JPS5951293A

JPS5951293A - Ｌ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルの精製法

Info

Publication number: JPS5951293A
Application number: JP16062682A
Authority: JP
Inventors: Matsuo Fujii; 藤井　松生; Seiji Matsumoto; 松本　清治; Kazuo Takada; 和夫高田
Original assignee: Takeda Chemical Industries Ltd
Current assignee: Takeda Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1982-09-14
Filing date: 1982-09-14
Publication date: 1984-03-24
Also published as: JPH0261959B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】本発明は、Ｌ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルの
精製法に関する。

Ｌ−アスコルビン酸は、医薬品、食品、化粧品等の分野
で広く使用されているが、熱、光に弱く、被酸化性物質
である。そこで、これらの欠点を除くために、リン酸エ
ステル体とすると、熱、光、酸化剤等に対し安定である
ことが知られ、リン酸エステル体の製造法が種々提案さ
れてきた。

Ｌ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルは、Ｌ−アス
コルビン酸をリン酸化することによって得られるが、そ
の反応液中には種々の不純物、たとえばＬ−アスコルビ
ン酸の不安定性に基因する分解物、種々のリン酸化物な
どが含まれている。

このような反応液中から、目的とするＬ−アスコルビン
酸−２−リン酸エステルを高収量且つ高純度で得ること
は極めて困難であり、既報告の精製法によっては満足な
結果は得られない。

このような情況に鑑み、本発明者らは、精製条件の検討
を種々行なったところ、活性炭を用い精製すると高収率
かつ高純度でＬ−アスコルビン酸−２−リン酸エステル
を精製できることを見い出し、さらに研究した結果、本
発明を完成した。

本発明は、Ｌ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルを
含有する強酸性の水溶液をカラムにつめた活性炭に接触
させてＬ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルを吸着
させ、次いで水性溶媒で溶出することを特徴とするＬ−
アスコルビン酸−２−リン酸エステルの精製法である。

本発明で用いられるＬ−アスコルビン酸−２−リン酸エ
ステルを含有する液としては、Ｌ−アスコルビン酸をリ
ン酸反応に付して得られた２−リン酸エステルを含有す
る反応液が挙げられる。

該リン酸化反応は、いずれのリン酸化反応でもよい。該
反応液としては、たとえば５位および６位の保護されま
たはされないＬ−アスコルビン酸とリン酸ハロゲン化物
とを特定の溶媒中、塩基の存在下に室温以下で反応させ
、得られるリン酸誘導体を加水分解して得られた反応液
〔特公昭５２−１８１９１号公報、ケミカル・アンド・
ファーマシュウテイカル・ビューレチン（Ｃｈｅｍｉｃ
ａｌ＆Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｂｕｌｌｅｔｉ
ｎ）第１９巻、Ｎｏ．７、第１４３３−１４３７頁（１
９７１年）、同第３０巻、Ｎｏ．３、第１０２４−１０
２９頁（１９８２年）参照〕、５，６−Ｏ−イソプロピ
リデン−Ｌ−アスコルビン酸、一般式ＰＯＸ＿３（Ｘ：
ハロゲン）および第三級アミンを特定の溶媒中で混合し
、該混合物を少なくとも約８のｐＨ値に維持し反応させ
ることにより得られた反応液（特開昭５２−１３６１６
０号公報参照）などが挙げられる。

本発明方法で用いられるＬ−アスコルビン酸−２−リン
酸エステルを含有する液としては、上記の反応液をあら
かじめ処理するのがよい。該処理としては、たとえば使
用された溶媒の留去、塩基あるいは第三級アミンの除去
などが挙げられる。

該溶媒を留去する方法としては、たとえばＬ−アスコル
ビン酸−２−リン酸エステルの分解を抑えるために、出
来るだけ低温で減圧下に留去する。

該塩基あるいは第３級アミンを除去する方法としては、
たとえば該反応液を無機アルカリ（例、水酸化ナトリウ
ム、水酸化カリウム等）水溶液でｐＨを約１１以上にし
、減圧下で留去する。

このようにして得られるＬ−アスコルビン酸−２−リン
酸エステルを含有する水溶液を強酸性にするには、たと
えば強酸性の鉱酸（例えば塩酸、硫酸、硝酸等）を使用
するが、取扱いの面から塩酸の使用が好ましい。上記水
溶液の強酸性とは、ｐＨ約２以下をいい、さらに好まし
くはｐＨ約１以下をいう。

本発明の方法で用いられる活性炭としては、特に限定さ
れないが、たとえば直径１５μ以下の細孔の全細孔容積
１ｃｃ／ｇ以上、直径３００Å以下の細孔の全細孔容積
０．６ｃｃ／ｇ以上、直径３００Å以下の細孔の平均細
孔直径２０Å以上の細孔特性を有する活性炭が挙げられ
る。

上記細孔特性のうち、直径１５μ以下の細孔の全細孔容
積は、たとえば水銀圧入法、窒素ガス吸着法〔慶伊富長
：吸着、第９５〜１１３頁（１９６７）、共立出版〕な
どの方法によって測定される。直径３００Å以下の細孔
の全細孔容積については、たとえば窒素ガス吸着法（前
記文献に記載された方法）などの方法によって測定され
る。また、直径３００Å以下の細孔の平均細孔直径とは
、直径３００Å以下の細孔を円筒形と仮定し、この細孔
容積と窒素ガス吸着等温線からＢＥＴ式（前記文献に記
載された方法）により計算される比表面積とから次式に
よって計算される値である。

（注）この場合の細孔容積とは、直径３００Å以下の細
孔の全細孔容積をいう。

上記のような特定の細孔特性を有する活性炭は、たとえ
ば木材片、ノコクズ、果実殻（ヤシガラ）などの木質原
料を塩化亜鉛、燐酸、塩化カルシウムなどの薬品に浸漬
し、約６００〜７００℃で焼成した後、たとえば塩酸な
どの酸によって添加薬品類を脱離、洗浄することにより
得られる。

活性炭の形状は、粉末状あるいは顆粒状のいずれでもよ
いが、なかでも顆粒状のものが好ましく、たとえば８〜
２５０メッシュの粒度のものが全体の９０％以上含有す
るものが好ましい。なお、上記のメッシュは、日本工業
規格（ＪＩＳ）の規準による。

上記活性炭の具体例としては、たとえばクロマト用特製
白鷺、粒状白鷺Ｌ、粒状白鷺Ｗ（いずれも武田薬品工業
株式会社製）、カルゴン（ＣＡＬＧＯＮ、Ｃａｌｇｏｎ
　Ｃｏｏｐｏｒａｔｉｏｎ製、米国）等が挙げられる。

上記の水溶液を活性炭カラムに接触させるには、カラム
に活性炭を充填し、水を満たしてカラムを調整し、これ
に該水溶液を通すことにより行なわれる。該水溶液を通
す速度は、通常行なわれる方法に従えばよいが、たとえ
ば、１時間当り充填した活性炭容量の０．５〜２倍量程
度、好ましくは１倍量程度の流量で通すのがよい。温度
は約５〜２０℃である。

このようにして、Ｌ−アスコルビン酸−２−リン酸エス
テルが活性炭に吸着される。

活性炭カラムに吸着されたＬ−アスコルビン酸−２−リ
ン酸エステルは、水性溶媒で溶出される。

該水性溶媒とは、水を基本とした水溶液をいう。

該水性溶媒の具体例としては、たとえば水溶性有機溶媒
（例、メタノール、エタノール、アセトン、イソブタノ
ール、イソプロピルアルコール等）の水溶液、塩基性物
質（例、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、アンモニ
ア、ジメチルアミン、ジエチルアミン等）の水溶液、無
機塩類（例、塩化ナトリウム、リン酸アンモニウム、塩
化アンモニウム等）の水溶液、あるいはこれらの混合物
などが拳げられる。

該塩基性物質または無機塩類の水溶液のｐＨは、約７〜
９とするのが好ましい。このｐＨ範囲にするためには、
たとえば塩化ナトリウムの場合は所要量の水酸化ナトリ
ウム水溶液を塩酸で、リン酸アンモニウムもしくは塩化
アンモニウムの場合は所要量の２５％アンモニア水をリ
ン酸もしくは塩酸でそれぞれ調整する。また該水溶性有
機溶媒の場合は５〜２０％程度の濃度の水溶液そのまま
が使用出来る。

溶出する温度は、約５〜３０℃が好ましい。また、溶出
に用いられる水性溶媒の使用量は、活性炭の容量に対し
て約１．５〜２．５倍量（容量）が一般的である。

得られた溶出液は、目的物を採取する前に、種々の適宜
の処理を行なってもよい。たとえば、溶出溶媒として水
溶性有機溶媒の水溶液以外の場合、これらの塩基性物質
および陽イオンを除くために、強酸性イオン交換樹脂〔
例えば、ダイヤイオンＳＫ−１１０（三菱化成株式会社
製）〕に通し、脱塩するのが好ましい。

次に、目的物を塩とするのが好ましい。塩としては、た
とえばマグネシウム塩、カルシウム塩、ナトリウム塩、
カリウム塩などが挙げられる。該塩を形成する方法とし
ては、たとえば、マグネシウム塩を得る場合には前記の
脱塩液を酸化マグネシウムで中和すればよい。また、カ
ルシウム塩を得るには塩化カルシウムあるいは水酸化カ
ルシウムを、ナトリウム塩を得るには水酸化ナトリウム
を、カリウム塩を得るには水酸化カリウムを用い上記と
同様に処理すればよい。

さらに、必要により着色成分を除去するための工程に付
してもよい。該着色成分の除去工程としては、たとえば
、活性炭をつめたカラムに付し、着色成分を活性炭に吸
着除去することにより行なわれる。該活性炭としては、
たとえば前記したものと同様のものが挙げられる。

脱色用活性炭カラムに付す液の液性としては、中性ない
し弱アルカリ性が好ましく、具体的にはｐＨ約６〜１０
、さらに好ましくはｐＨ約６〜７が挙げられる。このよ
うな液性に調整する方法としては、たとえば、鉱酸（塩
酸、硫酸、硝酸等）および有機酸（酢酸等）があげられ
るが、特に塩酸が好ましい。

上記の液をカラムに通過させるときの温度は、約１０〜
３０℃が好ましい。得られた流出液、および水をさらに
通過させて得られた流出液を採取する。

このようにして得られた目的物を含有する液を通常行な
われる濃縮工程、、晶出工程に付す。該濃縮は、たとえ
ば減圧濃縮などの方法が採用される。

晶出工程としては、たとえば、アルコール類（例、メタ
ノール、エタノール）またはアセトンなどを添加するこ
とにより行なわれる。

本発明の精製法により、目的とするＬ−アスコルビン酸
−２−リン酸エステルを高純度、高収率で精製すること
ができ、しかも、着色がほとんど認められない製品を得
ることができる。

本精製法で得られた製品は、再結晶操作を必要とせず、
高速液体クロマトグラフィーによる測定では９９％以上
の高純度である。また本精製法によると、高回収率で精
製される。

以下に実施例を挙げて本発明をさらに具体的に説明する
。なお、溶液のパーセントはとくにことわりのないかぎ
り、重量／容量パーセントを表わす。

実施例１、純水２４２ｍｌ、ピリジン６０．６ｇおよびイソプロピ
リデンアスコルビン酸（以下、「ＩＰＡ」と略称する）
３０ｇを混合溶解し、０〜１０℃に冷却後６０％水酸化
カリウム水溶液を加えてｐＨを約１３に調整した。次に
これにテトラクロルピロリン酸（以下「ＴＣＰＰ」と略
称する。）３０ｇと６０％水酸化カリウム水溶液とを滴
下しながら０〜１０℃で反応した。滴下終了後、ピリジ
ンを減圧下に留去し、塩酸を加えてｐＨを約０．５に調
整した。

活性炭（クロマト用特製白鷺）２００ｇを充填し、水を
満したカラムに上記のｐＨを約０．５に調整した液をＳ
Ｖ≒１で流し、更に約１ｌの４％塩酸を流した。次いで
リン酸５３ｇ、２５％アンモニア水７０ｇおよび水１９
００ｇの混合物２ｌ（ｐＨ約８）を流してＬ−アスコル
ビン酸−２−リン酸エステルを含む部分約０．９ｌを溶
出した。溶出液を３００ｍｌの強酸性イオン交換樹脂（
ダイヤイオンＳＫ−１１０）を通して脱アンモニアを行
い流出液を採取し、その液に酸化マグネシウム２６．４
ｇを加えてＬ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルを
マグネシウム塩とすると共に不用のリン酸をリン酸マグ
ネシウムとして沈澱させた。沈澱物をろ過して除去後、
活性炭（クロマト用特製白鷺）２０ｇを充填させたカラ
ムに上記Ｌ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルを含
む液をＳＶ≒１０で通過させて得られた流出液および更
に水２００ｍｌを通じて得られた流出液を採取した。次
にこれらの流出液を合し、これを約２５０ｍｌまで減圧
下濃縮し、濃縮液に粉末活性炭（白鷺Ａ、武田薬品工業
株式会社製）１．５ｇを加えて、１０分攪拌後ろ過し、
ろ液に９０％メタノールを５１０ｍｌ滴下すると結晶が
析出した。析出した結晶をろ取し、乾燥するとＬ−アス
コルビン酸−２−リン酸エステルマグネシウム塩の結晶
３５．０ｇが得られた。このものは、ほとんど着色が認
められなかった。リン酸化反応液からの回収率は８６％
であった。尚、このものの高速液体クロマトグラフィー
の面積比による含量は、乾物換算で９９．３％であった
。

元素分析値（％）：Ｃ＿１＿２Ｈ＿１＿２Ｏ＿１＿８Ｐ＿２Ｍｇ＿３・１２
Ｈ＿２Ｏとして理論値　Ｃ　１８．１２　Ｈ　４．５６
　Ｐ　７．７９Ｍｇ　９．１７測定値　Ｃ　１８．００　Ｈ　４．６３　Ｐ　７．３３
Ｍｇ　９．０４上記の性状、赤外部吸収スペクトル（ＩＲ）および紫外
部吸収スペクトル（ＵＶ）は、ケミカル・アンド・ファ
ーマシューテイカル・ビューレチン第１７巻、３８１頁
（１９６９年）に記載の値と一致した（なお、この文献
記載のアスコルビン酸−３−リン酸エステルは、ケミカ
ル・アンド・ファーマシューテイカル・ビューレチン第
１９巻、Ｎｏ．７、第１４３３頁（１９７１年）および
同第３０巻、Ｎｏ．３３、第１０２４頁（１９８２年）
から、アスコルビン酸−２−リン酸エステルである。）
。

実施例２、純水３５０ｍｌ、炭酸カリウム５０ｇおよびＩＰＡ３０
ｇを混合溶解し、次いでピリジン６２ｍｌを加えた後、
０±２℃に保ちながらオキシ塩化リン４５ｇを滴下して
リン酸化を行った。反応液に３０％カセイソーダ水溶液
を加えてｐＨを約１１とし、減圧下ピリジンを留去した
。さらに塩酸を加えてｐＨを約０．５にし、減圧下アセ
トンを留去して、実施例１、と同様の方法で処理し、Ｌ
−アスコルビン酸−２−リン酸エステル・マグネシウム
塩２９．５ｇを得た。このものは、ほとんど着色が認め
られなかった。リン酸化反応液からの回収率は８５％で
あった。本品のＩＲ、ＵＶのデーターは前記文献記載の
値と一致し、高速液体クロマトグラフの面積比による含
量は９９．１％を示した。尚、晶出用溶媒としてアセト
ンを５００ｍｌを使用したものについても同様の結果を
得た。

実施例３、実施例１、の方法において、ＴＣＰＰの代りにオキシ塩
化リンを使用してＩＰＡをリン酸化したものを実施例１
、と同様の方法で精製し、Ｌ−アスコルビン酸−２−リ
ン酸エステル・マグネシウム塩３４．０ｇを得た。純度
９９．０％。このものは、ほとんど着色が認められなか
った。本品のＩＰおよびＵＶは前記文献記載の値と一致
した。

リン酸化反応液からの回収率は８４％であった。

実施例４、実施例１、と同様の方法でリン酸化反応をし、実施例１
、と同様の方法で活性炭（クロマト用特製白鷺）２００
ｍｌにＬ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルを吸着
させた。約４％塩酸水溶液１ｌを通して活性炭を洗浄し
、次いで２０％イソプロピルアルコール水溶液２ｌをＳ
Ｖ≒１で通じ、Ｌ−アスコルビン酸−２−リン酸エステ
ルを含む部分を採取した。ついで、実施例１、と同様の
方法で処理し、Ｌ−アスコルビン酸−２−リン酸エステ
ル・マグネシウム塩の結晶を得た。純度９９．３％。

リン酸化反応液からの回収率は８５％であった。

このものは、ほとんど着色が認められなかった。

この結晶のＩＲおよびＵＶは、前記文献記載の値と一致
した。

実施例５、実施例１、と同様の方法でリン酸化および炭末クロマト
グラフィー用カラムへ吸着を行なった後、約４％塩酸水
溶液につづいて、塩化アンモニウム５０ｇを水１９００
ｍｌに溶解し、２５％アンモニアでｐＨ１０にした液を
流した。流出液においてＬ−アスコルビン酸−２−リン
酸エステルを含む画分約１．５ｌを採取し、以下、実施
例１、と同様の脱アンモニア、酸化マグネシウム中和、
メタノール晶出の操作を行ない、Ｌ−アスコルビン酸−
２−リン酸エステル・マグネシウム塩を得た。純度９９
．２％。このものは、ほとんど着色が認められなかった
。リン酸化反応液からの回収率は８３％であった。この
もののＩＲおよびＵＶは前記文献記載の値と一致した。

Claims

【特許請求の範囲】

Ｌ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルを含有する強
酸性の水溶液をカラムにつめた活性炭に接触させてＬ−
アスコルビン酸−２−リン酸エステルを吸着させ、次い
で水性溶媒で溶出することを特徴とするＬ−アスコルビ
ン酸−２−リン酸エステルの精製法。