JPH11503426A - 造血機能に関して刺激活性を示すｍｄｐ誘導体および複合体ならびにそれらを含む組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 例えばムラジメチド（Ｍuradimetide）、ムロクタシン（muroctasine）またはＭＴＰ-ＰＥなどの水溶性ムラミルペプチド誘導体を少なくとも１つ含む、造血機能を刺激するための、およびある種の治療による骨髄毒性効果を防止するための薬学的組成物。

Description

【発明の詳細な説明】 造血機能に関して刺激活性を示すＭＤＰ誘導体および複合体 ならびにそれらを含む組成物 本発明は、造血機能を刺激して、骨髄由来の幹細胞を大量に動員し、血流中に 生じせしめることができる薬学的組成物に関する。本発明が提供し得るのは、 １）新しい抗骨髄毒性治療 ２）骨髄幹細胞の新しい採取方法であって、 ａ）自己移植または同種移植 ｂ）遺伝子治療技術における使用 を目的とする骨髄生検を代替し得る方法である。 前記薬学的組成物は、下記の一般式(I)のＭＤＰ誘導体を少なくとも一つ含 み、本発明の主題として特に印象的な例は、式 Ｎac-Ｍur-Ｌ-Ａla-Ｄ-Ｇlu-[Ｏ ＣＨ3]-ＯＣＨ3で表されるムラジメチド（Ｍuradimetide）またはＭＤＰＡジメ チルエステルである。 ムラミルペプチドおよびそれらのエステル誘導体は、Ｎ-アセチル-ムラミル -Ｌ-アラニル-Ｄ-イソグルタミン（ＭＤＰ：ムラミルジペプチド）として初めて 記載されて以来、多くの刊行物および特許に記載されてきた一群の分子である。 簡潔にいえば、それらは、免疫アジュバント活性、抗感染活性、抗癌活性、 抗アレルギー活性およびサイトカインの分泌調節を含む多様な生物学的活性を示 し得る。しかしながら、これらのムラミルペプチドの多くは、非常に有用な生物 学的活性を示しながらも、しばしば副作用や欠点（特に毒性効果または水溶液中 への低溶解性による処方の難しさ）をも発現するため、医薬として用いることが 妨げられている。 さらに、ムラミルペプチドは、作用スペクトルが非常に広い。 ごく最近、下記の一般式（I）で表されるムラミルペプチドジエステル、特 にムラジメチドは、免疫刺激性という特別な性質を有し、同時に、効能、処方、 無毒性など、他のＭＤＰ誘導体には見られなかった多数の有用性をもっているこ とが示されてきた。特に外部からの投与（特にエアロゾルおよび経口による） で活性な免疫活性調節物質であるため、この免疫刺激薬をより広くまた柔軟に使 用することができると予想される。また、全身投与を行ったときの許容度が高い という利点もある。ＭＤＰ誘導体に関して既に記載された特性の、本質的な特色 は、液性または細胞性免疫システムの増強に関連している。 驚くべきことに、本発明は、下記の式(I)、(II)、(III)で表されるいくつか の型のＭＤＰ誘導体を、適切であれば式(IV)の化合物または式(V)と(VI)の複合 体と組み合わせると、とりわけＡＺＴを何度も投与することによって循環白血球 のレベルがかなり減少した後に、正常または未成熟な血液成分（特に循環血液中 の好中球）を増大せしめるという発見の結果である。事実、薬学的組成物を投与 後、骨髄球／前骨髄球の大幅な増加を伴って、血流中の正常な白血球が増加し、 次に好中球が、その後リンパ球が増加することが観察された。もっとも特筆すべ きは、極度の骨髄毒性を示す用量のＡＺＴによる処置と組み合わせた後でさえも 、この効果は大変強く観察されたことである。 全ての血液細胞は、骨髄に由来する共通の幹細胞から生じる。分化の最終段 階に達する前に、これらの細胞は異なる段階を経る。多分化能性幹細胞は、Ｔま たはＢ前リンパ細胞、または赤血球・骨髄球・顆粒球および骨髄核細胞の（myel okaryocytic）幹細胞のうちのいずれかに分化する。これらの異なる中間段階の 中では、それらを形態的に区別することができないので、最も幼若なもを前骨髄 球／骨髄球という用語で、最も分化に間近いものを後骨髄球という用語で示す。 これ以降の本明細書中では、これらの未分化細胞を、集合的にＨＳＣ（Ｈem atopoietic Ｓtem Ｃell：造血性幹細胞）と称する。 正常状態では、ＨＳＣのレベルは、血液中に存在する白血球の1％程度であ る。 以下の三つのケースにおいては、造血を亢進させ、ＨＳＣを動員することが 有用である。 １）ある種の薬物の骨髄毒性作用を打ち消し、血液細胞（特に好中球）を 正常レベルに維持する ２）骨髄細胞の同種または自己移植のために、骨髄生検の替わりに、循環 血液中の高レベルのＨＳＣを採取する ３）ある種の遺伝子治療を行うための担体として用いるために、循環血液 中から高レベルのＨＳＣを得る。 １）抗骨髄毒性治療： 癌やＡＩＤＳの化学療法、免疫療法または放射線療法のように、治療 または医薬のなかには、造血機能を低下させ、治療中の感染リスクを著しく増大 せしめるものがある。本発明の薬学的組成物は、骨髄毒性により生じる免疫系細 胞、特に好中球の減少を打ち消すことができる。さらに、免疫療法、特にサイト カインを用いる治療の中には、細胞毒性を生じるものがあるが、本発明の組成物 は、これに対する拮抗剤の役割を果たすことができる。 ２）骨髄移植の実施を可能にする細胞を得る： 強烈な化学療法または放射線療法による抗癌治療は、血液細胞および 免疫系細胞の崩壊を起こす。これらのケースでは、造血系は、骨髄細胞の移植に よって再構成される。自己移植は、癌が骨髄細胞以外の細胞を冒す場合に行われ 、この場合、破壊的な治療の前に、患者自身からサンプルをとる。同種移植（す なわち、適合性のある提供者由来の細胞を使用すること）は、骨髄細胞自体が癌 であるときに行われる。 どちらの場合においても、骨髄の幹細胞を増やすことは非常に有用で あるが、循環血液から幹細胞を大量に採取できるようにして、移植への利用を促 進することは最も有用である。事実、現在では、移植の準備のためにの豊富な血 液を使用するには、大量のサンプルを多数とらねばならず、これは非常に長期間 にわたる。さらに、ＨＳＣの増加した血液は、高価かつ許容度の低いサイトカイ ン（ＧＭ-ＣＳＦ）の投与に引き続き、大量の血液サンプルを多数採取して得ら れ、これは毎回入院を要する集団的処置を行うことによってなされるので、患者 と提供者に苦痛を与える準備を実施する必要がある。本発明の薬学的組成物は、 処置からわずか数日後（処置後約４日）に、血液中のＨＳＣの数を200倍も増幅 させるので、通院患者から骨髄移植に必要な素材を得ることが可能となる。 ３）遺伝子治療に使用できる、精製容易な幹細胞の取得 ある種の遺伝子治療技術の使用は、循環血液中のＨＳＣを大量に得 ることができるかどうかにかかっている。この目的は、骨髄から精製することが 非常に困難なＨＳＣを血液から非常に高い割合で得ることを可能にする本発明の 薬学的組成物によって達成され得る。 遺伝子治療の前臨床試験および臨床試験により、長寿命で、発現能 力が高く、全身に分布するような幹細胞を用いることが必要であることが示され た。ＨＳＣは、ゴーシェ病のような免疫不全または重度免疫不全（ＳＣＩＤ：重 症複合免疫不全症）症状を打ち消すか、または骨髄腫、白血病、乳ガンまたは卵 巣癌およびそれに類する癌を打ち消すか、または感染性の疾病（特にＡＩＤＳ） に対する抵抗性を誘導するための、非常に有用な遺伝子担体であることが広く認 められている。 それ故、これらの目的を満たすためには、通常の細胞分離技術によ って循環血液から、容易に大量精製することが可能なＨＳＣを随意に得ることが 必須であり、これはまさに、本発明の組成物またはそれを含有する医薬によって 得られる状態といえる。 本発明の組成物は、無処置では1％にも満たない細胞しか検出でき ない循環ＨＳＣの割合を200倍も増幅させる結果、循環血液中の細胞を使用して 、細胞破壊後に造血機能を再構築する方法の開発を企画できるようになった。 このＨＳＣに対する影響は、以下の実施例７に示すように、前記幹 細胞の分化段階にかかわらず起こる。 本発明は、あるＭＤＰ誘導体の新しい特性の発見の結果としてなされたもので あり、活性成分として次式(I)、(II)または(III)で表される少なくとも一つの化 合物を含むことを特徴とする、ある種の治療による骨髄毒性を予防または治療す ること、および／または造血機能を刺激することを目的とした新規薬学的組成物 に関する。 すなわち、上記活性成分は、 ここで、Ｒ＝ＨまたはＣＨ₃ Ｘ＝Ｌ-ＡlaまたはＬ-Ｔhr Ｒ_α＝ＮＨ₂またはＯ(ＣＨ₂)_xＨ (Ｘ＝1〜4) Ｒ_γ＝ＯＨ(Ｒ_α＝ＮＨ₂の場合を除く)またはＯ(ＣＨ₂)_xＨ (Ｘ＝1〜4 ) または、次式(II)のムロクタシン（muroctasine）： Ｎac-Ｍur-Ｌ-Ａla-Ｄ-イソＧln-Ｎ^α-ステアロイル-Ｌ-Ｌys または以下の式(III)のＭＴＰ-ＰＥ： モノナトリウムＮac-Ｍur-Ｌ-Ａla-Ｄ-isoＧln-Ｌ-alanyl-2-(1',2-ジ-パルミ トイル-sn-グリセロ-3'-フォスフォリル)エチルアミドである。 式(I)に相当する化合物のなかで、特に印象的な例は、以下の式で表されるム ラジメチドである。Ｎac-Ｍur-Ｌ-Ａla-Ｄ-Ｇlu[ＯＭe]-ＯＭe この組成物は、血液中に存在する成分、特に赤血球および血小板を正常または それ以上に回復させることができる。 式(I)、(II)または(III)の化合物の用量が、ヒトまたは動物のkg体重あたり0. 1〜25mgの経口投与、または有効成分の量がkg体重あたり0.05〜2.5mgの全身投与 になるような組成により、これらの化合物の希望の効果を得ることができる。 ＡＺＴを用いる治療は、骨髄毒性という欠点を有する。驚くべきことに、式(I )または(II)または(III)の誘導体を下記の一般式(IV)のヌクレオシド誘導体とと もに投与すると、血液中のＨＳＣレベルが10〜300倍、200倍前後増加するので、 有利には、本発明の組成物は、式(I)、(III)または(III)の誘導体とともに式(IV )の誘導体をも含む。 Ｂは、プリンまたはピリミジン塩基であり、 Ｒ＝Ｈ、Ｎ₃またはハロゲンである。 この誘導体の例は、3'-アジド-3'-デオキシチミジン（ＡＺＴ）である。また 、ＡＺＴに類似した骨髄毒性および抗レトロウイルス活性を示す全てのヌクレオ シド、特にデオキシリボースではなくリボースを含むヌクレオシドと組み合わせ ることができる。これ以降、本明細書中で我々がＡＺＴというときはいつも、当 業者は同様の使用において、他のヌクレオシドを用いることが可能であり、ＡＺ Ｔと同等であると考えられることが分かるであろう。 本発明の組成物において、ＡＺＴをＭＤＰ誘導体と組み合わせるときには、当 該組成物は、1〜150mg/kgの１日用量を経口または全身投与し得る量のＡＺＴを 含有し、この１日投与量は1回でまたは数回に分けて投与することが可能である 。 式(I)、(II)または(III)のＭＤＰ誘導体と同時に式(IV)の誘導体を投与するに は、 − 少なくともこれら２種類の化合物を含む医薬（このような医薬は本発明 の一部である）によって、または − 各々が１種類の化合物を含む医薬を同時に投与するか（同時に投与する とは、少なくともある期間、それらの効果が重複して発現していることである） または、 − 同一の分子に式(I)と(IV)の化合物を結合する複合体を生成することによ って行われる。 同時投与とは、同じ処方で経口または全身投与されるか、または逆に、二つの 別個の処方で、一つまたは他の有効成分の効果が同時に生じるように十分に短い 時間間隔で投与することを意味することが、当然に理解されよう。 本発明はまた、抗骨髄毒性効果を示すか、または循環血液中に造血性幹細胞を 動員することができる複合体であって、以下の式のうちの一つで特定される複合 体に関する。 第一は、 ここで、Ｒ＝ＨまたはＣＨ₃ Ｒ_α＝ＮＨ₂またはＯ(ＣＨ₂)_xＨ (Ｘ＝1〜4) Ｘ＝Ｌ-ＡlaまたはＬ-Ｔhr ｘ＝0,1,2 Ｙ＝アミノ酸残基 ここで、Ａは、5'位のデオキシリボース残基にヒドロキシル官能基またはアミン 官能基を有し、3'位に水素、ハロゲンまたはアジド基を含むヌクレオシドである 。 式(V)に相当する有利な複合体は、以下の通りである。 Ｒ＝ＣＨ₃ Ｘ＝Ｌ-Ａla ｘ＝１ Ｙ＝Ｌ-Ａla Ｒ_α＝ＯＣＨ₃ 本発明による別の複合体は、以下の式に相当するものである。 ここで、Ｘ＝Ｌ-ＡlaまたはＬ-Ｔhr Ｙは、ジカルボン酸、特にコハク酸残基のようなアームである Ｚ＝ＯまたはＮＨ Ｒ＝ＨまたはＣＨ₃ Ｒ_αおよびＲ_γは、式(I)中と同じ意味であり、 Ａは、デオキシリボース残基の5'位にヒドロキシル官能基またはアミン 官能基を有し、3'位に水素、ハロゲンまたはアジド基を含むヌクレオシドである 。 式(VI)に相当する有利な複合体は、以下の通りである。 Ｘ＝Ｌ-Ａla Ｒ＝ＣＨ₃ Ｒ_α＝ＯＣＨ₃およびＲ_γ＝ＯＣＨ₃ xＹ＝ＣＯ-(ＣＨ₂)₂-ＣＯ Ｚ＝Ｏ Ａは、ＡＺＴである。 本発明はまた、ある種の治療または医薬による骨髄毒性効果の拮抗剤として用 いることができる薬学的組成物であって、経口または全身投与において薬学的に 許容可能な担体とともに、活性成分として式ＶまたはVIの複合体を含むことによ り特徴付けられる組成物に関する。 これらの化合物は新規であり、これらを合成する方法も本発明の一部をなす。 式(V)の化合物を合成するためには、2'-デオキシリボヌクレオシドのプリンま たはピリミジン残基中に存在するであろうアミンまたはヒドロキシル官能基を、 一 時的な保護を与える基によって一旦マスクする。すなわち、ヌクレオシド誘導体 の5'位の官能基は、メシル基（これはアジドに変えられ、最終的にはアミン官能 基へと水素化することができる）を経て、任意にアミン官能基に変換することが できる。ヌクレオシド誘導体の3'位の官能基は、水素、ハロゲン、アジド基、ま たはアジド基もしくはハロゲンのような求核試薬で置換することができるメシル 基の中のいずれかである。 混合無水物法、あるいはカルボジイミド法を用い、任意にイミダゾール、ヒド ロキシベンゾトリアゾールまたは代わりにＤＭＡＰ（ジメチルアミノピリジン） のような添加剤を用いて、ヌクレオシド誘導体の5'位のヒドロキシルまたはアミ ン官能基を、Ｒ_γがヒドロキシルまたはアミノ酸残基である式(I)のムラミルペ プチド誘導体に結合させる。 Ｒ_γがアミノ酸残基であれば、まず、ヌクレオシド誘導体と保護されたアミノ 酸との結合にを行い、次いで脱保護の後、グルタミン酸のγ-カルボキシル基が 遊離している式(I)のムラミルペプチド誘導体への結合を行うことができる。 過程の最後で、(V)型の複合体を得るために、存在し得る一時的保護基を除去 し適切であれば3'位のメシル基を、アジドまたはハロゲンに転換する。 その他の方法では、 i)ヌクレオシド誘導体の5'位のヒドロキシルまたはアミン官能基と保護された アミノ酸とを結合し、 続くステップで、ペプチド合成技術にしたがい、 ii)適切に保護されたＤ-グルタミン酸誘導体を結合し、 iii)保護されたＬ-アラニンまたはＬ-スレオニンを結合し、 iv)保護されたＮ-アセチルムラミン酸誘導体結合する。 操作の終わりに、(V)型の複合体を得るために、最終的には一時的保護基を除 去し、適切な場合には、3'位のメシル基をアジドまたはハロゲンに転換する。 式(VI)の化合物を合成するために、2'-デオキシリボヌクレオシドのプリンま たはピリミジン塩基の残基中に存在するであろうアミンまたはヒドロキシル官能 基を、一時的保護を与える基で一旦マスクする。すなわち、ヌクレオシド誘導体 の5'位の官能基は、（これは最終的に水素化してアミン官能基にすることができ る アジド官能基に修飾し得る）メシル基を経て、任意にアミン官能基に変換するこ とができる。 ヌクレオシド誘導体の3'位の官能基は、水素、ハロゲン、またはアジド基、ま たはアジド基もしくはハロゲンのような求核試薬で置換することができるメシル 基の中のいずれかである。 混合無水物法、あるいはカルボジイミド法、任意にイミダゾール、ヒドロキシ ベンゾトリアゾールまたは代わりにＤＭＡＰ（ジメチルアミノピリジン）を用い て、ヌクレオシド誘導体の5'位のヒドロキシルまたはアミン官能基を、Ａが欠如 した式(VI)のムラミルペプチド誘導体に結合させる。： アノマー水酸基(Ｃ1)は、一時的に保護されているか、または保護されておら ず、 ＺはＮＨまたはＯであり、 Ｙは、ジカルボン酸残基、特にコハク酸残基である。 このようなムラミルペプチド誘導体は、式(I)のムラミルペプチド誘導体から 調製されるが、この合成法は現在では非常によく知られたものであり、水素化分 解可能なベンジルグルコシドまたは他の適切な基で一時的にアノマーヒドロキシ ル基（Ｃ1）を保護し、水素化分解可能なベンジリデン基または酸分解可能なイ ソプロピリデン基で、４および５位のヒドロキシル基を保護するものである。一 時的保護を除去することにより、主要なヒドロキシル官能基（Ｃ6）を解離させ 、例えばコハク酸基で置換、または最終的に水素化してアミン官能基にすること ができるアジド官能基に修飾し得るメシル基を経て、アミン官能基に変換するこ とができる。このアミン官能基は、それから、例えばコハク酸基で置換される。 過程の終わりに、（VI）型の複合体を産生するために、存在している一時的保 護基を除去し、適切であれば、3'位のメシル基はアジドまたはハロゲンに変換さ れる。 本発明はまた、単独もしくは式（IV）の化合物と組み合わせた式(I)、(II)、( III)、(V)または(VI)の化合物の使用であって、ある種の治療または医薬による 骨髄毒性効果に対する拮抗剤として、または一般的血液循環において造血機能を 刺激することができる医薬の製造における使用に関する。 特に、ＡＩＤＳまたはある種の癌を治療するための化学療法の骨髄毒性効果を 打ち消すのに、このような使用を推奨する。 組み合わせという用語は、二つの化合物を同一の薬学的組成物中で投与するか 、または別個の組成物であるが、各成分の少なくとも一部の効果が同時に発現す るような時間間隔内にヒトまたは動物に投与することを意味する。 このような使用により、問題の医薬品は循環血液中の造血性幹細胞を増加させ ることができる。自家移植もしくは同種移植で骨髄移植を行う場合に、あるいは 遺伝子治療を行うためにＨＳＣを使用する場合に、この種の増加は有用である。 何故ならば、先に説明したように、ＨＳＣによって構成される全能性幹細胞は、 患者に全身性再投与をした後、異種遺伝子を十分に発現させるための最良の候補 だからである。必然的に、与えられた時間内に、随意に血中のＳＨＣはきわめて 高濃度になり、従って長期間反復投与する場合に推奨される通常の用量より多量 のＡＺＴを、短い時間間隔で与えることが適切となる。さらに、非経口、経口ま たは全身投与にかかわらず投与すべきＡＺＴの用量は似ており、同じような範囲 内にある。 この使用は、式(I)の化合物が式Ｎac-Ｍur-Ｌ-Ａla-Ｄ-Ｇlu[ＯＭe]-ＯＭeの ムラジメチド、または式(II)の誘導体がムロクタシン（muroctasine）、または 式(III)の誘導体がＭＴＰ-ＰＥであることを特徴とする。 本発明の好適な使用において、式(IV)の化合物は、3'-アジド-3'-デオキシチ ミジン（ＡＺＴ）である。 最後に、本発明は、ある種の化学療法の骨髄毒性効果を打ち消すために、ある いは血液中のＳＨＣ濃度を増大させるために、本発明の組成物を用いて治療する 方法を含む。 以下の実施例は、新しい使用法において、一群の化合物のうちの一つがもつ全 く驚くべき効果を示すことを目的とし、制限を示唆するものではない。実施例は 、マウスを用いて行われたものであり、明細書中に記載された表１、２および３ と図１〜１３によって示されている。下記にその意味するところを説明するとと もに、式(I)に含まれるクラスの成分のうちの一つ、すなわちムラジメチドが有 する特別の効果について、抗骨髄毒性効果および血流中へのＨＳＣの動員をとも に明 確に実証する。この効果は、ＭＤＰＡのような他のＭＤＰ誘導体または骨髄球を 刺激するために通常用いられる、ＧＭ-ＣＳＦのようなリンフォカインを用いて も生じない。 図１は、非骨髄毒性量（kgあたり5mg）（図1Ａ）または骨髄毒性量（kgあたり 40mg）（図1Ｂ）のＡＺＴとともにムラジメチドをを用いて経口的にマウスを処 置したときの、循環白血球の変化に対する影響を示している。 図２は、好中球数についての同様な図である。図2Ａは非骨髄毒性量のＡＺＴ （kgあたり5mg）で行った実験、図2Ｂは骨髄毒性量のＡＺＴ（kgあたり40mg）で 行った実験を示している。 図３は、骨髄球数について同様に表したものである。図3Ａは非骨髄毒性量の ＡＺＴ（kgあたり5mg）を示し、図3Ｂは骨髄毒性量のＡＺＴ（kgあたり40mg）を 示している。 図４は、ＡＺＴ投与後における、ムラジメチドとrmＧＭ-ＣＳＦ(recombinant mouse ＧＭ-ＣＳＦ)の循環好中球数に対する影響を示している。 図５には、循環白血球数に対する同様の比較を示している。 図６には、循環単球数に対する同様の比較を示している。 図７には、循環骨髄球数に対する同様の比較を示している。 図８は、マウスにおいて、ＡＺＴの静脈内投与により誘起された、循環血液中 の骨髄球数の変化に対する、ムラジメチドを経口的に用いた処置の影響を表して いる。比較している二つのＭＤＰ誘導体は、ＭＤＰＡ（Ｎac-Ｍur-Ｌ-Ａla-Ｄ- Ｇlu）とムラジメチドである。 図９は、７日間連続でＡＺＴ、ムラジメチド（ＭＤＭ）またはこれらの化合物 の混合物を経口的にＢＡＬＢ/cマウスに与える処置が、血小板数に及ぼす影響を 表している。 図１０は、７日間連続でＡＺＴ、ムラジメチド（ＭＤＭ）またはこれらの化合 物の混合物を経口的にＢＡＬＢ/cマウスに与える処置が、赤血球数に及ぼす影響 を表している。 図１１は、２週連続（１週あたり４日）でＡＺＴ、ムラジメチド（ＭＤＭ）ま たは両者の混合物を経口的にＢＡＬＢ/cマウスに与える処置が、循環骨髄球数に 及ぼ す影響を表している。 図１２は、図１１に示されたものと同種の実験を表しており、脾臓摘出を行っ たマウスに対する影響をみている。 図１３は、細胞毒性をもつ薬物（シクロフォスファミド）を事前に投与する処 置を行った正常マウスに対する、類似の実験を表している。 実施例１−単独投与されたムラジメジドの活性 下記の表１は、25mg/kgの用量で単独投与されたムラジメチド処置後の時間に 対して、白血球、好中球、リンパ球および骨髄球数を示したものである。 前記処置は、静脈内投与によって、４日間連続で行った。 この表は、単独投与されたムラジメチドが、３日および４日目に、きわめて有 意な循環骨髄球数の増加を誘導したことを明確に示している。 実施例２−好中球、白血球および骨髄球数の増加に及ぼすＡＺＴ処理後のムラ ジメジド処理の影響 ＡＺＴの単独処理は、従来どおり、循環白血球および好中球数の減少を引き起 こす。減少後、処理開始後およそ４〜７日に回復する。ＡＺＴ40mg/kgで処理後 、ムラジメチドを全身的または経口的に投与した場合、細胞数の減少はなく、逆 に、既に４日後には白血球数が少なくとも1.5倍、好中球数が３倍増幅されてい る。 この結果を下の表２にまとめる。 ０〜３日目に、雄のＣＤＩマウス（グループあたり５匹）に対してkgあたり40 mgの用量でＡＺＴを投与した。同じ日に、静脈内にkgあたり10mgまたは経口でkg あたり50mgの用量で、ムラジメチドを投与した。細胞の計数は、０日目（処理前 ）および３日目と４日目に行った。 表２は、投与様式にかかわらず、ムラジメチド存在下では、骨髄球または前骨 髄球の割合が顕著に増加していることを示している。 実施例３−赤血球および血小板に対する、ＡＺＴとムラジメチドの同時経口処 置の影響 赤血球および血小板数に対する７日間の処置の影響を、それぞれ図９と図１０ に示す。計数は、０日において得られたカウントに対する百分率として示されて いる。雌ＢＡＬＢ/cマウス（グループあたり５匹）を、７日間連続で毎日１回、 100mg/kgＡＺＴ（△）、50mg/kgＡＺＴ（□）または100mg/kgＡＺＴと50mg/kgム ラジメチドで同時（○）に処置した。０日から処置開始後１０日まで、血小板ま たは赤血球の計数を行った。ＡＺＴ、ムラジメチドまたはＡＺＴとムラジメチド の混合物のいずれについても血小板に対する毒性は観察されなかった。血小板数 は、４日〜５日目に上昇する傾向がある。他方、処置群で貧血が見られることが あるのは、出血が繰り返されるためかもしれない。それにもかかわらず、ＡＺＴ 単独処置群で観察されるのに比べて、二つの生産物の混合物で処置した動物は、 貧血の割合と程度が非常に減少している。このことは、混合物が、ＡＺＴの毒性 を打ち消す効果は、白血球だけではなく、赤血球にも及ぶ可能性があることを示 唆している。 実施例４−ＡＺＴとムラジメチドの同時経口処置後のＨＳＣの動員 下記の表３と図１１は、kgあたり50mgのＡＺＴ投与前、同時または投与後に、 マウスをムラジメチドで経口処置したときの循環骨髄球数に対する影響を、４日 間毎日投与してから２４時間後に試験した結果を示す。 処置前の平均循環骨髄球数は、５つのグループで1mlあたり3〜15×10⁴細胞で ある。 「p-値」は、Ｍann-ＷhitneyのＵ階級テストで算出した。 ＮＳは、差が有意でないことを示す。この表から、ＡＺＴとムラジメチドの共 同効果があるときは、循環骨髄球は、およそ200増加することが確認される。組 み合わせた２つの構成成分は、経口で同時にまたは別の時間に投与した。 図１１は、第一週には０，１，２および３日目に、第二週には７，８，９およ び１０日目に、25mg/kgＭＤＭ（×）、50mg/kgＡＺＴ（○）および二つの混合物 （□）で２週間処置したときの、マウスの骨髄球数に対する影響を示している。 ムラジメチド単独でも、およびムラジメチドとＡＺＴの混合物では特に、ＳＨＣ の動員に対して顕著な効果を有するが、ＡＺＴ単独ではほとんど効果がないこと が明白である。効果は第一週において特に顕著であり、このことは異なる処置サ イクル間では、処置にはある種の時間経過が必要であり、適切な場合には、反復 処置が有用であることを示している。 実施例５−ＡＺＴ、ＭＤＭおよびこれらの化合物の混合物を経口処置したとき の脾臓摘出マウスの循環骨髄球数に対する影響 マウスでは、造血活性をもつ臓器は、骨髄の他には脾臓しかないということが 知られている。ＭＤＭとＡＺＴの混合物がＳＨＣの動員に及ぼす影響が、脾臓由 来 なのか骨髄由来なのかを決定するために、50mg/kgのＡＺＴ（○）、25mg/kgのＭ ＤＭ（△）およびこれらの化合物の混合物（○）を１０日前に脾臓を摘出したマ ウスに投与した。得られた結果を図１２に示す。４日連続で混合物を投与すると 末梢循環中に循環骨髄球が顕著に出現するが、これは正常マウスにおいて観察さ れるのと同じ程度の強度であり、既に二度目の投与でＳＨＣの増加が見られる（ 図１１）。このことは、ＳＨＣの動員が脾臓由来ではなくて、骨髄由来であるこ とを明確に示しており、骨髄が造血機能を担う主要組織であるヒトに対して、こ のような治療を行うことを類推する上できわめて重要である。 実施例６−ＡＺＴ、ＭＤＭまたはこれらの化合物の混合物を経口投与したとき の、シクロフォスファミド処置マウスにおけるＨＳＣ動員に対する影響 上記処置が、化学療法における細胞毒性効果を打ち消す効果を、シクロフォス ファミドでマウスを処置することによって研究した。 ０日において、マウスにシクロフォスファミド（200mg/kg）を単回皮下注射し 、４つのグループに分けて、生理学的食塩水（×）、50mg/kgＡＺＴ（□）、25m g/kgＭＤＭ（△）およびこれらの化合物の混合物（○）を経口で与えた。経口処 置は、０，１，２，および３日目になされ、処置開始後１４日目まで細胞数の評 価を行った。その結果を図１３に示す。ここでも、きわめて強い動員が起こって いるのが明確に見られ、特にＡＺＴとＭＤＭの混合物存在下で最も顕著である。 程度は弱いが、ＭＤＭの単独投与においても、循環好中球数に対する同様の効果 が観察された。実施例７−本発明の組成物が、分化段階が異なるＨＳＣの動員に及ぼす影響 これらの実験の目的は、循環血液中に異なるＨＳＣ群が存在することを実証す ることである。 ＣＦＡＣ（coblestone area forming cells）およびＬＴＣ-ＩＣ（long term culture-initiating cells）のような培養液中の識別可能な最も原始的段階のも ので、分化の兆候を示していないものから、ＨＰＰ、ＬＰＰ-ＣＦＵ（それぞれ 、高増殖能および低増殖能コロニー形成単位）のような中間段階を経たＧＭ-Ｃ ＦＵ（顆粒球マクロフ ァージコロニー形成単位）までの段階において探索がなされた。全てのケースで 、培養条件、特に期間は、異なる群を最適に検出することができるように選択し た。 この研究のために、生理的食塩水（×）、50mg/kgＡＺＴ、25mg/kgＭＤＭおよ び二つの混合物の投与が、循環ＨＳＣ数に対して及ぼす影響を比較した。精製後 の単核細胞を５日間培養してＧＭ-ＣＦＵ（顆粒球マクロファージコロニー形成 単位）を計測し、２８日間培養して低増殖能（ＬＰＰ）および高増殖能（ＨＰＰ ）ＣＦＵを計測した。ＣＡＦＣは、培養１４日後に計数を行い、ＬＴＣ-ＩＣは ２８日後に行った。結果は、それぞれ図14a,14b,14cおよび14dに示されている。 マウス（グループあたり１０匹のＢalb/c）に、１日１回３日間連続で、生理学 的食塩水、ＡＺＴ、ＭＤＭまたは二つの混合物を、上記の用量で投与した。最後 の投与から２４時間後に、各群の全てのマウスから採血した。図14a,14b,14cに 示されている実験では、単核細胞を密度勾配上で分離し、ＧＭ-ＣＦＵの場合は ５日間、ＬＰＰ-ＣＦＵの場合は２８日間、半固形培地中で培養した。これらの 全ての図において、ＭＤＭ単独での効果、さらにＭＤＭとＡＺＴの混合物の効果 が明瞭である。 この処置がＣＡＦＣおよびＬＴＣ-ＩＣに及ぼす影響を測定するために、生産 物を最後に投与してから２４時間後に採血し、単核細胞を精製して、放射能を受 けた細胞の栄養層上で、異なる細胞密度にて培養した。計数は、培養を開始して から１４日後に行い、生理学的食塩水で処置した対照細胞で得られた細胞数に対 するパーセントで表されている。図は、３または４つの独立した実験の平均であ る。培養を２８日間継続すると、ＬＴＣ-ＩＣ（long term culture-initiating cells）が形成されるが、処置後２８日における、これらの細胞の形成に対する 影響は、ＣＡＦＣの場合に観察されるものと類似している。 これらの実験は全て、ＡＺＴとＭＤＭを同時に経口処置すると、どのような分 化段階にあるＨＳＣの動員に対しても非常に効果的な影響を及ぼすことを示す。実施例８−非骨髄毒性量または骨髄毒性量のＡＺＴと組み合わせて、マウスをム ラジメチドで経口処置したときの、循環白血球および好中球数の変化に対する影 響 この影響は、図１および２に示してあり、図1Ａと2ＡはＡＺＴが非骨髄毒性量 の場合、図1Ｂと2ＢはＡＺＴが骨髄毒性量の場合を示している。 この実験においては、０，１，２および３日目において、雌のスイスマウスに kgあたり５または40mgのＡＺＴを静脈内投与した。４日間毎日、ＡＺＴの投与４ 時間前に、５匹の個体からなろマウスのグループに対して緩衝液またはkgあたり 25mgの用量でムラジメチドを与えた。 細胞の計数は、０，１，２，３，４および７日になされた。ヒストグラム上の アスタリスクは、得られた結果が、処理前に観察されたレベルと有意に異なって いることを示している。 図３に、骨髄球を計数している、同様の実験を示す。 図１，２および３の３つの図から、処置の開始から４日後に効果が最大である ことが明らかである。このことは、刺激後に白血球と好中球が正常レベルに復活 する傾向があるという事実によって容易に説明され、骨髄球に関しては、ベース ラインへ回復することは、上記の場合（遺伝子治療、骨髄移植、自家移植および 類するもの）に人工的刺激が、非常に有用であることを意味している。ＨＳＣは 成熟細胞に分化し、および／または臓器中に定着するという事実より、効果の消 失は当然のことであるといえる。 実施例９−ムラジメチドとＧＭ-ＣＳＦの効果の比較 ＡＺＴ処理を受けたマウスを、ムラジメチドに対して用いたのと同条件下にて 、ＧＭ-ＣＳＦで処理した場合、ＡＺＴとムラジメチドを組み合わせて使ったと きに観察されたのは対照的に、白血球数と好中球数は増加を示さない。他方、単 球数の増加はみられた。図４，５，６および７は、マウスをムラジメチドまたは mＧＭ-ＣＳＦで処理したときの、ＡＺＴの静脈内投与後の循環好中球、循環白血 球または循環単球または循環骨髄球の変化に及ぼす影響をそれぞれ示している。 ０，１，２および３日目において、雌のスイスマウスにkgあたり40mgのＡＺＴ を静脈内投与した。ＡＺＴの投与4時間前に、マウスのグループに対して（グル ープあたり５匹）、生理学的食塩水、またはkgあたり25mgのムラジメチド、また はkgあたり125μgのmＧＭ-ＣＳＦを静脈内投与した。計数は、０，２，３，４， および８日になされている。ヒストグラム上のアスタリスクは、０日目の処 理前に得られた値と比べて、数に有意な差があることを示している。mＧＭ-ＣＳ Ｆが単球数を増加させることができるのに対して、ムラジメチドは好中球および 白血球に著明な影響を及ぼすことが分かる。さらに、ＧＭ-ＣＳＦとは異なり、 ムラジメチドは血液中のＨＳＣを極度に上昇せしめる。 mＧＭ-ＣＳＦとムラジメチドとの効果の比較は、図７に明示されており、ＧＭ -ＣＳＦがＨＳＣの動員を起こさない条件下で、ムラジメチドは動員を起こすこ とが明らかに示されている。 実施例１０−ムラジメチドと他のＭＤＰ誘導体との効果の比較 ムラジメチドの特別な効果を実証するために用いた誘導体は、ＭＤＰＡである 。図８は、マウスに経口処置を行い、つづいてＡＺＴを静脈内投与することによ って引き起こされた骨髄球数の変化を示している。この実験では、０，１，２お よび３日目において、雌のスイスマウスにkgあたり40mgのＡＺＴを静脈内投与し た。４日間同じ日に、ＡＺＴの４時間前に、５匹のマウスからなる各グループに 対して、生理学的食塩水、またはkgあたり25mgのＭＤＰＡ、またはkgあたり25mg のムラジメチドを経口投与した。骨髄球の計数は、０，２，３，４および８日目 に行った。ヒストグラム上のアスタリスクは、前の図と同じ意味である。 式(I)の誘導体、特にムラジメチドの特性が、全てのムラミルペプチドに共通 する特性と異なることは明らかである。このことは、ＭＤＰＡ(ムラジメチドは ＭＤＰＡのジエステル誘導体である)との比較によって、特に十分に実証される 。 実施例１１−Ｎ-アセチルムラミル-Ｌ-アラニル-Ｄ-グルタミンα-メチルエス テルγ-Ｌ-アラニン3'-アジド-3'-デオキシチミジン（式V） a）Ｂoc-Ｌ-アラニン3'-アジド-3'-デオキシチミジン(1)の合成 102mg（1mmol）のジメチルアミノピリジンを含むジメチルホルムアミド無水物 20ml中に溶かしたＢoc-Ｌ-アラニン189ｍg（1mmol）に、206mg（1mmol）のＮ,Ｎ -ジシクロヘキシルカルボジイミドを添加する。反応混合物に267mg（1mmol）の3 '-アジド-3'-デオキシチミジン（ＡＺＴ）を添加し、24時間室温で攪拌する。ジ シクロヘキシル尿素の沈殿物を濾過した後、真空下で反応混合物を濃 縮した。シリカゲルのカラムで精製した後、最終的に生成物を得る。 b）Ｌ-アラニン3'-アジド-3'デオキシチミジン塩酸(2)の合成 氷酢酸中の1Ｎ塩酸溶液2mlに、260mg（0.6mmol）の(1)を溶解する。室温で30 分後、反応混合物を乾燥するまで濃縮する。得られた残留物をアセトン中に入れ 、乾燥するまで濃縮する。このプロセスを数度繰り返し、真空下で乾燥した残留 物をそのまま次のステップで用いる：225mg（100％）。 c）Ｎ-アセチルムラミル-Ｌ-アラニル-Ｄ-グルタミック α-メチルエステルγ -Ｌ-アラニン3-アジド-3'-デオキシチミジン(3)（式V）の合成： 10mlのジメチルフォルムアミド無水物に溶かした507mg（1mol）のＮ-アセチル ムラミル-Ｌ-アラニルＤ-グルタミックα-メチルエステル()に、-15℃で0.11ml （1mmol）のＮ-メチルモルフォリンと0.13ml（1mmol）のイソブチルクロロ炭酸 を順次添加する。５分後、0.11mlのＮ-メチルモルフォリンを含んだ、-15℃に冷 却した5mlのジメチルホルムアミドに溶かし、225mg（0.60mmol）の(2)を加える 。-15℃で、反応混合物を24時間攪拌した後、真空下で濃縮する。エタノールと 水の混合液で、Ｌichroprep ＲＰ18（Ｍerck）カラムから溶出して、精製した後 、最終的に生成物を得る。(3)の水溶液を凍結乾燥することによって、(3)が最終 的に得られる。：272mg（60％） 実施例１２−6-Ｏ-（サクシニル-3'-アジド-3-デオキシチミジン）-Ｎ-アセチ ルムラミル-Ｌ-アラニル-Ｄ-グルタミック ジメチルエステル（式VI）の合成 a）α-ベンジル-Ｎ-アセチルムラミル-Ｌ-アラニル-Ｄ-グルタミック ジメチ ルエステルの合成： 1.4g（2mmol）のα-ベンジル-4,6ＯＢＺi-Ｎ-アセチルムラミル-Ｌ-アラニル- Ｄ-グルタミック ジメチルエステル(1)を、完全に溶解するまで、56％酢酸水溶 液100ml存在下で還流処理する。真空下で、反応混合物を濃縮する。得られた残 留物を、順次水、トルエンおよびに入れて濃縮し、真空下で乾燥する。クロロホ ルムとメタノールの混合物で、シリカゲルカラムから溶出して、(1)を精製する 。：305mg（50％） b）6-Ｏ-サクシニル-Ｎ-アセチルムラミル-Ｌ-アラニル-Ｄ-グルタミックジメ チル エステル(2)の合成： 10mlのピリジン無水物に溶かした300mg（1mmol）の(1)に、44mg(4mmol)のコハ ク酸無水物を添加する。反応混合物を室温で４日間攪拌した後、真空下で濃縮す る。得られた残留物をアセトンに入れ、数回濃縮した後、真空下で乾燥する。得 られた生成物（α-ベンジル-6-Ｏ-サクシニル-Ｎ-アセチルムラミル-Ｌ-アラニ ル-Ｄ-グルタミック ジメチルエステル）を15mlの氷酢酸に溶かし、100mgの木炭 上の5％パラジウム100mg存在下で、大気圧にて４時間水素化を行う。触媒を濾過 して取り除いた後、反応混合物を真空下で濃縮する。得られた残留物をアセトン にいれ、数回濃縮した後、真空下で乾燥させる。次に、水に入れ、ＡＧ1Ｘ2(Ｈ+ )（ＢＩＯＲＡＤ）カラムにかけ、酢酸水溶液の勾配で溶出して精製する。最終 的に、(2)の水溶液を凍結乾燥して、(2)を得る。：450mg（70％） c）6-Ｏ-（サクシニル-3'-アジド-3'-デオキシチミジン）-Ｎ-アセチルムラミ ル-Ｌ-アラニル-Ｄ-グルタミック ジメチルエステル(3)（式VI）の合成 0.05ml（0.5mmol）のＮ-メチルモルフォリンと0.06ml（0.5mmol）のイソブチ ルクロロ炭酸を、10mlのジメチルホルムアミド無水物に溶かした320mg(0.5mmol) の(2)に、-15℃下で順次添加する。５分後、267mg（1mmol）の3'-アジド-3'-デ オキシチミジン（ＡＺＴ）を添加する。反応混合物を、15℃で24時間攪拌し、真 空下で濃縮する。Ｌichroprep Ｒpli（Ｍerck）にかけ、エタノールと水の混合 物で溶出して、最終的に生成物を得る。(3)の水溶液を凍結乾燥して、最終的に( 3)を得る。：440mg（50％） 他方、式(I)、(II)、(III)式の化合物は、式(IV)の誘導体または式(V)および( VI)の新規複合体（実は、式(I)と式(IV)の化合物が共有結合したもの）と組み合 わせると、きわめて使用範囲の広い、新しいクラスの医薬が得られる。実施例と 特許請求の範囲の記載以外でも、血液中の細胞数の変化を元に戻す必要がある場 合には、または何らかの理由で、血液循環から骨髄球を採取することが必要なと きには、それらを使用することができるはずである。本記述の冒頭で説明したよ うに、ＨＳＣはきわめて重要な全能性の細胞である。本発明によって、痛みを伴 う長期的な処置が不要になり、一度血液サンプルをとるだけで、生物学的ツール としてまたは治療目的で、それらを採取することが可能となった。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 38/00 ＡＧＺ Ａ６１Ｋ 37/02 ＡＧＺ (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ， ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，Ｓ Ｚ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，Ｉ Ｓ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ， ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，Ｓ Ｄ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者 シェディド、ルイ フランス国、エフ−75015 パリ、リュ・ ガストン−カイラベット 18

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．ヒトの造血機能を刺激する薬学的組成物であって、 式(I)： ここで、Ｒ＝ＨまたはＣＨ₃ Ｘ＝Ｌ-ＡlaまたはＬ-Ｔhr Ｒ_α＝ＮＨ₂またはＯ(ＣＨ₂)_xＨ (Ｘ＝1〜4) Ｒ_γ＝ＯＨ(Ｒ_α＝ＮＨ₂の場合を除く)またはＯ(ＣＨ₂)_xＨ (Ｘ＝1〜4 ) または次式(II)のムロクタシン： Ｎac-Ｍur-Ｌ-Ａla-Ｄ-isoＧln-Ｎ^ε-ステアロイル-Ｌ-Ｌys または次式(III)のＭＴＰ-ＰＥ： モノナトリウムＮac-Ｍur-Ｌ-Ａla-Ｄ-isoＧln-Ｌ-alanyl-2-(1',2'-ジ-パルミ トイル-sn-グリセロ-3'-ホスホリル)エチルアミド のうちの少なくとも一つの化合物を有効成分として含有することを特徴と する組成物。 ２．請求項１に記載の組成物であって、造血機能の刺激によってある種の治療 もしくは疾病の骨髄毒性効果を防止もしくは治療することができ、または血液中 の造血性幹細胞を増加させることができ、或いはこれら両方を同時に行うことが できることを特徴とする組成物。 ３．請求項１または２に記載の薬学的組成物であって、式(I)に相当する化合 物が、式：Ｎac-Ｍur-Ｌ-Ａla-Ｄ-Ｇlu[ＯＭe]-ＯＭeのムラジメチドであること を特徴とする組成物。 ４．請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物であって、式(I)または(II) または(III)の化合物は、ヒト体重kgあたり0.1〜25mgの用量で経口投与が可能な ように調合されていることを特徴とする組成物。 ５．請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物であって、ヒトに全身投与す ることができ、１回の投与ごとにkg体重あたり0.05〜2.5mgの投与が可能なよう に有効成分が調合されていることを特徴とする組成物。 ６．請求項１〜４のいずれか１項に記載の組成物であって、さらに一般式： Ｂは、プリンまたはピリミジン塩基 Ｒ＝Ｈ,Ｎ₃またはハロゲン のヌクレオシド誘導体を含有することを特徴とする組成物。 ７．請求項６に記載の組成物であって、前記ヌクレオシド誘導体が3'-アジド- 3'-デオキシチミジン（ＡＺＴ）であることを特徴とする組成物。 ８．式(V)により特徴づけられる複合体。 ここで、 Ｒ＝ＨまたはＣＨ₃ Ｒ_α＝ＮＨ₂またはＯ(ＣＨ₂)_xＨ (Ｘ＝1〜4) Ｘ＝Ｌ-ＡlaまたはＬ-Ｔhr ｘ＝0,1または2 Ｙ＝アミノ酸残基 Ａは、デオキシリボース残基の5'位にヒドロキシルまたはアミン官能基を 、3'位に水素、ハロゲンまたはアジド基を含有するヌクレオシド ９．式(VI)により特徴付けられる複合体。 ここで、 Ｘ＝Ｌ-ＡlaまたはＬ-Ｔhr Ｙは、ジカルボン酸、特にコハク酸残基のようなアームである Ｚ＝ＯまたはＮＨ Ｒ＝ＨまたはＣＨ₃ Ｒ_αおよびＲ_γは、式(I)中と同じ意味であり、 Ａは、デオキシリボース残基の5'位にヒドロキシルまたはアミン官能基 を、3'位に水素、ハロゲンまたはアジド基を含むヌクレオシド １０．請求項８または９に記載の複合体であって、 Ｘ＝Ｌ-Ａla Ｒ＝Ｈ Ｒ_α＝ＯＣＨ₃およびＲ_γ＝ＯＣＨ₃ であることを特徴とする複合体。 １１．請求項８または９のいずれかに記載の複合体であって、ＡがＡＺＴである ことを特徴とする複合体。 １２．活性成分として請求項８〜１１のいずれか１項に記載の複合体を含有する ことを特徴とする薬学的組成物。 １３．請求項１２に記載の薬学的組成物であって、癌またはＡＩＤＳに対する化 学療法、放射線療法または免疫療法のような、治療または医薬の骨髄毒性効果を 相殺し得ることを特徴とする組成物。 １４．請求項１２または１３に記載の組成物であって、血液中の成分、特に赤 血球および血小板を正常またはそれ以上のレベルに回復し得ることを特徴とする 組成物。 １５．請求項１２に記載の薬学的組成物であって、血液の造血性幹細胞を増加さ せ得ることを特徴とする組成物。 １６．式(V)の複合体の合成法であって、少なくとも (a) Ｂoc-Ｌ-アラニンおよびＡＺＴからＢoc-Ｌ-アラニン3'-アジド-3'- デオキシチミジン(1)を合成するステップと、 (b) (1)からＬ-アラニン3'-アジド-3'-デオキシチミジン塩酸(2)を合成す るステップと、 (c) (2)にＮ-アセチルムラミル-Ｌ-アラニル-Ｄ-グルタミック α-メチル エステルを添加して、Ｎ-アセチルムラミル-Ｌ-アラニル-Ｄ-グルタミック α- メチルエステル γ-Ｌ-アラニン 3'-アジド-3'-デオキシチミジンを合成するス テップと を具備してなることを特徴とする合成法。 １７．式(VI)の複合体の合成法であって、少なくとも (a) α-ベンジル-4,6-ＯＢzi-Ｎ-アセチルムラミル-Ｌ-アラニル-Ｄ-グ ルタミック ジメチルエステルからα-ベンジル-Ｎ-アセチルムラミル-Ｌ-アラニ ル-Ｄ-グルタミック ジメチルエステル(1)を得るステップと、 (b) (1)をスクシニル化して、6-Ｏ-スクシニル-Ｎ-アセチルムラミル- Ｌ-アラニル-Ｄ-グルタミック ジメチルエステル(2)を得るステップと、 (c)( 2)にＡＺＴを結合させて、6-Ｏ-(スクシニル-3'-アジド-3'-デオ キシチミジン)-Ｎ-アセチルムラミル-Ｌ-アラニル-Ｄ-グルタミック ジメチルエ ステル(3)を合成するステップと を具備してなることを特徴とする合成法。 １８．請求項１〜７のいずれか１項に記載の組成物、または請求項８〜１１のい ずれか１項に記載の複合体、または請求項１２に記載の組成物の使用であって、 単独もしくは式(IV)の化合物と組み合わせて、ある種の治療 もしくは医薬の骨髄毒性効果に対する拮抗剤、または造血性幹細胞を全身血流中 に動員することができる医薬の製造における使用。 １９．請求項１８に記載の使用であって、式(I)の化合物が、 式：Ｎac-Ｍur-Ｌ-Ａla-Ｄ-Ｇlu[ＯＭe]-ＯＭeのムラジメチドであること を特徴とする使用。 ２０．請求項１９に記載の使用であって、式(III)の誘導体がＭＴＰ-ＰＥである ことを特徴とする使用。 ２１．請求項２０に記載の使用であって、式(II)の誘導体がムロクタシンである ことを特徴とする使用。 ２２．請求項１８〜２１のいずれか１項に記載の使用であって、式(IV)の化合物 が3'-アジド-3'-デオキシチミジン（ＡＺＴ）であることを特徴とする使用。 ２３．請求項１８〜２２のいずれか１項に記載の使用であって、前記医薬が癌ま たはＡＩＤＳの治療における化学療法の効果を相殺するための医薬であることを 特徴とする使用。 ２４．請求項１８〜２２のいずれか１項に記載の使用であって、前記医薬が循環 血液中の造血性幹細胞を増加させることができる医薬であることを特徴とする使 用。 ２５．請求項１８〜２２のいずれか１項に記載の使用であって、前記医薬が、異 種遺伝子導入用の担体として使用し得る血液中の幹細胞を得ることを可能にする 医薬であることを特徴とする使用。 ２６．請求項１８〜２２のいずれか１項に記載の使用であって、前記医薬が、自 家骨髄移植または同種骨髄移植に使用し得る血液中の幹細胞を得ることができる ようにする医薬であることを特徴とする使用。 ２７．請求項１８〜２６のいずれか１項に記載の使用であって、前記化合物は式 (IV)の化合物と組み合わせて処方されることを特徴とする使用。