JPS5838429B2 - Ｎ−ベンジルオキシカルボニルアスパラギン酸の純化方法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 アルキル基中に１〜４個の炭素原子を有するα−Ｌ−ア
スパルチルーＬ−７エニルアラニンノ低級アルキルエス
テルはシヨ糖の甘味に著しく類似する甘味を呈するので
従って価値あるシヨ糖代用物である。

例えば米国特許第３４９２１３１号明細書を参照された
い。

かようなジペプチドのひとつ、即ちＬ−アスパルチルー
Ｌ−７エニルアラニンメチルエステル（ ａｓｐａｒｔ
ａｍｅ ）はシヨ糖の１００〜２００倍の甘味をもつこ
とが記載されている。

上記のジペプチドエステルはアスパラギン酸誘導体から
有オＵに製造されるがそれにはアミン官能基をペンジル
オキシカルボニル基によって保護し、β一カルボキシ官
能基をベンジルエステル基で保護し、そしてα一カルボ
キシ基をｐ−ニトロフエニルエステル基で．保護するの
である。

該アスハラギン酸誘導体の製造はＳ．ガットマン（ Ｓ
．Ｇｕｔｔｍａｎｎ ： Ｈｅｌｖ ．Ｃｈｉｍ，
Ａｃｔａ， ４ ４、７２１ （１９６１））により記
載されている。

この誘導体をフエニルアラニンエステル例えばＬ−フエ
ニルアラニンメチルエステルと更に反応させて保護され
たジペプチドを製造し、これを水素添加分解して低級ア
ルキルエステル例えばＬ−アスパルチルーＬ−７エニル
アラニンメチルエステルを生成させる。

前記のアスパラギン酸誘導体はＮ一ペンシルオキシカル
ボニルーＬ−７スパラキン酸から製造され得る。

食物中の前記のジペプチド甘味剤の使用に際してはジペ
プチド甘味剤合成の前駆体として用いられるアスパラギ
ン酸誘導体が可及的に純粋であることが要求される。

従って該前駆体は化学合成時に形成された副生物を実質
上含まないことが最も望まれるのである。

アスパラギン酸誘導体の前駆体であるＮ−ペンジルオキ
シカルボニルアスパラギン酸はＬ−アスパラギン酸の水
溶性アルカリ金属塩とペンジルクロロホルメートとの反
応によって通常は製造される。

この反応過程で少量のＮ−ペンジルオキシカルボニルア
スパラギン酸アルカリ金属塩はＬ−アスパラギン酸塩反
応体と反応して僅かな夾雑量の副生物即ちＮ−ペンジル
オキシカルボニルアスパルチルアスパラギン酸を形成す
る。

今や本発明によりこの副生夾雑物即ちＮ−ペンジルオキ
シカルボニルアスパルチルアスパラギン酸はＮ−ペンジ
ルオキシカルボニルアスパラギン酸製品のアルカリ加水
分解によってＮ−ペンジルオキシカルボニルアスパラギ
ン酸製品から除去され得ることが発見された。

特にこの副生物含有アスパラギン酸製品のアルカリ金属
塩をｐＨ少くとも約１０において加水分解することによ
り０．２重量％以下、好ましくは０．１重量％以下のＮ
−ペンジルオキシ力ルボニルアスパルチルアスパラギン
酸副生物を含有するのみのＮ−ペンジルオキシヵルボニ
ルアスパラギン酸を製造し得ることが発見された。

好適態様においては副生物含有アスパラギン酸製品をｐ
Ｈ少くとも１２、例えば１３〜１３．５において温度５
０〜９０℃、例えば６５〜８５℃の下に０．５〜１２時
間例えば１〜４時間かげて加水分解する。

アスパラギン酸とペンジルクロロホルメートトの反応は
文献に記載されている。

例えばベルクマン等の報文及びフーベンーワイルの著書 （ ” Ｃｏｎｃｅｒｎｉｎｇ ａ Ｕｎｉｖｅｒｓ
ａｌ Ｐｒｏｃｅｓｓ ｆｏｒｔｈｅ Ｓｙｎｔ
ｈｅｓｉｓ ｏｆ Ｐｅｐｔｌｄｅｓ ” ｂｙ
ＭａｘＢｅｒｇｍａｎｎ ｅｔ ａｌ１Ｂｅｒｉ
ｃｈｔｅ ｄ，Ｄ，Ｃｈｅｍ，Ｇｅｓｅｌｌｓｃｈａ
ｆｔ ， Ｖｏｌｕｍｅ ６ ５、ｐａｇｅｓ １１
９２−１ ２ ０ １ ． １ １ ９ ７ （ １
９ ３ ２ ） ａｎｄＨｏｕｂｅｎ −Ｗｅｙｌ ，
Ｖｏｌｕｍ ＸＶ ／ Ｉ ， ｐａｇｅ ３ ２１
（１９７４））を参照されたい。

この反応は米国特許第３８０８１９０号明細書実施例１
にも記載されている。

Ｎ−ペンジルオキシカルボニルアスハラキン酸（以後は
Ｚ − Ａ ｓｐと略記）の製造の典型的方法において
はＬ−アスパラギン酸ジアルカリ金属塩水溶液を有する
反応器へペンジルク口ロホルメートを制御されたｐＨ及
び温度条件下に徐々に添加する。

ペンジルクロロホルメートの添加に当り該水溶液のｐＨ
を約７〜１４に変化させ得る。

Ｎ−ペンジルオキシカルボニルアスパルチルアスパラギ
ン酸（以後はＺ − Ａ ｓｐ Ａ ｓｐと略記）副
生物の生成量を減ずると共に所望のＺ −Ａｓｐ製品の
充分な収量を達成するためにｐＨを好ましくは約１０〜
１２、更に好ましくは１０．７５〜１１．７５例えば１
１，５〜１１．７５に保持する。

ｐｍが１１．７５より有意に高《例えば１２〜１３．５
である場合にはペンジルクロロホルメート反応体は有意
の加水分解ヲ起してベンジルアルコールを生成しＺ−Ａ
Ｌｐ製品はコン跡量よりも多い不純物（これはＺ−Ａｓ
ｐよりも極性が低い）を含むことが見出され、これは薄
層クロマトグラフイ（ＴＬＣ）により測定された。

反応が高いｐＨ値即ちｐＨ １ ２〜１３．５の下で行
われたときにもＺ − Ａ ｓｐの収量は減少する。

水溶液のｐＨが１０．７５より有意に低《例えば約７〜
９であるならば有意の量例えば約０．５〜約１６重量％
（Ｚ−Ａｓｐに基づく）のＺ −Ａｓｐ Ａｓｐ並びに
Ｚ−Ａｓｐよりも低い極性及び高い極性の不純物（ＴＬ
Ｃにより測定）が２ −Ａｓ戻梨品中に見出される。

本発明に従って純化されたＺ − Ａ ｓｐ製品は僅か
な夾雑量のＺ−Ａｓｐ Ａｓｐを含むのみである。

ここに記載される方法は１６重量％という多量の２−Ａ
ｓｐ Ａｓｐを含むＺ−Ａｓｐに対して適用可能である
けれども本法はそれよりもかなり低い量のＺ−Ａｓｐ
Ａｓｐを含むＺ − Ａ ｓｐ製品に対して通常は使用
されるがそれはＺ −Ａｓｐ Ａｓｐ生成量の最少化方
法は本質的にぱＺ − Ａ ｓｐ収量の最大化に使用さ
れることが典型的であるからである。

代表的にはＺ−Ａｓｐは５重量％以下例えば１〜２重量
％のＺ−ＡＳｐＡ８ｐを含有する。

通常の場合に０．２又は０．３〜５重量％、例えば０．
２又は０．３〜１或は２重量％のＺ−ＡｓｐＡｓｐを
含有するＺ −Ａｓｐを本方法に従って処理する。

既述のようにＺ −Ａｓｐ Ａｓｐ含有のＺ Ａｓ繞
品のアルカリ金属塩水溶液を、実質的全量の２ −Ａｓ
ｐ Ａｓｐ不純物の加水分解のために充分な時間をかげ
てｐＨ少くとも１０に保持する。

好ましくはｐＨを少くとも１２、更に好ましくは少《と
も１３、例えば１３〜１３．５（最高はｐＨ １ ４
）に保つ。

商業的な適用のために適切な加水分解速度を提供し得る
ヒドロキシルイオン濃度となるように％定のｐＨを選択
せねばならない。

本法の処理によってＺ−Ａｓｐ製品は実質上何らの影響
を受けないことが意外にも見出されたのであったが過剰
量のアルカリ剤の使用は経済上望ましくない。

夾雑物含量のＺ − Ａ Ｓｐ製品の水性スラリに対し
、又はｐＨ １０以下を有する夾雑物含有のＺ −Ａｓ
ｐ製品のアルカリ金属塩水溶液に対し水溶性無機アルカ
リ剤を添加することにより、処理対象の２ 一Ａｓｐ水
溶液の上記のｐＨ値が得られる。

使用されるアルカリ剤としてはアルカリ金属水酸化物例
えば水酸化ナトリウム又は水酸化カリウムが好適である
。

Ｚ−Ａｓｐスラリ又は水溶液に対して添加されるアルカ
リ剤の量は処理時間の間において被処理物の水溶液に所
望のｐＨ値をもたらしそのｐＨ値を維持させるに必要な
量である。

使用アルカリ剤の濃度は臨界的でない。

水酸化ナトリウム又はカリウムの場合にはそれらの２０
〜５０重量％溶液の使用が普通である。

上記の加水分解反応を約２０〜約１００℃の温度の下に
遂行し得る。

好ましい反応温度は５０〜９０℃、更に好ましいのは６
５〜８５℃である。

加水分解反応の進行速度は使用温度と直接に関係する。

けれども温度が上記範囲の上限に近づくとＺ Ａｓｐ
ｆｌ品の分解の傾向が犬となる。

温度２０〜５０℃においては加水分解速度はおそい。

温度約２０℃（室温）以下のとき反応速度は商業上不適
当である。

Ｚ−Ａｓｐアルカリ金属塩水溶液を所望のｐＨ値に保っ
ておく時間の長さは使用の温度とｐＨとに依って変化さ
れる。

一般に使用温度が高い程２ −Ａｓｐ Ａｓｐ副生物
の完全アルカリ加水分解に必要な時間は短《なる。

通常は０．５〜１２時間、更に普通の場合に１〜４時間
が反応時間として使用される。

Ｚ −Ａｓｐ Ａｓｐ副生物の実質的全量の加水分解の
ため即ちＺ−ＡｓｐＡｓｐ含有率０．２重量％以下のＺ
− Ａ ｓｐ製造達成のために通常は上記の時間で充
分である。

小量のＺ −Ａｓｐ Ａｓｐを含むＺ − Ａ ｓｐの
アルカリ加水分解による純化はＺ−ＡｓｐＡｓｐを実質
的に含まないＺ−Ａｓｐ製品の製造を可能とする。

実質的に含まないという用語は回収されたＺ −ＡＳｐ
が０．２重量％以下のＺ−ＡｐｓＡＳｐを含有すること
を意味する。

更に適切には回収されたＺ − Ａ ｓｐが０．１重量
％以下、最も適切には０．０５重量％以下のＺ −Ａｓ
ｐ Ａｓｐを含有することを意味する。

本発明方法に従って製造されたＺ −Ａｓｐ製品は実質
的に純粋な、即ち少くとも９７重量％の２ −Ａｓｐを
含む製品である。

この製品の純度は屡々９８又は９９％よりも高い。

残留する未加水分解のＺ−Ａｓｐ Ａｓｐ及びその他の
有機夾雑物のほがに該Ｚ − Ａ ｓｐ製品は少量の（
約１％を越えない）アルカリ金属塩例えば塩化ナトリウ
ム又は塩化カリウム及び水を含むことがあり得る。

他の有機夾雑物即ち薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣ）で
測定した通りＺ−Ａｓｐよりも小さいか又は大きい極性
をもつ物質類は製品の０．５重量％以下、通常は０．２
重量％以下の測定値で示される。

Ｚ Ａｓ岸品中に残留するアルカリ金属塩量は製品回
収後に例えば水で徹底的に洗浄することで部分的に制御
される。

ここに記載されたアルカリ加水分解処理は２ −Ａｓｐ
製造法に対する追加工程としてＺ−ＡＳｐｉ品に対し又
はその金属塩例えばアルカリ金属塩に対し適用され得る
。

前者の場合の具体化において、Ｚ−Ａｓｐを水でスラリ
化し、生或酸をアルカリ例えば水酸化ナトリウムで滴定
して該酸の可溶性アルカリ金属塩を作る。

生成した水溶液について既述の通りの処理を施す。

使用水量は臨界的でない；げれども該塩の溶媒として、
取扱い容易な反応混合物の形或に役立つのみに充分であ
るべきことが好適である。

Ｚ−Ａｓｐは或程度まで水に溶けるので水を余計に使う
程水使用後に分離される２ −Ａｐｓ製品は損失される
。

後者の場合の具体化においてＺ−Ａｐｓ製品（これは通
常の場合に可溶性アルカリ金属塩である）を生成する反
応過程の後に、反応媒体のｐｍ値はアルカリ剤例えばア
ルカリ金属水酸化物例えば水酸化ナトリウムの添加によ
りアルカリ加水分解に所望されるレベルにまで上昇し本
発明方法が遂行される。

アルカリ加水分解の後に反応混合物を無機酸例えば塩酸
又は硫酸で酸性化してＺ−Ａｐｓが水溶液から析出する
ｐＨにする。

この結晶化製品を常用の固体一液体分別操作例えばｔ過
、遠心分離等により回収する。

回収された湿潤塊をｌ回又は多数回、通常は冷水を用い
て水洗することができる。

水洗製品を適宜の炉内で例えば４０℃で乾燥する。

Ｚ−Ａｓｐ製造に使用されるアスパラギン酸はＤｔ−ｉ
、Ｌ（−１−）又はＤＬ異性体として商業的に入手され
得る。

これらの異性体のいずれのものをも使用し得る。

甘味剤製造に使用するためにはＬ（力異性体が好適であ
る（ＤＬ異性体混合物は比較的に好適でない）がその理
由はＬ型立体異性体が所望の甘味性を呈するらしいこと
にある。

ペンジルクロロホルメートは商業的に入手され得る。

反応混合物中で過剰量又は局在量の未反応のペンジルク
ロロホルメートが存在することのないように実質上化学
量論的な量で徐々に適当な攪拌下に反応混合物へペンジ
ルクロロホルメートを添加する。

反応体相互が密に接触することを促進するために充分に
攪拌せねばならない。

好適態様において反応混合物中に導入されるペンジルク
ロロホルメートの速度は反応混合物中の未反応のペンジ
ルクロロホルメート対アスパラギン酸塩のモル比が０．
２より犬とならないよう、好ましくは０．１５より犬と
ならず最も好ましくは０．１より犬とならないように制
御される。

反応混合物中の未反応ペンジルクロロホルメート量が著
しくなる速度で反応混合物へペンジルクロロホルメート
を添加すると、例えばペンジルクロロホルメートを一度
に全部添加すると、ペンジルクロロホルメートを少量添
加する場合よりも多犬な加水分解が起る。

生成されたベンジルアルコールは酸物質即ち反応混合物
中に存在することのあるカルボン酸含有物質と反応して
エステルを作る。

これらのエステルはＺ −Ａｓｐ製品中の極性の低い夾
雑物（ＴＬＣにより発見されたもの）であると信ぜられ
る。

少くとも約２時間、例えば２〜３時間にわたり反応器ヘ
ベンジルクロロホルメートな徐々に均一に添加すれば反
応混合物中の未反応ペンジルクロロホルメートのアスパ
ラギン酸塩に対するモル比を前記の０．２のレベル以下
に維持するため及び該反応による発熱度を制御するため
に充分である。

下記の諸例はＺ−Ａｓｐの製造例である。

アスパラキン酸アルカリ金属塩水溶液にペンジルクロロ
ホルメートを加える。

該水溶液は該酸の水性スラリへのアルカリ金属水酸化物
の添加により製造され得る。

本明細書及び請求の範囲において用語”アルカリ金属１
゛はナトリウムとカリウムとを意味し包括するつもりで
ある。

反応に所望されるｐＨをもつアスパラギン酸アルカリ金
属塩水溶液を得るためにそのｐＨの水溶液を与えるアル
カリ剤の使用が必要である。

これらのアルカリ剤の例は水酸化ナトリウムと水酸化カ
リウムとである。

アスパラギン酸塩溶液調製に当りアスパラギン酸を水で
スラリ化し、続いて例えば滴定により所望のｐＨに達す
るまでスラリに対しアルカリ金属水酸化物を加える。

但しアルカリ金属水酸化物水溶液に対してアスパラギン
酸を加えることも可能である。

かようにして、アスパラギン酸は中和されて水溶性のア
ルカリ金属塩となる。

この溶液調製のために化学量論酌量よりもやや多いアル
カリ＊＊金属水酸化物即ち水酸化ナトリウム又は水酸化
カリウム（アスパラギン酸１モルに対し水酸化物２モル
）が必要である。

アスパラギン酸溶液製造に使用される水量は臨界的でな
い；げれども過剰量の水は経済上不利益である。

従って取扱い容易な反応混合物を提供するだけの水量を
使用すべきである。

例えばアスパラギン酸１モル当り０．５５ｌの水が適当
であることが見出された。

Ｚ Ａｓ繕品は或程度水に可溶である。

溶解度は溶液の温度と直接に関連する。即ちアスパラギ
ン酸溶液調製用の水が多い程製品から反応混合物の水相
が分別される際の製品の損失が多くなる。

Ｚ −Ａｓｐ （ Ｎ−ペンジルオキシカルボニルアス
パラギン酸）のジナトリウム塩の製造における一般反応
は下記の式によって示される： Ｎ−ペンジルオキシカルボニルアスパラギン酸ナトリウ
ム塩と１モル以上のアスパラギン酸ナトリウム塩との反
応の結果（酸性化の後に）Ｎ−ペンジルオキシカルボニ
ルアスパルテルアスパラギン酸（Ｚ−Ａｓｐ Ａｓｐ
）が望ましからぬ不純物として生成する： Ｚ −Ａｓｐ Ａｓｐの上記式はβ−アミドとして示さ
れているけれども生成されたＺ − Ａ ｓｐ Ａ ｓ
ｐ不純物はα−アミド及びβ−アミドとして共に存在し
やすい傾向をもつ。

反応混合物へのペンジルクロロホルメート添加完了後に
攪拌とアルカリ金属水酸化物の添加とを継続しペンジル
クロロホルメートな完全に反応せしめる。

反応完了までに約０．５〜１時間（ペンシルクロロホル
メート添加速度に依存する）を要する。

完了は反応混合物のｐＨ値の安定化で示される。

ｐＨ値安定化は反応進行に使用されるレベルにおける反
応混合物のｐＨ維持のために反応混合物添加されるアル
カリ金属水酸化物が不必要になった時点において示され
る。

ｐＨ安定化の後に反応混合物のｐＨを約１，５〜約２．
５に下げるために冷却下に反応混合物を酸性化しＺ −
Ａ ｓｐアルカリ金属塩生成物を遊離酸に転化させる
。

使用される酸は例えば塩酸及び硫酸を包含する。

好まし《ぱ塩酸を使用するがそれは反応媒体中にアニオ
ン性物質を導入させないためである。

中和熱補償のために充分に冷却する。

酸性化された反応混合物中のＺ−Ａｓ一品（遊離酸）は
反応混合物から結晶化するのでこれを常用分離手段例え
ばｔ過又は遠心分離により母液から分離する。

回収された白色粒状のＺ −Ａｓｐ製品を水洗してアル
カリ金属塩を除き分解温度以下の温度で乾燥する。

回収された湿潤状態のＺ −Ａｓｐ製品を等量の水（所
望ならば大量の水の使用も可能）で洗い４０℃で真空下
に又は４０℃の空気循環炉内で乾燥することは本質的に
純粋な製品の取得のために充分であることが見出された
。

本発明方法を下記の諸例によって更に詳記するけれども
それは例示のためのみであって多くの変更と変化とを施
し得ることは当業技術者にとって明かであろう。

例■ Ｌ−アスパラギン酸ナトリウム塩とペンジルクロロホル
メートとをｐＨ約１１，３において反応させて製造され
約０．４４重量％のＮ−ペンジルオキシカルボニルアス
パルチルアスパラギン酸を含有する９６．４％Ｎ−ペン
ジルオキシカルボニルアスパラギン酸の７３１２を２０
００ｒｕｌの水道水へ室温下に溶解させた。

この溶液に３００ｍｌの５０％水酸化ナトリウムを徐々
に加えた。

溶液の温度は２２℃から５５℃へｐＨは２．１９から１
１．３へ上昇した。

次にこのアルカリ性溶液を８５℃に加熱した。

加熱当初の２０分間にアルカリ性溶液のｐＨは約９．９
に下降した。

このアルカリ性溶液へ２０ｍｌの５０％水酸化ナトリウ
ムを更に加えてｐＨを上げてｐＨ１０．４２に安定した
と認められるまでこの溶液を３０分間攪拌した。

アルカリ性溶液を８５℃に１時間保持してから８℃に冷
却した。

冷却液のｐＨは１２．１７であった。

この冷却溶液に４ ５ ０ｙｄの濃塩酸を加え、酸性化
溶液を９０分間攪拌すると溶液のｐＨは２．２８であっ
た。

生成沈殿をＦしｃ過ケーキを３００ｍｌの氷水（水道水
から生成）で洗った。

洗浄後のケーキを４０℃の真空炉内で乾燥し６４７１（
回収率８８％）の乾燥製品を得た。

液体クロマトグラフイによりこの乾燥製品を分析したと
ころこれは０．１重量％以下のＮ−ペンジルオキシカル
ボニルアスパルチルアスパラギン酸を含有スル約９７、
２％Ｎ−ペンジルオキシカルボニルアスパラギン酸であ
ることが示された。

例■ 水道水４０Ｑｍｇを有する１ｌ容丸底フラスコに対し約
２７８重量％のＮ−ペンジルオキシカルボニルアスパル
チルアスパラギン酸と約１７．９重量％の水とを含む約
８０％Ｎ−ペンジルオキシカルボニルアスパラギン酸（
例■記載の方法により製造されたもの）の１４６．２Ｐ
を加えた。

Ｚ −Ａｓｐ及びＺ−ＡｓｐＡｓｐの分析は液体クロマ
トグラフイにより、水の分析はカールフイッシャー法に
よった。

従って全量１００％以上となることもあり得る。

この溶液に対し５１．７ＩＩｌｇの５０％水酸化ナトリ
ウムを徐々に加えた。

４８．５ｍｇの水酸化ナトリウムの添加中にアスパラギ
ン酸溶液のｐＨは初めの２．１９から１１．３へ上昇し
、温度は２２℃から約３９℃へ上昇した。

ここで溶液を８５℃に４０分間かげて加熱するとｐＨは
９．７２に降下した。

残りの３．２ｒｒＬｅの水酸化ナトリウムを加えて溶液
を約２％時間攪拌し、この間に温度を８５℃に保った。

最後のｐＨ値は１２．３０であった。濃塩酸７２．４ｒ
ｒｔｌ！の添加によりこのアルカリ性溶液を酸性化して
ｐＨを１．５とし、この酸性化溶液を室温下に一夜攪拌
してから１８．０７７１τの濃塩酸を加えた。

得られた酸性溶液（ｐＨ０．９５）を８℃に冷却して４
．５時間攪拌した。

生成沈殿をｔしてＥ過ケーキを８０ｍｔｆの水道水で洗
い、湿潤ケーキを２４時間６０℃で乾燥すると９９．：
ｌの乾燥物を与えた。

この乾燥製品を分析したところこれは１．０４重ｉ％の
Ｎ−ペンジルオキシカルボニルアスハルチルアスハラキ
ン酸含有の９５．５％Ｎ−ペンジルオキシカルボニルア
スパラギン酸であることが示された。

例■ 温度計、攪拌機、添加用漏斗、凝縮器及びｐＨ検出計を
具えた多口丸底フラスコに対し３ １ ０ｍｌの水と６
６．５？のＬ−アスパラギン酸とを室温下に加えた。

生成スラリを５０％水性水酸化ナトリウムで滴定しｐＨ
検出計とｐＨ測定器とを用いてｐＨを１０．３とした。

得られた溶液を約２０℃に保持しながら８７．８９のペ
ンジルクロロホルメー｝（９８．５％）を２時間かげて
フラスコへ徐々に加えた。

ペンジルクロロホルメート添加の際に２５％水性水酸化
ナトリウムの同時添加によりフラスコ中の溶液のｐＨを
約１０に保持した。

ペンジルクロロホルメートの添加の後に反応混合物を約
３０分間攪拌したがそこでＩ）Ｈは約１０．１で安定し
たように認められた。

反応混合物の一部をフラスコから取出し１０℃に冷やし
ｐＨ１，５となるまで濃塩酸で酸性化した。

生成された結晶性製品をＰ過して回収しｔ過ケーキを等
量の水で洗い、水洗後のケーキを４ ０ ゜Ｃの炉内で
一夜乾燥した。

乾燥製品を液体クロマトグラフイで分析したとこうこの
製品は０．３７重量％のＮ−ペンジルオキシ力ルボニル
アスパルチルアスパラギン酸を含有する９７．６％Ｎ−
ペンジルオキシ力ルボニルアスパラギン酸であることが
示された。

反応容器内に残留する室温下の反応混合物に対しｐＨが
１３．２５となるに至るまで２５％水酸化ナトリウムの
１２．５ｆを加え４時間攪拌した。

フラスコ内混合物を濃塩酸で１時間かかつて酸性化し生
成結晶性沈殿なｔ過回収した。

ｐ過ケーキを等量の水で洗い４０℃の炉内で乾燥した。

乾燥製品（ｓＢ）を液体クロマトグランイで分析したと
ころそれは０．０５重量％以下のＮ−ペンジルオキシ力
ルボニルアスパルチルアスパラギン酸を含み実質的にそ
の全部がＮ−ペンジルオキシカルボニルアスパラギン酸
から成る製品であることが示サレタ。

Ｎ− ペンジルオキシカルボニルアスパラギン酸の全収
率はＬ−アスパラギン酸にもとづき８８％であった。

例■〜■のデータはＮ−ペンジルオキシカルボニルアス
パラギン酸が高アルカリ性ｐＨ値の下で処理可能である
こと、それによって含有僅少量のＮ−ペンジルオキシ力
ルボニルアスパルチルアスパラギン酸を加水分解により
除去し得ることを証明している。

例■のデータはＺ−Ａｓ痺品中の２−Ａｓｐ Ａｓｐ含
有量を更に減ずるためには長時間の加水分解を要するこ
とを示す。

既述の通り２ｙ２時間の加水分解はＺ −Ａｓｐ Ａｓ
ｐ含有率を約２％だけ減ずる。

本発明方法はその或る態様についてのみ特に詳記された
がこの詳記事項は本発明の範囲を限定するものと考えら
れるべきでない。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 僅かな夾雑量のＮ−ペンジルオキシカルボニルアス
   パルチルアスパラギン酸を含有するＮ− ペンジルオキ
   シカルボニルアスパラギン酸の純化方法において、該Ｎ
   −ペンジルオキシカルボニルアスパルチルアスパラギン
   酸の実質的全量を加水分解するのに充分な時間だげｐＨ
   少くとも約１０において温度２０〜１００℃の下に該Ｎ
   −ペンジルオキシカルボニルアスパラギン酸のアルカリ
   金属塩水溶液を加水分解することを特徴とする前記の方
   法。 ２ Ｎ−ペンジルオキシカルボニルアスパラギン酸のア
   ルカリ金属塩水溶液をｐＨ少くともｌ２において加水分
   解することを特徴とする特許請求の範囲第１項に記載の
   方法。 ３ 加水分解温度が約５０〜約９０℃である特許請求の
   範囲第１又は２項に記載の方法。 ４ Ｎ−ペンジルオキシカルボニルアスパルチルアスパ
   ラギン酸の夾雑量が０．２〜５重量％であることを特徴
   とする特許請求の範囲第３項に記載の方法。 ５ 加水分解の際のｐＨ及び温度が夫々少くとも１３及
   び６５〜８５℃であることを特徴とする特許請求の範囲
   第１項に記載の方法。 ６ アルカリ金属塩がナトリウム塩又はカリウム塩であ
   ることを特徴とする特許請求の範囲第１項に記載の方法
   。 ７ 加水分解時間が０．５〜１２時間であることを特徴
   とする特許請求の範囲第１項に記載の方法。 ８ 加水分解時間が１〜４時間であることを特徴とする
   特許請求の範囲第６項に記載の方法。 ９ アルカリ金属塩がナトリウム塩、加水分解時のｐＨ
   が少くとも１２、加水分解温度が５０〜約９０℃及び加
   水分解時間が１〜４時間であることを特徴とする特許請
   求の範囲第１項に記載の方法。 １０ 加水分解後の溶液を塩酸又は硫酸で酸性化し、
   かようにしてＮ−ペンジルオキシカルボニルアスパルチ
   ルアスパラギン酸を実質上含まないＮ−ペンジルオキシ
   力ルボニルアスパラギン酸を生成させることを特徴とす
   る特許請求の範囲第１又は９項に記載の方法。 １１加水分解後のＮ−ペンジルオキシ力ルボニルアスパ
   ラギン酸が０．１重量％以下のＮ〜ペンジルオキシカル
   ボニルアスパルチルアスパラギン酸を含有することを特
   徴とする特許請求の範囲第１０項に記載の方法。 １２ アスパラギン酸アルカリ金属塩のアルカリ性水
   溶液をペンジルクロロホルメートと反応させ、得られた
   反応混合物を酸性化してＮ−ペンジルオキシ力ルボニル
   アスパラギン酸を結晶化させるＮベンジルオキシカルボ
   ニルアスパラギン酸の製造方法において、酸性化前に反
   応混合物をｐＨ少くとも１０において温度２０〜１００
   ℃の下に約０．５〜１２時間かげて加水分解し、この加
   水分解後の反応混合物を酸性化してＮ−ペンジルオキシ
   カルボニルアスパラギン酸を該反応混合物から結晶化さ
   せ、かようにしてＮ−ペンジルオキシ力ルボニルアスパ
   ルチルアスパラギン酸を実質上含まないＮ−ペンジルオ
   キシカルボニルアスハラキン酸を生成させることを特徴
   とする改良された前記の方法。 １３ 加水分解時のｐＨ及び温度が夫々少くとも１２
   及び５０〜９０℃であることを特徴とする特許請求の範
   囲第１２項に記載の方法。 １４ 加水分解時間が１〜４時間であることを特徴と
   する特許請求の範囲第１３項に記載の方法。 １５ 加水分解後の反応混合物の酸性化に塩酸を使用
   することを特徴とする特許請求の範囲第１２項に記載の
   方法。