JPS5939403B2 - 抗トロンビン様薬剤 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 この発明は、大豆（Ｇｌｙｅｉｎｅｍａｘｍｅｒｒｉｌ
ｌ）から抽出しうるサポニン成分を有効成分として含有
する抗トロンビン様薬剤に関する。

天然の植物や動物中に各種のサポニン物質が含まれてい
ることが知られ、大豆中にも複数のサポニン物質が含ま
れている。

大豆サポニン成分の中で、数種の化学構造が明らかにさ
れている。〔Ｃｈｅｍ、Ｐｈａｒｍ、Ｂｕｌｌ、第２４
巻（１）、第１２１〜１２９頁（１９７８年）参照］。
従来大豆サポニン成分が溶血性、殺虫性、殺魚性の生理
活性を示すことは知られている。

またこの発明の発明者らの研究の結果から、大豆サポニ
ン成分が過酸化脂質抑制作用を有することが判明してい
る。しかし、これとは全く異なる作用すなわち抗トロン
ビン様作用を有し、凝血、血栓の防止に有効であること
が見出された。血液の凝固は、血漿中に溶存しているフ
ィブリノーゲン（線維素源）が蛋白分解酵素であるトロ
ノビンの働きによつてそのアルギニン−グリシン結合が
切断され、血漿に不溶のフィブリン（線維素）を生成析
出し、フィブリンは更にカルシウムイオンの存在で重合
固化し、凝固する現象である。

このトロンビンは通常、糖蛋白のプロトロンピンの形で
血漿中に存在する。血液が体外に出るとか、止血が必要
になつたとき、血液凝固因子のトロンボプラスチンが活
性化されて生成した活性トロンボプラスチンが、２価の
カルシウムイオンの存在下に上記プロトロンビンに作用
しトロンビンに変化させるといわれている。一方、血栓
の生成は血管内皮の損傷、炎症、血流のうつ滞、血液凝
固能の亢進等の起因になるといわれ、血管内皮の損傷、
炎症部に血小板が付着しこれにトロンビンの働きによつ
てフィブリノーゲンより分解生成した線維素（フィブリ
ン）が付着凝集し、この線維素の網に、血球がまきこま
れ血液塊となり血栓が形成される。

この血液凝固、血栓生成の主因になるフィブリン生成の
引金になるトロンビンに拮抗する抗トロンビン作用をも
つ化合物としては、日本薬局方にも収載されているヘパ
リンが有名である。へパリンは動物の肝臓、肺臓から抽
出され、ナトリウム塩として輸血の際の抗凝血剤又は血
栓、塞栓症の予防及び血栓、塞栓の成長の阻止の目的で
抗血栓剤として広く用いられている。この発明は、この
発明の大豆サポニン成分又はその主成分である下記定義
のソーヤサポニンＩがへパリン以上の抗トロンビン作用
を有すことを見出してなされたものであり、大豆サポニ
ン成分又は少なくとも３−０−〔α上−ラムノピラノシ
ル（１→２）一β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）
一β−Ｄ−グルクロノピラノシル〕−ソーヤサポゲノー
ルＢ（ソーヤサポニノＩ）と医薬的に受容な賦型剤とか
らなる抗トロンビン様薬剤を提供するものである。

血管内での血栓の形成は、その部位から先の血流を著し
く阻害し未梢血行阻害、組織の壊死などの重大な障害を
もたらす血栓症、塞栓症を招くがこの発明の薬剤はこれ
らの予防及び成長の阻止に有効である。

例えば閉塞性動脈硬化症、血栓性静脈炎、血栓性心内膜
炎、冠動脈血栓症、肺栓塞、血栓性大動脈分岐部開閉塞
症（ルリーシ一症候群）一血栓性脳軟化症、血栓性血小
板減少性紫斑病等、血栓症塞栓症の予防及び改善に用い
られる。また、：―：？：ｉ成の予防、輸血時の抗凝血
剤とし本品は、食用に供せられる大豆のサポニンである
ので安全性が極めて高く〔ＬＤ５Ｏ３．５７以上／Ｋｇ
（マウス、経口）、ＬＤ５Ｏｌ．Ｏ７以上／Ｋｇ（マウ
ス、、腹腔内）〕、しかも安価に製造できる。また、サ
ポニン類は一般的に血球膜に働いて血球破壊を行なうい
わゆる溶血作用を有するので、注射投与ができないが、
この発明の大豆サポニン及びその主成分であるソーヤサ
ポニンＩは溶血作用が全く認められず、その上水に溶け
易いので注射剤、点滴剤としても利用できる利点がある
。又、他の抗凝血剤であるヘパリン、ウロキナーゼ、ア
ルピン、ワルフアリン、フエニンジオンＡＣＤ液、ＡＣ
Ｈ−ＮＩＨ−Ａ液等を併用して用いることもできる。こ
の発明のサポニン成分は大豆から抽出分離し、溶剤で精
製するか、あるいは抽出液より樹脂吸着剤を用いて選択
的にサポニンを吸着させ精製することによつて得ること
ができる。

なお、この発明において単に゛サポニン成分゛と称する
場合は、これらの方法によつて得られる実質的にサポニ
ン類のみからなる混合物をいう。また、この大豆サポニ
ンは、大豆以外の植物にも含有されていると考えられる
。大豆からサポニン成分を得る方法としては、例えば次
のような方法がある。

すなわち、原料となる大豆の子実の粉末を通常の脂溶性
有機溶媒例えばヘキサンを用いて脱脂後、水または低級
脂肪族アルコール例えばメタノール類あるいは含水低級
脂肪族アルコールを用いてその有効成分を抽出し、抽出
液を蒸発濃縮して抽出工キズとする。

これを水飽和ｎ−ブタノールに溶解し、該溶液に水を加
えて振盪した後静置し、ｎブタノール層を分離し、蒸発
乾固する。または、上記抽出工キズをｎ−ブタノール：
水（１：１）混合液に溶解し静置してｎ−ブタノール層
を分離し、蒸発乾固してもよい。この蒸発残留物を低級
脂肪族アルコールに溶解後、エーテル中に攪拌注入し生
成した析出物を沢取して大豆サポニンが得られる。もう
一つの方法としては、大豆粉末を脱脂処理し、水、低級
アルコールまたは含水低級アルコールにて抽出し、その
濃縮物を水または約３０％以下の低級アルコール含有水
に溶解し、この溶液を巨大網状構造で多孔性の架橋され
たポリスチレン系樹脂吸着剤（例えばセルヴアクロムＸ
ＡＤ）と接触させて、大豆サポニンを吸着せしめた後、
低級アルコールまたは約３０％以上の低級アルコール含
有水で溶離処理し、大豆サポニンが得られる。

このようにして得られた抽出物は、実質的にサポニン成
分のみを含むものであつて、そのままこの発明の有効成
分として使用できる。この発明によるサポニン成分は、
原料とする大豆の種類によつて構成される成分の種類、
量に若干の差があるが、後述するごとき式（１）、（］
］）の化合物を含有するものである。

このサポニン成分（大豆サポニン）の性状、性質は次の
通りである。

１．黄白色〜褐色の粉末でわずかに苦昧を有する無臭の
粉末で、メタノール、希メタノールに易溶、水、エタノ
ールに可溶、クロロホルム、エーテル、ヘキサン、四塩
化炭素に難溶である。

２．１％水溶液は中性である。

３．赤外線吸収 ＩＲ：νＭａｘ（ヌジヨール）３４００（Ｂｒ）、３３
５０（Ｂｒ）、１７２０（Ｂｒ）および１７１０（Ｂｒ
）ＣＴ！Ｌ−１１Ｒ：ν（ＫＢｒ）３４００（Ｂｒ）、 ３３５０（Ｂｒ）、２９１８、１７３４（Ｂｒ）、１３
８５（Ｂｒ）、１０７４および１０２７０π４．薄層ク
ロマトグラフイ一 担体：プレートのキーセルゲル６０Ｆ２５４（タルク社
）展開溶剤：クロロホルム／メタノール／水（６：４：
１）１％硫酸第２セリウム−１０％硫酸混合物を噴霧し
加熱すると明確な紅紫色のサポニンスポツトを発現した
。

５．酸加水分解により、水可溶部からグルクロン酸、ガ
ラクトーゼ、グルコーゼ、アラピノーゼ、ラムノーゼ、
キシローゼが得られ、水不溶部より構成主ゲニン体のソ
ーヤサポゲノールＡ（Ｃ３ＯＨ５ＯＯ４、融点３１０〜
３１２℃）、ソーヤサポゲノールＢ（Ｃ３ＯＨ５ＯＯ３
、融点２６０〜２６１℃）が得られ、他に微量のソーヤ
サポゲノールＣ．Ｄ．Ｅが認められる。

６．リーベルマン反応、ザルコウスキ一反応は陽性であ
る。

７．水に添加して振盪すると、持続性の小泡が発生する
。

この発明におけるサポニン成分中には次の式（１）また
は（１１）で表わされるソーヤサポニン類（ＳＯｙａｓ
ａｐＯｎｉｎｓ）の少なくとも一種類以上が含まれてい
る。

式（１）： 式中、Ｒ１はα−Ｌ−ラムノピラノシル（１→２）一β
−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→２）β−Ｄ−グルクロ
ノピラノシル基、α−Ｌ−ラムノピラノシル（１→２）
一α−Ｌ−アラビノピラノシル（１→２）−β−Ｄ−グ
ルクロノピラノシル基またはβ−Ｄ−ガラクトピラノシ
ル（１→２）β−Ｄ−グルクロノピラノシル基を示す。

式（１１） 式中、Ｒ１はβ−Ｄ−グルコピラノシル（１→２）−β
−Ｄ−ガラクトピラノシル一（１→２）β−Ｄ−グルク
ロノピラノシル基で、Ｒ２がβＤ−グルコピラノシル（
１→３）一α−Ｌ−アラビノピラノシル基のもの、また
はＲ１がβ−Ｄガラクトピラノシル一（１→２）一β−
Ｄ−グルクロノピラノシル基でＲ２がβ−Ｄ−グルコピ
ラノシル（１→３）一α−Ｌ−アラビノピラノシル基を
示す。

式（１）および式（ｎのサポニンは、トリテルペンのオ
レアナン系配糖体に属するサポニンである。

式（１）で表わされる化合物の個々の具体名としては、
３−０−〔α−Ｌ−ラムノピラノシル（１→２）β−Ｄ
−ガラクトピラノシル（１→２）−βＤ−グルクロノピ
ラノシル〕−ソーヤサポゲノールＢ（ソーヤサポニン１
．Ｃ４８Ｈ７８Ｏｌ８・２Ｈ２０、融点２３８〜２４０
℃）；３−０−〔α−Ｌ−ラムノピラノシル（１→２）
一α−Ｌ−アラビノピラノシル（１→２）−β−Ｄ−グ
ルクロノピラノシル〕−ソーヤサポゲノールＢ（ソーヤ
サポニン、Ｃ４７Ｈ７６Ｏｌ７・３Ｈ２０、融点２１２
〜２１５℃）；３−０−〔β−Ｄ−ガラクトピラノシル
（１→２）一β−Ｄ−グルクロノピラノシル〕ソーヤサ
ポゲノールＢ（ソーヤサポニン、Ｃ４８Ｈ６８Ｏｌ４・
２Ｈ２０１融点２１５〜２１６℃）が挙げられる。

式（１１）で表わされる化合物の個々の具体名としては
、３−０−〔β−Ｄ−グルコピラノシル（１→２）−β
−Ｄ−ガラクトビラノシル（１→２）β−Ｄ−グルクロ
ノピラノシル］−２１−０〔β−Ｄ−グルコピラノシル
（１→３）−β−Ｌアラビノピラノシル］−ソーヤサポ
ゲノールＡ（ソーヤサポニンＡ１、Ｃ５９Ｈ９６Ｏ２９
・４Ｈ２０、融点２４０〜２４２℃）、３−０−〔β−
Ｄ−ガラクトピラノシル一（１→２）一β−Ｄ−グルク
ロノピラノシル〕−２１０−〔β−Ｄ−グルコピラノシ
ル（１→３）α−Ｌ−アラビノビラノシル］−ソーヤサ
ポゲノールＡ（ソーヤサポニンＡ２、Ｃ，３Ｈ８６Ｏ２
４・３Ｈ２０、融点２３１〜２３３℃）が挙げられる。

この内、ソーヤサポニンＩの含有量が最も多い。

なお、大豆の中には前述した式（１）、（ｌ］）の構造
を有するサポニンの他に極く微量の下記ソーヤサポゲノ
ールＣ．Ｄ．Ｅを骨格とする構造未定のサポニン類も含
まれており、これらの物質もこの発明のサポニン成分に
含まれる。Ｒ１ −ＨソーヤサポゲノールＣ Ｒ，一ー一０ＣＨ３ソーヤサポゲールＤ Ｒｌ−一０ソーヤサポゲールＥ 前記個々の化合物は、前述のごとくして得られたソーヤ
サポニン（大豆総サポニン）を、例えばクロロホルム／
メタノール／水系あるいはｎ−ブタノール／酢酸／水系
の展開溶剤を用いたシリカゲルのカラムクロマトグラフ
イ一、高速液体クロマトグラフイ一などにより各構成サ
ポニンに分離精製することによつて得ることが出来る。

しかしながら、経済的見地から個々の構成サポニンに分
離して使用するより、混合物として用いる方が好ましい
。この発明における組成物の投与は経口用または非経口
用のいずれであつてもよい。

経口用剤形としては通常散剤、錠剤、乳剤、カプセル剤
、茶剤、顆粒剤、液剤（チンキ剤、流工キズ剤、酒精剤
、懸濁剤、リモナーデ剤、シロツプ剤などを含む）など
が挙げられる。また非経口剤形としては、注射剤、点滴
剤、軟膏、硬膏剤、液剤（酒精剤、チンキ剤、ローシヨ
ン剤等を含む）、湿布剤（パツプ剤、バスタ一剤）塗布
剤、噴霧剤、散布剤、リニメント剤（塗擦剤）、クリー
ム剤、乳剤、浴剤などが挙げられる。投与量は病状に応
じて異なるが、経口用の製剤の場合、サポニン成分とし
て成人１日当り５０〜１０００即、好ましくは１００〜
６００即を２〜３回に分けて投与することによつて効力
を発揮することが出来る。

又注射剤、点滴剤の場合、１日１０〜〜８００η、好ま
しくは３０ｍク〜６００ワを１〜３回に分けて投与する
。又、非経口用の外用の場合、サポニン成分として０．
０１〜５％濃度の配合でよく、好ましくは０．１〜１％
の製剤として使用するのがよい。ここに使用される固体
または液体の賦形剤としては、当該分野で公知のものが
使用される。

ただ後述のような１回の投与量に必要なこの発明の化合
物を含むように製剤化するのが望ましい。いくつかの例
を挙げると散剤、その他の内服用粉末剤における賦形剤
としては、乳糖、澱粉、デキストリン、リン酸カルシウ
ム、炭酸カルシウム、合成および天然ケイ酸アルミニウ
ム、酸化マグネシウム、乾燥水酸化アルミニウム、ステ
アリン酸マグネシウム、重炭酸ナトリウム、乾燥酵母な
どが挙げられる。外用散剤の場合は酸化亜鉛、タルク、
澱粉、カオリン、ホウ酸末、ステアリン酸亜鉛、ステア
リン酸マグネシウへ炭酸マグネシウム、沈降炭酸カルシ
ウム、次没食子酸ビスマス、硫酸アルミニウムカリウム
末などが挙げられる。

液剤における賦形剤としては水、グリセリン、プロピレ
ングリコール、単シロツプ、エタノール、脂肪油、エチ
レングリコール、ポリエチレングリコール、ソルビトー
ルなどが挙げられる。さらに軟膏剤の場合には脂肪、脂
肪油、ラノリン、ワセリン、グリセリン、ミツロウ、モ
クロウ、パラフイン、流動パラフイン、樹脂、高級アル
コール、プラスチックス、グリコール類、水界面活性剤
などを組み合わせて作つた疎水性基剤あるいは親水性基
剤（乳剤性基剤、水溶性基剤および懸濁剤性基剤を含む
）が賦形剤として使用される。溶剤とするには、本発明
のサポニン成分にホウ硝や硫酸カリウム等の希釈剤を加
えて製剤化するのが好ましい。

次にこの発明の大豆サポニンの製造例を示す。

製造例 １大豆種子粉末１．０ｋ９を、１００１のｎ−
ヘキサンで２回１時間ずつ加熱抽出し脱脂した後、１０
０１ずつのメタノールで２回３時間ずつ加熱抽出した。

この抽出液を減圧蒸留して溶剤を留去した後、残留物に
１０１の水飽和ｎ−ブタノールを用いて約１時間ずつ３
回蒸気浴上で攪拌しながら溶解させた。得られた溶液を
３１（７）ｎ−ブタノール飽和水を用いて３回水洗して
夾雑する糖類や色素を水に移行させて取り除き、分離し
た水飽和ｎ−ブタノール層を８０℃以下で減圧蒸留、乾
固した。残留物を３１のメタノールに溶かし、６０１の
エーテル中に撹拌下に注入した。１日静置後、析出物を
濾別し、６０℃以下で減圧乾燥して大豆サポニン３０ｙ
を得た。

製造例 ２ 大豆種子粉末１０ｋｇを１００１のｎ−ヘキサンで２回
１時間ずつ加熱抽出し脱脂した。

その脱脂乾燥物を１０１の９９％メタノールを加え６０
℃で１時間加熱抽出した。この操作を３回行い、各濾液
を合し、６０℃以下の温度で減圧濃縮乾燥した。この残
留物を水１００ｍ１に溶解した溶液を、合成樹脂吸着剤
セルヴアクロムＸＡＤ−Ｔｙｐｅ２の１．８ｋｇを３ｆ
？の水に分散させて内径８？のカラムに充填したセルヴ
アクロムＸＡＤ−Ｔｙｐｅ２カラムの上部から注入し、
流速２０ｍ１／分の速度で通過させサポニンを吸着させ
た。さらに流下物の着色のなくなるまで水を追加流下せ
しめ不純物を除去した。着色がなくなつてから９９％メ
タノールを、流速１０ｍ１／分の速度で流下させ、セル
ヴアクロムに吸着しているサポニンを溶離させた。溶離
の完了は薄層クロマトグラフイ一〔担体：キーゼルゲル
Ｆ２５４、溶剤：クロロホルム／メタノール／水（６５
：３５：１０下層）、検出：１％第二硫酸セリウム−１
０％硫酸噴霧後１０５℃で５分加熱］でチエツクした。
５ｆの９９％メタノールの流下によつて完全にサポニン
を溶離した。

得られた溶離液を６０℃以下で蒸発乾固し、残留物を６
０℃で乾燥して黄褐白色の大豆サポニン末３２７を得た
。製造例 ３ 大豆種子の粉末１０ｋｇをｎ−ヘキサン１００１で加熱
抽出を２回行い、脱脂した。

脱脂粉末は９８％メタノール１００／？．で、２回煮沸
下に３時間ずつ抽出処理した。抽出液を減圧蒸留に付し
て、１．４ｋｇの工キズを得た。この工キズをｎ−ブタ
ノール：水（１：１）の混液１００′に溶解し、分配し
静置した。ｎ−ブタノール移行部を分取し、減圧下に溶
媒を留去した後、９８％メタノール５１に溶解し、エチ
ルエーテル１００１１１（ＦＣ少量ずつ加えた。生じた
沈澱を▲取し、ついで沈澱に水飽和ｎ−ブタノール１０
１を加え、不溶部と可溶部に分けた。可溶部を減圧蒸留
して溶媒を完全に留去し、残留物６４７を得た。この残
留物はｎブタノール：水（１：２）混液１０１を用いて
分配した。水移行部は減圧留去し、得られた残留物（３
２７）をシリカゲルカラムクロマトグラフイー〔タルク
社製シリカゲルＧ（７０〜２３０メツシユ）、溶出溶媒
一クロロホルムーメタノール水（６５：３５：１０の下
層〜６：４：１）］に付した。溶出液を薄層クロマトグ
ラフイ一〔担体一シリカゲル６０Ｆ２５４、展開溶媒一
クロロホルムーメタノール一水（６：４：１）、発色剤
−１％硫酸第２セリウム−１０％硫酸溶液噴霧］で検し
、Ｒｆ約０．２５とＲｆ約０．３０のそれぞれに出現す
るソーヤサポニンＡ１とソーヤサポニンＡ２を含む各フ
ラクシヨンを分取した。各フラクシヨンは溶媒を減圧留
去し、各残留物を１００ｍ１の水に懸濁させ、１ｙの陽
イオン交換樹脂（ダウエツクス５０ＷＸ８）を加え、よ
く攪拌した。懸濁物は透明に溶解した。沢過したそれぞ
れの水溶液を減圧下で蒸発乾固し、白色粉末のソーヤサ
ポニンＡｌｌ．９７およびソーヤサポニンＡ２ｌ．２ｙ
を得た。各生成物は水性メタノールから再結晶して純品
とした。ソーヤサポニンＡ１は以下の性質を有する。

（１） Ｍｐ．２４Ｏ〜２４２℃である。（２） 〔α
際＋２３．２４（Ｃ−０．９、メタノール）の旋光度を
有する。

（３）赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ．ｃｍ−１）は３
３７５（プロード、強）、２９１８、１７３７、１６３
２、１３８５（プロード）、１０７４（プロード、強）
、１０２７（プロード）に特有の吸収極大を有する。

（４） ２１０ｎｍより長波長には紫外線吸収を示さな
い。

（５） １３Ｃ一核磁気共鳴スペクトル（Ｄ５−ピリジ
ンδｃ）は、１７２．１（ＣＯＯＨ）、１４４．０（Ｃ
ｌ３）、及び１０８，１、１０６．５、１０５．７、１
０４，５、１０２．９（以上アノメリツクＣ）を示す。

（６）溶解性はメタノールに溶けやすく、水、ピリジン
、ジメチルスルホキシド、エタノールに可溶、アセトン
、クロロホルム、エーテルに不溶である。（７）臭はな
く、水溶液は弱酸性を示す（水１ｍ１にソーヤサポニン
Ａ，ｌＯηを溶解させた溶液はＰＨ６を示す）。

（８）無色の微細粉末状結晶（水性メタノールから結晶
化）である。

（９）シリカゲルを用いた薄層クロマトグラフイ一（プ
レコートのシリカゲル６０Ｆ２５４、０．２５關、タル
ク社製、展開溶媒；クロロホルムリメタノール：水＝６
：４：１）に付した場合Ｒｆ値０．２５を示す。

薄層クロマトグラフ上１％の硫酸第２セリウムと１０％
の硫酸の混合液を噴霧し、加熱すると青紫色を呈す。

（代）メタノリシス（９％の塩酸一乾燥メタノール中加
熱還流する）とメチルガラクトシド、メチルアラビノシ
ド、メチルグルクロニドをそれぞれ１モルとメチルグル
コシド２モルを与える。

また箱守法（沃化メチル、ジメチルスルホキシド、水素
化ナトリウム）によつて、メチル化して得られる完全メ
チル化体（分子式：Ｃ７７Ｈｌ３２Ｏ２９）を還元後メ
タノリシスするとメチル３・４−ジ一０−メチルグルコ
ピラノシド、メチル３・４・６−トリ−０−メチルガラ
クトピラノシド、メチル２・４−ジ一０−メチル アラ
ビノピラノシドをそれぞれ１モルとメチル２・３・４・
６−テトラ−０−メチルグルコピラノシドを２モル与え
る。

またサポゲノールとして３・２２・２４−トリ−０−メ
チルソーヤサポゲノールＡ（Ｃ３３Ｈ５６Ｏ４）を１モ
ル与える。ソーヤサポニンＡ２は以下の性質を有する。

（１） Ｍｐ．２３ｌ〜２３３℃である。（２） 〔α
柵＋２３．９３（Ｃ−０．９、メタノール）の旋光度を
有する。

（３）赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ．ｃｒｎ−１）は
３３５０（プロード、強）、２９２５、１７４０、１６
４０、１３８５（プロード）、１０２７（プロード、強
）に特有の吸収極大を有する。

（４） ２１０ｎｍより長波長には紫外線吸収を示さな
い。（５） １３Ｃ一核磁気共鳴スペクトルは、１７２
．２（ＣＯＯＨ）、１４４．０（Ｃｌ３）、及び１０８
．３、１０６．０１１０５。

３と１０４．７（以上アノメリツクＣ）を示す。

（６）溶解性はメタノールに溶けやすく、水、ピリジン
、ジメチルスルホキシド、エタノールに可溶、アセトン
、クロロホルム エーテルに不溶である。

（７）臭はなく、水溶液は弱酸性を示す（水１ｍ１にソ
ーヤサポニンＡ２５ｍ９を溶解させた溶液はＰＨ６を示
す）。

（８）無色の微細結晶（水性メタノールから結晶化）で
ある。

（９）シリカゲルを用いた薄層クロマトグラフイ一（プ
レコートのシリカゲル６０Ｆ２５４、０．２５關、タル
ク社製、展開溶媒；クロロホルムリメタノール：水−６
：４：１）に付した場合Ｒｆ値０．３を示す。

薄層クロマトグラフ上１％硫酸第２セリウムと１０％硫
酸の混合液を噴霧し、加熱すると青紫色を呈す。

ＵＯ）メタノリシスすると、メチルグルコシド、メチル
ガラクトシド、メチルアラビノシド、メチルグルクロニ
ドをそれぞれ１モル与える。

箱守法によつてメチル化して得られる完全メチル化体（
Ｃ６８Ｈｌｌ６Ｏ２４）を還元後メタノリシスするとメ
チル化糖としてメチル３・４−ジ一０メチルグルコピラ
ノシド、メチル２・４−ジ０−メチルアラビノビラノピ
ラノシド、メチル２・３・４・６−テトラ−０−メチル
ガラクトピラノシド、メチル２・３・４・６−テトラ０
−メチルグルコビラノシドをそれぞれ１モル与え、メチ
ル化サポゲノールとして３・２２・２４−トリ−０−メ
チルソーヤサポゲノールＡを１モル与える。製造例 ４ 大豆種子の粉末２ｋｇを２０１（７）ｎ−ヘキサンで２
回加熱抽出を行ない脱脂した。

その脱脂乾燥物を２０１の９８％メタノールに加え、煮
沸下に２回、３時間ずつ加熱抽出した。この抽出液を減
圧蒸留に付して１６０７の工キズを得た。この工キズを
ｎ−ブタノール：水（１：１）の混液２０ｆに溶解し、
分配し静置した。ｎ−ブタノール移行部を分取し、減圧
下に溶媒を留去して得た残留物（５０７）を、９８％メ
タノール１１に溶解し、エチルエーテル２０ｆ中に少量
ずつ加えた。生じた沈澱を沢取し（３５７）、これをシ
リカゲルカラムクロマトグラフイ〔タルク社製シリカゲ
ルＧ（７０〜２３０メツシユ）、溶出溶媒＝クロロホル
ム−メタノール一水（６５：３５：１０の下層）］に付
し、活性炭で処理して、総ソーヤサポニン１２７を得た
。これをさらに遠心液体クロマトグラフイ一（ＫＴゲル
使用、５００ｒｐｍ）に付して、ソーヤサポニンＩ（２
．５２７）、ソーヤサポニン（０．４５７）、ソーヤサ
ポニン（０．２１ｙ）、ソーヤサポニンＡ１ （０．４
０７）およびソーヤサポニンＡ２（０．４８７）を各々
単離した。

次にこのようにして製造した大豆サポニンの薬理試験結
果を示す。

トロンビンのフイブリノーゲン凝固作用に対する大豆サ
ポニンの抑制効果血液血漿中のフイブリノーゲンの緩衝
液にトロンビンを作用させるとフイプリンを生じ凝固す
ることはよく知られている。

この凝固作用を抑制する作用（抗トロンビン作用）を有
する物質が添加されると凝固作用が抑制され凝固時間が
延長される。この発明の大豆サポニンとヘパリンの抗ト
ロンビン作用を下記の試験を行つて比較した。フイブリ
ノーゲン液（牛血漿より得たフイブリノーゲンを０．１
５ＭＮａＣ１／０．０５Ｍトリス緩衝（ＰＨ７．５）液
に溶解した０．５％牛フイブリノーゲン液）の１ｍ１づ
つに、２種の大豆サポニン（製造例１で得た大豆サポニ
ンと製造例４で得たソーヤサポニンＩ）の各種濃度の水
溶液及びヘパリンの１０Ｕ／ｍｌを水溶液（ナトリウム
塩）の各０．１ｍ１を添加した各被検液並びに上記フイ
プリノーゲン液の０．１ｍ１に水０．１ｍ１を加えたコ
ントロール液を作製した。これらの液のそれぞれにトロ
ンビン液（０．２Ｕ／ｍｌ）を０．１ｍ１づつ添加しそ
の凝固時間を２５℃で測定した。結果は下記のとおりで
あつた。上記の結果から大豆サポニン類は凝固時間を延
長することは明らかであり顕著な抗トロンビン作用を有
する。

またヘパリンの１ηは１３０Ｕに相当するのでその１０
Ｕ／ｍｌは７７μ７／ｍｌに相当する。従つて重量単位
で大豆サポニン類とヘパリンとの凝固時間を比較すると
大豆サポニン類の方が優れていることが分かる。次に臨
床例によつて製造例１で得た大豆サポニンの効力を説明
する。

臨床例 １ Ｔ．Ｓ．４６才女性 主婦 病名゛血栓閉塞性静脈炎 現病歴：２年前より左右下肢に静脈瘤を生じ冷えたり疲
れたりすると非常に痛むので他病院で治療を受けたが、
殆んど改善されなかつた。

最近下肢全体に浮腫を生じ殊に左下肢が固くなりその指
が少し変色してきたので血管撮影をしたところ血管静脈
が閉塞している事が見出され、早速入院手術の要ありと
いわれたので来院した。治療結果：血液検査結果は、白
血球数：７０００／土中性脂肪：１４１ワ／Ｄｊ、総コ
レステロール：１５８η／ＤｌｌＨＤＬコレステロール
：４８ｍ′／ｄｌであり正常であつた。

入院安静を保たしめると共に、製造例１の方法で得た大
豆サポニンを１日当り５００ｍクを散剤として１日２回
分服し連日投与した。

１ケ月後には、足指の変色は全くなくなり足の皮膚温度
が上昇し、両肢とも血管の怒張がほとんどなくなり浮肺
もとれ痛みも軽減した。

６ケ月後には、自覚症状も平常に戻り、レントゲン血管
撮影によつても血栓閉塞は殆どなくなり造影剤もほぼ正
常に通過し、痛みは全くなく通院に切替えた。

８ケ月後には静脈瘤も殆んど認められなくなり、正常生
活にもどることができた。

臨床例 ２Ｌ．Ｍ．５２才 男性 公務員 病名：脳梗塞症及び高脂血症 現病歴：１年前より動脈硬化症、高脂血症と診断され、
他病院で治療を受けていたが、２日前より言葉がもつれ
、左半身に運動麻痺を生じ時々意識が遠くなる症状が出
てきたので来院した。

治療経過：初診血液検査結果は、白血球数：１１５００
／ｍ邊、中性脂肪：２８２即／ｄｌ、総コレステロール
：２４８ワ／Ｄｊ、ＨＤＬコレステロール：４１ヮ／ｄ
ｌであり、高脂血症が認められた。断層レントゲン写真
で、右第３脳室に軽度の出血固化層が発見された。更に
左上下肢の鍵反射が充進しており、右脳血症と診断した
。製造例１の方法で得た大豆サポニン２００ワづつを１
日３回計６００７ｒ１９を空腹時に内服投与し、リンゲ
ル及び水溶性ビタミン類を静注併用した。２週間後の断
層写真診断では右第３脳室に認められた出血固化層は完
全に消失し早期に吸収されており、又左半身の麻痺も殆
んど認められなくなつた。

３週間後にぱ言語も非常に明確となり血液検査は、白血
球：７２００／ＭｌＬ．中性脂肪：１６０η／Ｄｌｌ総
コレステロール：１７７ヮ／ＤｌｌＨＤＬコレステロー
ル：６１Ｔ９／ｄｌで殆んど平常の血液所見となり、高
脂血症も大巾に改善された。

脳部における出血層の吸収は最近１ケ月以上要するのが
普通であるが、本例の場合著しく早く改善されたといえ
る。臨床例 ３ Ｍ．Ｓ．４３才女性 主婦 病名 脳虚血症 現病歴：１年前高血圧、動脈硬化症と診断され、他病院
で治療したが改善が認められず、１０日前より嘔吐を伴
うめまいが１日数回起るようになつたので来院した。

脳血管レントゲン撮影により、脳血管狭小がみられ、脳
血管に虚血症状が認められ一過性の脳虚血症と診断され
た。

血圧は最高１６８、最低９８であつた。

また血液検査は、中性脂肪：２６４η／ｄｌ、総コレス
テロール：２００ｍｙ／Ｄｌ，．ＨＤＬコレステロール
：３１〜／ｄｌであり、高脂血症状を示し心電図で冠不
全が認められた。製造例１の方法で得た大豆サポニン１
日４００ηを散剤として１日空腹時２回に分服せしめた
。１ケ月後には、嘔吐、目まいが殆んどなくなり２ケ月
後には、これらの自覚症状は全くなくなつた。

２ケ月後の脳血管レントゲン撮影では脳血管の虚血症状
は全く認められず、血液検査結果は、中性脂肪：１５２
Ｗ１９／Ｄｌｌ総コレステロール：１６８ｍ９／Ｄｌ，
．ＨＤＬコレステロール：４８ヮ／ｄｌであり大巾な改
善が認められた。

又、血圧は最高１４２、最低９１となつた。３ケ月後に
は大豆サポニン服用をやめ社会生活復帰をした。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 大豆サポニン成分と医薬的に受容な賦型剤とからな
   る抗トロンビン様薬剤。 ２ 大豆サポニン成分が３−０−〔α−Ｌ−ラムノピラ
   ノシル（１→２）−β−Ｄ−ガラクトピラノシル（１→
   ２）−β−Ｄ−グルクロノピラノシル〕−ソーヤサポゲ
   ノールＢ（ソーヤサポニンＩ）である特許請求の範囲第
   １項記載の抗トロンビン様薬剤。