JPH1096A - 微生物を用いるエリスリトールの製造方法 - Google Patents

微生物を用いるエリスリトールの製造方法

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JPH1096A
JPH1096A JP8172806A JP17280696A JPH1096A JP H1096 A JPH1096 A JP H1096A JP 8172806 A JP8172806 A JP 8172806A JP 17280696 A JP17280696 A JP 17280696A JP H1096 A JPH1096 A JP H1096A
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erythritol
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sugar
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Saburo Senda
三郎 千田
Toshiro Ochiai
敏郎 落合
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Nikken Chemicals Co Ltd
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    • C12P7/00Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/02Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group
    • C12P7/04Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group acyclic
    • C12P7/18Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group acyclic polyhydric
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
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    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
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  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
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Abstract

(57)【要約】 【目的】 微生物を用いて効率よくエリスリトールを生
産する方法を提供する。 【解決手段】 トリコスポロノイデス・メガチリエンシ
ス(Trichosporonoidesmegachiliensis)に属するエリ
スリトール生産菌、例えばトリコスポロノイデス・メガ
チリエンシスCBS190.92株、または同 CBS
191.92株を高濃度、好ましくは20〜50W/V
%の糖(ブドウ糖、フルクトース、マルトース、蔗糖
等)を含む培地で培養し、培地中に蓄積されたエリスリ
トールを採取する。 【効果】 トリコスポロノイデス属の菌株であるトリコ
スポロノイデス・メガチリエンシス(Trichosporonoide
s megachiliensis )を用い、高濃度の糖から多量のエ
リスリトールを安価に生産することができる。

Description

【発明の詳細な説明】
【0001】
【発明の属する技術分野】本発明は微生物を用いるエリ
スリトールの製造方法に関し、更に詳しくはトリコスポ
ロノイデス・メガチリエンシスに属する菌株を用いるエ
リスリトールの製造方法に関する。
【0002】
【従来の技術】現在、エリスリトールを生産するために
実用化されている微生物として、モニリエラ・トメント
サ・バール・ポリニス(Moniliella tomentosa var. po
llinisCBS461.67)とオーレオバシデウム(Au
reobasidium sp. SN−G42 FERM P−894
0)の2種類が知られている。前者には、糖類の発酵に
よりポリオールを工業的規模で製造する方法等(特公平
6−30591、同6−30592、同6−3059
3、同6−30594)一連のポリオールの製造方法が
知られている。また、後者にはエリスリトール生産能を
有する新規微生物及びそれを用いる発酵によるエリスリ
トールの製造方法(特公平4−11189、同4−63
5)が知られている。
【0003】一方、トリコスポロノイデス属の微生物に
ついては、その種は不明であるがブラジル国カンピナス
大学のマリナ・A・アオキ氏等による蔗糖及びブドウ糖
からのエリスリトールへの変換の報告(BIOTECHNOLOGY
LETTERS, Volume 15,NO.4,P.383-388, April 1993)
がある。この報告によると、ブドウ糖からエリスリトー
ルへの変換率が43.0%、蔗糖からエリスリトールへ
の変換率が37.4%と高いものの、このときの培養液
の糖濃度は10%(W/V)と低く、又、培養日数も6
日間と長いなど工業的規模での製造には問題がある。本
発明で使用されるトリコスポロノイデス・メガチリエン
シス(Trichosporonoides megachiliensis)は、カナダ
国アルバータ大学のG.ドグラス・イングリス(DOU
GLAS INGLIS)とリン・シグラー(LYNN
E SIGLER)により1992年に新菌種として報
告(Mycologia,Volume 84,No.4,P.555-570,1992)
された菌株である。彼らの報告には新菌種と同定した菌
株の形態学的、生理学的諸性状が記述されている。しか
し、これらの菌株がエリスリトールを生成するとの報告
はない。
【0004】
【発明が解決しようとする課題】本発明者等は微生物を
用いるエリスリトールの製造方法について、種々研究を
行った結果、トリコスポロノイデス・メガチリエンシス
がブドウ糖等の糖を効率よく高収率でエリスリトールに
変換することを見いだし本発明を完成するに至った。し
たがって、本発明の目的は、トリコスポロノイデスに属
する微生物を用いて、高濃度(20〜50W/V%)の
糖からエリスリトールを製造する方法を提供するにあ
る。
【0005】
【課題を解決するための手段】即ち、本発明はトリコス
ポロノイデス・メガチリエンシス(Trichosporonoides
megachiliensis)に属する菌株を高濃度の糖培地で培養
し、培養物からエリスリトールを採取することを特徴と
するエリスリトールの製造方法に関する。
【0006】
【発明の実施の形態】以下に、本発明に係るエリスリト
ールの製造方法について述べる。本発明で使用されるト
リコスポロノイデス・メガチリエンシスに属する菌株と
してはトリコスポロノイデス・メガチリエンシス CB
S190.92株(UAMH6490株)、同CBS1
91.92株(UAMH6822株)の他、カナダ国ア
ルバータ大学のG.ドグラス・イングリス等により報告
された菌株である、トリコスポロノイデス・メガチリエ
ンシス UAMH6820株、同UAMH6821株、
同UAMH6823株、及びこれらの菌株を通常の変異
処理方法、例えば、紫外線照射、放射線照射等による物
理的変異方法、あるいはエチルメタンスルホン酸、ニト
ロソグアニジン等の化学的変異剤による化学的変異方法
等で処理することにより得られた変異株を挙げることが
できる。
【0007】菌株の培養は炭素源、窒素源、無機塩類等
を含む液体培地を用いて好気的条件下に行われる。炭素
源としてはグルコース、フルクトース、蔗糖、マルトー
ス等の糖類及びこれらの糖類を含む澱粉糖化液、甘藷糖
蜜、甜菜糖蜜等の糖質、好ましくは、グルコース、フル
クトース又は蔗糖が使用される。窒素源としては微生物
により利用可能な窒素化合物、例えば酵母エキス、ペプ
トン、麦芽エキス、コーンスチープリカー、アンモニア
水、アンモニウム塩類、尿素、硝酸塩類等が使用され
る。無機塩としてはリン酸塩、マグネシウム塩、カルシ
ウム塩、カリウム塩、鉄塩、マンガン塩等が適宜使用さ
れる。その他、培養液中の発泡を抑制するため、通常使
用されるシリコーン樹脂等の消泡剤が適宜使用される。
【0008】培養は、培地中の糖濃度を高濃度、好まし
くは20〜50W/V%、更に好ましくは30〜40W
/V%に調製した、前記組成からなる液体培地に菌株を
直接植菌するか、又は別に前培養によって得られる種培
養液を接種して、以下の条件、即ち、通常pH3〜8、
好ましくはpH3〜6、培養温度24〜40℃、好まし
くは35〜38℃で通常3〜8日間培養することにより
行われる。尚、培養は、培地の栄養源が最大限に利用さ
れ、かつ培養液中のエリスリトールの生成量が最高に達
した時点で培養を終了させることが望ましい。培養液中
に蓄積されたエリスリトールは、常法により培養液から
分離し採取される。例えば、培養液から菌体を濾過ある
いは遠心分離によって除去し、次いで、イオン交換樹脂
処理法、吸着クロマトグラフィー法、溶媒抽出法、濃縮
法、晶析法等の方法を適宜組み合わせることにより行わ
れる。更に、不純物を除去するため、通常用いられる活
性炭脱色処理法、再結晶法等も用いられる。
【0009】
【実施例】次に、本発明の実施例について具体的に説明
するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものでは
ない。 実施例1(培養温度とエリスリトール収率) トリコスポロノイデス・メガチリエンシス CBS19
0.92株及び同CBS191.92株をそれぞれ酵母
エキス培地(ブドウ糖30W/V%、酵母エキス1W/
V%)に植菌し、35℃、3日間振とう培養した後、予
め、同酵母エキス培地を分注しておいたL型培養管に、
培地量の2%になるように接種し、振とう温度勾配培養
装置(アドバンテック東洋株式会社、モデルTN−21
48)を用いて、振とう数60回/分、温度24.5〜
39.7℃の範囲で4日間培養した。培養液中のエリス
リトールの対糖収率(消費された糖量に対する生成され
たエリスリトールの収率)は高速液体クロマトグラフで
培養液中のブドウ糖の残量とエリスリトールの生成量を
測定する事で算出した。その結果を表1に示した。
【0010】
【表1】
【0011】表1に示したように、CBS190.92
株のエリスリトール生産の最適温度範囲は36.5〜3
8℃であり、このときのエリスリトールの対糖収率は2
8.1〜29.4%であった。また、菌株CBS19
1.92株のエリスリトール生産の最適温度範囲は35
〜38℃であり、このときのエリスリトールの対糖収率
は27.8〜28.8%であった。
【0012】実施例2(糖の種類の影響) 菌株(CBS190.92、CBS191.92)を酵
母エキス培地を基本培地として、ブドウ糖を他の糖類
(フルクトース、マルトース、蔗糖)に変えて、それぞ
れ培養した。即ち、菌株をそれぞれ酵母エキス培地(ブ
ドウ糖30W/V%、酵母エキス1W/V%)に植菌
し、35℃、3日間振とう培養して得られた種培養液を
それぞれ、酵母エキス培地を基本にそれぞれの糖を添加
した培地(糖40W/V%、酵母エキス1.33W/V
%)に接種(対培地量2%)し、37℃、7日間、三角
フラスコによる振とう培養を行った。その結果を表2に
示した。
【0013】
【表2】
【0014】表2に示したように、本発明ではフルクト
ース又は蔗糖を培地の炭素源としたときはブドウ糖と同
様にエリスリトールの生成量が高いことが分かる。
【0015】実施例3(pHの影響) トリコスポロノイデス・メガチリエンシス CBS19
0.92株及び同CBS191.92株をそれぞれ培養
し培地pHの検討を行った。即ち、両菌株をそれぞれ酵
母エキス培地(ブドウ糖30W/V%、酵母エキス1W
/V%)に植菌し、35℃、3日間振とう培養した。続
いてそれぞれの菌株を、塩酸及び苛性ソーダを用いて培
地のpHを2.5,3.0,4.0,5.0,6.0,
8.0,10.0に調整した培地(糖40W/V%、酵
母エキス1.33W/V%)に接種(対培地量1.0
%)し、培養中の培地のpHを初めのpHに保持し、3
7℃、5日間、三角フラスコによる振とう培養を行っ
た。その結果を表3に示した。
【0016】
【表3】
【0017】表3に示したように本発明ではpH3.0
から8.0まで幅広い範囲でエリスリトールを安定して
製造できることが分かる。
【0018】実施例4(糖濃度と培養時間) トリコスポロノイデス・メガチリエンシス CBS19
0.92株及び同CBS191.92株をそれぞれ酵母
エキス培地(ブドウ糖30W/V%、酵母エキス1W/
V%)に植菌し、35℃、3日間振とう培養した。続い
て得られた種培養液を、糖濃度を10、20、30、4
0、50、60W/V%に調製した培地に接種(対培地
量2.0%)し、37℃で、それぞれ、エリスリトール
の最高収率(対糖収率)が得られる迄三角フラスコによ
る振とう培養を行った。その結果を表4に示した。
【0019】
【表4】
【0020】表4に示したように、ブドウ糖の糖濃度1
0W/V%ではCBS190.92株及びCBS19
1.92株共に培養日数は2日間と短時間で終了した。
この時のエリスリトールの対糖収率はそれぞれ、36.
7%と37.0%であった。また、糖濃度40W/V%
においてはCBS190.92株の培養日数は6日間で
この時のエリスリトールの対糖収率は27.3%であっ
た。又、CBS191.92株の培養日数は6日間でこ
の時のエリスリトールの対糖収率は26.1%であっ
た。
【0021】実施例5 菌株(CBS190.92)を酵母エキス培地(ブドウ
糖30W/V%、酵母エキス1W/V%)に植菌し、3
7℃で3日間振とう培養した。次いで、得られた培養液
を、前述の酵母エキス培地に植菌(対培地量2.0%)
し、ミニジャファーメンター(エイブル株式会社:モデ
ルDPCー2)で37℃、撹拌数450回/分で5日間
培養した。培養終了時のエリスリトールの対糖収率は3
5.1%であった。
【0022】実施例6 実施例4の糖濃度30W/V%の培地で培養した培養液
の一部を用いて、エリスリトールの結晶を得て物質の確
認を行った。即ち、培養液から菌体を濾去し上澄液を得
た。次いで、この上澄液を活性炭による脱色及びイオン
交換樹脂(SK−1B(三菱化学):PA−408(三
菱化学))による脱塩をし、得られた溶出液を糖濃度5
0%以上に濃縮した後、ゆっくりと冷却しながら結晶を
得た。更に、この結晶を水から再結晶して結晶を得た。
本物質の赤外線吸収スペクトル、融点及び核磁気共鳴ス
ペクトルをエリスリトールの標準品と比較したところ一
致する事から本物質はエリスリトールである事を確認し
た。
【0023】
【発明の効果】トリコスポロノイデス・メガチリエンシ
スに属する菌株を用いると、同属の公知菌株(前記文献
に記載の菌株)と比べてエリスリトール生産の培養時間
を大巾に短縮する(文献では糖濃度10%の場合、培養
日数が6日間であるのに対して、本発明では2日間で培
養が終了する)ことができ、しかも両者の収率はほぼ同
程度であるため、本発明はエリスリトールを生産する上
で非常に有利な方法である。更に、本発明では、糖濃度
30W/V%と高濃度の培地を用いた場合も、5日間で
培養が終了し、エリスリトールの収率(対糖収率)が約
35%と比較的高いため、エリスリトールを生産する上
で極めて有利である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 FI 技術表示箇所 C12R 1:645)

Claims (2)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】トリコスポロノイデス・メガチリエンシス
    (Trichosporonoides megachiliensis )に属する菌株
    を高濃度の糖培地で培養し、培地中に蓄積されたエリス
    リトールを採取することを特徴とする、エリスリトール
    の製造方法。
  2. 【請求項2】高濃度の糖培地が糖濃度20〜50W/V
    %である請求項1記載のエリスリトールの製造方法。
JP8172806A 1996-06-13 1996-06-13 微生物を用いるエリスリトールの製造方法 Pending JPH1096A (ja)

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US09/194,890 US6110715A (en) 1996-06-13 1997-05-15 Method for producing erythritol using a microorganism
PCT/JP1997/001640 WO1997047760A1 (en) 1996-06-13 1997-05-15 Process for producing erythritol by using microorganism
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