JPH11286452A - 病原性細菌及びウイルス感染防御剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 病原性細菌及びウイルス感染に防御機能を有
する新規な感染防御剤、医薬又は飲食品の提供。 【解決手段】 感染防御剤、医薬、飲食品は鉄結合型ラ
クトフェリンを有効成分として含有する。ラクトフェリ
ンの鉄飽和度は20〜100 ％が望ましい。経口的に投与さ
れ、大腸菌、ストレプトコッカス ミュータンス、イン
フルエンザウイルス、サイトメガロウイルス等の感染を
防御することができる。投与量は、成人１日当り0.1 〜
5,000mg が好ましい。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、新規な病原性細菌
及びウイルスに対する感染防御剤に関する。また、本発
明は、病原性細菌及びウイルスに対する感染防御機能を
賦与した新規な医薬及び飲食品に関する。

【０００２】

【従来の技術】一般に、病原性細菌の生体への感染は、
標的細胞すなわち生体上皮の細胞表層に存在する複合糖
質の糖鎖構造（レセプター）を認識して結合することに
よりなるといわれている。そして、この病原性細菌の生
体への感染に対する一般的な治療法として、抗生物質の
使用がある。この抗生物質は、増殖した病原性細菌を死
滅させることにより、感染による病気を治療するという
もので、病原性細菌の感染過程の最終段階で行われるも
のである。このように、抗生物質による病原性細菌感染
症の治療は、発病後の生体に対する治療法として非常に
有効であるが、抗生物質の性格上、様々な副作用やアレ
ルギー症状を引き起こす等の問題も多い。

【０００３】一般に、生体は、病原性細菌による感染に
対し、その感染初期の段階においての防御機構を備えて
いる。例えば、消化管における分泌型免疫グロブリンＡ
を主とする免疫グロブリンによる防御機構がそれであ
り、これらの免疫グロブリンは、病原性細菌の標的細胞
への付着を阻止することにより、病原性細菌による感染
から生体を守っている。

【０００４】ところで、一般に、レセプターやレセプタ
ーと類似した構造をもつ物質は、病原性細菌の細胞表層
のレセプター結合部位に特異的に結合し、病原性細菌の
標的細胞への結合を特異的に阻害することが期待されて
いる。この特異的な作用は、病原性細菌の感染を初期の
段階で阻止するという意味で、前述した免疫グロブリン
による防御機構に類似しているといえる。すなわち、こ
のような病原性細菌のレセプター結合部位に特異的に結
合する物質は、病原性細菌の感染を未然に防ぐことがで
き、しかも、作用が穏やかで副作用が少ない病原性細菌
感染防御剤となり得る。

【０００５】一方、ウイルス感染症については、現在ま
でに抗ウイルス剤に関する多くの研究がなされている。
しかし、ウイルスは、宿主細胞の増殖機能に依存して増
殖するという性質を有するため、薬剤によってウイルス
感染症を治療することは極めて困難である。例えば、ウ
イルスの細胞への侵入を阻害するアマンタジンは、イン
フルエンザウイルスＡに効果があるといわれているが、
治療効果が弱い上に中枢神経毒性等の副作用も出現し、
臨床薬としては殆ど利用されていない現状にある。現
在、わが国で使用が認可されている抗ウイルス剤として
は、ウイルス遺伝子の合成を阻害するアシクロビル（単
純ヘルペスや単純ヘルペス脳炎等に適用）、ビダラビン
（単純ヘルペスや単純ヘルペス脳炎等に適用）、点眼剤
用のイドクスウリジン（ヘルペス角膜炎に適用）、アジ
ドチミジン（ＡＩＤＳに適用）等が知られているが、ア
ジドチミジンは、全身投与によりしばしば重篤な副作用
が出現し、治療薬としては未だ問題を抱えている。

【０００６】また、抗ウイルス剤として、近年、注目を
集めているインターフェロンが知られている。このイン
ターフェロンは、ウイルスの細胞内増殖を抑制する因子
であり、遺伝子組み換えの技術を利用して生産されてい
るが、高価であり、副作用も問題となっている。

【０００７】これらの現状から、ウイルス性疾患に対す
る対策として、ウイルスによる感染を予防するワクチン
の投与が最も普及している。このワクチンには、ウイル
スを何らかの方法で弱毒化した生ワクチンやウイルスを
ホルマリン等で処理して作成した不活性化ワクチン、ウ
イルスの抗原部分のみを精製したコンポーネントワクチ
ンがある。そして、これらのワクチンにより、大部分の
ウイルス性疾患を予防することが可能となっている。し
かし、最も代表的なウイルス性疾患の一つであるインフ
ルエンザでは、ワクチンによる感染予防は困難である。
なぜなら、インフルエンザの場合、インフルエンザウイ
ルスのエンベロープに存在する抗原をワクチンとして使
用しているが、この抗原部分がしばしば変異を繰り返
し、元のウイルスに対するワクチンは変異型のウイルス
に対して何ら効果を示さないからである。また、ＨＩＶ
のようにワクチンとして利用可能な抗原が不明な場合や
臓器移植後の免疫抑制剤投与による免疫機能低下時にし
ばしば発症するサイトメガロウイルス感染症等に対して
は、ワクチンによる感染予防は困難である。さらに、ワ
クチンによっては、病気に罹患する危険があり、ワクチ
ンの接種による副作用も考慮すべき問題である。

【０００８】近年、ウイルス学の研究進展により、ウイ
ルスのヒトへの感染についても、前述した病原性細菌に
よる感染の場合と同様、標的細胞すなわち生体上皮の表
層に存在する複合糖質の糖鎖構造等からなるレセプター
にウイルスが結合して細胞内へウイルスが侵入すること
が明らかになっている。例えば、ＨＩＶは、Ｔリンパ球
の表面に存在するＣＤ４レセプターに結合して感染する
ので、ＣＤ４を大量に血中に投与することによりＡＩＤ
Ｓの発症を予防することができるといわれている。ま
た、インフルエンザウイルスも、細胞の表面に存在する
シアル酸結合複合糖質分子からなるレセプターに結合し
て感染するので、このシアル酸結合複合糖質分子や類似
の糖鎖構造を有する物質を投与することにより、インフ
ルエンザウイルスによる感染を予防したり、感染後の他
の細胞や組織へのインフルエンザウイルスの伝搬を防御
することが考えられている。

【０００９】従来、病原性細菌やウイルスのレセプター
への結合を阻害して感染を防御する効果を有する物質と
して、κカゼインやそのプロテアーゼ分解物であるκカ
ゼイングリコマクロペプチドが知られている (特開昭 6
3-284133号公報) 。また、同様のメカニズムでκカゼイ
ングリコマクロペプチドが抗歯垢及び抗齲歯剤として有
効であることも知られている (特開昭 63-233911号公
報) 。さらに山川らは、インフルエンザウイルスによる
赤血球凝集を阻害する物質をヒト血球から単離して、こ
の物質がシアル酸を構成糖とする糖タンパク質であるこ
とを明らかにした（生化学, vol.31, pp.416-421, 195
9) 。

【００１０】ところで、乳中に含まれる感染防御機能を
有するタンパク質として、ラクトフェリンが知られてい
る。このラクトフェリンの病原性細菌に対する感染防御
機能は、ラクトフェリンのもつ鉄キレート力により、そ
の増殖に必要な鉄が病原性細菌から奪い取られて増殖が
抑制されることによる。しかしながら、このラクトフェ
リンによる病原性細菌増殖抑制効果は一時的なものであ
り、また、他の食品と同時にラクトフェリンを摂取する
場合には、ラクトフェリンが食品中に含まれる全ての鉄
分をキレートするので、多量のラクトフェリンを摂取す
る必要があるという問題がある。

【００１１】なお、ラクトフェリンに関しては、その鉄
キレート力による病原性細菌増殖抑制機能とは全く別の
メカニズムによる病原性細菌の腸管細胞への付着を阻止
する感染防御機能が示唆されているが、この病原性細菌
感染防御機能における鉄結合型ラクトフェリンの役割に
ついては、全く明らかにされていない。また、分子中の
糖鎖構造がウイルスの細胞への付着を阻止するので、抗
ウイルス剤としてもラクトフェリンは有効であることが
知られている（特開平2-233619号公報）。しかし、この
ウイルス感染防御機能においても、鉄結合型ラクトフェ
リンの役割は全く明らかにされていない。

【００１２】

【発明が解決しようとする課題】本発明者らは、従来よ
り、ラクトフェリンのもつ薬理作用に注目し、鋭意研究
を進めていたところ、病原性細菌やウイルスの細胞への
付着を阻止する機能に関しては、鉄非結合型ラクトフェ
リンに殆ど活性がないのに対し、鉄結合型ラクトフェリ
ンに強い活性があることを見出した。そして、この活性
は、鉄結合型ラクトフェリンの鉄飽和度に依存すること
を見出し、本発明を完成するに至った。したがって、本
発明は、病原性細菌及びウイルスに対する新規な感染防
御剤あるいはこのような感染防御機能を賦与した新規な
医薬品及び飲食品を提供することにある。さらに、具体
的には本発明は、鉄結合型ラクトフェリンを有効成分と
する病原性細菌及びウイルス感染防御剤を提供すること
を課題とする。また、本発明は、鉄結合型ラクトフェリ
ンを配合して病原性細菌及びウイルス感染防御機能を賦
与した医薬品及び飲食品を提供することを課題とする。

【００１３】

【課題を解決するための手段】本発明は、病原性細菌や
ウイルスに対する感染防御剤の有効成分として、あるい
は病原性細菌やウイルスに対する感染防御機能を医薬及
び飲食品に賦与するために、鉄結合型ラクトフェリンを
使用することを特徴とする。

【００１４】本発明で使用する鉄結合型ラクトフェリン
は、ウシ等の哺乳動物の乳、あるいは、これらの脱脂乳
やホエー等を原料としてイオン交換クロマトグラフィー
等の処理を施すことにより得られるラクトフェリンに、
例えば、塩化第二鉄を溶解したクエン酸ナトリウム等の
溶液中で鉄イオンをキレートさせた後、透析して脱塩す
ることにより調製することができる。また、ラクトフェ
リンに鉄イオンをキレートさせる際には、遺伝子組み換
えの技術により得られたラクトフェリンを使用しても良
いし、市販のラクトフェリンを使用しても良い。

【００１５】ウシ等の哺乳動物の乳、あるいは、これら
の脱脂乳やホエー等から、ラクトフェリンを得る方法と
しては、モノクローナル抗ラクトフェリン抗体を使用す
る方法 (特開昭 60-166619号公報、特開昭 60-145200号
公報) 、ヘパリンを固定化した架橋型のセルロースやキ
トサンを担体として使用する方法 (特開昭 63-255299号
公報) 、架橋型ポリサッカライドの硫酸エステル化物を
担体として使用する方法 (特開昭 63-255300号公報) 、
スルホン基を導入した多糖類アフィニティ担体を使用す
る方法 (特開平3-109400号公報) 、陽イオン交換体を担
体として使用し、イオン強度及びpHを調整することによ
り溶出する方法 (特開平5-202098号公報) 等が知られて
いる。本発明で使用する鉄結合型ラクトフェリンの鉄飽
和度としては、好ましくは20％以上であり、より好まし
くは50％以上 100％までである。

【００１６】

【発明の実施の形態】本発明の病原性細菌及びウイルス
感染防御剤は、鉄結合型ラクトフェリンを有効成分とし
たものである。病原性細菌及びウイルス感染防御剤の剤
型は、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、粉剤等とする
ことが望ましい。これらは経口的に投与することが望ま
しい。また、これらの剤型は、従来知られている普通の
方法で製造することができる。例えば製剤製造上許容さ
れる担体、賦形剤等と混合して成型する。また、本発明
の病原性細菌及びウイルス感染防御機能を賦与した医薬
及び飲食品は、鉄結合型ラクトフェリンを前記のような
剤型として医薬、特に経口剤に配合したり、鉄結合型ラ
クトフェリンを牛乳、乳飲料、コーヒー飲料、ジュー
ス、ゼリー、ビスケット、パン、麺、ソーセージ等の飲
食品、さらには、各種粉乳の他、乳児、幼児及び低出生
体重児等を対象とする栄養組成物に配合したりしたもの
である。これらは、病原性細菌及びウイルスに対する感
染防御機能を有するので、これらの病原性細菌あるいは
ウイルスに感染する疾病を予防し、あるいは疾病を治療
する用途に用いられる。このような疾病には、大腸菌に
基づく下痢、食中毒、ストレプトコッカス ミュータン
スに基づく齲蝕病、インフルエンザウイルスに基づくイ
ンフルエンザ、サイトメガロウイルスに基づく妊婦等へ
の感染が例示される。

【００１７】本発明で、病原性細菌及びウイルスに対す
る感染防御効果を発揮させるためには、成人の場合、鉄
結合型ラクトフェリンを１日当たり 0.1〜 5,000mg摂取
できるように配合量等を調整すれば良い。

【００１８】次に、実施例及び試験例を示し、本発明を
詳しく説明する。

【実施例１】鉄結合型ラクトフェリン (鉄飽和度 100
％) の調製 市販のラクトフェリン (オレオフィナ社製) 5gの１％水
溶液に１／５量の0.003M塩化鉄(III) を含む0.1Mクエン
酸三ナトリウム溶液を加えて１時間撹拌し、鉄飽和度 1
00％の鉄結合型ラクトフェリン溶液を調製した。この溶
液に含まれるラクトフェリンについては、全てのラクト
フェリン分子に鉄イオンが結合して鉄飽和度が 100％に
なっていることを確認した。次に、この鉄結合型ラクト
フェリン溶液を透析チューブに封入し、蒸留水に対して
透析して余分な塩類を除去した後、凍結乾燥して、鉄飽
和度 100％の鉄結合型ラクトフェリン粉末5gを得た。

【００１９】鉄非結合型ラクトフェリン (鉄飽和度０
％、アポラクトフェリン) の調製 市販のラクトフェリン (オレオフィナ社製) 5gの１％水
溶液を透析チューブに封入し、20倍量の0.05％ＥＤＴＡ
を含む0.1Mクエン酸水溶液に対して４℃で30時間透析し
た。引き続き、この透析チューブを取り出して、蒸留水
に対して24時間透析し、鉄飽和度０％の鉄非結合型ラク
トフェリン（アポラクトフェリン）溶液を調製した。こ
の溶液に含まれるラクトフェリンについては、全てのラ
クトフェリン分子に鉄イオンが結合しておらず鉄飽和度
が０％になっていることを確認した。次に、透析を完了
した溶液を凍結乾燥して、鉄飽和度０％の鉄非結合型ラ
クトフェリン粉末5gを得た。

【００２０】鉄結合型ラクトフェリン (鉄飽和度20％及
び鉄飽和度50％) の調製 得られた鉄結合型ラクトフェリン (鉄飽和度 100％) 粉
末を水に溶解し、濃度が 10mg/mlの鉄結合型ラクトフェ
リン (鉄飽和度 100％) 水溶液を調製すると共に、得ら
れた鉄非結合型ラクトフェリン (鉄飽和度０％) 粉末を
水に溶解し、濃度が 10mg/mlの鉄非結合型ラクトフェリ
ン (鉄飽和度０％) 水溶液を調製した。そして、この鉄
結合型ラクトフェリン (鉄飽和度 100％) 水溶液と鉄非
結合型ラクトフェリン (鉄飽和度０％) 水溶液を２：８
の割合で混合することにより、鉄飽和度20％の鉄結合型
ラクトフェリン溶液を調製し、凍結乾燥して、鉄飽和度
20％の鉄結合型ラクトフェリン粉末を得た。

【００２１】また、この鉄結合型ラクトフェリン (鉄飽
和度 100％) 水溶液と鉄非結合型ラクトフェリン (鉄飽
和度０％) 水溶液を５：５の割合で混合することによ
り、鉄飽和度50％の鉄結合型ラクトフェリン溶液を調製
し、凍結乾燥して、鉄飽和度50％の鉄結合型ラクトフェ
リン粉末を得た。

【００２２】

【試験例１】実施例１に示した方法で調製した各鉄飽和
度の鉄結合型ラクトフェリン及び鉄非結合型ラクトフェ
リンを試料として、病原性大腸菌に対する感染防御効果
を調べた。感染防御試験は、次のように行った。ヒト小
腸細胞（JTC-17）（東京医科大より分譲を受けた）を 2
5cm²底面積培養フラスコで、５％牛胎児血清を含むダル
ベッコ変法イーグル培地（５％ＦＣＳ／ＤＭＥＭ）によ
り、37℃、二酸化炭素濃度５％で培養した。細胞がほぼ
コンフルエントの状態に増殖したら、常法に従ってトリ
プシン−ＥＤＴＡで細胞を剥がし取り、遠心操作により
細胞を集めた。上清を吸い出し、新たに５％ＦＣＳ／Ｄ
ＭＥＭ 8mlに細胞を懸濁した。得られた細胞懸濁液各１
mlを10ml容ポリスチレンチューブ（ファルコン社2095）
に入れ、37℃で３日間培養した。

【００２３】病原性大腸菌H10407株、Pb176 株（都立衛
生研より分譲を受けた）をそれぞれ１白金耳取り、普通
ブイヨン培地４mlで、37℃で１夜培養した。そして、培
養終了後、3,000rpm、10分間遠心分離することにより集
菌し、これをpH８に調整したＰＢＳで３回洗浄した。そ
の後、病原性大腸菌をpH８に調整したＰＢＳ 1mlに懸濁
し、ＦＩＴＣ（フルオレッセン イソチオシアネート
Fluorescein Isothiocyanate) 1mg を加えてよく溶解
し、４℃で３時間ゆっくり撹拌しながら反応させて病原
性大腸菌をＦＩＴＣラベルした。ラベルした病原性大腸
菌は、ＰＢＳにて３回洗浄した後、ＰＢＳ 3mlに懸濁し
た。このようにして調製したＦＩＴＣラベル化病原性大
腸菌懸濁液 400μl に、各試料のＰＢＳ溶液 200μl を
混合し、37℃で１時間インキュベートした。

【００２４】一方、３日間の培養を終えたJTC-17細胞を
1,000rpmで５分間遠心分離して上清の培地を除き、さら
にＰＢＳで３回洗浄し、これに上述の病原性大腸菌と各
試料とを混合してインキュベートした溶液 600μl を加
え、37℃で30分間インキュベートした。インキュベート
終了後、750rpmで５分間遠心分離し、細胞だけを沈澱さ
せ、細胞に付着せずに上清に残った病原性大腸菌を吸い
出した。さらに、ＰＢＳにて細胞を２回洗浄した。ＰＢ
Ｓで洗浄した細胞に 200U トリプシン／ＰＢＳ900μl
を加えて激しく撹拌した。これに 0.1％ＳＤＳ 100μl
、１mlの脱イオン水を加えて激しく撹拌し、30分静置
することにより細胞を溶解した。この溶液を蛍光分光光
度計（日立フルオレッセンススペクトロメーターF-300
0）にて励起波長 520nm、蛍光波長 520nmで相対蛍光強
度を測定し、蛍光ラベルした病原性大腸菌のJTC-17細胞
への付着を評価した。表１には試料を添加しない時の相
対蛍光強度（ブランク）を付着率 100％、蛍光ラベルし
た病原性大腸菌のポリスチレンチューブへの非特異的な
吸着（ポリスチレンチューブ内に検体と同じ条件で測定
した相対蛍光強度）を付着率０％とし、各試料を添加し
た際の付着率（％）を示している。実験は３連で行っ
た。

【００２５】

【表１】

【００２６】

【試験例２】実施例１に示した方法で調製した各鉄飽和
度の鉄結合型ラクトフェリン及び鉄非結合型ラクトフェ
リンを試料として、ストレプトコッカス・ミュータンス
に対する感染防御効果を調べた。試験は、次のように行
った。３種のストレプトコッカス ミュータンス(ATCC-
27670, ATCC-25175, ATCC-27351)を１白金耳取り、ブレ
インハートフージョン（ＢＨＩ）培地４mlで一夜培養し
た。一夜後、3,000rpmで10分間遠心することにより集菌
し、上清の培地を吸い出した。さらに、これをＰＢＳで
３回洗浄し、これをOD650=0.8 となるようにＰＢＳに懸
濁した。この菌懸濁液と試料溶液を当量混合し、10mlの
ポリスチレンチューブ（ファルコン社2095）に入れ、よ
く撹拌し、37℃で３時間インキュベートした。インキュ
ベート終了後、OD650 を測定し、次式から付着率（％）
を求めた。 付着率（％）＝0.4 − (Ｘ／0.4)× 100× (試料のOD65
0) 実験は２連で行い、その結果を表２に示した。これによ
ると、鉄非結合型ラクトフェリンに比べ鉄結合型ラクト
フェリンは、う歯原菌のポリスチレンチューブへの付着
を阻止し、鉄飽和度が大きい程その阻止効果は高くなる
傾向を示した。

【００２７】

【表２】

【００２８】

【試験例３】実施例１に示した方法で調製した各鉄飽和
度の鉄結合型ラクトフェリン及び鉄非結合型ラクトフェ
リンを試料として、インフルエンザウイルスに対する感
染防御効果を調べた。試験は、次のように行った。イン
フルエンザウイルスのヒヨコ安定化赤血球（武田薬品工
業製）及びヒト赤血球（Ｏ型）に対する凝集反応阻止
（ＨＩ）活性を測定した。ＨＩ活性は、前述した山川ら
の方法（生化学, vol.31, pp.416-421, 1959) に準じて
測定した。インフルエンザウイルスとしては、デンカ生
研より入手した不活化インフルエンザウイルスのＡ／山
形／１２０／８６（Ｈ１Ｎ１）、Ａ／新潟／１０２／８
１（Ｈ３Ｎ２）、Ａ／四川／α／８７（Ｈ３Ｎ２）、Ａ
／福岡／Ｃ２９／８５（Ｈ２Ｎ２）、Ｂ／長崎／１／８
７、Ｂ／シンガポール／２２２／７９、及び静岡薬科大
学より入手した不活化されていないインフルエンザウイ
ルスのＡ／ＰＲ／８／３４（Ｈ１Ｎ１）を用いた。ヒヨ
コ安定化赤血球に対するＨＩ活性を表３に、ヒト赤血球
に対するＨＩ活性を表４にそれぞれ示す。これによる
と、鉄非結合型ラクトフェリンに比べ鉄結合型ラクトフ
ェリンは、インフルエンザウイルスに対して強いＨＩ活
性を示し、鉄飽和度が大きい程その阻止効果は高くなる
傾向を示した。

【００２９】

【表３】 ────────────────────────────────── 鉄飽和度（％） ───────────────────────── 0 20 50 100 ────────────────────────────────── 山形 N.D. N.D. N.D. N.D. 新潟 4 0.13 6.25×10² 1.6×10² 四川 8 0.13 6.25×10² 1.6×10² 福岡 4 0.25 6.25×10² 3.1×10² 長崎 − 0.5 0.13 6.25×10² シンガポール − 0.5 0.13 6.25×10² ＰＲ − 8 1 0.25 ──────────────────────────────────

【００３０】

【表４】 ────────────────────────────────── 鉄飽和度（％） ───────────────────────── 0 20 50 100 ────────────────────────────────── 山形 4 0.25 0.13 6.25×10² 新潟 4 0.13 6.25×10² 1.6×10² 四川 8 0.13 6.25×10² 1.6×10² 福岡 4 0.13 6.25×10² 3.1×10² 長崎 − 0.5 0.13 6.25×10² シンガポール − 0.5 0.13 6.25×10² ＰＲ − 8 2 0.5 ──────────────────────────────────

【００３１】

【試験例４】実施例１に示した方法で調製した各鉄飽和
度の鉄結合型ラクトフェリン及び鉄非結合型ラクトフェ
リンを試料として、静岡薬科大学より入手した不活化さ
れていないインフルエンザウイルスのＡ／ＰＲ／８／３
４（Ｈ１Ｎ１）及びＡ／愛知／２／６８（Ｈ３Ｎ２）を
段階的に希釈し、５個のニワトリ10日卵に 0.1mlずつ尿
液喰内腔内に接種し、３日後、個々の卵の尿液50μl を
取り、これを 0.5％ヒヨコ安定化赤血球と混合、撹拌
し、赤血球の凝集によって感染率を決定した。 100％の
感染率を示した希釈倍率のウイルス希釈液の 0.1mlにそ
れぞれの鉄飽和度に調整した鉄結合型ラクトフェリン又
は鉄非結合型ラクトフェリンをそれぞれ 0.5mg溶解し、
室温で30分間インキュベートした後、ニワトリ10日卵に
0.1mlずつ尿液腔内に接種した。３日後、個々の卵の尿
液50μl を取り、赤血球凝集反応により感染率を決定し
た。１群５個の卵を使用し、各群の感染率（％）を得
た。その結果を表５に示す。これによると、鉄非結合型
ラクトフェリンに比べ鉄結合型ラクトフェリンは、イン
フルエンザウイルスに対して強い感染防御効果を示し
た。

【００３２】

【表５】

【００３３】

【試験例５】実施例１に示した方法で調製した各鉄飽和
度の鉄結合型ラクトフェリン及び鉄非結合型ラクトフェ
リンを試料として、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）に
対する感染防御効果を調べた。なお、各鉄飽和度に調整
した鉄結合型ラクトフェリン及び鉄非結合型ラクトフェ
リンを２％血清添加ＭＥＭ培地に5mg/mlとなるように溶
解し、0.45μm のフィルターで濾過滅菌し、ストック溶
液を必要に応じて２％血清添加ＭＥＭ培地により希釈し
て用いた。ヒトＣＭＶ(Towne株) を各鉄飽和度の鉄結合
型ラクトフェリン含有培溶液(0.1mg/ml)で１時間インキ
ュベート後、ヒト胎児線維芽細胞（ＨＥＬ細胞）に感染
させた。さらにラクトフェリンを含まない培養液をコン
トロールとした。24時間培養後、ヒトＣＭＶ陽性血清で
蛍光染色し細胞へのヒトＣＭＶの吸着能力を測定した。
そして、カバースリップ当たりの蛍光陽性細胞数の平均
値を求めた。その結果を表６に示す。これによると、鉄
非結合型ラクトフェリンに比べ鉄飽和度が大きい鉄結合
型ラクトフェリン程ＣＭＶ吸着侵入能力を抑制すること
が確認された。

【００３４】

【表６】

【００３５】

【実施例２】表７に示した配合により原料を混合した
後、打錠機で打錠して、病原性細菌及びウイルス感染防
御機能を賦与したタブレットを製造した。

【００３６】

【表７】 ─────────────────────────────── 鉄結合型ラクトフェリン (鉄飽和度 100％) 10.0 (重量％) 還元麦芽糖 52.0 砂糖 15.0 乳糖 18.7 クエン酸 2.0 香料 1.0 滑沢剤 1.3 ───────────────────────────────

【００３７】

【実施例３】表８に示した配合により原料を混合し、容
器に充填した後、加熱殺菌して、病原性細菌及びウイル
ス感染防御機能を賦与した飲料を製造した。

【００３８】

【表８】 ─────────────────────────────── 鉄結合型ラクトフェリン (鉄飽和度 100％) 2.0 (重量％) 果糖ブドウ糖液糖 8.0 クエン酸 0.6 リンゴ果汁 10.0 水 79.4 ───────────────────────────────

【００３９】

【発明の効果】本発明の病原性細菌及びウイルス感染防
御剤や病原性細菌及びウイルス感染防御機能を賦与した
医薬及び飲食品は、病原性細菌やウイルスに対して優れ
た感染防御効果を示す。しかも鉄飽和度を高めた鉄結合
型ラクトフェリンを使用するので、比較的安価に大量供
給が可能であり、しかも、極めて安全性が高いという特
徴を有している。

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 鉄結合型ラクトフェリンを有効成分とす
   る病原性細菌及びウイルス感染防御剤。
2. 【請求項２】 鉄結合型ラクトフェリンの鉄飽和度が20
   〜 100％である請求項１記載の感染防御剤。
3. 【請求項３】 鉄結合型ラクトフェリンを配合して病原
   性細菌及びウイルス感染防御機能を賦与した医薬又は飲
   食品。
4. 【請求項４】 鉄結合型ラクトフェリンの鉄飽和度が20
   〜 100％である請求項３記載の医薬又は飲食品。