JPH0261959B2

JPH0261959B2 -

Info

Publication number: JPH0261959B2
Application number: JP16062682A
Authority: JP
Inventors: Matsuo Fujii; Seiji Matsumoto; Kazuo Takada
Original assignee: Takeda Chemical Industries Ltd
Current assignee: Takeda Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1982-09-14
Filing date: 1982-09-14
Publication date: 1990-12-21
Also published as: JPS5951293A

Description

【発明の詳細な説明】本発明は、Ｌ−アスコルビン酸−２−リン酸エ
ステルの精製法に関する。

Ｌ−アスコルビン酸は、医薬品、食品、化粧品
等の分野で広く使用されているが、熱、光に弱
く、被酸化性物質である。そこで、これらの欠点
を除くたに、リン酸エステル体とすると、熱、
光、酸化剤等に対し安定であることが知られ、リ
ン酸エステル体の製造法が種々提案されてきた。

Ｌ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルは、
Ｌ−アスコルビン酸をリン酸化することによつて
得られるが、その反応液中には種々の不純物、た
とえばＬ−アスコルビン酸の不安定性に基因する
分解物、種々のリン酸化物などが含まれている。
このような反応液中から、目的とするＬ−アスコ
ルビン酸−２−リン酸エステルを高収量且つ高純
度で得ることは極めて困難であり、既報告の精製
法によつては満足な結果は得られない。

このような情況に鑑み、本発明者らは、精製条
件の検討を種々行なつたところ、活性炭を用い精
製すると高収率かつ高純度でＬ−アスコルビン酸
−２−リン酸エステルを精製できることを見い出
し、さらに研究した結果、本発明を完成した。

本発明は、Ｌ−アスコルビン酸−２−リン酸エ
ステルを含有する強酸性の水容液をカラムにつめ
た活性炭に接触させてＬ−アスコルビン酸−２−
リン酸エステルを吸着させ、次いで水性溶媒で溶
出することを特徴とするＬ−アスコルビン酸−２
−リン酸エステルの精製法である。

本発明で用いられるＬ−アスコルビン酸−２−
リン酸エステルを含有する液としては、Ｌ−アス
コルビン酸をリン酸化反応に付して得られた２−
リン酸エステルを含有する反応液が挙げられる。
該リン酸化反応は、いずれのリン酸化反応でもよ
い。該反応液としては、たとえば５位および６位
の保護されまたはされないＬ−アスコルビン酸と
リン酸ハロゲン化物とを特定の溶媒中、塩基の存
在下に室温以下で反応させ、得られるリン酸誘導
体を加水分解して得られた反応液〔特公昭52−
18191号公報、ケミカル・アンド・フアーマシユ
ウテイカル・ビユーレチン（Chemical ＆
Pharmaceutical Bulletin）第19巻、No.７、第
1433−1437頁（1971年）、同第30巻、No.３、第
1024−1029頁（1982年）参照〕、５，６−０−イ
ソプロピリデン−Ｌ−アスコルビン酸、一般式
POX₃（Ｘ：ハロゲン）および第３級アミンを特
定の溶媒中で混合し、該混合物を少なくとも約８
のPH値に維持し反応させることにより得られた反
応液（特開昭52−136160号公報参照）などが挙げ
られる。

本発明方法で用いられるＬ−アスコルビン酸−
２−リン酸エステルを含有する液としては、上記
の反応液をあらかじめ処理するのがよい。該処理
としては、たとえば使用された溶媒の留去、塩基
あるいは第三級アミンの除去などが挙げられる。

該溶媒を留去する方法としては、たとえばＬ−ア
スコルビン酸−２−リン酸エステルの分解を抑え
るために、出来るだけ低温で減圧下に留去する。
該塩基あるいは第３級アミンを除去する方法とし
ては、たとえば該反応液を無機アルカリ（例、水
酸化ナトリウム、水酸化カリウム等）水溶液でPH
を約11以上にし、減圧下で留去する。

このようにして得られるＬ−アスコルビン酸−
２−リン酸エステルを含有する水溶液を強酸性に
するには、たとえば強酸性の鉱酸（例えば塩酸、
硫酸、硝酸等）を使用するが、取扱いの面から塩
酸の使用が好ましい。上記水溶液の強酸性とは、
PH約２以下をいい、さらに好ましくはPH約１以下
をいう。

本発明の方法で用いられる活性炭としては、特
に限定されないが、たとえば直径15μ以下の細孔
の全細孔容積１c.c.／ｇ以上、直径300Å以下の細
孔の全細孔容積0.6c.c.／ｇ以上、直径300Å以下の
細孔の平均細孔直径20Å以上の細孔特性を有する
活性炭が挙げられる。

上記細孔特性のうち、直径15μ以下の細孔の全
細孔容積は、たとえば水銀圧入法、窒素ガス吸着
法〔慶伊富長：吸着、第95〜113頁（1967）、共立
出版〕などの方法によつて測定される。直径300
Å以下の細孔の全細孔容積については、たとえば
窒素ガス吸着法（前記文献に記載された方法）な
どの方法によつて測定される。また、直径300Å
以下の細孔の平均細孔直径とは、直径300Å以下
の細孔を円筒形と仮定し、この細孔容積と窒素ガ
ス吸着等温線からBET式（前記文献に記載され
た方法）により計算される比表面積とから次式に
よつて計算される値である。

平均細孔直径＝４×細孔容積／比表面積（注）この場合の細孔容積とは、直径300Å以下
の細孔の全細孔容積をいう。

上記のような特定の細孔特性を有する活性炭
は、たとえば木材片、ノコクズ、果実穀（ヤシガ
ラ）などの木質原料を塩化亜鉛、燐酸、塩化カル
シウムなどの薬品に浸漬し、約600〜700℃で焼成
した後、たとえば塩酸などの酸によつて添加薬品
類を脱離、洗浄することにより得られる。

活性炭の形状は、粉末状あるいは顆粒状のいず
れでもよいが、なかでも顆粒状のものが好まし
く、たとえば８〜250メツシユの粒度のものが全
体の90％以上含有するものが好ましい。なお、上
記のメツシユは、日本工業規格（JIS）の規準に
よる。

上記活性炭の具体例としては、たとえばクロマ
ト用特製白鷺、粒状白鷺Ｌ、粒状白鷺Ｗ（いずれ
も武田薬品工業株式会社製）、カルゴン
（CALGON，Calgon Cooporation製、米国）等
が挙げられる。

上記の水溶液を活性炭カラムに接触させるに
は、カラムに活性炭を充填し、水を満たしてカラ
ムを調整し、これに該水溶液を通すことにより行
なわれる。該水溶液を通す速度は、通常行なわれ
る方法に従えばよいが、たとえば、１時間当り充
填した活性炭溶量の0.5〜２倍量程度、好ましく
は１倍量程度の流量で通すのがよい。温度は約５
〜20℃である。

このようにして、Ｌ−アスコルビン酸−２−リ
ン酸エステルが活性炭に吸着される。

活性炭カラムに吸着されたＬ−アスコルビン酸
−２−リン酸エステルは、水性溶媒で溶出され
る。該水性溶媒とは、水を基本とした水溶液をい
う。

該水性溶媒の具体例としては、たとえば水溶性
有機溶媒（例、メタノール、エタノール、アセト
ン、イソブタノール、イソプロピルアルコール
等）の水溶液、塩基性物質（例、水酸化ナトリウ
ム、水酸化カリウム、アンモニア、ジメチルアミ
ン、ジエチルアミン等）の水溶液、無機塩類
（例、塩化ナトリウム、リン酸アンモニア、塩化
アンモニウム等）の水溶液、あるいはこれらの混
合物などが挙げられる。

該塩基性物質または無機塩類の水溶液のPHは、
約７〜９とするのが好ましい。このPH範囲にする
ためには、たとえば塩化ナトリウムの場合は所要
量の水酸化ナトリウム水溶液を塩酸で、リン酸ア
ンモニウムもしくは塩化アンモニウムの場合は所
要量の25％アンモニア水をリン酸もしくは塩酸で
それぞれ調整する。また該水溶性有機溶媒の場合
は５〜20％程度の濃度の水溶液そのままが使用出
来る。

溶出する温度は、約５〜30℃が好ましい。ま
た、溶出に用いられる水性溶媒の使用量は、活性
炭の容量に対して約1.5〜2.5倍量（容量）が一般
的である。

得られた溶出液は、目的物を採取する前に、
種々の適宜の処理を行なつてもよい。たとえば、
溶出溶媒として水溶性有機溶媒の水溶液以外の場
合、これらの塩基性物質および陽イオンを除くた
めに、強酸性イオン交換樹脂〔例えば、ダイヤイ
オンSK−110（三菱化成株式会社製）〕に通し、脱
塩するのが好ましい。

次に、目的物を塩とするのが好ましい。塩とし
ては、たとえばマグネシウム塩、カルシウム塩、
ナトリウム塩、カリウム塩などが挙げられる。該
塩を形成する方法としては、たとえば、マグネシ
ウム塩を得る場合には前記の脱塩液を酸化マグネ
シウムで中和すればよい。また、カルシウム塩を
得るには塩化カルシウムあるいは水酸化カルシウ
ムを、ナトリウム塩を得るには水酸化ナトリウム
を、カリウム塩を得るには水酸化カリウムを用い
上記と同様に処理すればよい。

さらに、必要により着色成分を除去するための
工程に付してもよい。該着色成分の除去工程とし
ては、たとえば、活性炭をつめたカラムに付し、
着色成分を活性炭に吸着除去することにより行な
われる。該活性炭としては、たとえば前記したも
のと同様のものが挙げられる。

脱色用活性炭カラムに付す液の特性としては、
中性ないし弱アルカリ性が好ましく、具体的には
PH約６〜10、さらに好ましくはPH約６〜７が挙げ
られる。このような液性に調整する方法として
は、たとえば、鉱酸（塩酸、硫酸、硝酸等）およ
び有機酸（酢酸等）があげられるが、特に塩酸が
好ましい。

上記の液をカラムに通過させるときの温度は、
約10〜30℃が好ましい。得られた流出液、および
水をさらに通過させて得られた流出液を採取す
る。

このようにして得られた目的物を含有する液を
通常行なわれる濃縮工程、晶出工程に付す。該濃
縮は、たとえば減圧濃縮などの方法が採用され
る。晶出工程としては、たとえば、アルコール類
（例、メタノール、エタノール）またはアセトン
などを添加することにより行なわれる。

本発明の精製法により、目的とするＬ−アスコ
ルビン酸−２−リン酸エステルを高純度、高収率
で精製することができ、しかも、着色がほとんど
認められない製品を得ることができる。

本精製法で得られた製品は、再結晶操作を必要
とせず、高速液体クロマトグラフイーによる測定
では99％以上の高純度である。また本精製法によ
ると、高回収率で精製される。

以下に実施例を挙げて本発明をさらに具体的に
説明する。なお、溶液のパーセントはとくにこと
わりのないかぎり、重量／容量パーセントを表わ
す。

実施例１純水242ml、ピリジン60.6ｇおよびイソプロピ
リデンアスコルビン酸（以下、「IPA」と略称す
る）30ｇを混合溶解し、０〜10℃に冷却後60％水
酸化カリウム水溶液を加えてPHを約13に調整し
た。次にこれにテトラクロルピロリン酸（以下
「TCPP」と略称する。）30ｇと60％水酸化カリウ
ム水溶液とを滴下しながら０〜10℃で反応した。
滴下終了後、ピリジンを減圧下に留去し、塩酸を
加えてPHを約0.5に調整した。

活性炭（クロマト用特製白鷺）200ｇを充填し、
水を満したカラムに上記のPHを約0.5に調整した
液をSV≒１で流し、更に約１の４％塩酸を流
した。次いでリン酸53ｇ，25％アンモニア水70ｇ
および水1900ｇの混合物２（PH約８）を流して
Ｌ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルを含む
部分約0.9を溶出した。溶出液を300mlの強酸
性イオン交換樹脂（ダイヤイオンSK−110）を通
して脱アンモニアを行い流出液を採取し、その液
に酸化マグネシウム26.4ｇを加えてＬ−アスコル
ビン酸−２−リン酸エステルをマグネシウム塩と
すると共に不用のリン酸をリン酸マグネシウムと
して沈澱させた。沈澱物を過して除去後、活性
炭（クロマト用特製白鷺）20ｇを充填させたカラ
ムに上記Ｌ−アスコルビン酸−２−リン酸エステ
ルを含む液をSV≒10で通過させて得られた流出
液および更に水200mlを通じて得られた流出液を
採取した。次にこれらの流出液を合し、これを約
25mlまで減圧下濃縮し、濃縮液に粉末活性炭（白
鷺Ａ、武田薬品工業株式会社製）1.5ｇを加えて、
10分撹拌後過し、液に90％メタノールを510
ml滴下すると結晶が析出した。析出した結晶を
取し、乾燥するとＬ−アスコルビン酸−２−リン
酸エステルマグネシウム塩の結晶35.0ｇが得られ
た。このものは、ほとんど着色が認められなかつ
た。リン酸化反応液からの回収率は86％であつ
た。尚、このものの高速液体クロマトグラフイ
ーの面積比による含量は、乾物換算で99.3％であ
つた。

元素分析値（％）： C₁₂H₁₂O₁₈P₂Mg₃・12H₂Oとして理論値 C18.12 H4.56 P7.79 Mg9.17 測定値 C18.00 H4.63 P7.33 Mg9.04 上記の性状、赤外部吸収スペクトル（IR）お
よび紫外部吸収スペクトル（UV）は、ケミカ
ル・アンド・フアーマシユーテイカル・ビユーレ
チン第17巻、381頁（1969年）に記載の値と一致
した（なお、この文献記載のアスコルビン酸−３
−リン酸エステルは、ケミカル・アンド・フアー
マシユーテイカル・ビユーレチン第19巻、No.７、
第1433頁（1971年）および同第30巻、No.３、第
1024頁（1982年）から、アスコルビン酸−２−リ
ン酸エステルである。）。

実施例２純水350ml、炭酸カリウム50ｇおよびIPA30ｇ
を混合溶解し、次いでピリジン62mlを加えた後、
０±２℃に保ちながらオキシ酸化リン45ｇを滴下
してリン酸化を行つた。反応液に30％カセイソー
ダ水溶液を加えてPHを約11とし、減圧下ピリジン
を留去した。さらに塩酸を加えてPHを約0.5にし、
減圧下アセトンを留去して、実施例１と同様の方
法で処理し、Ｌ−アスコルビン酸−２−リン酸エ
ステル・マグネシウム塩29.5ｇを得た。このもの
は、ほとんど着色が認められなかつた。リン酸化
反応液からの回収率は85％であつた。本品のIR，
UVのデーターは前記文献記載の値と一致し、高
速液体クロマトグラフの面積比による含量は99.1
％を示した。尚、晶出用溶媒としてアセトンを
500mlを使用したものについても同様の結果を得
た。

実施例３実施例１の方法において、TCPPの代りにオキ
シ塩化リンを使用してIPAをリン酸化したものを
実施例１と同様の方法で精製し、Ｌ−アスコルビ
ン酸−２−リン酸エステル・マグネシウム塩34.0
ｇを得た。純度99.0％。このものは、ほとんど着
色が認められなかつた。本品のIPおよびUVは前
記文献記載の値と一致した。

リン酸化反応液からの回収率は84％であつた。

実施例４実施例１と同様の方法でリン酸化反応をし、実
施例１と同様の方法で活性炭（クロマト用特製白
鷺）200mlにＬ−アスコルビン酸−２−リン酸エ
ステルを吸着させた。約４％塩酸水溶液１を通
して活性炭を洗浄し、次いで20％イソプロピルア
ルコール水溶液２をＳ≒１で通じ、Ｌ−アスコ
ルビン酸−２−リン酸エステルを含む部分を採取
した。ついで、実施例１と同様の方法で処理し、
Ｌ−アスコルビン酸−２−リン酸エステル・マグ
ネシウム塩の結晶を得た。純度99.3％。リン酸化
反応液からの回収率は85％であつた。

このものは、ほとんど着色が認められなかつた。
この結晶のIRおよびUVは、前記文献記載の値と
一致した。

実施例５実施例１と同様の方法でリン酸化および炭末ク
ロマトグラフイー用カラムへ吸着を行なつた後、
約４％塩酸水溶液につづいて、塩化アンモニウム
50ｇを水1900mlに溶解し、25％アンモニウムでPH
10にした液を流した。流出液においてＬ−アスコ
ルビン酸−２−リン酸エステルを含む画分約1.5
を採取し、以下、実施例１と同様の脱アンモニ
ア、酸化マグネシウム中和、メタノール晶出の操
作を行ない、Ｌ−アスコルビン酸−２−リン酸エ
ステル・マグネシウム塩を得た。純度99.2％。こ
のものは、ほとんど着色が認められなかた。リン
酸化反応液からの回収率は83％であつた。このも
ののIRおよびUVは前記文献記載の値と一致し
た。

Claims

【特許請求の範囲】

１Ｌ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルを
含有する強酸性の水溶液をカラムにつめた活性炭
に接触させてＬ−アスコルビン酸−２−リン酸エ
ステルを吸着させ、次いで水性溶媒で溶出するこ
とを特徴とするＬ−アスコルビン酸−２−リン酸
エステルの精製法。