JPS59184189A - 新規の製薬学的化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は４−デスアセチルインドール−ジヒドロインド
ールアルカロイドの二官能性エステル誘導体に関する・ ピンカロゼア（Ｖｉｎｃａ　ｒｏｓｅａ　）から得られ
るアルカロイドは哺乳類の実験的悪性腫瘍の生成に対し
逆の作用をなす製薬化学的に最も生産的な分野を提供す
るものである。最初は上記植物の葉から抽出され、クロ
マトグラフィで純化されて得られたこれらのアルカロイ
ドの酸物のみが活性であることが見出された。ビンカ植
物の葉から直接得られるこれらの活性な抗腫瘍性アルカ
ロイドはＶＬＢ（ビンブラスチン、ビンカロイコプラス
テン）、ビンクリスチン（ロイロンリスチン）、ロイロ
ジン（ピンロイロジン）、ロイロンジン（ビンロンシン
）、ロイコフオルミン（フォルミルロイロジン）及びデ
オキシＶＬＢ＃Ａ’及び＃　Ｂ　ｔ　（４’−デオキシ
ＶＬＢ及び４′−デオキシロイロンジン）を包含する。

ビンカアルカロイドの化学的変改処理の研究開始が遅か
ったことについていくつかの理由がある。

まず第一にその分子構造が極端に複雑であって分子上の
特異的官能基を、他の官能基へ影響させることなく、変
改させる諸反応の化学者による発見が遅れたことである
。第二に所望の治療化学的諸性質を欠如する二量体アル
カロイドがビン力ロゼアの抽出物から得られ又は製造さ
れ、その構造決定はこれらの不活性化合物が活性アルカ
ロイドのうちのひとつ又は複数のものと構造的に近似し
、異性体であるとさえ結論させるに至ったことである。

従って既知の抗ガン性アルカロイドに２ける僅かな化学
変化は抗腫瘍活性に対し明らかに影響し得るであろうと
考えられたのである。

上記の諸制約の理由により、ビンカロゼアから得られる
インドール−ジヒドロインドールアルカロイドの変改は
分子上の三個の位置：　Ｃ−３、Ｃ−４′及びｃ−４に
のみ集中された。まず考えられるＣ−３位の変改は酸近
の、更に成功的な変改であるが、基礎的なインドール−
ジヒドロインドール構造の変改によりｃ−３力ロゴキサ
ミド誘導体が製造され、それらの大部分は活性抗腫瘍剤
として製造された〔米国特許第４１６６８１０号及びコ
ンラド等の文献（Ｃｏｎｒａｄ　ａｔ　ａｌ、、　Ｊ、
　Ｍｅｄ。

Ｃｈｅｍ、　２２．３９１．１９７９）参照〕。４−７
′ス了セチルＶＬＢ３−カル？キサミド（ｖｉｎｄｅｓ
ｉｎｅ）は腫瘍細胞崩壊剤として欧州の数カ国で現在市
販中である。このものは生殖細胞腫瘍を含む通常の多く
の新生物の他に或種のビンクリスチン−抵抗性白血病の
治療に有効であるといわれる。６−ヒドロキシ及び３−
エステル官能基とインシアネートとの反応によシ対応す
るオキサゾリジンジオン誘導体が生成され、そのうちの
ひとつ即ちＮ−クロロエチル１透導体（ビンシリジン）
は現在治療試験に供されつつある。該オキサゾリジンジ
オン誘導体はミラー及びグトウスキ（Ｍｉｌｌｅｒ　ａ
ｎｄＧｕｔｏｗｓｋｌ　、米国特許　ＲＥ　３０５６０
号、　１９８１年６月３１日再発行）によシ開示されて
いる。

分子上の変改された第２の位置はＣ−４′である。これ
らの変改の多くは６′、　′−アンヒト０誘導体に関し
ていて、その構造に三方法があシ、即ち変改ボロノフス
キ反応［ｍｏｄｉｆｉａｄ　Ｐｏ１ｏｎｏｖｓｋｉｒｅ
ａｃｔｉｏｎ（Ｐｏｔｉｅｒ　ｅｔ　ａｌ＋、　Ｊ、　
Ｃ，Ｓ、Ｃｈｅｍ、　Ｃｏｍｍ、。

６７０．１９７５））によるビンドリンとカタランチン
との結合に基づく方法及びＶＬＢ又はロイロンジンの脱
水反応（Ｇｕｔｏｗｓｋｉ及びＭｉｌｌｅｒ、米国特許
第４０２９６６３号）による方法がある。脱水反応の結
果デルタ３／　、　４／　−アンヒドロ誘導体の他に２
個のエキンー二重結合異性体が生成する。これらの二重
結合のうちのいずれのひとつの官能化についてもエポキ
シド、ジオール等を生成し、これらはＣ−４′のイヒ学
的変改の基礎をなしている。

インドール−ジヒドロインドールの第３位で変改に成功
しているのはＣ−４である。まず第一に上記のビンカア
ルカロイドのすべてに存在するアセトキシ基は加水分解
されると活性抗腫瘍性の４−デスアセチル誘導体を生成
する（　Ｖｉｎｄｅｓｉｎｅ、これはｃ−５カルぎキサ
ミドであって４−デスアセチル誘導体である）。第二に
、ハルグロブ（Ｈａｒｇｒｏｖｅ　、米国特許第３３８
７００１及び３５９２１７５号）は４−デスアセチルＶ
ＬＢ、４−デスアセチルピンクリスチル等の新規の４−
了シル誘導体を製造した。これらの新規誘導体のうちに
４−クロロ了セチルＶＬＢが含まれるがこのものはアミ
ン例えばジメチルアミンと反応して有効な抗ガン剤、即
ちビングリシネート、即ちＮ。

Ｎ−ジメチル−４−グリシニルＶＬＢ’ｉ生ずる。

様々な変改が行われたがライト及びノイス（Ｗｒｉｔｅ
　ａｎｄ　Ｎｅｕｓｓ　、米国特許第４１２２０８２号
）は４−デスアセチルＶＬＢの４−ヒドロキシルヲ酸化
して４−ケト化合物を造り、トンプソン（Ｔｈｏｍｐｓ
ｏｎ　、米国特許第４１９５０２２号）はこのケトンを
４−エビヒドロキシ（４α−ヒドロキシ）誘導体へ還元
したかこの化合物も又抗ガン活性を有する。

インドール−ジヒドロインドール架橋二量体：即ちビス
−アミドによシ３−カルゴキシルを介して架橋している
同じか又は異るアルカロイトモイエティはコンラド及び
ｒルゾン（Ｃｏｎｒａｄ　ａｎｄＧｅｒｚｏｎ、米国特
許第４１９９５０４号）に記載されている。その他の方
法においてはインドールーゾヒドロインドールピンカア
ルカロイド二量体が分子内の他の位置を介して架橋して
ビンカ四量体を生成することはない。

ＶＬ８及びビンクリスチンはタンー臂り質ト接合して放
射能元素使用の免疫定量に有用な物質を生成する。４−
デス了セチルＶＬＢ３−カルデキシ了シト（デスアセチ
ルピングラチノイツクアジド）及び対応するビンクリス
チン化合物はこの目的に使用された：核反応の例示のた
めのコンラド等の文献（Ｃｏｎｒａｄ　ｅｔ　ａｌ、、
　Ｊ、　Ｍｅｄ、　Ｃｈｅｍ、、　２２．３９１．１９
７９：欧州特許、７４１９３５号及び米国特許第４２０
３８９８号）を参照されたい。

本発明は下式Ｉ Ｒ−０−Ｇｏ　−Ｘ−Ｃｏ−Ｚ　　　　　　（１）の化
合物及びその塩を提供する。

但し上式中Ｒ，は二量体化インド−ルーツヒドロインド
ール基であって好ましくは４−アセトキシ又は４−ヒド
ロキシ抗腫瘍性二量体化インドールジヒドロインドール
アルカロイド、から誘導された基であり、該二量体化イ
ンドール−ジヒドロインドール基Ｒは、例えば下式■ 二１ 但し式中Ｒ２けＨ，ＣＨ３又はＣＨＯであり、　Ｒ４と
Ｒ５とが別個に存在している場合にはＲ５はＨであり　
６５及びＲ４のうちのひとつはエチルでおりは他ｄＨ又
はＯＨであり；Ｒ４とＲ５とがそれらに付着する炭素原
子（複数）と共に存在している場合にはオキシラン環を
形成し、そじてＲ３はエチルであり：Ｒ１はＣｏＯＨ％
ｃｏｏｃ１〜３アルキル又はＣＯＲ６であり；Ｒ６はＮ
Ｈ２、ＮＨ−ＣＩ−’ｉアルキル、ＮＨ−ＣＨ２ＣＨ２
Ｃｔ、　　１−ピロリジル、１−ピペリジニル、又ｉｊ
　ＮＨ−ＣＨ２ＣＨ２ＹＣＨ３であってＹはＳ又は０或
はカルボキシ保護基であり；上式１４Ｃ訃いて２は０Ｈ
１ＯＣ１〜３アルキル、ＯＲ％　ＮＨ２、ＮＨＮＩ−１
２，又はカルボキシ保護基（ｚｌ）或はカルざキシ保護
基（ｚ２）であり：Ｘ１ｄＣ１〜４直鎖アルキレン、０
２〜８分枝鎖アルキレン、Ｃ２，４アルケニレン、　Ｃ
３−４フルキニレン、Ｃ３，６シクロアルキレン、フェ
ニレン、ヒドロキシ置換Ｃ１−４アルキレン又は直接結
合である。式Ｉにおいて２がＯＲである場合１ＩＩｃＲ
基は同じか又は異るものであり得る。

式■において２がＯＲ，ＯＨ，ｏ−ｃｊ〜３アルキル、
ＮＨ２又はＮＨＮＨ２である化合物はマウスの移植腫瘍
に対し抗腫瘍性を示す化合物として有用であると共に又
抗咳分裂性をも有する。

＆Ｉにおいて２がカルボキシ活性化（アシル化）基であ
る場合にはそれは化学特にベゾチド化学の技術分野で使
用される公知のいかなる基であってもよい。該基は適業
技術分野で周知であって例えばポダンスキ等の著書［Ｐ
ｅｐｔｌｄｅ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｂｙＭ−Ｂｏｄａ
ｎｓｚｋｙ、　Ｙ、Ｓ、　Ｋｌａｕｓｎｅｒ　ａｎｄ　
Ｍ、Ａ、　０ｎｄｅｔｔｉ＊５ｅｃｏｎｄ　Ｅｄｉｔｉ
ｏｎ　（１９７６）　　Ｊｏｈｎ　Ｗｉｌｅｙ　＆　Ｓ
ｏｎｇ。

ｎｏｔａｂｌｙ　ｐａｇｅｓ　Ｂｓ　ｔｏ　ｉ　３６　
〕中に論ぜられている。アジド（−Ｎｓ）基については
上文中の記号のうち２はノ・ロデン原子例えばシュウ素
、特に塩素、式Ｒ７Ｃ０・０（但しＲ７は脂肪族又は芳
香族残基例えばＣＩ〜３アルキルである）％アルコキシ
碁打ましくはＣｌＮ３アルコキシ又はアリールオキシ基
、メタンスルフオニルオギシ、トシルオキシ又はベンゼ
ンスルフォニルオキシ基、イミダゾリル基又ハＮ−アシ
ルヒドロキシルアミン誘導体残基と結合してもよく１例
えば２はサクシンイミドオキシ。

フタルイミドオキシ又はベンゾトリアゾリルオキシであ
る。

２がカルボキシ保護基であるか又はＲがＣＯＲ６であっ
てＲ６がカルボキシ保護基である場合にはそれはこの目
的に使用される公知のいかなる基であってもよい。この
ことはカルボン酸の官能性を閉塞即ち保護するのに使用
される常用のカルボン酸保護基を意味し、該化合物の他
の官能基に関する反応は遂行され得るのである。かよう
なカルボキシ保護基は加水分解により又は水添分解の方
法により対応するカルボン酸へ容易に分裂し転化される
ことが注目される。カルボン酸エステル保護基の語例は
式ＯＲ７を有する基であって式中Ｒ７は第３級グチル、
ベンジル、４−メトキシベンジル、０２Ｎ６アルカノイ
ルオキシメチル、２−ヨードエチル、ｐ−ニトロベンジ
ル、ヅフェニルメチル（ベンズヒドリル）、フェナシル
％　４　　／Ｓロフエナシル、ジメチルアリル、２．２
．２−）リクロロエチル、トＩＪ（Ｃ，〜３アルキル）
シリル、サクシンイミドメチル及び類似エステル形成性
モイエテイである。その他の公知のカルボキシ保護基は
例えばハスラムの著書（Ｅ、　Ｈａｓ　ｌａｍ　＊　　
’ＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅＧｒｏｕｐｓ　ｉｎ　Ｏｒｇａ
ｎｉｃ　Ｃｈｅｍｉｓ’ｔｒｙ’ｓ　Ｃｈａｐｔｅｒ　
５　）に記載されている基が適当と窮められる筈である
。

上記のカルボキシ活性化基又は保護基の詳細な例は下記
のもの即ちα、ＢｒｂＮ５、イミダゾリル、サクシンイ
ミドオキシ フタイルイミドオキシ ベンゾトリアゾリルオキシ メタンスルフォニルオキシ、トシルオキシ、ベンゼンス
ルフォニルオキシ又ハソのＷ供物、アシル化基（Ｚ’　
）　又ＨＣＣｔ、ＣＨ２Ｏ，Ｃａｒ３ＣＨ２０゜ＣＨ２
１ｃＨ２０、ベンジルオキシ、メチルベンジルオキシ、
ｔ−グチルすキシ、アリルオキシ、メトキシベンジルオ
キシ、ニトロベンジルオキシ、フェナシルオキシ、ニト
ロフェナシルオキシ、メトキシフェナシルオキシ、メチ
ルフェナシルオキシ、ジフェニルメトキシ、トリチルオ
キシ（トリフェニルメトキシ）、トリメチルシリルオキ
シ又は類似のカルボキシ保護１（Ｚ２）’ｉ包含する。

基Ｘの猪例はメチレン、エチレン、ｆロピレン。

ブチレン、ビニル、グロペニレン、！テニレン、１チニ
レン、エチニレン、ヒドロキシエチレン、１．２−ジヒ
ドロキシエチレン、１，２−ジメチルエチレン、１，２
，３．４−テトラヒドキシブチレン、３，４−ジメチル
ブチレン、１．４−シクロヘキシレン％　１．４−フェ
ニレン、１．２−フェニレン、及び類似基を包含する。

好ましくはＸはＣアルキレン＆Ｃアルケニレン、 １〜４　　　　　　　　　　　　　　　　２〜４０２Ｎ
４了ルキニレン、０５Ｎ６シクロアルキレン又はフェニ
レンであって特にＣアルキレン−が好Ｉ〜４ ましい。

本発明の化合物の塩はＲ１がＣ０ＯＨであるか又は２が
ＯＨである場合にｃ−５カルボン酸基のカチオン塩例え
ばナトリウム、カリウム、テトラメチルアンモニウムの
塩及び類似塩を包含する。又製薬学士許容可能の付加塩
は無毒性無機酸例えば塩ａ２．硝酸、リン酸、硫酸、シ
ュウ化水素酸、ヨウ化水素酸、亜リン酸及び類似酸並び
に無毒性有機酸例えば脂肪族モノ又はジカル？ン酸、フ
ェニル置換アルカン酸、ヒドロキシアルカン酸及ヒヒド
ロキシアルカンジオイツク酸、芳香族酸、脂肪族及び芳
香族のスルフォン酸等から導かれる塩を包含する。即ち
製薬学、上許容可能塩＃ｉ硫酸塩、ピロ＠酸塩１型＠酸
塩、亜硫酸塩、重亜＠酸塩、硝酸塩、リン酸塩、リン酸
−水素塩、リン酸二水素塩、メタリン酸塩、ピロリン酸
塩、塩化物、シュウ化物、ヨウ化物、酢酸塩、プロピオ
ン酸塩、デカン酸塩、カプリル酸塩、アクリル酸塩、義
酸塩、イソグチレート、カプレート、ヘプタン酸塩、プ
ロピオレート、オキザレート、マロネート、サクシネー
ト、スベレート、セバケート、フマレート、マレエート
、マンプレート、ブチン−１，４−ジオエート、ヘキシ
ン−１，６−ノオエート、ベンゾエート、クロロベンゾ
エート、メチルベンゾエートｍ　　、７二）ｏベンゾエ
ート、ヒドロキシベンツエート、メトキシベンゾエート
、フタレート、テレフタレート、ベンゼンスルフォネー
ト、トルエンスルフォネート、クロロベンゼンスルフォ
ネート、キシレンスルフォネ−ト、フェニルアセテート
、フェニルノロピオネ−）１１　フェニルブチレート、
サイトレート、ラクテート、β−ヒドロキシグチレート
、グリコレート、マレート、ナフタリｙ−１−／Ｃル７
オネート、ナフタリン−２−スルフォネート、メシレー
ト及び類似塩を包含する。

本発明の化合物の合成は段階的方式で遂行され得る。ま
ず最初にハルグローブ（Ｈａｒｇｒｏｖｅ・　米。

国特許第３！１９２１７５号）の方法により製造された
弐ＲＯＨの４−デスアセチルインドール−ジヒドロイン
ドールを下式 （但し式中Ｘは前定義の通力である） のカルボン酸無水物によってアシル化して式！（但し２
はＯＨであり、Ｒ及びＸは前記の意味を有する）の化合
物を生成させる。２がＯ−Ｃ，〜３アルキルである化合
物ＦｉＣ，〜３アルカノールを用い常用のエステル化処
理によシ半−酸即ちＲ−Ｃ０−Ｘ　−Ｃ０ＯＨから製造
される。アルカノールとしてメタノールが好適であるが
その理由は式ＲＯＨの出発原料化合物中に存在する他の
エステル基（複数）はメチルエステル（複数）であるの
でエステル基交換の問題が大きく回避される点にある。

式ＩＣ但しＲ１はＣ０ＯＨ又はＣ０Ｒ６であってＲ６＃
ｉカルボキシ保護基である）の化合物の製造のためにイ
ンドール−ジヒドロインドールと無水コハク酸又は類似
酸とを反応させる場合にｃ−５エステル基並びにＣ−４
エステル基を最初に加水分解して例ｔ＃ｆｖＬ日から４
−デスアセチルビンプラスチノイツク酸を生成させる（
米国特許第４０１２３９０号参照）。次にＣ−５カルボ
キシル基を土窯定義のようにカルボキシ保護基で保膜せ
ねばならない。このｃ−３力ルボキシ保護誘導体はＣ−
４に自由ヒドロキシル基を持つので土窯記載のようにし
て無水物と反応させられる。次に生成化合物を化学的に
処理して式Ｉ（但しｚＨアシル化モモイエティある）の
化合物を生ずる。但し反応条件は中性又は塩基性であり
、かようにしてｃ−３カルボキシ保護基の離脱を避ける
。所望の最終基即ち２を適所に存在させた後にＣ−３位
のカルボキシ保護基を除去して式ＩＣ但しＲ１はＣ０Ｏ
Ｈである）に従う化合物を生成させ得る。

別法として下式 ％式％ の化合物を、アシル化剤として半エステル、半酸塩化物
即ちＣｔ−ｃｏ−ｘ−ｃｏ−ｏ−ｃ、−３８，１ノｋｙ
［）使用ニョ汎直接製造し得る。その他のアシル化基を
ｃｔ　の代り　　□に使用し得る。アシル化モイエティ
は一般に下式２式％ （但しＸは前定義の通力であり、ｚｌはＣＬ　Ｓ　Ｂｒ
、Ｎ３、サクシンイミドオキ゛シ、フタルイミドオキシ
、メタンスルフォニルオキシ、トシルオキシ、フェニル
スルフォニルオキシ、ペンゾトリアソリルオキシ又はそ
の他のアシル化モイエティである）で表わされ得る。更
に別法として下式 ２式％ （但シｚ２ハカルゴキシ保護基である）の了シル化剤を
使用して式Ｒ−０−ＣＯ−Ｘ−ＣＯ−Ｚ　　の化合物を
生じさせ得る。

式Ｉ（但しｚＦｉＮＨ２又はＮＨＮＨ２テある）の化合
物はアンモニア又はヒドラジンを用いて下式２式％ （但し２は好ましくはＣｔ　である）の？活性化Ｉヒン
力タイマー（Ｒ基）４−ヘミ酸を形成させることによっ
て環造される。Ｎ−メチルモルフォリン及びアルキルク
ロロフォルメートの順次使用の処理によシ混□合無水物
に半−酸から生成される。

該混合無水物とアルコール性アンモニア又はヒドラジン
との反応により所望の半一アミドが生成される。Ｒ′が
Ｃ０ＯＨで２がＮＨ２又はＮＨＮＨ２テある化合物を羨
造するためにはＲ′のカルツキシル基を先ず保護してお
いてから標準的基礎的反応（複数）を適用し得る。

２がＯＲであってＲが式■で表わされるインドール−ジ
ヒドロインドール基である化合物は下式％式％ のアシル化モイエテイを作り、このものと１同じか又は
異る４−デスアセチルインド−ルーツヒドロインドール
アルカロイド、ＲＯＭ　’とを反応させることによって
製造される。但しＣ−３の遊離カルツキシル基を先ず保
護しておくのであって該保護基は反応完了後に任意に除
去される。

上記諸化合物中の数種のものを製造するための別法はカ
ッリング剤例えばカルぎジイミド、例えばＤＤＣ（ジシ
クロへキシルカル？ジイミド）又［ＥＥＤＱ（Ｎ−エト
キシカルぎニル−２−エトキシ−１，２−ジヒドロキノ
リン〕等及び半−酸ｌ−１０−Ｃｏ−Ｘ−Ｃｏ−Ｚ２ （但シ式中２２　　はカルボキシ保護基である）を無水
反応条件下で使用することを包含する。例えばｏｃｃ存
在下［ＲＯＨ及びＨＯ−Ｇｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＯＺ
２から４−サクシンオキシ誘導体が製造され、これから
下式 ％式％ の化合物が製造される。

次にカルボキシ保護基を離脱させて得られた遊離酸トヒ
ドロキシフタルイミド、ヒドロキンベンゾトリアゾール
、ヒドロキシサクシンイミド、ノーロダン化剤、アジド
又は類似物とを反応させることにより下式 ％式％ （但し式中２３　　はサクシンイミドオキシ、ベンゾト
リ了ゾリルオキシ、フタルイミドオキシ、Ｃｔ。

Ｂｒ　、　Ｎ３等である）の反応性アシル化中間体を生
成させる。次いでこれらの中間体と第二の、同じか又は
異るインドール−ジヒドロインドール、ＲＯＨｌと全反
応させることにより架橋されたビンカテトラマーを生成
させるか又は免疫グロブリン或は免疫グロブリン断片（
フラグメント）と反応させることにより例えは放射性元
素標識免疫定量法に有用な接合体を形成させるかもしく
Ｆｉポリクロナル（多クローン性）抗体又はモノクロナ
ル（単クローン性）抗体と反応させることにより抗ガン
剤を生成させることができる。更にこれらのＩ活性化さ
れたｌ誘導体と低級アルコールとを反応させることによ
シ下式 ％式％ の半一エステルを生成させ得る。

製造されるこの化合物Ｙ：Ｉ）ｘがヒドロキシ、ノヒド
ロキシ又はテトラヒドロキシＣ１，４アルキレンである
場合、即ちリンゴ酸、酒石酸又は糖酸から誘導される結
合基である場合には、保護基例えばピラニル基ヲ用いて
ヒドロキシ又はヒドロキシル（複数）を保護する必要が
ある。トリアルキルシリル基例えばトリメチルシリル基
も又使用され得る。隣位ジヒドロキシ化合物例えば酒石
酸の場合にはアセタル即ちイソゾロビリデン又はシクロ
ヒエオキシリデン（ｃｙｃｌｏｈｙｅｏｘｙｌｉｄｅｎ
ｅ　）誘導体を使用し得る。

Ｘが直接結合基（この結合基は修酸から生成される）で
ある場合にはオキザリルクロリドを使用し得ないがその
理由はへミオキデレートと３−ヒドロキシルとが環化す
るからである。けれどもオキザレート半エステル又は式
ＣＡ−ＣＯ−ＣＯ−Ｚ２の１６酸誘導体を使用し得るし
、アシル化モイエテイ即ちＲ−ＣＯ−ＣＯ−Ｚ　’　　
への同時的転化の際にエステルの加水分解即ちカル・げ
キシ保護基の離脱が起る・一般［ａ造Ｒ−ｏ−ｃｏ−ｘ
−ｃｏ−ｚｌ（但（、ｚｌＨｃｚ。

Ｓｒ　、　トシルオキシ、ベンゼンスルフォニルオキシ
、メタンスルフォニルオキシ％Ｎ３　　又はその他のア
シル化モイエテイである）の本発明による化合物は本発
明の化合物（但しＲ及び２は共にインドール−ジヒドロ
インドールアルカロイド基を含む）の製造に有用である
のみならず上記の通り免疫グロブリン例えばポリクロナ
ル抗体及びモノクロナル抗体とのカプリングに有用であ
り、かようにして放射性元素標識免疫定量の目的のため
の適切な接合体を提供するか又は抗ガン性を具える接合
体を提供する。

これらの接合体１ｄ　４造Ｒ−０−Ｃｏ−Ｘ−Ｃｏ−Ｚ
ｌ　　（７）化合物とポリクロナル抗体又はモノクロナ
ル抗体とを常用の反応中性例えば水性媒体中５〜２５Ｃ
２例えば室温で、及びｐＨ７，５〜９．５、好ましくは
８．０〜９．０の下で反応させることにょシ製造される
。この反応の結果免疫グロブリン分子の遊離アミノ基例
えばリジン残基から誘導されたアミノ基への１個又は傾
数個のビンカ残基の共有結合による付着が起る。付着す
る残基の数は反応体の濃度及び反応時間に依存するが通
虐の場合に例えば３〜１４又は２０である。

例えば反応遂行に際し適宜の溶剤例えばジオキサンの中
で式Ｒ−０−ＣＯ−Ｘ−ＧＯ−２１の化合物の溶液を例
えば０．３４Ｍホウ酸塩緩衝液中でｐＨ８，６において
緩衝化免疫グロブリン溶液に対して徐々に滴下する。接
合体をｌｒ’　ｘ　ｆ５過により単離し飽和硫酸アンモ
ニウム溶液中に貯蔵するがこの接合物は緩衝溶液例えば
リン酸塩緩衝化・貴塩液を用いｐＨ７，４で透析するこ
とにより容易に溶液中へ戻される。又は接合体を冷凍庫
内で４℃に貯蔵し或は例えば−２０℃に凍結させ得る。

これらの接合体を製造するだめの好適材料はヒト又は動
物の腫瘍に関係する下記の抗原に対するモノクロナル抗
体或はポリクロナル抗体であって、該抗原は例えば以下
の通りである： （１）発ガン抗原で免疫させたヤギ又はヒツジから得ら
れるＩｇ： （１１）　　ウサギの抗急性リンパ芽球白血病血清から
得られるＩｇ： （ｍ）　　急性リン・ぐ芽球白血病、急性骨髄芽球白血
病、１蔓性リン・そ芽球白血病及び慢性顆粒球白血病に
対して発現する各種霊長類動物の抗血清から得られるＩ
ｇ： （１ｖ）肺癌物質で免疫させたヤギ又はヒツジから得ら
れる■ｇ： （ｖ）抗−ヒト結腸直腸ガン抗体を分泌する雑種系マウ
スから得られるモノクロナル■ｇ：（ｖＤ　　抗−ヒト
黒色腫抗体を分泌する雑種系マウスから得られるモノク
ロナル１ｇ： （ｖｉ−ヒト白血病細胞と反応する抗体を分泌する雑種
系マウスから得られるモノクロナル■ｇ：（ｖｉｉＤ　
　ヒト神経芽細胞と反応する抗体を分泌する雑種系マウ
スから得られるモノクロナルＩｇ：（×−ヒト乳ガレ抗
原と反応する抗体を分泌する雑棟系マウスから得られる
モノクロナルＩｇ：（沁　ヒト卵巣ガン細胞と反応する
抗体を分泌する雑種系マウスから得られるモノクロナル
１鼠；０沁　ヒト骨肉腫細胞と反応する抗体を分泌する
維［系マウスから得られるモノクロナル１已：仙〉　肺
ガンに対する抗体を分泌する雑煉系から得られるモノク
ロナルＩｇ。

本発明の化合物の製造に有用な４−ｆスアセチルインド
ールージヒドロインドールアルカロイト及びＲＯＨｉ出
発原料として製造される本発明の化合物は下記の二元構
造式■ １　　　　　　　　　　（履） １ 〔但し式中Ｒ２はＨ，ＣＨ３又はＣＨＯであＪ）　：　
Ｒ４と　　　□Ｒ５とが別個に存在している場合にはＲ
５はＨであシ、Ｒ３及びＲ４のうちのひとつはエチルで
あつ　　　□て他はＨ又はＯＨであり：Ｒ４とＲ５とが
それらに付着する炭素原子（ａｌｌ＞と共に存在してい
る場合にはオキシラン環を形成し、そしてＲ３はエチル
であり；Ｒ１はＣ０ＯＨ、Ｃ００Ｃ，〜３　アルキル又
はＣＯＲ６であシ；Ｒ６はＮＨ２、ＮＨ−Ｃ１，、、、
アルキル、ＮＨ−ＣＨ２ＣＨ，２Ｃｔ、　　１−ピロリ
ジル、１−ピペリジニル、父はＮ）４−Ｃｔ−１２ＣＨ
２ＹＣ）−１３であってＹはＳ又Ｉ／′ｉｏである〕に
よって示され得る。

１、。

上式においてＲがＣｏ−０ＣＨ３，Ｒがメチル、Ｒ３が
゛ヒドロキシル、Ｒ４がエチルであり、　Ｒ５がＨであ
れば４−デスアセチルＶＬＢ（４−デス了セチルビン！
ラスチン）が表わされる；Ｒ１がＣＯ−ＯＣＨ！Ｓ　、
　Ｒ２がフォルミル、　Ｒ５がヒドロキシル、Ｒ４がエ
チルであυ、Ｒ５がＨであれば４−デスセセチルピンク
リスチンが表わされる；Ｒ１゛がＣｏ−０ＣＨ３、Ｒ２
がメチル、Ｒ５がエチル、Ｒ４がヒドロキシルであシ、
Ｒ５かＨであれば４−デスアセチルデオキシジンが表わ
される；Ｒ１がＣ０−０ＣＨ３、Ｒ２がメチル又はフォ
ルミル、Ｒ５がエチルであってＲ４と８５とがそれらに
付着する炭素原子（複数）と共に存在していてα−エポ
キシド壌を形成すれば４−デスアセチルロイロジン及び
４−デスアセチルロイロフオルミンが夫々表わされる；
Ｒ１がＣｏ−０ＣＨ３、Ｒ２がメチル、Ｒ３がエチル、
Ｒ４及びＲ５がＨであれば４−デス了セチルデオキシＶ
Ｌ８’Ｂ’父は４−７′、’１．７セチルー　４’　−
７’オキシロイロシジン或は４−デスアセチル−４′−
エピデオキシＶＬ８が表わされる；Ｒ１がＣ０−ＯＣＨ
Ｒ２がメチル、Ｒ４がエチル、Ｒ４がエチ５　′ ルであ’ｇ　Ｒ３及びＲ５がＨであれば４−デスアセチ
ルデオキシＶＬＢ＃Ａ１１又は４−デスアセチル−４７
−デオキシＶＬＢが表わされる；Ｒ１がｃｏ−ＯＣＨ，
Ｒ２がＣＨＯ，Ｒ３がエチルであってＲ４及びＲ５がＨ
であれば４−デスアセチル−４′−エピデオキシ−ピン
クリスチン（４−デスアセチル−〆 フオルミルー１−デスメチル−４′−デオキシロイロン
シン）が表わされる：そしてＲ１がＣＱ　−ＮＨＲ２が
メチル、　Ｒ５がＯＨ，Ｒ４がエチルで２　ゝ あってＲ５がＨであれはピンデシン（４−デスアセチル
−ＶＬＢ　　３−カルデキサミド）が表わされる。弐■
によって表わされる４−デスアセチルインドール−ジヒ
ドロインドールアルカロイドのその他の３−カル？キサ
ミド誘導体の名称を以下に列挙する： ６−（２−メチルチオ）エチルカルボキサミド、３−（
２−メトキシ）エチルカルボキサミド、３−カルはキシ
ヒドラジド、３−ピロリジニル誘導体、Ｎ−メチルカル
がキサミド誘導体、及びその他；但しアミド基の夫々は
上記のＲ１に包含される′。式…に従う化合物において
８１　　がカルがキシル基であれば該化合物をｌオイッ
ク酸（ｏｉｃ　ａｃｉｄｓ）’と呼ぶこととする；即ち
４−デスアセチルピンプラスチノイツク酸、４−デスア
セチルロイロンノイツク酸、４−デス了セチルビンクリ
スチノイツク酸等である。、４−デスアセチルピンプラ
スチンイツク酸誘導体製造に関して３−カルボキシルを
、カルＩキシ保護基剤例えば２　の定義に関する既述の
保護基のうちのひとつを用いて無水物又は他のアシル化
剤、Ｚ　　Ｃｏ　Ｘ−Ｃ００Ｃ１〜３７　ｋ　キｋ、と
の反応以前に、保護せねばならないこと、第二のカルＩ
キシ保護基不使用の場合にこの反応の生成物、Ｒ−０−
ＣＯ−Ｘ−ＣＯＯＣ１〜３　　アルキル、を加水分解ジ
チアシル化基、（ＣＯＺ　）即ちＣ０Ｃ４Ｃ０Ｂｒ、Ｃ
ｏ−Ｎ３　　、サクシンイミドオキ７等を有するヘミ酸
へ転化させることは画業技術にとって明かであろう。

４−デスアセチル誘導体（ＩＩＩ）の原アルカロイド類
に関する参考文献を挙げると次の通りである：Ｉｅｕｒ
ｏｓｉｎｅ　（米％４３．３７０．０５７　’）、ＶＬ
Ｂ（米％Ａ　３　、０９７　、１３７　）　、　Ｉｅｕ
ｒｏｓｉｄｉｎｅ（ｖｉｎｒｏｓｉｄｉｎｅ　）及び１
ｅｕｒｏｃｒｉｓＮｎａ　（以下にｖｉｎｃＦｉｓｔｊ
ｎｅと記す）（共に米製４３，２０５，２２０ｄｅｓｍ
ｅｔｈｙｌ　ＶＬＢ　　（米製４５，５５４．１６５）
。

ｖｉｎｄｅｓｉｎｅ及び他の３−ｃａｒｂｏｘａｍｉｄ
ｅｓ　（米ｔ￥ｊ＆４　、２０３　、８９８　）　、　
ｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｏｉｃ　ａｃｉｄ　、　　　　−
ｖｉｎｃｒｉｓｔｉｎｏｉｃ　ａｃｉｄ　、　ｅｔｃ−
（米製Ａ　４，０１２，３９０）。

４’−ｅｐｉｖｌｎｃｒｉｓｔｉｎａ　（米％Ａ４，１
４３，０４１）ｌｅｕｒｏｆｏｒｍｉｎｅ　、　ｆｏｒ
ｍｙｌｌｅｕｒｏｓｉｎｅ　（米４？屋４．２７９，８
１６）、並びにｄｅｏｘｙ　ＶＬＢ　’Ａ’及び　ＩＢ
Ｉ　　［丁＊ｔｒａｈａｄｒｏｎ　　Ｌａｔｔｅｒｓ、
　　７８５（１９５Ｂ）］。

弐川に従う代表的化合物を以下に例示する。記名の容易
化のために例えば構造Ｒ−０−Ｃｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−
Ｃｏｏ）ｌ　　ノ化合物ｆＶＬ　８−４−ヘミサクシネ
ートと表示するが４−デスアセチルといつ語ヲ省略する
ことはすべてのＲ基について普通のことである。

例１ ４一デスアセナルＶＬＢ（２ｔ）ｋピリジンに溶かしこ
の溶液に対し無水コハク酸（２Ｆ）ｔｌ−加えた。この
反応混合物を周囲温度下に５時間攪拌した。（この反応
に０〜５０℃の温度ｔ−ａ用してよい。）揮発性成分を
Ｘ９下に蒸発して除き残留物をＣＨ，２ＣＪ２　　に溶
かし友。ＣＨ２Ｃノ２層ｔ？５％重炭酸す）　ＩＪウム
溶液で流込、次に水洗した。有機層を乾燥し、溶剤を真
空下に除去した。かように製造されたＶＬＢ４−ヘミサ
クシネートは下記の物理的性状を有していた： 赤外吸収極大部位：　１７３７，１６１５．１４６０１
４３４ｃｍ−’ 核磁気共鳴：　（ＣＤＣ）３）８．０５　７．５４．７
．１４６．５８．６．１１　５．８３．．５．４６．５
．２Ｂ、、５．Ｆ２Ｏ３，７８，、，５，６９，３，６
２５！、、７１．．０．９２．０．７９９０ｍ ＶＬＢヘミサクシネートを無水エタノールにとかしてこ
れに２％エタノール性硫ｊ１２に加えｐｉ−１＝３．９
５としてから揮発性成分を蒸発させることにより硫酸塩
を製造した。この硫酸塩は下記の物理的性状を有してい
た： 紫外吸光（Ｈ２Ｏ）極大部位２１４，２６８ｓ２８３゜
５１２　ｎｍ 赤外（に［３ｒ）吸収極大部位：　５４０Ｑ（幅広）。

７４０ｃｍ 滴定値（６６％ＤＭＦ　）：　ｐＫａ＝４．８０，６．
１０゜７．８０ 上記の手続′＃を用いて下記の追加の諸化合物を製造し
た： ４−デスアセチルビンクリスチンからビンクリスチン４
−ヘミサクシネート：収量＝７００Ｉｖ（１，９５ｆの
原料から）、この化合物は下記の物理的性状を示した： 赤外吸光極大部位：　１７４０　＋　１６８４ｃｍ−１
核磁気共鳴（ｏｃｃ）３）：　８．７７．８．１５，８
．１１　。

７．７２，７．５４，７．１８，６，９０，６．８３，
５．８９゜５．３９，５，２１，４．６９，４．５１，
３．８６，５．７４゜３．６７ｒｓｐｍ 遊離塩基（ａｏｏｑ）のエタノール溶液に２％エタノー
ル性硫酸を加えることにより硫ｅｔｘｔ製造した。収量
＝３３０１Ｑ；Ｒｆ　値（シリカゲル、メタノール）＝
０　、１６゜ ビンデシン４−ヘミサクシネート″ｆｒ：３００■のビ
ンデシン（４−デスアセチルＶＬＢＣ−３カル？キサミ
ド）から製造した。収量＝２９０η。この化合物は下記
の物理的性状を示した： 赤外吸収極大部位：　５４５０　、　１７５５．１６９
３ｃｍ−１核磁気共鳴（ＣＤＣｊ、）：　８．０７，７
．５２，７．１０゜６．５４，６．０８，５．９２，５
．４９，５．２７，３．７０゜３．５９．３．４６，２
．８５，０．９１，０．７８ｐｐｍ前記のようにして硫
酸塩を製造した（　２００Ｉｖの遊離塩基から１６０雫
の白色無定形粉末が得られた）。薄層クロマトグラフィ
によるＲｆ　値（シリカゲル、メタゾール使用）＝０．
５６４−デスアセチル−４２−エビデオキシＶＬＢ（１
０８０即）からの４１−エビデオキシＶＬＢ４−ヘミサ
クシネート収量＝５４０即：Ｒｆ値　　　　１（ＳｉＯ
２，１、”　Ｉ　ＥｔＯ＾ｃ　／　ＭｅＯＨ）＝　０　
、０８４−デスアセチルビンブラスチンイツク酸からピ
ングラスチンイツク酸４−ヘミサクシネートを製造した
。この化合物は下記の物ル的性質を有していた： Ｒｆ値　（５ｉＯ２１’　ル、ＭｅＯＨ）＝　０　、２
３核磁気共鳴（ＣＤＣＡ３）：　８．０５，７．５２，
７．１１゜６．５７，６．０６，５．７１ｓ５．２６，
５．ｉａ、５．７５゜３−６０．２−８２　ｐ　Ｄ　、
　９０−０　、７６　ｐｐｍ既述の操作に従って４−デ
スアセチルｖＬＢと無水マレイン酸とを反応させてＶＬ
Ｂ−４−へミマレエートを製造した。この化合物は下記
の物理的性質を示した： 赤外吸光極大部位：１７５０．１５９０ロー１核磁気共
鳴：　（ＣＨＣｊ５）８．６１，８．Ｇｄ、７．５０゜
７、ｉ２＋６．５９ｔ６．ａ８，５．７８　　（Ｊ＝１
２Ｈｚ）６．０９＋５．７，５．５１，５．３，３．７
９＋２．７０ｐｐｍ既述の操作に従いＶＬＢ４−へミグ
ルタレート（３１の出発原料から７００〜）を製造し、
このものは下記の物理的性質を有していた：赤外吸光極
大部位：　３４５０　、ｉ　７５６ａｎ−’核磁気共鳴
：　（ＣＨＣｊ！３）８．０７，７．５３，７．１５゜
６．５３，６．１３，５．８３，５．４５，５．２４，
３．８０゜’ｘ、／ｚ８．．３．６３，２．６９，０．
９１　、［３，８１ｐｐｍＲ（Ｓｉｎ２．１　：　ｉ　
ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ）　＝０　、２５硫ず 酸塩（収率＝５０％） Ｒｙ　’（Ｓｉ０２，１　＋、　Ｉ　ＥｔＯＡ（：　／
　ＭｅＯＨ）　　＝０．０８４−デスアセチルインドー
ル−ジヒドロインドールビンカダイマーの前記のアシル
化のいずれの場合においても３−ＯＨの附随的なアシル
化はハルグローブ法（Ｈａｒｇｒｏｖｅｓ米国特許第５
３９２１７５号）にもとづく潤潤シリカｒル処理によυ
これを逆転させることができる。別法としてはこの化合
物を、３−アシル誘導体又は他の反応副生物の夾雑から
、クロマトグラフィにより、便利にはシリカゲル上で酢
酸エチル／メタノール混合溶剤全溶出剤として使用する
ことにより純化し得る。

例２ 物の製造 ＶＬＢ４−ヘミサクシネート（９０即）￥ｒＣＨ２Ｃｊ
２　（２ｍｅ　）に溶かし、これにＮ−メチルモルフォ
リン（１５μ！　）を加えて得られた溶液を約０℃に冷
却した。イソブチルクロロフォルメート（約２０μ））
を加えてからＮ−ヒドロキシサクシンイミド（２０■）
ｆ加えた。反応混合物を還流下に約１５分間加熱し、真
空下の蒸発によジ溶剤及びその他の揮発性成分を除込た
。得られたがム状残留物を純化せずにそのままタン／ぐ
り質と接合させるために用いた。得られた化合物は下記
の構造を有してｗｆＣ： 但し上式中Ｒは既述の通υＶＬＢ基である。この化合物
を化合物分類学士４−［３−（１−サクシンイミドオキ
シ力ルデニル）ｆロビオニルＶＬＢと称し得る。このも
のは下記の物理的特性を有していた： 赤外吸収（ＣＨＣＪ３）　　％大部位：　１７４１　、
１７１８ｃｒＩｌ−’別個の実験操作において下記構造
式をもつＶＬＢ４−ヘミサクシネート及びイソブチルカ
ルＭ７酸の中間的混合無水物を単離したがこのものの性
質に次の通りである： 赤外吸収極大部位）　５４５０　、１７３８．１８２０
ｃｍ−１核磁気共鳴（ＣＤＣＡ５）：　８．０５，７，
４５，７，１５゜６．４０，６．１０．５．８８，５．
４２．５．３７，４，００゜３．８１，３．７６．５．
６５．２．７４．０．９５ｐｐｍＲ−０−Ｃｏ−ＣＨ２
−ＣＨ２−Ｃｏ−０−Ｃｏ−０−イソブチル但し式中Ｒ
はＣ−４位の混合無水物官能基に結合［、友ＶＬＢであ
る。

ｌ活性化＃ＶＬ８４−ヘミサクシネートのＤＭＦ中１４
．７臀／ゴの溶液（３５０μ〕）を、０．３４Ｍホウ酸
緩衝液（ｐＨ８，６）中のマウスのモノクロナル抗−肺
小細胞ガン抗体の２０．０ｍｙ　／　Ｉｄ溶液（２、ｒ
Ｊｍｌ）に対し急速攪拌下に加えた＠室温下に４時間攪
拌した後ＪＣＩＮ塩酸使用下に反応混合物のｐＨを７．
４に調節し遠心処沖によシ清澄化した。この生成物につ
論てリン酸塩緩衝食塩液で平衡化したビオグル（Ｂｉｏ
　−Ｇｅｊ　）　Ｐ−６の２．０Ｘ２２．Ｏｃｍ（６７
，０ｄ）のコラム上でｒルＰ遇することによシ、接合製
品が単離された。極大値を示す部分を集め（９，７ゴ）
デスアセチルビンブラスチン及びタンノ４り質について
２７０及び２８０ｎｒｎＶｃおける分光光度計による測
定を行った。かようにして製造された接合体は１モルの
１を当９７．５モルのＶＬＢを含有していたー 活性化基が１−サクシンイミドオキシ基であるｌ活性化
＃ＶＬＢ４−ヘミサクシネートの改良製造法は下文の通
勺である・ ＶＬＢ−４−ヘミサクシネート（１ｔ）と二塩化メチレ
ン（２０ｍ）中のＮ−メチルモルフォリン（３８０〜）
とを混合しインブチルクロロフォルメー）（３９０■）
を加えた。この反応混合物をチッ素気中約Ω℃で約４５
分間撹拌し７’Ｃ，Ｎ７ヒドロキシサクシンイミド（７
９５Ｉｎ９）を加え反応混合物をチッ素気中還流温度下
に約４５分間攪拌下に加熱した。反応混合物を冷却しこ
の冷却混合物を脱イオン水で洗ってから直ちＫ　Ｎａ２
ＳＯ４を用いて乾燥した。乾燥剤をｒ別しＰ液を真空蒸
発し乾燥しｆｃ：残留物重１＝９００〜；薄層クロマト
グラフィは純度９０％以上であることを示した。

ａ創的操作法に従いＶＬＢ４−へミグルタレートを順次
に塩化メチレン溶液中のＮ−メチルモルフォリン、イソ
ブチルクロロフォルメート及びＮ−ヒドロキシサクシン
イミドで処悉して４−グルタリルＶＬＢ（４００ｍ）か
ら４−［４−（１−サクシンイミドオキシカル？ニル）
〕ツチリルＶＬＢ（収量ｔ６０＊）？得た〇 上記の操作に従い４′−エピデオキシＶＬＢ４−ヘミサ
クシネートｔ−４−［５−（１−サクシンイミドオキシ
カルボニル）〕プロピオニルＶＬＢへ転化させた。１：
　Ｉ　ＥｔＯＡｃ　／　ＭｅＯＨｆ用いＳ　ｉ　Ｏ２ｒ
ル上でクロマトグラフィを行った；　Ｒｔ＝０．２３；
原料のヘミサクシネート（５４０１Ｖ）からの収量＝３
６０、ｖ。

上記の換作に従いｌ活性化ｌビンデシン４−ヘミサクシ
ネート即ち４−（３−（１−サクシンイミドオキシカル
がニル）〕プロピオニルビンデシンを製造した。この化
合物は次の物理的特性を有していた： 赤外吸収極大部位：　３５２０，３４７０，３４００゜
１８１０．１７９１，１７４４ 幅広い肩部を示す部位１７　ａ　ａ−１６５０ｃｍ−’
核磁第共鳴（ＣＤＣ）３）　：　８−０８　ｅ　７　：
　４５−７−１５　。

６．４４，６．１２，５．８５，５．４８，５．３２，
３．７９゜３．６４ｓ！ｔ、５Ｂ、２．８５＋２．８ａ
＋、９５ｍ、７８ｏｐｍ４−（３−（１−サクシンイミ
ドオキシカルがニル）〕プロピオニルビンクリスチンを
も製造した：出発原料（２５６〜）からの収量＝１４０
１９゜赤外吸収極大部位：　！ｔａ６０ｅ１８１０，１
７８５゜１７４４．１７１９　　ａｎｄ　　１６８５ｃ
ｍ−’核磁気共鳴（ＣＤＣｊ、、）；　８．７９，８．
１９，８．１４゜７．７８＃７．４１，７．１８１６．
９７，６．８４，５．９２゜５．４２．５．５５，４．
７２．４．５２，５．８１，３．７８゜５　、７１　ｔ
　２　、８５　ｍ　０　、８３９ｐｍ例３ ＶＬＢ４−ヘミサクシネー）（２［１０Ｉｎ９）を無水
酢酸（１０ｍ）に溶かした。氷酢酸（５ｍ）を加えてか
ら５滴のピリシンを含むメタノール（２００ｍｇ）’ｔ
”加えた。この溶液を１ｉ７２時間冷却してから１６時
間室温に置いた。揮発性成分を蒸発させると油状物が残
った。この残留物を水に溶かし水溶液に１４Ｎ水酸化ア
ンモニウ水溶液を加えて塩基性とした。塩基性水層をＣ
Ｈ２α２　で抽出し、　ＣＨ２０２抽出物を水洗し乾燥
した。溶剤を除去するとＶＬＢ４−サクシネート〔別名
：４−（５−メトキシカルボニル）プロピオニルＶＬ８
：１が残留物として得られた。

半メチルエステル製造の改良方法は次の通シである： 例２によシ製造されＮ−ヒドロキシサクシンイミドによ
って活性化されたＶＬＢ４−ヘミサクシネー）（１０２
０１１９）ｔ２５ｄのＭｅＯＨに溶かした。この反応１
ｋＮ２　気中に密封して遮光下に行つつた。１８時間後
に揮発性成分を真空下に除去した。残留物１ＨＰＬｃシ
リカゲルコラム上でクロマトグラフィ処理しＥ　ｔＯＡ
ｃ　：　Ｅ　ｔＯＡｃ−ＭｅＯＨ（１：　１　）の勾配
混液を用いて溶出した。薄層クロマトグラフィによる測
定にもとづき所望生成物を含むフラクションを集めた。

真空下に揮発成分を除去するとメチル−４−ヘミサクシ
ネー）ＶＬＢ（収量５１０Ｉｎ９）が黄褐色無定形粉末
として得られた。

常法により硫酸塩を製造した（　ＺＢＥｔＯＨ中２係Ｈ
２ＳＯ４）。

上記操作に従って製造されたその他のメチルエステルは
次のものを含む： メチルビンデシン４−ヘミサクシネートＲｆ　（５１０
２，１：Ｉ　ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ）　＝　０　、５赤
外吸収極大部位：１７３５．１６９９ｃｒｙ＋質量哀ペ
クトラム：　８６７（Ｍ＋）、８３６（Ｍ−５１）、８
０８（Ｍ−５９） 核磁気共鳴（ＣＤＣ１５）：９−９４＊８−０５＊７．
５２，７．１４．６．９８．６．５８゜６．１２，５．
８７．５．５５．５．５０゜３．７９．５．６９．５．
６２．５．４７゜２　　、　７４　　、　０　　、　９
　０　　ａ　　０　　、　８　１　　ｐｐｍ硫酸塩：　
Ｒｆ　（５ｉ０２　、１　：　Ｉ　ＥｔＯＡｃ／？ｖ’
１ｅＯＨ＝０　、５５メチル４′エビデオキシ Ｖ　ＬＢ４−サクシネート 質量スペクトラム：８６６（Ｍ＋）、８６４゜８８０．
８９４，９０８，３５９（Ｍ−ビンドリンモイエテイ）
、１５９ 赤外吸収極大部位：　１７４５ｃｍ−’核磁気共鳴（Ｃ
ＤＣ１５）：８．０５．７．５５゜７．１６．６．６０
．６．１０，５．８９゜５．４６．５．５９．５．８２
．５．７２゜３．６４，２．７６ 例４ ＶＬＢ４−ヘミサクシネー）（ｉＦ）を二塩化メチレン
（約２５−）に溶かした。この溶液に対しチッ素気中で
Ｎ−メチルモルフォリン（２００１ｎ＆）を加えこの反
応混合物を水溶中で冷却した・イソグチルクロロフォル
メート（２００１ｎｇ）を加え反応混合物を室温下約０
℃で１５分間攪拌した。

次にこの反応混合物を蒸発乾固すると黄褐色ガム状物を
生じた。ガム状物をメタノール性アンモニアに溶かしチ
ッソ雰囲気下で両回温度に約４８時間保持した。揮発成
分を蒸発させるとＶＬＢ４−ヘミサクシネートのアミド
（４−サクシネート上の）、（便宜上４−サクシノイル
ＶＬＢアミドと呼ぶ）を含む残留物を生じた。このアミ
ドは次の物理的特性を有していた： 赤外吸収極大部位：１７３８．１６８５０−１質量スペ
クトラム：　８６７（Ｍ＋）、３５５．１５４核磁気共
鳴（ｃｏｃ＋５）二９．８６．８．０４゜７．５３．７
．１２，６．６５．６．１０．５．８５゜５．４８．５
．３２＃３．８１，５．８０．５．７３゜５．６２＊２
．７２ｍ０．９０ｓ０．８２ｐｐｍＲｔ　（Ｓｉ０２７
１：Ｉ　ＥｔＯＡｃ／ＭｅＱＨ）　＝＝ｏ　、　５Ｂ硫
酸塩： Ｒｆ　（Ｓｉ０２　ｍ　１　：　Ｉ　　ＥｔＯＡｃ／Ｍ
ｅＯＨ）　＝０−５５メタノール性ヒドラゾンを用いる
ことによル著−しく短縮された反応時間で対応するヒド
ラジド。

即ち４−サクシノイルＶＬＢヒドラジドを上述のように
して製造した。この化合物に次の物理的特性を有してい
た： Ｒず（Ｓｉ０２．１　：　ｉ　ＥｔＯＡｃ／Ｍｅ０１−
１）＝［１、２５赤外吸収極大部位：　５４００．５４
５０，１７５９゜１６８０Ｃｒｒ１ 核磁気共鳴（ＣＤＣＩ３’）：９．８８．８．０３゜７
．５３，７．１２．６．５５．６．１０，５．８５゜５
．４６．５．２７．５．７９．５．６０．２．６０゜０
．８８．０゜８１　ｐｐｍ 例　　５ ４−ｆスフ−１＝＋ルＶ　ＬＢ　（１、４ｆ　）？二塩
化メチレン（５０ｄ）に溶かした。アジピン酸（３ｔ＞
′ｔ−加えてからジシクロへキシルカルボジイミド（３
ｆ）を加えた。この反応混合物を無水雰囲気下に約２４
時間周囲温度に保った。次に反応混合物’ｔＦＬ、てフ
ィルターケーキ會二塩化メチレンで洗った。二塩化メチ
レンを蒸発して残留物を生成させ、これをシリカダル上
クリマドグラフィにより純化し溶出剤として１：１酢酸
エチル／メタノール混液ヲ用いた。クロマトグラフィに
よる主生成物はメチルＶＬＢ４−アジポエートであった
がこれは明かにクロマトグラフィ操作過程で未反応ジシ
クロへ中ジルカルボジイミド及びメタノールの存在によ
り生成されたものである；収量＝２２０ダ； 核磁気共鳴、極大３　、６３　（ＣＨｘＯ−新規メチル
エステル）；質量スペクトラム；極大９１０（Ｍ＋）９
２４（Ｍ＋１４）、８７９，８５２，３５５，１５４下
記の諸化合物は式■によって示される化合物の範囲の例
示である。これらの化合物の命名に当り次のことを配慮
した：原のインドール−ジヒドロインドールダイマーが
新規官能基により代替され念こと；即ち４−アセトキシ
は４−サクシノオキシにより代替され、又は５−メチル
カルがキシレートはカルボキサミドで代替され、離脱基
を除いたこと。例えば４−デスアセチルＶＬＢ４−？ク
シネートの代りにＶＬＢ４−サクシネートと命名し、又
は４−デスアセチル−６−ジスメトキシ−カルボニルＶ
ＬＢ５−カルボキサミド４−４ｊ／シネートの代りにビ
ンデシン４−サクシネートト命名した： ４′　−デオキシ−４−Ｃ５−（１−サクシンイミドオ
キシ）プロピオニルＶＬＢ ４′　−デオキシ−４−（５−エトキシカルボニル）ノ
ロピオニル−１−フォルミルロイロンシン ４′−デオキシ−１−７オルミルロイロシジンー４−マ
レエート ４′−デオキシ−１−７オルミルー４−（５−アジドカ
ルがニル）プロパノイルロイロンヅン ４−（４−ｔ−ブチルオキシカルボニル）ブチニルロイ
ロジン ４−（５−（１−フタルイミドオキシ）〕パレリルピン
グラスチチンック酸 ４−（５−メトキシカルボニル）ｆロピオリルピンクリ
スチンイック酸 ４−［３−（２−ベンゾトリアゾリルオキシ）ノロピオ
ニルビンクリスチン３−（２−り０ロエチル）カルがキ
サミド ａ−Ｃ（５−トリリルオキシカルボニ）プロピオニルロ
イロンジン５−（１−ピロリジル）カルボキサミド ４Ｉ　−デオキシＶＬ８３−へミグルタレートロイロシ
ン５−へミアジイート ビス［ａ、　−（４−デスアセチルＶ　ＬＢ　）　）サ
クシネト ビス［ａ−（ａ−デスアセチルＶＬＢ５−カルボキサミ
ド）］マレエート 前式中２がＯＲ、ＯＨ、ＮＨ２、ＮＨＮＩ−１２又はｏ
　−Ｃｌ〜３アルキルである本発明の化合物はマウスの
移植腫瘍に対する抗腫瘍活性化合物として有用である。

２がサクシンイミドオキシ、フタルイミドオキシ、　Ｓ
ｒ　＋ＣＩ、Ｎ５＊ベンゾトリ了ゾリルオキシ、トシル
オキシ、ベンゼンスルフォニルオキ−／　又ｕ　）タン
スルフォニルオキシである化合物ハ既述の通り抗体接合
体の製造に有用である。

前式Ｉにおいて２がＯＲ、ＯＨ、ＮＨ２，ＮＨＮＨ２又
Ｉｄ　Ｏ−ＣＩ、ｓ　　アルキルである化合物の核分裂
阻止剤としての有用性、分裂中期における分裂停止能力
に関する証明は標準操作法に従って測定された。

第１表は該測定結果を示す。第１表において第１欄は化
合御名％第２欄は該化合物の媒質中濃度を示しこれは分
裂中期の分裂停止能を証する。

第１表 一ト硫酸塩 ＶＬＢ　４−へミグルタレート硫酸塩　　　　０．２上
記化合物中の酸物も又マウスの移植腫瘍に対する活性を
有する。これについての情報を第■表に示す。同表中第
１欄は化合物名、第２欄は腫瘍名、第３欄は投与量（ｍ
ｚ／ｋｐ）、第４欄は腫瘍抑制率（憾）を示す。Ｐ１５
５４Ｊは白血病。

６　Ｃ３ＨＥＤＵリン・臂性肉腫でアル。　　　　　・
第ｎ表 化合物名　　　　腫　瘍　　投与量阻止率係ビンデシン
４−へミサ　　６Ｇ、５ＨＥＤ　　　１２　　　４８ク
シネート　　　　　　　　　　　　　　　　　２５　　
９８５ｇ　　　　ｉｏ。

６Ｃ５ＨＥＤ　　１８　１０口 ３６　　　１０’０ ７２　　有害 ビンクリスチン４−ヘミ　　Ｐ１５３ＡＪ　　　２０　
　　６５サクシネート硫酸塩　　　　　　　　　　　　
４０　　８５６０　　　９４ ８０　　　９６ ６Ｃ３ＨＥＤ　　　２０　　１００ ４０　　　１００ ６０　　　１００ Ｂ□　　　　ｉｏ。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）　　下式： ％式％ 〔但し式中Ｒは４−アセトキシ又は４−ヒドロキシ抗ｍ
   ｓ性二量体化インドールージヒ・ド９インドールアルカ
   ロイドから誘導された二量体化インドール−ジヒドロイ
   ンドール基で、ｓす、　ｚｉｊ　ＯＲであり、Ｒは同じ
   か又は異るものであってＯＨ，ＱＣアルキル、ＮＨＮＨ
   ＮＨ２、カル１〜３２１１ がキシ活性化基（ｚｌ）或はカルボキシ保護基（ｚ２）
   であり、ＸはＣ直鎖アルキレン。 １〜４ Ｃ２，６分岐鎖アルキレン”　２．ｖ４了ルケニレン。 Ｃアルキニレン、Ｃシクロアルキレン、３〜４３〜６ フェニレン、ヒドロキシ置換０１Ｎ４アルキレン又は直
   接結合である〕を有する化合物及びその塩。 ＋２）　　基Ｒが下式ｌ： １　　　　　　　　　　　（１） １ ［但シ式中Ｒ２ｄ　Ｈ、ＣＨ，又ＨＣＨＯ’ｔ”あｌ、
   ＲとＲ５とが別個に存在している場合にはＲ５はＨであ
   シ、Ｒ３及びＲ４のうちのひとつにエチルであって他Ｆ
   ｉＨ又ｉｊ　ＯＨであシ：Ｒ４とＲ５とがそれらに付着
   する炭素原子（複数）と共に存′在している場合にはオ
   キシラン環全形成し、そしテＲ３１ｒｉｘｆルテあす；
   　Ｒ’　ｉ　Ｃ０ＯＨ、Ｃ００Ｃし＼６ アルキル又はＣ０Ｒ６であり：Ｒ６ばＮＨ２，ＮＨ−Ｃ
   ＩＮ３アルキル、ＮＨ−ＣＨ２ＣＨ２Ｃｔ、　　１−ピ
   ロリジル、１−ピペリジニル、又はＮＨ−ＣＨ２ＣＨ２
   ＹＣＨ５であったＹ＃：ｔＳ又は０である〕を有し、２
   がＯＨ，ＱＣ，〜３７ｈ＊ル、　ＯＲ，Ｚ　　又ＵＺ　
   　である特許請求の範囲第１項記載の化合物。 （３）　２が０Ｒ１ＯＨ又はｏｃｌ〜３アル４ルである
   特許請求の範囲第２項記載の化合物。 （４）ｚがＳｒ、Ｃ４，Ｎ　　　サクシンイミドオキシ
   、１ フタルイミドオキシ、ベンゾトリアゾリルオキシ、メタ
   ンスルフォニルオキシ、トシルオキシ又ハベンゼンスル
   フオニルオキシで、！る％ＦＦｉ求の範囲第２項記載の
   化合物。 （５）ｚがＣＣｔ３ＣＨ２０１ＣＢ「、ｃＨ２ｏ％ｃＨ
   ２ＩｃＨ２ｏ％Ｎ２０％オキシ、メチルベンジルオキシ
   、ｔ−１チルオキシ、アリルオキシ、メトキシベンジル
   オキシ、ニトロベンジルオキシ、フェナシルオキシ、ニ
   トロフェナシルオキシ、メトキシフェナシルオキシ、メ
   チルフェナシルオキシ、ジフェニルメトキシ、トリチル
   オキシ、トリメチルシリルオキシである特許請求の範囲
   第２項記載の化合物。 （６）ｘがＣ４，４アルキレンである特許請求の範囲第
   ２〜５項のうちのいずれかに記載の化合物。 （７）特許請求の範囲第１項記載の化合物及び製薬年上
   許容可能希釈剤又は担体を含有することを特徴とする製
   薬学的処方物。 （８）　　下式： ％式％ （但ｔ、式中ＡＨ２”ｔ’あり、５ｈｚ２、ＯＣ１〜３
   アルキル又はＯＲであり、或はＡと８とは共に一〇−結
   合を形成する）の化合物を４−ヒドロキシニ量体化イン
   ドール−ジヒドロインドール即ちＲＱＨと反応させ、任
   意にＣアルキル或−〜３ けｚ２基を離脱させて遊離酸（但し２はＯＨである）を
   得るか、又は下式： ％式％ の化合物を活性化して化合物（但し２は２　である）を
   生成させ、任意にこの化合物とアンモニア、ヒドラジン
   或は０１〜．アルカノールとを反応させて化合物（但し
   ２はＮ８２％　ＮＨＮＨ２又はｏＣ１〜６アルキルであ
   る）を得ることを特徴とする特許請求の範囲第１項記載
   の化合物の製造方法。