は特に非経口投与に適しているが、経口投与にも用いられ、または吸入用の用量計量吸入器またはネブライザーに入れる。ポリビニルピロリドン、ゼラチン、ヒドロキシセルロース、アカシア、ポリエチレングリコール、マンニトール、塩化ナトリウムまたはクエン酸ナトリウムのような賦形剤を添加することが望ましい。また、これらの化合物は経口投与用にカプセル化、打錠化またはエマルジョンまたはシロップに調製される。医薬上許容される固体または液体担体を添加して、組成物を強化または安定化させ、または組成物の調製を容易にする。固体担体は、澱粉、ラクトース、硫酸カルシウム二水和物、白土、ステアリン酸マグネシウムまたはステアリン酸、タルク、ペクチン、アカシア、寒天またはゼラチンを包含する。液体担体は、シロップ、ピーナッツ油、オリーブ油、食塩水および水を包含する。担体は、また、モノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルなどの除放性物質を単独でまたはワックスと一緒に有していてもよい。固体担体の量は変化するが、好ましくは、投与単位当たり約２０ｍｇないし約１ｇの間である。医薬調製物は、錠剤形の場合、粉砕、混合、顆粒化、および必要ならば、圧縮化；またはハードゼラチンカプセル形の場合、粉砕、混合および充填を含む通常の調剤技術に従って調製される。液体担体を用いる場合、調製物はシロップ、エリキシル、エマルジョンまたは水性または非水性懸濁剤の形態である。このような液体処方は、直接的に経口投与、またはソフトゼラチンカプセルに充填して投与される。経直腸投与の場合、本発明の化合物はまた、カカオ脂、グリセリン、ゼラチンまたはポリエチレングリコールのような賦形剤と組み合わせて、坐剤を成型してもよい。本発明の化合物は、例えば、貯蔵のため、または診断または研究における使用などのex vivoの操作のために、in vitroにて用い、血液および血液製品中の血小板の凝集を阻害してもよい。本発明はまた、哺乳動物、特にヒトにおける血小板凝集および血餅形成を阻害する方法であって、式（Ｉ）のペプチドおよび医薬上許容される担体を内部投与することからなる方法を提供する。このような療法についての適応症は、急性心筋梗塞（ＡＭＩ）、深静脈血栓症、肺塞栓症、解剖無尿症、一過性虚血発作（ＴＩＡ）、卒中および他の梗塞関連障害、および不安定アンギナを包含する。分散性静脈内凝固（ＤＩＣ）、敗血症、手術または感染性ショック、術後および分娩後外傷、心肺バイパス手術、不適合輸血、胎盤早期剥離、血栓症性血小板減少性紫斑症（ＴＴＰ）、ヘビ毒および免疫病などの慢性または急性の高凝集性症状がこのような治療に対して反応しやすい。加えて、本発明の化合物は、転移病態の予防、免疫刺激を誘発する真菌性または細菌性感染症の予防または治療および鎌状赤血球貧血の治療において有用である。本明細書に記載の化合物はビトロネクチンレセプターのアンタゴニストであり、基礎となる病状がビトロネクチンレセプターと相互作用するリガンドまたは細胞に起因する疾患を治療するのに有用である。例えば、これらの化合物は、骨マトリックスの喪失が病状を形成する疾患の治療に有用である。かくして、当該化合物は骨粗鬆症、上皮小体機能亢進症、パジェット病、悪性の高カルシウム血症、骨転移により形成される骨溶解性病変、不動化による骨喪失または性ホルモン欠損症の治療に有用である。本発明の化合物はまた、抗腫瘍および抗炎症剤としての有用性を有し、アテローム性動脈硬化症および再狭窄の治療にて有用であると思われる。本発明の化合物は、血漿中の薬剤濃度が血小板凝集または骨吸収、あるいは他の適応症を阻害するのに十分な濃度になる程度に、患者に経口または非経口投与される。該化合物を含有する医薬組成物を、約０.２ないし約５０ｍｇ／ｋｇの用量で、患者の症状に合うように投与する。急性療法の場合、非経口投与が好ましい。化合物の水または生理食塩水中５％デキストロース中の静脈内注入または適当な賦形剤を有する同様の処方が、最も効果的であるが、筋肉内ボーラス注射もまた有用である。典型的には、非経口用量は、約０.０１ないし約１００ｍｇ／ｋｇ；好ましくは０.１ないし２０ｍｇ／ｋｇである。化合物をある濃度で一日に１ないし４回投与し、約０.４ないし約４００ｍｇ／ｋｇ／日の一日用量を達成する。正確な濃度および化合物を投与する方法は、薬剤の血中濃度を治療効果を得るに必要な濃度と比較することにより当業者であれば容易に決定される。本発明はさらにフィブリン溶解療法後の動脈または静脈の再閉塞の阻害法であって、式（Ｉ）のペプチドおよびフィブリン溶解剤を内部投与することからなる阻害法を提供する。フィブリン溶解療法におけるペプチドの投与は、再閉塞を完全に防止するかまたは再閉塞までの時間を延長することが判明している。本明細書において用いる場合、フィブリン溶解剤なる語は、天然または合成製品のいずれであっても、フィブリン血餅の溶解を直接または間接的に生じさせる化合物を意味する。プラスミノーゲン活性化剤は周知の一群のフィブリン溶解剤である。有用なプラスミノーゲン活性化剤は、例えば、アニストレプラーゼ、ウロキナーゼ（ＵＫ）、プロ−ウロキナーゼ（ｐＵＫ）、ストレプトキナーゼ（ＳＫ）、組織プラスミノーゲン活性化剤（ｔＰＡ）、および化学的に修飾されているか、または１個またはそれ以上のアミノ酸が付加、欠失または置換されているか、または１個またはそれ以上の機能領域が付加、欠失もしくは１個のプラスミノーゲン活性化剤の活性部位を別のプラスミノーゲン活性化剤またはフィブリン結合分子のフィブリン結合領域と合するように変更されている変異体などの、プラスミノーゲン活性化剤活性を保持する、その突然変異体または変異体を包含する。他の変異体として、１個またはそれ以上のグリコシル化部位が変更されているｔＰＡ分子が挙げられる。プラスミノーゲン活性化剤のうち好ましいのは、第一アミノ酸配列が成長因子領域でプラスミノーゲン活性化剤の血清半減期が増加するように変更されているｔＰＡ変異体である。ｔＰＡ成長因子変異体は、例えば、Ｒobinsonら、ＥＰ−Ａ０２９７５８９およびＢrowne、ＥＰ−Ａ０２４０３３４に開示されている。他の変異株は、ハイブリッドタンパク、例えば、ＥＰ００２８４８９、ＥＰ０１５５３８７およびＥＰ０２９７８８２（そのすべてを出典明示により本明細書の一部とする）に開示されているものを包含する。アニストレプラーゼが本発明にて用いる場合に好ましいハイブリッドタンパク質である。フィブリン溶解剤は、天然源から単離されるが、通常は遺伝子工学の伝統的方法により産生される。ｔＰＡ、ＳＫ、ＵＫおよびｐＵＫの有用な処方は、例えばＥＰ−Ａ０２１１５９２、ＥＰ−Ａ００９２１８２および米国特許第４,５６８,５４３号（そのすべてを出典明示により本明細書の一部とする）に開示されている。典型的には、フィブリン溶解剤は、水性緩衝等張溶液、例えば、酢酸またはアジピン酸ナトリウムまたはアンモニウム緩衝液（pＨ３.３〜５.５）に処方される。ポリビニルピロリドン、ゼラチン、ヒドロキシセルロース、アカシア、ポリエチレングリコール、マンニトールおよび塩化ナトリウムのような別の賦形剤を添加してもよい。このような組成物は凍結乾燥できる。医薬組成物は、式（Ｉ）の化合物およびフィブリン溶解剤の両方を同一容器中に処方してもよいが、別の容器内に処方するのが好ましい。両方の薬剤を溶液形態にした場合、同時投与用の注入／注射系に、またはタンデム装置中に含めることができる。このような療法の適応症は、心筋梗塞、深静脈血栓症、肺塞栓症、卒中および他の梗塞関連障害を包含する。本発明の化合物をｔＰＡまたは他のフィブリン溶解剤の非経口投与の直前、同時、または直後に投与する。再潅流が、最大限、療法後の再閉塞を阻害するように確立された後も、該ペプチドでの治療を十分な期間続けるのが望ましいことが判明している。ｔＰＡ、ＳＫ、ＵＫまたはｐＵＫの有効用量は、０.５ないし５ｍｇ／ｋｇであり、ペプチドの有効用量は、約０.１ないし２５ｍｇ／ｋｇである。阻害剤およびフィブリン溶解剤を同時または別々に都合よく投与するために、ボックスのような１個の容器に、カートンまたは他の容器、個別のビン、袋、バイアルまたは他の容器からなり、各々、前記した有効量の非経口投与用阻害剤および前記した有効量の非経口投与用ｔＰＡまたは他のフィブリン溶解剤を入れたものからなるキットが調製される。このようなキットは、例えば、別々の容器または同一の容器に入れた両薬剤と、所望の凍結乾燥プラグと、復元用溶液の容器とからなっていてもよい。この変形は、復元用溶液および凍結乾燥プラグを１個の容器の２つのチャンバーに含めるものであり、これを使用前に混合できる。このような装置では、フィブリン溶解剤および本発明の化合物を、別々に、２個の容器にパッケージしたり、一緒に凍結乾燥して粉末にし、１個の容器で提供できる。両薬剤を溶液形にて提供する場合、これらの薬剤は同時投与用の注入／注射系またはタンデム装置に含めることができる。例えば、血小板凝集阻害剤は、静脈内注射可能な形態、またはチューブで一列に別の注入バッグ内のフィブリン溶解剤に連結した注入バッグに入れてもよい。このような系を用いた場合、患者は、ペプチド阻害剤の初期ボーラス型注射または注入を受け、続いてフィブリン溶解剤の注入を受けることができる。所定の薬理効果を有する必要の化合物の濃度を測定するために、数種の生物学的検定のうち一の検定にて当該化合物を試験してもよい。ＲＧＤ−媒介ＧＰIIｂ−IIIａ結合の阻害ＧＰIIｂ−IIIａの精製１０ユニットの旧式の、洗浄したヒト血小板（赤十字より入手）を、３％オクチルグルコシド、２０ｍＭトリス−ＨＣl（pＨ７.４）、１４０ｍＭＮaＣl、２ｍＭＣaＣl₂中、４℃で２時間、穏やかに撹拌するで溶解させた。その溶解物を１００,０００ｇで１時間遠心分離に付した。得られた上清液を、２０ｍＭトリス−ＨＣl（pＨ７.４）、１００ｍＭＮaＣl、２ｍＭＣaＣl₂、１％オクチルグルコシド（緩衝液Ａ）で予め平衡にした、５ｍｌのレンチル・レクチン・セファロース４Ｂカラム（Ｅ.Ｙ.Ｌabs）に加えた。２時間インキュベーションした後、該カラムを冷緩衝液Ａ（５０ｍｌ）で洗浄した。レクチン保持ＧＰIIｂ−III ａを１０％デキストロース含有の緩衝液Ａで溶出した。すべての操作は４℃で行った。得られたＧＰIIｂ−IIIａは、ＳＤＳポリアクリルアミドゲル電気泳動操作によれば、＞９５％純度であった。ＧＰIIｂ−IIIａのリポソームへの組み込みホスファチジルセリン（７０％）およびホスファチジルコリン（３０％）の混合物（Avanti Polar Lipid）を、窒素流下、ガラス管の壁にて乾燥させた。精製したＧＰIIｂ−IIIａを最終濃度０.５ｍｇ／ｍＬにまで希釈し、１：３(ｗ：ｗ) のタンパク質：リン脂質の比にてリン脂質と混合した。該混合物を再び懸濁させ、バスソニケーターにて５分間超音波処理に付した。ついで、該混合物を、１０００倍過剰の５０ｍＭトリス−ＨＣl（pＨ７.４）、１００ｍＭＮaＣl、２ｍＭＣaＣl₂（２回交換）に対する１２,０００−１４,０００分子量カットオフ透析を用いて一夜透析した。ＧＰIIｂ−IIIａ含有リポソームを、１２,０００ｇで１５分間遠心分離に付し、約１ｍｇ／ｍＬの最終タンパク質濃度で再び透析緩衝液に懸濁させた。該リポソームを必要になるまで−７０℃で貯蔵した。ＧＰIIｂ−IIIａへの競合結合フィブリノゲンレセプター（ＧＰIIｂ−IIIａ）に対する結合を、ＲＧＤ−型リガンドとして［³Ｈ］−ＳＫ＆Ｆ−１０７２６０を用いる間接的競合結合法により検定した。該結合検定は、２２μｍの親水性デュラポアー（durapore）膜を用い、９６−ウェルの濾過プレート装置（Ｍillipore Ｃorporation，Ｂedford，ＭＡ）にて行った。該ウェルを１０μｇ／ｍＬのポリリシン（Ｓigma Ｃhemical Ｃo.）,Ｓt.Ｌouis，ＭＯ.）０.２ｍＬで、室温で１時間、プレコートし、非特異的結合を遮断した。種々の濃度の非標識化ベンザジアザピンを四重試験にてウェルに加えた。［³Ｈ］−ＳＫ＆Ｆ−１０７２６０を４.５ｎＭの最終濃度にて各ウェルに加え、つづいて精製した血小板ＧＰIIｂ−IIIａ含有リポソーム１μｇを加えた。混合物を室温で１時間インキュベートした。ＧＰIIｂ−IIIａ結合［³ Ｈ］−ＳＫ＆Ｆ−１０７２６０を、ミルポール（Millipore）濾過マニホールドを用いる濾過により非結合体より分離し、つづいて氷冷緩衝液（２回、各０.２ｍＬ）で洗浄した。フィルター上に保持している結合放射活性を、４０％効率の、ベックマン・リキッド・シンチレーション・カウンター（Ｂeckman Ｌiquid Ｓcintillation Ｃounter）（モデルＬＳ６８００）中、Ｒeady Ｓolve（Ｂeckm an Ｉnstruction，Ｆullerton，ＣＡ）１.５ｍＬにて計数した。非特異的結合を２μＭの非標識化ＳＫ＆Ｆ−１０７２６０の存在下で測定し、それは一貫してサンプルに加えた全放射活性の０.１４％未満であった。すべてのデータは４重試験の平均点である。競合結合データを非線状最小二乗曲線適合操作により分析した。この方法によりアンタゴニストのＩＣ₅₀（［³Ｈ］−ＳＫ＆Ｆ−１０７２６０の特異的結合を平衡状態で５０％まで阻害するアンタゴニストの濃度）が得られる。ＩＣ₅₀は、ＣhengおよびＰrusoffの式：Ｋi＝ＩＣ₅₀／（１＋Ｌ／Ｋｄ）（Ｌは競合結合検定にて用いる［³Ｈ］−ＳＫ＆Ｆ−１０７２６０の濃度（４.５ｎＭ）であり、Ｋ dは［³Ｈ］−ＳＫ＆Ｆ−１０７２６０の解離定数であり、Ｓcatchard分析により測定した場合、４.５ｎＭである）に基づき、アンタゴニストの平衡解離定数（Ｋi）に関係付けられる。本発明の化合物は［³Ｈ］−ＳＫ＆Ｆ−１０７２６０結合を約２ｎＭないし約１.０μＭの範囲のＫiで阻害する。好ましい化合物は、、一般に、６０ｎＭ未満のＫiを有する。血小板凝集の阻害ナイーブな雑種成犬より血液を収集した（凝固作用を抑制するのにシトレート処理に付した）。血小板に富む血漿、ＰＲＰを、１５０×ｇで１０分間、室温で遠心分離に付すことにより調製した。洗浄した血小板をＰＲＰを８００×ｇで１０分間遠心分離に付して調製した。こうして得られた細胞ペレットを、Ｃa⁺⁺不含のＴyrode緩衝液（pＨ６.５）にて２回洗浄し、３×１０⁵細胞／ｍＬの濃度で、１.８ｍＭＣa⁺⁺含有のＴyrode緩衝液(pＨ７.４) に再び懸濁させた。すべての血小板凝集の検定において、アゴニストの３分前にペプチドを加えた。最終アゴニスト濃度は０.１単位／ｍｌトロンビンおよび２ｍＭＡＤＰ（シグマ社）であった。凝集をＣhrono−Ｌog Ｌumi−Ａggregometerにてモニターした。アゴニストを添加した５分後の光透過率を用い、式：％凝集＝［（９０−ＣＲ）÷（９０−１０）］×１００［式中、ＣＲはチャートの読み、９０はベースライン、１０はＰＲＰのブランクの読みを意味する］に従って凝集％を算定した。ＩＣ₅₀を［凝集の％阻害］対［ペプチドの濃度］をプロットすることにより測定した。ペプチドを２００ｍＭで検定し、逐次、２つのファクターで希釈し、適当な用量応答曲線を確立した。本発明の化合物は、ＡＤＰで刺激されたヒト血小板の凝集を約０.０２〜約２. ０μＭのＩＣ₅₀で阻害する。好ましい化合物はＩＣ₅₀が１μＭ未満である。最も好ましい化合物はＩＣ₅₀が０.１μＭ未満である。化合物の血漿中プロテアーゼに対する安定性を評価するために、アゴニストの添加前に化合物をＰＲＰ中で３時間（３分ではなく）培養する。血小板凝集のin vivo阻害血栓形成のin vivo阻害を、Ａikenら、Ｐrostaglandins，１９，６２９（１９８０）に記載の方法にしたがって、麻酔したイヌにペプチドを注入し、全身性および血液力学的効果を記録することにより測定する。ビトロネクチン結合の阻害 αvβ₃に対する固相［³Ｈ］−ＳＫ＆Ｆ−１０７２６０結合：緩衝液Ｔ（２ｍＭＣaＣl₂および１％オクチルグルコシド）中のヒト胎盤またはヒト血小板αvβ₃（０.１−０.３ｍｇ／ｍｌ）を、１ｍＭＣaＣl₂、１ｍＭＭ nＣl₂、１ｍＭＭgＣl₂（緩衝液Ａ）および０.０５％ＮaＮ₃を含有する緩衝液Ｔで希釈し、ついで直ちに９６−ウェルノＥＬＩＳＡプレート（ＮＹ、ニューヨーク、Ｃorning）に１ウェルに付き０.１ｍｌを加えた。各ウェルに０.１−０.２ μｇのαvβ₃を加えた。プレートを４℃で一夜インキュベートした。実験の時点で、該ウェルを緩衝液Ａで一度洗浄し、０.１ｍｌの３.５％同緩衝液中ウシ血清アルビミンと一緒に室温で１時間インキュベートした。インキュベートした後、該ウェルを十分に吸引し、０.２ｍｌの緩衝液Ａで２回洗浄した。化合物を１００％ＤＭＳＯに溶かして２ｍＭのストック溶液を得、それを結合緩衝液（１５ｍＭトリス−ＨＣl（pＨ７.４）、１００ｍＭＮaＣl、１ｍＭＣ aＣl₂、１ｍＭＭnＣl₂、１ｍＭＭgＣl₂）で１００μＭの最終化合物濃度まで希釈した。種々の濃度の非標識化アンタゴニスト（０．００１−１００μＭ）を三重反復にてウェルに加え、つづいて５.０ｎＭの［³Ｈ］−ＳＫ＆Ｆ−１０７２６０（６５−８６Ｃi／ミリモル）を加えた。プレートを室温で１時間インキュベートした。インキュベートした後、ウェルを十分に吸引し、ウェル−ツー−ウェルの方法で、０.２ｍｌの氷冷緩衝液Ａで一度洗浄した。０.１ｍｌの１％ＳＤＳを用いてレセプターを可溶化させ、結合した［³Ｈ］−ＳＫ＆Ｆ−１０７２６０を、４０％効率の、ベックマン・ＫＳ・リッキド・シンチレーション・カウンターにて３ｍｌのＲeady Ｓafeを添加して液体シンチレーション計数操作で測定した。［³Ｈ］−ＳＫ＆Ｆ−１０７２６０の非特異的結合を２μＭのＳＫ＆Ｆ−１０７２６０の存在下で測定し、それは一貫して投入した放射性リガンド全体の１％未満であった。ＩＣ₅₀（［³Ｈ］−ＳＫ＆Ｆ−１０７２６０の結合を５０％阻害するアンタゴニストの濃度）を、ＬＵＮＤＯＮ−２プログラムを修飾した、非線状最小二乗曲線適合慣用的操作により測定した。式：Ｋi＝ＩＣ₅₀／（１＋Ｌ／Ｋd）（ＬおよびＫdは、各々、［³Ｈ］ −ＳＫ＆Ｆ−１０７２６０の濃度および解離定数である）に従って、Ｋi（アンタゴニストの解離定数）を算定した。本発明の化合物は、約１５ないし１００μＭ以上の濃度でビトロネクチンのＳＫ＆Ｆ−１０７２６０への結合を阻害する。好ましい化合物は、５０μＭ以下の濃度でビトロネクチン結合を阻害する。本発明の化合物をまた、ＥＰ５２８５８７に開示されているピット形成検定のような、骨形成の阻害を評価するための当該分野での標準的検定にて、in vitro およびin vivoにおける骨吸収について試験し、それをまたラット破骨細胞の代わりにヒト破骨細胞を、およびＷronskiらにより、Ｃells and Ｍaterials １９９１、Ｓup.１、６９−７４において記載されている卵巣切除したラットモデルを用いて行ってもよい。以下の実施例は、本発明の範囲を何ら制限するものではなく、本発明の化合物の調製法および使用を説明するものである。別の多くの具体例も、当業者には自明であり容易に利用可能である。実施例実施例において、温度はすべて摂氏である。質量スペクトルは電子スプレー（ＥＳ）イオン化法を用いて行った。融点はＴhomas-Ｈooverキャピラリー融点測定装置を用いて測定し、何ら修正していない。セライトは、酸洗浄した珪藻土の濾過助剤であり、コロラド州、デンバー、Ｍ ansville-Ｃorp.の登録商標である。薄層クロマトグラフィーには、アナルテクシリカゲルＧＦおよびＥＭシリカゲル薄層プレートを用いた。フラッシュおよび重力クロマトグラフィーは共にＭerch６０（２３０−４００メッシュ）シリカゲルで実施した。ＯＤＳはオクタデシルシリル誘導のシリカゲルクロマトグラフィー支持体をいう。 (±)−７−カルボキシ−４−メチル−３−オキソ−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸メチルおよび(±)−８−カルボキシ−３−オキソ−４−(２−フェニルエチル)−２,３,４,５−テトラヒドロ− １Ｈ−１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸メチルを、Ｂondinellら、ＷＯ９３／０００９５の方法により調製した。以下の方法は本発明の化合物を調製するためのある種の有用な中間体の製法を説明するものである。実施例１ ( ±)−７−[[ビス[２−(４−ピリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−４−メチル−３−オキソ−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４−ベンゾジアゼピン −２−酢酸の調製ａ）ビス[２−(４−ピリジル)エチル]アミン４−ビニルピリジン（１０.０ｇ、９５.１ミリモル）および塩化アンモニウム（５.１ｇ、９５.１ミリモル）のＭeＯＨ（９０ｍｌ）中混合物を、アルゴン下、２７℃で加熱還流した。得られた混合物を濾過し、濾液をロータリーエバポレーターで濃縮した。残渣をＨ₂Ｏ（２００ｍｌ）に溶かし、その溶液を２ＮＮaＯＨを用いてpＨ１０.５の塩基性にした。ＣＨ₂Ｃl₂抽出（３ｘ１００ｍｌ）、乾燥（ＭgＳＯ₄）および濃縮に付して黄色油（５.７３ｇ、４９％粗製物）を得た。この油のうち２.９ｇをシリカゲル上のクロマトグラフィー（１２％ＭeＯＨ／ＣＨ₂Ｃl₂）に付し、黄色油として標記化合物（１.８１ｇ、１６％）を得た。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ２２８(Ｍ＋Ｈ)⁺。ｂ）(±)−７−[[ビス[２−(４−ピリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−４− メチル−３−オキソ−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸メチルジイソプロピルエチルアミン（０.３５ｇ、２.７ミリモル）を、０℃でアルゴン下、ビス[２−(４−ピリジル)エチル]アミン（０.３７ｇ、１.６５ミリモル）、(±)−７−カルボキシ−４−メチル−３−オキソ−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸メチル（０.４４ｇ、１.５０ミリモル）、ＥＤＣ（０.３４ｇ、１.８ミリモル）およびＨＯＢＴ・Ｈ₂Ｏ（０.２４ｇ、１.８ミリモル）のＤＭＦ（８ｍｌ）中撹拌混合物に一度に添加し、反応物を室温に加温した。１９.５時間経過した後、反応物を氷水（１００ｇ）および５％ＮaＨＣＯ₃（１０ｍｌ）の混合物中に注ぎ、ＣＨ₂Ｃl₂（２ｘ１００ｍｌ）で抽出した。合した有機層を５％ＮaＨＣＯ₃（５０ｍｌ）で洗浄し、乾燥（Ｍg ＳＯ₄）し、濃縮した。シリカゲル上のクロマトグラフィー（７％ＭeＯＨ／ＣＨ₂ Ｃl₂）に付し、標記化合物（０.７ｇ、８８％）を得た。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ５０２.４（Ｍ＋Ｈ）⁺。ｃ）(±)−７−[[ビス[２−(４−ピリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−４− メチル−３−オキソ−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸１.０ＮＬiＯＨ（０.６６ｍｌ、０.６６ミリモル）を、(±)−７−[[ビス[２ −(４−ピリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−４−メチル−３−オキソ−２, ３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸メチル（０.１６ｇ、０.３ミリモル）のＴＨＦ（７ｍｌ）およびＨ₂Ｏ（１０ｍｌ）中混合物に室温で滴下した。２２.５時間経過した後、反応混合物をロータリーエバポレーターで濃縮した。得られた残渣を１.０ＮＡcＯＨ（１.５ｍｌ）で中和し、冷凍装置にて保持し、結晶生成物（０.１１４ｇ、７３％）を得た。ＯＤＳ結合溶出クロマトグラフィー（ＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏ）により精製し、標記化合物を得た。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ４８８.２（Ｍ＋Ｈ）⁺。実施例２ ( ±)−７−[[ビス[２−(４−ピペリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−４−メチル−３−オキソ−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸の調製ａ）(±)−７−[[ビス[２−(４−ピペリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−４ −メチル−３−オキソ−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸メチル (±)−７−[[ビス[２−(４−ピリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−４−メチル−３−オキソ−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸メチル（０.３５ｇ、０.６５ミリモル）、ＰtＯ₂（０.１１ｇ、０. ４８ミリモル）、１.０ＮＨＣl（１.３ｍｌ、１.３ミリモル）およびＭeＯＨ（３０ｍｌ）の混合物を、Ｐarr装置中、４５ｐｓｉで水素添加した。５時間経過した後、反応混合物をセライトを介して濾過し、濃縮して粗標記化合物（０.６ｇ）を得、それをさらに精製することなく用いた。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ５１４. ４（Ｍ＋Ｈ）⁺。ｂ）(±)−７−[[ビス[２−(４−ピペリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−４ −メチル−３−オキソ−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸 (±)−７−[[ビス[２−(４−ピリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−４−メチル−３−オキソ−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸メチルの代わりに、(±)−７−[[ビス[２−(４−ピペリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−４−メチル−３−オキソ−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸メチル（０.３２ｇ、０.５１ミリモル）を用いる以外、実施例１（ｃ）の操作に従って、標記化合物（０.４１ｇ）を調製した。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ５００.５(Ｍ＋Ｈ)⁺。実施例３ ( ±)−８−[[ビス[２−(４−ピリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−３−オキソ−４−(２−フェニルエチル)−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸の調製ａ）(±)−８−[[ビス[２−(４−ピリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−３− オキソ−４−(２−フェニルエチル)−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４ −ベンゾジアゼピン−２−酢酸メチル (±)−７−カルボキシ−４−メチル−３−オキソ−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸メチルの代わりに、(±)−８− カルボキシ−３−オキソ−４−(２−フェニルエチル)−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸メチル（０.５７ｇ、１.５ミリモル）を用いる以外、実施例１（ｂ）の操作に従って、標記化合物（０.８３ｇ、９３％）を得た。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ５９２.４（Ｍ＋Ｈ）⁺。ｂ）(±)−８−[[ビス[２−(４−ピリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−３− オキソ−４−(２−フェニルエチル)−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４ −ベンゾジアゼピン−２−酢酸 (±)−７−[[ビス[２−(４−ピリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−４−メチル−３−オキソ−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４−ベンゾジアゼビン−２−酢酸メチルの代わりに、(±)−８−[[ビス[２−(４−ピリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−３−オキソ−４−(２−フェニルエチル)−２,３,４,５ −テトラヒドロ−１Ｈ−１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸メチル（０.１５ｇ、０.２５ミリモル）を用いる以外、実施例１（ｃ）の操作に従って、標記化合物（０.２１ｇ）を調製した。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ５７８.２（Ｍ＋Ｈ）⁺。実施例４ ( ±)−８−[[ビス[２−(４−ピペリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−４−( ２−シクロヘキシルエチル)−３−オキソ−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ− １,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸の調製ａ）(±)−８−[[ビス[２−(４−ピペリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−４ −(２−シクロヘキシルエチル)−３−オキソ−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸メチル (±)−７−[[ビス[２−(４−ピリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−４−メチル−３−オキソ−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸メチルの代わりに、(±)−８−[[ビス[２−(４−ピリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−３−オキソ−４−(２−フェニルエチル)−２,３,４,５ −テトラヒドロ−１Ｈ−１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸メチル（０.５３ｇ、０.９０ミリモル）を用いる以外、実施例２（ａ）の操作に従って、標記化合物（０.６３ｇ）を調製した。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ３０５.６（Ｍ＋２Ｈ）²⁺。ｂ）(±)−８−[[ビス[２−(４−ピペリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−４ −(２−シクロヘキシルエチル)−３−オキソ−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸 (±)−７−[[ビス[２−(４−ピリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−４−メチル−３−オキソ−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸メチルの代わりに、(±)−８−[[ビス[２−(４−ピペリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−４−(２−シクロヘキシルエチル)−３−オキソ−２, ３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸メチル（０.２６ｇ、０.３８ミリモル）を用いる以外、実施例１（ｃ）の操作に従って、標記化合物を調製した。ＯＤＳクロマトグラフィー（段階的勾配、５−２２％ＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏ（０.１％ＴＦＡ含有））に付し、標記化合物（０.２５ｇ）を得た。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ５９６.４（Ｍ＋Ｈ）⁺。実施例５非経口投与単位組成物滅菌乾燥粉末として実施例１の化合物２０ｍｇを配合する調製物を以下のように調製する：２０ｍｇの化合物を１５ｍｌの蒸留水に溶かす。この溶液を滅菌条件下で２５ｍｌの複数回投与用アンプル中に濾過し、凍結乾燥する。静脈内または筋肉内注射用の２０ｍｌの５％水中デキストロース（Ｄ５Ｗ）を加えることにより、粉末を復元する。投与量を注射容量により決定する。その後、計量した容量のこの投与量を単位を別の容量の注射用Ｄ５Ｗに添加することにより希釈を行ってもよく、または計量した容量をＩＶ点滴注入または他の注射−注入系用の瓶もしくは袋にあるような薬剤分散機構に加えてもよい。実施例６経口投与単位組成物経口投与用カプセルを、実施例１の化合物５０ｍｇをラクトース７５ｍｇおよびステアリン酸マグネシウム５ｍｇと混合し、粉砕することにより調製する。得られた粉末をスクリーンに付し、硬ゼラチンカプセルに充填する。実施例７経口投与単位組成物経口投与用錠剤を、シュークロース２０ｍｇ、硫酸カルシウム・二水和物１５０ｍｇおよび実施例１の化合物５０ｍｇを１０％ゼラチン溶液と一緒に混合し、顆粒化することにより調製する。該湿式顆粒をスクリーンに付し、乾燥し、澱粉１０ｍｇ、タルク５ｍｇおよびステアリン酸３ｍｇと混合し、打錠する。以上は、本発明の調製法および使用法を例示するものである。しかし、本発明は、本願明細書に記載した具体例に限定されるものではなく、次に示す特許請求の範囲内にある修飾をずべて包含するものである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者クウォン，チェットアメリカ合衆国19406ペンシルベニア州キング・オブ・プルシア、サウス・ヘンダーソン・ロード 649番アパートメント・ディ503 (72)発明者ミラー，ウィリアム・ヘンリーアメリカ合衆国19473ペンシルベニア州シュウェンクスビル、フェル・レイン333 番

Claims

【特許請求の範囲】１．式：［式中、ＡはＮＲ'、ＣＨＲ'、ＯまたはＳであり；Ｘ¹およびＸ²はＣ＝ＯまたはＣＨ₂である。ただし、Ｘ¹またはＸ²のうち一方だけがＣ＝Ｏであり；Ｒ¹はＨ、Ｃ_1-6アルキルまたは(ＣＨＲ')_mＹであり；Ｒ²は−(ＣＨ₂)_tＣＯ₂Ｒ³であり；Ｒ³はＨ、Ｃ_1-6アルキルまたは(ＣＨＲ')_mＡｒであり；であり；ＹはＨ、Ａr、Ｃ_3-7シクロアルキル、ＣＯ₂Ｒ³またはＴetであり；Ｒ'はＨ、Ｃ_1-6アルキルまたは(ＣＨ₂)_mＡrであり；Ａrは、置換されていないか、または１ないし３個のＣ_1-6アルキル、トリフルオロメチル、ハロゲン、ＯＲ'、ＳＲ'、ＣＯＮＲ'Ｒ¹、ＣＯ₂Ｒ¹、ＮＯ₂またはＲ⁵Ｒ¹Ｎで置換されているフェニルまたはナフチルであり；Ｒ⁵はＨ、Ｃ_1-6アルキル、(ＣＨＲ')_mＹまたはＣＯ(ＣＨＲ')_mＹであり；ン、ピラゾール、ピラゾリン、ピラゾリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、ピリジン、ピリジニウム、テトラヒドロピリジン、テトラヒドロアゼピンまたはヘキサヒドロアゼピンであり、ｍは０ないし６であり；ｓは１ないし４であって；ｔは１または２を意味する］で示される化合物またはその医薬上許容される塩。２．Ｘ¹がＣＨ₂であり、Ｘ²がＣ＝Ｏである請求項１記載の化合物。３．ＡがＮＲ'である請求項２記載の化合物。４．Ｒ¹がＣ_1-4アルキルまたは(ＣＨＲ')_mＹであり、ここにＲ'がＨまたはＣ₁ _-4 アルキルであり、ｍが１ないし３であり、ＹがＡrまたはＣ_3-7シクロアルキルである請求項３記載の化合物。がピペリジン、ピペラジン、ピリジン、ピリジニウムまたはテトラヒドロピリジンであり、ｓが１ないし３である請求項４記載の化合物。７． (±)−７−[[ビス[２−(４−ピリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−４−メチル−３−オキソ−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸、または (±)−８−[[ビス[２−(４−ピリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−３−オキソ−４−(２−フェニルエチル)−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４− ベンゾジアゼピン−２−酢酸である請求項６記載の化合物。９． (±)−７−[[ビス[２−(４−ピペリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−４− メチル−３−オキソ−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ−１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸、または (±)−８−[[ビス[２−(４−ピペリジニル)エチル]アミノ]カルボニル]−４− (２−シクロヘキシルエチル)−３−オキソ−２,３,４,５−テトラヒドロ−１Ｈ −１,４−ベンゾジアゼピン−２−酢酸である請求項８記載の化合物。 10．請求項１に記載の化合物および医薬上許容される担体を含有してなる医薬組成物。 11．請求項１に記載の化合物を投与してなる血小板凝集の阻害方法。 12．請求項１に記載の化合物を投与してなる卒中または一過性脳虚血発作または心筋梗塞の治療法。 13．フィブリン溶解剤およびおよび請求項１に記載の化合物を投与してなる動脈または静脈の再潅流を促進し、再閉塞を阻害する方法。