JPH11508565A - サッカリドコンジュゲート - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、サッカリドおよび１または複数の作用剤を含むコンジュゲートに関する。また、本発明は、該コンジュゲートの使用にも関する。

Description

【発明の詳細な説明】 サッカリドコンジュゲート 本発明は、サッカリドコンジュゲートおよびその使用に関する。 一般に、多くの作用剤、特に癌治療用に供する作用剤ならびに脳、神経、グリ ア細胞、大グリア細胞および非神経細胞等の一定の器官およびその細胞に到達す るであろう作用剤が、その作用部位にほとんど送達されず、よって重大な副作用 を有するという問題を伴っている。 従って、本発明の目的は、ほとんどの様々な種類の作用剤を十分計算された様 式でその作用部位に送達し、その副作用が低減され得る製品を提供することにあ る。 本発明によれば、このことは、請求の範囲に定義された主題により達成される 。 従って、本発明の主題は、サッカリドおよび１以上の作用剤を含むコンジュゲ ートに関する。 本発明は、β−Ｄ−グルコース イソホスホルアミド(Isophosphoramid)が良 好な抗腫瘍特性を有し、シクロホスホルアミドおよびイソホスホルアミドと比較 して非常に低い副作用を有するという本出願人の発見に基づくものである。さら に、本出願人は、β−Ｄ−グルコース イソホスホルアミドが部位特異的送達に より腫瘍細胞に到達することを発見した。この送達のためには、グルコース輸送 体が必須であるということがわかった。 前記知見に基づいて、サッカリド、具体的には、モノサッカリド、ジサッカリ ドまたはオリゴサッカリドに結合する１以上の作用剤を有するコンジュゲートを 開発した。モノサッカリドとしては、具体的にはグルコース、より具体的にはＤ −グルコース、ガラクトース、マンノース、アラビノース、キシロース、フコー ス、ラムノース、２−アミノ−２−デオキシグルコース、２−フルオロ−２−デ オキシグルコース、Ｎ−アセチル−２−アミノ−２−デオキシグルコース、Ｎ− アセチル−２−アミノ−２−デオキシガラクトース、ジギトキソースおよび２− アミノ−２−デオキシガラクトースが挙げられる。好適なジサッカリドは、具体 的には、１，４−結合または１，６−結合いずれかのマルトース、ラクトースま たはゲンチオビオースである。オリゴサッカリドとしては、具体的には、直鎖状 または分枝鎖状のジ−、トリ−、特に、Ｎ，Ｎ’−ジ−２−クロロエチル−（３ ，６−ジ−Ｏ−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシル）− リン酸エステルジアミドおよびテトラアンテナリーオリゴサッカリド等が挙げら れる。 すべての治療上および／または診断上使用可能な物質は、作用剤として斟酌さ れる。これらは、具体的には、システイン、Ｎ−アセチルシステイン、α−トコ フェロール（ビタミンＥ）、プロブコール、α−リポ酸、リモネン（ペリリル酸 ）、キサンチン、カロチノイドおよびニトロン等の抗酸化剤、抗リウマチ薬、抗 アレルギー剤、抗貧血剤、スルホンアミド等の抗生物質、抗糖尿薬、抗嘔吐薬、 抗ヒスタミン剤、抗てんかん薬、β−受容体遮断薬、カルシウムアンタゴニスト 、ＡＣＥ阻害剤、気管支拡張剤、喘息治療薬、コリン作用剤、コルチコイド、皮 膚薬、利尿薬、酵素阻害剤、痛風治療薬、インフルエンザ治療薬、鎮静剤、免疫 治療剤、肝臓治療剤、抗脂血症剤、片頭痛治療薬、筋弛緩薬、麻酔薬、ニューロ パシー製剤、抗運動亢進剤、神経活性薬、甲状腺治療剤、性ホルモンおよびそれ らの阻害剤、鎮痙薬、ビタミン、創傷治療剤、インドメタシン、パラセタモール 、イブプロフェンおよびアセチルサリチル酸等の鎮痛薬、シメチジン、シクロホ スホルアミド、イソホスホルアミド、シスプラチン複合体、メトトレキセートお よび５−フルオロウラシル デオキシリボヌクレオシド等の代謝拮抗物質、ミト ザントロン(mitoxanthrone)等のトポイソメラーゼ阻害剤等の癌治療剤、癌診断 薬、ミソニダゾール等の放射線感受性剤、Ｏ⁶−ベンジルデオキシグアノシン等 のＤＮＡ修復阻害剤、Ｌ−ドーパおよびドーパミン等のα−交換神経作用剤、オ リゴヌクレオチド等の核酸、ならびに、アジドチミジン、ジデオキシイノシトー ルおよびジデオキシシチジン等の抗ＡＩＤＳ薬である。 サッカリドと１又は複数の作用剤との結合は、通常のように存在してもよい。 サッカリドの１位を介して少なくとも１つの結合が存在する場合が好ましい。こ のことは、作用部位で、即ち、細胞において、サッカリドの１位を介して結合し た作用剤が酵素的に開裂して放出されるという有利性を含む。 本発明のコンジュゲートの好ましい態様において、サッカリッドを通常のリン カーを介して少なくとも１つの作用剤と結合させる。好適なリンカーは、具体的 には、ジオール、より具体的には、エチレングリコール等の１，２−ジオールか ら１，６−ヘキサンジオールまでの短鎖ジオールである。 本発明のコンジュゲートは、グルコース輸送体および／またはその関連輸送体 を有する細胞、器官および組織に蓄積する。該コンジュゲートは、具体的には、 肝臓、腎臓、心臓、胸腺、甲状腺、腸および脳ならびにすべての種類の腫瘍に蓄 積する。 従って、本発明のコンジュゲートは、アルツハイマー病、脳卒中、パーキンソ ン病およびその他の痴呆疾患等の神経学的疾患を治療するのに特に好適である。 この目的のために、コンジュゲートが作用剤として抗酸化剤を含む場合が好まし い。これらの作用剤は、好気性細胞で、ミトコンドリア電子輸送鎖における酸素 の不完全反応が起こり、従って、アポトーシスを起こす可能性のあるスーパーオ キシドラジカル、ヒドロキシパーオキシドまたはヒドロキシラジカルが細胞質に 放出されることを予防する。脳卒中およびその他の動脈硬化症の場合、特に、動 脈硬化性斑の形成を伴う危険な発症を意味するＬＤＬ粒子の過酸化脂質への酸化 を、抗酸化剤の投与により阻止する。パーキンソン病を治療する場合、作用剤と してのＬ−ドーパまたはドーパミンの使用も、その価値を証明した。 抗酸化剤を作用剤として含む本発明のコンジュゲートは、心臓血管疾患、糖尿 病、炎症、具体的には関節リウマチ、炎症性腸疾患および膵炎、高血圧ならびに 特発性肺線維症および嚢胞性線維症等の肺疾患、ＡＩＤＳによるＣＤ４−Ｔ細胞 のアポトーシス、動脈硬化症、骨粗鬆症、虚血、白内障ならびに多発性硬化症の 治療にも好適である。さらに、かかるコンジュゲートは、前記疾患、特に、動脈 硬化症およびアルツハイマー病の予防にも好適である。 また、本発明のコンジュゲートが対応する作用剤を含むとき、それらは、癌の 治療および／または診断に成功して用いることができる。治療上利用可能な作用 剤の例は、シクロホスホルアミドおよびイソホスホルアミドである。さらに、特 に、放射線療法および／または光力学的治療の癌特異的促進をもたらすミソニダ ゾール等の放射線感受性剤が挙げられる。さらに、特に、Ｏ⁶−ベンジルデオキ シグアノシン等のＤＮＡ修復阻害剤が挙げられる。これらの作用剤は、ＤＮＡ修 復力の癌特異的低下、従って、アルキル化癌化学療法剤による治療の改良に寄与 する。抗酸化剤を含むコンジュゲートも、癌の治療および癌疾患の予防に好適で ある。前記説明したように、これらの作用剤は、細胞傷害を生じさせて細胞の変 性を促進させることが公知であるフリーラジカルの生成を停止させるのに役立つ 。従って、抗酸化剤を有するコンジュゲートは、化学療法および放射線療法の場 合における健康な細胞を保護するためにも使用してもよい。また、最新の出願人 の結果は、癌治療剤を含む本発明のコンジュゲートを投与したとき、癌治療剤単 独で投与したときよりもかなり少ない耐性が明らかになるという事実を示す。 さらに、作用剤としてオリゴヌクレオチド等の核酸を含む本発明のコンジュゲ ートは、特に器官特異的遺伝子欠損の診断および／または治療に好適である。 なお、本発明のコンジュゲートは、グルコース輸送体またはそれに関連する輸 送体を有するあらゆる種類の病原体を制御するためにも用いることができる。か かる病原体は、具体的には、ウイルス、細菌および原生動物の生物である。従っ て、本発明のコンジュゲートは、ウイルス感染症、特にＡＩＤＳ等のかかる病原 体により生じる疾患を治療するのにも適する。 以下の実施例により、本発明を説明する。実施例１：本発明のコンジュゲート、β−Ｄ−ガラクトピラノシド−［４−（１ −メチルエテニル）−１−シクロヘキセン−１−イル］メチルの調製 ２５０ｍｌの無水ジエチルエーテル、７．５ｇの炭酸銀、２５ｇの細かく粉砕 したモレキュラーシーブ（４Å）および２．３ｍｌ（０．１５モル）の抗酸化剤 Ｓ（−）ペリラアルコールを、ベークした５００ｍｌの三つ口フラスコ中で、光 から保護して１５分間攪拌した。次いで、６ｇ（０．１５モル）のテトラアセチ ル−α−ブロモガラクトースを、少しずつ１時間かけて１００ｍｌの無水ジエチ ルエーテルに添加した。反応を、薄層クロマトグラフィー（シリカゲル ＰＥ／ 酢酸エステル ４：１ ｖ／ｖ）により観察した。１０時間後反応混合物を濾過 し、固体の残渣をアセトンで洗浄した。次いで、該残渣を５％ＮａＨＣＯ₃溶液 および水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、減圧下で濃縮して、カラムクロマト グラフィー（シリカゲル ＰＥ／酢酸エステル ６：１ ｖ／ｖ）により精製し た。３．０５ｇのアノマー混合物を、無色の油状物として得た。ＨＰＬＣクロマ トグラフィーにより、β：α＝２．９２の生産比が示された。室温で１時間のト リエチルアミンでの変換により、ほとんど定量的収量でアセチル保護基を分離し た。 得られた産物は、下記構造式： を有する。実施例２：本発明のコンジュゲート、β−Ｄ−グルコシルイソホスホルアミド（ β−Ｄ−Ｇｌｃ−ＩＰＭ）の調製と使用 １．０ｍＭのグリコシルイミデートを、２０ｍｌのアセトニトリルに溶解した 。１．０ｍＭのイソホスホルアミド（Ｈａｌｏｘａｎ^R）を添加し、混合物を暗 闇で６時間還流した。濾過して回転濃縮させた後、常法によりシリカゲルを用い てクロマトグラフィーを行なった。得られたβ−Ｄ−Ｇｌｃ−ＩＭＰは、下記構 造式： を有する。 このコンジュゲートを、常法により¹⁴Ｃで標識して、以下のラットの処置に使 用した。 使用したラットは、雌性スプラーグ−ドーリーラット（ＳＤラット；Charles River Wiga、ドイツ、スルツフェルトより入手可能）および雄性コペンハーゲン ラット（Harlan Sprague Dawley、米国、インディアナポリスより入手可能）で あった。 ダンニング(Dunning)前立腺癌組織の新鮮な切片（２×２ｍｍ）を、コペンハ ーゲンラットに移植した。前記癌を、十分触診可能であるが壊死にならないまで 約１週間成長させておいた。 ５匹の健常ＳＤラット群に、３１５ｍｇ／ｋｇのβ−Ｄ−Ｇｌｃ−ＩＭＰおよ び５６．２ｍｇ／ｋｇのβ−Ｄ−Ｇｌｃ−ＩＭＰをそれぞれｉ．ｖ．注射した。 ５匹の癌産生コペンハーゲンラットに、３１５ｍｇ／ｋｇのβ−Ｄ−Ｇｌｃ−Ｉ ＭＰを与えた。注射当たりの放射活性量は、約２０μＣｉであった。各群の１匹 の動物を、それぞれ、注射投与１０分、１時間、２時間、８時間および２４時間 後ＣＯ₂で殺した。ラットの組織を通常のミクロトーム標品用に調製し、切片を 、ウルベルグ(Ullberg，S.)(1977)によるアルベフェルト(Alvefeldt)，O.(編集) 、全身オートラジオグラフィーに関する特別発行、Science Tools，スウェーデ ン、ブロンマ、２頁）に記載のようにオートラジオグラフィーに供した。 本発明のコンジュゲートは、わずか１０分後に器官、具体的には、肝臓、腎臓 、胸腺および甲状腺に蓄積したことが示された。脳を含む中枢神経系は、８時間 後コンジュゲートを含んでいた。さらに、癌組織でもコンジュゲートの強力な蓄 積が見られた。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項 【提出日】１９９７年７月７日 【補正内容】 請求の範囲 １．神経学的疾患の治療用の医薬製剤の製造のための、 −抗酸化剤、ビタミンおよび鎮痛薬からなる群より選ばれた１以上の作用剤、な らびに −サッカリド を含むコンジュゲートの使用。 ２．腫瘍疾患の医薬製剤の製造および／または診断のための、 −抗酸化剤、放射線感受性剤、ＤＮＡ修復阻害剤、核酸および抗ＡＩＤＳ薬から なる群より選ばれた１以上の作用剤、ならびに −サッカリド を含むコンジュゲートの使用。 ３．少なくとも１つの作用剤が、サッカリドの１位を介して結合していることを 特徴とする請求項１または２記載の使用。 ４．サッカリドがモノサッカリドであることを特徴とする請求項１〜３いずれか 記載の使用。 ５．モノサッカリドがグルコース、ガラクトース、マンノース、アラビノース、 キシロース、フコース、ラムノース、２−アミノ−２−デオキシグルコース、２ −フルオロ−２−デオキシグルコース、Ｎ−アセチル−２−アミノ−２−デオキ シグルコース、Ｎ−アセチル−２−アミノ−２−デオキシガラクトース、２−ア ミノ−２−デオキシガラクトースおよびジギトキソースからなる群より選ばれる ことを特徴とする請求項４記載の使用。 ６．サッカリドがジサッカリドであることを特徴とする請求項１〜３いずれか記 載の使用。 ７．ジサッカリドがマルトース、ラクトースおよびゲンチオビオースからなる群 より選ばれることを特徴とする請求項６記載の使用。 ８．サッカリドがオリゴサッカリドであることを特徴とする請求項１〜３いずれ か記載の使用。 ９．オリゴサッカリドが分枝鎖状のオリゴサッカリド、特に、Ｎ，Ｎ’−ジ−２ −クロロエチル−（３，６−ジ−Ｏ−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ− グルコピラノシル）−リン酸エステルジアミドであることを特徴とする請求項８ 記載の使用。 １０．抗酸化剤がシステイン、Ｎ−アセチルシステイン、α−トコフェロール（ ビタミンＥ）、プロブコール、α−リポ酸、リモネン（ペリリル酸）、キサンチ ン、カロチノイドおよびニトロンからなる群より選ばれることを特徴とする請求 項１または２記載の使用。 １１．鎮痛薬がインドメタシン、パラセタモール、イブプロフェンおよびアセチ ルサリチル酸からなる群より選ばれることを特徴とする請求項１記載の使用。 １２．放射線感受性剤がミソニダゾールであることを特徴とする請求項２記載の 使用。 １３．ＤＮＡ修復阻害剤がＯ⁶−ベンジルデオキシグアノシンであることを特徴 とする請求項２記載の使用。 １４．抗AＩＤＳ薬がアジドチミジン、ジデオキシイノシトールおよびジデオキ シシチジンであることを特徴とする請求項２記載の使用。 １５．サッカリドおよび少なくとも１つの作用剤が、リンカーを介して連結して いることを特徴とする請求項１〜１４いずれか記載の使用。 １６．リンカーが１，２−ジオールから１，６−ヘキサンジオールまでの短鎖ジ オールから選ばれることを特徴とする請求項１５記載の使用。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 バイロイテル，コンラート ドイツ連邦共和国 ハイデルベルク デー −69190 ルドルフ−クレール−シュトラ ッセ 25

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．サッカリドおよび１以上の作用剤を含むコンジュゲート。 ２．少なくとも１つの作用剤が、サッカリドの１位を介して結合していることを 特徴とする請求項１記載のコンジュゲート。 ３．サッカリドがモノサッカリドであることを特徴とする請求項１または２記載 のコンジュゲート。 ４．モノサッカリドがグルコース、ガラクトース、マンノース、アラビノース、 キシロース、フコース、ラムノース、２−アミノ−２−デオキシグルコース、２ −フルオロ−２−デオキシグルコース、Ｎ−アセチル−２−アミノ−２−デオキ シグルコース、Ｎ−アセチル−２−アミノ−２−デオキシガラクトース、２−ア ミノ−２−デオキシガラクトースおよびジギトキソースからなる群より選ばれる ことを特徴とする請求項３記載のコンジュゲート。 ５．サッカリドがジサッカリドであることを特徴とする請求項１または２記載の コンジュゲート。 ６．ジサッカリドがマルトース、ラクトースおよびゲンチオビオースからなる群 より選ばれることを特徴とする請求項５記載のコンジュゲート。 ７．サッカリドがオリゴサッカリドであることを特徴とする請求項１または２記 載のコンジュゲート。 ８．オリゴサッカリドが分枝鎖状のオリゴサッカリド、特に、Ｎ，Ｎ’−ジ−２ −クロロエチル−（３，６−ジ−Ｏ−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ− グルコピラノシル）−リン酸エステルジアミドであることを特徴とする請求項７ 記載のコンジュゲート。 ９．作用剤が抗酸化剤、鎮痛薬、シメチジン、癌治療剤、癌診断薬、放射線感受 性剤、ＤＮＡ修復阻害剤、α−交換神経作用剤および核酸からなる群より選ばれ ることを特徴とする請求項１〜８いずれか記載のコンジュゲート。 １０．抗酸化剤がシステイン、Ｎ−アセチルシステイン、α−トコフェロール（ ビタミンＥ）、プロブコール、α−リポ酸、リモネン（ペリリル酸）、キサンチ ン、カロチノイドおよびニトロンからなる群より選ばれることを特徴とする請求 項９記載のコンジュゲート。 １１．鎮痛薬がインドメタシン、パラセタモール、イブプロフェンおよびアセチ ルサリチル酸からなる群より選ばれることを特徴とする請求項９記載のコンジュ ゲート。 １２．癌治療剤がシクロホスホルアミド(Cyclophosphoramid)、イソホスホルア ミド、シスプラチン複合体、代謝拮抗物質およびトポイソメラーゼ阻害剤からな る群より選ばれることを特徴とする請求項９記載のコンジュゲート。 １３．サッカリドおよび少なくとも１つの作用剤が、リンカーを介して連結して いることを特徴とする請求項１〜１２いずれか記載のコンジュゲート。 １４．リンカーが１，２−ジオールから１，６−ヘキサンジオールまでの短鎖ジ オールからなる群より選ばれることを特徴とする請求項１３記載のコンジュゲー ト。 １５．診断および／または治療のための請求項１〜１４いずれか記載のコンジュ ゲートの使用。