JPH1081673A

JPH1081673A - 複素環誘導体、及びそれを含有する制癌剤

Info

Publication number: JPH1081673A
Application number: JP23660396A
Authority: JP
Inventors: Toshihiro Hatanaka; 敏宏畑中; Koji Osumi; 幸治大角; Riyuusuke Nakagawa; 隆祐中川; Hisashi Tsuji; 尚志辻; Yasuyo Suga; 泰世須賀; Yukio Nihei; 幸夫二瓶
Original assignee: Ajinomoto Co Inc
Current assignee: Ajinomoto Co Inc
Priority date: 1996-09-06
Filing date: 1996-09-06
Publication date: 1998-03-31

Abstract

(57)【要約】（修正有）【課題】毒性が低く治療効果の高い制癌剤を提供す
る。【解決手段】下記一般式（１）で表される複素環誘導
体。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は複素環誘導体、及び
それらの化合物を有効成分とする制癌剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】シススチルベンを基本骨格とするコンブ
レタスタチン類は強い有糸分裂阻害活性を示し、かつ強
い細胞毒性を持つことが知られているが、化合物が水に
難溶性であるなどの理由により、医薬品として実用化さ
れるに至っていなかった。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】本発明は合成が容易で
あり、毒性が低く、治療効果の高いコンブレタスタチン
誘導体を見いだし、それを制癌剤として提供することを
課題とする。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者等は各種のスチ
ルベン誘導体の二つの芳香環をシス配置に固定した化合
物を合成し、制癌活性を持つ化合物を鋭意検索した結
果、下記一般式（１）で表される化合物が動物試験で顕
著な制癌活性を有し、また低毒性であることを見いだ
し、本発明を完成するに至った。これらの化合物は今ま
でに合成されておらず、全く新規な化合物である。

【０００５】

【化２】

【０００６】（式中、Ｈｅｔは複素環を表す。）

【０００７】

【発明の実施の形態】一般式（１）において、複素環
は、例えばテトラゾール環、チアゾール環を挙げること
ができる。

【０００８】一般式（１）における複素環がチアゾール
環の場合、置換基を有してもよく、その置換基としては
低級アルキル基、アミノ基、モノアルキルアミノ基、ジ
アルキルアミノ基、ヒドラジノ基、ハロゲン、低級アル
コキシ基が挙げられる。

【０００９】好ましい化合物を例示すれば次のような化
合物が挙げられる。５−（３−アミノ−４−メトキシフ
ェニル）−２−メチル−４−（３, ４, ５−トリメトキ
シフェニル）チアゾール、２−アミノ−５−（３−アミ
ノ−４−メトキシフェニル）−４−（３, ４, ５−トリ
メトキシフェニル）チアゾール、５−（３−アミノ−４
−メトキシフェニル）−２−アミノメチル−４−（３,
４, ５−トリメトキシフェニル）チアゾール、５−（３
−アミノ−４−メトキシフェニル）−２−ジメチルアミ
ノ−４−（３, ４, ５−トリメトキシフェニル）チアゾ
ール、５−（３−アミノ−４−メトキシフェニル）−２
−ヒドラジノ−４−（３, ４, ５−トリメトキシフェニ
ル）チアゾール、５−（３−アミノ−４−メトキシフェ
ニル）−２−メトキシ−４−（３, ４,５−トリメトキ
シフェニル）チアゾール、５−（３−アミノ−４−メト
キシフェニル）−２−クロロ−４−（３, ４, ５−トリ
メトキシフェニル）チアゾール。

【００１０】５−（３−アミノ−４−メトキシフェニ
ル）−１−（３, ４, ５−トリメトキシフェニル）テト
ラゾール。

【００１１】一般式（１）で表される本発明の化合物
は、例えば、次に示す製造ルートに従って合成すること
ができる。

【００１２】

【化３】

【００１３】（式中、Ｘは低級アルキル基、アミノ基、
モノアルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、ヒドラジ
ノ基、ハロゲン、低級アルコキシ基などの置換基を表
す。）

【００１４】

【化４】

【００１５】本発明の化合物に属する式（５）で表され
る化合物は、例えば、Ｅ−２−（４−メトキシ−３−ニ
トロフェニル）−１−（３, ４, ５−トリメトキシフェ
ニル）エテン（特開平７−２２８５５８に合成法記載）
とＮ−ブロモスクシンイミドを反応させて得られる２−
ブロモ−２−（４−メトキシ−３−ニトロフェニル）−
１−（３，４，５−トリメトキシフェニル）エタノール
（２）をジクロロメタン中、−７８℃においてジメチル
スルホキシド及び無水トリフルオロ酢酸により酸化し、
２−ブロモ−２−（４−メトキシ−３−ニトロフェニ
ル）−１−（３，４，５−トリメトキシフェニル）エタ
ノン（３）とした後に、室温でジメチルホルムアミド
中、炭酸ナトリウムの存在下、チオアミド誘導体を反応
させてチアゾール誘導体（４）を合成し、これを酢酸
中、亜鉛で還元することにより得ることができる。

【００１６】また本発明の化合物に属する式（９）で表
される化合物は、例えば、４−メトキシ−３−ニトロ安
息香酸の酸クロライド物と３, ４, ５−トリメトキシア
ニリンを反応させて得られる（３−ニトロ−４−メトキ
シフェニル）−Ｎ−（３, ４,５−トリメトキシフェニ
ル）アミド（６）をトルエン中、６０℃でLawesson's試
薬と反応させて（３−ニトロ−４−メトキシフェニル）
−N−（３, ４, ５−トリメトキシフェニル）−チオア
ミド（７）とし、次いで抱水ヒドラジンと反応させた後
にトリメチルオルトホルメートを反応させ、テトラゾー
ル誘導体（８）を合成し、これを酢酸中、亜鉛で還元す
ることにより得ることができる。

【００１７】上記の方法により製造した本発明の複素環
誘導体は、常法の単離精製手段、例えば溶媒による抽
出、クロマトグラフィー、結晶化等によって反応混合物
から容易に分離し、かつ精製することができる。

【００１８】本発明において、前記の複素環誘導体を制
癌剤として使用する場合には、経口投与もしくは非経口
投与（筋肉内、皮下、静脈内、坐薬等）により投与され
る。投与量は症状により異なるが、通常成人一人あたり
１〜３０００ｍｇの用量範囲で一般に数回に分けて１日
あたり１〜９０００ｍｇである。

【００１９】さらに、本発明の複素環誘導体を経口用製
剤として調製する場合には賦形剤、さらに必要に応じて
結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味矯臭剤などを加
えた後、常法により錠剤、被覆錠剤、顆粒剤、カプセル
剤などとする。

【００２０】賦形剤としては例えば乳糖、コーンスター
チ、白糖、ブドウ塘、ソルビット、結晶セルロースなど
が、結合剤としては例えばポリビニルアルコール、ポリ
ビニルエーテル、エチルセルロース、メチルセルロー
ス、アラビアゴム、トラガント、ゼラチン、シェラッ
ク、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピ
ルスターチ、ポリビニルピロリドンなどが、崩壊剤とし
ては例えばデンプン、寒天、ゼラチン末、結晶セルロー
ス、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、クエン酸カ
ルシウム、デキストラン、ペクチンなどが、滑沢剤とし
ては例えばステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエ
チレングリコール、シリカ、硬化植物油等が、着色剤と
しては医薬品に添加することが許可されているものが、
矯味矯臭剤としてはココア末、ハッカ脳、芳香酸、ハッ
カ油、竜脳、桂皮末などが用いられる。これらの錠剤
は、顆粒剤には糖衣、ゼラチン衣、その他必要により適
宜コーティングすることはもちろん差し支えない。

【００２１】注射剤を調製する場合には必要によりpH調
整剤、緩衝剤、安定化剤、保存剤などを添加し、常法に
より、皮下、筋肉内、静脈内注射剤とする。

【００２２】本発明の複素環誘導体は必要により、塩
酸、硫酸、リン酸などの無機塩、及び、シュウ酸、フマ
ル酸、マレイン酸、リンゴ酸、クエン酸、酒石酸、グル
タミン酸などの有機塩との薬学的に許容しうる酸付加塩
とすることができる。

【００２３】

【実施例】以下実施例により本発明を詳細に説明する
が、本発明がこれらの実施例によって限定されるもので
はない。

【００２４】＜実施例１＞２−アミノ−５−(３−アミ
ノ−４−メトキシフェニル)−４−(３, ４, ５−トリメ
トキシフェニル)チアゾールの合成

【００２５】工程１２−ブロモ−２−（４−メトキシ−３−ニトロフェニ
ル）−１−（３，４，５−トリメトキシフェニル）エタ
ノールの合成Ｅ−２−（４−メトキシ−３−ニトロフェニル）−１−
（３，４，５−トリメトキシフェニル）エテン１０. １
ｇをジメチルスルホキシド１５０ｍｌ＋水１０ｍｌに溶
解し、Ｎ−ブロモスクシイミド７. ５ｇを加え、３０分
間室温で反応させた。水を５００ｍｌ加え、酢酸エチル
で抽出、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮した。
この反応を４回行い、シリカゲルカラム（酢酸エチル−
ヘキサン,１：１→２：１）で精製し、減圧濃縮した。
粗結晶を酢酸エチルに溶解し、加温しながらヘキサンを
ゆっくりと加えて、室温で静置した後−２０℃で数時間
沈澱を析出させ、これを濾取した(１５. ５２ｇ, ３５.
１ｍｍｏｌ,収率３０％）。

【００２６】¹H-NMR(CDCl₃) 2.587(1H,d,J=3.2Hz), 3.770(6H,s), 3.814(3H,s), 3.9
43(3H,s), 5.070(1H,d,J=5.1Hz), 5.169(1H,d-d,J=3.2H
z,5.1Hz), 6.409(2H,s), 6.959(1H,d,8.6Hz),7.430(1H,
d-d,J=2.3Hz,8.6Hz), 7.930(1H,d,J=2.3Hz)

【００２７】工程２２−ブロモ−２−（４−メトキシ−３−ニトロフェニ
ル）−１−（３，４，５−トリメトキシフェニル）エタ
ノンの合成無水トリフルオロ酢酸５. ５ｍｌをジクロロメタン２０
０ｍｌに溶解し、−７８℃に冷却して、ジメチルスルホ
キシド５. ０ｍｌ＋ジクロロメタン４０ｍｌ溶液を２５
分かけて滴下した。この温度で２０分撹拌した後、２−
ブロモ−２−（４−メトキシ−３−ニトロフェニル）−
１−（３，４，５−トリメトキシフェニル）エタノール
２. ０１ｇのジクロロメタン２５ｍｌ溶液を１０分かけ
て滴下し、この温度のまま２５分間反応させた。この温
度でトリエチルアミン７. ０ｍｌのジクロロメタン２０
ｍｌ溶液を５分かけて滴下し、２Ｍ臭化水素酸１２０ｍ
ｌを加え、室温まで昇温した。反応液をジクロロメタン
で抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧
濃縮した。これをシリカゲルカラム（酢酸エチル−ヘキ
サン, ２：３）で精製し目的物２. １４ｇを得た。

【００２８】¹H-NMR(CDCl₃) 3.919(6H,s), 3.939(3H,s), 3.985(3H,s), 6.249(1H,
s), 7.129(1H,d,J=8.9Hz), 7.273(2H,s), 7.806(1H,d-
d,J=2.4Hz,8.9Hz), 8.065(1H,d,J=2.4Hz)

【００２９】工程３２−アミノ−５−（４−メトキシ−３−ニトロフェニ
ル)−４−(３, ４, ５−トリメトキシフェニル）チアゾ
ールの合成２−ブロモ−２−（４−メトキシ−３−ニトロフェニ
ル）−１−（３，４，５−トリメトキシフェニル）エタ
ノン８５６ｍｇ（１. ９４ｍｍｏｌ）、チオ尿素１５２
ｍｇ（２. ００ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド１０
ｍｌに溶解し、炭酸ナトリウム２０９ｍｇ（１. ９７ｍ
ｍｏｌ）を加えて室温で２時間反応させた。水５０ｍｌ
を加え、酢酸エチルで抽出し、有機層を無水硫酸ナトリ
ウムで乾燥後を加えて放冷後、さらに−２０℃に冷却し
て結晶を析出させ、目的物６１５.４ｍｇ（１. ４７ｍ
ｍｏｌ, 収率７６％）を得た。

【００３０】1H-NMR(CDC_l3) δ：3.714(6H,s), 3.848(3
H,s), 3.946(3H,s), 5.001(2H,brs),6.679(2H,s), 6.98
4(1H,d,J=8.8Hz), 7.417(1H,d-d,J=2.4Hz,8.8Hz), 7.86
2(1H,d,J=2.4Hz)

【００３１】工程４２−アミノ−５−(３−アミノ−４−メトキシフェニル)
−４−(３, ４, ５−トリメトキシフェニル)チアゾール
の合成活性化亜鉛末１２. ２ｇを酢酸１００ｍｌに懸濁させ、
溶液が４０℃を越えないような速度で２−アミノ−５−
（４−メトキシ−３−ニトロフェニル）−４−（３,
４, ５−トリメトキシフェニル）チアゾール５８５ｍｇ
（１. ４０ｍｍｏｌ）の酢酸２. ０ｍｌ＋ジクロロメタ
ン４. ０ｍｌ懸濁溶液を滴下し、３０分間反応させた。
酢酸エチル３００ｍｌを加えて濾過し、濾液を減圧濃縮
した。これをシリカゲルカラム（酢酸エチル−ヘキサン
３：２）で精製し、濃縮後、酢酸エチル１００ｍｌ＋ヘ
キサン２００ｍｌより再結晶し、目的物２９３. ２ｍｇ
（０. ７５７ｍｏｌ, 収率５４％, 純度９７. ７％−Ｈ
ＰＬＣ）を得た。

【００３２】1H-NMR(C_D3OD) δ：3.614(6H,s), 3.706(3
H,s), 3.811(3H,s), 6.594(1H,d-d,2.2Hz,8.2Hz), 6.67
8(1H,d,J=2.2Hz), 6.719(2H,s), 6.773(1H,d,J=8.2H
z)；高分解能マススペクトル(FAB)：測定値 388.1313, 計算
値 388.1331

【００３３】＜実施例２＞３−(３−アミノ−４−メトキシフェニル)−４−(３,
４, ５−トリメトキシフェニル)テトラゾールの合成

【００３４】工程１（４−メトキシフェニル−３−ニトロ）−Ｎ−（３,
４, ５−トリメトキシフェニル) アミドの合成法４−メトキシ−３−ニトロ安息香酸３. ０ｇ（０. ０１
５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１８０ｍｌに溶かし、塩
化チオニル３. ３ｍｌ（０. ０４５ｍｍｏｌ）を加えて
室温で１２時間撹拌した。反応液を濃縮した後に、ジク
ロロメタン１５０ｍｌ、３, ４, ５−トリメトキシアニ
リン３.０ｇ（０. ０１７ｍｍｏｌ）、ピリジン５ｍｌ
を加え、室温で２時間反応させた。次に飽和炭酸水素ナ
トリウム水を加え、ジクロロメタンで３回抽出した。無
水硫酸ナトリウムで乾燥後、濃縮し、シリカゲルカラム
クロマトグラフィー（５％メタノール−ジクロロメタ
ン）で精製した。濃縮後、ジクロロメタンに溶かし、酢
酸エチルを加えて再結晶し、目的物４.２ｇ（収率７７.
３％）を得た。

【００３５】1H-NMR (CDC_l3) δ：8.35(1H,d,J=2.4),
8.15(1H,dd,J=2.4,8.7), 7.92(1H,brs), 7.19(1H,d,J=
8.7), 6.96(2H,s), 4.04(3H,s), 3.87(6H,s), 3.84(3H,
s); 分子量_C17_H18_N2_O7=362；ESIマススペクトル：363(MH
+)；黄色結晶融点168-169℃

【００３６】工程２ N−(４−メトキシフェニル−３−ニトロ)−(３, ４, ５
−トリメトキシフェニル) チオアミドの合成（４−メトキシフェニル−３−ニトロ)−Ｎ−(３, ４,
５−トリメトキシフェニル）アミド２. ０ｇをトルエン
１００ｍｌに溶かし、Lawesson's試薬を２. ６８ｇ加え
て１００℃で３時間反応させた。室温まで冷却し濃縮し
た後に、酢酸エチル、ヘキサンを順に加え結晶化し、目
的物１. ３ｇ（３. ４ｍｍｏｌ, ６１. ８％）を得た。

【００３７】1H-NMR(CDC_l3) δ：9.03 (1H,s), 8.19 (1
H,s), 8.05 (1H,brs), 7.15 (1H,d,J=9.0), 7.04 (2H,
s), 4.01 (3H,s), 3.91 (6H,s), 3.89 (3H,s)；分子量 _C17_H18_N2_O6_S1=378；ESIマススペクトル：379(MH
+)；黄色結晶融点199−200℃

【００３８】工程３３−(４−メトキシフェニル−３−ニトロ)−４−(３,
４, ５−トリメトキシフェニル)テトラゾールの合成 (４−メトキシフェニル−３−ニトロ)−N−(３, ４, ５
−トリメトキシフェニル)チオアミド５０４ｍｇ（１.
３３ｍｍｏｌ）をエタノール２５ｍｌ＋ジクロロメタン
２５ｍｌに溶かし、抱水ヒドラジン５ｍｌを加え、室温
で２時間反応させた。次に反応液を濃縮し、濃縮物を酢
酸２５ｍｌに溶かし、亜硝酸ナトリウム３００ｍｇを加
えて室温で４時間反応させた後、２Ｎ水酸化ナトリウム
で中和し、飽和食塩水を加えてからジクロロメタンで抽
出した。無水硫酸ナトリウムで乾燥後、濃縮し、酢酸エ
チルから結晶化して、目的物４８３ｍｇ（１. ２８ｍｍ
ｏｌ, ８０. ０％）を得た。

【００３９】1H-NMR (CDC_l3) δ：8.02 (1H,d,J=2.7),
7.63 (1H,dd,J=2.7,9.0), 7.25 (1H,d,J=9.0), 6.99 (2
H,s), 4.06 (3H,s), 3.91 (3H,s), 3.75 (6H,s)；分子量 _C17_H17_N5_O6=387; ESIマススペクトル：388(MH+)
；白色結晶融点197-198℃

【００４０】工程４３−(３−アミノ−４−メトキシフェニル)−４−(３,
４, ５−トリメトキシフェニル)テトラゾールの合成３−(４−メトキシフェニル−３−ニトロ)−４−(３,
４, ５−トリメトキシフェニル)テトラゾール４００ｍ
ｇを酢酸２０ｍｌ＋ジクロロメタン１０ｍｌに溶かし、
活性化亜鉛を５ｇ加えて、室温で２時間撹拌した。濾
過、濃縮後シリカゲルカラムクロマトグラフィー（５％
メタノール−ジクロロメタン）で精製し、目的物２５７
ｍｇ（０. ７５ｍｍｏｌ,７０. １％）を得た。

【００４１】1H-NMR (CDC_l3) 6.89(2H,s), 6.85(1H,d,J=8.1), 6.73(1H,d,J=2.4), 6.
71(1H,dd,J=2.4,8.1),3.92(3H,s), 3.88(3H,s), 3.71(6
H,s) 分子量 _C17_H19_N5_O4=357；ESIマススペクトル 358(MH
+)；白色結晶融点147-148℃ 高分解能マススペクトル(FAB)： (MH+) 計算値 358.151
5 実測値 358.1515

【００４２】＜実施例３＞細胞毒性の評価癌細胞としてマウスcolon26大腸癌細胞を用い、培養に
は１０％牛胎児血清を含むＰＲＭＩ−１６４０培地を用
いた。９６穴マイクロプレート上に５×１０３個／５０
μｌ／ウェルで播種し、各濃度の被試験化合物水溶液を
５０μｌづつ添加し、３７℃で３日間培養した後、ＭＴ
Ｔ法により生細胞数を測定し、用量反応曲線を作成し
た。これより被試験化合物による５０％増殖抑制濃度
（ＩＣ₅0）を算出した。各化合物のＩＣ₅0値を表１中に
示した。また薬剤を静脈内へ投与した際、直後に急性の
死亡例が現れるドーズを毒性発現ドーズとして表１中に
示した。

【００４３】＜実施例４＞マウスでの薬効試験マウス皮下継代されているcolon 26をはさみで破砕して
トロッカーでマウス皮下に移植した。１週間後、腫瘍を
ノギスで計測し、腫瘍体積を算出して群分けを行った
（各群ｎ＝５）。被試験化合物をジメチルスルホキシド
に溶解した後に、５％Ｔｗｅｅｎ８０−生理食塩水の溶
液で希釈し、そのうちの０. ２ｍｌを静脈注射あるいは
皮下注射により投与した。薬剤投与は移植後７日目、１
１日目、１５日目に１日１回行った。移植後２１日目に
腫瘍体積の測定を行い、腫瘍体積および腫瘍増殖抑制率
(Ｉ. Ｒ. )をそれぞれ数１、数２によって算出した。

【００４４】

【数1】

【００４５】

【数2】

【００４６】

【表1】

【００４７】

【発明の効果】本発明の複素環誘導体は優れた制癌活性
を有し、医薬産業上、極めて有用である。

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【手続補正書】

【提出日】平成８年１１月２６日

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００１６

【補正方法】変更

【補正内容】

【００１６】また本発明の化合物に属する式（９）で表
される化合物は、例えば、４−メトキシ−３−ニトロ安
息香酸の酸クロライド物と３, ４, ５−トリメトキシア
ニリンを反応させて得られる（４−メトキシ−３−ニト
ロフェニル）−Ｎ−（３, ４,５−トリメトキシフェニ
ル）アミド（６）をトルエン中、６０℃でLawesson's試
薬と反応させて（４−メトキシ−３−ニトロフェニル）
−N−（３, ４, ５−トリメトキシフェニル）−チオア
ミド（７）とし、次いで抱水ヒドラジンと反応させた後
にトリメチルオルトホルメートを反応させ、テトラゾー
ル誘導体（８）を合成し、これを酢酸中、亜鉛で還元す
ることにより得ることができる。

【手続補正２】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００２６

【補正方法】変更

【補正内容】

【００２６】¹H-NMR(CDCl₃) δ：２．５８７（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ），３．７７０（６Ｈ，ｓ），
３．８１４（３Ｈ，ｓ），３．９４３（３Ｈ，ｓ），
５．０７０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），５．１
６９（１Ｈ，ｄ−ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，５．１Ｈｚ），
６．４０９（２Ｈ，ｓ），６．９５９（１Ｈ，ｄ，
８．６Ｈｚ），７．４３０（１Ｈ，ｄ−ｄ，Ｊ＝２．
３Ｈｚ，８．６Ｈｚ），７．９３０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝
２．３Ｈｚ）

【手続補正３】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００２８

【補正方法】変更

【補正内容】

【００２８】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３） δ：３．９
１９（６Ｈ，ｓ），３．９３９（３Ｈ，ｓ），３．
９８５（３Ｈ，ｓ），６．２４９（１Ｈ，ｓ），
７．１２９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ），７．２７
３（２Ｈ，ｓ），７．８０６（１Ｈ，ｄ−ｄ，Ｊ＝
２．４Ｈｚ，８．９Ｈｚ），８．０６５（１Ｈ，ｄ，
Ｊ＝２．４Ｈｚ）

【手続補正４】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００３０

【補正方法】変更

【補正内容】

【００３０】 ^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ _３） δ：３．７
１４（６Ｈ，ｓ），３．８４８（３Ｈ，ｓ），３．
９４６（３Ｈ，ｓ），５．００１（２Ｈ，ｂｒｓ），
６．６７９（２Ｈ，ｓ），６．９８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ
＝８．８Ｈｚ），７．４１７（１Ｈ，ｄ−ｄ，Ｊ＝
２．４Ｈｚ，８．８Ｈｚ），７．８６２（１Ｈ，ｄ，
Ｊ＝２．４Ｈｚ）

【手続補正５】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００３２

【補正方法】変更

【補正内容】

【００３２】 ^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ _３ＯＤ） δ：3.614
(6H,s), 3.706(3H,s), 3.811(3H,s), 6.594(1H,d-d,2.2
Hz,8.2Hz), 6.678(1H,d,J=2.2Hz), 6.719(2H,s), 6.773
(1H,d,J=8.2Hz)；高分解能マススペクトル(FAB)：測定値 388.1313, 計算
値３８８．１３３１

【手続補正６】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００３４

【補正方法】変更

【補正内容】

【００３４】工程１（４−メトキシ−３−ニトロフェニル）−Ｎ−（３，
４, ５−トリメトキシフェニル) アミドの合成法４−メトキシ−３−ニトロ安息香酸３. ０ｇ（０. ０１
５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１８０ｍｌに溶かし、塩
化チオニル３. ３ｍｌ（０. ０４５ｍｍｏｌ）を加えて
室温で１２時間撹拌した。反応液を濃縮した後に、ジク
ロロメタン１５０ｍｌ、３, ４, ５−トリメトキシアニ
リン３.０ｇ（０. ０１７ｍｍｏｌ）、ピリジン５ｍｌ
を加え、室温で２時間反応させた。次に飽和炭酸水素ナ
トリウム水を加え、ジクロロメタンで３回抽出した。無
水硫酸ナトリウムで乾燥後、濃縮し、シリカゲルカラム
クロマトグラフィー（５％メタノール−ジクロロメタ
ン）で精製した。濃縮後、ジクロロメタンに溶かし、酢
酸エチルを加えて再結晶し、目的物４.２ｇ（収率７７.
３％）を得た。

【手続補正７】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００３５

【補正方法】変更

【補正内容】

【００３５】 ¹H-NMR(CDCl ₃) δ：8.35(1H,d,J=2.4), 8.
15(1H,dd,J=2.4,8.7), 7.92(1H,brs),7.19(1H,d,J=8.
7), 6.96(2H,s), 4.04(3H,s), 3.87(6H,s), 3.84(3H,
s); 分子量C ₁₇H ₁₈N ₂O ₇=362；ESIマススペクトル：363(MH
+)；黄色結晶融点168-169℃

【手続補正８】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００３６

【補正方法】変更

【補正内容】

【００３６】工程２ N−(４−メトキシ−３−ニトロフェニル)−(３, ４, ５
−トリメトキシフェニル) チオアミドの合成（４−メトキシ−３−ニトロフェニル)−Ｎ−(３, ４,
５−トリメトキシフェニル）アミド２. ０ｇをトルエン
１００ｍｌに溶かし、Lawesson's試薬を２. ６８ｇ加え
て１００℃で３時間反応させた。室温まで冷却し濃縮し
た後に、酢酸エチル、ヘキサンを順に加え結晶化し、目
的物１. ３ｇ（３. ４ｍｍｏｌ, ６１. ８％）を得た。

【手続補正９】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００３７

【補正方法】変更

【補正内容】

【００３７】 ¹H-NMR(CDCl ₃) δ：9.03 (1H,s), 8.19 (1
H,s), 8.05 (1H,brs), 7.15 (1H,d,J=9.0), 7.04 (2H,
s), 4.01 (3H,s), 3.91 (6H,s), 3.89 (3H,s)；分子量 C ₁₇H ₁₈N ₂O ₆S ₁=378；ESIマススペクトル：379(MH
+)；黄色結晶融点199−200℃

【手続補正１０】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００３８

【補正方法】変更

【補正内容】

【００３８】工程３３−(４−メトキシ−３−ニトロフェニル)−４−(３,
４, ５−トリメトキシフェニル)テトラゾールの合成 (４−メトキシ−３−ニトロフェニル)−N−(３, ４, ５
−トリメトキシフェニル)チオアミド５０４ｍｇ（１.
３３ｍｍｏｌ）をエタノール２５ｍｌ＋ジクロロメタン
２５ｍｌに溶かし、抱水ヒドラジン５ｍｌを加え、室温
で２時間反応させた。次に反応液を濃縮し、濃縮物を酢
酸２５ｍｌに溶かし、亜硝酸ナトリウム３００ｍｇを加
えて室温で４時間反応させた後、２Ｎ水酸化ナトリウム
で中和し、飽和食塩水を加えてからジクロロメタンで抽
出した。無水硫酸ナトリウムで乾燥後、濃縮し、酢酸エ
チルから結晶化して、目的物４８３ｍｇ（１. ２８ｍｍ
ｏｌ,８０. ０％）を得た。

【手続補正１１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００３９

【補正方法】変更

【補正内容】

【００３９】 ¹H-NMR (CDCl ₃) δ：8.02 (1H,d,J=2.7),
7.63 (1H,dd,J=2.7,9.0), 7.25 (1H,d,J=9.0), 6.99 (2
H,s), 4.06 (3H,s), 3.91 (3H,s), 3.75 (6H,s)；分子量 C ₁₇H ₁₇N ₅O ₆=387; ESIマススペクトル：388(MH+)
；白色結晶融点197-198℃

【手続補正１２】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００４０

【補正方法】変更

【補正内容】

【００４０】工程４３−(３−アミノ−４−メトキシフェニル)−４−(３,
４, ５−トリメトキシフェニル)テトラゾールの合成３−(４−メトキシ−３−ニトロフェニル)−４−(３,
４, ５−トリメトキシフェニル)テトラゾール４００ｍ
ｇを酢酸２０ｍｌ＋ジクロロメタン１０ｍｌに溶かし、
活性化亜鉛を５ｇ加えて、室温で２時間撹拌した。濾
過、濃縮後シリカゲルカラムクロマトグラフィー（５％
メタノール−ジクロロメタン）で精製し、目的物２５７
ｍｇ（０. ７５ｍｍｏｌ,７０. １％）を得た。

【手続補正１３】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００４１

【補正方法】変更

【補正内容】

【００４１】 ¹H-NMR (CDCl ₃) δ：6.89(2H,s), 6.85(1
H,d,J=8.1), 6.73(1H,d,J=2.4), 6.71(1H,dd,J=2.4,8.
1),3.92(3H,s), 3.88(3H,s), 3.71(6H,s) 分子量 C ₁₇H ₁₉N ₅O ₄=357；ESIマススペクトル 358(MH
+)；白色結晶融点147-148℃ 高分解能マススペクトル(FAB)： (MH+) 計算値 358.151
5 実測値３５８．１５１５

【手続補正１４】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００４２

【補正方法】変更

【補正内容】

【００４２】＜実施例３＞細胞毒性の評価癌細胞としてマウスｃｏｌｏｎ２６大腸癌細胞を用
い、培養には１０％牛胎児血清を含むＰＲＭＩ−１６４
０培地を用いた。９６穴マイクロプレート上に５×１０
³個／５０μｌ／ウェルで播種し、各濃度の被試験化合
物水溶液を５０μｌづつ添加し、３７℃で３日間培養し
た後、ＭＴＴ法により生細胞数を測定し、用量反応曲線
を作成した。これより被試験化合物による５０％増殖抑
制濃度（ＩＣ ₅₀）を算出した。各化合物のＩＣ ₅₀値を表
１中に示した。また薬剤を静脈内へ投与した際、直後に
急性の死亡例が現れるドーズを毒性発現ドーズとして表
１中に示した。

【手続補正１５】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００４６

【補正方法】変更

【補正内容】

【００４６】

【表1】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者辻尚志神奈川県川崎市川崎区鈴木町１−１味の素株式会社中央研究所内 (72)発明者須賀泰世神奈川県川崎市川崎区鈴木町１−１味の素株式会社中央研究所内 (72)発明者二瓶幸夫神奈川県川崎市川崎区鈴木町１−１味の素株式会社中央研究所内

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】下記一般式（１）で表される複素環誘導
体。【化１】（式中、Ｈｅｔは複素環を表す。）
【請求項２】複素環が置換基を有してもよいチアゾー
ル、又はテトラゾールである請求項１記載の複素環誘導
体。
【請求項３】請求項１記載の複素環誘導体又はその薬
学的に許容しうる塩を含有することを特徴とする制癌
剤。