JPH11211695A - 電気泳動用ゲル - Google Patents
電気泳動用ゲルInfo
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- JPH11211695A JPH11211695A JP10022530A JP2253098A JPH11211695A JP H11211695 A JPH11211695 A JP H11211695A JP 10022530 A JP10022530 A JP 10022530A JP 2253098 A JP2253098 A JP 2253098A JP H11211695 A JPH11211695 A JP H11211695A
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- electrophoresis
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- aqueous gel
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 ゲル中のポリマー濃度が４．５％以下の低濃
度である縦置き式電気泳動用水性ゲルが泳動終了後の染
色時に破損しやすい欠点を防止する。 【解決手段】 面状水性ゲルの一面が、水性ゲルに付着
能を有する水不溶性材に接触しており、他の一面が上部
に凹状の切れ込みの入った板状剛体に接触している電気
泳動用ゲルを用いて電気泳動を行い、泳動終了後、水性
ゲルに付着能を有する水不溶性材に接着した状態の低濃
度水性ゲルを染色することにより、ゲルの破損を防止す
ることができる。
度である縦置き式電気泳動用水性ゲルが泳動終了後の染
色時に破損しやすい欠点を防止する。 【解決手段】 面状水性ゲルの一面が、水性ゲルに付着
能を有する水不溶性材に接触しており、他の一面が上部
に凹状の切れ込みの入った板状剛体に接触している電気
泳動用ゲルを用いて電気泳動を行い、泳動終了後、水性
ゲルに付着能を有する水不溶性材に接着した状態の低濃
度水性ゲルを染色することにより、ゲルの破損を防止す
ることができる。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、生化学、医学の分
野において、生体由来物質、例えば蛋白質や核酸等の分
離分析に用いられる電気泳動用ゲルに関するものであ
り、特にポリマー濃度が低い脆弱な水性ゲルを内蔵する
容器あるいはゲル支持材に関する。
野において、生体由来物質、例えば蛋白質や核酸等の分
離分析に用いられる電気泳動用ゲルに関するものであ
り、特にポリマー濃度が低い脆弱な水性ゲルを内蔵する
容器あるいはゲル支持材に関する。
【０００２】
【従来の技術】架橋ポリアクリルアミド水性ゲルあるい
は架橋ポリＮ−ビニルカルボン酸アミド水性ゲルは電気
泳動用ゲルとして賞用されている。電気泳動時における
蛋白質、核酸（ＤＮＡ，ＲＮＡ等）のゲル中の泳動速度
はゲルを構成する水性ポリマー濃度が低い程ポアサイズ
が大きくなり高分子量の蛋白質や核酸の分析に対応する
ことができる。特に核酸の分析においてはポリマー濃度
の低い（４．５％以下）水性ゲルの利用が望まれてい
る。また通電時のゲルの発熱による温度上昇を防止する
ためには、ゲルを垂直に立て、片面を電極液に接してセ
ットし、接した液によりゲルを冷却する方法が一般的で
ある。 この様にして使用するゲルはガラスやプラスチ
ック等の容器にてゲルを支持すると共に電気絶縁を行
い、電極（マイナス極）液側の容器壁の上部に凹状の切
れ込みが入って水性ゲルと電極（マイナス極）液が接触
して上下方向に通電され、ゲル上部に分析試料をセット
するウェルを有する構造を持つのが一般的である。電気
泳動が終了したゲルは容器よりはずされ、柔らかな裸の
支持体無しの水性ゲルのままで染色に供される。
は架橋ポリＮ−ビニルカルボン酸アミド水性ゲルは電気
泳動用ゲルとして賞用されている。電気泳動時における
蛋白質、核酸（ＤＮＡ，ＲＮＡ等）のゲル中の泳動速度
はゲルを構成する水性ポリマー濃度が低い程ポアサイズ
が大きくなり高分子量の蛋白質や核酸の分析に対応する
ことができる。特に核酸の分析においてはポリマー濃度
の低い（４．５％以下）水性ゲルの利用が望まれてい
る。また通電時のゲルの発熱による温度上昇を防止する
ためには、ゲルを垂直に立て、片面を電極液に接してセ
ットし、接した液によりゲルを冷却する方法が一般的で
ある。 この様にして使用するゲルはガラスやプラスチ
ック等の容器にてゲルを支持すると共に電気絶縁を行
い、電極（マイナス極）液側の容器壁の上部に凹状の切
れ込みが入って水性ゲルと電極（マイナス極）液が接触
して上下方向に通電され、ゲル上部に分析試料をセット
するウェルを有する構造を持つのが一般的である。電気
泳動が終了したゲルは容器よりはずされ、柔らかな裸の
支持体無しの水性ゲルのままで染色に供される。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】ポリマー濃度の低い水
性ゲルは壊れやすく、柔らかな裸の支持体無しの状態で
染色操作を行う際にゲルを破損し易い欠点があり、改良
が望まれていた。
性ゲルは壊れやすく、柔らかな裸の支持体無しの状態で
染色操作を行う際にゲルを破損し易い欠点があり、改良
が望まれていた。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者は電極液と接し
て冷却を行う側の容器材質として上部に凹状の切れ込み
の入った板状剛体を用いて剥離に便ならしめ、他方のゲ
ル接触面にゲルボンドフィルムのごとき電気泳動用水性
ゲルに付着能を示す水不溶性材を用いることにより染色
時のゲル破壊を防止し上記課題を解決することに成功し
た。
て冷却を行う側の容器材質として上部に凹状の切れ込み
の入った板状剛体を用いて剥離に便ならしめ、他方のゲ
ル接触面にゲルボンドフィルムのごとき電気泳動用水性
ゲルに付着能を示す水不溶性材を用いることにより染色
時のゲル破壊を防止し上記課題を解決することに成功し
た。
【０００５】本発明の請求項１の発明は、ウェルを有す
る面状の電気泳動用水性ゲルの一面が、電気泳動用水性
ゲルに付着能（ゲルボンド性）を示す水不溶性材に接触
していることを特徴とする電気泳動用ゲルである。
る面状の電気泳動用水性ゲルの一面が、電気泳動用水性
ゲルに付着能（ゲルボンド性）を示す水不溶性材に接触
していることを特徴とする電気泳動用ゲルである。
【０００６】本発明の請求項２の発明は、電気泳動用水
性ゲルが、アクリルアミドと水溶性ジビニル化合物を含
有するモノマー水溶液をラジカル重合する事により製造
することを特徴とする請求項１に記載の電気泳動用ゲル
である。
性ゲルが、アクリルアミドと水溶性ジビニル化合物を含
有するモノマー水溶液をラジカル重合する事により製造
することを特徴とする請求項１に記載の電気泳動用ゲル
である。
【０００７】本発明の請求項３の発明は、電気泳動用水
性ゲルが、Ｎ−ビニルカルボン酸アミドと水溶性ジビニ
ル化合物を含有するモノマー水溶液をラジカル重合する
事により製造することを特徴とする請求項１に記載の電
気泳動用ゲルである。
性ゲルが、Ｎ−ビニルカルボン酸アミドと水溶性ジビニ
ル化合物を含有するモノマー水溶液をラジカル重合する
事により製造することを特徴とする請求項１に記載の電
気泳動用ゲルである。
【０００８】本発明の請求項４の発明は、電気泳動用水
性ゲルのゲルボンド性を示す水不溶性材に接触しない面
が上部に凹状の切れ込みの入った板状剛体に接触してい
ることを特徴とする請求項１ないし請求項３に記載の電
気泳動用ゲルである。
性ゲルのゲルボンド性を示す水不溶性材に接触しない面
が上部に凹状の切れ込みの入った板状剛体に接触してい
ることを特徴とする請求項１ないし請求項３に記載の電
気泳動用ゲルである。
【０００９】本発明の請求項５の発明は、上部に凹状の
切れ込みの入った板状剛体の材質がガラスまたは水不溶
性プラスチックであることを特徴とする請求項１ないし
請求項４に記載の電気泳動用ゲルである。
切れ込みの入った板状剛体の材質がガラスまたは水不溶
性プラスチックであることを特徴とする請求項１ないし
請求項４に記載の電気泳動用ゲルである。
【００１０】本発明の請求項６の発明は、電気泳動用水
性ゲルが、４．５％以下のポリマー濃度のゲル部分を有
することを特徴とする請求項１ないし請求項５に記載の
電気泳動用ゲルである。
性ゲルが、４．５％以下のポリマー濃度のゲル部分を有
することを特徴とする請求項１ないし請求項５に記載の
電気泳動用ゲルである。
【００１１】
【発明の実施の形態】本発明の第一の限定は、ウェルを
有する面状の電気泳動用水性ゲルの一面が、電気泳動用
水性ゲルに付着能（ゲルボンド性）を示す水不溶性材に
接触していることを特徴とする電気泳動用ゲルである。
本発明の第二の限定は、請求項１に記載の電気泳動用ゲ
ルにおいて、電気泳動用水性ゲルが、アクリルアミドと
水溶性ジビニル化合物を含有するモノマー水溶液をラジ
カル重合する事により製造することを特徴とする。本発
明の第三の限定は、請求項１に記載の電気泳動用ゲルに
おいて、電気泳動用水性ゲルが、Ｎ−ビニルカルボン酸
アミドと水溶性ジビニル化合物を含有するモノマー水溶
液をラジカル重合する事により製造することを特徴とす
る。本発明の第四の限定は、請求項１ないし請求項３に
記載の電気泳動用ゲルにおいて、電気泳動用水性ゲルの
ゲルボンド性を示す水不溶性材に接触しない面が上部に
凹状の切れ込みの入った板状剛体に接触していることを
特徴とする。本発明の第五の限定は、請求項１ないし請
求項４に記載の電気泳動用ゲルにおいて、上部に凹状の
切れ込みの入った板状剛体の材質がガラスまたは水不溶
性プラスチックであることを特徴とする。本発明の第六
の限定は、請求項１ないし請求項５に記載の電気泳動用
ゲルにおいて、電気泳動用水性ゲルが、４．５％以下の
ポリマー濃度のゲル部分を有することを特徴とする。
有する面状の電気泳動用水性ゲルの一面が、電気泳動用
水性ゲルに付着能（ゲルボンド性）を示す水不溶性材に
接触していることを特徴とする電気泳動用ゲルである。
本発明の第二の限定は、請求項１に記載の電気泳動用ゲ
ルにおいて、電気泳動用水性ゲルが、アクリルアミドと
水溶性ジビニル化合物を含有するモノマー水溶液をラジ
カル重合する事により製造することを特徴とする。本発
明の第三の限定は、請求項１に記載の電気泳動用ゲルに
おいて、電気泳動用水性ゲルが、Ｎ−ビニルカルボン酸
アミドと水溶性ジビニル化合物を含有するモノマー水溶
液をラジカル重合する事により製造することを特徴とす
る。本発明の第四の限定は、請求項１ないし請求項３に
記載の電気泳動用ゲルにおいて、電気泳動用水性ゲルの
ゲルボンド性を示す水不溶性材に接触しない面が上部に
凹状の切れ込みの入った板状剛体に接触していることを
特徴とする。本発明の第五の限定は、請求項１ないし請
求項４に記載の電気泳動用ゲルにおいて、上部に凹状の
切れ込みの入った板状剛体の材質がガラスまたは水不溶
性プラスチックであることを特徴とする。本発明の第六
の限定は、請求項１ないし請求項５に記載の電気泳動用
ゲルにおいて、電気泳動用水性ゲルが、４．５％以下の
ポリマー濃度のゲル部分を有することを特徴とする。
【００１２】本発明において、ゲルボンド性を示す水不
溶性材としては、横置き水平式（サブマリンタイプ）電
気泳動法に使用されるゲルボンドフィルムと称される、
片面にゲル接着層を塗布したＰＥＴフィルムを使用する
ことが最も簡便である。本質的にゲル接着層を塗布した
ものであれば、フィルム状だけではなく板状剛体であっ
ても使用できることは言うまでもない。本発明の適用範
囲はゲル上部に分析試料をセットするウェルを有する構
造を規定していることから、ゲルを垂直に立て、片面を
電極液に接してセットし、接した液によりゲルを冷却す
る縦置き式スラブゲルであることは明らかである。本方
式は冷却に用いる電極液の対流がスムーズであり、通電
時のゲルの発熱による温度上昇を防止するのに特に適し
た方法であり、分析試料も他の試料と隔離されたウェル
にセットされることから横置き水平式電気泳動法よりも
明瞭な分析ができる。ウェルは、プレートと呼ばれる容
器に、コームと呼ばれる櫛状のプラスチックをセットし
た状態でモノマー水溶液の重合を行うことにより形成す
る。モノマー水溶液の重合は、過硫酸アンモニウム（略
称：ＡＰＳ）とＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルエチ
レンジアミン（略称：ＴＥＭＥＤ）の組み合わせの如き
重合開始剤より発生するラジカルあるいは紫外線照射に
より発性するラジカル等によりラジカル重合を行うのが
一般的である。
溶性材としては、横置き水平式（サブマリンタイプ）電
気泳動法に使用されるゲルボンドフィルムと称される、
片面にゲル接着層を塗布したＰＥＴフィルムを使用する
ことが最も簡便である。本質的にゲル接着層を塗布した
ものであれば、フィルム状だけではなく板状剛体であっ
ても使用できることは言うまでもない。本発明の適用範
囲はゲル上部に分析試料をセットするウェルを有する構
造を規定していることから、ゲルを垂直に立て、片面を
電極液に接してセットし、接した液によりゲルを冷却す
る縦置き式スラブゲルであることは明らかである。本方
式は冷却に用いる電極液の対流がスムーズであり、通電
時のゲルの発熱による温度上昇を防止するのに特に適し
た方法であり、分析試料も他の試料と隔離されたウェル
にセットされることから横置き水平式電気泳動法よりも
明瞭な分析ができる。ウェルは、プレートと呼ばれる容
器に、コームと呼ばれる櫛状のプラスチックをセットし
た状態でモノマー水溶液の重合を行うことにより形成す
る。モノマー水溶液の重合は、過硫酸アンモニウム（略
称：ＡＰＳ）とＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルエチ
レンジアミン（略称：ＴＥＭＥＤ）の組み合わせの如き
重合開始剤より発生するラジカルあるいは紫外線照射に
より発性するラジカル等によりラジカル重合を行うのが
一般的である。
【００１３】本発明のゲルは前述の如く縦置き式スラブ
ゲルであることから、上部ウェル部分は電極（マイナス
極）液側の容器壁の上部に凹状の切れ込みが入って水性
ゲルと電極（マイナス極）液が接触して上下方向に通電
できる必要が有り、この凹状の切れ込みが入った剛体の
容器壁を染色液に浸けるのは試料整理の点で現実的では
ないことから、該容器壁は剥離する側とし、他方のゲル
ボンド性を示す水不溶性材から成る容器壁は単純な長方
形をとることが望ましい。上部に凹状の切れ込みの入っ
た板状剛体の材質はガラスまたは、ＰＥＴ等の水不溶性
プラスチックであることが望ましい。上記ゲルボンド性
を示す単純な長方形の容器壁と上部に凹状の切れ込みの
入った板状剛体の容器壁が向かい合い、スペーサーによ
りモノマー水溶液が充填される空間を有するサンドイッ
チ構造の容器内でモノマー水溶液を重合することによ
り、一面がゲルボンド性を示す水不溶性材に接着した水
性ゲルを製造することができる。 上記容器にはコーム
がセットしてあることは言うまでもない。この様にして
得られた、一面がゲルボンド性を示す水不溶性材に接着
した水性ゲルは、ポリマー濃度が低く脆弱であっても、
通常の縦置き式スラブゲルの如く柔らかな裸の支持体無
しの状態で染色操作を行うのではなく、ゲルボンド性を
示す水不溶性材で補強されているため、染色時にゲルを
破損することが無い。
ゲルであることから、上部ウェル部分は電極（マイナス
極）液側の容器壁の上部に凹状の切れ込みが入って水性
ゲルと電極（マイナス極）液が接触して上下方向に通電
できる必要が有り、この凹状の切れ込みが入った剛体の
容器壁を染色液に浸けるのは試料整理の点で現実的では
ないことから、該容器壁は剥離する側とし、他方のゲル
ボンド性を示す水不溶性材から成る容器壁は単純な長方
形をとることが望ましい。上部に凹状の切れ込みの入っ
た板状剛体の材質はガラスまたは、ＰＥＴ等の水不溶性
プラスチックであることが望ましい。上記ゲルボンド性
を示す単純な長方形の容器壁と上部に凹状の切れ込みの
入った板状剛体の容器壁が向かい合い、スペーサーによ
りモノマー水溶液が充填される空間を有するサンドイッ
チ構造の容器内でモノマー水溶液を重合することによ
り、一面がゲルボンド性を示す水不溶性材に接着した水
性ゲルを製造することができる。 上記容器にはコーム
がセットしてあることは言うまでもない。この様にして
得られた、一面がゲルボンド性を示す水不溶性材に接着
した水性ゲルは、ポリマー濃度が低く脆弱であっても、
通常の縦置き式スラブゲルの如く柔らかな裸の支持体無
しの状態で染色操作を行うのではなく、ゲルボンド性を
示す水不溶性材で補強されているため、染色時にゲルを
破損することが無い。
【００１４】本発明の水性ゲルを形成するポリマーとし
ては従来公知のポリアクリルアミド系あるいはポリＮ−
ビニルカルボン酸アミド系のゲルが使用可能である。具
体的には、アクリルアミドと水溶性ジビニル化合物を含
有するモノマー水溶液（緩衝剤を含む）をラジカル重合
する事あるいはＮ−ビニルカルボン酸アミドと水溶性ジ
ビニル化合物を含有するモノマー水溶液（緩衝剤を含
む）をラジカル重合する事により製造される。本発明の
水溶性ジビニル化合物としてはＮ，Ｎ−メチレンビスア
クリルアミド（略称：ＢＩＳ）が最も多用されている
が、Ｎ−アリルアクリルアミド、Ｎ，Ｎ−ジアリル酒石
酸アミド等の水溶性ジビニル化合物を用いることができ
る。モノマー水溶液には、ゲルに弾力性を持たせるため
に、アガロース、ポリアクリルアミド、ポリビニルアル
コール、ポリビニルピロリドン、ポリエチレンオキサイ
ド、ポリメチルビニルエーテル、ポリＮ−ビニルカルボ
ン酸アミド等の水溶性ポリマーを含有させることもでき
る。一般に、電気泳動用ゲルには、緩衝剤が含まれる。
本発明において、トリス−（ヒドロキシメチル）アミノ
メタン（略称：ＴＲＩＳ）、バルビタール、クエン酸あ
るいは等電点電気泳動用緩衝剤を水性ゲル中に含むこと
ができる。また、必要に応じてドデシル硫酸ナトリウム
（略称：ＳＤＳ）、セチルトリメチルアンモニウムブロ
ミド、ポリエチレンオキサイドソルビタンモノオレート
等の界面活性剤を含むことができる。本発明が特に賞用
される水性ゲルのポリマー濃度（仕込み時のモノマー濃
度）は４．５％以下の場合に特に有用であり、グラディ
エントゲルの低濃度部分あるいはスタッキングゲルの部
分等の如く一部分であってもポリマー濃度４．５％以下
のゲル部分を有する場合にも適用され、当然のことなが
らゲル全域にわたってポリマー濃度４．５％以下の場合
にも適用される。
ては従来公知のポリアクリルアミド系あるいはポリＮ−
ビニルカルボン酸アミド系のゲルが使用可能である。具
体的には、アクリルアミドと水溶性ジビニル化合物を含
有するモノマー水溶液（緩衝剤を含む）をラジカル重合
する事あるいはＮ−ビニルカルボン酸アミドと水溶性ジ
ビニル化合物を含有するモノマー水溶液（緩衝剤を含
む）をラジカル重合する事により製造される。本発明の
水溶性ジビニル化合物としてはＮ，Ｎ−メチレンビスア
クリルアミド（略称：ＢＩＳ）が最も多用されている
が、Ｎ−アリルアクリルアミド、Ｎ，Ｎ−ジアリル酒石
酸アミド等の水溶性ジビニル化合物を用いることができ
る。モノマー水溶液には、ゲルに弾力性を持たせるため
に、アガロース、ポリアクリルアミド、ポリビニルアル
コール、ポリビニルピロリドン、ポリエチレンオキサイ
ド、ポリメチルビニルエーテル、ポリＮ−ビニルカルボ
ン酸アミド等の水溶性ポリマーを含有させることもでき
る。一般に、電気泳動用ゲルには、緩衝剤が含まれる。
本発明において、トリス−（ヒドロキシメチル）アミノ
メタン（略称：ＴＲＩＳ）、バルビタール、クエン酸あ
るいは等電点電気泳動用緩衝剤を水性ゲル中に含むこと
ができる。また、必要に応じてドデシル硫酸ナトリウム
（略称：ＳＤＳ）、セチルトリメチルアンモニウムブロ
ミド、ポリエチレンオキサイドソルビタンモノオレート
等の界面活性剤を含むことができる。本発明が特に賞用
される水性ゲルのポリマー濃度（仕込み時のモノマー濃
度）は４．５％以下の場合に特に有用であり、グラディ
エントゲルの低濃度部分あるいはスタッキングゲルの部
分等の如く一部分であってもポリマー濃度４．５％以下
のゲル部分を有する場合にも適用され、当然のことなが
らゲル全域にわたってポリマー濃度４．５％以下の場合
にも適用される。
【００１５】
【実施例】以下に本発明について実施例を用いて具体的
に説明するが、この発明は実施例の範囲のみに制限され
るものではなく、前記特許の各請求項に記載された事項
によって構成される技術的思想の範囲を超えないかぎ
り、種々に変更できるものであることは言うまでもな
い。
に説明するが、この発明は実施例の範囲のみに制限され
るものではなく、前記特許の各請求項に記載された事項
によって構成される技術的思想の範囲を超えないかぎ
り、種々に変更できるものであることは言うまでもな
い。
【００１６】（ゲル調整）横幅１２ｃｍ、縦１０ｃｍの
長方形の市販ゲルボンドフィルムをガラス板に密着して
支持し、上部に凹状の切れ込みの入ったガラス板に厚さ
１ｍｍのガラス製スペーサーをはりつけたものを押しつ
け、シリコンゴムで下部液漏れを封じた型枠（容器）に
注射器によりモノマー水溶液を注入し、最後にウェルを
形成させるために凹状の切れ込みよりＰＥ製コームを押
し込んで２７°Ｃで３時間放置して重合を完結させ、本
発明に使用する電気泳動用ゲル（ゲル−１）を作成し
た。モノマー水溶液の組成はアクリルアミドモノマー
２．９２％，ＢＩＳ：０．０８％，ＴＲＩＳ：０．４モ
ル（ＨＣｌによりＰＨ８．８に調整），ＳＤＳ：０．１
％を含有する水溶液に、ＴＥＭＥＤおよびＡＰＳを適量
混合して調整した。
長方形の市販ゲルボンドフィルムをガラス板に密着して
支持し、上部に凹状の切れ込みの入ったガラス板に厚さ
１ｍｍのガラス製スペーサーをはりつけたものを押しつ
け、シリコンゴムで下部液漏れを封じた型枠（容器）に
注射器によりモノマー水溶液を注入し、最後にウェルを
形成させるために凹状の切れ込みよりＰＥ製コームを押
し込んで２７°Ｃで３時間放置して重合を完結させ、本
発明に使用する電気泳動用ゲル（ゲル−１）を作成し
た。モノマー水溶液の組成はアクリルアミドモノマー
２．９２％，ＢＩＳ：０．０８％，ＴＲＩＳ：０．４モ
ル（ＨＣｌによりＰＨ８．８に調整），ＳＤＳ：０．１
％を含有する水溶液に、ＴＥＭＥＤおよびＡＰＳを適量
混合して調整した。
【００１７】（比較ゲル調整）横幅１２ｃｍ、縦１０ｃ
ｍの長方形のガラス板に、上部に凹状の切れ込みの入っ
たガラス板に厚さ１ｍｍのガラス製スペーサーをはりつ
けたものを押しつけ、シリコンゴムで下部液漏れを封じ
た型枠（容器）に注射器によりモノマー水溶液を注入
し、最後にウェルを形成させるために凹状の切れ込みよ
りＰＥ製コームを押し込んで２７°Ｃで３時間放置して
重合を完結させ、本発明の比較例に使用する電気泳動用
ゲル（比較ゲル−１）を作成した。モノマー水溶液の組
成はアクリルアミドモノマー２．９２％，ＢＩＳ：０．
０８％，ＴＲＩＳ：０．４Ｍ（ＨＣｌによりＰＨ８．８
に調整），ＳＤＳ：０．１％を含有する水溶液に、ＴＥ
ＭＥＤおよびＡＰＳを適量混合してゲル−１の作成に用
いたのと同様の組成に調整した。
ｍの長方形のガラス板に、上部に凹状の切れ込みの入っ
たガラス板に厚さ１ｍｍのガラス製スペーサーをはりつ
けたものを押しつけ、シリコンゴムで下部液漏れを封じ
た型枠（容器）に注射器によりモノマー水溶液を注入
し、最後にウェルを形成させるために凹状の切れ込みよ
りＰＥ製コームを押し込んで２７°Ｃで３時間放置して
重合を完結させ、本発明の比較例に使用する電気泳動用
ゲル（比較ゲル−１）を作成した。モノマー水溶液の組
成はアクリルアミドモノマー２．９２％，ＢＩＳ：０．
０８％，ＴＲＩＳ：０．４Ｍ（ＨＣｌによりＰＨ８．８
に調整），ＳＤＳ：０．１％を含有する水溶液に、ＴＥ
ＭＥＤおよびＡＰＳを適量混合してゲル−１の作成に用
いたのと同様の組成に調整した。
【００１８】（電気泳動試験）ゲル−１をアトー株式会
社製縦置き式電気泳動装置にセットし、蛋白質試料を各
々のウェルに５μｌずつ注入し、電気泳動を行った。泳
動用緩衝液は、０．０２５ＭのＴＲＩＳ、および０．１
９２Ｍのグリシン含有水溶液で０．１％のＳＤＳを含
む。蛋白質試料は市販ＨＭＷ−ＳＤＳ粉末の２％蒸留水
溶液（ＢＰＢ着色済）を用いた。電気泳動は、２０ｍＡ
でＢＰＢの泳動末端が下から５ｍｍのところで通電を中
止した。
社製縦置き式電気泳動装置にセットし、蛋白質試料を各
々のウェルに５μｌずつ注入し、電気泳動を行った。泳
動用緩衝液は、０．０２５ＭのＴＲＩＳ、および０．１
９２Ｍのグリシン含有水溶液で０．１％のＳＤＳを含
む。蛋白質試料は市販ＨＭＷ−ＳＤＳ粉末の２％蒸留水
溶液（ＢＰＢ着色済）を用いた。電気泳動は、２０ｍＡ
でＢＰＢの泳動末端が下から５ｍｍのところで通電を中
止した。
【００１９】（染色）通電終了後にガラス板を除去し、
ゲルボンドフィルムに接着した状態の水性ゲルをゲルボ
ンドフィルムと共に、染色液に１時間、脱色液に（適宜
新しい浴液に更新しながら）１晩浸漬放置した。染色液
の組成は０．０５％クマシーブリリアントブルーＧ−２
５０、１０％酢酸、３０％メタノールである。脱色液の
組成は１２％酢酸、１５％メタノールである。全操作を
終了しても水性ゲルの破損は無く、泳動像は明瞭であ
り、乾燥して保存するのに適していた。
ゲルボンドフィルムに接着した状態の水性ゲルをゲルボ
ンドフィルムと共に、染色液に１時間、脱色液に（適宜
新しい浴液に更新しながら）１晩浸漬放置した。染色液
の組成は０．０５％クマシーブリリアントブルーＧ−２
５０、１０％酢酸、３０％メタノールである。脱色液の
組成は１２％酢酸、１５％メタノールである。全操作を
終了しても水性ゲルの破損は無く、泳動像は明瞭であ
り、乾燥して保存するのに適していた。
【００２０】（比較例）上記ゲル−１に替えて、比較ゲ
ル−１を用いて上記と同様の電気泳動試験を行い、通電
終了後にガラス板をはずして補強材無しの水性ゲルを染
色しようと、ゲルとガラス板の間にヘラをいれたとこ
ろ、水性ゲルは破れ、次工程の染色を行うことができな
かった。
ル−１を用いて上記と同様の電気泳動試験を行い、通電
終了後にガラス板をはずして補強材無しの水性ゲルを染
色しようと、ゲルとガラス板の間にヘラをいれたとこ
ろ、水性ゲルは破れ、次工程の染色を行うことができな
かった。
【００２１】
【発明の効果】上記の如く、本発明のゲルボンドフィル
ムに接着した状態の水性ゲルをゲルボンドフィルムと共
に取り扱って染色および脱色操作を行うことにより、比
較例において裸の水性ゲルを取り扱う際に生じたゲルの
破損を完全に解消することができ、分析技術の簡易化に
寄与するところが大きい。
ムに接着した状態の水性ゲルをゲルボンドフィルムと共
に取り扱って染色および脱色操作を行うことにより、比
較例において裸の水性ゲルを取り扱う際に生じたゲルの
破損を完全に解消することができ、分析技術の簡易化に
寄与するところが大きい。
Claims (6)
- 【請求項１】 ウェルを有する面状の電気泳動用水性ゲ
ルの一面が、電気泳動用水性ゲルに付着能（ゲルボンド
性）を示す水不溶性材に接触していることを特徴とする
電気泳動用ゲル。 - 【請求項２】 電気泳動用水性ゲルが、アクリルアミド
と水溶性ジビニル化合物を含有するモノマー水溶液をラ
ジカル重合する事により製造することを特徴とする請求
項１に記載の電気泳動用ゲル。 - 【請求項３】 電気泳動用水性ゲルが、Ｎ−ビニルカル
ボン酸アミドと水溶性ジビニル化合物を含有するモノマ
ー水溶液をラジカル重合する事により製造することを特
徴とする請求項１に記載の電気泳動用ゲル。 - 【請求項４】 電気泳動用水性ゲルのゲルボンド性を示
す水不溶性材に接触しない面が上部に凹状の切れ込みの
入った板状剛体に接触していることを特徴とする請求項
１ないし請求項３に記載の電気泳動用ゲル。 - 【請求項５】 上部に凹状の切れ込みの入った板状剛体
の材質がガラスまたは水不溶性プラスチックであること
を特徴とする請求項１ないし請求項４に記載の電気泳動
用ゲル。 - 【請求項６】 電気泳動用水性ゲルが、４．５％以下の
ポリマー濃度のゲル部分を有することを特徴とする請求
項１ないし請求項５に記載の電気泳動用ゲル。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP10022530A JPH11211695A (ja) | 1998-01-21 | 1998-01-21 | 電気泳動用ゲル |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP10022530A JPH11211695A (ja) | 1998-01-21 | 1998-01-21 | 電気泳動用ゲル |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH11211695A true JPH11211695A (ja) | 1999-08-06 |
Family
ID=12085364
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP10022530A Pending JPH11211695A (ja) | 1998-01-21 | 1998-01-21 | 電気泳動用ゲル |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH11211695A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002250715A (ja) * | 2001-02-26 | 2002-09-06 | Japan Science & Technology Corp | 電気泳動用強化ゲルとその製造方法 |
-
1998
- 1998-01-21 JP JP10022530A patent/JPH11211695A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002250715A (ja) * | 2001-02-26 | 2002-09-06 | Japan Science & Technology Corp | 電気泳動用強化ゲルとその製造方法 |
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