JPS5945874A - デンプン発酵性酵母菌 - Google Patents
デンプン発酵性酵母菌Info
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- JPS5945874A JPS5945874A JP57157296A JP15729682A JPS5945874A JP S5945874 A JPS5945874 A JP S5945874A JP 57157296 A JP57157296 A JP 57157296A JP 15729682 A JP15729682 A JP 15729682A JP S5945874 A JPS5945874 A JP S5945874A
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- Japan
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- ethanol
- aureobasidium
- satucharomyces
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- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02E—REDUCTION OF GREENHOUSE GAS [GHG] EMISSIONS, RELATED TO ENERGY GENERATION, TRANSMISSION OR DISTRIBUTION
- Y02E50/00—Technologies for the production of fuel of non-fossil origin
- Y02E50/10—Biofuels, e.g. bio-diesel
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、デンプンを発酵して直接エタノールを製造す
ることができるデンプン発酵性酵母並びにこれを使用す
るエタノールの製造法に関する。
ることができるデンプン発酵性酵母並びにこれを使用す
るエタノールの製造法に関する。
従来、デンプンからエタノール金製造する方法としては
、デンプンを先ずアミラーゼ又は酸等によって糖化し、
次いで生成したブドウ糖等の糖を酵母により発酵させて
エタノールに変換するトイう二段階による方法がとられ
ていた。
、デンプンを先ずアミラーゼ又は酸等によって糖化し、
次いで生成したブドウ糖等の糖を酵母により発酵させて
エタノールに変換するトイう二段階による方法がとられ
ていた。
しかし、斯かる二段階による方法は工業的に実施する場
合厄介であり、デンプンから一段階でエタノールを製造
する方法の開発が望まれていた。
合厄介であり、デンプンから一段階でエタノールを製造
する方法の開発が望まれていた。
デンプンを直接エタノールに変えることのできる酵母と
して、すでにサツカロミセス・ティアスタテイクス（Ｓ
ａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｄｉａｓｔａｔｉｃｕｓ
）が知られているが、このデンプン発酵能は極めて弱く
（第２図参照）、到底実用に供されるものではなかった
。
して、すでにサツカロミセス・ティアスタテイクス（Ｓ
ａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｄｉａｓｔａｔｉｃｕｓ
）が知られているが、このデンプン発酵能は極めて弱く
（第２図参照）、到底実用に供されるものではなかった
。
斯かる実情において、本発明者は、テンノン発酵性菌、
すなわちデンプンを発酵して直接エタノールを生成する
ことのできる菌を見出すべく、種々研究を行った結果、
サツカロミセス・ディアスクティクスに属する菌株とオ
ーレオパシデイウム・プルランス（Ａｕｒｅｏｂａｓｉ
ｄｉｕｍ ｐｕｌｌｕｒａｎｓ ）に属する菌株全細胞
融合して得られる酵母菌が優れたデンプン発酵性を有す
ることを見出した。
すなわちデンプンを発酵して直接エタノールを生成する
ことのできる菌を見出すべく、種々研究を行った結果、
サツカロミセス・ディアスクティクスに属する菌株とオ
ーレオパシデイウム・プルランス（Ａｕｒｅｏｂａｓｉ
ｄｉｕｍ ｐｕｌｌｕｒａｎｓ ）に属する菌株全細胞
融合して得られる酵母菌が優れたデンプン発酵性を有す
ることを見出した。
従って、本発明の目的は、デンプン発酵性を有するサツ
カロミセス・ディアスクティクス扁２２０及び屋２５１
と命名された新規な酵母菌を提供せんとするにある。
カロミセス・ディアスクティクス扁２２０及び屋２５１
と命名された新規な酵母菌を提供せんとするにある。
本発明の他の目的は、当該酵母菌を用いてデンプン全発
酵せしめてエタノール全製造する方法を提供せんとする
ものである。
酵せしめてエタノール全製造する方法を提供せんとする
ものである。
本発明のデンプン発酵性酵母菌は、例えばサツカロミセ
ス・ディアスクティクスに属する菌、例えばサツカロミ
セス・ディアスクティクスＩＦＯ−１０４６株とオーレ
オバシデイウムφグルランスに属する菌、例えばオーレ
オバシデイウムープルランスＨ−２８（微工研菌寄第６
７０４号）全細胞融合することによって得られる１、 Ｈ−２８株は次の両手的性質を有する。
ス・ディアスクティクスに属する菌、例えばサツカロミ
セス・ディアスクティクスＩＦＯ−１０４６株とオーレ
オバシデイウムφグルランスに属する菌、例えばオーレ
オバシデイウムープルランスＨ−２８（微工研菌寄第６
７０４号）全細胞融合することによって得られる１、 Ｈ−２８株は次の両手的性質を有する。
１、 コロニーは２５℃。麦芽寒天培地上で、はじめ白
色〜淡桃色、しだいに褐色、のち黒色に変色する、栄養
菌糸は、はじめ薄膜、無色、のち厚膜になり、褐色に変
色する。隔壁金有する。分枝しその巾７．３μｍになる
。厚膜胞子は、栄養菌糸の分節によって形成される分節
型分生子で厚膜、暗褐色、単細胞〜多細胞で大きさは変
化に富む。６〜１０Ｘ８Ｘ１７．５μｍ１成熟した胞子
はイボ状の突起を有する。分生子柄を欠く。分生子は、
栄養菌糸の刺状突起から同調的に出芽によって形成され
る。
色〜淡桃色、しだいに褐色、のち黒色に変色する、栄養
菌糸は、はじめ薄膜、無色、のち厚膜になり、褐色に変
色する。隔壁金有する。分枝しその巾７．３μｍになる
。厚膜胞子は、栄養菌糸の分節によって形成される分節
型分生子で厚膜、暗褐色、単細胞〜多細胞で大きさは変
化に富む。６〜１０Ｘ８Ｘ１７．５μｍ１成熟した胞子
はイボ状の突起を有する。分生子柄を欠く。分生子は、
栄養菌糸の刺状突起から同調的に出芽によって形成され
る。
ダ円形〜卵形２．６〜４．６Ｘ５．６〜９．６μｍ、無
色４、この第１分生子から酵母様出芽により、前者より
小形の第２分生子が形成される。分生子形成に伴ない粘
質をおびる。
色４、この第１分生子から酵母様出芽により、前者より
小形の第２分生子が形成される。分生子形成に伴ない粘
質をおびる。
２、糖の資化性
グルコース ＋
ガラクトース 士
麦芽糖 十
ラフィノース ＋
シ ョ 糖 手孔 糖
十 トレハロース 士 セロビオース 士 メリビオース 士 メリチトース ＋ キシロース ＋ Ｌ−ンルボース ＋ Ｄ−アラビノース ＋ Ｌ−アラビノース ＋ リボース ＋ Ｌ−ラムノース ＋ エリスリトール ＋ マンニトール 士 イノシトール ＋ 乳 酸 十 コハク酸 十 クエン酸 − 酢 酸 十 イヌリン ＋ 可溶性デンプン ＋ エタノール − グリセロール ＋ ３、生理的性質 グルコースの発酵能 − ビタミン要求性 − 生育限界温度 ３０〜３２ ”Ｃ デンプン様物質生産 − 尿素分解能 − アルブチン分解能 − シクロヘキシミド耐性 − 以上の性質は、Ｇ、Ｓ、Ｄｅｓ Ｈｏｏｇ ＆ Ｅ、Ｊ
。
十 トレハロース 士 セロビオース 士 メリビオース 士 メリチトース ＋ キシロース ＋ Ｌ−ンルボース ＋ Ｄ−アラビノース ＋ Ｌ−アラビノース ＋ リボース ＋ Ｌ−ラムノース ＋ エリスリトール ＋ マンニトール 士 イノシトール ＋ 乳 酸 十 コハク酸 十 クエン酸 − 酢 酸 十 イヌリン ＋ 可溶性デンプン ＋ エタノール − グリセロール ＋ ３、生理的性質 グルコースの発酵能 − ビタミン要求性 − 生育限界温度 ３０〜３２ ”Ｃ デンプン様物質生産 − 尿素分解能 − アルブチン分解能 − シクロヘキシミド耐性 − 以上の性質は、Ｇ、Ｓ、Ｄｅｓ Ｈｏｏｇ ＆ Ｅ、Ｊ
。
Ｈｅｒｍａｎｉｄｅｓ−Ｎｉｊｈｏｆ：” Ｔｈｅ ｂ
ｌａｃｋ ｙｅａｓｔｓ ａｎｄａｌ目ｅｄ ｈｙｐｈ
ｏｍｙｃｅｔｅｓ”、１４２頁に記載のＡｕｄｉｏｂａ
ｓｉｄｉｕｍ ｐｕｌ Ｉｕｌａｎｓと一致した。従っ
てオーＶオパシデイウム・プルランスＨ−２８と命名し
た。
ｌａｃｋ ｙｅａｓｔｓ ａｎｄａｌ目ｅｄ ｈｙｐｈ
ｏｍｙｃｅｔｅｓ”、１４２頁に記載のＡｕｄｉｏｂａ
ｓｉｄｉｕｍ ｐｕｌ Ｉｕｌａｎｓと一致した。従っ
てオーＶオパシデイウム・プルランスＨ−２８と命名し
た。
細胞融合は、例えば次のごとくして行われる。
（１） 融合株の調製
サツカロミセス・ディアスタテイクスＩＦＯ−１０４６
株（以下ｒ １０４６閑株」と称する）とオーレオバシ
テイウム・プルランスＨ−２８（以下ｒＨ−２８菌株」
と称する）の対数増殖期の細胞を集め、それぞれについ
て、常法に従って、２−メルカプトエタノールとエチレ
ンジアミンテトラアセテート各ｌチを含む水溶液で前処
理を行う。この前処理は約３０℃の温度で約１０分間行
えばよい。
株（以下ｒ １０４６閑株」と称する）とオーレオバシ
テイウム・プルランスＨ−２８（以下ｒＨ−２８菌株」
と称する）の対数増殖期の細胞を集め、それぞれについ
て、常法に従って、２−メルカプトエタノールとエチレ
ンジアミンテトラアセテート各ｌチを含む水溶液で前処
理を行う。この前処理は約３０℃の温度で約１０分間行
えばよい。
次いで前処理した各細胞に細胞壁溶解酵素を作用させて
プロトプラスト化する。当該酵素は細胞壁を溶解するも
のであればよく、例えばザイモリアーゼ（Ｚｙｍｏｌｙ
ａｓｅ ） −５０００、カタツムリ消化管酵素等が使
用される。プロトプラスト化は例えば各細胞１０８個／
ｍＮｒリン酸緩衝液に懸濁し、これに上記酵素０．４
ｍｙ ／ ｍｌ及びｉｏｍＭの２−）ｋ−ｈブトエタノ
ール、塩化カリウムを添加し、約３０℃の温度で数時間
処理することによって行われる。
プロトプラスト化する。当該酵素は細胞壁を溶解するも
のであればよく、例えばザイモリアーゼ（Ｚｙｍｏｌｙ
ａｓｅ ） −５０００、カタツムリ消化管酵素等が使
用される。プロトプラスト化は例えば各細胞１０８個／
ｍＮｒリン酸緩衝液に懸濁し、これに上記酵素０．４
ｍｙ ／ ｍｌ及びｉｏｍＭの２−）ｋ−ｈブトエタノ
ール、塩化カリウムを添加し、約３０℃の温度で数時間
処理することによって行われる。
このようにして得られた１０４６菌株とＨ−２８菌株の
２種のプロトプラストラ細胞融合させる。細胞融合は、
例えば３０チポリエチレングリコール−６０００及び５
０ｍＭ−塩化カルシウムを含む溶液に両者全懸濁し、約
３０℃の温度に約１時間放置することによって行われる
、 更に、斯くして得られた融合株（融合プロトプラスト）
全適当な培地で培養して再生細胞を得る。
２種のプロトプラストラ細胞融合させる。細胞融合は、
例えば３０チポリエチレングリコール−６０００及び５
０ｍＭ−塩化カルシウムを含む溶液に両者全懸濁し、約
３０℃の温度に約１時間放置することによって行われる
、 更に、斯くして得られた融合株（融合プロトプラスト）
全適当な培地で培養して再生細胞を得る。
（２）融合株の単離
上述の如くして得られた再生細胞中には、融合株の他に
、未融合親株が含まれているので、次の如くして融合株
全分離する。
、未融合親株が含まれているので、次の如くして融合株
全分離する。
まず、再生細胞を、ラフィノースを含む胞子形成用培地
中で培養して胞子を形成させた後、約６０℃の温度で加
熱処理して滅菌する。斯くするとき、Ｈ−２８菌株は胞
子を形成しないので滅菌されて除去される。
中で培養して胞子を形成させた後、約６０℃の温度で加
熱処理して滅菌する。斯くするとき、Ｈ−２８菌株は胞
子を形成しないので滅菌されて除去される。
次いで、この胞子を、可溶性デンプン、ペプトン、酵母
エキスを含む培地に接種して細胞増殖させ、この細胞を
乳糖を炭素源とする培地にレプリカして培養する。この
とき、１０４６菌株は乳糖を資化しないので増殖しない
が、融合株は乳糖を資化して増殖するので、融合株を単
離することができる。
エキスを含む培地に接種して細胞増殖させ、この細胞を
乳糖を炭素源とする培地にレプリカして培養する。この
とき、１０４６菌株は乳糖を資化しないので増殖しない
が、融合株は乳糖を資化して増殖するので、融合株を単
離することができる。
この融合株についてデンプン発酵性を調べたところ、２
つの融合株が単離され、これらをそれぞれサツカロミセ
ス・ディアスタティクスＡ ２２０及びＡ２５１（微工
研菌寄第６７０５号）と命名した。
つの融合株が単離され、これらをそれぞれサツカロミセ
ス・ディアスタティクスＡ ２２０及びＡ２５１（微工
研菌寄第６７０５号）と命名した。
これらの菌株は、何れもＬ−アラビノース及びメレジト
ースを資化せず、可溶性デンプンからの高いエタノール
生産性を有する点で１０４６菌株と異なる。更に両者は
次のような相違を有する。
ースを資化せず、可溶性デンプンからの高いエタノール
生産性を有する点で１０４６菌株と異なる。更に両者は
次のような相違を有する。
このようにして得られた本発明の４２２０及び扁２５１
株は次の如き菌学的性質を有する。
株は次の如き菌学的性質を有する。
■ 生育状態及び形状
■、生理的性質
Ａ ２２０ Ａ ２５１
脂肪の分解 −−
尿 素 −−ゼラチン液化
−− 生育最高シュクロース濃度 ５０％ ｌカ
ロチノイド生成 −− 有機酸の生成 −− デンプン様物質の生成 −− ビタミン要求性 −− （３９炭素源の資化性 墓２２０ 屋２５１ （１）Ｄ−アラビノース −−（２）Ｌ
−アラビノース −−（３）Ｄ−リボ
ース −−（４）Ｄ−キシロース
−−（５）Ｄ−グルコース 発
酵性 十 干資化性 ＋
＋ （６）Ｄ−マンノース ＋
＋（７）Ｄ−ガラクトース 発酵性 十αす＋（
遅）資化性 ＋ ＋ （８）Ｌ−ラムノース −−（９）Ｄ
−フルクトース ＋ ＋σ
ＱＬ−ソルボース −−〇麦芽糖
発酵性 十 干資化性 ＋
＋ ４２シ ヨ 糖 発酵性 ＋ ＋資化
性 十 ＋ 罎 糖 発酵性 −− 資化性 −− σ→メリビオース −−に）セロビ
オース −−α０ラフイノース
発酵性 ＋（１／３） ＋ （１／３）資化
性 十 十 １１７）フルクトース −−Ｑ８デ
キストリン ＋ ＋Ｑ→
可溶性デンプン 発酵性 ■ 柑資化
性 十 干 （イ）コハク酸 −一 本発明のＡ２２０及びＡ２５１菌株は可溶性デンプンか
らエタノールを生成する場合にのみ親株に比べ高い値を
示し、他の糖類の場合には差違が認められない（第１図
）。第１図は、各種糖類を１０チ含有する以外は後述の
実施例２と同じ培地を用い、発酵’１３０Ｇで行ったと
きの結果を示す。尚第１図のＡは糖類がブドウ糖、Ｂは
マルトース、Ｃはラフィノース、Ｄは可溶性デンプン、
Ｅはショ糖であり、曲線（１）は１０４６菌株、曲線（
２）はＡ２２０株、曲線（３）はＪＦＬ２５１株を示す
。
−− 生育最高シュクロース濃度 ５０％ ｌカ
ロチノイド生成 −− 有機酸の生成 −− デンプン様物質の生成 −− ビタミン要求性 −− （３９炭素源の資化性 墓２２０ 屋２５１ （１）Ｄ−アラビノース −−（２）Ｌ
−アラビノース −−（３）Ｄ−リボ
ース −−（４）Ｄ−キシロース
−−（５）Ｄ−グルコース 発
酵性 十 干資化性 ＋
＋ （６）Ｄ−マンノース ＋
＋（７）Ｄ−ガラクトース 発酵性 十αす＋（
遅）資化性 ＋ ＋ （８）Ｌ−ラムノース −−（９）Ｄ
−フルクトース ＋ ＋σ
ＱＬ−ソルボース −−〇麦芽糖
発酵性 十 干資化性 ＋
＋ ４２シ ヨ 糖 発酵性 ＋ ＋資化
性 十 ＋ 罎 糖 発酵性 −− 資化性 −− σ→メリビオース −−に）セロビ
オース −−α０ラフイノース
発酵性 ＋（１／３） ＋ （１／３）資化
性 十 十 １１７）フルクトース −−Ｑ８デ
キストリン ＋ ＋Ｑ→
可溶性デンプン 発酵性 ■ 柑資化
性 十 干 （イ）コハク酸 −一 本発明のＡ２２０及びＡ２５１菌株は可溶性デンプンか
らエタノールを生成する場合にのみ親株に比べ高い値を
示し、他の糖類の場合には差違が認められない（第１図
）。第１図は、各種糖類を１０チ含有する以外は後述の
実施例２と同じ培地を用い、発酵’１３０Ｇで行ったと
きの結果を示す。尚第１図のＡは糖類がブドウ糖、Ｂは
マルトース、Ｃはラフィノース、Ｄは可溶性デンプン、
Ｅはショ糖であり、曲線（１）は１０４６菌株、曲線（
２）はＡ２２０株、曲線（３）はＪＦＬ２５１株を示す
。
本発明のＡ２２０又は４２５１株を使用してエタノール
を製造するには、可溶性デンプンを含む培地に該菌株を
加えて発酵を行えばよく、発酵は約３０℃の温度で行わ
れる。
を製造するには、可溶性デンプンを含む培地に該菌株を
加えて発酵を行えばよく、発酵は約３０℃の温度で行わ
れる。
次に実施例を挙げて説明する。
実施例１
（１）サツカロミセス・ディアスタテイクスＩＰＯ−１
０４６株の細胞１．３Ｘ１０７個全０．８５チの食塩水
で洗浄し、これを、２−メルカプトエタノール及びエチ
レンジアミンテトラアセテート各１俤全含む水溶液に懸
濁し、３０℃で１０分間放置した。次いでこの細胞ｉ
０．６ Ｍ塩化カリウム水溶液で洗浄し、前処理１０４
６菌株細胞６．５Ｘ１０個を得た。
０４６株の細胞１．３Ｘ１０７個全０．８５チの食塩水
で洗浄し、これを、２−メルカプトエタノール及びエチ
レンジアミンテトラアセテート各１俤全含む水溶液に懸
濁し、３０℃で１０分間放置した。次いでこの細胞ｉ
０．６ Ｍ塩化カリウム水溶液で洗浄し、前処理１０４
６菌株細胞６．５Ｘ１０個を得た。
また、オーレオバシデイウム・プルランスＨ−２８菌株
の細胞について同様に処理し、前処理Ｈ−２８菌株細胞
２．５Ｘ１０６個を得た。
の細胞について同様に処理し、前処理Ｈ−２８菌株細胞
２．５Ｘ１０６個を得た。
（ＩＩ） ０．０６７Ｍ ＋７ン酸緩衝液に（１）で
得た前処理細胞のそれぞれ全１０８個／ｄになるように
懸濁し、これに「ザイモリアーゼ−５０００Ｊ ｋ Ｏ
，４Ｑ ／ ｔｎｌ 、 ２−メルカプトエタノール１
０ ｍＭ 、塩化カリウム０．６Ｍを加え、３０℃で３
時間処理した。この処理液’ｉ ３０００ Ｘｔで５分
間遠沈してプロトゲラストを集め、０．６Ｍ塩化カリウ
ム水溶液で洗浄し、両プロトプラストを得た。
得た前処理細胞のそれぞれ全１０８個／ｄになるように
懸濁し、これに「ザイモリアーゼ−５０００Ｊ ｋ Ｏ
，４Ｑ ／ ｔｎｌ 、 ２−メルカプトエタノール１
０ ｍＭ 、塩化カリウム０．６Ｍを加え、３０℃で３
時間処理した。この処理液’ｉ ３０００ Ｘｔで５分
間遠沈してプロトゲラストを集め、０．６Ｍ塩化カリウ
ム水溶液で洗浄し、両プロトプラストを得た。
Ｇ１１）３ｏ％ポリエチレングリコールー６０００及び
塩化カルシウム５０ ｍＭ ｆ含む水溶液に（１１）で
得た両プロトプラストヲ懸濁し、３０℃で６０分間放置
して細胞融合を行った。３０００Ｘｆで５分間遠沈して
プロトプラストを集め、０．６Ｍ水酸化カリウム水溶液
で洗浄した。
塩化カルシウム５０ ｍＭ ｆ含む水溶液に（１１）で
得た両プロトプラストヲ懸濁し、３０℃で６０分間放置
して細胞融合を行った。３０００Ｘｆで５分間遠沈して
プロトプラストを集め、０．６Ｍ水酸化カリウム水溶液
で洗浄した。
０ψ （１１０で得たプロトプラスト金、ブドウ糖２チ
、ペプトン１％、酵母エキス１チ、寒天２チを含む平板
培地（１）Ｈ５，Ｏ）に接種して培養して融合株を再生
させた。
、ペプトン１％、酵母エキス１チ、寒天２チを含む平板
培地（１）Ｈ５，Ｏ）に接種して培養して融合株を再生
させた。
（Ｖ） 酢酸ナトリウム０．４チ、ラフィノース０．
０４％を含む培地（ｐＨ６，０）に再生細胞全接種し、
３０°Ｃで７日間振とう培養し、６０℃で３０分間加熱
処理した後、胞子全採取した。
０４％を含む培地（ｐＨ６，０）に再生細胞全接種し、
３０°Ｃで７日間振とう培養し、６０℃で３０分間加熱
処理した後、胞子全採取した。
（ｖＤ 可溶性デンプン２ｑ６、ペプトン１％、酵母
エキス１ｅ１６’に含む寒天平板培地（ｐＨｓ、ｏ ）
に胞子を接種し、３０℃で５日間培養して細胞全増殖さ
せた。。
エキス１ｅ１６’に含む寒天平板培地（ｐＨｓ、ｏ ）
に胞子を接種し、３０℃で５日間培養して細胞全増殖さ
せた。。
υ１） 乳糖２％、硫酸アンモニウム０．５％、リン酸
第１カリウム０．１ ％ 、硫酸マグネシウム０．０５
％、塩化カルシウム０．０１１ｍ化ナトリウム０．０１
％、ビタミン混液を含む寒天平板培地（ｐＨ５，０）に
（ｖｌｌで得た細胞全レプリカし、３０℃で３日間培養
した。この培地で増殖した細胞についてデンプン発酵性
菌を採取し、サツカロミセス・ディアスタテイクス煮２
２０及びＡ ２５１を得た。
第１カリウム０．１ ％ 、硫酸マグネシウム０．０５
％、塩化カルシウム０．０１１ｍ化ナトリウム０．０１
％、ビタミン混液を含む寒天平板培地（ｐＨ５，０）に
（ｖｌｌで得た細胞全レプリカし、３０℃で３日間培養
した。この培地で増殖した細胞についてデンプン発酵性
菌を採取し、サツカロミセス・ディアスタテイクス煮２
２０及びＡ ２５１を得た。
実施例２
０．１％、酵母エキスＯ−５％を含む培地（ｐｎｓ、ｏ
）にサツカロミセス・ディアスタテイクスＩＦＯ−１０
４６株〔第２図中（１）〕、Ａ２２０〔同（２）〕、Ａ
２５１（同（３）〕の細胞金、それぞれ３．８Ｘ１０７
個／１ｎｌになるように加え、３０℃で発酵を行い、エ
タノールの生成を経時的に調べた。その結果は第２図の
Ａ（可溶性デンプン３０％）及び第２図のＢ（可溶性デ
ンプン１０％）のとおりである。
）にサツカロミセス・ディアスタテイクスＩＦＯ−１０
４６株〔第２図中（１）〕、Ａ２２０〔同（２）〕、Ａ
２５１（同（３）〕の細胞金、それぞれ３．８Ｘ１０７
個／１ｎｌになるように加え、３０℃で発酵を行い、エ
タノールの生成を経時的に調べた。その結果は第２図の
Ａ（可溶性デンプン３０％）及び第２図のＢ（可溶性デ
ンプン１０％）のとおりである。
実施例３
可溶性デンプン３０％を含む実施例２と同じ培地６０プ
をフラスコに入れ、これに１０９個のＡ２５１株細胞を
接種し、３０℃で４８時間発発酵性い、３６１のエタノ
ールを得た。発酵液の上層３０ｍ１を新しい培地で置換
する操作ｔ−２４時間毎に繰り返し、半連続発酵を行っ
たところ、６日間にわたって３６〜４２ｔのエタノール
が得られた。
をフラスコに入れ、これに１０９個のＡ２５１株細胞を
接種し、３０℃で４８時間発発酵性い、３６１のエタノ
ールを得た。発酵液の上層３０ｍ１を新しい培地で置換
する操作ｔ−２４時間毎に繰り返し、半連続発酵を行っ
たところ、６日間にわたって３６〜４２ｔのエタノール
が得られた。
第１図は各種糖類を含む培地で１０４６菌株、 ４２２
０株及びＡ２５１株を培養したときのエタノール生成の
経時変化を、第２図は可溶性デンプンを含む培地で同菌
株を培養したときのエタノール生成の経時変化を示す。 以上 （１５） （１７） ３９７− （１６） 第２図 ２４ ４８ ７２ ９６ １２０培誉時間（時
間） ２４ ４８ ７２ ９６ 手続補正書（自発） ］ 事件の表示 昭和５７年 特 許 願第１５７２９６号２ 発明の
名称 デンプン発酵性酵母菌およびエタノールの製造法３、
補正をする者 事件との関係 出願人 ４代理人 自 発 ６、 補正の対象 明細書の「発明の詳細な説明」の欄 ７、補正の内容 （１）明細賽子、第３頁、第７行 「−−−−ｐｕｌｌｕｒａｎｓ） Ｊとある管、ｌ’
−−−−ｐｕｌｌｕｌａｎｓ） Ｊ 、！：訂正する。 （２）同、第５頁、ｍ９行 「メリチトース」とろるを、「メレジトース」と訂正す
る。 （３）同、第６頁、第１８行 ｒ ＡｕｄｉｏｂａａｉｄｉｕｍＪとめるを、ｒ Ａｕ
ｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍＪと訂正する。 （４） 同、纂１２頁、ｍ２行 ｒ （１３１乳糖 発酵性 −−」とめるを、ｒ （１
３１乳糖 発酵性 十 十」と訂正する。 （５） 同、１ｉｌＺ頁、第３行 「 資化性 −−」とあるを、 「 資化性 ＋ 十」と訂正する。
０株及びＡ２５１株を培養したときのエタノール生成の
経時変化を、第２図は可溶性デンプンを含む培地で同菌
株を培養したときのエタノール生成の経時変化を示す。 以上 （１５） （１７） ３９７− （１６） 第２図 ２４ ４８ ７２ ９６ １２０培誉時間（時
間） ２４ ４８ ７２ ９６ 手続補正書（自発） ］ 事件の表示 昭和５７年 特 許 願第１５７２９６号２ 発明の
名称 デンプン発酵性酵母菌およびエタノールの製造法３、
補正をする者 事件との関係 出願人 ４代理人 自 発 ６、 補正の対象 明細書の「発明の詳細な説明」の欄 ７、補正の内容 （１）明細賽子、第３頁、第７行 「−−−−ｐｕｌｌｕｒａｎｓ） Ｊとある管、ｌ’
−−−−ｐｕｌｌｕｌａｎｓ） Ｊ 、！：訂正する。 （２）同、第５頁、ｍ９行 「メリチトース」とろるを、「メレジトース」と訂正す
る。 （３）同、第６頁、第１８行 ｒ ＡｕｄｉｏｂａａｉｄｉｕｍＪとめるを、ｒ Ａｕ
ｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍＪと訂正する。 （４） 同、纂１２頁、ｍ２行 ｒ （１３１乳糖 発酵性 −−」とめるを、ｒ （１
３１乳糖 発酵性 十 十」と訂正する。 （５） 同、１ｉｌＺ頁、第３行 「 資化性 −−」とあるを、 「 資化性 ＋ 十」と訂正する。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 Ｌ Ｌ−アラビノース及びメレジトース全資化奢ず、
可溶性デンプンからの高いエタノール生産性を有するサ
ツカロミセス・ディアスタテイクス墓２２０及び煮２５
１０ ム サツカロミセス・ディアスタテイクスに属する菌株
とオーレオバシデイウム・プルランスニ属する菌株を細
胞融合して得られたものである特許請求の範囲第１項記
載のサツカロミセス・ディアスタテイクスＡ２２０及び
Ａ２５１゜ ３、サツカロミセス・ディアスタテイクスに属する菌株
がサツカロミセス・ディアスタテイクスＩＦＯ−１０４
６株で、オーレオバシデイウム・プルランスに属する菌
株がオーレオバシデイウムｅプルランスＨ−２８（微工
研菌寄第６７０４号）である特許請求の範囲第２項記載
のサツカロミセス・ディアスタテイクス＆２２０及びＡ
２５１゜４、サツカロミセス・ディアスタテイクスＡ２
２０又はＡ ２５１ ｆ用いてデンプンを発酵させるこ
と全特徴とするエタノールの製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57157296A JPS5945874A (ja) | 1982-09-09 | 1982-09-09 | デンプン発酵性酵母菌 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57157296A JPS5945874A (ja) | 1982-09-09 | 1982-09-09 | デンプン発酵性酵母菌 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5945874A true JPS5945874A (ja) | 1984-03-14 |
| JPH0339671B2 JPH0339671B2 (ja) | 1991-06-14 |
Family
ID=15646558
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP57157296A Granted JPS5945874A (ja) | 1982-09-09 | 1982-09-09 | デンプン発酵性酵母菌 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5945874A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61127493A (ja) * | 1984-11-15 | 1986-06-14 | 株式会社タツノ・メカトロニクス | 移動式の給油装置 |
-
1982
- 1982-09-09 JP JP57157296A patent/JPS5945874A/ja active Granted
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61127493A (ja) * | 1984-11-15 | 1986-06-14 | 株式会社タツノ・メカトロニクス | 移動式の給油装置 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0339671B2 (ja) | 1991-06-14 |
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