JPH10512457A

JPH10512457A - 腸ラクターゼの評価を意図した組成物および溶液の製造におけるβ−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロースの使用および製造法

Info

Publication number: JPH10512457A
Application number: JP9517877A
Authority: JP
Inventors: アラゴン・レイエス，フアン・ホセ; カナダ・ビシナイ，フランシスコ・ハビエル; フェルナンデス−マジョララス・アルバレス，アルフォンソ; ロペス・アルバレス，ロサ; マルティン・ロマス，マヌエル; ビジャヌエバ・トレグロサ，ダニエル
Original assignee: コンセホ・スペリオール・インベスティガシオネス・シエンティフィカス; ウニベルシダッド・アウトノマ
Priority date: 1995-11-08
Filing date: 1996-11-08
Publication date: 1998-12-02
Anticipated expiration: 2016-11-08
Also published as: ES2100131A1; NZ321607A; EA199700097A1; HUP9801439A2; PT819764E; AU702329B2; CA2209927A1; DE69619973T2; JP2000106898A; CZ252797A3; EP0819764A1; US5994092A; CA2209927C; CN1177984A; ES2176505T3; CN1220779C; NO973159D0; ES2100131B1; PL321257A1; WO1997017464A1

Abstract

(57)【要約】Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロース、特に、２−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロースおよび３−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロースの腸ラクターゼの評価を意図した組成物および溶液の製造のためのβ−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロースの使用が記載されている。また、Ｄ−キシロースの濃度がβ−Ｄ−ガラクトピラノシドより２−２０倍高く、ｐＨ５.０−９.０に緩衝化した水性媒体中で、４−３７℃の間の温度で、Ｄ−キシロースおよびβ−Ｄ−ガラクトピラノシド基質をβ−ガラクトシダーゼ酵素の存在下で反応させる；薄層クロマトグラフィーを基本にしてジサッカライドの最大の形成に到達した時、１００℃に加熱してβ−ガラクトシダーゼを不活性化する形成ジサッカライドを、水または水とアルコールの混合物から選択した溶剤により充填カラムで濾過して単離する；工程を含む、Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロースの製造法も記載されている。

Description

【発明の詳細な説明】腸ラクターゼの評価を意図した組成物および溶液の製造における β−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロースの使用および製造法発明の技術的範囲ラクースの不十分な消化または消化能力を失う原因である、腸ラクターゼの欠失または低活性は、ヒト成人で一般的な症候群であるが、先天的代謝疾患と見なされることは希である。哺乳類の大部分において、ラクターゼ活性の急激な減少は、離乳時から起こる。長期間の乳またはラクターゼ含有物の実質的消費に依存している先祖を有するヒトにおいて、この減少はあまり頻繁ではない。一方、腸ラクターゼの欠失または低活性は、授乳されている乳児においてかなり頻繁である。発明の背景腸ラクトース活性の測定は、小児科および胃腸科において重要であり、直接的に粘膜サンプルから、または間接的に、個体に一定量投与した後の血液のグルコースレベルからまたは呼気水素から行い得る。直接測定は、不快であり、個体への危険があることを別にして、特別な装置および続く分析に提供すべきサンプルの摘出技術についての特別の人材が必要であるため、複雑で高価な方法から成るという欠点がある。間接的測定は、個体が接種した他の食物の消化に由来するグルコースおよび移動する内因性グルコースの存在により複雑で、間違いの疑いがある血液を分析する前に、特別の人材による採血を必要とする血液を含むという利点を有する。腸ラクターゼを測定する他の方法は、ラクターゼへの親和性に基づいてある特定ジサッカライドが、ラクターゼの基質として働くことが可能で、酵素の作用により、特異的モノサッカライドに変換し、それが腸で容易に吸収され、尿中に排出されるという事実に基づく。従って、スペイン特許ＥＳ−Ｐ−４７８５９０およびＥＳ−Ｐ−４８２０７３は、３−Ｏ−メチル−Ｄ−メチルラクラーゼの経口投与および尿中の３−Ｏ−メチル−Ｄ−グルコースの測定の手段による“インビボ”評価に基づく。しかしながら、本方法は、尿中の３−Ｏ−メチル−Ｄ−グルコースの分析にクロマトグラフィー方法の使用を必要とし、これは複雑で高価な設備および分析装置を伴う。一方、スペイン特許ＥＳ−Ｐ−９００１６８０は、腸ラクターゼ活性の評価のための式(Ｉ) で示される４−Ｏ−β−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロースの製造を記載している。該ジサッカライドを経口で投与し、それは腸ラクターゼの基質として働き、腸管でキシロースとガラクトースに分解され、キシロースの吸収および尿中への排出は、単純色素測定法で直接評価し得る。スペイン特許ＥＳ−Ｐ−９００１６８０のジサッカライドは、ラクターゼと非常に類似の構造を有する変わりに、ラクトースへの増加された親和性を示すという欠点がある。これは、消化４−Ｏ −β−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロースの一部分のみが、ラクターゼの酵素活性により分解され、従って、キシロースおよびガラクトースの非分解部分が糞便として排泄されることを含む。これは、分析尿中のキシロースの低いまたは全く存在さえしないこともあるという比較的重大な誤差範囲を伴い、そのラクターゼへの親和性の欠如のために、ラクターゼ活性の欠失または全くないことおよびジサッカライドの加水分解の欠失の両方に由来し得る。該誤差範囲を除くために、個体がかなりの量のジサッカライドを消化することが必要であり、それは、次に個体に下痢のような腸の問題および対応する不快感を引き起こし得る。スペイン特許ＥＳ−Ｐ−９００１６８０はまた４−Ｏ−β−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロースの合成法を記載し、それは基本的にベンジル−β−キシロピラノシドからの合成を含み、続いて、選択的保護反応、糖付加および脱保護を含む連続操作を含む。多くの反応段階、糖付加における銀トリフラートのような高価な反応試薬の使用および中間体および最終生産物の精製におけるクロマトグラフィーカラムの使用が、値段を上げ、産業規模での該方法の実施を困難にする。一方、Ｇorin et al.，“Ｔhe Ｓynthesis of β−Ｇalacto- and β−Ｇluco -Ｐyranosil disaccharides by“Ｓporobolomyces Ｓingularis””，Ｃan．Ｊ．Ｃhem.，42(1964)2307-2319は、多くのジサッカライドの合成を記載し、その中で、２−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロースおよび３−Ｏ−β −Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロースが純粋に実験的方法の手段で記載されている。この刊行物において、結論は、生産物は、主に、一次ヒドロキシル基よりもむしろ二次ヒドロキシル基の置換に由来する、種々の受容体を使用したガラクトシルの転移に由来し、受容体との反応に必要な最小構造は、置換ヒドロキシル基に隣接したヒドロキシル基であるように思えるということに到達する。しかしながら、この刊行物において、別の合成ジサッカライドの使用は記載されていない。発明の記載先に記載の技術の欠点を解決するために、本発明の目的は、血を使用せず、信頼できる腸ラクターゼの評価に使用するための組成物および溶液の製造における、β−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロース、特に、一般式(II) の２−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロースおよび一般式(III) の３−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロースの使用である。一方、本発明の他の目的は、このタイプのジサッカライドの既知の方法と比べて単純な方法での、その使用法を本明細書で請求しているβ−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロースおよび他のβ−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロースの製造を可能にする方法である。その使用法を請求しているβ−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロース、すなわち、２−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロースおよび３−Ｏ− β−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロースは、このタイプの評価において慣用的に使用されるジサッカライトと比べて、実質的に増加したラクターゼへの親和性を示し、両方の化合物が、４−Ｏ−β−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロースのような以前に使用されていた化合物より構造的にラクターゼに似ておらず、分子内で配糖体的結合にそれぞれ隣接したヒドロキシル基を有することにより構造的に異なっているという観点から非常に驚くべきことである。式(II)および(III)のジサッカライドは、別々にまたは組み合わせて、または式(Ｉ)の慣用のジサッカライドの一定量および／または低用量のラクトースと組み合わせてさえ、それ自体既知の組成物および溶液に含まれ得る。このような組成物および溶液は、それ自体慣用のその成分の薬学的に許容される量で、安定化剤、保護剤、調味料、ラクトース、ゲル化剤、溶剤および防腐剤からなる群から選択される、少なくとも一つの添加剤を含み得る。３つのジサッカライド(Ｉ)、(II)および(III)の混合物を使用する場合でさえ、排泄尿に存在するキシロースによる腸ラクターゼ活性の評価は、ジサッカライド(Ｉ)のみを投与した場合に可能性のある評価と比較して実質的に改善されており、本発明により付与される驚くべき効果を明らかに証明する。本発明の方法は、β−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄキシロースの製造の可能性を含み、これは、先に示したジサッカライドＩ、IIおよびIIIを含み、以下の段階を含む：以下の反応の図説に従って、Ｄ−キシロースおよびβ−Ｄ−ガラクトピラノシド基質をβ−ガラクトシダーゼ酵素の存在下で反応させるここで、Ｄ−キシロースの濃度は、β−Ｄ−ガラクトピラノシドより２−２０倍高く、ｐＨ５.０−９.０に緩衝化した水性媒体中で、４−３７℃の間の温度で行う；薄層クロマトグラフィーまたは活性炭素カラムでジサッカライドの最大の形成に到達した時(通常、４−８時間後)、１００℃に加熱してβ−ガラクトシダーゼを不活性化し、形成ジサッカライドを、水または水／アルコールで選択した溶剤により充填カラムで濾過して単離し、このようにしてジサッカライド(Ｉ)、(I I)および(III)の混合物を得、これらは３つのジサッカライドの混合物としてまたはジサッカライド(II)または(III)の一つを単離した後のジサッカライド(Ｉ) との混合物として、または個々に組成物または溶液に含まれ得る。本方法に態様において、使用するβ−Ｄ−ガラクトピラノシドはＯ−ニトロフェニル β−Ｄ−ガラクトピラノシドであり、他の態様において、それはラクトースである。一方、β−ガラクトシダーゼは、例えば、スペインの会社、SIGMA-ALDRICH QU 方法は、アセトニトリル、ジメチルホルムアミドまたはジメチルスルフォキシドのような水と混合し得る共溶媒の存在下で行い得る。ジサッカライドの単離に使用する濾過カラムは、活性炭素と共に充填されたＳ ephadex(登録商標)Ｇ−１０またはＢiogel(登録商標)Ｐ２であり得る。ジサッカライドIIおよびIIIはまた、例えば、Ｇorin et al.,“Ｔhe Ｓynthes is of β−Ｇaracto Ａnd β−Ｇluco−Ｐyranosyl disaccharides by Ｓporobo lomyces Ｓigilaris”，Ｃan．Ｊ．Ｃhem.，42(1964)2307-2319に記載のような他の慣用法により得られ得る。図面の簡単な説明唯一の図面は、ａ）β−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロース(Ｉ)、(II) および(III)のインビボ加水分解の、尿中に排出されたキシロースの割合としてのβ−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロース(Ｉ)、(II)および(III)のインビボ加水分解およびｂ）実施例に示すように、ラット成育中の腸ラクターゼ活性 (nm／分／タンパク質mg)の評価を図示する。発明の態様以下の実施例は、本発明の関連する態様を、非限定的に、図説する。実施例１：４−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロース(ジサッカライドＩ)、２−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロース(ジサッカライドII)および３−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロース(ジサッカライドIII)の混合物の製造緩衝液(０.０５ＭＫＨ₂ＰＯ₄、１mＭＭｇＣｌ₂、５mＭメルカプトエタノール、２６５mＬ、ｐＨ７.０)中のｏ−ニトロフェニル β−ガラクトピラノシド(４ｇ、５０mＭ)およびキシロース(２０ｇ、５００nＭ)の溶液に、に、SIGMA のＥ．coliのβ−ガラクトシダーゼ(１.５mg、５６０Ｕ)を添加し、混合物を２５℃で５時間４５分の間インキュベートした。この時間の後、混合物を、１０分、１００℃で加熱し、濃縮して得られた残渣を、活性炭素のカラムに入れ、水− エタノール１：０−−−→８５：１５の勾配を使用した。最初に、モノサッカライドキシロースおよびガラクトースが、次いでジサッカライドＩ、IIおよびIII の混合物が溶出し、ジサッカライドの混合物２ｇ(最初のｏ−ニトロフェニル β−ガラクトピラノシドの等量に関して５０％)が、Ｉ：II：IIIの比８.６：１. ４：１.０で得られる。ジサッカライドＩ、IIおよびIIIが含む異なる機能のうち、幾つかを分離し、それぞれ１種ずつ純粋であり、それらをＮＭＲにより特徴付けるのに使用する。ジサッカライドＩのフラクションのＶarian XL-300スペクトロメーターで測定したＨ¹−ＮＭＲスペクトル(３００ＭＨｚ、Ｄ₂Ｏ)は、以前に製造された生産物のものと同一であった。ジサッカライドIIおよびIII中で形成されている結合のレジオケミストリー(re gio-chemistry)の明白な特徴付けおよび測定の目的のために、該化合物に富むフラクションを、半分取ＨＰＬＣ(通常層カラムＳｉＯ₂、ヘキサン−酢酸エチル１：１、屈折率)にりょり単離した。続いて、得られた誘導体のそれぞれ一つづつのＨ¹−ＮＭＲスペクトル(３００ＭＨＺ、ＣＤＬ₃)を記録した： − ２−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−ｏ−Ｄ−キシロピラノースのアセチル化誘導体。 − ２−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−β−Ｄ−キシロピラノースのアセチル化誘導体。 − ３−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−ｏ−Ｄ−キシロピラノースのアセチル化誘導体。 − ３−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−β−Ｄ−キシロピラノースのアセチル化誘導体。クロマトグラフィーカラムで得たジデサッカライドＩ、IIおよびIIIの比率を、フレームイオン化検出器および毛細カラムＳＥ−５４を備えたクロマトグラフィーで、ガスクロマトグラフィーにより測定した(固定相：５％ジフェニルおよび９５％ジメチルポリシロキサン、長さ１５m、内部直径０.１５mmおよび厚さμ m)。分析において、１mＬ／分の窒素流を使用した。使用した温度設定は：最初の温度１６０℃；最初の時間２分；温度を５℃／分で上昇；最終温度：２５０℃ であった。サンプルを、以下のプロトコール：アリコート(１０μl)を１００℃ で１０分加熱し、その後、内部対照β−キシロピラノシド(１０mＭ)およびＮ− トリメチルシリルイミダゾル(２５μＬ)を含むピリジン(２５μＬ)を添加し、加熱を３０分続けることによるトリエメチルシリル化の後分析した。異なるジサッカライドを同定するピークの保持時間は、下記の通りである： − β−キシロピラノシドベンジル(内部対照)：１２.０４分 − ジサッカライドＩ：２０.３５および２０.５０分 − ジサッカライドII：１８.４６および１９.５０分 − ジサッカライドIII:１８.３０分実施例２：インビトロ加水分解の動態試験ジサッカライドＩ、IIおよびIIIならびにラクトースを、Ａ．Ｒivera-Ｓagred mas.，Ｅur．Ｊ．Ｂiochem.，209(1992)415-422の方法に従って、ヒツジ腸ラクターゼで、ｐＨ６.０で行い、ミカエル定数(Ｋ_m)および最大速度(Ｖ_max)について以下の結果を得た：ジサッカライドIIおよびIIIのミカエル定数が、ジサッカライドＩのより低く、ジサッカライドIIIのＫ_mはラクトースのより更に低いことが見られ、これはジサッカライドIIおよびIIIのラクターゼへの非常な親和性の証拠となる。実施例３：ジサッカライドＩ、IIおよびIIIの混合物の経口投与後の尿中へのキシロースの排泄実施例１の方法で製造したジサッカライドＩ、IIおよびIII(比率、８.６：４. ４：１.０)の混合物を使用し、腸ラクターゼの活性を評価した。このために、同じ飼育箱の１７匹の１２日令のＳpraque-Ｄawley授乳ラットを、６時間絶食させ、母親と離した。この時間後、各動物の基底尿を膀胱を腹から押して採集し、すぐに蒸留水０.３mＬ中の希釈ジサッカライド混合物１８.２mgをそれぞれに胃内針を使用して投与した。このときから、尿を５時間採集し、その中のキシロース排泄を、経口反応に基づいた色素分析により測定し、基底尿を標的として使用した。尿の採集直後、腸粘膜のラクターゼ活性を直接測定する３匹のラットを殺した。このために、小腸の一部を乾燥させ、洗浄し、粘膜をガラスにスクラップし、均質化し、均質生産物のラクターゼ活性を分光光度的に測定した。残った動物を母親に返し、実験を１５、１８、２１、２４および３０日後に同じ条件下で繰り返し、飼育箱を空にした。該実験で得られた平均値を図に示し、それは、ラットの成育中のジサッカライドＩ、IIおよびIII混合物のインビボでの加水分解および腸ラクターゼ活性を示す。これを達成するために、年令(日)に対する排泄キシロース(％)[曲線ａ）]およびラクターゼ活性(nm／分／タンパク質mg)[曲線ｂ）]を示す。この実験の結果は：１）投与されたジサッカライドの、腸ラクターゼの作用による加水分解に由来する尿中キシロースの存在が、検出されること；および２）経口投与に由来する尿中のキシロースの一連の排泄が個体の発育に従い減少する腸ラクターゼ活性の既知の生理学的変化と平衡に動くことを示す。該実験は、本方法が、腸ラクターゼ活性の“インビボ”評価に有用であり、本方法は、血液を用いない方法で、診断目的の、該活性の評価に使用され、特に該酵素の欠失が疑われる授乳個体への適用性を有する。実施例４：同じ飼育箱由来であり、１５日令のＳprague-Ｄawleyラットを、代謝箱で３０℃で４時間絶食させた。このそれぞれに、蒸留水０.５ml中のジサッカライドＩ１８.２ｇを投与した。尿を動物から、膀胱を腹から押すことにより５時間採集した。この時間に尿中に排泄されたキシロースをスペクトル分析した。キシロースの排泄は、１５日後に２１％であり、すなわち、生産物Ｉ、IIおよび IIIの混合物の結果の半分以下であった。本実施例で得られたデータと実施例３のものを比較して、ジサッカライドIIおよびIIIの“インビボ”親和性は、この３つのサッカライドを、ジサッカライドＩが最も多い混合物で投与した時、ジサッカライドＩの最も低い親和性を補う程高いことが明白である。

【手続補正書】【提出日】１９９７年１１月１１日【補正内容】１）明細書１頁末尾から２行の「３−０−メチル−Ｄ−メチルラクラーゼ」を「３ −０−メチル−ラクトース」と訂正する。２）明細書２頁５行の化学式を下記の通りに訂正する。３）明細書２頁１０−１１行(化学式を１行と数えて)の「ラクターゼと非常に類似の構造を有する変わりに、ラクトースへの」を「ラクトースと非常に類似の構造を有するにもかかわらず、ラクターゼへの」と訂正する。４）明細書３頁１６行の化学式を下記の通りに訂正する。５）明細書４頁９行の「ラクターゼ」を「ラクトース」と訂正する。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者カナダ・ビシナイ，フランシスコ・ハビエルスペイン、エ−28006マドリッド、フアン・デ・ラ・シエルバ３番コンセホ・スペリオール・インベスティガシオネス・シエンティフィカス、インスティトゥト・キミカ・オルガニカ・ヘネラル (72)発明者フェルナンデス−マジョララス・アルバレス，アルフォンソスペイン、エ−28006マドリッド、フアン・デ・ラ・シエルバ３番コンセホ・スペリオール・インベスティガシオネス・シエンティフィカス、インスティトゥト・キミカ・オルガニカ・ヘネラル (72)発明者ロペス・アルバレス，ロサスペイン、エ−28006マドリッド、フアン・デ・ラ・シエルバ３番コンセホ・スペリオール・インベスティガシオネス・シエンティフィカス、インスティトゥト・キミカ・オルガニカ・ヘネラル (72)発明者マルティン・ロマス，マヌエルスペイン、エ−28006マドリッド、フアン・デ・ラ・シエルバ３番コンセホ・スペリオール・インベスティガシオネス・シエンティフィカス、インスティトゥト・キミカ・オルガニカ・ヘネラル (72)発明者ビジャヌエバ・トレグロサ，ダニエルコロンビア84−166バランキージャ、カレラ51番ウニベルシダッド・デ・バランキージャ

Claims

【特許請求の範囲】１．分子内に配糖体的結合にそれぞれ隣接した幾つかのヒドロキシル基が存在するβ−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロースであることを特徴とする、腸ラクターゼの評価を意図した組成物および溶液の製造のためのβ−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロースの使用。２．β−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロースが、２−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロースおよび３−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル− Ｄ−キシロースおよびこれらの混合物であることを特徴とする、請求項１記載の使用。３．組成物が、薬学的に許容される量の、安定化剤、保護剤、調味料、ラクトース、ゲル化剤、溶剤および防腐剤からなる群から選択される、少なくとも一つの添加剤を含むことを特徴とする、請求項１または２記載の方法。４．溶液が水性であることを特徴とする、請求項１または２記載の使用。５．溶液が食塩水であることを特徴とする、請求項４記載の使用。６．溶液が、薬学的に許容される量の、安定化剤、保護剤、調味料、ラクトース、ゲル化剤、溶剤および防腐剤からなる群から選択される、少なくとも一つの添加剤を含むことを特徴とする、請求項１、２、５または５のいずれかに記載の方法。７．(ａ)Ｄ−キシロースの濃度がβ−Ｄ−ガラクトピラノシドより２−２０倍高く、ｐＨ５.０−９.０に緩衝化した水性媒体中で、４−３７℃の間の温度で、Ｄ−キシロースおよびβ−Ｄ−ガラクトピラノシド基質をβ−ガラクトシダーゼ酵素の存在下で反応させる； (ｂ)薄層クロマトグラフィーを基本にしてジサッカライドの最大の形成に到達した時、１００℃に加熱してβ−ガラクトシダーゼを不活性化する (ｃ)、形成ジサッカライドを、水または水とアルコールの混合物から選択した溶剤により充填カラムで濾過して単離する；工程を含むことを特徴とする、分子内の配糖体的結合にそれぞれ隣接した幾つかのヒドロキシル基が存在する、β−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロースを少なくとも一つ含む、β−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロースの製造の酵素的方法。８．β−Ｄ−ガラクトピラノシド基質がＯ−ニトロフェニル β−Ｄ−ガラクトピラノシドであることを特徴とする、請求項７記載の方法。９．β−Ｄ−ガラクトピラノシドがラクトースであることを特徴とする、請求項７記載の方法。１０．β−ガラクトシダーゼがＥ．coliのβ−ガラクトシダーゼであることを特徴とする、請求項７記載の方法。１１．水と混合し得る少なくとも共溶媒の存在下で行うことを特徴とする、請求項７記載の方法。１２．共溶媒が、アセトニトリル、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルフォキシドおよびこれらの混合物からなる群から選択されることを特徴とする、請求項１１記載の方法。１３．充填カラムが、Ｓephadex(登録商標)Ｇ−１０またはＢiogel(登録商標) Ｐ２の一つが充填されていることを特徴とする、請求項７記載の方法。１４．充填カラムが活性炭素と共に充填されていることを特徴とする、請求項７記載の方法。１５．形成ジサッカライドが２−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロース、３−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロースおよび４−Ｏ− β−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロースの混合物であることを特徴とする、請求項７または１０記載の方法。１６．形成されたジサッカライドから、２−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル −Ｄ−キシロース、３−Ｏ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−キシロースの少なくとも一つを単離することを特徴とする、請求項１０記載の方法。