JPS5993036A - ペプチド - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、精神薬理学的性質を有するペプチド、こ扛ら
ペプチドの製造方法、およびこｇらペプチド（！−活性
成分として含有する医薬１１１成物に１ｊｌｌするもの
である。

さらに計卸１には、本発明は、主としてバングレシンお
よびオキシトシンの断片と見なし彷るペプチドに門する
ものである。

オキシトシン訃よびパップレシンの両者は、そ扛らのホ
ルモン作用の他にさらにニューロペプチド、−ｆｌ工わ
ち待にｄ己１．線過程に影響を与えるペプチドとしてｈ
己載さｎているペプチドである。

今回、オキシトシンおよびバンプレシンのホルモン作用
をもｔよや示さないが、記″１章過程に対しより大きい
かつよシ特異的な影響を示すペプチドを見出した。

本発明は、一般式Ｉ： Ｈ−Ｌ−ｐＧｌｕ−Ｌ−ＡＳＸ−Ｌ−ＣＴａ−Ｌ−Ｐｒ
ｏ−Ｌ−Ａ−Ｙ　　１Ｌ 〔式中、ＲはＨ−Ｌ　−Ｃ）ｒ＋＋−ＯＨまたは醇 Ｉ■−Ｌ−ｐＧｌｕ　−Ｌ−Ａｓｘ　−Ｌ−Ｃｙｓ　−
Ｌ−Ｐｒｏ　−Ｌ−Ａ−Ｙ　％）Ｙは基０ＦＩ−ｉｆｌ
は基Ｇｌｙ　−ＯＨｆ：示す〕を有するペプチド、なら
びにその゛ぼ能誘導体に関するものである。

式Ｉによるペプチドおよびペプチド誘導体は、ペプチド
に関し慣用の方法で製造きれる。本化合物の゛誤用の製
造方法は、均買相に寂いて或いＦ；Ｊ：ヶいわゆる＋４
１相を用いて、縮合によ’）Ｐ）′ｒｇのアミン峨ヲ紹
合させることである。

均質相における縮合は次のように行ｌようことができる
： （ａ）　　遊陣ｔカルボキシル基および保ｄ４さ扛た他
の反応性基を有するアミノ酸もしくはペプチドと、）ｌ
！％　ｉη１ｆアミノ基および保護さ扛たその他の反応
性基を有するアミノ酸もしくはボギペプチドとの、縮合
剤のイｆ在下における粗汁、 （ｂ）　　活性カルボキシル基および必要に応じ保護さ
扛たその他の反応１生基を有するアミノ淑もしくＱよペ
プチドと、遊１祇アミノ基２．１：び必要に応じ保鵬さ
ｔしたその他の反応性基を有するアミノ＋’ｄもしくは
ペプチドとの縮合、′！、たけ （ｅ）　　ａ：ツ１ｔ、カルボキシル基および保護され
た他の反応性基を有するアミノ酸もしくはペプチドと、
ン占性アミノ基および必要に応じ保護された他の反応往
古−ｋ　’＋”４　ｊるアミノ酸もしくはペプチドとの
鰯カルボキシル基の活性化は行に、カルボキシル茫ヲ酸
ハロゲン化物、アジド、無水物、イミダゾリドまたは活
性化エステル、たとえばＮ−ヒドロキシ−スクシンイミ
ド、Ｎ−ヒドロキシ−ベンズ）ｌＪ７：／−ル寸りはｐ
−ニトロフェニルエステルにｆ侠して行なうことができ
る。

アミノ基は、これをホスファイトアミドに変換させて或
いは「ホスホルアゾ」法を用いて活性化することができ
る。

上記励行反応に対する厳も一般的な方法は、カルボジイ
ミド法、アジド法、混合無水物性および活性化エステル
法であり、これらは「ザ・ペプチド」、第１巻、１９６
５（アカデミツク・プレス社）、イーφシュレダーおよ
びケーΦリュブクに記載さｎている。

しかしノ工がら　式Ｉの化曾物ばジャーナル・アメリカ
ン・ケミカルーソ丈エティ、第８５＠、第２１４９頁（
１９６３）に記載されたメリフィールドの「固相」法に
より製造することも可能である。製造すべきペプチドの
アミノ酸の結合は、カルボキシ末端側から出発する。こ
の目的で、反宅・性基を存在させるための、或いは反応
性基を付着させるための固体キャリヤが必要である。こ
のキャリヤは、たとえば反応性クロルメチル基を有する
ベンゼンとジビニルベンゼンとの共重合体とすることが
でき、またはヒドロキシメチルもしくはベンジルアミン
に対し反応性にされた高分子キャリヤとすることもでき
る。

たとえば、クロルメチル基を含有するキャリヤを使用す
れば、キャリヤに対する最初のα−７６人保護されたア
ミノ酸の結合がエステル結合によＲ，−１−ＣＨ２−Ｃ
−０−ＣＨ２−匡１ヨ（式中、Ｒ１はα−アミノ−保護
基である）を与える。

基Ｒ，を除去した後、α−アミノ−保護されたアミノ酸
（たとえばこの場合、リジンであって、そのε−アミン
基も保護されている）は縮合反応により結合することが
でき、またα−アミン基を脱保護した後、次のアミノ酸
を結合させることができる。大抵の場合、反応媒体中に
は相当過剰の各α−アミノ−保護されたアミノ酸を有す
ることが好才しく、この反応媒体はさらに固体キャリヤ
の他にたとえば塩化メチレンまたはジメチルホルムアミ
ドと塩化メチレンとの混合物を含有する。

所望のアミノ酸縮合を合成した後、たとえば）Ｉ　Ｆ　
マタハトルフルオロメタンスルホノ酸ニよってペプチド
をキャリヤから遊離さ亡る。また、ペプチドは、低級ア
ルコール、好捷しくはメタノールもしくはエタノールと
のエステル交換によってキャリヤから除去し、直接にペ
プチドの低級アルキルエステルを生成させることもでさ
る。同様に、アンモニヤを用いる開裂はアミドを与える
。

縮合反応に関与しない反応性基は、たとえば加水分解捷
たは還元によって極めて容易に除去しつる基により保護
される。たとえば、カルボキシル基は、たとえば、メタ
ノール、エタノール、　　１−ブタノール、ベンジルア
ルコールまたｔマｐ−ニトロベンジルアルコールでのエ
ステル化によって効果的に保護することができる。

アミノ基を効果的に保護しうる基は一般に酸基。

たとえば酢酸、安息香酸もしくはビリジ／カルボン酸の
ような脂肪族、芳香族、芳香脂肪族もし７ぐは複素環式
カルボン酸から誘導される酸基、またはたとえばエトキ
シ力ルホニル、ベンジルオキシカルボニル、ｔ−ブトキ
シカルボニルもしくはｐ−メトキ７−ペンジルオキシカ
ルボニル基のようなカルボン酸から誘導される酸基、ま
たはたとえハヘンセンスルホニル４Ｌ＜ｉｄｐ　　）ル
エンスルホニル基のようなスルホン酸から誘導される酸
基であるが、たとえばベンジルおよびトリフェニルメチ
ル基のような置換もしくは未置換のアリールもしくはア
ラルキル基、またはたとえばオルトーニトロンエニルス
ルフェニルおよび７−ペンソイル−１−メチルビニル基
のようなその他の基を使用することもできる。

さらに、リジンのε−アミノ基およびアルギニノのグア
ニジン基を保護することも推奨される。

本発明において慣用の保護基は、リジンについてはｔ−
ブトキシカルボニル基もしぐはトシル基であり、アルギ
ニンについてはニトロもしくはＭｂｓ基である。

」二記のアミノ酸縮合しおいて、アミノ酸ンスチンを使
用することもできるが、第１の場合アミノ酸システィン
を使用するのが好適で＋（’１ち、ことでチオール基（
−８Ｈ）はたとえばアセタミドメチルもしくはトリチル
のような慣用のＳＨ−保護基により保獲される。最終の
所望アミノ酸配列（シスヂニルの代りにシステイニルを
有する）が構成された後、ペプチドに存在するシステイ
ニル残基のチオール基を公知方法により（必要に応じ、
ヂオール保護基を除去した後）第２のシスティン分子の
チオール基へ、或は同じペプチドの第２の分子における
チオール基へ結合させる。

本発明のペプチドにおけるＮ−末端アミノ酸ｐ　Ｇ　Ｉ
　ｕは、アミノ酸縮合においてアミノ酸ピログルタミン
酸を使用して得ることができる。しかしながら、ピログ
ルタミン酸の代りにグルタミンを使用して所望のペプチ
ドを合成し、かつこのように調製されたペプチドのグル
タミニル基を一般公知の方法で縮合反応が生じた後にピ
ログルタミン酸残基まで変換させ、かつ使用した保護基
を除去することが好ましい。

保護基は、当該保護基の種類に応じて種々の慣用方法に
より、たとえばトリフルオロ酢酸またはメタンスルホン
酸によｐ除去することができる。

一般式１によるペプチドの官能誘椰体とは、次のものと
理解される： １　本ペプチドの塩、特に酸付加塩および金属塩、 ２、１〜６個の炭素原子を有する脂肪族カルボン酸、特
に酢酸から誘導されるｈ−アシル誘Ｎｌ−体、３　アミ
ドまたはモノアルキル−もしくはジアルキル−置換アミ
ド（ここで、アルキルは１〜６個の炭素原子を有する）
、 ・１．１〜１８個の炭素原子を有するアルコール、好寸
しくは１〜６個の炭素原子を有する脂肪族アルコールか
ら誘導されるエステル。

酸付加塩は所望の酸媒体からペプチドを直接に単離して
得ることができ、或いは得られたペプチドを次いでこの
ペプチドとたとえばＩＩ（３１，ＨＢｒ、陽酸、硫酸、
酢Ｇも、マレイン酸、酒石酸、クエン酸もしくはポリグ
ルタミン酸のような酸との反応によって酸付加塩まで変
換するとともできる。

金属塩、特にアルカリ金属塩は、ペプチドをたとえばＮ
ａ１ｌ−（、Ｎａ２ＣＯ３、Ｎａ１１００３などのよう
な所望の金属塩基と反応させて、或いは「同相」法にお
いてペグチドーキャリャ結合をアルカリ金属水酸化物で
開裂させることにより得られる。

特にＮ−末端アシル誘導体を意味するＮ−アシル誘導体
ｅ」、好ましくはペプチド合成において既に適自なアシ
ル基を有するアミノ酸を用いて製造される。次いで、こ
のアシル基は、さらにペプチド合成において保護基とし
ても作用する。このように、所望のアシル誘導体は直接
に製造される。

し、かじながら、所望のアシル基は、後にペプチドを慣
用の方法でアシル化して導入することも可能である０、 好適に使用されるヘーアシル基はアセチル基である。

均質縮合法において、式Ｉによるペプチドのエステルお
よびアミドは、好１しくけペプチド合成において既に所
望のエステルもしくはアミド基を有するアミノ酸を用い
て製造される。しかしながら、これらは後に慣用方法で
、得られたペプチドをエステル化するか、またはこれを
アミドへ変換して製造することもできる。「固相」法に
おいて、エステルはペグチドーキャリャ結合のエステル
交換で得ることができ、またアミドはアンモニヤでの処
理によシ得ることができる。

好捷しくけ、１〜６個の炭素原子を有するアルコールか
ら誘導された低級脂肪族エステル、たとえばメチル、エ
チル、プロピル、イソプロピル。

ブチル、　５ｅｃ−フチルアペンチルまたはヘキシルエ
ステルが使用される。

好適に使用されるアミドは未置換のアミド、モノメチル
アミドもしくはジメチルアミド、またはモノエチルアミ
：、１’もしくはジエチルアミドである。

上記したように、本発明によるペプチドは精神薬理学的
作用を有し、特に記憶過程に影響を及ぼす。この作用は
、たとえばオギシトシンおよびパップレシンのような公
知のニューロペプチドよりも著しく大である。

本発明によるペプチド（ＡはＬｙｓもしくばＡｒｇを示
す）は記憶の固定化を著しく促進すると共に、一般に精
神機能の刺戟が望まれる場合にたとえばうつ病の処置に
使用されるが、特にたとえば老人に見られるような学習
過程および記憶過程の障害（老衰）を処置するのに使用
することができる。

本発明によるペプチド（式中、ＡはＬｅｕを示す）は、
記憶の固定化および記憶の後退を抑制する。

したがって、これらペプチドは一般に、中枢神経系の抑
制が望まれる場合に使用することができろうこれらは一
般に、たとえば強迫観念神経症およびその他の形態の不
完全挙動を処置するのに使用することができる。

式Ｉの好適なペプチドは、Ａｓｘがアスパラギニルを示
すペプチドである。

本発明によるペプチドは経口、経腸、非経口。

舌下または鼻孔内ルートで投与することができる。

口もしくは鼻孔内投与に適せしめる医薬上許容された補
助薬と混合して溶液、懸濁ｉ（Ｋ　（必要ならばミクロ
カプセル化による）、乳液および噴霧剤を生成させる。

適当な補助薬と混合することにより、本発明のペプチド
はさらに経口投与に適する形態、たとえば丸剥１錠剤お
よび糊ＪＪ’Ｊとして使用することもできる。さらに、
本発明のペプチドは墾薬とし７て投与することもできる
。

本発明によるペプチドまたはペプチド誘導体はである。

経口および経腸投与に関し、投与量は一般に１０〜ｉｏ
ｏ倍だけ多い。

以下の実施例に関（７、次のことを特記すべきである。

■　光学配置を示さない場合、Ｌ−型を意味する。

Ｈ使用する保護基または活性基につき次の記号を使用す
る。

Ｓｃｍ　　　＝８−カルボメトキシスルフェニルｔＩ３
ｕ　　　＝　ｔ　−−ブチル Ｍｅ　　　＝メチル Ｍｂｓ　　＝４−メトキシベンゼンスルホニルＺ　　　
＝ペンジルオギシカルボニル ’Ｉ’ｒｔ　　　＝＝　トリチル ■　使用する溶剤もしくは試薬につき、次の記号を使用
する。

１弓ｔＯＨ＝エタノール ｒ３ｕＯＨ”＝ブタノール Ｐｙ　　　　−ピリジン ＨＯＡｃ　　＝酢酸 Ａｍ　　　　＝アミＩしアルコール ｔ−ＢｕＯＨ＝ｔ−ブタノール Ｅ　ｔ　Ａｃ　　−酢酸エチル ＭｅＯＨ＝メタノール ＤＯＨＡ　　＝ジシクロヘキシルアミンＤＭＦ　　　−
ジメチルホルムアミド ＴＨＦ　　　−テトラヒドロフラン ＤＯＯ−シンクロへキシルカルボジイミドＤＣＵ　　　
＝ジシクロヘキシル尿素 ＴＦＡ　　　：＝）リフルオロ酢酸 Ｎ、Ｊら１Ｍ、壬Ｎ−エチルモル七リンＨＯＢｔ　　　
＝Ｎ−ヒドロキシベンズトリアゾール■　アミノ酸基に
つき次の記号を使用する。

ＬｙＳ；リジル （）＋ｙ　　　＝グ：νシル Ａｒｇ　　　＝アルギニル Ｐｒｏ　　　　＝プロリル Ｏｙｓ　　　−ソステイニル Ａｓｘ　　　　−アスパルチルモジくはアスパラギニル
Ａｓｐ　　　ニアスパルチル Ａ、ｓｎ　　　−アスパラギニル Ｇｌｕ　　　−グルタミル Ｇｉｎ　　　ニグルタミニル ｐＧＩｕ　　　＝ピログルタミル 実施例１ １、　　Ｚ−Ａｒｇ（Ｍｂｓ）−０ｊＢｕ４２、５　ｙ
　（５９，０１ｍＭ　）のＺ−Ａｒｇ（Ｍｂｓ）−０Ｉ
−（、ＤＯＩ（Ａ　　を、　９．９７１（７３，２１ｍ
Ｍ）のＫ１−１８０４が予め溶解されている５００ｍ１
のＥｔＡｃおよび１００ｍｅのＩ（２０中に懸濁させた
。全物質が溶解した後、層を分離させそして有機層を１
００ｍｇの３０％Ｍａｉｌ　溶液で洗浄した。有機層を
Ｎａ２ｓＯ４上で脱水し、次いで蒸発させた。１３５−
のイソブチンを一３０℃にて凝縮させ、その後ＯＨ２０
１２４００ｍ１１’およびａＨ２ｓＯ４５ｍｌにおける
Ｚ　Ａｒｇ（Ｍｈｓ　）−ＯＨの溶液を加えた。この混
合物を４日間攪拌し、次いでイソブチンを蒸発させた。

有機層を分離漏斗中へ導入し、次いで水を加え、充分量
のル２００３を加えてｐＩＩを７にした。次いで、層を
分離させ、有ＰＡ層を３Ｘ１００ｍｅ（７）５％ＮａＨ
ＯＯｘと５％ＫＨ８（Ｊ４と３０％Ｎａ１ｌ　溶液とで
洗浄した。

有機層を”ｚｓＯ４で脱水した。石油ニーデルを加えた
後、生成した沈澱を戸別し、そして石油ニーデルで洗浄
した。

収量：　１８．６１？（５９，０％） ０１１０１３：　ＭｅＯＨ（８：　２　）におけるＩも
ｆ＝０．８４（８４０２） ２、　１１−Ａ、ｒｇ　（Ｍｂｓ　）−０ＲＢｕＭｅＯ
Ｈ１８０ｍｅ中におけるＩＢ、００９のンｒ　Ａｒｇ（
Ｍｂｓ）−０ｔＢｕを５％濃度のＰｄ１０および水素を
用いて水素化した渋その後、Ｐｄ１０を戸別し、そして
溶液を蒸発させた。残留物（泡沫）を再び蒸発さぜ、そ
して２００　ｙｎｌＱＥ　ｔ　Ａｃ中へ溶解さぜ、溶解
しなかった固体を済去した。次いで、泥液を泡沫が残存
する才で蒸発させた。

収量：　１２．７２？（９３％） ＯＨＯＩ３　：　ＭｅＯＩ４：　Ｈ２Ｏ（７０：　３０
　：　５　）におけるＩＬｆ＝　０．６３　（５ｉＯｚ
　） ３、　２−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｍｂｓ　）−０ｔＢｕ５．
１５Ｆ（３８，１１ｍＭ）のＨＯＢ　ｔと７．２３Ｆ（
３４，９４ｍｌ’ｖｆ）のＤＯＯとをＪＩＩｌ１次に１
２７２り（３１，７６ｎｎＭ）のＨ−Ａｒｇ（Ｍｂｓ　
）−０ｔＢｕと７．９２ｆ（３１，７６ｍＭ）のＺ−Ｐ
ｒｏ−ＯＨとの混合物へ一５℃にて加えた。その後、混
合物を一５℃にて１５分間、０℃にて４５分間および室
温にて１晩攪拌した。ＤＯＵを沖去し、そして溶液を蒸
発させた。

その後、残留した油状物を５００ｍ１の酢酸エチル中に
溶解させ、この溶液を次いで３Ｘ１００ｙｄの５％Ｎｌ
ＳＯ４と５％ＮａＨＯＯｓと水とにより抽出した。

有機層をＮａ２５Ｏａ　　で脱水し、次いで蒸発させた
。

得られた油状物を次いでメタノール中に溶解させた。水
を加えることにより油状生成物を得た。

収量：　１６．７５９　（８５，９％））・ルエン：　
ｇｔｏＨ（ｓ　：　２　）における財＝０．４０　（Ｓ
ｉＯｚ　） ４、　　Ｚ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｍｂｓ）−Ｏｌｌｌ　５
９　（２３，７４ｍＭ）の乙−Ｐ　ｒｏ−Ａｒｇ　（Ｍ
ｂｓ　）−ＯｔＢｕ　を１５＋）＋＋＋ｇの９ｏ％ＴＦ
Ａおよび１．５　ｍｅのアニソール中に溶解し、そして
混合物を１時間攪拌し／こ。その後、反応混合物を１，
５００ｍ／！のエーテル中１・こ導入して、油状物を分
離させた。上澄液を次いでデカント除去し、そして油状
物をエーテルと共に攪拌した。エーテルをデカント除去
した。

次いで、油状物を１００ｍ／！の０Ｈ２０１２に溶解さ
せ、これをエーテルに滴加して沈澱を生成させた。沈澱
物を戸別し、ＫＯＨで乾燥させた。

収量：　１２．５１　？　（９１，５％）０１−４２０
＋２　　：　ＭｅＯＨ：水（７０：３０：５）における
Ｒ４＝　０．４６　（５ｉＯｚ　） ５．　　Ｚ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｍｂｓ）−Ｇｌｙ−Ｎｌ
２２．８９−（２２，９４ｍＭ）のＮＥＭが既に加えら
れ−ＣＬＩ＆ＤＭＩｉ’　２５　ｍｅにおける２、５４
１　（２２，９４ｍＭ　）の１ｉ−Ｇｌｙ−ＮＩＪ２：
　ｌＩＣ１す、容液を、ＤＭＦ１８０ｍｅにおける１２
Ｆ（２０，８５ｍＭ）の乙−ヒ、。−ｋｙ（Ｍｌ）Ｓ　
）−ＯＨと５．６４９　（４１，７０ｍＭ）のｌｌ０Ｂ
　ｔとの混合物・＼−１０°Ｃにで加えた。、ｉ、７ｓ
ｒ（ｚ２．９ｓｍＭ）のＤｃｃｆｉｃ◇更応混合物へ一
１０℃にて加えた。次し１で、混合物を一１０℃にて１
時間および４℃にて１晩攪拌した。その後、ＤＣＵを沖
去し、そして炉液を油状物が得られるまで蒸発させた。

油状物をＯＨ２０１２における２−ＢＬＩＯＨの混合物
（２：３）２００ｒｎ／！中に溶解させ、３　Ｘ　５０
　ｍｌの５％ＫＩＳＯ，と５％ＮａＨＣＯ３と３０％Ｎ
ａ１ｌ　溶液とで抽出した。次いで、有機層をＮａｚ８
０４　　で脱水した。

石油エーテルを有機層に加えて沈澱を生ぜしめた。

この沈澱を炉別し、石油エーテルで洗浄した。

収量：９４．３ち＝１２．，１２ｆ ＯＨＣＩ３　：　ＭｃＯＨ：　ＨｚＯ（７（１：　３０
　：　５　）におけるＲｆ＝　０．７７　（５ｉＯｚ　
） ６、　　Ｔｒｌ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）　−Ｐｒｏ−Ａｒｇ
（Ｍｂｓ）−（Ｈｙ−Ｎｌ２のＴ’ｄ１０より水素添加
した。Ｐｄ　／　Ｏを炉去し、そして：先台′吻を一１
０℃まで冷却し、その後１，３５９　（２，７１ｍＭ）
のＴｒｌ−Ｏｙｓ　（Ｔｒｔ　）　　Ｏ，Ｈと０．７０
ｆ（５，１６ｍＭ　）のＩ−ＪＯＢ＋と０５９２の［ン
ｃｃｌを）式次に加えた。この混合物を次いて一１０℃
にて１５分間、次いで０℃にて１時間、さらに！の′崎
室温にて１晩攪拌した。反応混合物’１−ｚＳ’ｃまで
冷却し、生成し；／ｉ：　Ｄ　（Ｊ　Ｕをｒ去し、そし
て）戸液２蒸発させて油状物を得た。この油状物を乙−
Ｂ＋、＋０Ｉ−１と１ｊＨ２０１２との混合物（２：３
）５０１ｎｌ中に溶解さぜ、そして３Ｘ１５ｍ／！の５
％Ｎａｌ−１００３と５％ＫＩＳＯ＜と３０％Ｎａ１ｌ
　溶液とで抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、
そして蒸発させた。

収量：２７０２（９６％） ＯＨＯＩ３　：　ＭｅＯＨ：　ＨｚＯ（７０：　３０　
：　５　）におけるＲｆ＝　０．８２　（５ｉ０２　） ７、　　Ｈ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｍｂ
ｓ）−Ｇｌｙ−Ｎｌ−１２６、８５ｆ　（６，３１ｍＭ
　）のＴｒｔ−Ｏｙｓ　（Ｔｒｔ　）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ
　（Ｍｂｓ　）−Ｇｌｙ−Ｎｌ２を４０ゴの酢酸中に溶
解させた。この溶液へ４ｒｎ１！の水を徐々に加えた。

溶液をさらに室温で１時間攪拌した後、さらに４０ｍ１
の水を加えて沈澱を生ぜしめた。この沈澱を炉去し、ろ
液を蒸発させて油状物を得、この油状物を７０−のＺ−
ＢｕＯＨ：　０Ｈ２０１２（２：　３　）に溶解させ、
そして３Ｘ１０ｍ／！の５％ＮａＨＣＯ３と３Ｘ１０ｍ
ｌ！の３゜％ＮａＯＩ　溶液とで抽出した。有機層をＮ
’ａ１８０４　　で脱水した。エーテルを添加すると沈
澱が生じ、これを炉別かつ乾燥させた。

収＃：　ｓ、ｏｓ　ｙ　（ｓ９％） ＯＨＯＩ３　：　ＭｅＯＨ：ＨｚＯ（７０：３０：　５
）におけるＲｆ＝、　０．７１　（５ｉＯ２） ８、　　Ｚ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｏｙｓ（Ｔｒｔ）−Ｐｒ
ｏ−Ａｒｇ（Ｍｂｓ）−ＧｌｙＮＨ２ Ｏ，６６ｔ　（４，８７ｍＭ）のＨＯＢｔと０．８５ｆ
（４，１０ｍＭ　）（７）Ｄ　００とを順次に、５０−
ノＤＭＦにおけル３．４２９　（４，，０６ｍＭ；Ｖ）
上記７で得られたペプチドと１．６０　ｔ　（４，０６
ｍＭ）のＺ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−ＯＨの溶液に一１０℃で
加えた。溶液を２４時間攪拌した後、これを−２５℃ま
で冷却し、そして生成したＤＯＵを戸去１７た。Ｆ液を
１００ｍ１の５％ＮａＨＯＯａ中に注ぎ込んで沈澱を生
ぜしめた。

この沈澱を戸別しそして水で３回洗浄し、次いで乾燥さ
せたー。

収量：　４．Ｏｆ　（８０，８％） ０１４ｚＯＩｚ　　：ＭｅＯＨ：ＨｚＯ（７０二３０：
５）におけるＲｆ　＝　０．７０　（５ｉＯｚ　） ９、　　Ｚ−ＧＩＦＩ−Ａｓｎ−Ｏｙｓ（８ｃｍ）−Ｐ
ｒｏ−Ａｒｇ−（）Ｉｙ−Ｎｌ２４、Ｏｆ　（３，２３
ｍＭ）　　の上記８で得られたベプチドを１００＋＋＋
７！のメタノールと１００−の〇Ｈ２Ｏ１２中に溶解さ
せた。その後、０．６ｔｄの塩化Ｓ−カルボキシメチル
スルフェニルを加えた。混合物ヲ１時間攪拌した後、生
成した沈澱をｐ別しそしてエーテルで洗浄した。

収量：２．０Ｏｆ（ｓ７％） ＯＨｚＯｌｚ　：　ＭｅＯＨ：　Ｉ２０　（７０：　３
０　：　５　）におけるＲｆ　＝　０．５５　（８ｉ０
ｚ　）即誼 ２．００　ｆ　（１，８４ｍＭ）　　の上記９で得られ
たペプチドを１００　ｍｌのメタノール中に溶解させ、
その後０．６５１　（３，６８ｍＭ）のＨ、０ｙｓ−Ｏ
Ｈ、ＨＯｌ　、ＨｚＯを加えた。混合物を１時間攪拌し
、その後１００ｍ１のエーテルを加えて沈澱を生成させ
た。液体をデカント除去し、そして結晶をエーテルと共
に２回攪拌した。次いで、残渣を極めて少量のメタノー
ル中に溶解させ、そしでクロマトグラフィーによシ精製
した。

収量：　６５０ｍｇ　（３１，３％） ＢｕＯＨ：ＨＯＡｃ：Ｉ２０（６７：１０：２３）にお
ける■ｔ（＝　０．３１　（５ｉ０２　） ４５０　ｍｇ（０，４０ｍＭ　）　　の上記１０で得ら
れたペプチドを１２．５−のＴＦＡと０，１３−のＭｅ
ＳＯ３１−１と０．０１１ｎｅのグーオアニソールとの
混合物に溶解させ、そして５時間攪拌した。反応混合物
を次いでエーテル中に注ぎ入れて油状物を生成させた。

上澄液をデカシト除去１−１ぞして油状物をニーデル型
のイオン交換樹脂（ダー　ウエックス２．Ｘ−８）でイ
オン交換し、次いで凍結乾燥させた。収量：３００　ｍ
ｇｏ 凍結乾燥した物質を１０−の５０％ＨＯＡｃに溶解させ
、５０℃にて６時間攪拌した後、再び凍結乾燥させた。

次いで、この物質をクロマトグラフィーによって精製し
た。

収量：８４ｍｇ １−ＢｕＯＨ：　ＨＯＡｃ　：　１１２０　（２：　１
　：　１　）におけるＲ、ｆ＝　０．１４　（５ｉ０２
　、ウエルム）実施例２ １、　　　　　ｌｌ−０ｙｓ−０１（ Ｚ−Ｇｌ　ｎ−Ａｓｎ−０ｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｏｆ
ｙ−ＮＨ２、Ｉ（ＣＩ２．６ｇ（ａｍＭ）のＺ　Ｇｌｎ
−ＡｓＧｌｎ−Ａｓｎ−０ｙｓ（Ｓ。

−Ｌｅｕ−Ｃ）ｌｙ−Ｍ−ｈ　（実施例１に記載した方
法と同様に製造：　０Ｈ２０１２：　ＭｅＯＨ（８：　
２　）におけるＲｆ＝０、６０　、　８１０２上）を３
０−のＤＭＦ中に溶解させ、その後０．７８　ｆ　（４
，４ｍＭ）のＨ−０ｙｓ−ＯＨ，Ｉ（０１、Ｈ＋０を加
えた。室温で２．５時間攪拌した後、反応混合物をエー
テル中に注ぎ入れてペプチドを油状物として分離させた
。この油状物を少量のＭｅＯＨ中に溶解させ、そし゛Ｃ
溶出剤としてメタノールを使用してセファデックスカラ
ム上で和製した。

収量：　０．６５９　（２４％） １−ＢｕＯＨ：　ＨＯＡｃ：　Ｉ２０　（４：　１　：
　１　）における１Ｌｆ＝　０．３６　（５ｉ（Ｊ２　
） ２、　　　　　　Ｈ−Ｏｙｓ　−ＯＨ ｐＧＩｕ−Ａｓｎ−Ｏｙｓ−Ｐｒｏ−−、Ｌｅｕ−ＣＨ
ｙ−Ｎｌ−１２、酢酸塩０．６５９　（０，７１ｍＭ）
　　の上記１で得られたペプチドを７５−のＴＦＡと１
２−のメタンスルよン酸と０．２５　ｍｅのチオアニソ
ール中に溶解させた。

混合物を２時間攪拌した後、１００ｒｎｅのエーテルを
加え沈澱を生成させた。この沈澱をエーテルと共に２回
攪拌し、デカントした。次いで、回内をｔ−ＢｕＯＨ：
　Ｉ２０　（１：　１　）に溶解させ、ダーウエツクス
Ｚ　、Ｘ　−８Ａｃ−との交換にかけ、次いで凍結乾燥
させた。凍結乾燥されグζ物質を、溶出剤としてｈ　Ｂ
ｕＯＩｌ　：　ＨＯＡｃ　：　ｌ−１２０（３：　１　
：　１　）を使用するクロマトグラフィー（メルクＣ型
既製カラム）に分配によりｌ−９，ＯＨ：　ｌ−１０Ａ
ｃ　：ＨｚＯ（４：　１　：　５　）を用いてオ青製し
た。

収ｉ：１３７　宜ｎｇ（２２□９６’　）１−１３ｕＯ
Ｈ：ピリジン：Ｉ（ＯＡｃ：ＨｚＯ（８：３：１：４）
におけるＲｆ　＝　０．２６　（５ｉＯｚウエル１、）
実施例３ ２、２　９　　（２，０６ｍＭ　）のＺ−Ｇｉｎ−人ａ
ｎ−Ｃｙｓ（Ｓｃｍ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｍｂｓ　）−
０ｔＩ３ｕ　　（実施例１に記載した方法と同様にして
得られる；　０Ｈ２０ｈ　：へ１ｅＯＩｌ　：　１４２
０（７０：３０：５）におけるＲｆ＝二ｏ、　１１４　
（ｓｉｏｚ上））を２０ｍ１２のＭｅＯＨ中に溶解させ
、その後０．３５９　（１，９６ｒｎＭ）のＨ−Ｏｙｓ
−０１１，ｔ１２０　、　）１０１　を攪拌しながら加
え、そして混合物を１時間攪拌し／こ。２０ｒ、フｅの
ニーデルを加えることにより沈澱物を得た。

液体をデカント除去し、そして固体を１００−のエーテ
ルと共に２回攪拌し次いで、固体を２００−〇〇Ｈｘ　
Ｏｉ　２中に溶解させ、セして２Ｘ１００ｍｌの水によ
シ抽出した。水層を凍結乾燥させた。

収量：　１．８５　ｆ　（，７４Ｘ） ＯＨ２０１２：　ＭｅＯＨ：　ＨｚＯ（’７０　：　３
０　：　５　）におけるＲｆ　＝　０．３７　（ＳｉＯ
２上） ２、　　　　　　　ＨＯｙｓ　　ＯＨ ｐＧＩｕ−Ａｓｎ−Ｏｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−ＯＨ，酢
酸塩１８０ｍｇ（０，１６ｍＭ）の上８己１で得られた
ペプチドを３．７−のＴＦＡと０．３７π２のチオアニ
ノールと０．９　ｍｌとメタンスルホン酸とに溶解させ
、そして混合物を室温にて５時間攪拌した。その後、反
応混合物を２５ｍ１のエーテル中に注ぎ込み、得られた
沈澱を戸別し、そしてエーテル洗浄した。

ＺＸ−ｓ）　　による交換にかけた。イオン交換樹脂。

を炉去し、溶液を凍結乾燥させた。次いで、固体を１０
ｍ１の５０％酢酸中に溶解させ、５０℃にて５時間攪拌
し、次いで再び凍結乾燥づせ／こ。この生成物を、りｒ
Ｊ７トグラフイーにて（メルク既製カラム）　Ｉ　　Ｂ
ｕＯＨ：ＨＯＡｃ　：ＨｚＯ（１：　１　：　１　）を
溶出剤として使用することにより精製１〜だ。

収−１１ｉ　：　４７ｍｇ　（４０％）２−］ＪｕＯＨ
：　Ｐｙ　：　２５％Ｎ１Ｉ３０１ｉ　；　ＨｚＯ（２
０：　２０：３：１５）におけるＩｌｆ　＝　０．２１
　（Ｓ　ｉ０２　）実施例４ 実施例１．１１にｈ己載したと同様の方法を用１ハてＺ
−Ｏｆ　ＩＩ−Ａ　Ｉ！１ｌ−Ｃｙｓ−Ｐ　ｒｏ−Ｌｅ
ｕ−Ｏｔ　Ｂｕ　、　Ｈｅ　ｌ　（］　−Ｔｉｕ　Ｏｆ
　Ｉ　：Ｈ０ｙｓ−ＯＨ Ｐｙ　：　ＨＯＡＣ：　ＨｚＯ（８：　３　：　１　：
　４　）におけるＲｆ＝０．１２）：ＨｚＯ（２：１：
１）における几ｒ　＝０．４０　（５ｉ０２）　）に変
換させた。

実施例５ 同様にして、 の酢酸塩を製造した。

実施例６ １、　　（Ｚ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｏｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｒ
ｇ（Ｍｂｓ）−０ｔＢｕ）２１．６２９　（１，３３ｍ
Ｍ）のＺ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｏｙｓ　（Ｔｒｔ　）Ｐｒ
ｏ−ｋｒｇ　（Ｍｂｓ　）−〇ｔＢｕ　（実施例１に記
載した方法と同様に得られる；　０ＨＯＩｓ　：　Ｍｅ
ＯＨ：　Ｈ２（Ｊ　（７０：　３０；５）におけるｎ、
ｒ＝ｏ７ｏ　（８１０２）　）を酢酸における沃素の０
．００５Ｍ溶液２９２ｍｇ中へ溶解させた。

室温にて１時間攪拌した後、チオ硫酸すトリウム溶液を
淡黄色溶液が得られるまで徐々に加えた。

次いで、１．３３−のｌＮＮａＯＨ溶液と２５０　ｍｌ
、の水とを加え、生じた沈澱を濾過によシ除去し、そし
て水洗した。ＭｃＯＩ−１／エーテル中で再結晶化を行
なった。

収量：１．０３ｆ（７９％） ＯＴ■２ＣＩ＋　：　ＭｅＯＩｌ（８：　２　）におけ
るＲｆ　＝　０．３５（Ｓｉ０２） ２、　　（ｐＧｌｕ−Ａｓｎ−Ｏｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ
−ＯＨ）２上記の保護されたダイマー１．０３　ｙ　（
０，５３ｍＭ）をＴＦＡ　１０７！中に攪拌しながら溶
解させ、これに６１２のメタンスルホン酸と０．６２の
チオアニソールとを加えた。室温にて５時間静置した後
、この溶液を１００艷のエーテルに滴加し、生じた沈澱
を濾過により除去し、そしてエーテル洗浄した。次いで
、この化合物をｔ−Ｂｕｄ）（と■］２０との１作 （ダウエックス乙Ｘ−８）を用いてイオン交換し、そし
て凍結乾燥させた。この凍結乾燥された物質（６９０ｍ
ｇ）を１０Ｔｎｌ！の５０％ＨＯＡｃ溶液中に溶解させ
、５０℃にて５時間保った。凍結乾燥の後、この化合物
を８ｉ０２カラム上でのクロマトグラフィーにより溶出
剤系１−ＢｕＯｌｌ　：　ＨＯＡｃ　：　Ｉ２０　　（
１：　１：１）を用いて精製した。

収量：１５０ｍｇ １−＋３ｕＯＨ：　ＨＯＡｃ　：　Ｉ２０　（１：　２
　：　１　）におけるｒＬｆ＝　０．４２　（５ｉ０２
　、ウエルム）実施例７ 化合物Ｚ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ　（Ｔｒｔ　）　−
Ｐｒｏ−Ａｒｇ　（Ｍｌ）８　）−Ｇｌｙ−Ｎｌ２（実
施例１にしたがって得られる）を実施例６．１に記載し
た方法でＩ２により処理し、その後ペプチド４　（ｐＧ
Ｉｕ−Ａｓｎ−Ｏｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−０１ｙ−Ｎｌ
２　）２　　を実施例６２に記載したように得た。

１−ＢｕＯＨ：　ＨＯＡＣ：Ｉ２０　（１：　２　：　
１　）におけるＲｆ＝　０．２７　（８ｉ０２　、ウエ
ルム）実施例８ （Ｚ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｏｙｓ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｏｔ
Ｂｕ　）　２を実施例６におけると同様な方法で製造し
た。

このペプチド０．７ｇ（ｉ７７５ｍ（７）ＴＦＡと１．
２ｄのメタンスルホンｅと０．２５−のチオアニソール
とに溶解させた。２時間（ｊｔ拌した後、１００　ｍｌ
のエーテルを加えて沈＃を生成させ、この沈σ２を次い
でエーゾＡで洗浄した。その後、固体物′Ｊ′Ｌをｔ　
−ＢｕＯＨ：　Ｈ，０（１：　１　）に溶解させ、／ｙ
夕′ウェックス（２Ｘ−８Ａｃ　）によシイオン交換し
、そして鞍結乾燥させた後、これを５ｉ０２カラム上で
クロマトグラフィーにより精製して（ｐＧｌｕ　−Ａｓ
ｎ　−Ｃｙｓ　　Ｐｒｏ−Ｌｅｕ　−ＮＨ＊　）ｚの酢
酸塩を得た。

１−ＢｕＯＨ：　Ｐｙ　：正（ＯＡｃ：Ｉ２０（８：３
：１：４）におけるＲｆ＝０．２２（Ｓｌｏｚ）。

実施１＋ｉ′ｌ１９ 同様にして、次のものを製造した： （ｐＧＩｕ　−Ａｓｎ　−Ｃｙｓ　−Ｐｒｏ　−Ｌｙｓ
　−Ｇｌｙ　−Ｎｆ（ｔ　）＊（ｐＧＩｕ　−Ａｓｎ　
−Ｃｙｓ　−Ｐｒｏ　−Ｌｙｓ　−０Ｈ）を夏

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）一般式： ％式％ ： 〔式中、１（はＨ−Ｌ　−Ｃｙｓ−ＯＨまたはＨ−Ｌ−
   ｐＧｌｕ　−Ｌ−Ａｓｘ　−Ｌ−Ｃｙｓ　−Ｌ−Ｐｒｏ
   　−Ｌ　−Ａ−Ｙ　　ｆ）示し、 Ａはアミノ酸基Ａｒｇ　Ｉ　Ｌｙｓ　　またはＬｅｕを
   示し、Ｙは基−０ｋＩま之は−Ｇｕｙ−Ｑｉ（’を示す
   〕合有するペプチドまたはその官能誘導体。 （２）式： ％式％ 〔式中、ＲｈよびＹは特許請求の軛ｄ第１項に記載の怠
   味ケ有する〕 含有する特許請求の範囲 またはその官能誘導体。 （３）式： 〔式中、ＲおよびＹは特許請求のΦ旧用第１項に記載の
   意味１ｃ冶丁る〕 を有づ−る特ｆｊ’Ｆ　ｆｆＲ求の範囲第１項に記載の
   ペプチドまたはその官能誘導体。 （４）特ｎ＃ｊ’？求のｊｌｉａ囲第１項第１項３項の
   いずれかにｈ己＋ｉｉ＋．のペフ゜チドを製造するに際
   し、このペフ。 チド全、同族ペプチドを：！Ｆ！造丁るためのＩＩ用力
   法によって製置することを特徴とするベプチ１゜の製造
   方法。 ｛５｝式： ％式％ 〔式中、１個若しくはそｎ以上のアミノ酸基は保１１４
   基を有する〕 のペプチドから保り基を除去し・次いでグルクミニル基
   全ピログルタミルＭ＋こ変換させることを１１．！Ｊ′
   徴とする特許請求の’ｊ’ｊ　＋Δ１第４項にｉｊ市或
   の方法。 （６）特許、１ｆ−Ｊ求の昶囲第１項乃至第３項のいず
   れかに記ｊ１ａのペプチドと、医薬用途に適するキャリ
   ヤとからなる医薬組成物。