JPH11116480A

JPH11116480A - アクリドン誘導体を含有する医薬組成物

Info

Publication number: JPH11116480A
Application number: JP28188497A
Authority: JP
Inventors: Mitsuaki Watanabe; 三明渡辺; Masahisa Fujiwara; 将寿藤原; Masayuki Okamoto; 昌之岡本; Masanori Baba; 昌範馬場; Shiro Shigeta; 士郎茂田; Tomoyuki Yokota; 智之横田
Original assignee: SOYAKU GIJUTSU KENKYUSHO KK
Current assignee: SOYAKU GIJUTSU KENKYUSHO KK
Priority date: 1997-10-15
Filing date: 1997-10-15
Publication date: 1999-04-27

Abstract

(57)【要約】【課題】レトロウイルス、特にＨＩＶに感染した後、
免疫細胞のゲノムに組み込まれた上記ウイルスＤＮＡの
ＲＮＡへの複製を充分に阻止することのできる、優れた
抗ＨＩＶ活性を有する医薬組成物を提供すること。【解決手段】下記式（Ｉ）で表されるアクリドン誘導
体を有効成分として含有する医薬組成物。【化１】（式（Ｉ）中、Ｒはアルキル基を示し、Ｒ¹〜Ｒ⁴はそれ
ぞれ、同一であっても異なっていてもよく、水素原子、
水酸基、ハロゲン原子又はアルコキシ基を示す。）

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、抗レトロウイルス
剤、特に抗ＨＩＶ（human immunodeficiency virus）剤
として有用な医薬組成物に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】近年、種々の抗ＨＩＶ活性を有する化合
物が見いだされ、その中のいくつかは既に医薬品として
臨床上広く使用されている。かかる従来の医薬品は、そ
のほとんどが急性期での患者の症状改善を目的とし、逆
転写酵素の阻害あるいはプロテアーゼの阻害をその作用
機序とするものであった。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】しかし、従来の医薬品
では、ＨＩＶ感染後、免疫細胞のゲノムに組み込まれた
ＨＩＶのＤＮＡの複製があまり行われていない、いわゆ
る潜伏期からＨＩＶのＤＮＡの複製が急激に起こる急性
期への移行を充分に阻止するものではなく、このような
潜伏期から急性期への移行を充分に阻止できる医薬品の
開発が切望されていた。

【０００４】したがって、本発明の目的は、レトロウイ
ルス、特にＨＩＶに感染した後、免疫細胞のゲノムに組
み込まれた上記ウイルスＤＮＡのＲＮＡへの複製を充分
に阻止することのできる、優れた抗ＨＩＶ活性を有する
医薬組成物を提供することにある。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記目的
を達成するため鋭意検討を重ねた結果、特定の構造を有
するアクリドン誘導体がレトロウイルス、特にＨＩＶに
持続感染した細胞におけるＤＮＡからＲＮＡへの複製を
充分に阻止し、優れた抗レトロウイルス活性（抗ＨＩＶ
活性）を有することを見い出し、本発明を完成させるに
至った。

【０００６】すなわち、本発明は、下記式（Ｉ）：

【０００７】

【化２】（式（Ｉ）中、Ｒはアルキル基を示し、Ｒ¹〜Ｒ⁴はそれ
ぞれ、同一であっても異なっていてもよく、水素原子、
水酸基、ハロゲン原子及びアルコキシ基からなる群から
選択されるいずれかを示す。）で表されるアクリドン誘
導体を有効成分として含有する医薬組成物である。

【０００８】

【発明の実施の形態】本発明の医薬組成物の有効成分
は、下記式（Ｉ）：

【０００９】

【化３】で表されるアクリドン誘導体である。

【００１０】上記式（Ｉ）中のＲはアルキル基であり、
メチル、エチル、n-プロピル、iso-プロピル、n-ブチ
ル、iso-ブチル、sec-ブチル、tert-ブチルなどの炭素
数１〜５の低級アルキル基が好ましく、特にメチル基が
好ましい。

【００１１】また、上記式（Ｉ）中のＲ¹〜Ｒ⁴はそれぞ
れ、同一であっても異なっていてもよく、水素原子、水
酸基、ハロゲン原子及びアルコキシ基からなる群から選
択されるいずれかを示す。このようなハロゲン原子とし
ては、フッ素、ヨウ素、シュウ素、塩素原子を例示する
ことができる。また、上記アルコキシ基としては、メト
キシ、エトキシ、n-プロポキシ、iso-プロポキシ、n-ブ
トキシ、iso-ブトキシ、sec-ブトキシ、tert-ブトキシ
などの炭素数１〜５の低級アルコキシ基が好ましく、メ
トキシ基が特に好ましい。

【００１２】より具体的には、Ｒ¹が水酸基、水素原子
又は炭素数１〜５の低級アルコキシ基であるとアクリド
ン誘導体の抗ＨＩＶ活性が向上する傾向にあるため好ま
しい。また、Ｒ²が水素原子又は水酸基であるとアクリ
ドン誘導体の抗ＨＩＶ活性が向上する傾向にあるため好
ましく、中でもＲ²が水素原子であると特に抗ＨＩＶ活
性に優れたアクリドン誘導体が得られる傾向にあるため
特に好ましい。更に、Ｒ³が水酸基、水素原子又は炭素
数１〜５の低級アルコキシ基であるとアクリドン誘導体
の抗ＨＩＶ活性が向上する傾向にあるため好ましい。更
にまた、Ｒ⁴が水素原子、水酸基又はハロゲン原子であ
るとアクリドン誘導体の抗ＨＩＶ活性が向上する傾向に
あるため好ましい。

【００１３】従って、上記式（Ｉ）で表されるアクリド
ン誘導体の中でも、Ｒがメチル基であるアクリドン誘導
体、より好ましくはＲがメチル基、Ｒ²が水素原子であ
るアクリドン誘導体、特に好ましくはＲがメチル基、Ｒ
¹が水酸基、Ｒ²〜Ｒ⁴が水素原子である１−ヒドロキシ
−１０−メチルアクリドン、を有効成分とすることが好
適である。

【００１４】また、本発明にかかる上記アクリドン誘導
体は、薬学的に許容されるものであれば、塩（例えば、
塩酸塩、酒石酸塩等の酸付加塩）、水和物、溶媒和物の
形態であってもよい。

【００１５】このようなアクリドン誘導体は、公知化合
物であるか、例えば下記の反応スキームのような公知の
方法に従って調製可能である（例えば、Chem. Pharm. B
ull., 32(3), 1264-1267(1984)、J. Org. Chem., 1988,
53, 880-882、J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1(199
5), (18), 2333-2337、など参照）。

【００１６】

【化４】上記の式（II）、式（III）及び式（Ｉ）［（Ｉ-1）及
び（Ｉ-2）］中、Ｒはアルキル基を示し、Ｒ¹〜Ｒ⁴はそ
れぞれ、同一であっても異なっていてもよく、水素原
子、水酸基、ハロゲン原子及びアルコキシ基からなる群
から選択されるいずれかを示し、Ｒ⁵は水素原子又はハ
ロゲン原子を示す。

【００１７】すなわち、リチウムＮ−イソプロピルシク
ロヘキシルアミドの有機溶媒溶液を−８０〜−６０℃に
冷却後、アントラニル酸誘導体（式（II）の化合物）を
添加して撹拌し、−２０〜０℃に昇温後、ベンゼン誘導
体（式（III）の化合物）を添加し、０〜４０℃で撹拌
しながら両化合物を反応させることによって式（Ｉ-1）
で表されるアクリドン誘導体が得られる。次に、有機溶
媒中、式（Ｉ-1）のアクリドン誘導体とトリブロムホウ
素とを０〜４０℃で撹拌しながら反応させることによっ
て式（Ｉ-2）で表されるアクリドン誘導体が得られる。
このようにして得られたアクリドン誘導体は、シリカゲ
ルなどを用いたクロマトグラフィー法により単離精製す
ることができる。

【００１８】本発明の医薬組成物は、上述のアクリドン
誘導体を有効成分として含有するものであればよく、他
の含有成分は特に制限されない。例えば、本発明の医薬
組成物は、通常医薬に使用される賦形剤、その他の添加
剤を含む組成物として使用される。このような他の含有
成分としては、例えば固体状のものとして、乳糖、カオ
リン、ショ糖、結晶セルロース、コーンスターチ、タル
ク、寒天、ペクチン、ステアリン酸、ステアリン酸マグ
ネシウム、レシチン、塩化ナトリウムなどが挙げられ、
液体状のものとして、グリセリン、落花生油、ポリビニ
ルピロリドン、オリーブ油、エタノール、ベンジルアル
コール、プロピレングリコール、水などが挙げられる。

【００１９】また、本発明の医薬組成物の剤形としては
任意の形態を採ることができ、例えば錠剤、散剤、顆粒
剤、カプセル化剤、坐剤、トローチ剤などの固形製剤、
シロップ、乳液、軟ゼラチンカプセル、クリーム、ゲ
ル、ペースト、スプレー、注射剤などの液状製剤が挙げ
られる。

【００２０】なお、本発明の医薬組成物における上記ア
クリドン誘導体の含有量は特に制限されず、剤形などに
応じて適宜選択されるが、一般的には０．０１〜９９．
９９重量％程度であることが好ましい。

【００２１】本発明の医薬組成物の投与方法は、経口、
経腸、非経口、局所投与などのいずれの投与経路であっ
てもよく、投与量は、患者の年齢、病態、体重などに応
じ適宜決定されるが、通常は１日当たり０. ００１〜１
０００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲内から選ばれ、一回または
複数回に分けて投与される。

【００２２】本発明の医薬組成物は、後述の試験例から
も明らかなように、ＨＩＶ持続感染細胞におけるＨＩＶ
ＤＮＡのＲＮＡへの複製を充分に阻止し、優れた抗ＨＩ
Ｖ活性を有することから、抗レトロウイルス剤、特に抗
ＨＩＶ剤として有用である。従って、本発明の医薬組成
物は、レトロウイルスの感染の治療並びに予防、特にエ
イズの治療のために有効に使用することが可能である。

【００２３】

【実施例】次に実施例を挙げて本発明をより詳細に説明
するが、本発明はこれらの実施例に何ら限定されるもの
ではない。

【００２４】実施例１〜１３（合成例）アクリドン誘導体の調製以下の（１）および（２）に示した合成法に従い、下記
の反応スキームに示す種々のアクリドン誘導体を合成し
た。

【００２５】

【化５】

【００２６】（１）ｎ−ブチルリチウム（８．２５当
量）とＮ−イソプロピルシクロヘキシルアミン（８．２
５当量）から生成した８．２５当量のリチウムＮ−イソ
プロピルシクロヘキシルアミドを含有するテトラヒドロ
フラン溶液（ＬＩＣＡ／ＴＨＦ）５０ｍｌを調製し、ド
ライアイス・アセトンを用いて−７８℃に冷却した。こ
の溶液にＮ−アルキルアントラニル酸メチルエステル
（式（II）の化合物、２．５当量）のＴＨＦ溶液（５ｍ
ｌ）を注射器を使ってゆっくりと添加した。得られた混
合液を−７８℃で一夜撹拌した後、−１０℃に昇温し、
ハロベンゼン（式（III）の化合物、５．０当量）のＴ
ＨＦ溶液（５ｍｌ）を添加した。得られた混合液を室温
で１２時間撹拌した後、飽和食塩水を加えて反応を停止
させ、溶媒を減圧下で留去した。得られた残渣からジク
ロロメタンを用いて生成物を抽出し、ジクロロメタン層
を乾燥した後、溶媒を留去して、式（Ｉ-1）に示すアク
リドン誘導体を得た。これらのアクリドン誘導体をシリ
カゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：ジクロロメ
タン）で精製し、実施例１〜７のアクリドン誘導体を得
た。

【００２７】（２）次に、式（Ｉ-1）に示すアクリドン
誘導体（１．０当量）のクロロホルム溶液（１０ｍｌ）
を氷浴を用いて０℃に冷却した後、トリブロモホウ素の
クロロホルム溶液（２当量）を加え、得られた混合液を
室温で１２時間撹拌して反応させた。反応終了後、その
混合液に５％炭酸水素ナトリウム溶液を加え、クロロホ
ルム層を抽出した後、乾燥し、減圧下で溶媒を留去し
て、式（Ｉ-2）に示すアクリドン誘導体を得た。これら
のアクリドン誘導体をシリカゲルカラムクロマトグラフ
ィー（溶離液：ジクロロメタン）で精製し、実施例８〜
13のアクリドン誘導体を得た。

【００２８】各実施例における収率、得られたアクリド
ン誘導体の構造式、分子量、融点、ＮＭＲ測定値及びＩ
Ｒ測定値を以下に列挙する。なお、ＮＭＲ測定値はバリ
アン社製、商品名：Ｇｅｍｉｎｉ２００及び３００ＮＭ
Ｒスペクトロメーター、ＩＲ測定値は日本分光社製、商
品名：ＪＡＳＣＯＩＲ８１０スペクトロメーターを用
いて測定した。

【００２９】［実施例１］式（II）の化合物1a及び式
（III）の化合物2aから（１）の方法にしたがって以下
に示すアクリドン誘導体3aを得たところ、収率は５０％
であった。

【００３０】

【化６】

【００３１】［実施例２］式（II）の化合物1a及び式
（III）の化合物2bから（１）の方法にしたがって以下
に示すアクリドン誘導体3bを得たところ、収率は５０％
であった。

【００３２】

【化７】

【００３３】［実施例３］式（II）の化合物1a及び式
（III）の化合物2cから（１）の方法にしたがって以下
に示すアクリドン誘導体3cを得たところ、収率は６８％
であった。

【００３４】

【化８】

【００３５】［実施例４］式（II）の化合物1a及び式
（III）の化合物2dから（１）の方法にしたがって以下
に示すアクリドン誘導体3dを得たところ、収率は５９％
であった。

【００３６】

【化９】

【００３７】［実施例５］式（II）の化合物1a及び式
（III）の化合物2eから（１）の方法にしたがって以下
に示すアクリドン誘導体3eを得たところ、収率は１３％
であった。

【００３８】

【化１０】

【００３９】［実施例６］式（II）の化合物1a及び式
（III）の化合物2fから（１）の方法にしたがって以下
に示すアクリドン誘導体3fを得たところ、収率は６７％
であった。なお、この10-メチルアクリドンは、和光純
薬５５０−２４４３１、アルドリッヒ１９２５０−３と
して市販されている。

【００４０】

【化１１】

【００４１】［実施例７］式（II）の化合物1b及び式
（III）の化合物2aから（１）の方法にしたがって以下
に示すアクリドン誘導体3gを得たところ、収率は５７％
であった。

【００４２】

【化１２】

【００４３】［実施例８］式（I-1）の化合物3aから
（２）の方法にしたがって以下に示すアクリドン誘導体
4aを得たところ、収率は８０％であった。

【００４４】

【化１３】

【００４５】［実施例９］式（I-1）の化合物3bから
（２）の方法にしたがって以下に示すアクリドン誘導体
4bを得たところ、収率は７５％であった。

【００４６】

【化１４】

【００４７】［実施例10］式（I-1）の化合物3cから
（２）の方法にしたがって以下に示すアクリドン誘導体
4cを得たところ、収率は８０％であった。

【００４８】

【化１５】

【００４９】［実施例11］式（I-1）の化合物3dから
（２）の方法にしたがって以下に示すアクリドン誘導体
4dを得たところ、収率は７５％であった。

【００５０】

【化１６】

【００５１】［実施例12］式（I-1）の化合物3eから
（２）の方法にしたがって以下に示すアクリドン誘導体
4eを得たところ、収率は８０％であった。

【００５２】

【化１７】

【００５３】［実施例13］式（I-1）の化合物3gから
（２）の方法にしたがって以下に示すアクリドン誘導体
4fを得たところ、収率は８０％であった。

【００５４】

【化１８】

【００５５】（試験例１）ＨＩＶ持続感染細胞を用いた
抗ＨＩＶ活性試験実施例１，３，６，８〜13で得られたアクリドン誘導体
（薬剤）をそれぞれ、９６穴マイクロプレートの各穴を
用いて培養液（日水製薬社製、商品名：ＲＰＭＩ１６４
０、１００μｌ）で希釈し、各アクリドン誘導体につい
て濃度０．１６〜１００μｇ／ｍｌの溶液を調製した。
次いで、各溶液にＯＭ１０．１細胞培養液（１×１０⁴
細胞／１００μｌ）を加えて、３７℃で３０分間放置し
た。その後、ＴＮＦ（腫瘍壊死因子、Ｇｅｎｚｙｍｅ社
製、商品名：ＴＮＦ−α、１ｎｇ／ｍｌ）を各溶液に加
えて２日間培養した。２日後、培養上精を５０μｌ採取
し、ＨＩＶ−１ｐ２４ａｎｔｉｇｅｎＥＬＩＳＡキット
（Celluler社製）を用いてｐ２４抗原を測定した。薬剤
を加えていない対照と比較し、ｐ２４抗原の増加を５０
％抑制する薬剤濃度（５０％有効濃度（ＥＣ₅₀）、μｇ
／ｍｌ）を求めた。得られた結果を以下の表１に示す。

【００５６】

【表１】

【００５７】表１に示した結果から明らかなように、実
施例１，３，６，８〜13で得られた本発明のアクリドン
誘導体は、ＨＩＶ持続感染細胞におけるｐ２４抗原の増
加を充分に抑制したことから、免疫細胞のゲノムに組み
込まれたＨＩＶＤＮＡのＲＮＡへの複製を充分に阻止す
る優れた抗ＨＩＶ活性を有していることが認められた。

【００５８】（試験例２）細胞毒性試験上記各溶液の培養を更に２日間継続した後、実施例１，
３，６，８，12で得られたアクリドン誘導体（薬剤）の
細胞毒性をＭＴＴ（3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)2,5-
diphenyltetrazolium bromide）法により測定した。す
なわち、培養された各溶液にＭＴＴ液（Ｓｉｇｍａ社
製、商品名：ＭＴＴ、７．５ｍｇ／ｍｌ）２０μｌを加
えて３７℃で３時間放置し、溶出液（１０％（ｖ／ｖ）
トリトンＸ−１００含有塩酸イソプロパノール溶液（塩
酸：イソプロパノール＝１：２５０））を更に加えてホ
ルマザンを可溶化し、各溶液の色調変化をバイオラッド
社製、マイクロプレートリーダーを用いて５４０ｎｍと
６９０ｎｍの二波長で測定した。薬剤を加えていない対
照と比較し、正常細胞の増殖を５０％阻害する薬剤濃度
（５０％阻害濃度（ＣＣ₅₀）、μｇ／ｍｌ）を求めた。
得られた結果を上記の表１に示す。

【００５９】表１に示した結果から明らかなように、実
施例１，３，６，８，12で得られた本発明のアクリドン
誘導体は、正常細胞の増殖を５０％阻害する薬剤濃度
（ＣＣ₅₀）が前記５０％有効濃度（ＥＣ₅₀）より充分に
高いことから、抗ＨＩＶ剤として有効でかつ正常細胞へ
の影響が比較的少ないことが認められた。特に、実施例
３，６，８，12で得られた本発明のアクリドン誘導体
は、ＣＣ₅₀／ＥＣ₅₀の値が２以上であることから、医薬
品として有望であることが確認された。

【００６０】（製剤例１）錠剤アクリドン誘導体３０．０ｍｇ微粉末セルロース２５．０ｍｇ乳糖３９．５ｍｇスターチ４０．０ｍｇタルク５．０ｍｇステアリン酸マグネシウムＯ．５ｍｇ常法によって上記組成を有する錠剤を調製したところ、
本発明のアクリドン誘導体の抗ＨＩＶ活性が阻害される
ことなく、抗ＨＩＶ錠剤を得ることができた。

【００６１】（製剤例２）カプセル剤アクリドン誘導体３０．０ｍｇ乳糖４０．０ｍｇスターチ１５．０ｍｇタルク５．０ｍｇ常法によって上記組成を有するカプセル剤を調製すると
ころ、本発明のアクリドン誘導体の抗ＨＩＶ活性が阻害
されることなく、抗ＨＩＶカプセル剤を得ることができ
た。

【００６２】（製剤例３）注射剤アクリドン誘導体３０．０ｍｇグルコース１００．０ｍｇ上記成分を注射用精製水に溶解して上記組成を有する注
射剤を調製するところ、本発明のアクリドン誘導体の抗
ＨＩＶ活性が阻害されることなく、抗ＨＩＶ注射剤を得
ることができた。

【００６３】

【発明の効果】本発明によれば、レトロウイルス、特に
ＨＩＶに感染した後、免疫細胞のゲノムに組み込まれた
上記ウイルスＤＮＡのＲＮＡへの複製を充分に阻止する
ことが可能な、優れた抗ＨＩＶ活性を有する医薬組成物
を得ることが可能となる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者茂田士郎福島県福島市大森久保内147−28 (72)発明者横田智之福島県福島市飯坂町平野字北下里20−１

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】下記式（Ｉ）で表されるアクリドン誘導
体を有効成分として含有する医薬組成物。【化１】（式（Ｉ）中、Ｒはアルキル基を示し、Ｒ¹〜Ｒ⁴はそれ
ぞれ、同一であっても異なっていてもよく、水素原子、
水酸基、ハロゲン原子及びアルコキシ基からなる群から
選択されるいずれかを示す。）
【請求項２】抗レトロウイルス剤である、請求項１記
載の医薬組成物。
【請求項３】抗ＨＩＶ剤である、請求項１記載の医薬
組成物。
【請求項４】前記式（Ｉ）中、Ｒは炭素数１〜５の低
級アルキル基、Ｒ¹は水酸基、水素原子又は炭素数１〜
５の低級アルコキシ基、Ｒ²は水素原子又は水酸基、Ｒ³
は水酸基、水素原子又は炭素数１〜５の低級アルコキシ
基、Ｒ⁴は水素原子、水酸基又はハロゲン原子である、
請求項１記載の医薬組成物。
【請求項５】前記式（Ｉ）中、Ｒがメチル基である、
請求項１記載の医薬組成物。
【請求項６】前記式（Ｉ）中、Ｒがメチル基、Ｒ²が
水素原子である、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項７】前記式（Ｉ）中、Ｒがメチル基、Ｒ¹が
水酸基、Ｒ²〜Ｒ⁴が水素原子である、請求項１記載の医
薬組成物。