JPH11222432A - インターフェロンを誘起するアミド誘導体を含有する外用剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】アトピー性皮膚炎などの治療剤として有用な、
新規なアミド誘導体を含有する外用剤の提供。 【解決手段】下記式Ｉで示されるアミド誘導体及びその
医薬的に許容しうる酸付加塩と溶解・吸収促進剤、及び
基剤よりなる外用剤。 【化１】 （式中、Ｒ₁とＲ₂は低級アルキル基等、ＸとＹは独立し
て酸素原子、ＮＲ₄、ＣＲ₅等（Ｒ_4、Ｒ₅は独立して水
素、芳香環等）、Ｚは芳香環または複素環、Ｒ₃は水
素、低級アルコキシ基等、ｇ、ｉ、ｋは独立して０〜６
の整数、ｈ、ｊ、ｌは独立して０または１の整数、ｍは
０〜５の整数、ｎは２〜１２の整数をそれぞれ表す。）

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、強力にインターフ
ェロンを誘起し、皮膚好酸球浸潤反応を抑制するアトピ
ー性皮膚炎などの治療剤として有用な新規なアミド誘導
体を含有する外用剤である。

【０００２】

【従来の技術】アトピー性皮膚炎の治療には、従来より
基本的にステロイド剤の外用と抗ヒスタミン剤あるいは
抗アレルギー剤の内服が行われており、その他、減感作
療法、アレルゲン（ダニ・食物）除去療法、ＰＵＶＡ
（ソラレン−長波長紫外線照射）療法、細菌ワクチン療
法などが試みられている。しかし、いずれも決め手とな
るものではなく、特にステロイド外用剤は、切れ味は良
いが長期連投による皮膚の萎縮・毛細血管拡張・潮紅・
紫斑・易感染性などの副作用が問題となっている。

【０００３】最近、アトピー性皮膚炎治療の方向はステ
ロイドから作用メカニズムが新規なサイトカイン療法に
向かいつつある（中川秀巳,臨床免疫,27[supple 16] 59
7-602,1995, 小林祥子ら,臨床免疫,27,[supple 16] 603
-609,1995)。アトピー性皮膚炎患者においては、Ｔｈ１
ヘルパー細胞とＴｈ２ヘルパー細胞のバランスの不均衡
すなわちＴｈ２細胞優位の状態にあり、Ｔｈ２細胞から
のインターロイキン−４やインターロイキン−５などの
サイトカインの産生増大の結果、IgE産生や好酸球等の
炎症細胞の分化・増殖・浸潤を増強し炎症が惹起される
という説が有力となっている。一般に、感作されたヒト
の皮膚に抗原を投与すると投与直後と4〜8時間後に最大
となり24〜48時間持続する皮膚反応が生じる。前者を即
時型反応(IgE-肥満細胞が関与)、後者を遅発型アレルギ
ー反応と呼ぶ。特に遅発型反応は喘息を含むアレルギー
疾患の病態と密接な関係があると指摘されている。遅発
型反応のメカニズムは永らく不明であったが、今日では
IgE-肥満細胞が関与するＩ型アレルギー反応における時
間的に遅れた相、すなわちlate phase reactionof the
typeＩ allergy であり、Ｔｈ２ヘルパー細胞優位によ
る好酸球浸潤が深く関わっていると考えられるようにな
った（黒沢元博,臨床免疫,27(5),564-574,1995)。Ｔｈ
１ヘルパー細胞とＴｈ２ヘルパー細胞のバランスはイン
ターフェロンによって調節されており、インターフェロ
ン（α、γ）はＴｈ０細胞のＴｈ１細胞への分化を促進
する。従って、Ｔｈ２細胞優位を是正するインターフェ
ロン（α、γ）がアトピー性皮膚炎の治療に試みられる
ようになってきた。

【０００４】インターフェロン療法の主流はリコンビナ
ントなインターフェロンα（ Paukkonen K.et.al.:Act
a. Derm. Venereol.73,141-142,1993）やインターフェ
ロンγ（ Hanifin J.M.:J.Am.Dermatol.28,189-197,199
3, Nishioka K.et.al.:J.Dermatol. 22(3),181-185,199
5)の皮下注射であり、皮膚症状の改善と血中好酸球数の
減少が報告されている。インターフェロンは免疫強化作
用を有するのでステロイドでよく認められる易感染性等
の副作用は認められない。しかし、高コストであること
と別の副作用（発熱、感冒様症状、頭痛）が発現すると
いう点でまだ満足できる薬物とは言えない。

【０００５】インターフェロンそれ自身はまだ幾つかの
問題を残しているが、低分子化合物のインターフェロン
誘起剤が開発されればその局所適用（外用）によってス
テロイド外用剤及びインターフェロン注射剤の抱えてい
る問題（コストと副作用）を解決できる可能性は高い。
これまでインターフェロンを誘起する化合物が幾つか公
知となっている。例えば、１−置換−１Ｈ−イミダゾ
［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン類としては、抗ウ
イルス剤である１−イソブチル−１Ｈ−イミダゾ［４，
５−ｃ］キノリン−４−アミン（イミキモド）を始めと
して幾つか知られている（欧州特許第１４５３４０号、
米国特許第４６８９３３８号、米国特許第４６９８３４
８号、米国特許第４９２９６２４号、欧州特許第３８５
６３０号、米国特許第５３４６９０５号等）。

【０００６】それらのヒトでのインターフェロン誘起活
性は低く、また好酸球浸潤抑制作用も記載されていな
い。したがって、高いインターフェロン誘起活性を持つ
化合物を含有し、皮膚局所において好酸球の浸潤を抑制
する外用製剤が望まれる。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】従って本発明は、強力
なインターフェロン誘起活性による好酸球浸潤抑制作用
と優れた経皮吸収性を有し、従ってアトピー性皮膚炎な
どに有効な新規な化合物を含有する外用剤を提供するこ
とにある。

【０００８】

【課題を解決するための手段】上記の課題を解決する本
発明は以下の通りである。

【０００９】本発明の外用剤に含まれる化合物は下記式
Ｉで示されるアミド誘導体及びその医薬的に許容しうる
酸付加塩であり、これらを少なくとも効果を発揮するた
めに十分な量の溶解・吸収促進剤を含有する外用剤を提
供する。

【００１０】

【化２】

【００１１】（式Ｉ中、Ｒ₁およびＲ₂は炭素数１から６
の分岐していてもよいアルキル基を表し、またＲ₁とＲ₂
は一つになって環を形成していてもよい。またＲ₁また
はＲ₂のどちらかが、Ｘ、Ｙあるいはメチレン鎖中の任
意の原子と一つになって環を形成していてもよい。

【００１２】ＸおよびＹは独立して、酸素原子、Ｓ(О)
p（ｐは０から２の整数を表す。）、ＮＲ₄、ＣＲ₅＝Ｃ
Ｒ₆、ＣＲ₇Ｒ₈あるいは置換されていてもよいフェニレ
ン基を表す。ここで、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、Ｒ₇およびＲ₈は
独立して、水素原子、低級アルキル基、水酸基、低級ア
ルコキシ基、アミノ基、モノあるいはジ低級アルキル置
換アミノ基、カルボキシル基、低級アルコキシカルボニ
ル基、置換されていてもよい芳香環基、あるいは置換さ
れていてもよい複素環基を表す。

【００１３】Ｚは芳香環または複素環を表し、低級アル
キル基、水酸基、低級アルコキシ基あるいはハロゲンの
ような置換基を有していてもよい。

【００１４】Ｒ₃は水素原子、置換されていてもよいフ
ェニル基、低級アルキル基（フェニル基、フェノキシ
基、ベンジルオキシ基、低級アルコキシ基、アミノ基、
モノあるいはジ低級アルキル置換アミノ基、カルボキシ
ル基、あるいは低級アルコキシカルボニル基で置換され
ていてもよい。）を表す。

【００１５】ｇ、ｉおよびｋは独立して０から６の整数
を表し、ｈ、jおよびｌは独立して０または１を表し、
ｍは０から５の整数を、ｎは２から１２の整数を表
す。） 式Ｉで示されるアミド誘導体に医薬的に許容しうる酸付
加塩としては、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン
酸、酢酸、乳酸、マレイン酸、フマル酸、クエン酸、リ
ンゴ酸、酒石酸、シュウ酸、メタンスルホン酸、ｐ−ト
ルエンスルホン酸などの塩が挙げられ、常法により調製
される。

【００１６】式Ｉで示されるアミド誘導体の多くは、分
子内に不斉炭素を有しラセミ混合物であるが、必要に応
じて光学分割、不斉合成などの方法によって各光学活性
体を単離し、利用することが可能である。

【００１７】

【発明の実施の形態】本発明の式Ｉで示されるアミド誘
導体及びその医薬的に許容される酸付加塩（以下、酸付
加塩と略す）は、アトピー性皮膚炎治療剤として投与す
ることができる。

【００１８】外用剤の剤形は、軟膏、クリーム、ローシ
ョン、ゲル剤、貼付剤、スプレーなどが挙げられる。い
ずれの剤形においても、調製の際に適当な医薬・製剤的
に許容しうる添加物を用いることができる。添加物とし
ては、賦形剤、結合剤、滑沢剤、崩壊剤、希釈剤、風味
剤、着色剤、溶解剤、懸濁剤、乳化剤、保存剤、緩衝
剤、等張化剤、軟膏基剤、オイル、溶解補助剤、吸収促
進剤、接着剤、噴霧剤などが挙げられる。

【００１９】式Ｉで示されるアミド誘導体及びその酸付
加塩は、好酸球浸潤抑制作用を示すことから、それらの
作用が効果を及ぼす他の疾患、たとえばアレルギー性鼻
炎、じん麻疹、類天疱瘡、好酸球性膿疱性毛包炎、喘息
などに有用であることが示唆される。また、インターフ
ェロンα、γを強力に誘起することから、多発性骨髄
腫、腎癌、皮膚悪性腫瘍、膀胱癌、ヘアリー細胞白血
病、慢性骨髄性白血病などの各種癌疾患と慢性関節リウ
マチにも有用である。さらに、Ｂ型、Ｃ型慢性活動性肝
炎、単純ヘルペス性角膜炎、性器疣、尖圭コンジロー
マ、帯状疱疹、ＡＩＤＳなどの各種ウイルス性疾患にも
適応可能である。

【００２０】式Ｉに属する最も好ましい化合物は次式で
表される。

【００２１】N-[4-(4-Amino-1H-imidazo[4,5-c]quinoli
n-1-yl)butyl]-4-{[2-(dimethylamino)ethoxy]phenylme
thyl}benzamide

【００２２】

【化３】

【００２３】以下、化合物（II）と略す。

【００２４】この化合物は、例えば、以下の方法により
合成される。

【００２５】α−（２−ジメチルアミノエトキシ）−α
−フェニル−Ｐ−トルイル酸０.４４ｇ（１.４７mmol）
をクロロホルム１０mlに懸濁し、塩化チオニル０.２１m
l(２.９４mmol）を加え、２.５時間加熱還流する。反応
液を減圧下濃縮し、酸クロライド体の粗生成物を合成し
た後、１−（４−アミノブチル）−１Ｈ−イミダゾ
［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン０.３８ｇ（１.４
７mmol）をエタノール２２mlと水１５mlの混合溶媒に溶
解し、１Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液１.４７mlを加え
た後、氷冷下で先に得られた酸クロライド体のクロロホ
ルム５ml懸濁溶液を加え、２０分間撹拌させる。反応液
を炭酸水素ナトリウム水溶液に注ぎ、クロロホルムさら
にクロロホルム−メタノール（１０：１(v/v)）混液で
抽出し、有機層を乾燥し、溶媒を留去し、残渣をアルミ
ナカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノー
ル＝２００：１〜３０：１(v/v)）で精製する。最後に
エーテルでトリチュレートして濾取し、化合物（II）
０.４４ｇ（０.８２０mmol）を微橙白色粉末（ｍｐ：１
１０〜１１４℃）として得ることができる。

【００２６】式Ｉで示されるアミド誘導体及びその酸付
加塩は、外用剤（軟膏剤、クリーム、ローション、ゲル
剤）の基剤中で０．００１〜１０％、好ましくは０．０
４〜１％になるように用いられる。

【００２７】この発明では、式Ｉで示されるアミド誘導
体及びその酸付加塩が外用剤とするに際して、予め溶解
・吸収促進剤に溶解して用いられる。この発明の溶解・
吸収促進剤とは、好ましくは化合物を少なくとも０．０
１％以上の濃度に溶解しうるもので、かつ外用剤として
製剤化された際に式Ｉで示されるアミド誘導体及びその
酸付加塩を皮膚から吸収しうるものを意味する。換言す
れば式Ｉで示されるアミド誘導体及びその酸付加塩に溶
解能と吸収能を付与しうるものである。

【００２８】なお、溶解能または吸収能の一方のみを有
するものも、この発明の溶解・吸収促進剤の範囲に包含
されるものである。

【００２９】上記２つの要件を満たす基剤を種々検討し
た結果、次のものが溶解・吸収促進剤として挙げられ
る。

【００３０】１．アルコール類（エタノール、１，３ブ
タンジオール、グリセリン等） ２．高級脂肪酸（イソステアリン酸、オレイン酸等） ３．有機概念図上において有機性値が３０〜１０００、
無機性値が５０〜１０００、有機性値に対する無機性値
の比が０．５〜２．０の領域内にある溶解・吸収促進剤
で、例えば、炭酸低級アルキレン類（炭酸プロピレン、
炭酸エチレン等）；界面活性剤（ソルビタンモノラウレ
ート（ＳＰ−２０）、ソルビタンモノステアレート（Ｓ
Ｐ−６０）、ＤＭＳＯ等）；モノグリセリド（モノステ
アリン酸グリセリル（ＭＧＳ）、モノオレイン酸グリセ
リル（ＭＧＯ））；クロタミトン。

【００３１】４．これらの混合物 本明細書において、有機概念図とは、すべての有機化合
物の根源をメタン（ＣＨ₄）とし、ほかの化合物はすべ
てメタンの誘導体とみなしてその炭素数、置換基、変態
部、環などにそれぞれ一定の数値を設定し、そのスコア
を加算して有機性値及び無機性値を求め、この値を有機
性値をχ軸、無機性値をy軸にとった図上にプロットし
ていくものである。

【００３２】この有機概念図は藤田穆氏の考案によるも
のであり、その詳細はＫＵＭＡＭＯＴＯ ＰＨＡＲＭＡ
ＣＥＵＴＩＣＡＬ ＢＵＬＬＥＴＩＮ，第１号、第１〜
１６項（１９５４年）、化学の領域、第１１巻、第１０
号、７１９〜７２５項（１９５７年）、フレグランスジ
ャーナル、第３４号、第９７〜１１１項（１９７９
年）、フレグランスジャーナル、第５０号、第７９〜８
２項（１９８１年）などに説明されている。

【００３３】従って、各化合物の有機概念図はこれらの
文献に記載の手法に従って、容易に求めることができ
る。

【００３４】化合物（II）に好適に用いられる溶解・吸
収促進剤とその有機性値と無機性値を表１に示す。

【００３５】

【表１】

【００３６】一方、化合物（II）に上述した有機性値お
よび無機性値の範囲外で、一般的に使用される溶解基
剤、例えば乳酸セチル、セバシン酸ジエチル、オリーブ
オイル、ヤシ油（ミグリオール８１２）等を用いると溶
解性が著しく悪く、溶解・吸収促進剤として適さない。

【００３７】これらの有機性値と無機性値を表２に示
す。

【００３８】

【表２】

【００３９】この発明では、式Ｉで示されるアミド誘導
体及びその酸付加塩を含有する溶液（溶解、吸収促進剤
中）を、外用剤の基剤を用いて当該分野で公知の手段を
用いて製剤化される。基剤としては、油脂性基剤（白色
ワセリン、流動パラフィン、サラシミツロウ、ひまし油
等）が挙げられる。これは、適宜組み合わせて用いるの
が好ましい。

【００４０】この発明の外用剤は、上記基剤に加えて、
香料、着色剤、防腐剤、高級アルケン酸のような吸収促
進剤など外用剤に使用しうる他の添加物や、他の皮膚疾
患に有効な薬剤が含まれてもよい。

【００４１】この発明の１つの観点によれば、式Ｉで示
されるアミド誘導体及びその酸付加塩を溶解・吸収促進
剤に溶解し、得られる溶液と基剤とを混合し、得られる
混合物を攪拌または加熱攪拌し、ついで冷却して外用剤
を得ることからなる軟膏剤の製法が提供される。

【００４２】この方法で１以上の添加剤と、任意に、式
Ｉで示されるアミド誘導体及びその酸付加塩の溶液に用
いたのと同じかまたは異なる溶解・吸収促進剤の追加量
とを、基剤と同時に加えてもよい。

【００４３】なお、この発明の外用剤においては、式Ｉ
で示されるアミド誘導体及びその酸付加塩が一部結晶と
して存在する場合があるが、この場合もこの発明範囲内
に包含される。

【００４４】この発明の外用剤は皮膚の患部に１日１〜
６回塗布して使用する事ができる。

【００４５】

【実施例】実施例１ 本発明による５％化合物（II）軟膏を以下の成分・方法
により調整した。

【００４６】化合物（II）５ｇを、ソルビタンモノラウ
レート（ＳＰ−２０）２５ｇに８０℃で加熱溶解した
（Ａ液）。白色ワセリン７０ｇを８０℃で加熱溶解した
ものにＡ液を加え１０分間攪拌し、次いで室温に冷却し
ながら混合した。

【００４７】実施例２ 本発明による１％化合物（II）軟膏を以下の成分・方法
により調整した。

【００４８】化合物（II）１ｇを、ソルビタンモノラウ
レート（ＳＰ−２０）１０ｇに８０℃で加熱溶解する
（Ａ液）。白色ワセリン８９ｇを８０℃で加熱溶解した
ものにＡ液を加え１０分間攪拌し、次いで室温に冷却し
ながら混合した。

【００４９】実施例３ 本発明による０．２％化合物（II）軟膏を以下の成分・
方法により調整した。

【００５０】化合物（II）０．２ｇを、ソルビタンモノ
ラウレート（ＳＰ−２０）１０ｇに８０℃で加熱溶解す
る（Ａ液）。白色ワセリン８９．８ｇを８０℃で加熱溶
解したものにＡ液を加え１０分間攪拌し、次いで室温に
冷却しながら混合した。

【００５１】実施例４ 本発明による０．０４％化合物（II）軟膏を以下の成分
・方法により調整した。

【００５２】化合物（II）０．０４ｇを、ソルビタンモ
ノラウレート（ＳＰ−２０）１０ｇに８０℃で加熱溶解
する（Ａ液）。白色ワセリン８９．９６ｇを８０℃で加
熱溶解したものにＡ液を加え１０分間攪拌し、次いで室
温に冷却しながら混合した。

【００５３】実施例５ 本発明による０．００８％化合物（II）軟膏を以下の成
分・方法により調整した。

【００５４】化合物（II）０．００８ｇを、ソルビタン
モノラウレート（ＳＰ−２０）１０ｇに８０℃で加熱溶
解する（Ａ液）。白色ワセリン８９．９９２ｇを８０℃
で加熱溶解したものにＡ液を加え１０分間攪拌し、次い
で室温に冷却しながら混合した。

【００５５】実施例６ 本発明による１％化合物（II）軟膏を以下の成分・方法
により調整した。

【００５６】化合物（II）１ｇを、ソルビタンモノステ
アレート（ＳＰ−６０）１０ｇに８０℃で加熱溶解する
（Ａ液）。ポリオキシエチレン（１０）硬化ひまし油
（以下、ＨＣＯ−１０と略す）５ｇ、白色ワセリン８４
ｇを８０℃で加熱溶解したものにＡ液を加え１０分間攪
拌し、次いで室温に冷却しながら混合した。

【００５７】実施例８ 本発明による１％化合物（II）軟膏を以下の成分・方法
により調整した。

【００５８】化合物（II）１ｇを、モノステアリン酸グ
リセリル（ＭＧＳ）１０ｇに８０℃で加熱溶解する（Ａ
液）。ＨＣＯ−１０ ５ｇ、白色ワセリン８４ｇを８０
℃で加熱溶解したものにＡ液を加え１０分間攪拌し、次
いで室温に冷却しながら混合した。

【００５９】実施例９ 本発明による１％化合物（II）軟膏を以下の成分・方法
により調整した。

【００６０】化合物（II）１ｇを、モノオレイン酸グリ
セリル（ＭＧＯ）１０ｇに８０℃で加熱溶解する（Ａ
液）。ＨＣＯ−１０ ５ｇ、白色ワセリン８４ｇを８０
℃で加熱溶解したものにＡ液を加え１０分間攪拌し、次
いで室温に冷却しながら混合した。

【００６１】実施例１０ 本発明による１％化合物（II）軟膏を以下の成分・方法
により調整した。

【００６２】化合物（II）１ｇを、１，３−ブタンジオ
ール５ｇに７０℃で加熱溶解した（Ａ液）。一方、ステ
アリン酸３ｇ、ステアリルアルコール０．５ｇ、ミツロ
ウ０．５ｇ、グリセリルモノステアレート３ｇ、ＨＣＯ
−１０ ０．５ｇ、セバシン酸ジエチル０．２５ｇ、白
色ワセリン８６．２５ｇを７０℃の加温下で溶解し均一
に混合した（Ｂ液）。次に、Ｂ液を６０℃の加温下で攪
拌しながらＡ液を加え１０分間攪拌し、室温に冷却しな
がら混合した。

【００６３】実施例１１ 本発明による１％化合物（II）軟膏を以下の成分・方法
により調整した。

【００６４】化合物（II）１ｇを、８０℃で加熱したソ
ルビタンモノラウレート（ＳＰ−２０）５ｇとクロタミ
トン２ｇの混合溶液で溶解した（Ａ液）。ＨＣＯ−１０
５ｇ、白色ワセリン８７ｇを８０℃で加熱溶解したも
のにＡ液を加え１０分間攪拌し、次いで室温に冷却しな
がら混合した。

【００６５】実施例１２ 本発明による１％化合物（II）クリームを以下の成分・
方法により調整した。

【００６６】化合物（II）１ｇを、８０℃で加熱したイ
ソステアリン酸１０ｇで溶解後、８０℃下でベンジルア
ルコール２ｇ、セチルアルコール２．２ｇ、ステアリル
アルコール３．１ｇ、Polysorbate６０ ２．５５ｇ、
ソルビタンモノステアレート０．４５ｇを添加し攪拌溶
解した（Ａ液）。一方、グリセリン２ｇ、メチルパラベ
ン０．２ｇ、プロピルパラベン０．０２ｇ、精製水７
６．４８ｇを８０℃の加温下で溶解し均一に混合した
（Ｂ液）。Ａ液、Ｂ液をほぼ同じ温度（７５℃）に加温
し、Ａ液にＢ液を加えAce Homogenizer(AM-3)（日本精
機製作所）で１０分間混合（１２０００ｒｐｍ）した。
次いで、水冷しながら低回転で１５分間混合した。

【００６７】実施例１３ 本発明による１％化合物（II）ローションを以下の成分
・方法により調整した。

【００６８】化合物（II）１ｇを、７０℃で加熱した
１，３−ブタンジオール６９ｇで溶解し、精製水３０ｇ
を加え攪拌した。

【００６９】実施例１４ 本発明による１％化合物（II）ローションを以下の成分
・方法により調整した。

【００７０】化合物（II）１ｇを、７０℃で加熱した
１，３−ブタンジオール４９ｇで溶解し、精製水５０ｇ
を加え攪拌した。

【００７１】実施例１５ 本発明による１％化合物（II）ローションを以下の成分
・方法により調整した。

【００７２】化合物（II）１ｇを、７０℃で加熱したソ
ルビタンモノラウレート（ＳＰ−２０）１０ｇで溶解
し、流動パラフィン８９ｇを加え攪拌した。

【００７３】比較例１ 本発明による１％化合物（II）軟膏を以下の成分・方法
により調整した。

【００７４】化合物（II）１ｇを、ミグリオール８１２
１０ｇに８０℃で加熱し懸濁した（Ａ液）。白色ワセ
リン８９ｇを８０℃で加熱溶解したものにＡ液を加え１
０分間攪拌し、次いで室温に冷却しながら混合した。

【００７５】次にこの発明の軟膏についての経皮吸収試
験及び薬理試験について述べる。

【００７６】インターフェロン誘起活性 化合物（II）について、ヒトインターフェロン-α測定
キット（大塚製薬）とヒトインターフェロン-γ測定キ
ット（BioSource International）を使用してELISA法で
ＩＦＮ量を定量した結果、高いインターフェロン誘起活
性を有することが確認された。

【００７７】経皮吸収性 （１）試験方法 動物は４週齢のヘアレスマウス（雄）を日本クレア
（株）より購入し１週間の馴化期間の後実験に供した。

【００７８】経皮吸収性実験は引間知広らの方法（薬剤
学,Vol.55(2),122-126,1995）に準じて行った。

【００７９】マウスの背部皮膚を無傷の皮膚（インタク
トスキン）状態で切り取り、縦型２セル型膜透過実験装
置（VIDREZX）に取り付けた。実施例２、実施例８及び
比較例１の方法で調整した軟膏（３００mg）をト゛ナーセル
の皮膚上に加え、レセプターセルにはペニシリン（５０
U/ml）とストレプトマイシン（５０μg/ml）を含むPBS
を満たした。レセプター溶液を一定温度（３７℃）に保
ち、透過実験を行った。経時的にサンプル口から１００
μlサンプリングし、HPLCにより薬物を定量した。

【００８０】この結果より薬物皮膚透過速度を求めた。

【００８１】（２）結果 表３に示すように実施例２及び実施例８の製剤が優れた
経皮吸収性を示すことが、確認された。

【００８２】

【表３】

【００８３】皮膚好酸球浸潤抑制作用 マウス皮膚好酸球浸潤モデルにより本製剤の好酸球浸潤
抑制効果を調べる。

【００８４】（１）試験方法 動物飼育方法 動物は４週齢のBalb/cマウス（雄）を日本クレア（株）
より購入し室温２３±２℃、湿度５０±１０％（照明時
間(8:00-20:00）の条件下で１週間以上の馴化期間の後
に実験に供した。実験はすべて非絶食下で行い、被験物
投与後の実験期間中は自由に水及び飼料を摂取させた
（実験時の体重：１８〜３２ｇ））。

【００８５】感作及び惹起 タンパク量１０mg相当のダニ抽出物-Dp (コスモバイオ
）にＲＯ水３．８ml、生理食塩水１．２mlを加えタン
パク質量２mg/mlの溶液（原液）を調製した。原液を生
理食塩水にてタンパク質量５００μg/mlに調製した溶液
に百日せき菌液を４０分の１容量添加したものを感作溶
液とした。感作はマイジェクター（テルモ社製）を用
い、マウスの頸部の皮下にこの溶液を２００μl投与す
ることによって行った。この感作方法で初回感作を含め
７日おきに３回感作を行った。

【００８６】惹起は初回感作２１日後に、生理食塩水で
２００μｇ/mlのタンパク濃度に調製したダニ抗原溶液
を背部皮内にマイジェクター（テルモ社製）を用いて５
０μl投与することによって行った。

【００８７】皮膚回収及び病理標本の観察 惹起４８時間後に頸椎脱臼によりマウスを屠殺し背部の
皮膚を剥ぎ取り、マーキングした部分を中心に１cm四方
に皮膚を切断した。回収した皮膚は１０％中性ホルマリ
ン緩衝液（コーニングの１５ml遠沈管使用）に入れ１日
以上室温で放置して固定した。固定した皮膚は、常法に
したがってパラフィン切片作成後、ルナ染色を施した
（切り出しは体軸に対し垂直方向に皮膚サンプルの中央
と頭側２ｍｍ上方の２ヶ所で行った）。標本の観察は光
学顕微鏡（４００倍）で、１切片１ｃｍ当たりの好酸球
数を計測した。

【００８８】薬剤（被験化合物）による抑制は以下の式
から算出した。

【００８９】

【数１】

【００９０】各被験薬物の調製 実施例３〜５の軟膏剤を使用した。また、吉草酸ベタメ
タゾンの外用剤は０．１２％リンデロンＶ軟膏（シオノ
ギ製薬）をそのまま使用した。

【００９１】薬物投与方法 経皮投与（密封包帯法：Occlusive dressing technique
(ODT)） マウスをエーテル麻酔して背部中央を電気バリカンで皮
膚を傷つけないように除毛した。背部中央の惹起箇所に
あたる部分にあらかじめ油性マジックで印を付けた。薬
剤（被験化合物）の塗布は、背部の印をつけた部分を中
心に前投与では３cm四方に、惹起後は惹起部分を中心に
２cm四方に塗布した。さらに、塗布部を覆うようにポリ
エチレン製の不透性シートをのせ伸縮性テープ（Johnso
n & Johnson MEDICAL INC：エラスコチン）で固定し
た。対照群は基材のみを塗布した。

【００９２】投与量は一匹当たり５０mg／dayとし、投
与スケジュールは以下に示したように惹起前日より４日
間連投した。

【００９３】惹起前々日 → 惹起日（惹起直後）→
惹起翌日（計３回） （２）結果 実施例３〜５、０．１２％吉草酸ベタメタゾン軟膏の各
被験薬物のダニ惹起マウス皮膚好酸球浸潤反応に対する
抑制効果を表４に示す。実施例３、４の軟膏は好酸球浸
潤を吉草酸ベタメタゾン軟膏（ステロイド）と同等に抑
制した(表４）。

【００９４】

【表４】

【００９５】

【発明の効果】上述した通り、本発明により新規な外用
製剤が得られる。本製剤に含まれるアミド誘導体は強力
なインターフェロン（α、γ）誘起作用を有し、皮膚好
酸球浸潤抑制効果により特にアトピー性皮膚炎の治療に
有用である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 上田 美江子 神奈川県足柄上郡中井町井ノ口1500番地 テルモ株式会社内

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】下記式Ｉで示されるアミド誘導体及びその
   医薬的に許容しうる酸付加塩と溶解・吸収促進剤、及び
   基剤よりなる外用剤。 【化１】 （式Ｉ中、Ｒ₁およびＲ₂は炭素数１から６の分岐してい
   てもよいアルキル基を表し、またＲ₁とＲ₂は一つになっ
   て環を形成していてもよい。またＲ₁またはＲ₂のどちら
   かが、Ｘ、Ｙあるいはメチレン鎖中の任意の原子と一つ
   になって環を形成していてもよい。ＸおよびＹは独立し
   て、酸素原子、Ｓ(О)p（ｐは０から２の整数を表
   す。）、ＮＲ₄、ＣＲ₅＝ＣＲ₆、ＣＲ₇Ｒ₈あるいは置換
   されていてもよいフェニレン基を表す。ここで、Ｒ₄、
   Ｒ₅、Ｒ₆、Ｒ₇およびＲ₈は独立して、水素原子、低級ア
   ルキル基、水酸基、低級アルコキシ基、アミノ基、モノ
   あるいはジ低級アルキル置換アミノ基、カルボキシル
   基、低級アルコキシカルボニル基、置換されていてもよ
   い芳香環基、あるいは置換されていてもよい複素環基を
   表す。Ｚは芳香環または複素環を表し、低級アルキル
   基、水酸基、低級アルコキシ基あるいはハロゲンのよう
   な置換基を有していてもよい。Ｒ₃は水素原子、置換さ
   れていてもよいフェニル基、低級アルキル基（フェニル
   基、フェノキシ基、ベンジルオキシ基、低級アルコキシ
   基、アミノ基、モノあるいはジ低級アルキル置換アミノ
   基、カルボキシル基、あるいは低級アルコキシカルボニ
   ル基で置換されていてもよい。）を表す。ｇ、ｉおよび
   ｋは独立して０から６の整数を表し、ｈ、jおよびｌは
   独立して０または１を表し、ｍは０から５の整数を、ｎ
   は２から１２の整数を表す。）
2. 【請求項２】請求項１に記載のアミド誘導体及びその医
   薬的に許容しうる酸付加塩の外用剤中における含量が
   ０．００１〜１０％（ｗ／ｗ）である請求項１に記載の
   外用剤。
3. 【請求項３】請求項１に記載のアミド誘導体及びその医
   薬的に許容しうる酸付加塩を溶解しうる溶解・吸収促進
   剤がアルコール類（エタノール、エチレングリコール、
   プロピレングリコール、１，３ブタンジオール、グリセ
   リン等）および／または、高級脂肪酸（イソステアリン
   酸、オレイン酸等）および／または、本文に定義する有
   機概念図上において有機性値が３０〜１０００、無機性
   値が５０〜１０００、有機性値に対する無機性値の比が
   ０．５〜２．０の領域内にある溶解・吸収促進剤から選
   ばれる少なくとも一種を含有することを特徴とする請求
   項１または２記載の外用剤。
4. 【請求項４】溶解・吸収促進剤の外用剤中における含量
   が、０．１〜７０％（ｗ／ｗ）である請求項１〜３のい
   ずれか１項に記載の外用剤。