JPH11269078A

JPH11269078A - カルシウム吸収促進剤及びカルシウム補給飲食品

Info

Publication number: JPH11269078A
Application number: JP10090808A
Authority: JP
Inventors: Shuichiro Ueda; 修一郎上田
Original assignee: Viox Inc
Current assignee: Viox Inc
Priority date: 1998-03-19
Filing date: 1998-03-19
Publication date: 1999-10-05
Anticipated expiration: 2018-03-19
Also published as: JP3408739B2

Abstract

(57)【要約】【目的】カルシウム吸収促進効果と共に、他の様々な
生理活性機能をも期待できるカルシウム吸収促進剤及び
カルシウム補給食品を提供する。【構成】このカルシウム吸収促進剤は、ローヤルゼリ
ーのプロテアーゼによる分解物であって、好ましくは分
子量3000以下のペプチドを有効成分とする。このカルシ
ウム吸収促進剤と、カルシウム原料とを含有させること
により、カルシウム補給食品を得る。カルシウム補給食
品には、更にビタミンＤ₃ 、カゼインホスホペプタイ
ド、ビタミンＫ、イソフラボンから選ばれた少なくとも
一種を添加してもよい。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、ローヤルゼリーのプロ
テアーゼによる分解物を有効成分とするカルシウム吸収
促進剤及びそれを含有するカルシウム補給飲食品に関す
る。

【０００２】

【従来の技術】ローヤルゼリーは、若い働き蜂の分泌線
（下咽頭線、大腮腺）から分泌される乳白色を帯びた強
い酸味のある物質で、女王蜂を育てるための特別な餌と
なるものである。ローヤルゼリーの成分については、ま
だ不明の点もあるが、ビタミン、ミネラル、アミノ酸、
アセチルコリン、10−ヒドロキシデセン酸、ステロー
ル、ホルモンなどの栄養成分をバランスよく含み、人体
に対して好ましい生理活性を持つことが知られている。
そのため古くから、生タイプ、カプセルタイプ、飲料タ
イプなどの健康食品、医薬品、化粧品等として利用され
ている。

【０００３】ローヤルゼリーの生理的機能については、
これまでにも種々の報告がなされている。例えば、村上
らによりin vitroの系におけるローヤルゼリーのIgG 、
IgMの産生促進作用（Agric. Biol. Chem., 54(4), 1087
-1089, 1990）、並びにIFN-γの産生促進作用（'90 、'
91 農芸化学学会講演要旨集）が報告されている。ま
た、米倉らによりヒト単球培養細胞の増殖促進効果（9
2' 生化学会講演要旨集、No.2035 ）が報告されてい
る。

【０００４】また、本出願人による特開平４−２１６５
０号には、生ローヤルゼリーを基質に対する作用部位の
異なる二種類以上のプロテアーゼで処理することによ
り、生ローヤルゼリーと同様な成分を含有し、しかも透
明で、安定性に優れ、飲料等にも添加しやすく、したが
って経口摂取しやすい透明なローヤルゼリー分解物が得
られることが開示されている。

【０００５】更に、本出願人による特開平８−１０４６
４５号には、ローヤルゼリーのプロテアーゼによる分解
物であって、分子量３０００以下のペプチドを有効成分
として含有する経口摂取用育毛剤が開示されている。更
にまた、本出願人による特開平８−５９４９９号には、
分子量３０００以下のペプチドを有効成分として含有す
る感染防御機能増強剤が開示されている。

【０００６】一方、カルシウム吸収促進剤としては、カ
ゼインホスホペプタイド（以下「ＣＰＰ」と略称する）
がよく知られている。しかしながら、ＣＰＰは、カルシ
ウム吸収促進効果を有するものの、ローヤルゼリーのよ
うな様々な生理活性効果を有するものではない。なお、
ローヤルゼリーに関するカルシウム吸収促進効果につい
ては、本発明者が知る限り未だ報告された事例はない。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】したがって、本発明の
目的は、カルシウム吸収促進効果と共に、他の様々な生
理活性機能をも期待できるカルシウム吸収促進剤及びカ
ルシウム補給食品を提供することにある。

【０００８】

【課題を解決するための手段】本発明者は、ローヤルゼ
リーあるいはその酵素分解物にカルシウム吸収促進効果
があるかもしれないという発想をいだき、後述するマウ
スの腸管を利用した動物実験を行ったところ、ローヤル
ゼリーそのものには、カルシウム吸収促進効果はない
が、ローヤルゼリーの酵素分解物には、ＣＰＰに匹敵す
るカルシウム吸収促進効果があることを見出し、本発明
を完成するに至った。

【０００９】すなわち、本発明のカルシウム吸収促進剤
は、ローヤルゼリーのプロテアーゼによる分解物を有効
成分とすることを特徴とする。

【００１０】また、本発明のカルシウム補給飲食品は、
ローヤルゼリーのプロテアーゼによる分解物と、カルシ
ウム原料とを含有することを特徴とする。

【００１１】本発明によれば、ローヤルゼリーのプロテ
アーゼによる分解物により、後述する実施例に示される
ように優れたカルシウムの吸収促進効果がもたらされ
る。また、ローヤルゼリーのプロテアーゼによる分解物
は、前記特開平８−１０４６４５号に示されるように、
育毛効果を有しており、前記特開平８−５９４９９号に
示されるように、病原性の細菌やウイルスに対する感染
防御機能増強効果も有している。このように、カルシウ
ムの吸収促進効果だけでなく、前述したような各種の生
理活性機能が期待できる。

【００１２】本発明において、前記分解物は、分子量30
00以下のペプチドを主成分とするものであることが好ま
しい。すなわち、ローヤルゼリーそのものには、カルシ
ウム吸収促進効果は認められず、分解してペプチドにし
たときに初めてカルシウム吸収促進効果が認められるか
らである。

【００１３】また、本発明のカルシウム補給飲食品は、
前記原料に加えて、ビタミンＤ₃ 、カゼインホスホペプ
タイド、ビタミンＫ、イソフラボンから選ばれた少なく
とも一種を含有することが好ましい。これらは、いずれ
もカルシウム吸収促進に関与することが知られており、
本発明のカルシウム吸収促進剤と併用することによっ
て、その効果をより一層高めることができる。

【００１４】更に、本発明のカルシウム補給飲食品は、
特に飲料に好適である。すなわち、ローヤルゼリーのプ
ロテアーゼによる分解物は、生ローヤルゼリーに比べて
水に溶解したときに溶解しやすく、にごり等を生じるこ
ともないため、飲料に添加したときの品質安定性が優れ
ているからである。

【００１５】

【発明の実施の形態】以下、本発明について好ましい態
様を挙げて、更に詳細に説明する。本発明のカルシウム
吸収促進剤の有効成分であるローヤルゼリーのプロテア
ーゼによる分解物（以下「ローヤルゼリー分解物」と略
称する）は、ローヤルゼリーの懸濁液に、プロテアー
ゼ、好ましくは基質に対する作用部位の異なる二種類以
上のプロテアーゼを、同時又は逐次添加して室温以上の
温度に保持し、酵素反応させることにより得られる。

【００１６】この場合、プロテアーゼとしては、微生物
や植物起源の酸性プロテアーゼ、中性プロテアーゼ、ア
ルカリプロテアーゼや、ペプシン、パンクレアチン等の
哺乳動物由来の消化酵素など、通常、食品加工に用いら
れているものを使用することができ、これらの中から基
質に対する作用部位の異なる二種類以上を選択して用い
ることが好ましい。

【００１７】プロテアーゼによる処理は、蛋白質の分解
率を経時的に測定し、最終分解率は使用するプロテアー
ゼにより異なるが、分解率が好ましくは75％以上、より
好ましくは85％以上となるまで行うのがよい。なお、上
記製造法の詳細は、前記特開平４−２１６５０号に記載
されている。

【００１８】こうして得られたローヤルゼリー分解物
は、分子量3000以下のペプチドを含有している。また、
蛋白質が分解されてペプチド化している以外は、生ロー
ヤルゼリーと同様な成分を含有している。このローヤル
ゼリーの分解物は、水溶液にしたときに透明で、安定性
に優れており、したがって飲料等にも添加しやすく、経
口摂取しやすいものである。なお、このローヤルゼリー
の分解物は、そのまま溶液状で用いてもよく、凍結乾燥
などの手段によって粉末化して用いてもよい。また、上
記ローヤルゼリー分解物としては、例えば「バイオサン
ローヤル」（商品名、株式会社バイオックス製）などの
市販品を用いることもできる。

【００１９】本発明のカルシウム補給食品は、上記ロー
ヤルゼリー分解物と、カルシウム原料とを含有するもの
である。カルシウム原料としては、例えば乳精カルシウ
ム、炭酸カルシウム等の各種カルシウム化合物の他、牛
骨粉、卵殻粉、貝殻粉等のカルシウム高含有食品素材が
用いられる。

【００２０】乾燥物換算のローヤルゼリー分解物（デセ
ン酸換算で生ローヤルゼリーと同濃度の乾燥ローヤルゼ
リー分解物）と、カルシウム原料との配合比率は、特に
限定されないが、カルシウム吸収量を効果的に高めるた
め、重量比で１：１〜２０であることが好ましい。

【００２１】本発明のカルシウム補給食品には、上記原
料の他、ビタミンＤ₃ 、カゼインホスホペプタイド、ビ
タミンＫ、イソフラボンから選ばれた少なくとも一種を
含有させることが好ましい。これらの物質も、カルシウ
ム吸収促進に関与することが知られており、ローヤルゼ
リー分解物と併用することにより、カルシウム吸収促進
効果をより一層高めることが期待される。

【００２２】また、本発明のカルシウム補給食品には、
セルロース、パインファイバー等の難消化性多糖類や、
乳糖などの賦形剤や、香料、甘味料、着色料等を適宜添
加することができる。

【００２３】本発明のカルシウム補給食品は、例えば錠
剤、カプセル剤等の固形状の食品とすることもでき、ハ
チミツ、栄養ドリンク、清涼飲料等に溶解させて、飲料
等の流動性食品にすることもできる。また、本発明のカ
ルシウム吸収促進剤の有効成分であるローヤルゼリー分
解物の好ましい摂取量は、生ローヤルゼリー換算で、１
日当たり０．３〜６ｇである。

【００２４】

【実施例】製造例生ローヤルゼリー100 ｇに温水を加えて、ローヤルゼリ
ーの懸濁液1 kgを調製し、20％水酸化ナトリウム溶液を
用いて、ｐＨを4 にした。この懸濁液に、哺乳動物の消
化酵素であるペプシン（1:10,000、シグマ社製）0.1 ｇ
を添加し、45℃で、6 時間酵素処理を行って、ペプシン
処理液を得た。

【００２５】次に、このペプシン処理液を、20％水酸化
ナトリウム溶液を用いて、ｐＨを8に調整した後、哺乳
動物の消化酵素であるパンクレアチン（2,000,000 単位
／ｇ、シグマ社製）0.1 ｇを添加し、45℃で、6 時間酵
素処理を行った。

【００２６】酵素処理を終了した後、80℃で、10分間加
熱して酵素を失活させ、次いで、濾過して異物や不溶性
残渣を除去して、透明な溶液を得た。

【００２７】次いで、得られた溶液を、初めに用いた生
ローヤルゼリーと同じ重さである100 ｇまで減圧濃縮し
て、透明な溶液状のローヤルゼリー分解物を得た。な
お、このローヤルゼリー分解物は、「バイオサンローヤ
ル」（商品名、株式会社バイオックス製）として市販さ
れているものと同様のものである。

【００２８】また、酵素処理時間は、以下に示す方法
で、酵素反応開始後０、２、４、６時間後にそれぞれ蛋
白質の分解率を測定し、分解率が最高に達した時点とし
た。

【００２９】蛋白質の分解率は、サンプル2.0 mlに、等
量の10％トリクロル酢酸（ＴＣＡ）を加えて遠心分離を
行い、この上清を希釈した後、ローリー法で比色定量
し、ＴＣＡ可溶性成分の量の推移を調べた。なお、ロー
ヤルゼリー中の粗蛋白質は、ＴＣＡ溶液のかわりに等量
の水を加えた溶液を用い、同様に比色定量して求めた。
そして、下記数１に示す式により、蛋白質の分解率を求
めた。

【００３０】

【数１】分解率＝｛（ｃ−ｂ）／（ａ−ｂ）｝×１００％ａ：ローヤルゼリー分解物の粗蛋白質含有量ｂ：ローヤルゼリー分解物のＴＣＡ可溶性成分の含有量ｃ：酵素処理サンプルのＴＣＡ可溶性成分の含有量

【００３１】上記の方法により求めた6 時間酵素処理後
の蛋白質の分解率は、91.6％であった。

【００３２】また、得られたローヤルゼリー分解物と、
生ローヤルゼリーとに含まれる粗蛋白質について分子量
分布を測定し、比較した。なお、測定方法は高速液体ク
ロマトグラフィーにより行った。その結果を図１に示
す。図において、Ａは製造例で得られたローヤルゼリー
分解物の結果、Ｂは生ローヤルゼリーの結果を示す。

【００３３】図１の結果から、製造例で得られた透明な
ローヤルゼリー分解物中の粗蛋白質の分子量分布を、生
ローヤルゼリー中の粗蛋白質の分子量分布と比較する
と、製造例で得られたローヤルゼリー分解物中には、分
子量１万以上のものがほとんどなくなって、分子量500
〜3000のペプチドが主成分となっている。このことは、
電気泳動等の結果からも確認した。

【００３４】すなわち、製造例で得られたローヤルゼリ
ー分解物は、蛋白質が分解されてペプチド化している以
外は、生ローヤルゼリーと同様な成分を含有し、ペプチ
ドとしては、特に生理機能を有するといわれている分子
量数百〜数千のペプチドを多く含有していることがわか
る。

【００３５】なお、製造例で得られたローヤルゼリー分
解物は、弱酸性の飲料に添加しても、生ローヤルゼリー
のように凝集沈殿することなく容易に溶解し、また、そ
のまま食しても、喉を刺すような刺激もなく、むしろ若
干の旨味と甘さがあるものであった。

【００３６】実施例１マウスの体内から摘出した小腸を用いて、カルシウム吸
収に対するＣＰＰ、生ローヤルゼリー（以下「生ＲＪ」
と略称する）、ローヤルゼリー分解物（以下「ＲＪ分解
物」と略称する）の影響を調べた。すなわち、上記の各
種サンプル及びカルシウムを含む液を、摘出した小腸内
に入れ、吸収されて溶出するカルシウム濃度を測定する
ことにより、各種サンプルのカルシウム吸収に対する影
響を比較した。

【００３７】実験に供した生ＲＪ及びＲＪ分解物は、下
記表１に示す性状を有するものである。なお、ローヤル
ゼリー分解物は、前記製造例と同様な方法で製造したも
のを２倍に薄めたものである。

【００３８】

【表１】

【００３９】以下、実験方法及び結果について説明す
る。（１）小腸の調製方法ＤＤＹ系７週齢雄マウスを、２４時間絶食させた後、屠
殺し、直ちに小腸を摘出して、冷生理食塩水で洗浄し
た。小腸の両端から１６ｃｍずつ切り取り、腸管内を洗
浄後、胃に近い上部の空腸部と、下部の回腸部とを採取
した。ＣＰＰを用いた予備試験において、空腸部よりも
回腸部の方がカルシウム吸収促進作用を受けやすい傾向
があったので、以下の試験は回腸部を用いて行った。

【００４０】（２）試料の調製方法以下の試料を作成し、小腸及びその内部に残留するカル
シウムの影響を除くため、生理食塩水のみを使用したブ
ランク区で得られたカルシウム濃度をブランク値とし
て、他のテスト区のカルシウム濃度から差し引いて、各
テスト区間のＣａ吸収量の比較を行った。

【００４１】ブランク区：生理食塩水のみ。コントロール区：生理食塩水に、カルシウムとして6
7.5mg/dl 、リン（Ｐ）として18.0mg/dl になるよう
に、塩化カルシウム及びリン酸カリウムを用いて調製し
たもの（以下「コントロール液」とする）。ＣＰＰ区：コントロール液に、ＣＰＰ（明治乳業製、
商品名「ＣＰＰIII 」、Ｃａ free のもの）0.4mg/mlを
添加したもの。生ＲＪ区：コントロール液に、蛋白質量でＣＰＰと同
濃度（0.298mg/ml）になるように、生ＲＪを添加したも
の（生ＲＪとして2.219mg/ml添加）。ＲＪ分解物１区：コントロール液に、固形分量で生Ｒ
Ｊ区と同濃度になるように、ＲＪ分解物を添加したもの
（ＲＪ分解物として5.034mg/ml添加）。ＲＪ分解物２区：コントロール液に、蛋白質量でＣＰ
Ｐ区と同濃度（0.298mg/ml）になるように、ＲＪ分解物
を添加したもの（ＲＪ分解物として8.230mg/ml添加）。ＲＪ分解物３区：コントロール液に、蛋白質量でＣＰ
Ｐ区の1.63倍の濃度（0.486mg/ml）になるように、ＲＪ
分解物を添加したもの（ＲＪ分解物として13.455mg/ml
添加）。

【００４２】（３）実験工程前記方法で調製した小腸（回腸部）の片方の腸端から１
ｃｍのところを糸で結び、ゾンデ針をつけた注射器で各
種試料（内液）を１．０ｍｌずつ注入し、５％炭酸ガス
含有酸素で飽和した生理食塩水４０ｍｌ（外液）の中に
結び目が浸らないように入れ、３７℃、３０分間、５％
炭酸ガス含有酸素を通じながらインキュベーションし
た。

【００４３】インキュベーション後、外液を15,000rpm
で１５分間遠心分離を行い、その上清について、422.7n
m におけるＣａの発光強度をＩＣＰ発光分析装置で分析
を行い、各種の試料の小腸におけるＣａ吸収に対する影
響を確認した。

【００４４】（４）結果各テスト区で得られた数値（生データ）をブランク区に
おける外液カルシウム濃度を用いて補正した結果を表２
及び図２に示す。

【００４５】

【表２】

【００４６】コントロール区の外液カルシウム濃度は20
7.9ppbを示すのに対し、ＣＰＰ区では231.0ppbと、カル
シウム吸収が促進される傾向が認められたが、今回の実
験系では、有意な差は認められなかった。

【００４７】生ＲＪ区（185.7ppb ）については、コン
トロール区、ＣＰＰ区よりも低い数値を示し、特にＣＰ
Ｐ区よりも有意に低い数値（Ｐ＜0.05）を示した。

【００４８】また、ＣＰＰ区、ＲＪ分解物１区、ＲＪ分
解物２区、ＲＪ分解物３区においては、コントロール区
及び生ＲＪ区より高い数値を示し、カルシウムの吸収が
促進される傾向が認められた。

【００４９】特に、ＲＪ分解物３区については、ＣＰＰ
区に対してＰ＜0.05、生ＲＪ区、ＲＪ分解物１区、ＲＪ
分解物２区に対してＰ＜0.01の危険率で有意な差が認め
られた。このように、ＲＪ分解物を添加することによ
り、明らかなカルシウム吸収促進効果が認められた。

【００５０】実施例２（ＲＪ分解物を含有する錠剤の製
造）下記表３に示す配合組成の原料を用い、常法に従って打
錠成形を行い、１粒250mg の錠剤を製造した。この錠剤
は、１日６〜１２粒摂取することにより、カルシウム補
給効果が期待される。

【００５１】

【表３】

【００５２】実施例３（ＲＪ分解物を含有する栄養飲料
の製造）下記表４に示す配合組成の原料を用い、表中の各栄養成
分を水に溶解させることにより、１本１００ｇの栄養飲
料を製造した。

【００５３】

【表４】

【００５４】

【発明の効果】以上説明したように、本発明のカルシウ
ム吸収促進剤は、ローヤルゼリーのプロテアーゼによる
分解物を含有することにより、前記実施例に示したよう
な顕著なカルシウムの吸収促進効果をもたらすことがで
きる。また、本発明のカルシウム補給飲食品は、ローヤ
ルゼリーのプロテアーゼによる分解物とカルシウム原料
とを含有することにより、カルシウム補給効果に優れた
飲食品を提供することができる。また、ローヤルゼリー
のプロテアーゼによる分解物は、カルシウムの吸収促進
効果だけでなく、前述した育毛効果や、感染防御機能増
強効果などの各種生理活性機能も期待できる。

【図面の簡単な説明】

【図１】製造例で得られたローヤルゼリー分解物中の粗
蛋白質と、生ローヤルゼリー中の粗蛋白質の分子量分布
を示す図表である。

【図２】カルシウムの腸管吸収に対する各種試料の影響
を調べた実験結果を示す図表である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＡ６１Ｋ 38/00 Ａ６１Ｋ 37/02 37/18

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】ローヤルゼリーのプロテアーゼによる分
解物を有効成分とすることを特徴とするカルシウム吸収
促進剤。
【請求項２】前記分解物が分子量3000以下のペプチド
を主成分とする請求項１記載のカルシウム吸収促進剤。
【請求項３】ローヤルゼリーのプロテアーゼによる分
解物と、カルシウム原料とを含有することを特徴とする
カルシウム補給飲食品。
【請求項４】前記分解物が分子量3000以下のペプチド
を主成分とする請求項３記載のカルシウム補給飲食品。
【請求項５】前記原料に加えて、ビタミンＤ₃ 、カゼ
インホスホペプタイド、ビタミンＫ、イソフラボンから
選ばれた少なくとも一種を含有する請求項３又は４記載
のカルシウム補給飲食品。
【請求項６】飲料である請求項３〜５のいずれか１つ
に記載のカルシウム補給飲食品。