JPH11279072A - 皮膚外用剤 - Google Patents

皮膚外用剤

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JPH11279072A
JPH11279072A JP10100610A JP10061098A JPH11279072A JP H11279072 A JPH11279072 A JP H11279072A JP 10100610 A JP10100610 A JP 10100610A JP 10061098 A JP10061098 A JP 10061098A JP H11279072 A JPH11279072 A JP H11279072A
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JP
Japan
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skin
lectin
external preparation
improving
gln
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Pending
Application number
JP10100610A
Other languages
English (en)
Inventor
Tetsuya Sado
哲也 佐道
Hisao Namioka
日左雄 浪岡
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KAISO SHIGEN KENKYUSHO KK
Lion Corp
Original Assignee
KAISO SHIGEN KENKYUSHO KK
Lion Corp
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Publication date
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Abstract

(57)【要約】 【解決手段】 キリンサイ属レクチンを含むタンパク質
を含有する皮膚外用剤。 【効果】 本発明の皮膚外用剤は、荒れ肌改善、皮膚保
湿効果及び皮膚の老化防止・改善効果に優れたものであ
る。

Description

【発明の詳細な説明】
【0001】
【発明の属する技術分野】本発明は、特に肌荒れ改善、
皮膚保湿効果及び皮膚の老化防止・改善効果に優れた皮
膚外用剤に関する。
【0002】
【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】近年、
乾燥による皮膚のバリアー機能の低下やアレルギー性疾
患により、皮膚トラブルが増加しており、荒れ肌改善、
皮膚保湿効果に優れた外用剤が強く求められている。そ
のため、皮膚の乾燥性疾患やアレルギー性疾患に対し、
皮膚のバリアー機能を高め、皮膚を健康に保つことを目
的として、グリチルレチン酸等の抗炎症剤や各種保湿剤
を用いる提案が多数なされているが、効果の点で十分と
は言えない。また、皮膚は老化に伴い、柔軟性・弾力性
の低下、しわの増加、乾燥して滑らかさのない荒れた肌
として認められるようになる。これら皮膚の老化をもた
らす因子として、細胞の内的要因、つまり遺伝的要因
と、もう一つは栄養、内分泌、ストレス、環境等の外的
要因が挙げられ、特に皮膚は、直接外界と接しており、
紫外線、乾燥、冷寒等に強く影響されることが知られて
いる。こうした老化症状の改善を目的に、α−トコフェ
ロール、α−ヒドロキシ酸、レチノール等の薬剤が提案
されているが、老化防止効果として十分でなかったり、
皮膚刺激等の問題がある。
【0003】従って、本発明は、上記問題のない優れた
肌荒れ改善、皮膚保湿効果及び皮膚の老化防止・改善効
果を有する皮膚外用剤を提供することを目的とする。
【0004】
【課題を解決するための手段及び発明の実施の形態】本
発明者らは、上記目的を達成するため鋭意検討を行った
結果、キリンサイ属レクチンを含むタンパク質、特にW
O95/18149に記載されているようなレクチン
が、肌荒れ改善、皮膚保湿、皮膚の老化防止及び改善に
優れた効果を与えることを見出し、本発明を完成するに
至った。
【0005】以下、本発明につき更に詳しく説明する
と、本発明の皮膚外用剤は、キリンサイ属レクチンを含
むタンパク質を有効成分として含有するものである。
【0006】このキリンサイ属レクチンを含むタンパク
質は、キリンサイ属(Eucheuma属又はKapp
aphycus属)に属する海藻から得られるが、この
キリンサイ属に属する海藻としては、トゲキリンサイ
(E.serra)、ユーキュウマコットニー(E.c
ottonii)、カタメンキリンサイ(E.gela
tinae)及びアマクサキリンサイ(E.amaku
saensis)、E.denticulatum、
E.muricatum、E.cupresoiseu
m、E.spinosum、E.arnoldii、
E.alvarezii、E.striatum等のE
ucheuma属及びK.procrusteanu
m、K.cottonii、K.striatum、
K.alvarezii、K.arnoldii等のK
appaphycus属に属する海藻が挙げられる。レ
クチンの含有量や入手のし易さ等から判断し、好ましく
はトゲキリンサイ(E.serra)、ユーキュウマコ
ットニー(E.cottonii)、カタメンキリンサ
イ(E.gelatinae)及びアマクサキリンサイ
(E.amakusaensis)、E.dentic
ulatum、E.spinosum、E.alvar
ezii、K.procrusteanum及びK.c
ottonii、K.alvareziiであり、特に
好ましいのは、トゲキリンサイ(E.serra)、ユ
ーキュウマコットニー(E.cottonii)、カタ
メンキリンサイ(E.gelatinae)及びアマク
サキリンサイ(E.amakusaensis)であ
る。
【0007】上記キリンサイ属レクチンを含むタンパク
質としては、上記キリンサイ属に属する海藻を原料と
し、緩衝液及び溶媒−水混合液から選ばれる抽出溶媒で
抽出後、この抽出液から溶媒沈殿、透析処理したレクチ
ンを含むタンパク質を粗精製レクチンとして配合するこ
とができる。またこの粗精製レクチンをゲル濾過により
分離精製、更に必要によりイオン交換クロマトグラフィ
ーにより分画した精製レクチンとして配合することがで
きる。
【0008】この場合、キリンサイ属レクチンとして
は、下記(a)〜(c)のうち少なくとも一つの性状を
有し、かつ下記(d)〜(g)の性状を有するものを用
いることが好ましい。 (a)ゲル濾過法による分子量が約25,000であ
る。 (b)SDS電気泳動法による分子量が約29,000
である。 (c)等電点がポリアクリルアミドゲル等電点電気泳動
法にて測定される場合に、pI4.5〜pI5.7の範
囲、好ましくは、当該ポリアクリルアミドゲル等電点電
気泳動法にてpI4.75、pI4.95、pI5.0
5、pI5.20及びpI5.50から選ばれる少なく
とも一の等電点を示す。 (d)糖鎖を持たない。 (e)N末端領域のアミノ酸配列がGly−Arg−T
yr−Thr−Val−X−Asn−Gln−Trp−
Gly(XはGln或いはLys)である。 (f)トリプシン処理ウサギ赤血球、ヒツジ赤血球及び
トリプシン処理ヒツジ赤血球に対して特異的な凝集活性
を有する。 (g)フェチン、アシアロフェチン、チログロブリン及
びイーストマンナンに対して結合特異性を示す。
【0009】かかるレクチンは、例えばWO95/18
149に記載の方法にて得ることができる。
【0010】これらのレクチンの配合量は、製品形態や
使用頻度、またその生理活性によっても異なるが、通
常、その一種又は二種以上の混合物を外用剤全体の0.
001〜5重量%の範囲が適当である。
【0011】本発明の皮膚外用剤には、上記必須成分の
他に、通常、皮膚外用剤に用いられる配合剤、例えば、
界面活性剤、油分、アルコール類、保湿剤、増粘剤、防
腐剤、酸化防止剤、キレート剤、pH調整剤、香料、色
素、紫外線吸収・散乱剤、ビタミン類、アミノ酸類、水
等を配合することができる。なお、任意成分は、これら
に限定されるものではない。
【0012】本発明の皮膚外用剤は、ローション剤、乳
剤、クリーム、軟膏等の形態に調製でき、使用目的に応
じ、例えば化粧料等として適用される。なお、本発明に
おいて、皮膚は頭皮をも包含するものである。
【0013】
【実施例】以下、本発明を実施例に基づいて更に詳細に
説明する。ただし、本発明は以下の実施例に制限される
ものではない。なお、実施例及び比較例における皮膚外
用剤の組成は重量%で示す。また、各例の組成におい
て、全成分の合計量は100%である。
【0014】〔製造例〕WO95/18149に記載の
レクチン製造法に準じて目的とするレクチンを得た。即
ち、トゲキリンサイ、ユーキュウマコットニー、カタメ
ンキリンサイ、及びアマクサキリンサイを採取し、海水
にて良く洗浄した後、凍結乾燥を行い、粉砕機にて粉砕
し海藻粉末を得た。
【0015】それぞれの海藻粉末に10倍量の20〜2
5%のエタノール水溶液を加え、低温下で2回抽出し、
レクチンを含む抽出液を得た。次に、これら抽出液から
レクチンを回収するために、抽出液に冷エタノールを最
終濃度80%以上となるように適量加え、レクチンを含
むタンパク質を沈殿として析出させた。得られた沈殿物
を50mMのリン酸緩衝液(pH7.2)に懸濁し、同
緩衝液に対して透析を行ってエタノールを除去し、各々
のレクチン粗製液を得た。
【0016】次いで、レクチン粗製液をゲル濾過クロマ
トグラフィーに供し、トゲキリンサイ由来粗製液からレ
クチンES0、ユーキュウマコットニー由来粗製液から
レクチンEC0、カタメンキリンサイ粗製液からレクチ
ンEG0、アマクサキリンサイ由来粗製液からレクチン
EA0をそれぞれ精製した。
【0017】更に、上記精製レクチンをDEAEイオン
交換クロマトグラフィーに供し、トゲキリンサイ由来の
レクチンES0からES1とES2の2画分を、ユーキ
ュウマコットニー由来のレクチンEC0からEC1とE
C2の2画分を、カタメンキリンサイ由来のレクチンE
G0からEG1、EG2、及びEG3の3画分を、更に
アマクサキリンサイ由来のレクチンEA0からEA1、
EA2、及びEA3の3画分を得た。
【0018】以上の方法により得られたレクチンは、出
発原料となる海藻の種類に拘らず、以下の(a)〜
(g)の特徴を有した。 (a)ゲル濾過法による分子量測定で分子量約25,0
00又は(b)SDS電気泳動法による分子量測定で分
子量約29,000又は(c)等電点電気泳動法にて、
pI4.5〜pI5.7の範囲にある1又は2以上の等
電点を示し、かつ、(d)糖鎖を持たず、(e)N末端
領域のアミノ酸配列が、Gly−Arg−Tyr−Th
r−Val−X−Asn−Gln−Trp−Gly(X
はGlnあるいはLys)であり、(f)トリプシン処
理ウサギ赤血球、ヒツジ赤血球及びトリプシン処理ヒツ
ジ赤血球に対して特異的な凝集活性を有し、(g)フェ
チン、アシアロフェチン、チログロブリン及びイースト
マンナンに対して結合特異性を示す。
【0019】なお、ポリアクリルアミドゲル等電点電気
泳動法による等電点測定の結果、下記表1に示す等電点
を有することが認められた。
【0020】
【表1】
【0021】更に、各々レクチンは、それぞれマウス及
びヒトリンパ球に対して、幼若化活性を有することが確
認された。
【0022】下記例においては、上記に示したようにト
ゲキリンサイ、ユーキュウマコットニー、カタメンキリ
ンサイ、及びアマクサキリンサイの海藻粉末から、20
〜25%のエタノール水溶液で抽出し、抽出液に冷エタ
ノールを最終濃度80%以上となるように加え、レクチ
ンを含むタンパク質を沈殿として析出させ、得られた沈
殿物を純水にて透析したものを粗精製レクチンとして用
いた。
【0023】また、下記例において、荒れ肌改善及び皮
膚保湿効果については、以下の方法で調べた。男女パネ
ラー30人の前腕内側部をアセトン:エーテル=1:1
の混合溶媒で脱脂し、荒れ肌を作成した。その後、試料
をそれぞれ1日2回塗布し、3日後に以下の2つの評価
を行った。 (1)荒れ肌改善効果;表面形状観察評価 直接目視及びレプリカ法により荒れ肌の症状の観察を行
った。なお、ここでいう荒れ肌の症状とは、角層剥離,
紅斑,浮腫が起きる、皮溝,皮丘がはっきりせず肌のキ
メがそろわない等を示す。
【0024】荒れ肌改善効果は以下の基準で評点を付
け、評価を行った。 (評点) 著 効:荒れ肌の症状が消失した 有 効:荒れ肌の症状が弱くなった やや有効:荒れ肌の症状がやや弱くなった 無 効:荒れ肌の症状に変化が見られない (評価) ◎:著効、有効、及びやや有効の評価をした被験者が8
0%以上 ○:著効、有効、及びやや有効の評価をした被験者が5
0%以上80%未満 △:著効、有効、及びやや有効の評価をした被験者が3
0%以上50%未満 ×:著効、有効、及びやや有効の評価をした被験者が3
0%未満
【0025】(2)皮膚保湿効果;皮表角質水分量測定 評価部位の皮表角質水分量をインピーダンスメーターを
用いて測定した。
【0026】皮膚保湿効果は、以下の基準で評点を付
け、評価を行った。なお、ここでいう基剤とは、レクチ
ン及び比較成分のいずれも含まないクリームである。 (評点) 著 効:基剤塗布部位と比べて測定値が200%以上 有 効:基剤塗布部位と比べて測定値が150%以上
200%未満 やや有効:基剤塗布部位と比べて測定値が110%以上
150%未満 無 効:基剤塗布部位と比べて測定値が110%未満 (評価) ◎:著効、有効、及びやや有効の評価をした被験者が8
0%以上 ○:著効、有効、及びやや有効の評価をした被験者が5
0%以上80%未満 △:著効、有効、及びやや有効の評価をした被験者が3
0%以上50%未満 ×:著効、有効、及びやや有効の評価をした被験者が3
0%未満
【0027】更に、皮膚の老化防止・改善効果について
は、以下の方法で調べた。 (3)皮膚の老化防止・改善効果の評価 男女パネラー70人(35〜60歳)を1群10名と
し、各群の顔面に1日3回、試料をブラインドにて連続
3ヶ月間使用させた。評価終了後、パネラー本人が皮膚
の状態を、「小じわの改善効果」、「肌のきめに対する
効果」、「つや・はりに対する効果」についてそれぞれ
「改善」、「やや改善」、「変化なし」の3段階で評価
した。
【0028】〔実施例1〜20、比較例1〜5〕表2,
3に示す組成のクリームを製造した。製造法は、油分、
活性剤からなる油相、精製水などからなる水相をそれぞ
れ70℃で混合溶解し、水相を撹拌しながら油相を徐々
に添加し予備乳化を行った。この後、乳化機(ホモミキ
サー)処理を行い、乳化粒子を均一にし、脱気、冷却
後、室温にてキリンサイ由来レクチンを添加、分散させ
仕上げた。
【0029】ここで荒れ肌改善効果、保湿改善効果につ
いて、上記(1)、(2)の試験によって評価した。
【0030】
【表2】
【0031】
【表3】
【0032】〔実施例21〜26、比較例6〕表4に示
す組成のクリームを製造した。製造法は、油分、活性剤
からなる油相、精製水などからなる水相をそれぞれ70
℃で混合溶解し、水相を撹拌しながら油相を徐々に添加
し予備乳化を行った。この後、乳化機(ホモミキサー)
処理を行い、乳化粒子を均一にし、脱気、冷却後、室温
にてキリンサイ由来レクチンを添加、分散させ仕上げ
た。
【0033】ここで皮膚の老化防止・改善効果につい
て、上記(3)の試験によって評価した。結果は表4に
おいて各評価を示したパネラー数にて示した。
【0034】
【表4】
【0035】以下、更に処方例を示す。
【0036】
【表5】
【0037】
【表6】
【0038】
【表7】
【0039】
【表8】
【0040】
【表9】
【0041】
【表10】
【0042】
【表11】
【0043】
【表12】
【0044】
【表13】
【0045】
【表14】
【0046】
【表15】
【0047】
【表16】
【0048】
【表17】
【0049】
【表18】
【0050】
【表19】
【0051】
【表20】
【0052】
【表21】
【0053】
【表22】
【0054】
【表23】
【0055】
【発明の効果】本発明の皮膚外用剤は、荒れ肌改善、皮
膚保湿効果及び皮膚の老化防止・改善効果に優れたもの
である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 FI A61K 38/36 AGZ A61K 37/46 AGZ

Claims (2)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】 キリンサイ属レクチンを含むタンパク質
    を含有する皮膚外用剤。
  2. 【請求項2】 キリンサイ属レクチンが、下記(a)〜
    (c)のうち少なくとも一つの性状を有し、かつ下記
    (d)〜(g)の性状を有するものである請求項1記載
    の皮膚外用剤。 (a)ゲル濾過法による分子量が約25,000であ
    る。 (b)SDS電気泳動法による分子量が約29,000
    である。 (c)等電点電気泳動法による等電点がpI4.5〜p
    I5.7の範囲にある。(d)糖鎖を持たない。 (e)N末端領域のアミノ酸配列がGly−Arg−T
    yr−Thr−Val−X−Asn−Gln−Trp−
    Gly(XはGln或いはLys)である。 (f)トリプシン処理ウサギ赤血球、ヒツジ赤血球及び
    トリプシン処理ヒツジ赤血球に対して特異的な凝集活性
    を有する。 (g)フェチン、アシアロフェチン、チログロブリン及
    びイーストマンナンに対して結合特異性を示す。
JP10100610A 1998-03-27 1998-03-27 皮膚外用剤 Pending JPH11279072A (ja)

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Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2002193736A (ja) * 2000-12-28 2002-07-10 Katakura Chikkarin Co Ltd 化粧料
JP2002193737A (ja) * 2000-12-28 2002-07-10 Kose Corp 皮膚外用剤及び皮膚外用剤組成物
JP2005089390A (ja) * 2003-09-19 2005-04-07 Kanebo Cosmetics Inc 化粧料
JP2010229107A (ja) * 2009-03-27 2010-10-14 Kose Corp 化粧料組成物及び該組成物を含有する皮膚外用剤又は化粧料
JP2010248170A (ja) * 2009-03-27 2010-11-04 Kose Corp 化粧料組成物及び該組成物を含有する皮膚外用剤又は化粧料

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