JPH1175863A5

JPH1175863A5 -

Info

Publication number: JPH1175863A5
Application number: JP1997322651A
Authority: JP
Filing date: 1997-11-25
Publication date: 2005-04-07

Description

２５位に水酸基を導入する２５位水酸化酵素遺伝子は、すでにラット肝臓由来のものがクローニングされ（特開平３−２３２４９３）ている。また、活性型ビタミンＤ_３の分解に関わる、ビタミンＤ_３・２４位水酸化酵素もクローニングされ（特開平４−２０７１９６）ている。
ビタミンＤ_３の１α位を水酸化する酵素としては、ヒトのＣＹＰ２７が報告されているが〔Proc. Nat. Acad. Sci., USA, 91, 10014 (1994)〕、該酵素の１α位を水酸化する活性は副次的な活性で、非常に弱く、本来の活性ではない、また誘導のかかる活性でもない。

Claims

配列番号１および２で表されるアミノ酸配列から選ばれるアミノ酸配列を有するポリペプチド、または配列番号１および２で表されるアミノ酸配列から選ばれるアミノ酸配列とは一個以上のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加されたアミノ酸配列を有し、かつ２５−ヒドロキシビタミンＤ_３−１α−水酸化酵素活性を有するポリペプチド。
請求項１記載のポリペプチドをコードするＤＮＡまたは該ＤＮＡとストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、かつ２５−ヒドロキシビタミンＤ _３ −１α−水酸化酵素活性を有するポリペプチドをコードするＤＮＡ。
ＤＮＡが、配列番号３、４、５および６で表される塩基配列から選ばれる塩基配列を有するＤＮＡである、請求項２記載のＤＮＡ。
請求項２または３記載のＤＮＡをベクターに組み込んで得られる組換え体ＤＮＡ。
請求項４記載の組換え体ＤＮＡを保有する形質転換体。
請求項５記載の形質転換体を培地に培養し、培養物中に請求項１記載のポリペプチドを生成蓄積させ、該培養物より該ポリペプチドを採取することを特徴とする該ポリペプチドの製造法。
請求項１記載のポリペプチドおよび２５−ヒドロキシビタミンＤ_３を水性媒体中に存在させることにより、水性媒体中に１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３を生成させ、生成した１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３を該水性媒体中より採取することを特徴とする、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３の製造法。
請求項１記載のポリペプチドを認識する抗体。
請求項８記載の抗体を用いる、請求項１記載のポリペプチドの免疫学的検出法。
請求項８記載の抗体を用いる、免疫組織染色法。
請求項８記載の抗体を含有する、免疫組織染色剤。
請求項２または３記載のＤＮＡ、または該ＤＮＡとストリンジェントな条件下でハイブリダイズするＤＮＡを用いて、請求項１記載のポリペプチドの遺伝子のｍＲＮＡを検出する方法。