JPS5961777A - 胆汁酸の分析システム - Google Patents
胆汁酸の分析システムInfo
- Publication number
- JPS5961777A JPS5961777A JP17263182A JP17263182A JPS5961777A JP S5961777 A JPS5961777 A JP S5961777A JP 17263182 A JP17263182 A JP 17263182A JP 17263182 A JP17263182 A JP 17263182A JP S5961777 A JPS5961777 A JP S5961777A
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- JP
- Japan
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- bile acids
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- fractionated
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- Pending
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-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
- C12Q1/32—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase involving dehydrogenase
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- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
この発明は胆汁酸の分析システムに関する。詳しくは各
種胆汁酸が共存する試料、例えば血清のごとき体液など
の総遊離型胆汁酸、総グリシン抱台型胆汁酸および総タ
ウリン抱台型胆汁酸を簡便に高感度で短時間にて分析し
うる分析システムに関する。
種胆汁酸が共存する試料、例えば血清のごとき体液など
の総遊離型胆汁酸、総グリシン抱台型胆汁酸および総タ
ウリン抱台型胆汁酸を簡便に高感度で短時間にて分析し
うる分析システムに関する。
従来、胆汁酸の分析としては総胆汁酸の分析〃（行われ
ているが、これでは情報が少ないので総遊離型胆汁酸、
総グリシン抱台型胆汁酸および総タウリン抱合型胆汁酸
の分析が望まれている。
ているが、これでは情報が少ないので総遊離型胆汁酸、
総グリシン抱台型胆汁酸および総タウリン抱合型胆汁酸
の分析が望まれている。
第１図に従来用いられている総１１０汁酸分析装置の概
略系統図を示しだ。試料は試料注入ポンプ（１）によっ
て注入され、次いで分析系路（２）とレファレンス系路
（３）とに２分されて供給される。反応試薬は反応試薬
注入ポンプ（４）と（５）とで分析系路（２）とレファ
レンス系路とにそれぞれ送られる。また緩衝液が緩ω（
」液送液ポンプ（８）と（９）とで分析系路（２）とし
７７レンス糸路（３）とに送られる。（６）と（７）は
試料区分間の空気泡の注入用ポンプである。このように
して注入された試料、反応試薬および緩鈎液の混合物は
加熱炉四において６０〜７０°Ｃに加熱される。
略系統図を示しだ。試料は試料注入ポンプ（１）によっ
て注入され、次いで分析系路（２）とレファレンス系路
（３）とに２分されて供給される。反応試薬は反応試薬
注入ポンプ（４）と（５）とで分析系路（２）とレファ
レンス系路とにそれぞれ送られる。また緩衝液が緩ω（
」液送液ポンプ（８）と（９）とで分析系路（２）とし
７７レンス糸路（３）とに送られる。（６）と（７）は
試料区分間の空気泡の注入用ポンプである。このように
して注入された試料、反応試薬および緩鈎液の混合物は
加熱炉四において６０〜７０°Ｃに加熱される。
そして分析系路（２）に送られた液は固定化酵素カラム
（１１）と反応コイ／Ｉ／（６）とを通過後螢光光度計
０灼にて螢光光度が測定される。・一方レファレンス系
路（３）に送られた液は反応コイル０］をｊｌｉｉ過後
螢先後螢光光度計１で螢光光度が測定される。次いで２
つの螢光光度データから総胆汁酸量が算出される。０萄
と０９とは気泡放出孔である。
（１１）と反応コイ／Ｉ／（６）とを通過後螢光光度計
０灼にて螢光光度が測定される。・一方レファレンス系
路（３）に送られた液は反応コイル０］をｊｌｉｉ過後
螢先後螢光光度計１で螢光光度が測定される。次いで２
つの螢光光度データから総胆汁酸量が算出される。０萄
と０９とは気泡放出孔である。
上記の従来法では、試料の体液中に存在して固定化酵素
と反応する物質の影響を除くために加熱燻としてＬ／フ
ァレレン系路が設置され大型化している。−また試料区
分用の気泡を注入せねばならず気泡抜きによる試才１の
ロスが起こり分析感度が低下するという問題点を有する
。
と反応する物質の影響を除くために加熱燻としてＬ／フ
ァレレン系路が設置され大型化している。−また試料区
分用の気泡を注入せねばならず気泡抜きによる試才１の
ロスが起こり分析感度が低下するという問題点を有する
。
この弁明は上記間四点を解消するとともに、さらに総遊
削πり胆汁酸、総グリシン抱合型胆汁酸、総タウリン抱
合型胆汁酸の三つの胆汁酸群を分析しうる分析システム
であって、Ａ）ピペリジノヒドロキシプロピルゲルのよ
うなイオン交換基を有する疎水性ゲル充填の服汁酸分画
部と、Ｂ）１以上の反応試薬液の送液部、３α−■ＳＤ
固定化酵素カラム、反応部および螢光光度測定部をこの
順で流路を介して連結してなり、□さらに前記送液部と
前記酵素カラムとの間に分画された胆汁酸の注入部を介
設し、総遊闘し！Ｉｉ！用４汁酸、総グリシン抱台型胆
汁酸および総タウリン抱合４り胆Ｖ１酸を分析［７うる
よう：’ｌ’ｆｆ成してなる胆汁酸分析システムを提供
するものである、 ′この発明の分析システムによれば３群の胆汁酸が分析
できるだけでなく次のような利点を有する。
削πり胆汁酸、総グリシン抱合型胆汁酸、総タウリン抱
合型胆汁酸の三つの胆汁酸群を分析しうる分析システム
であって、Ａ）ピペリジノヒドロキシプロピルゲルのよ
うなイオン交換基を有する疎水性ゲル充填の服汁酸分画
部と、Ｂ）１以上の反応試薬液の送液部、３α−■ＳＤ
固定化酵素カラム、反応部および螢光光度測定部をこの
順で流路を介して連結してなり、□さらに前記送液部と
前記酵素カラムとの間に分画された胆汁酸の注入部を介
設し、総遊闘し！Ｉｉ！用４汁酸、総グリシン抱台型胆
汁酸および総タウリン抱合４り胆Ｖ１酸を分析［７うる
よう：’ｌ’ｆｆ成してなる胆汁酸分析システムを提供
するものである、 ′この発明の分析システムによれば３群の胆汁酸が分析
できるだけでなく次のような利点を有する。
イオン交換基を有する疎水性ゲルカラムで試料を予め処
理することによって酵素と反応して分析に何重しくない
影唇を与える物質が除去されるので、前記従来法のよう
な加熱炉が不要になり全体の反応時間が短かくなる。こ
のため単位時間当りの分析処、１′！ｌ！数が大となる
。また試料区分用の気泡の注入も不要となり気泡排出時
の試料のロスがなくなり感度が上昇する。まだレファレ
ンス部が不要になり分析装置ｄが簡略化される。
理することによって酵素と反応して分析に何重しくない
影唇を与える物質が除去されるので、前記従来法のよう
な加熱炉が不要になり全体の反応時間が短かくなる。こ
のため単位時間当りの分析処、１′！ｌ！数が大となる
。また試料区分用の気泡の注入も不要となり気泡排出時
の試料のロスがなくなり感度が上昇する。まだレファレ
ンス部が不要になり分析装置ｄが簡略化される。
この発明に係る分析システノ、は生体試料のように胆ｌ
」イゾを多成分含有する試ネ・１の分析に好適である。
」イゾを多成分含有する試ネ・１の分析に好適である。
この発明の分析システムでは、試料によって、例えば血
油などの場合、常法によって脱塩、除蛋白処理が行われ
る。例えに、アンバーライトＸＡＤ−２（ローノ・アン
ドハース社製）や５ｅｐ−ｐａｋＯ＋ｓ （ウォーター
ズ社１１ｊｌｌ ）カラムを通過させて胆汁酸を保Ｊ、
ｌｒさせておいて蒸留水で６１′、浄した後エタノール
で溶出する。相られだ溶出液をイオン交換基を有する疎
水性ゲルによる処理に付して遊離型、グリシン抱合型及
びタウリン抱合型のＩＩ［１汁酸を含有スる３つのフラ
クション（それぞれＦフラクション、Ｇフラクション及
びＴフラクションと称する）に分画する。この分画方法
としては、市原らによって開発されだＰｉｐｅｒｉｄｉ
ｎｏ−ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌ ８ｅｐｈａｄｅ
ｘ 、ＬＩｌ−２６（ＰＬｉＰ Ｌｌｌ−２０）（Ｓ
ｅｐｈａｄｅｘ ＬＩｌ−２０ヲ化学修飾したもの。〕
を用いたカラムクロマトグラフィーがあげられる。
油などの場合、常法によって脱塩、除蛋白処理が行われ
る。例えに、アンバーライトＸＡＤ−２（ローノ・アン
ドハース社製）や５ｅｐ−ｐａｋＯ＋ｓ （ウォーター
ズ社１１ｊｌｌ ）カラムを通過させて胆汁酸を保Ｊ、
ｌｒさせておいて蒸留水で６１′、浄した後エタノール
で溶出する。相られだ溶出液をイオン交換基を有する疎
水性ゲルによる処理に付して遊離型、グリシン抱合型及
びタウリン抱合型のＩＩ［１汁酸を含有スる３つのフラ
クション（それぞれＦフラクション、Ｇフラクション及
びＴフラクションと称する）に分画する。この分画方法
としては、市原らによって開発されだＰｉｐｅｒｉｄｉ
ｎｏ−ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌ ８ｅｐｈａｄｅ
ｘ 、ＬＩｌ−２６（ＰＬｉＰ Ｌｌｌ−２０）（Ｓ
ｅｐｈａｄｅｘ ＬＩｌ−２０ヲ化学修飾したもの。〕
を用いたカラムクロマトグラフィーがあげられる。
このようにして慴られた各フラクションは次のような酵
素反応を利用して分析される。
素反応を利用して分析される。
ＮＡＤ Ｎ ＡＤＩＩ
レゾルフィン レザズリン試＊Ｉ中ノＩ］
ｄ汁ｍｌｌ’ｉ酵素８ ａ −１，Ｉ Ｓ Ｄ （３α
−ｈｙｄｒｏｘｙｓｔｅｒｏｉｄｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎ
ａｓｅ ）によって酸化され共存させたＮＡＬＩは同時
にＮ Ａ Ｉ）Ｈにρ元される。ジアフォラーゼの共存
下Ｎ Ａ Ｄ ＩＩはＮ Ａ ＩＪに酸化され、共存さ
せたレッズリンは同時に螢光を発するレゾルフィンを生
成する。コノ螢光’ｈＪ’Ｒの螢光光度を」１１定して
胆汁酸が分析される。
ｄ汁ｍｌｌ’ｉ酵素８ ａ −１，Ｉ Ｓ Ｄ （３α
−ｈｙｄｒｏｘｙｓｔｅｒｏｉｄｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎ
ａｓｅ ）によって酸化され共存させたＮＡＬＩは同時
にＮ Ａ Ｉ）Ｈにρ元される。ジアフォラーゼの共存
下Ｎ Ａ Ｄ ＩＩはＮ Ａ ＩＪに酸化され、共存さ
せたレッズリンは同時に螢光を発するレゾルフィンを生
成する。コノ螢光’ｈＪ’Ｒの螢光光度を」１１定して
胆汁酸が分析される。
第２図にこの発明の分析システムの一実施例の概略系統
図（′＠ｌ水併ゲルカラムは図示せず）を示した。すな
わちＮＡＩ）、レサズリンおよびジアファラーゼ含有の
緩衝溶液Ｑυをポンプ（ハ）で送りながら試料注入部（
ハ）から、予め疎水性ゲルカラムで分画された遊離型、
グリシン抱合１）すおよびタウリン抱合型の各胆汁酸の
フラクションの試料を注入する。固定化酵素カラム（３
α−ＩＬｓＤ）（ホ）と反応コイル（ハ）をＪｌｌ】過
させて前記反応を完了させ螢光光度計（１）にて螢光光
度を４１１１定することによって各フラクションの総胆
汁酸が分析される。
図（′＠ｌ水併ゲルカラムは図示せず）を示した。すな
わちＮＡＩ）、レサズリンおよびジアファラーゼ含有の
緩衝溶液Ｑυをポンプ（ハ）で送りながら試料注入部（
ハ）から、予め疎水性ゲルカラムで分画された遊離型、
グリシン抱合１）すおよびタウリン抱合型の各胆汁酸の
フラクションの試料を注入する。固定化酵素カラム（３
α−ＩＬｓＤ）（ホ）と反応コイル（ハ）をＪｌｌ】過
させて前記反応を完了させ螢光光度計（１）にて螢光光
度を４１１１定することによって各フラクションの総胆
汁酸が分析される。
また第８図にはこの発明の胆汁酸分析装置の一変形例の
４１１’Ｊ略系続図（ＩＴ！水性ゲルカラムは図示せず
）を示した。すなわち、レサズリン、ジアフオフーゼ及
び１孝素（３α−Ｔ１８ Ｄ ）含有の緩衝溶液Ｃｔ１
）をポンプＣ’１２で送るとともにＮ Ａ Ｔ）含有の
Ｍ衝溶液ｃ（東をポンプＱ４１で送りながら、試料注入
部弼から前記実施例と同様の各フラクションの試料を注
入する。次いで反応コイル（７）を通過させて前記反応
を完了させ螢光光ル計ｃ３Ｉ）にて螢光光度を測定する
ことによって各フラクションの総胆汁酸が分析さｔしる
。
４１１’Ｊ略系続図（ＩＴ！水性ゲルカラムは図示せず
）を示した。すなわち、レサズリン、ジアフオフーゼ及
び１孝素（３α−Ｔ１８ Ｄ ）含有の緩衝溶液Ｃｔ１
）をポンプＣ’１２で送るとともにＮ Ａ Ｔ）含有の
Ｍ衝溶液ｃ（東をポンプＱ４１で送りながら、試料注入
部弼から前記実施例と同様の各フラクションの試料を注
入する。次いで反応コイル（７）を通過させて前記反応
を完了させ螢光光ル計ｃ３Ｉ）にて螢光光度を測定する
ことによって各フラクションの総胆汁酸が分析さｔしる
。
第１図は従来用１いられている胆汁酸分析装置の概１烙
系統図、第２図はこの発明の胆汁酸の分析システムの一
実施５例の概略系統図、第３図はこの発明の胆汁酸分析
システムの一変形例の（Ｉ！Ｙ略糸続図である。 （１１、（４） 、 （５） 、 （８） 、（９）−
（ホ）、ｅつ・・・送液ポンプ、（６） 、 （７）・
・・空気泡注入ポンプ、（２）・・・分析系路、
（３）・・・レファレンス系路、ＯＱ・・・加熱炉、
０１）、 （：？Ａ・・・固定化酵素カラム、
０り、（ハ）、０）・・・反応コイル、シυ・°・ＮＡ
Ｉノ、レサズリンーレよびジアフォヮーゼ含有のＮ衝溶
液、 ６Ｄ・・°レサズリン、ジアフォラーゼおよび８α−Ｅ
［Ｓ Ｉ）酵米含有の緩衝溶液、 第１図 第２図
系統図、第２図はこの発明の胆汁酸の分析システムの一
実施５例の概略系統図、第３図はこの発明の胆汁酸分析
システムの一変形例の（Ｉ！Ｙ略糸続図である。 （１１、（４） 、 （５） 、 （８） 、（９）−
（ホ）、ｅつ・・・送液ポンプ、（６） 、 （７）・
・・空気泡注入ポンプ、（２）・・・分析系路、
（３）・・・レファレンス系路、ＯＱ・・・加熱炉、
０１）、 （：？Ａ・・・固定化酵素カラム、
０り、（ハ）、０）・・・反応コイル、シυ・°・ＮＡ
Ｉノ、レサズリンーレよびジアフォヮーゼ含有のＮ衝溶
液、 ６Ｄ・・°レサズリン、ジアフォラーゼおよび８α−Ｅ
［Ｓ Ｉ）酵米含有の緩衝溶液、 第１図 第２図
Claims (1)
- １、 Ａ）ピペリジノヒドロキシプロピルゲルのよう
なイオン交換基を有する疎水性ゲル充填の胆汁酸分画部
と、Ｂ）１以上の反応試薬液の送液部、８α−１１８１
）固定化酵素カラム、反応部および螢光光度７１ｉｌｌ
定部をこの順で流路を介して連結してなり、さらに前記
送液部と前記酵素カラムとの間に分画された胆汁酸の注
入部を介設し、総遊離型胆汁酸、総グリシン抱金型胆汁
酸および総タウリン抱台型胆汁酸を分析しうるよう構成
してなる胆汁酸分析システム。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP17263182A JPS5961777A (ja) | 1982-09-30 | 1982-09-30 | 胆汁酸の分析システム |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP17263182A JPS5961777A (ja) | 1982-09-30 | 1982-09-30 | 胆汁酸の分析システム |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5961777A true JPS5961777A (ja) | 1984-04-09 |
Family
ID=15945450
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP17263182A Pending JPS5961777A (ja) | 1982-09-30 | 1982-09-30 | 胆汁酸の分析システム |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5961777A (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62209358A (ja) * | 1986-03-11 | 1987-09-14 | Toyo Soda Mfg Co Ltd | 自動臨床分析システム |
| US4961345A (en) * | 1986-12-08 | 1990-10-09 | Fuji Electric Co., Ltd. | Vibration type transducer |
| JPH048256U (ja) * | 1990-05-01 | 1992-01-24 | ||
| EP0821069A1 (en) * | 1996-07-23 | 1998-01-28 | Unitika Ltd. | Test strip using fluorescent chromogen |
| DE112017003532T5 (de) | 2016-07-12 | 2019-04-04 | Panasonic Intellectual Property Management Co., Ltd. | Magnetsensor und Detektionsvorrichtung, die ihn verwendet |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5639797A (en) * | 1979-09-07 | 1981-04-15 | Japan Spectroscopic Co | Analytical method of bile acid and apparatus for the same |
-
1982
- 1982-09-30 JP JP17263182A patent/JPS5961777A/ja active Pending
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5639797A (en) * | 1979-09-07 | 1981-04-15 | Japan Spectroscopic Co | Analytical method of bile acid and apparatus for the same |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62209358A (ja) * | 1986-03-11 | 1987-09-14 | Toyo Soda Mfg Co Ltd | 自動臨床分析システム |
| US4961345A (en) * | 1986-12-08 | 1990-10-09 | Fuji Electric Co., Ltd. | Vibration type transducer |
| JPH048256U (ja) * | 1990-05-01 | 1992-01-24 | ||
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| US5912139A (en) * | 1996-07-23 | 1999-06-15 | Unitika, Ltd. | Test strip |
| DE112017003532T5 (de) | 2016-07-12 | 2019-04-04 | Panasonic Intellectual Property Management Co., Ltd. | Magnetsensor und Detektionsvorrichtung, die ihn verwendet |
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