JPS58219151A - オリゴペプチドプロドラグ - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は選択された化学療法用化合物のプロトラグ（ｐ
ｒｏｄｒｕｇ　）を含有するオリゴペプチドおよび該プ
ロトラグ製造用の化学的中間体に関する。

また、本発明°は、感染外苑物の細胞膜に対して不透過
性の化学療法用剤を運び、細胞内で該活性薬剤を放出す
る方法にも関する。

従前から、感染性生物の細胞膜内へ化学物質を運び込む
１つの機能としてペプチド輸送システムが認められてい
る。細胞膜、例えば、エシェリヒア・コリ（Ｅｓｃｈｅ
ｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ）の細胞膜にはジペプチドおよ
びオリゴペプチド両方の輸送システムが存在することが
示されている（　Ｂ、　Ｃ，Ａｍｅ　ｓ　。

Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔ、Ａｃａｄ、Ｓｃｉ、Ｏ５Ｈ７０４
５６（１９７３）またはＣ，Ｇｉｌｖａｒｇ　、　Ｎａ
ｔｕｒｅ、　ｔｈｅ　ＮｅｗＢｉｏｌｏｇｙ　屯４」エ
　１６１　（１９７３）　〕。該ジペプチド輸送システ
ムはその輸送能力において該オリゴペプチド輸送ジ゛ス
テムよりも特異的である。

ペプチド輸送システムは原核および真核微生物の両方に
広く行きわたっている。かかる輸送もしくは透過酵素シ
ステムを介してそれ自体で感染性生物の細胞膜を通過で
き、細胞内で薬剤を放出するプロトラグは増強した活性
を有する。

エムーエムーポンピボムウ［Ｍ、Ｍ、Ｐｏｎｐｉｐｏｍ
ｅｔ　ａｔ、、　Ｊ、Ｍｅｄ、Ｃｈｅｍ、、　２４　１
３８８　（１９８１）〕、ヨーロッパ特許出願第３８５
４１号またはシイ、フィリップラ（Ｃ６Ｐｈ１ｌｉｐ　
ｅｔ　ａｌ］のｐｃＴ出願ＷＯ３１１０１１４５号によ
り記載されているように、この輸送システムの利点を取
り入れるために種々の合成誘導体が製造されている。こ
れらのタイプの化合物のいくつかは毒性を限定するか、
より特異的な生物活性を達成することを意図したもので
ある。これら従来の化合物は作用範囲を限定するか、細
胞内のペプチダーゼに対する抵抗性から、受容体部位で
分解することなく生物活性を示すこと、すなわち、輸送
形にすることを目的とするものである。例えば、前記の
フィリップらの出願はポリペプチドに共有結合した抗腫
瘍性の構造部分を開示している。共有結合基はそれ自体
活性でなければならない。これは本発明とは異なること
であり、本発明においては、該生物活性基もしくは弾頭
は可逆的に結合している。

従来、感染性生物の細胞膜に対して不透過性または透過
性の乏しい非常に有用な化学療法用薬剤が多く存在して
いる。これらの化合物の不透過性は該化合物固有の物理
化学的性質によるか、標的生物の細胞膜の透過酵素系が
該薬剤に対して抵抗性を獲得したことによるものである
。

従来技術の化学的背景 ヒイーイシャイＣＢ、　ｌ５ｈａｉ　、　Ｔｅｔｒａｈ
ｅｄｒｏｎ（１９７６）１５７１）またはドイツ特許第
２５５３６８９号（Ｔｅｃｈｎｉｏｎ、　Ｆａｒｍｄｏ
ｃ　４６４Ｑ３Ｘ）はグリオキサル酸と第１級アミドを
反応させてα−ヒドロキシアミノ酸を生成させることを
開示している。しかし、グリオキサル酸をアミノ酸アミ
ドと反応させて後記するようなα−炭素にヒドロキシ置
換基を有するペプチドを生成させることは開示していな
い。

特公昭５４−０４８７７３号（Ｆａｒｍｄｏｃ　４１１
８０８／２２）および特公昭５３７００７６１９号〔な
らびに、これらの特許に対応するＴ、　Ｎｉ　ｓｈｉ　
ｔａｎｉ。

ｅｔ　　ａｌ、、Ｊ、Ｏｒｇ、Ｃｈｅｍ、、４４　２０
１９　（１９７９）、Ｔ＋　Ｉｗａｓａｋｉ、ｅｔ　　
ａｌ、、Ｊ、Ｏｒｇ。

Ｃｈｅｍ−１１２２４１９（１９７７）　、Ｔ、Ｎ１５
ｈｉｔａｎｉ。

ｅｔ　　ａｌｌＣｈｅｍ、Ｐｈａｒｍ＋　Ｂｕｌｌ、、
２８　１１３７（１９８０）］あるいはアール・ケイ・
オルセンら［Ｒ，に、０１ｓｅｎ、　ｅｔ　ａｌ　＋Ｉ
　ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔｅｒｓ、　４１３５
７９　（１９７５）　〕ハア；６種のα−アセトキシア
ミノ酸の製造詔よび５−フルオロウラシルまたはメルカ
プタンを包含する置換基による該α−アセトキシ基の置
換を開示している。しかし、本発明者らの知る限りにお
いて、可逆的にα−置換されたオリゴペプチドを開示し
た先行文献は見当らない。

本発明の説明 本発明のプロトラグの構造は感染性生物の細胞膜にお１
する透過酵素系の受容体および細胞内ペプチダーゼによ
って許容されるに必要な多くの要件を有することが判明
した。これらの各受容体系は、感染性または毒性生物の
細胞内に、まず、活性薬剤を輸送し、ついで、放出する
に必須である。

これらのプロトラグはオリゴペプチド鎖を有し、そのグ
リシル単位のα−位に化学療法用構造部分が可逆的に置
換しており、さらに、該グリシル運搬単位はそのアミノ
基によってオリゴペプチド鎖の残りの部分に結合して安
定化されている。

本明細書においては、該グリシル運搬単位を１一単位と
称する。後記の式１の構造において、オリゴペプチド鎖
のカルボキシまたはＣ−末端をＱ１アミノまたはＮ−末
端をＰで示す。また、該運搬単位は、安定化アミノ酸が
該グリシル運搬単位に隣接する限り、該オリゴペプチド
単位のいずれの位置にあってもよい。合成の都合上から
、該運搬単位は、通常、そして、好ましくは、鎖のカル
ボキシ末端単位として表わされる。

したがって、オリゴペプチド鎖はカルボキシ末端または
１一単位に遊離のカルボキシ基を有し、該単位はそれに
薬剤ま・たは弾頭が結合するか、１ｎｖｉｖｏ　Ｆカル
ボキシ単位を生じることができるものである。Ｎ−末端
アミノ酸単位は遊離アミノ基を有するか、ｉｎ　ｖｉｖ
ｏ　でそのような単位をヰしることかできるものである
。運搬単位以外の各アミノ酸単位は、好ましくは、天然
型である。該プロトラグ製造の間に必要な全ての化学的
保護基は、それらが該最終生成物を用いるべき生物系内
で脱離されない場合は脱離すべきである。

該運搬アミノ酸単位の立体配置はＬ−配置でなければな
らない。現在、そのＤ−型は輸送されないことが判明し
ている。該ポリペプチド鎖の最初の２つの単位は、好ま
しくは、Ｌ−配置である。

ポリペプチド鎖の残りの単位は特に制限されるものでは
なく、Ｄ−配置、Ｌ−配置またはそれらの混合物でもよ
い。しかし、好ましくは、アミノ酸単位は全てＬ型で、
製造の容易さから、ペプチド鎖の一方向に沿って第３〜
６単位は全て同じである。該ジペプチド連鎖において、
各１−２単位の配線がＬ−ＬＳＬ−ＤＬまたはＤＬ−Ｄ
Ｌの場合、Ｌ−Ｌ型およびＤ−含有混合物のＬ−Ｌ型の
みが輸送され、Ｄ−末端単位を有する化合物はとり残さ
れることが判明した。さらに、該オリゴペプチドの１お
よび２−位における２つのＬ一単位はプロトラグを自然
分解に対して安定化することも判明した。

該１一単位がＬ−型でなければならないので、少なくと
も「弾頭」残基、すなわち、後記の生物活性を有する残
基により、α−または２−置換されていなければならな
い。また、かかるα−置換は求核置換反応によるプロト
ラグの生成に重要であるばかりでなく、感染性生物の細
胞内において活性基または弾頭を放出するためにも重要
である。

本発明者らは、細胞内ペプチダーゼが該ポリペプチドを
細胞内で１および２一単位の間で分裂させるものと推定
している。ついで、該活性薬剤は残った１つのアミノ酸
残基から、もはや鎖の安定化アミノ酸単位を有しない該
単位の自然な分解により放出される。この作用の機構を
支持する１ｎｖｉｔｒ。

におけるテスト結果を後に示す。

本明細書において、「オリゴペプチド」なる語は、該プ
ロトラグの運搬尾部を示すために用いられており、ジペ
プチドおよびそれより多いオリゴペプチド鎖を包含する
。該ペプチド鎖の非運−単位におけるアミノ酸としては
Ｌ−アラニルが好ましい。

本発明の化合物は、式： 〔式中、 Ｒ１は炭素数１〜４の低級アルキル、フェニル、アミノ
ブチルまたはベンジル、 Ｐは水素または、天然り一またはＤ−配置のグリシル、
アラニル、フェニルアラニル、リシル、オルニチル、メ
チオニル、バリル、イソロイシル、ロイシル、アルギニ
ル、チロシル、アスパラギル、グルタミル、プロリル、
ピログルタミル、ヒドロキシプロリル、アスパルチル、
スレオニル、セリルまたはシステイニルのようなアミノ
酸の１〜４個の残基単位、 Ｑはヒドロキシまたは、天然Ｌ−またはＤ−配置のグリ
シル、アラニル、フェニルアラニル、リジル、オルニチ
ル、メチオニル、バリル、イソロイシル、ロイシル、ア
ルギニル、チロシル、アスパラギル、グルタミル、プロ
リル、ピログルタミル、ヒドロキシプロリル、アスパル
チル、スレオニル、セリルまたはシステイニルのような
アミノ酸の１〜４個の残基単位、 Ｗは求核置換反応に関与することのできる電子配置を有
する生物活性薬剤（ＨＷ）の残基、を意味する〕 で例示できる。

式１中、該２−ペプチド単位は各々、アラニル（または
関連したバリル、ノルバリル、ロイシル、イソロイシル
またはノルロイシル）、フェニルグリシル、リジルまた
はフェニルアラニル基として認識される。

また、該オリゴペプチドフラグメント、ＰおよびＱ中、
各ペプチド単位は立体配置または化学構造が異なってい
てもよいが、製造の都合上、該単位が同じで、例えば、
ポリーＬ−アラニル、あるいは、さらにはポリグリシル
単位のように単純であることが好ましい。

「天然に生じるアミノ酸」なる語は前記したヨーロッパ
特許出願第３８５４１号′の第７頁はじめにも示されて
いるごとく、当該分野において明らかな意味を有する。

ペプチド鎖のアミノ酸部分または弾頭葺上のいずれの反
応性基も該ヨーロッパ特許出願の第７頁１５行および第
１２頁１４行に示されると同様に、合成の間、保護する
ことｐｉできる。また、米国特許第３８０３１２Ｑ号、
ことに第４欄２８行ならびに第６〜９欄または米国特許
第３９５７８０３号参照。

本発明の好ましい化合物は式： 〔式中、Ｗは式１におけると同じ、立体配置はＬ−して
ある〕 で示される。

ＨＷは、さらに詳しくは、つぎの式： ％式％］（ 〔式中、ｘは−０−１−ｓ−１−ＮＨ−１−Ｎ４たは活
性化−σ−１ｋ２はＸと一緒になって求核攻＼ 撃基となる生物活性薬剤残基を意味する〕で示される。

生物活性薬剤は、さらに詳しくは、つぎのものが挙げら
れる。

（ａ）抗菌剤または抗真菌剤、例えば、０ＣＲ３゛ ならびに炭素数１〜６のアルキルチオール、ω−アミノ
プロピルチオールのような炭素数１〜６の官能性アルキ
ルチオールまたは式： 〔式中、ｋは水素または、炭素数１〜４のアルキル、炭
素数１〜４のアルコキシ、シアノ、ノーロゲンまたは炭
素数１〜４のアルキルチオからなる群から選ばれる１〜
２個の置換基を意味する〕で示されるようなフェニルチ
オール。他の抗微生物剤については、ＣＡ９４　１８５
５０７ＣＳＣＡ見３　１５０１６３（１、ＣＡ９ユ　１
１４５５２ｑ、ＣＡ３６　　８９６７１ｒ、ＣＡ９０　
　９８００７ｐ、ＣＡ９０１５２１９７ｒ、ＣＡ９２１
４６６０９ｂ、ヨーロッパ特許出願第３８５４１号、米
国特許第３５９００３５号、第３７００６７６号または
第３７７３７７０号参照。

（ｂ）抗腫瘍剤、例えば、 １ 〔Ｒは水素、ハロゲン、カルボキシ、トリフルオロメチ
ル、２−ブロモビニルまたはニトロヲ意味する〕。

（Ｃ）駆虫剤のような抗寄生虫剤、例えば、オキシベン
ダゾール、パルベンダゾール、オキシベンダゾール、カ
ムベンダゾール、フェンペンタソール、メベンダゾール
、アルベンダゾールまたはチアベンダゾール。

Ｗが前記式■で定義されるような炭素数１〜６のアルキ
ルチオ、炭素数１〜６の官能性アルキルチオまたはフェ
ニルチオの式１または工Ａの化合物はことに、生物系に
おけるプロテアーゼ／ペプチダーゼ作用を検出するため
に有用である。例えば、これらの化合物は血清のような
生物学的液体中のプロテアーゼ活性検出において、ロイ
シンＰ−ニトロアニリドよりもより鋭敏な色素生成性基
質薬である。この有用性はプロテアーゼの作用による式
Ｈ−５−に２のメルカプタンの放出に基くも６　　ので
、後記のごとくエルマン試薬（ＥＩ　Ｉｍａｇｅｓｒｅ
ａｇｅｎｔ　）を用いて定量的に分析される。

例えば、Ｌ−アラニル−Ｌ−（α−フェニルチオ）グリ
シンは、ロイシンＰ−ニトロアニリドを色素生成性基質
として用いるとプロテアーゼレベルの差がほとんど検出
できないマウスの新鮮な血清および保存した血清におけ
るプロテアーゼ活性測定のための検出ペプチドとして用
いら与る。

構造中に遊離のカルボキシ基を有する本発明の検出薬化
合物は生物学的液体中のカルボキシペプチダーゼ用の色
素生成性基質として作用させるために用いる。Ｎ−アセ
チル−し−アラニル−Ｌ−（α−フェニルチオ）グリシ
ンはエルマンの方法を用いるカルボキシペプチダーゼＡ
の作用をモニターするために用いられる。

本発明の化合物はつぎの反応式に従って製造される。

反応式Ａ ＲＩＯＲＯＯＨ （１）　　　　　　（２１（３１ ＋５１　　　　　　　　　　ｆ６１ ＲＩＯＷ　　　　　　　ＲＩＯＷ （７）　　　　　　　　　＋８１ １１ ＲＯＷ　　　　　　　　　　　　ＲＯＷｉ９）　　　　
　　　　　　　　　　　（ｔα反応式Ｂ ｌ０Ｗ ｆｌｕ）　　　　　　　　　ｆ１２１ Ｒ”ＯＷ これらの反応式中、Ｗ、Ｐ、Ｑ、Ｒ’、Ｘおよび西よ前
記と同じまた。よ、ブー、Ｆ−分野７通常用いられるそ
れらの保護誘導体を意味する。

Ｚは、反応中に感受性の化学中心を保護し、その後、分
子中の他の部分、この場合は特にα−置換基Ｗに影響を
与えることなく化学的手段で除去できるポリペプチド分
野において用いられるアミノ保護基を意味する。かかる
アミノ保護基としては、選択的加水分解または水素供与
体の存在下、パラジウムのような貴金属上での交換水素
添加分解によって脱離できる基が挙げられる。これらの
基の例としては、アラルキル−またはアルキルオキシカ
ルボニル基、例えば、トリクロロエチルオキシカルボニ
ル、アリルオキシカルボニル、ベンズヒドリルオキシカ
ルボニル、ベンジルオキシカルボニルまたはｔ−ブチル
オキシカルボニル（【−ｂｏｃ　）が挙げられる。後記
のカルボキシ保護基におけると同じ反応で脱離できる保
護基が好ましい。ペプチドの分野で公知の他の保護基に
ついては前記の文献に記載されている。

Ｙはアミノ基についてのＺと同じ目的で用いられるカル
ボン酸保護基である。かかる基の例としては、アリル、
ベンズヒドリル、【−ブチル、トリクロロエチル、ベン
ジル、ベンジルオキシメチルまたはＰ−ニトロベンジル
エステルのような容易に開裂されるエステルが挙げられ
る。

〜はアシル基で、それが結合する酸素と共に当該分野で
公知の活性アシルオキシ脱離基を形成する。アルキルま
たはアリールカルボニルオキシ基の例としては、炭素数
２〜６のアルカノイル、ベンソイル、炭素数１〜６の低
級アルキルスルホニル（例えば、メシル）または炭素数
６〜１０のアリールスルホ手ル（例えば、Ｐ−）ルエン
スルホニル）が挙げられる。トシルオキシのようなある
種の脱離基は反応性なので、それらを含有する中間体化
合物は容易に単離できないかもしれない。

これらは単離することなしに生成、使用することができ
る。別法として、α−クロロまたはα−ブロモ基のよう
なハロゲン脱離基をアシルオキシ基の代りに用いる。

ペプチドの合成に有用な、かつ、本発明においてＺおよ
びＹについて用いることのできる保護基ならびにＰまた
はＷ中における他の化学的に感受性の基についての保護
基の例はシンセテイック・ペプチド：［（５ｙｎｔｈｅ
ｔｉｃ　Ｐｅｐｔｉｄｅｓ　工、　Ｖｏｎ　Ｎｏ５ｔｒ
ａｎｄ。

１９７０）第３〜８頁およびそのつづきの巻ならびに前
記の文献中に記載されている。

ことに、ＺおよびＹが同じ保護基で、標準的な水素供与
体の存在下、パラジウム触媒上での水素　　−交換反応
により両方が脱離できる基であることが都合よい。反応
式Ａにおける保護中間体の例としては、（１）ｚがカル
ボベンゾキシおよびＹがベンジル、（＋１１７がアリル
オキシカルボニルおよびＹがアリルまたは（１１＋１７
がｔ−ブチルオキシカルボニルおよびＹが【−ブチルの
ものが挙げられる。また、−〇ＡＣが置換される場合、
もっとも実用的なＡＣ基はアセチルである。さらに、反
応式Ａの化合物（３）におけるα−〇Ｈ基を公知のハロ
ゲン化剤を用いて塩素または臭素のようなハロゲン脱離
基で置換してもよい。ついで、このハロゲンイオンは（
４）→（６）の置換反応において脱離基となる。該α−
ハロゲン中間体は、弾頭基を酸素原子を介してペプチド
鎖に結合させる場合にことに重要であり、攻撃オキシ基
の金属塩が有用である。゛反応式Ａにおいて、はじめの
反応はＬ−α−置換アミノ酸アミド（１）をグリオキサ
ル酸（２）自体または前記のようなカルボキシ保護基を
すでに有しているグリオキサル酸エステルと反応させる
ことからなる。この反応は室温から還流温度までの温度
で、反応体が実質的に可溶な不活性有機溶媒中、反応が
完了するまで（例えば、８時間まで）行なわれる。水ト
ラツプ上で還流させたベンゼン様溶媒がもつとも都合よ
い。また、塩化メチレンのようなハロゲン化溶媒または
エチルエーテルのようなエーテル性溶媒も使用できる。

得られたα−ヒドロキシジペプチド（３）は、もし、す
でにエステル化されていない場合、ついで、公知のカル
ボキシ保護剤と反応させる。

保護したα−ヒドロキシジペプチドを、冷時、ピリジン
のような第３級アミン中、酸塩化物または無水物のよう
なアシル化剤と反応させてα−アシルオキシジペプチド
（４）を得る。

α−アシルオキシジペプチド（４）を、反応体が可溶な
不活性有機溶媒中、室温から還流温度までの温度で、反
応が完了するまでＨＸＲ２またはＨＷの求核性生物活性
薬剤と反応させる。置換した酸を吸収するために第３級
アミンを存在させることができる。各々、過剰のトリエ
チルアミンと組合せたジメチルホルムアミド、ジオキサ
ン、テトラヒドロフランまたはジメチルアセトアミドが
良好な溶媒系である。

本発明者らは反応式Ａ中の式（４）の化合物のび一アシ
ルオキシ基が求核性置換に対して非常に感受性のあるこ
とを見出した。この反応は文献に報告されている５Ｎ２
−　ＳＮｌ型混合反応過程よりも、ＳＮ２型反応過程が
都合よい。一般に、式（４）の化合物のα−アシルオキ
シ基は、ある種のセファロスポリン中間体の３−アセト
キシメチル基よりも置換を受けやすＩＩＮ　［Ｃｅｐｈ
ａｌ！ｏｓｐｏｒｉｎｓ　ａｎｄ　Ｐｅｎ１ｃｉ　ｌ　
−１ｉｎｓ、　Ｅ、Ｈ，ＦＩ！ｙｎｎ、　Ａｃａｄｅｍ
ｉｃ　Ｐｒｅｓｓ　（１９７２）、　Ｐｐ。

１５８−１６４，１５１−１７１参照〕。

このジペプチドのび一アシルオキシ基の置換が本発明に
おける重要な反応である。前記の先行技術（Ｔ、Ｎ１５
ｈｉｔａｎｉ　、　ｅｔ　ａｌ、）の説明に示したよう
に、かかる置換は、従来、アセチル、イソブチルまたは
カルボベンゾキシの〜ような当該分野における通常のＮ
−アシル基を有するＮ−アシルアミノ酸を用いることが
報告されている。しかし、これらは、本明細書に記載の
新規化合物のペプチド輸送鎖のごとき輸送部分として供
することはできない。本発明においては、輸送部分はＬ
−配置の特定の運搬ペプチド単位ならびにＮ−末端アミ
ノ基および安定化２一単位を有しなければならない。実
際には、該置換の過程は薄層クロマ（グラフィーで追跡
して反応の進行を確認する。

この置換による重要なジペプチド生成物（６）は、つい
で、接触交換反応（例えば、水素源とパラジウム触媒使
用）、酸処理（例えば、酢酸中、塩化水素または臭化水
素使用）、適当な場合には接触水素添加またはアルカリ
処理（例えば、水酸化カルシウム使用）のような公知の
方法により、いずれの保護基をも脱離させる反応に付さ
れる。

もちろん、かかる処理は重要なα−弾頭部分（Ｗ）の部
分の化学的開裂を包含してはならない。保護基が脱離さ
れると、ジペプチドである本発明の目的化合物（式Ｉ、
Ｐ＝Ｈ）が得られる。

２個より多いアミノ酸単位を有するオリゴペプチドは、
公知の方法によりＮ−保護されたアミノ酸またはオリゴ
ペプチドをＮ−脱保護α−弾頭ジペプチド（反応式Ａ、
（８））と縮合させることにより都合よく製造される。

この工程もまた、公知のいずれのペプチド・カップリン
グ法を用いることができる（例えば、米国特許第３８０
３１２０号参照）。かかる方法の例としては、Ｎ−保護
アミノ酸とＣ−保護ジペプチドをジシクロへキシルカル
ボジイミドまたはカルボニルジイミドゾールと共に用い
ることが挙げられる。他のカップリング法は酸ハロゲン
化物、無水物、アジドまたは活性混合エステルのような
該オリゴ酸の種々の活性カップリング型を用いることで
ある。再び１．ぺプチド・カップリング反応後、前記の
ように保護基を除去して式■の目的とするプロトラグを
得る。

ペプチド鎖をＣ−末端の方へ延長する場合は、反応式Ｂ
に示すごとく、また、前記したごとく、所望の保護アミ
ノ酸またはオリゴペプチド単位を式（１１）の保護α−
置換オリゴペプチドと反応させる。

別法として、最終生成物に所望のオリゴペプチド鎖は反
応式Ａのグリオキサル酸エステル縮合工程の式（１）の
化合物に対応する構造中に位置させ、目的生成物まで持
ち込んでもよい。しかしながら、この方法は、しばしば
、その中間体が取扱困難な物理化学的性質を有するので
、好ましくないＯ 前記の反応式ＡおよびＢに示した反応の生成物はジアス
テレオマー混合物として得られる。これらは、所望によ
り、逆相クロマトグラフィーまたは式Ｉのオリゴペプチ
ドそれ自体またはその塩の光学的活性塩基または酸によ
る分別結晶のような公知の方法により分離できる。意外
にも、異性体のクロマトグラフィ一番こよる分離が都合
のよい分割法であることが判明した。１および２−アミ
ノ酸単位におけるり、Ｌ−異性体は細胞膜のペプチド透
過酵素系によって選択的に輸送されるものである。異性
体の混合物が存在する場合、Ｌ、Ｌ−異性体が選択的に
吸収され、不透過性のり、Ｄ−異性体はとり残される。

したがって、この観察に基き、弾頭部分の適当な活性量
を調節した、分離したし。

Ｌ−異性体またはジアステレオマー混合物が有用である
。

前記した反応は液相で行なうことを意図したものである
が、大部分のペプチド反応と同様、別法として、同相法
または酵素技術も使用することができる（　Ｒ１Ｂ１Ｍ
ｅｒｒｉｆｉｅ／ｄ、　Ｂｉｏｌｏｇｙ　　３　１３８
５（１９６４）またはＪ、Ａｍ、Ｃｈａｎ、Ｓｏｃ、　
８５　２１４９（１９６３）参照〕。

また、本発明には、その重要な特徴が末端グリシル単位
のα−または２−位に置換可能な置換基を有し、さらに
、ジペプチドの他の単位である安定化アミノ酸単位と結
合した構造を有する式、１“：１ｏＲ５ Ｚ　ＮＨＣＨＣＮ　ＨＣＨＣＯ２Ｙ 〔式中、Ｙ、Ｚおよびに１は前記と同じ、ｋ５は求核的
置換反応において公知の脱離基、例えば、塩素、臭Ｌ　
ヒドロキシまたはアシルオキシ（アシル基は前記と同様
）を意味する〕 で示される中間体も包含する。

有利な中間体は、ｋｌがメチル、ｋ５がヒドロキシまた
はアセトキシ、Ｚがアリルオキシカルボニル、カルボベ
ンゾキシまたは【−ブチルオキシカルボニル、Ｙがアリ
ル、ベンジルまたはｔ−ブチルの式■の化合物である。

運搬した化学療法残基（弾頭、Ｗ）が作用する標的生物
の細胞膜の透過性を増強するための式Ｉのプロトラグの
使用法も本発明の他の１つの態様である。式■の化合物
を、直接接触による細菌または真菌の表面感染の処置に
おけるような、１ｎｖｉｔ：ｒ：’ｏで、あるいは、局
所注入、非経口注入または経口投与による全身または局
所感染の処置におけるような、ｉｎ　ｖｉｖｏ　で標的
細胞と接触させる。

抗腫瘍剤は直接潅流によって適用でき、一方、駆虫剤は
経口投与または筋肉注射によって適用できる。

該プロトラグの用量は該弾頭または薬剤自体について公
知の用量から、該プロトラグの不活性ペプチド運搬鎖に
ついての補償を行なうことにより求められる。もちろん
、抗菌−抗真菌プロトラグの局所適用を用いる場合、用
量は感染部位へ充分過剰な薬剤を適用するという場合は
ど重要ではない。局所用には、０．５〜１０％濃度のプ
ロトラグを溶液、懸濁液または、軟膏、シャンプー、ヘ
アー・オイル、トローチ、ガム、水薬、石鹸のような局
所適用製品形で用いる。

ついで、適用されたプロトラグは細胞膜の透過酵素系の
受容体単位に対するペプチド鎖の親和力により細胞膜を
通して輸送される。細胞内に入ると、プロトラグは細胞
内ペプチダーゼの攻撃を受け、少なくとも、１および２
一単位の間でペプチダーゼが開裂される。

■ ＮＨ−ＣＨＣ０２Ｈ十■Ｗ 〔式中、ＰおよびＷは前記と同じ〕 ついで、′α−置換アミノ酸の分離により、細胞内の作
用部位で薬剤が放出される。該活性薬剤は細胞膜を容易
に透過できないので、薬剤は細胞内で蓄積する傾向にあ
る。また、弾頭（Ｗ）が非常に大きな基であったり、帯
電基を有する場合は輸送が容易でない場合もある。この
場合、運搬鎖中のペプチド単位の数を増加させるべきで
ある。かくして、該プロトラグは非特異的オリゴペプチ
ド輸送系を使用することができる。酸基のような干渉性
基の場合、生理的ｐＨにおいて陽性に帯電するオルニチ
ン、リジンまたはアルギニンのようなアミノ酸を用いて
可逆的または補償的にマスクしてもよい。

したがって、本発明の方法は感染性生物の細胞を式■の
化合物と接触させることからなる化学療法薬剤に対する
感染性生物の細胞膜透過性を向上させる方法である。

これらの新規化合物は局所的あるいは全身的に細菌や真
菌を処理するのにもつとも有用であるが、同じプロトラ
グの概念は他の目的にも用いることができる。弾頭Ｗが
抗腫瘍化合物の場合、該オリゴペプチドプロトラグは、
異常細胞が増強したペプチダーゼレベルを有する場合、
該細胞に対して毒性の弾頭を送るために用いることがで
きる。他の例では、該ペプチドプロトラグは、低溶解度
のような物理化学的性質により、通常、注射製剤として
用いられない化合物の注射製剤製造に用いることができ
る。この用法は、ことに、公知のベンズイミダゾール駆
虫剤において利用できる。もちろん、プロトラグが作用
部位に到達する前にペプチダーゼにさらさ□れるような
投与経路ではプロトラグのペプチド鎖が分解される。こ
の効果は、実際上、ある種の駆虫剤においては都合よい
場合がある。

本明細書において、式■のプロトラグは両性ポリペプチ
ド型として表わしであるが、明らかなように、ポリペプ
チド鎖や弾頭部に塩基性中心がある場合の医薬上許容さ
れる酸付加塩のような、該プロトラグの塩も同様に有用
である。また、酸中心が存在する場合、アルカリ金属あ
るいは非毒性有機アミンカチオンを有するような通常の
塩基から誘導される医薬上許容される塩基塩も製造でき
る。両方のタイプの塩は公知の方法により、通常、適当
な溶媒中で該プロトラグを過剰の酸または塩基と接触さ
せることにより製造される。

さらに、前記のごと（、式■およびＩＡの化合物は、Ｎ
−アセチル、カルボベンゾキシまたはアリルオキシカル
ボニル誘導体のようなＮ−末端におけるアミド誘導体あ
るいはアルキル、ベンジルまたはアルキルオキシ誘導体
のようなＣ−末端におけるエステル誘導体の形で使用す
ることができる。

実施例および生物活性試験 つぎの実施例および生物活性試験により本発明をさらに
詳しく説明する。

実施例Ｉ Ｎ−カルボベンゾキシアラニルアミド５１ｉ’　（０゜
０２２５モル）、グリオキサル酸永和物２．３Ｐ（０，
０２５モル）およびエチルエーテル−塩化メチレン５０
−を攪拌しながら一夜放置する。白色固体のＮ−カルボ
ベンゾキシ−Ｌ−アラニル−Ｄ、Ｌ−２−ヒドロキシグ
リシン２ｙが分離する。融点１２８〜１３０℃。濾液を
さらにグリオキサル酸２．３りと反応させて、さらに３
．１５Ｆの生成物を得る。融点１２７〜１３０℃。

元素分析＝Ｃｌ３Ｈ１６Ｎ２０６　　として、計算値（
％）：Ｃ，５２，７０；Ｈ，５，４４；Ｎ、９．４６実
測値（％）：Ｃ，５２，６５；Ｈ，５，０６；Ｎ、９．
５７このα−ヒドロキシジペプチド０．５９ｙ（２ミリ
モル）のジメチルホルムアミド２〇−中溶液ヲ炭酸セシ
ウム０．３３！ｉ’（１ミリモル）の水８ｍｌｍｌ液溶
液合する。混合液のｐＨを〜７．０まで上げる。

揮発性成分を蒸発させ、ジメチルホルムアミドおよびト
ルエンと順次共沸させる。得られたガム状固体ヲジメチ
ルホルムアミド２０−に溶解し、臭化ベンジル１．７１
Ｆ！（１０ミリモル）を加える。

この混合液を室温で一夜攪拌する。

濾液を水で稀釈し、酢酸エチルで抽出する。洗浄した抽
出液を合し、蒸発させる。残渣をエーテルで摩砕し、白
色固体のＮ−カルボベンゾキシ−Ｌ−アラニル−Ｄ、Ｌ
　−２−ヒドロキシグリシンベンジルエステル０．４９
Ｆを得る。試料を５％メタノール−塩化メチレンを用い
てシリカゲル上で精製する。融点９１〜９１，５℃。

元素分析’Ｃ２゜Ｈ２２Ｎ２０６として、計算値（％）
　：　Ｃ，６２，１７；Ｈ，５，７４；Ｎ、　７．２５
実測値（％）　：　Ｃ，６２，２０；Ｈ，５，３６；Ｎ
、　７．０４この反応は臭化ベンジル、重炭酸ナトリウ
ムおよびジメチルホルムアミドを用いても行なえ、所望
のベンジルエステルが良好な収量で得られる。

該保護α−ヒドロキシジ“≧１プチド０．２７１７ミリ
モル）およびピリジン３．３　ｍ／の０℃に冷却した混
合液に無水酢酸３．３−を加える。冷所に一夜放置して
、反応混合液を蒸発させる。残渣をエーテルで摩砕して
白色のＮ−カルボベンゾキシ−Ｌ−アラニルーＤ、Ｌ−
２−アセトキシグリシンベンジルエステル０．３２Ｐを
得る。

元素分析：Ｃ２２Ｈ２４Ｎ２０□として、計算値（％）
：Ｃ，６１，６７；Ｈ，５，６５；Ｎ、６．５４実測値
（％）：　Ｃ，６１，９１；Ｈ，５，６５；Ｎ、６．３
３該α−アセトキシジペプチド０．２８　Ｐ　（６，８
ミリモル）をテトラヒドロフラン４−およびトリエチル
アミン０．０６８Ｐ中、２０℃で（ベンゾチアゾール−
２−イル）メタノール０．１１　Ｌ！（６，８ミリモル
）と反応させ、２４時間攪拌する。真空下で溶媒を蒸発
させ、黄色油状のＮ−カルボベンゾキシ−し−アラニル
−２−（ベンゾチアゾリル−２−メトキシ）−Ｄ、Ｌ−
グリシンベンジルエステルを得る。

この物質１５０ｍｇを、触媒として５％パラジウム−炭
素、水素供与体としてシクロヘキセンを用−いてメタノ
ール中で処理してＬ−アラニル−２−（ベンゾチアゾリ
ル−２−メトキシ）−Ｄ、Ｌ−グリシンを得る。

実施例２ 実施例１のα−アセトキシジペプチド０．５３１ｉ’（
１，２３ミリモル）、５−フルオロウラシル０．１４６
グ（１，１２ミリモル）、トリエチルアミン０゜１１３
Ｐ（１，１２ミリモル）およびジメチルホルムアミド２
−の混合物を室温で１８時間攪拌する。

混合液を濃縮する。残渣を水２−に溶解し、酢酸エチル
で再抽出する。抽出液を合し、洗浄し、乾燥し、濃縮し
て、わずかに不純物を含むＮ−カルボベンツキシ−し−
アラニル−２−（５−フルオロウラシル−１−イル）−
Ｄ、Ｌ−クリシンベンジルエステル０．５９Ｆ（９８％
）を得る。

この物質を、塩化メチレン−塩化メチレン中１％メタノ
ールおよびシリカゲルカラムを用いる中圧液体クロマト
グラフィーにより精製して精製生成物０．４５９（７４
％）をジアステレオマー混合物として得る。融点９３〜
９５℃。

こノＤ、Ｌ−異性体混合物３５０ｍｇ（０，７０ミＩＪ
モル）、１０％パラジウム−炭素３００　ｍｇ、シクロ
ヘキセン０．５−およびメタノール３５−の混合液を１
０分間加熱還流する。この熱混合液を濾過し、濃縮して
Ｌ−アラニル−２−（５−フルオロウラシル−１−イル
）　−り、Ｌ−グリシンの精製脱係１護生成物０．１８
１９４％）を得る。逆相変性シリカゲルＣ１８カラムを
用いる高圧液体クロマトグラフィーに付し、２０％メタ
ノール−水で溶出したところ、２つ、のジアステレオマ
ーが１：１の比率であることが示された。

元素分析：Ｃ９Ｈ工、ＦＮ４０６．Ｈ２Ｏとして、計算
値（％）：Ｃ，３６，９５；Ｈ，４，４８；Ｎ、１９．
１７実測値（％）　：　Ｃ，３６，６６；Ｈ，４，３４
；Ｎ、　１８．８５脱保護後、シリカゲルカラム上、前
記の溶媒系を用いて中圧液体クロマトグラフィー（ＭＰ
ＬＣ）に付して、Ｌ−ＬおよびＬ−Ｄジアステレオマー
を分離する。

Ｌ−Ｄ異性体の旋光度：〔α〕。（１，Ｈ２０）−一１
０５．９°。

元素分析：Ｃ９Ｈ１□ＦＮ４０．・Ｈ２０として、計算
値（％）：Ｃ，３６，９９；Ｈ，４，４８；Ｎ、１９．
１７実測値（％）　：　Ｃ，３７，１１；Ｈ，４，１４
；Ｎ、　１９．１・９Ｌ−Ｌ異性体の旋光度：〔αヤ　
（１、Ｈ２０）−十１３１．１°。

元素分析：ＣＨＦＮ０　　・１．５Ｈ２０として、１１
４５ 計算値（％）　：　Ｃ，３５，８９；Ｈ，４，６８；Ｎ
、　１８．５９実測値（％）：ｃ、３５．５４，３５．
５４；Ｈ，４，２０，４，０８； Ｎ、１８．４４ｊ１８．５１ 実施例３ グリオキサル酸水和物をベンゼン中で過剰のアリルアル
コールと反応させてグリオキサル酸了りルアセタールを
得る。沸点５５〜６０℃／１６Ｉ＋ＩＩ＋ＩＨｇ。

Ｌ−アラニルアミド塩酸塩を、水酸化ナトリウム２．０
９およびテトラヒドロフラン４−を含有する水２〇−中
、１当量のクロロギ酸アリルと反応させてアリルオキシ
カルポニＪレアミノ−Ｌ−アラニルアミ「を得る。融点
１３５〜１３６℃。

元素分析：Ｃ７Ｈ０２Ｎ２０３　として。

計算値腐）：　Ｃ，４８，８３；Ｈ，７，０３ｉＮ、１
６．２７実測値Ｃ％）：　Ｃ，４９，１６；Ｈ，７，１
２ｉＮ、１６．１０アリルオキシカルボニルアミノ−し
−アラニルアミｌ−’１．５４ｇ（０，００９モル）、
グリオキサル酸アリルアセタール１．２ｆ！（０，００
９モル）およびベンゼン５０−の混合液を共沸条件下、
５４時間加熱還流して反応を完了させる。冷却した混合
液を石油エーテルで処理し、摩砕して結晶質のＮ−アリ
ルオキシカルボニル−Ｌ−アラニル−２−ヒｒロキシー
Ｄ、Ｌ−グリシンアリルエステル２グ〔８０％）を分離
する。酢酸エチル−石油エーテルから再結晶して精製し
、白色固体１．１７を得る。

融点８８〜９０℃。

元素分析：Ｃ□２Ｈ□８Ｎ２０６として、計算値′図）
：Ｃ，５０，３５；Ｈ，６，３４；Ｎｓ　　９．８８実
測値（％）：Ｃ，５０，２５ｉＨ，６，５５ｉＮ、１０
．４３該α−ヒドロキシジペプチ）’０．９　Ｐ　Ｃ０
，００３モル）、無水酢酸７．０１ｎｌおよび乾燥ピリ
ジン９ｒｎｌの混合液に冷所で調製する。８時間放置後
、真空下で揮発性成分を除去して黄色の油０．８５ｆＩ
を得る。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）による分析
はいくらかの出発物質が存在することを示し、これは、
エーテルとの摩砕によって分離され、Ｎ−アリルオキシ
力ルボニル−し一アラニル−２−アセトキシーＤ、Ｌ−
グリシンアリルエステルが得られる。

Ｎ　Ｍ　Ｒ（ＣＤＣｌ　３　）　：δ１．３５　（ｄ　
、　３　）　ｉ　２．０（Ｓ　、３）ｉ４．５（ｔ　、
２）；５〜６（−、オレフィン）ｉ６．４（ｄ、２）。

該α−アセトキシジペプチ１″０．７５ｙ（０，００２
２モル）、ベンゾチアゾール−２−イルメタノール０．
２５グ（”ｂ、ｏｏ２ｚモル）および乾燥テトラヒドロ
フラン０．２２ｆＩ（０，００２２モル〕の混合液を乾
燥テトラヒドロフラン５−生乾燥トリエチルアミン０．
２２ｙ（０，００２２モル）に加える。

混合液を室温で８時間攪拌する。薄層クロマトグラフィ
ー（塩化メチレン−メタノール（９９：　１））は反応
が完了したことを示す。混合液を真空下で蒸発させて、
黄色の油１，１りを得、シリカゲルカラム上、２％メタ
ノール−塩化メチレンを用いて中圧液体クロマトグラフ
ィーに付し、Ｎ−アリルオキシカルボニル−し−アラニ
ル−２−（ベンゾチアゾリル−２−メトキシ）−Ｄ、Ｌ
−グリシンアリルエステル０．５１９Ｃ５４％〕を得る
。

ＮＭＲ（ＣＤＣ／３）：δ１．４（ｄ、３）；４．５５
（ｔ　、　２　）　；　５．１５　（’８．２）　；５
．２〜６．２　（ｍ、、オレフィン）；７．４および３
．Ｑ（ｍ、芳香族〕。

この置換生成物０．３Ｆ（０，０００７モル〕および塩
化メチレン３ｒｎｌの混合液を窒素雰囲気下、水素供与
体としての２−エチルヘキサン酸ｏ、ｓｙの塩化メチレ
ン３−中溝液、ついで、トリフェニルホスフィン４０Ｗ
９およびテトラ（トリフェニルホスフィン）パラジウム
４０ｒＩ９で処理する。混合液を室温で一夜攪拌し一エ
ーテルで稀釈する。生じた固体１８■を集める。

ｐ液を濃縮して、大部分が出発物質である残渣を得る。

これを前記と同様に２４時間反応させて脱保護生成物８
５１ｎｇを得る。双性イオンとしてのし一アラニルー２
−（ベンゾチアゾリル−２−メトキシ）−り、Ｌ−グリ
シンの総収量は１０３■である。

Ｒ［（アセトニトリル−水（８０：２０））：０．４７
゜ 元素分析：Ｃ□３Ｈ工５Ｎ３０４Ｓ　として、計算値（
％）　：Ｃ，５０，４８ｉＨ，４，８９；Ｎ、１３．５
８実測値Ｃ％）：Ｃ，５０゜７０；Ｈ，’４．８４；Ｎ
、１３．４０実施例４ ４−（Ｎ−（２−メルカプトエチル）アミノ）ピリジ７
−２．６−ジカルボン酸０．２８ｆ！（０，００１モル
）、実施例３の保護α−アセトキシジペプチド０．３３
９　（０，００１％ル）、乾燥トリエチルアミン０．４
４Ｆ（０，００４モル〕および乾燥ジメチルホルムアミ
Ｆ１３−の混合液を室温で２時間攪拌する。システアミ
ン出発物質の未反応アミン塩のいくらかを分離する。Ｐ
液を蒸発させて残渣を得、水に溶解し、ＰＨ１，５の酸
性とし、−夜蒸発させる。固体１０５”’Ｐを分離する
。これは所望のＮ−アリルオキシカルボニル−し−アラ
ニル−２−（２，６−ジカルポキシー４−ピリジル）エ
チルチオ−Ｄ、Ｌ−グリシンアリルエステルである。

ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−δ６）：δ１．２（ｄ、３）；２゜
８５（ｍ、２）；３．５（ｍ、２）；４．２（ｔ　　、
１）　；　４．５　（ｍ　、　２　）　；　５．１〜６
．１　（ｄ、オレフィン）；７．４（８，２）。

元素分析：Ｃ２□Ｈ２ａ　Ｎ　４０９　Ｓ　として、計
算値（９６）　：　Ｃ，４８，６３；）１．４．９７　
；Ｎ　、１０．６５実測値四）　：　Ｃ，４９，３０ｉ
Ｈ，５，１３；Ｎ、１０．９７この保護システアミン置
換生成物２２０■（０゜０００４（−／ｌｚ）、）　’
Ｊ　１　チ／Ｉ／　７　ミンＱ、　０９　ｍ／　ｇ　Ｊ
：び乾燥塩化メチレン１０ｍ／の混合液を乾燥酢酸エチ
ル３−中２−エチルへキサン酸０．６６Ｐと、ついで、
各々、トリフェニルホスフィンおよびテトラ（トリフェ
ニルホスフィン）パラジニム２０ηづつと反応させる。

混合液を一夜攪拌する。分離した白色固体を集め、塩化
メチレンで洗浄し、乾燥してＬ−アラニル−２−（２，
６−ジカルポキシー４−ピリジル）エチルチオ−Ｄ、Ｌ
−グリシンのモノトリエチルアミン塩１５０”？（９７
％）を得る。ＵＶ　　Ｆ、ｍａｘ＝１１０００（水中、
波長３００〕。

元素分析＝ＣＩ４！［（□８Ｎ４０７Ｓ−Ｎ（ｃ２Ｈ５
）３トシテ、計算値例）：Ｃ，４９，２７；Ｈ＋６，８
２；Ｎ、１４．３７実測値（％）：Ｃ，４９，１３；Ｈ
，６，８０ｉＮ、１４．７１実施例５ 前記で得られたＬ−アラニル−２−〔５−フルオロウラ
シル−１−イル）　−ＤＩＬ−りＩＪ−／７７１１１−
物０．１７５ＰＣ０，６４ミリモル〕、重炭酸ナトリウ
ム０．１０８９および水２．５４の混合液をジオキサン
３−に溶解したＮ−カルボベンゾキシ−し−ｙ７ニン　
Ｎ−ヒドロキシスクシンイミ）″（Ｍ保護アラニンとＮ
−ヒドロキシスクシンイミドカーボネートから調製）０
．２０４１ｉ（１，２８ミリモル）を合する。混合液を
室温で５時間攪拌し、濃縮する。残渣を水７ｙｔ／′Ｊ
３よび酢酸エチル７ｒｎ！で稀釈し、１０％クエン酸溶
液でｐＨ３，２に調整する。有機層を分離し、水層の酢
酸エチル洗液と合し、１０％クエン酸溶液で洗浄する。

乾燥した有機抽出液を蒸発させて白色固体のＮ−カルボ
ベンゾキシ−Ｌ−アラニル−Ｌ−アラニル−２−（５−
フルオロウラシル−１−イル）−り、Ｌ−グリシン０．
１５ｙ（５０％〕を得る。

この物質０．１！Ｍ’をメタノール１５−に洛解し、パ
ラジウム−炭素０．１５ｙおよびシクロヘキセン０．５
−と共に１０分間加熱還流する。この熱反応混合液を濾
過し、濃縮し、水に再溶解し、凍結乾燥する。ついで、
生成物を０□８シリ力ゲル逆相中圧液体クロマトグラフ
ィーカラム（Ｈ２Ｏ）上で精製し、凍結乾燥してＬ−ア
ラニル−Ｌ−アラニル−２−（５−フルオロウラシル−
１−イル）−り。

Ｌ−グリシンを得る。

元素分析：Ｃｌ２Ｈ０６Ｎ５０６　・２Ｈ２０として、
計算値ｃ％）二Ｃ，３７，８０；Ｈ，５，２８；Ｎ、１
８．３６実測値（％）　：Ｃ，３７，９８；Ｈ，４，７
８；Ｎ、１８．０５実施例６ Ｎ−アリルオキシカルボニル−し−アラニル−２−アセ
トキシ−Ｄ、Ｌ−グリシンアリルエステル０．３２８グ
（１，０ミリモル）−オキシベンダゾール（５−ｎ−プ
ロポキシ−２−ベンズイミダゾールカルバミン酸メチル
）０．２４９Ｆ（１，０ミリモル〕、トリエチルアミン
０．１０５’およびジメチルホルムアミｌ″５ｒｎｌの
混合液を室温で１２時間攪拌する。得られた混合液に酢
酸エチル５０−１ついで、１．５％塩酸５０ｍＡ’を加
える。酢酸エチルフラクションを分離し、水および食塩
水で順次洗浄する。乾燥抽出液を濃縮し、Ｎ−アリルオ
キシカルボニル−し−アラニル−２−（５−ｎ−プロポ
キシ−２−カルボメトキシアミノベンズイミダゾール−
１−イル）、−Ｄ、Ｌ−グリシンアリルエステル０．３
０５ｆＩ（５９％〕を得る。シリカゲル薄層クロマトグ
ラフィー（塩化メチレン−メタノール（９５：５））は
１つの主生成物を示す。この物質を、シリカゲル上、塩
化メチレン〜塩化メチレン中２％メタノールを用い、中
圧液体クロマトグラフィーでさらに精製して精製生成物
０．１６６ｆＩを得る。

この保護生成物０．１５７ｆ（０，３０ミリモル）を、
前記のごとく、テトラ〔トリフェニルホスフィン〕パラ
ジウム５０■、トリフェニルホスフィンｌＯηおよび酢
酸エチル５−と合する。混合液を窒素雰囲気下で３時間
攪拌する。分離した生成物５０ｇを水性アセトンから再
結晶して精製し、Ｌ−アラニル−２−（５−ｎ−プロポ
キシ−２−カルボメトキシアミノベンズイミダゾール−
１−イル）−Ｄ、Ｌ−グリシンを得る。この化合物は薄
層クロマトグラフィーにより、紫外線およびニンヒドリ
ン陽性の２つのスポットを示し、２つのジアステレオマ
ーであることを示す。

この化合物の弾頭部１０■／〜に相当する量を食塩水に
溶解し、オキシベンダゾールに感受性の嬬虫侵入物に感
染したブタまたはウマの皮下に゛注射する。

前記した１−位に反応性水素を有する他のベンズイミダ
ゾールも同様に調製できる。得られたプロトラグの溶解
度が良好なことから、ジペプチｒ鎖が好ましい。

実施例７ 実施例１の保護２−アセトキシグリシン０．２１４ｆＩ
（０，０５ミリモ／Ｌ／）および乾燥テトラヒドロフラ
ン２−の混合液を２−メルカプトピリジン０゜１１！１
ｌ（０，１ミリモル）−トリエチルアミン０，１１４（
０，１ミリモル）およびテトラヒドロ７ラン５−の溶液
と混合する。後者の溶液を該アセトキシ混合液に２０分
を要して滴下する。反応混合液を室温で一夜攪拌する。

溶媒を蒸発させて黄色の油を得、酢酸エチルにとり一水
および食塩水で洗浄し、乾燥する。この抽出液を蒸発さ
せ″て黄色の油を得る。ＮＭＲスペクトル分析は所望の
置換生成物と痕跡量の出発酢酸塩を示す。５％メタノー
ル−塩化メチレンを用いる液体クロマトグラフィーは異
性体の分離を示す。

Ｎ−カルボベンゾキシ−Ｌ−アラニル−２−〔ピリジル
−２−チオ）−り、Ｌ−グリシンベンジルエステル２０
０■を氷酢酸に溶解し、これに、乾燥塩化水素ガスを４
時間通す。薄層クロマトグラ浴中で冷却する。薄層クロ
マトグラフィー（セルロースプレート、ブタノール−酢
酸−水（４：１：４））の分析によると、保護生成物が
速かに消失する。

混合液を濃縮し、エーテルで摩砕し、Ｌ−アラニル−２
−（ピリジル−２−チオ）−Ｄ、Ｌ−グリシンｏ、ｘ３
２！ｉ’を得る。この物質は少量の不純物を含んでいる
ので、Ｃ□８逆相中圧液体クロマトグラフィーにより精
製する。

置換する弾頭として２−メルカプトピリドンを用いて同
じ操作を行ない、Ｄ、Ｌ−アラニル−２−（１−オキシ
ビリジルー２−チオ）−Ｄ、Ｌ−グリシンを得る。

実施例８ カルボベンゾキシアラニルアミド１２．２１ｉ’（０゜
０５５モル）、グリオキサル酸ベンジル１０グ（０，０
６１モル）ｉ゛よびトルエン１５０−の混合液を真空下
、水トラツプを付し、約７０℃で一夜加熱還流させる。

反応混合液からトルエン゛を蒸発させて白色固体を得る
。これを酢酸エチルで処理する。この抽出液を乾燥し、
冷却して、実施例１における中間体と同じＮ−カルボベ
ンゾキシ−Ｌ−アラニル−Ｄ、Ｌ−２−ヒドロキシグリ
シンベンジルエステル１２．６ｙを得る。

この化合物５００〜を前記と同様に１−メチルテトラゾ
ール−５−チオールまたは１−（２−メタンスルホンア
ミＦエチル〕テトラゾール−５−チオールと反応させ、
ついで、酸処理して、Ｄ、Ｌ−アラニル−２−（１−メ
チルテトラゾリル−５−チオ）−り、Ｌ−グリシンおよ
びり、Ｌ−アラニル−２−（１−（２−メタンスルホン
アミド）エチルテトラゾリノＩ／−５−チオ）−Ｄ、Ｌ
−グリシンを得る。

実施例９ 実施例１のＮ−カルボベンゾキシ−し−アラニル−２Ｌ
ヒドロキシ−Ｄ、Ｌ−グリシンベンジルエステル０．３
８６ｇおよびチオニルクロリ）１〇−の混合液を室温で
一夜攪拌し、濃縮する。残渣を石油エーテルで摩砕し、
濾過、乾燥後、Ｎ−カルボベンゾキシ−Ｌ−アラニル−
２−クロロ−Ｄ、Ｌ−グリシンベンジルエステル０゜３
６４９を得る。

元素分析：Ｃ２ｏＨ２□ＣｌＮ２Ｏ５として、計算値Ｃ
９６）　：Ｃ，５９，３３；Ｈ，５，２３；Ｎ、６．９
２Ｃ／、８．７６ 実測値（％）　：Ｃ，５９，２０；Ｈ，５，３８；Ｎ、
７．０８ＣＩ！、８．６８ ＮＭＲスペクトル：プロトンピーク６、２８　ＰＰｍ。

α−ヒドロキシピークｓ、　５５　ｐｐｍ。

ジメトキシエタンを溶媒として用い、−夜還流してこの
ハロゲン化をくり返す。薄層クロマトグラフィーで分析
後、反応混合液を（−）−（シス−１，２−エポキシプ
ロピル）ホスホン酸のジ銀塩（水中でそのす）　ＩＪウ
ム塩から調製、米国特許第３９２９８４０号）３５．２
■と合する。混合液を一夜攪拌し、濾過し、濃縮して油
を得る。生成物を酢酸エチルに溶解し、水洗し、乾燥し
、濃縮して、弾頭としてホスホノマイシンを有する化合
物であるＮ−カルボベンゾキシ−Ｌ−アラニル−２−（
−）−（シス−１，２−エポキシプロピル）ホスホノ−
Ｄ、Ｌ−グリシン２９．４ｙを得る。

この化合物は前記の交換水素添加を用いて脱保護される
。

実施例１０ 実施例３で得られたＮ−アリルオキシカルボニル−し−
アラニル−２−アセトキシ−Ｄ、Ｌ−グリシンアリルエ
ステル１．２ｙ（０，００３６モル〕および乾燥ジメチ
ルホルムアミド１５ｒｎｌの混合液をＰ−ニトロアニリ
ン０．５９Ｃ０，００３６モル）および乾燥トリエチル
アミン０．３６グ（０，００３６モル〕と混合す°る。

混合液を室温で６７時間攪拌し、氷水３００−に注ぎ、
攪拌する。沈澱した黄色固体を集め、水洗し一乾燥して
Ｎ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−アラニル−２−（ｐ
−二トロアニリノ）−り、Ｌ−グリシンアリルエステル
１．２２ｆ！（８３，５％）を得る。この生成物を熱塩
化メチレンから再結晶させる。融点１６０〜１６１℃。

元素分析：ＣＩＰ２２Ｎ４０７として、計算値ｃ％）　
：Ｃ、５３，７０；Ｈ、５，４６；Ｎ　、　１３．７９
実測値Ｃ％）：Ｃ，５２，９２；Ｈ，５，５６；Ｎ、１
３．７２この置換生成物０．３６６２（０，０００９モ
ル）および塩化メチレン１０−の混合物を２−エチルへ
キサン酸０．３３Ｐおよび酢酸エチル１０ｍ／の混合液
、ついで、トリフェニルホスフィン０．０４！ｉｌ’お
よびテトラ（トリフェニルホスフィン）パラジウム０．
０４Ｓ’と混合する。２０時間攪拌後、混合液を前記と
同様に処理してＬ−アラニル−２−ＣＰ−ニトロアニリ
ノ）−Ｄ、Ｌ−グリシン３０ｍ９を得る。融点１７４〜
１７５℃Ｃ分解）。

元素分析：Ｃ□、Ｈ工。Ｎ４０５　として、１値（％）
　：Ｃ，４６，８１；Ｈ，５，００；Ｎ、１９．８５実
測値（９６）　：Ｃ，４８，７３；Ｈ，５，４１；Ｎ、
１８．６５実施例１１ 実施例１０で用いたα−アセトキシペプチドＯ１６６ｆ
！を前記と同様にＰ−ニトロフェノール０．２８７と反
応させて白色固体のＮ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−
アラニル−２−（ｐ−ニトロフェノキシ）−Ｄ、Ｌ−グ
リシンアリルエステル０．１６７を得る。融点１２１〜
１２２℃。

実施例１０の水素添加交換方法を用いて脱保護してわず
かに非保護出発物質を含むし一アラニルー２−（ｐ−ニ
トロフェノキシ）−Ｄ、Ｌ−グリシンを得る。融点１０
５〜１０８℃。

実施例１２ ５−（ヒドラジノスルホニル）−１，３−ベンゼンジカ
ルボン酸０．２６Ｆ’（０，００１モル）−Ｎ−カルボ
ベンゾキシ−Ｌ−アラニル−２−アセト牛シーＤ、Ｌ−
グリシンベンジルエステル０．４３Ｆ（０，００１モル
）および乾燥ジメチルホルムアミド５−の混合液をトリ
エチルアミン０．３　Ｐ　Ｃ０，００３モル〕と混合す
る。混谷液を室温で４時間攪拌する。薄層クロマトグラ
フィー（セルロース、塩化メチレン−メタノール−ギ酸
（９７：３：３）〕は出発物質が消失し、新しいスポッ
トが現われることを示す。

ポンプで揮発性成分を除去する。残液を稀塩酸で処理す
る。分離した油を酢酸エチルにとる。抽出液を合し、真
空下で蒸発させてＮ−カルボクンゾキシーＬ−アラニル
−２−（３，５−ジカルボキシフェニルスルホヒドラジ
ノ）’−Ｄ、Ｌ−グリシンベンジルエステルのガラス様
残渣を得る。これは結晶できなかったが、ＮＭＲスペク
トルは一致した。

この物質０．５４９（０，０００８モル）をメタノール
３００ｒｎ１中、還流温度で、シクロヘキセン１゜０−
および１０％パラジウム−炭素０．５４ｆＩと１時間反
応させる。前記と同様に処理して生成物を得る。これは
生物学的スクリーンで活性ではなかったが、さらに分析
したところ、完全（こ脱保護されていなかった。

この物質を実施□例２に従い、より長い反応時間で脱保
護して所望のし一アラニルー２−（３，５−ジカルボキ
シフェニルスルホヒドラジノ）−Ｄ、Ｌ−グリシンを得
る。

実施例１３ Ｎ−カルボベンゾキシ−Ｌ−アラニル−Ｄ、Ｌ−２−ア
セトキシグリシンベンジルエステル２．１４ｇ（５ミリ
モル）、チオフェノール０．５５グ（５ミリモル）、ト
リエチルアミン０．５Ｆ（５ミリモル）およびジメチル
ホルムアミド２５−の混合液を室温で１８時間攪拌する
。混合液を濃縮する。

残渣を酢酸エチルに溶解する。この有機抽出液を水洗（
３Ｘ５０．ｄ）Ｌ、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮し
、；リカゲル上でクロマトグラフィーに付し、分析的に
純粋な油状のＮ−カルボベンゾキシ−し−アラニル−２
−（チオフェニル〕−Ｄ。

Ｌ−グリシンベンジルエステルのジアステレオマー混合
物１．６７を得る。

得られた保護ペプチ）１，４　Ｆ　（２，９ミリモル）
を氷酢酸１０−に溶解し、０℃に冷却する。氷酢酸の飽
和溶液２５ｒｎｌおよび臭化水素酸を保護ペプチＦの冷
酢酸溶液に加える。混合液を３０分間攪拌する。ついで
、ん却浴をはずし、溶液を５時間攪拌する。溶媒を蒸発
させて粘稠固体〔ガム〕を得、塩化メチレンで摩砕して
固化させて吸湿性の臭化水素酸０．４ｆＩ（５４％）を
得る。この固体塩をエタノールに溶解し、得られた溶液
をプロピレンオキサイ）５ｒｎｌで処理して双性イオン
に夏え、５時間後、白色固体のＬ−アラニル−２−（チ
オフェニル）−Ｄ、Ｌ−グリジン０．２２を得る。

逆相変形シリカゲルＣ□８カラムを用いる高圧液０％水
３００−１１０％メタノール−水１ｊ、２０％メタノー
ル−水（１，５／）で段階的に溶出してＬ−ＬおよびＬ
−Ｄジアステレオマーを分離する。

Ｌ−Ｌ異性体の旋光度：〔αｌｕ　　（１−８２０）＝
＋１７０．０°。

元素分析：Ｃ□□Ｈ□４Ｎ２０３Ｓ、１／４Ｈ２０とし
て。

計算値（９６）　：Ｃ，５１，０５；Ｈ，５，６４ｉＮ
、１０．８２実測値（％）：Ｃ，５１，３７ｉＨ，６，
６５；Ｎ、１０．４２＝−２００，８°。

元素分析：Ｃ□、Ｈ□４Ｎ２０３Ｓ−１／４）（２０，
：して、 計算値（９６）　：Ｃ，５１，０５；Ｈ，５，６４；Ｎ
、１０．８２実測値（９６）　：Ｃ，５１，１１；Ｈ，
５，６５；Ｎ、１０．２５実施例１４ 実施例１３で用いたα−アセトキシペ材チド５リエチル
アミン５ミリモルを用いて２．４−ジクロロチオフエノ
ール５ミリ 保護ペプチドを得る。

臭化水素酸、酢酸を用い、前記と同様にカルボベンゾキ
シおよびベンジル保護基を脱離させて所望のペプチドの
臭化水素酸塩を得、プロピレンオキサイドの処理により
双性イオンに変える。実施例１３と同様ＧこＬ−アラニ
ル−２−（　２．４−ジクロロチオフェニル）−Ｄ，Ｌ
−グリシンの異性体を分離する。

実施例１５ 前記と同様に、実施例１３のαーアセトキシペプチ１″
５ミリモル、４−アセドア安トチオフエノール５ミリモ
ル、トリエチルアミン５ミリモルおよびジメチルホルム
アミ）２５ｒｎ１を反応させ、得られた保護ベプチＦを
脱保護する。得られたジアステレオマー混合物を前記と
同様に高圧液体クロマトグラフィーを用いて分離し，Ｌ
−アラニル−２−（４−アセトアミドチオフェニル）−
Ｄ，Ｌ−グリシンを得る。

実施例１６ αーアセトキシペプチＶ５ミリモル、エチルメルカプタ
ン５ミリモル、トリエチルアミン５ミリモルおよびジメ
チルホルムアミ）２５−を前記と同様に反応させる。得
られた保護ペプチＶを前記のように酢酸中、臭化水素酸
で処理し、Ｌ−アラニル−２−（チオエチル）−Ｄ，Ｌ
−グリシンの臭化水素酸塩を得、これをプロピレンオキ
サイＦで処理して双性イオンに変える。このり、Ｌ−ジ
アステレオマー混合物を実施例１３と同様に分離する。

ブチルメルカプタン５ミリモルを用いてＬ−ア５＝ｋ　
−　２　−　（　＋オ’ｆｆ＆　）　−Ｄ，Ｌ−ｆ　１
７　？＞＠　　　　□・・。

得る。ベンジルメルカプタン５ミリモルを用いてＬ−ア
ラニル−２−（チオベンジル）−Ｄ，Ｌ−グリシンを得
る．Ｎ−カルボベンゾキシ−３−アミノプロピルメルカ
プタン５ミリモルを用い、Ｌーア子ニル−２−（３−ア
ミノプロピルチオ）−り。

Ｌ−グリシンを得る。

実施例１７ Ｎ−カルボベンゾキシ−し−アラニル−Ｄ，Ｌ　−２−
アセトキシグリシンベンジルエステル４，２８ｙ〔１０
ミリモル）−フェノール０．９４ｙ（１０ミリモル）、
トリエチルアミン１（Ｈ’（１０ミリモル）およびジメ
チルホルムアミ＆：３５−の混合液を室温で１８時間攪
拌する。混合液を濃縮する。

残渣を酢酸エチルに溶解し、水洗（３Ｘ１　００ｄ）し
、硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発させて粗製のし一ア
ラニルー２−（フェノキシ）−Ｄ，Ｌ−グリシンのエス
テル誘導体を得る。シリカゲルカラム上で中圧液体クロ
マトグラフィーに付し、塩化メチレン３００−および１
０％メタノール−塩化メチレン１１で溶出させて精製す
る。

実施例１３と同様に精製した該り，Ｌ−異性体混合物０
．７　５　ｆ　（　１．５ミリモル〕を加熱しながらメ
タノール５０ｆｎｌに溶解し、１０％パラジウム−炭素
０．４１を加える。この混合液をパー水素添加装置を用
い、合計８．５時間水素添加する。触媒をＦ去する。Ｆ
液を蒸発させる。残液を水に溶解し、濾過し、凍結乾燥
してＬ−アラニル−２−（フェノキシ）−Ｄ，Ｌ−グリ
シンのジアステレオマー混合物０．２６Ｆ（７３％）を
得る。

逆相変形シリカゲルＣ□８カラムを用いる高圧液体り″
ロマトグラフイー（ＨＰ　ＬＣ　）に付し、１００％水
３００ｍ１，１０％メタノール−水ＩＩ！、２０％メタ
ノール−水１１で溶出してＬ−ＬおよびＬ−Ｄ異性体を
分離する。

Ｌ・Ｌ−異性体の旋光度：〔α］　　　（　１　、８２
０）＝−６１．８°。

元素分析：Ｃ１１Ｈ１４Ｎ２０４・３／４Ｈ　Ｏ　とし
て、計算値（％）：Ｃ．５２．４７；Ｈ．５．９６；Ｎ
．１１．１３実測値閥）：Ｃ．５２．７６ｉＨ．５．７
７ｉＮ．１１．３０Ｌ，Ｄ−異性体の旋光度：〔α鑞５
（ｉ，Ｈ２Ｏ．）＝＋５４．９°。

元素分析：Ｃ１１Ｈ１４Ｎ２０４・３／４Ｈ２０として
。

計算値Ｃ％）　：　Ｃ，５２，４７ｉＨ，５，９６；Ｎ
、１１．１３実測値圀）：Ｃ，５２，７２ｉＨ，５，６
２；Ｎ　、１１．１０同様に、２．４−ジクロロフェノ
ール１５ミリモルヲ用いてＬ−アラニル−２−（２，４
−ジクロロフェノキシ）−Ｄ、Ｌ−グリシンを、また、
４−（Ｎ−カルボキシ−２−アミノエチル）フェノール
を用いてＬ−アラニル−２−［４−（２−アミノエチル
）フェノキシ）−Ｄ、Ｌ−グリシンを得る。

実施例１８ アラニンベン、ジルエステル塩酸塩７．６３　Ｐ　（３
５，５ミＩノモル）、Ｎ−エチルモルホリン４．０８９
（３５，５ミリモル）およびジメチルホルムアミド１５
０−の混合液を０℃に冷却する。この混合液にＮ−カル
ボベンゾキシ−し−アラニル−Ｄ、Ｌ　−２−ヒｒロキ
シグリシン１０．５グ（３５，５ミリモル〕、ヒｒ口キ
シベンゾトリアゾール４．７９ＰＣ３５，５ミリモル）
およびジシクロへキシル力ルボジイミに８．０４　ｆ’
Ｃ３９，１ミ１１−ｔニル〕ヲ７１ｃＩＬル。

反応混合液を０１℃で４５分間、ついで、室温で１５分
間攪拌し−この粗反応混合液を許過し、濃縮する。残渣
を酢酸エチル５００−に溶解し、稲束炭酸ナトリウム溶
液（３Ｘ１０゜０ｒｎｌ）、１０％クエン酸溶液（３Ｘ
１００ｔ＋ｄ）、水（３Ｘ１００ｍ／）、飽和塩化す）
Ｕラム溶液（３Ｘ１０Ｄｉ）で洗浄し、硫酸マグネシウ
ムで乾燥する。溶媒を蒸発させて白色固体を得、アセト
ン−ヘキサン混液（２：１）から再結晶させてＮ−カル
ボベンゾキシ−Ｌ−アラニル−Ｄ、Ｌ−２−ヒＦロキシ
グリシルーＬ−アラニンベンジルエステル１６．３Ｓ’
（１００％）を得る。

Ｎ−カルボベンゾキシ−し−アラニル−Ｄ、Ｌ−２−ヒ
ＶロキシグリシルーＬ−アラニンベンジルエステル１．
ＯＬｙ（２，１９ミリモル）を無水酢酸２５ｒｎ！で処
理し、氷水浴中で〜０℃に冷却する。ついで、ピリジン
２５ｍ１を加え、反応混合液を５℃で１５時間保持する
。反応混合液を濃縮する。得られた残渣をエチルニー゛
チルー石油エーテル（１：ｌ〕で摩砕し、濾過し、乾燥
してＮ−カルボベンゾキシ−Ｌ−アラニル−Ｄ、Ｌ−２
−アセトキシグリシル−Ｌ−アラニンベンジルエステル
０．８２２〔７５％）を得る。シリカゲル薄層クロマト
グラフィー（塩化メチレン−メタノール（９５：　５）
）Ｒ４：０．６４゜１Ｈおよび１３ＣＮＭＲスペクトノ
１造と一致した。

△ Ｎ−カルボベンゾキシ−し−アラニル−Ｄ、Ｌ−２−ア
セトキシグリシル−し−アラニンベンジルエステル２．
Ｏｙ　（４，ｔＪミリモル〕、トリメチオフリン３．５
ｙ（１２ミリモル）およびジメチルホルムアミド５０−
の混合液を１時間攪拌する。混合液を濃縮する。残渣を
酢酸エチル４００−に溶解し、水（３Ｘ７５ｍ／）およ
び食塩水７５ｍｊで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し
、濃縮する。残渣をクロマトグラフィーに付し一泡状固
体のＮ−カルボベンゾキシ−し−アラニル−２−［［４
−アミノ−５−［（３，４，５−）リメトキシフェニル
］メチル］ピリミジン−２−イルコアミノ）−Ｄ、Ｌ−
グリシル−し−アラニンベンジルエステル１．９５Ｐ（
６７％）を得る。ＮＭＲおよびマススペクトル分析は構
造と一致した。

この保護ペプチＩ’０．７６９　（１，０４モル）、１
゜％パラジウムー炭素０．３７９およびメタノール１０
０−の混合液をパー装置中、５０ｐｓｉで１４時間水素
添加する。触媒を沢去する。Ｆ液を濃縮し、水に溶解し
、凍結乾燥してＬ−アラニル−２−〔〔４−アミノ−５
−（（３，４，５−トリメトキシフェニル〕メチル〕ピ
リミジン−２−イル〕アミノ］−Ｄ、Ｌ−グリシル−Ｌ
−アラニン０．４８！９を得る。高速中圧クロマトグラ
フィーにより分析的に純粋なジアステレオマー混合物を
得る。この混合物を注意深くクロマトグラフィーに付し
、ジアステレオマーを分離する。

Ｌ、Ｌ、Ｌ−異性体の旋光度：〔α〕ｏ（ｌ、Ｒ２０）
＝−２７，０°。

元素分析：Ｃ２２Ｈ３□Ｎ７０７・１−３／４Ｈ２０と
して、 計算値（％）：Ｃ・４９．２０；Ｈ，６，４７；Ｎ、１
８．２５実測値（９６）：Ｃ，４９，１０；Ｈ，６，３
３ｉＮ、１８．１６＝−５８，０°。

元素分析二′Ｃ２２Ｈ３□Ｎ７０□・２Ｈ２０として、
計算値（％）：Ｃ，４８，７９；Ｈ，６，５１ｉＮ、１
８．１０実測値（％）：Ｃ，４８，５４；Ｈ，６，２７
；Ｎ、１８．２４実施例２Ｏ Ｎ−カルボベンゾキシ−し−アラニル−Ｄ、Ｌ　−２−
アセトキシグリシンベンジルエステル２．１４ｙ（５，
０ミリモル）、アニリン０．４６　ｙ（５，０ミリモル
）、トリエチルアミン０．５．０　ｇ（５，０ミリモル
）およびジメチルホルムアミド５０ｒｎｌの混合液を室
温で２時間攪拌する。混合液を濃縮する。

残渣を酢酸エチルに溶解し、水（３Ｘ５０ｍ７）および
食塩水５０ｒｎｌで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し
、濃縮し、シリカゲル上でフラッシュ・クロマトグラフ
ィーに付してＮ−カルボベンゾキシ−１−アラニル−２
−アニリニルーＤ、Ｌ−グリシンベンジルエステル２．
４６Ｐ（１００％）ヲ得ル。

ヘキサン−アセトンから結晶させて分析的に純粋なジア
ステレオマー混合物の試料を得る。

前記で得られた保護ペプチド０．８１１（１，７５ミリ
モル）　、１０．”％パラジウムー炭＝ｏ、４ｙおよび
メタノール１５０ｍ１をパー装置中５９　ｐｓｉで８時
間水素添加する。触媒を泥去する。涙液を濃縮し、水に
溶解し、凍結乾燥してＬ−アラニル−２−丁ニリノーＤ
、Ｌ−グリシンのジアステレオマー混合物０．４０２を
得る。

この物質２００　ｍＩｉ＋を前記と同様に中圧逆相クロ
マトグラフィーにより精製ジアステレオマーに分離する
。

Ｌ、Ｌ異性体の旋光度：〔α丞５（１，Ｈ２Ｏ）　−＋
　７０．０°。

元素分析”　Ｃ１１Ｈ１５Ｎ３０３・　１−１　／２Ｈ
２０として、 計算値（％］：　Ｃ，４９，９９；Ｈ，６，８６；Ｎ、
１５．９６実測値（％ｌ：　Ｃ，４９，９７；Ｈ，６，
５１；Ｎ、１５．９６Ｌ、Ｄ異性体の旋光度：〔α〕乙
５（１，Ｈ２Ｏ）−十３９．９゜ 元素分析：Ｃ，、Ｈ工、Ｎ３０３・１−１／２Ｈ２０と
して、計算値（％ｌ：　Ｃ，４（１９９ｉＨ，６，８６
ｉＮ、１５．９６実測値じｌ：　Ｃ，４９，９３；Ｈ，
６，５１；Ｎ、１６．０６実施例２１ Ｎ−カルボベンゾキシ−し−アラニル−α−アセトキシ
グリシル−Ｌ−アラニンベンジルエステル２．５９　（
５，０ミリモル）、チオフェノール０．５１ｙｈｌ（０
，５５Ｆ、　５．０ミリモル）およびトリエチルアミン
０．５１９（５ミリモル）をジメチルホルムアミド５〇
−中で合する。シリカゲル薄層クロマトグラフィー（塩
化メチレン−メタノール（９５：５））は０．２５時間
後、酢酸塩の消失を示す。

３０分後、反応混合液を濃縮し、酢酸エチル２００−に
溶解し、水（３Ｘ２５ｍＪ）および食塩水２５−で洗浄
し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して淡黄色泡状の
・Ｎ−カルボベンゾキシ−Ｌ−アラニル−Ｄ、Ｌ（α−
５−フェニル）グリシル−し−アラニンベンジルエステ
ル２．３１Ｓ’を得る。ＴＬＣは少しの不純物を示す。

この物質をパーカー・フラッジ、：Ｌ　（Ｂａｋｅｒｆ
ｌａｓｈ）シリカゲルの１．５”×６Ｎカラム上でフラ
ッシュ・クロマトグラフィーに付し、塩化メチレン、つ
いで、塩化メチレン中２９％メタノールで溶出して精製
生成物２．２５１ｉ’（８２％）を得る。

ＩＨＮＭＲ（ＣＤＣｊ！３　）　：　　δ８．０〜７．
０　（ｍ、１５）；　６．２〜５．８　（ｍ、２）　　
ｉ　５．２５　（Ｓ、１）　　ｉ　５．１５（Ｓ　、１
）　；　ｓ、ｔ　Ｏ（Ｓ　、２）　；　４．８〜４．２
　（ｍ、３：）ｉｌ、３（ｔ、６）。

１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣ）３）：δ１７２．２，１７１．
８，１６９．９　、１５５．８．１３６．３　、１３５
．３　、１３４．８　、１３０、ｌＸ１２８．８．１２
８．５．１２８．３．１２８．０．１２７．８，６７．
０，６６．７，５７．６，５０．４，４８．４，１８．
９　、　ｌ　８．２　、　ｌ　８．０゜Ｈ（ＣＨ２Ｃ）
２）：　　３４２０　．３０４０　．２９９０．１７４
０，１６６０，１５００ｃｍ　　０この保護ジアステレ
オマー混合物１．（１（１，８ミリモル）を２０℃で臭
化水素酸飽和酢酸４〇−に加える。反応混合液を室温で
６時間攪拌する。

真空下で揮発性成分を除去する。得られた油をエーテル
で摩砕し、濾過し、エタノール１０ｒｎｌに溶解し、過
剰（３ｍＩりのプロピレンオキサイドで処理し、１６時
間冷蔵する。

得られた固体をＦ取し、アセトンで洗浄し、乾燥し、双
性イオン０．４２　Ｐ゛（７１％）を得る。

前記と同様に、ジアステレオマー混合物ヲＲＰ−ｌ　８
ＭＰＬＣ力ラムニ注うし、水０．５Ｊ、２０％メタノー
ル−水１ノで段階的に溶出してより移動性のＬ−アラニ
ル−Ｌ−（Ｓ−フェニル）グリシル−Ｌ−アラニン７６
Ｆｎｇ（１８％）と、移動性の少ないＤ−異性体を得る
。

Ｌ、　Ｌ、Ｌ−異性体の旋光度：〔α〕計（１，Ｈ２Ｏ
）　−十１０２．９°。

元素分析：Ｃ□４Ｈ□９Ｎ３０４Ｓ弓−１／４Ｈ２０と
して、 計算値（％ｌ二ｃ、４８゜３３；Ｈ，６，２３ｉＮ、１
２．０７実測値（％ｌ：ｃ、４８．０６．Ｈ，５，８１
，Ｎ、１２．５６Ｌ、Ｄ、Ｌ−異性体の旋光度：〔α〕
乙５（１，Ｈ２０）　＝−１５０，６。

元素分析：Ｃ□４Ｈ□９Ｎ３０３Ｓ−１−１／８Ｈ２０
として、計算値（％ｌ：　Ｃ，４８，６４；Ｈ，６，２
０；Ｎ、１２．１５実測値（％）：　Ｃ，４８，０８ｉ
Ｈ，５，８４；Ｎ、１２．７２実施例２２ Ｎ−カルボベンゾキーシーム−アラニル−Ｄ、Ｌ−２−
アセトキシグリシンベンジルエステルｏ、４２８Ｌｉ（
１，０ミリモル）、アルベンダゾール０．２６５ＦＣ１
，０ミリモル）、トリエチルアミン０．１０１ＦＣ５，
０ミリモル）およびジメチルホルムア、°ミド１０−の
混合液を室温で６時間攪拌する。残渣を酢酸エチルに溶
解し、水（ａｘｓＯｍｚ）１よび食塩水５０−で洗浄し
、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮し、塩化メチレンに
再溶解する。少量の不溶性物質を許去し、Ｐ液をシリカ
ゲル上でフラッシュ・クロマトグラフィー（ＭＰ　ＬＣ
）　　に付シ、白色泡状固体０．２５Ｐ（４０％）を得
る。分光分析（Ｈおよび１３ＣＮＭＲ，ＩＲ）はＮ−カ
ルボベンゾキシーＬ−アラニル−２−（アルベンダゾー
ル）−Ｄ、Ｌ−グリシンベンジルエステルの異性体の混
合物と一致した。ＨＰＬＣもこの混合物を示した。

この保護ペプチド混合物０．８０ｆ（１，２６ミＩＪモ
ル）を臭化水素酸飽和酢酸５０ｍ／に加え、室温で６時
間攪拌する。反応混合液をエーテル１ノに注ぎ、許過し
、真空下で乾燥する。得られた固体の臭化水素酸塩を無
水エタノール２０−に溶解し、プロピレンオキサイド２
−と合する。−４℃にゆつくりと冷却して生じた白色固
体を戸数し、真空下で乾燥し、Ｌ−アラニル−１２−（
アルベンダゾール）−Ｄ、Ｌ−グリシン０．２１７Ｆ（
５３％）を得る。

元素分析：Ｃ□７Ｈ２３Ｎ５ｏ５Ｓ・１／２Ｈ２０とシ
テ、計算値（％）：Ｃ，４８，７９ｉＨ，５，７８；Ｎ
、１６．７３実測値（憐：Ｃ，４８，４６；Ｈ，５，５
４ｉＮ、１６．２２実施例２３ 実施例１および２の反応において、代りに化学量論量の
Ｎ−カルボベンゾキシ−Ｌ−フェニルグリシルアミド、
Ｎ−カルボベンゾキシ−し−フェニルアラニルアミドま
たはＮ、Ｎ−ビス−カルボベンゾキシ−し−リジルアミ
ドを用いてＮ−カルボベンゾキシ−Ｌ−フェニルグリシ
ル−２−ヒドロキシ−Ｄ、Ｌ−グリシン、Ｎ−カルボベ
ンゾキシ−し−フェニルアラニル−２−ヒドロキシ−Ｄ
、Ｌ−グリシンまたはＮ、Ｎ−ビスカルボベンゾキシ−
し−リジル−２−ヒドロキシ−Ｄ、Ｌ−グリシンを得る
。

Ｎ−カルボベンゾキシ−し−フェニルグリシル−２−ヒ
ドロキシ−Ｄ、Ｌ−グリシンをピリジン中、化学量論量
の塩化ベンゾイルと反応させて対応する２−ベンゾイル
オキシ化合物を得る。これを実施例２と同様に５−フル
オロウラシルで処理し、パラジウム−炭素およびシクロ
ヘキセンを用いて脱保護してＬ−フェニルグリシル−２
−（５−フルオロウラシル−１−イル）−Ｄ、Ｌ−グリ
シンを得る。

Ｎ−カルボベンゾキシ−Ｌ−フェニルアラニル−２−ヒ
ドロキシ−Ｄ、Ｌ−グリシンをピリジン中でクロロギ酸
エチルと反応させて対応する２−エチルギ酸エステルを
得、これを５−フルオロウラシルと反応させ、脱保護し
てＬ−フェニルアラニル−２−（５−フルオロウラシル
−２−イル）−り。

Ｌ−グリシンを得る。

Ｎ、Ｎ−ビスカルボベンゾキシ−Ｌ−リジル−２−ヒド
ロキシ−Ｄ、Ｌ−グリシンを塩化アセチルおよびピリジ
ンでアシル化し、実施例２と同様に、５−フルオロウラ
シルと反応させ、脱保護してＬ−リジル−２−（５−フ
ルオロウラ４シル−２−イル）−Ｄ、Ｌ−グリシンを得
る。

実施例２４ 実施例５の反応にちいて、Ｎ−カルボベンゾキシアニリ
ンの代りにＮ−カルポベンゾキシロイシンヲ用いてり、
Ｌ−ロイシン−Ｌ−アラニル−２−＠さ く５−フルオロウラシル−１−イル）−Ｄ、Ｌ−グリシ
ンを得る。Ｎ−カルボベンゾキシ−Ｄ、Ｌ−フェニルア
ラニンを代りに用いてり、Ｌ−フェニルアラニル−し−
アラニル−２−（５−フルオロウラシル−１−イル）−
Ｄ、Ｌ−グリシンを得る。代りにＮ−カルボベンゾキシ
−Ｄ、Ｌ−プロリンを２回用いてり、Ｌ−プロリル−Ｄ
、Ｌ−プロリル−Ｌ−アラニル−２−（５−フルオロウ
ラシル−１−イル）−Ｄ、Ｌ−グリシンを得る。Ｎ−カ
ルボベンゾキシ−Ｄ、Ｌ−アラニル−Ｄ、Ｌ−ロイシル
を代すに用いてり、Ｌ−アラニル−Ｄ、Ｌ−口イシル−
Ｌ−アラニル−２−（５−フルオロウラシル−１−イル
）−Ｄ、Ｌ−グリシンを得る。Ｎ−カルボベンゾキシ−
Ｄ、Ｌ−アラニル、、、−〇−セリンを代りに用いて、
Ｄ、Ｌ−アラニル−Ｄ−セリル−し−アラニル−２−（
５−フルオロウラシル−１−イル）−Ｄ、Ｌ−グリシン
を得る。Ｎ−カルボベンゾキシ−Ｄ、Ｌ、−アスパルチ
ル（ベンジルエステル）−Ｄ、Ｌ−スレオニンを代りに
用いてり、Ｌ−アスパルチル−Ｄ、Ｉ−スレオニル−Ｌ
−アラニル−２−（５−フルオロウラシル−１−イル）
−Ｄ、Ｌ−グリシンを得るＮ−カルボベンゾキシ−アラ
ニル−アラニル−アラニンを用いてアラニル−アラニル
−アラニル−ｔ、−７ラニルー２−（５−フルオロウラ
シル−１−イル）−Ｄ、Ｌ−グリシンを得る。

前記した［シンセテイツク・ペプチド（Ｓｙｎｆｈｅｔ
　ｉｃＰｇｐｔｉｄｅｓ　）　Ｊに記載されているよう
な他のアミノ酸またはオリゴペプチドのいずれか、ある
いは、他の生物学的活性弾頭（Ｗ）を用い、本発明の他
の化合物を得る。

実施例２５ 【−ブトキシカルボニルアラニルアミド５Ｌｉ（０，０
２６６モル）、グリオキサル酸ｔ−ブチル（酒石酸Ｅ−
ブチルの酸化により調製）３．９ｆｉ’（０゜０３モル
）およびベンゼン１００ｍ／の混合液を共沸条件下、５
４時間加熱還流して反応を完結させてＮ−ｔ’ブ）キシ
カルボニル− ２−ヒドロ、キシーＤ，Ｌ−グリシン【−ブチルエステ
ルを得、これを、例えば、トリフルオロ酢酸と反応させ
て適宜ｔ−ｂｏｃ基を脱離させて前記と同様に用いる。

生物活性試験 Ｌ−アラニル−２−（５−フルオロウラシル−２−イル
）−Ｌ−グリシンの代表的な真菌および細菌に対する活
性を評価した。

試験方法 Ａ真菌（ジスク拡散法） スミス・クライン・アンド・フレンチ・ラボラトリ−・
カルチャー・コレクションから入手したカンジダ・アル
ビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ　　ａｌｂｉｃａｎｓ）　Ｂ
−３１１およびＢＣ７５９株をトリブチカーゼ・大豆ブ
ロス中、２８℃で７時間培養する。１．５％寒天を含む
この培地を用い、ただ１つの窒素源としてリジンまたは
グルタミン酸塩２００μｇ／−を含有する酵母−炭素ベ
ース培地１ノ中の接種物１−を接種して種平板を調製す
る。

Ｂ真菌（最小阻止濃度（ＭＩＣ）） グルタミン酸ナトリウム２００μ！ｉ！、ろｄを含有す
る酵母−炭素ベース培地中、２培ブロス稀釈試験により
試験化合物の最小阻止濃度を測定する。化合物を２８０
　、ｌ／ｍｌ　〜０．２５μｙ／ｍ！、に稀釈し、同じ
培地中で３７℃、１５時間培養したカンジダ・アルビカ
ンスの懸濁液を試験培地に接種する。

この試験における最終接種物の量は約ＩＱ４ｃｆｕ／−
および１０”Ｃｆｕ／ｍ／である。試験管を３７℃で２
４時間および４８時間培養し、阻止を観察する。

Ｃ細菌（ジスク拡散法） Ａと同様に、ただし、Ｍ−９培地（窒素源としてのアン
モニウムイオンおよび炭素源としてのグルコースを含む
塩基性塩）とイー・コリ（Ｅ、ｃｏｌｉ）を用いる。

試験結果 （１）方法Ａにおけるカンジダ・アルビカンスＬ−アラ
ニル−２−（５−フルオロウラシル−１−イル）−Ｌ−
グリシン μｙ／ｍｔ　　　　　　　　　　　　帯サイズ（馴）１
０００　　　　　　　　　　　　　３０５００　　　　
　　　　　　　　　　　　　　２６２５０　　　　　　
　　　　　　　　　　　　２２１２５　　　　　　　　
　　　　　　　　　　２０６２　　　　　　　　　　　
　　　　　　１６Ｌ−アラニル−２−（５−フルオロウ
ラシル−１−イル）−Ｄ−グリシン μＶ々　　　　　　　　　　帯サイズ（馴）１０００　
　　　　　　　　　　　　　０５００　　　　　　　　
　　　　　０ ２５０　　　　　　　　　　　　　０ １２５　　　　　　　　　　　　　　０６２　　　　　
　　　　　　　　０ これらの結果は本発明の化合物におけるり、Ｌ−配置の
ものの特有の効果を示している （２）方法Ｂにおけるカンジダ・アルビカンスアラニル
−２−（５−フルオロウラシル−２−イル）グリシン　
゛ 株　　　　　　　　　　ＭＩＣ（μ７／−）ＢＣ７５９
１，０６，３１，６＞Ｚｏｏ　　１．セ５アムホテ 株　　　　　５−Ｆｕ　　Ｌ、ＤＬ　　Ｌ、Ｌ　　　Ｌ
、Ｄ　　、、、、ＢＢ３１１　　　４．０　　２５　　
１２．５　　＞１００　１．２５３１５３Ａ　　　１．
０　　２５　　　１２．５　　＞１００　　１．２５こ
れらの結果はり、ＤＬ−および、ことに、Ｌ、Ｌ−ジア
ステレオマーは抗真菌活性を示すが、Ｌ、Ｄ−異性体は
抗真菌活性のないことを示している。

（３）方法Ｃにおけるイー・コリＭ２６２６濃度　　　
　　　　　帯サイズ（ｒｒｔｎ　）ＣＡ’ｉ／ジスク）
訃フルオ　ＦＵ＋２−　　　ＦＵ＋７’　　　２−ＦＵ
−Ｌ−ロウラシル　ＦＵ−アラ　　ラニルア　　アラ、
−レーＬ−（ＦＵ）　　　ニル−Ｌ−ラニン　　　り″
ＩＪシンシンラグリシン　　　　　　　　コレ−アラニ
ン２５．０　　　　　４６　　　　３１　　　　　−　
　　　　　−１２．５　　　　　４１　　　　２６　　
　　４１　　　　　　０６．０　　　　　４０　　　　
２７　　　　４０　　　　　　０３．０　　　　　３８
　　　　２５　　　　３８　　　　　　０１．５　　　
　　３３　　　　２２　　　　３３　　　　　　０この
結果は、活性がプロトラグ自体によるもので、その分解
前の部分によるものでないことを示している。

（４）方法Ｂにおけるカンジダ・アルビカンスＢ−１０ ＭＩＣ（μグ／ｒｎｌ）２４時間 Ｌ−アラニル−２−（５−Ｌ−アラニル−２−（５フル
オロウラシル−２−イ　　−フルオロウラシルー２ル）
−Ｌ−グリシン　　　　　−イル）−Ｄ−グリシン１２
．５　　　　　　　　　　　＞２００（５）試験Ａにお
けるカンジダ・アルビカンス−３１１ アラニル−２−（５−フルオロウラシル−２−イル）グ
リシン 濃度　　５−Ｆｕ　　Ｌ−ＤＬ　　Ｌ−Ｌ　　Ｌ　Ｄ（
μｇ／ジスク　） ２５　　　　　　　　　４４　　　　　２０　　　　　
３０Ｌ　　　　　　０１２．５　　　　　　　４０　　
　　　２０　　　　　２６　　　　　　０６．０　　　
　　　　３０　　　　　２０　　　　　２２　　　　　
　０３．０　　　　　　　３０　　　　　１８　　　　
　２０　　　　　　０１．５　　　　　　　２２　　　
　　１２　　　　　１６　　　　　　　Ｑこれらのデー
タはオリゴペプチド鎖の末端グリシン単位にＬ−配置を
有する異性体の活性を確認している。

（６）水溶液および酵素触媒弾頭放出に対するα−置換
グリシンペプチドの安定性 グリシンのび一位に結合したスルフヒドリル基を含む構
造を有する実施例４および１３のα−置換グリシンペプ
チドは０．２Ｍリン酸塩緩衝液（ｐＨ７，０）中で安定
（１１／２〜５０００分）であることが判明した。酵素
、ロイシンアミノペプチダーゼの添加により、弾頭が放
出された。放出は観察期間中（５分間）にわたって直、
線的割合で保持された。この観察をｐＨ７，５でくり返
した。このｐＨでも、非酵素的弾頭放出に何ら目につく
増加は見られなかったが、酵素的触媒による放出は、再
び、前記の２倍の割合で進行した。この観察はこの酵素
の効力に必要な至適ｐＨを記載した文献と合致する。

これらの観察は、遊離スルフヒドリル基とエルマン試薬
である５、５′−ジチオビス（２−二トロ安息香酸）と
の反応によりつぎのとおり黄色色素を生じさせる比色分
析によって得られた。

反応酸〇 ロイシンアミノペプチダーゼ 黄　　色 分析 実施例４のペプチドを４■／−のレベルでエルマン試薬
を含有する４ｎＭ　ＩＪン酸塩緩衝液（ＰＨ７）に溶解
し、該ペプチドの１ｍＭ溶液を調製する。得られた混合
液を波長４１２０ｍで分光光度計を用いてモニターする
。この溶液１−にブタ腎ロイシシアミノペプチダーゼ（
シグマ社）１００μグを加え、４１２ｎｍで酵素加水分
解を連続的にモニターする。

データ 時間（秒）　　　　　　　リン酸塩緩衝液λ（４１２） ０　　　　　　　　　　　　０．０９０１　　　　　　
　　　　　　０．０９３２　　　　　　　　　　　　０
．０９５（酵素添加） ３　　　　　　　　　　　　０．１０９４　　　　　　
　　　　　　０．１２７５　　　　　　　　　　　　０
．１４２６　　　　　　　　　　　　０．１６１７　　
　　　　　　　　　　０．１８０８　　　　　　　　　
　　　０．１９９反応反応液をペプチド１ｍＭ、エルマ
ン試薬４■／ｍｔ、リン酸塩緩衝液４ｍＭ　（ｐＨ７）
を含有する。

２モル７分

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１ン式： 〔式中、 ｋｌは炭素数１〜４の低級アルキル、フェニル、アミノ
   ブチルまたはベンジル Ｐは水素または該ペプチド鎖のアミノ酸構成員の１〜４
   個の残基単位、 Ｑはヒドロキシまたはアミノ酸の１〜４個の残基単位、 Ｗは求核性の、生物活性薬剤残基、 を意味する〕 で示され、該Ｗ−置換グリシル単位および該α−に単位
   が共にＬまたはり、Ｌ−配置である化合物、その医薬上
   許容される塩またはプロトラグ誘導体。 （２）アミノ酸の配置が全てしてある前記第（１）項の
   化合物。 （３）Ｐが水素、Ｑがヒドロキシである前記第（２）項
   の化合物。 （４）Ｐが水素、１がメチル、ｑがヒドロキシである前
   記第（１）項または第（２）項の化合物。 （５）　Ｐ　カＬ−アラニル、足がメチル、Ｑがヒドロ
   キシ、Ｗが抗微生物剤である前記第（１）項の化合物。 （６）Ｐが水素、Ｑがヒドロキシ、１がメチルおよびＷ
   が５−フルオロウラシル−２−イルである前記第（５）
   項の化合物。 （７）Ｐが水素、Ｑがヒドロキシ　Ｒ１がメチルおよび
   Ｗがベンズイミダゾール駆虫剤である前記第（１）項の
   化合物。 （８）Ｐが水素、Ｑがヒドロキシ、足がメチルおよびＷ
   が炭素数１〜４のアルキルチオまたは（Ｒ３は水素ま、
   たは、炭素数１〜４のアルキル、炭素数１〜４のアルコ
   キシ、シアノ、ハロゲンおよび炭素数１〜４のアルキル
   チオからなる群から選ばれる１または２個の置換基） である前記第（１）項の化合物。 ＋９１　Ｗ　カフェニルチオの、Ｌ−アラニル−Ｌ−に
   ルチオ）グリシンである前記第（８）項の化合物。 αα式： 〔式中、 Ｙはカルボキシ保護基、 ｋｌは炭素数１〜４の低級アルキル、フェニル、Ｚ−Ｎ
   ＨＣ４Ｈ８−またはベンジル、 Ｒ５は塩素、臭素、ヒドロキシまたはアシルオキシ、 Ｚはアミン保護基、 を意味する〕 で示される化合物。　　　・ α１）ｋｌがメチルである前記第１０１項の化合物。 （１２１Ｙがベンジル　Ｒ１がメチル、Ｚがカルボベン
   ゾキシである前記第０α項の化合物。 ０３Ｒ５がアセトキシである前記第（１０１項または第
   （１１１項の化合物。 １４１Ｙがアリル、Ｒ１がメチノ眠Ｚがアリルオキシカ
   ルボニルである前記第００項の化合物。 １１５１　Ｎ−アリルオキシカルボニル−し−アラニル
   −２−アセトキシ−Ｄ、Ｌ−グリシンアリルエステルで
   ある前記第（１０項の化合物。 ＋１６）　Ｎ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−アラニル
   −２−ヒドロキシ−Ｄ、Ｌ−グリシンアリルエステルで
   ある前記第（１０１項の化合物。 （１９Ｎ−カルボベンゾキシ−し−アラニル−２−アセ
   トキシ−Ｄ、Ｌ−グリシンベンジルエステルである前記
   第（１０１項の化合物。 （１８１Ｎ−カルボベンゾキシ−Ｌ−アラニル−２−ヒ
   ドロキシ−Ｄ、Ｌ−グリシンベンジルエステルである前
   記第００項の化合物。 （１９）　Ｎ　−ｔ−ブチ゛ル、オキシカルボニル−Ｌ
   −アラニル−２−アセトキシ−Ｄ、Ｌ−グリシン【−ブ
   チルエステルである前記第０１項の化合物。 ■式： 〔式中、 ｇ’ｃｔ炭素数１〜４の低級アルキル、フェニル、アミ
   ノブチルまたはベンジル、 Ｐは水素または該ペプチド鎖のアミノ酸構成員の１〜４
   個の残基単位、 Ｑはヒドロキシまたはアミノ酸の１〜４個の残基単位、 Ｗは求核性の、抗微生物剤化合物残基、を意味する〕 で示され、該Ｗ−置換グリシル単位および該α−Ｒ１単
   位が共にＬまたはＤＬ−配置である化合物、その医薬上
   許容される塩またはプロトラグ誘導体および担体からな
   る抗微生物剤組成物。 （２１）式： 〔式中、 Ｙはカルボキシ保護基、 ｋ　は塩素、臭素またはアシルオキシ、２はアミノ保護
   基、 を意味する〕 で示される化合物を式： ％式％ 〔式中、Ｘ　バー　０、−１−ｓ−１−ＮＨ−１＝　Ｎ
   ＜、または活性化−ＣＨ，Ｒ２はＸと一緒になって求核
   ＼ 攻撃基となる生物活性薬剤残基を意味する〕で示される
   化合物と反応させ、該保護基を公知の方法で脱離させ、
   所望により、得られた化合物を公知のアミノ酸またはオ
   リゴペプチドと反応させてペプチド鎖を延長し、また、
   所望により、塩誘導体を形成させることを特徴とする式
   ：〔式中、 Ｒ屓炭素数１〜４の低級アルキル、フェニル、アミノブ
   チルまたはベンジル、 Ｐは水素または該ペプチド鎖のアミノ酸構成員の１〜４
   個の残基単位、 Ｑはヒドロキシまたはアミノ酸の１〜４個の残基単位、 Ｗは求核性の、生物活性薬剤残基、 を意味する〕 で示され、該Ｗ−皺換グリシル単位および該α−に１単
   位が共にＬまたはＤ　Ｌ−配置である化合物またはその
   医薬上許容される塩の製法。 （２２１Ｈ−Ｘ−Ｒ２が低級アルキル−５Ｈまたは（ｋ
   は水素、炭素数１〜４のアルキル、炭素数１〜４のアル
   コキシ、シアン、ハロゲンまたは炭素数１〜４のアルキ
   ルチオ） である前記第（２１）項の製法。 （２３１Ｈ−Ｘ−一がチオフェノールである前記第（２
   １）項の製法。 ｅ１４１　Ｒ”がアセトキシである前記第（２１）項〜
   第（２３）項いずれか１つの製法。