JPS60100596A - Ｇｒｆ類似体類 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はヒトその他の哺乳動物の下垂体の機能に影響を
与えるペプチドに関する。特に本発明は下垂体による、
成長ホルモンの放出を促：；ｆ！するペプチドを目的と
する。

生理学者たちは視床下部が、各下垂体ホルモンの分泌を
刺激または抑制する視床下部産生特殊物質により１尿下
垂体の分泌作用フｔ／コントロールすると長年にわたシ
認識してきた。１９８２年に、ヒト膵（腫瘍）放出因子
（ｈｐＧＩｔｉ’）がヒト膵臓腫瘍の抽出物から単離さ
れ、精製、！１！ｉ性確認、合成および試験ざｎ、下垂
体によるＧｌｌの放出を促進することが発見でれた。対
応ずイ〉ラット視床下部ＧＩＩ放出因子（ｒＧＲＦ’）
および対応するブタ視床下＞？ｌＳＧＩｆ放出因子（７
）ＧＩＩＦ）についても特性確認とげ成を行なった。

合成ポリペプチド′が合成さノ１そして試験された。

この合成ポリペプチドは培養下爪体４ｆｌ胞からＧＨを
放出し、そして、生体内における酵素分屏に河して抵抗
性である。これらのベプ゛チトは次の必須要件のうちの
少なくともいずｉＬ／Ｊ・１つの要件を満たず。（ａ）
第１位における残基（土Ｎ”Ｍｅ置換基まだはＣＡＩｅ
置挨基のいず扛かをイ１する；（ｂ）Ｄ−Ｌｅｕば■１
７−および／または第２３立に存在する；および／また
は（Ｃ）Ｄ−ＧｌｕまたばＤ−Ａｓｐは第２５位に存在
する。これらのペプチドは（ａ）〜（Ｃ）の要件のうち
の１つ以上の要件を満たし又いてもよく、あるいは、全
ての要件を満たすこともできる。

第１位における残基はＴｖｒ、Ｄ−Ｔ２／ｒ１Ｍｅｔ。

ＰｈｅｒＤ−Ｐｈｅ＋ｐＣ／ｌ−、ｌ”ｈｅ、Ｌｅｖｘ
ｌｉｉｓおよびＤ−Ｈｉｓであることもできる。（これ
らの残基はα−炭素上またはα−アミン基中のいずれか
にメチル置換基を有することもできる。〕これらのペプ
チドは場合により、第２位にＤ−Ａｌａおよび／または
第３位にＤ−Ａｓｐおよ少／−または第８位にＤ−Ａｒ
ｇまたばＤ−８ｅｒおよび／゛または第１０位にＤ−Ｔ
ｙｒおよび／または第１５位にＤ−Ａｌａを有すること
もできる。これらのベブチ１−はまた、第２７位のＭｅ
ｔについて、Ｉ）−Ｍｅｔ、Ｎｌｒ＋、またはＮυαの
ような置換基を有することがｆｊＨ，シい。

本発明による医薬組成物は医療薬用祉たは獣医薬用の液
状または固体状の担体中に分散きれた、長さが２８〜４
４残基の類似体またはその非毒性塩を含有する。このよ
うな医薬組成物は治療目的および診断目的に投与するた
めのヒトおよび獣類用の臨床薬に使用できる。更に、こ
れらの医薬組酸物は温血動物（家禽類を含む）の生長お
よび冷血動物（例えば、魚類、ウナギ秀）の養殖を促進
するのに使用できる。

ペプチドを規定するために用いられる命名法は／ユレー
ダーおよびリュプヶ著°°波プチド類”（アカデミツク
・プレス（１９６５）にょシ明確にされたものである。

ここで＆、ｌ、慣用の表現法に従ってＮ−末端を左側に
表わし、Ｃ−末端を右側に示す。”天然アミノ酸”とは
、タンパク胃中に見出される共通の天然アミノ酸であシ
、Ｇｌ’／、Ａｌａ。

Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌａ、Ｓｅｒ、ＴｌＬｒ、Ｌ’／ｓ
＋Ａｒｇ＋Ａ８’１）ｒＡｓｎ、Ｇｌｕ、、Ｇｌｎ、、
Ｃ’ｌｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、’ｌ”／ｒ、Ｐｒｏ。

Ｔｒｐおよび１ｉｉｓのうちの１つを意味する。”Ｎｌ
ｅ”はノルロイシンのことであり、捷た、Ｎｖαはノル
バリンのことである。アミノ酸残基が異性体の形をもつ
場合、特にことわらない限シ、その異性体は表示されて
いるアミノ酸の７．−形である。

本発明によシ、下記の配列を有する合成Ｒプチドおよび
その非毒性塩が提供される。

Ｒ＋−Ｒ２−Ｒ３−Ａｌａ−Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−
ＲＢ−８ｅｒ−ＲＢ６ＡｒｇＲ）２−ＲｌＢ−Ｌｅｕ−
Ｒ，ｆｆ−Ｇｌｎ−ＲＩ７−ＲｌＢ−Ａｌａ−Ａｒｇ−
Ｌ’ｌ５−Ｌｅｖ、−’Ｉｒｅｕ−Ｒ２４−Ｒ，，５−
Ｉｌｅ−Ｒ２７−Ｒ２Ｈ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ｇ１ｎ−Ｇ
ｌｙ−Ｇｌｕ−Ｒ３，−Ａｓｎ−Ｇ１ｎ−Ｇ１ｕ−Ｒ２
Ｈ−８３ｇ−Ｒ４６−Ａｒｇ−７１４４２ＨｉｓＡ’４
４ 〔式中、Ｒ１はＴ’Ｊｒ、Ｄ−Ｔ’／ｒ、ＡＩ’ｅｔ、
Ｐｈ、ｅ、Ｄ−Ｐｈｅ、ｐｃｌ−Ｐｈｅ、Ｌｅｔｔ、Ｈ
ｉＳ＋甘たはＤ−Ｈｉｓである； Ｒ２はＡｌａｉたはＤ−Ａｌａである；Ｒ１はＡｓｐま
たは１）−Ａｓｐである；Ｒ８ば３ｅｒ、Ａｓｎ、、Ｄ
−８ｅｒ４たはＤ−Ａｓｎである； １１、ｏＩｄ７＋ｙｒ′！ｆ、たはＤ−４’３’ｒであ
る；Ｒ１２はＡｒｇｉたはＬｙｓである； ＲｌＢはｌ１ａｉたはＶａｌである； Ｒ１，はＧｌｙ−またはＤ−Ａｌａである；Ｒ１゜はＬ
ｅｕまたはＤ−Ｌｅｒｔである；Ｒ１８はＴ’／ｒｌた
は３ｅｒである：ｌビ２４はｊｉｉｓまたはＧｌｎであ
る；Ｒ２５はＧｌｕ、Ａｓｐ、ＤＧｌｒｂ、またはＤ−
Ａｓ７ｙである； Ｉビ２７Ｉ′１Ａ（ｅｔ、Ｄ−Ｍｅｔ、Ａｌｕ、、Ｎｌ
ｅ、Ｉｔｅ、Ｌｅｗ。

Ｎυα、またはＶａｌである； Ｒ２８はＡｓｎ、、またはＳｅｒである；Ｒ３４はＡｒ
ｑ、ｔたはＳｅｒである；Ｒ３８はＧｉｎま／ζはＡｒ
ｇである；Ｒ４２はｐｈｅ、Ａｌａまた（ｄ、ｌ／ｃ、
ｔである；ｌ？４３はｌＡｓｎ１たはＡｒｇである；／
？４４は天然アミノ酸である； １こだし、 （α）Ｉ７−よＣ“Ｍ’ｅまたはＮαＡ（ａ置換基を有
するか、または（ｂ）Ｉｌ＋□および７寸たはＲ２３は
Ｄ−Ｌｅｕであるか、若しくｔｔ：Ｊ：Ｃｃ）１ｅｔｓ
はＤ−Ｇｌｕか、あるいは、１）−Ａ、ｓｐである； また、ただし、 Ｒ２，と８４４の間の残基のうｊノのいずれか、または
全部を除去することもできる。〕 Ｃ−末端におけるアミノ酸残基のカルボキシ部分は一〇
〇〇Ｒ、−ＣＲＯ、−ＣＯＮＩＩＮＩ−ＪＲ、−ＣＯＮ
（Ｒ）（Ｒ′）または−ＣＩＩ２ＱＲ基であることがで
きる。

ここで、ＲおよびＲ′は低級アルキル、フルオロ低級ア
ルキルまたは水素である。メチル、エチルおよびプロピ
ルが好ましい低級アルキル基である。

前記の基は全て等価であると考えられる。通常、Ｃ−末
端における残基は遊離酸または「１′Ｌ純なアミドの形
をしている。第１位にＡｈｔが存在する場合、Ｍ’ｅｔ
は第２７位に別の残基を有することが好ましい。

前記のように、Ｎ−末端から約２８の残基にまで伸びる
断片は生物学的効力を有する。このような生物学的に有
効な断片は本発明の範囲内に含まれるものと考えられる
。ペプチド１所ハが２８残基にまでしか伸びていない場
合、ＹはＮｌＩ２または置換アミドでなければならない
。断片が２９残基〜３９残基のうちのいずれかにまで伸
びている場合、Ｙはアミドまたは置換アミドであること
が好ましいが、ＯＨであることもできる。断片が４０以
上の残基を有する場合、Ｃ−末端における基について特
に好ｌしいものはない。

これらのイブチドは適切な方法にょシ、たとえば全同相
法により、部分的固相法により、断片縮合法によシ、古
典的な溶液カングリンダ法にょシ合成される。丑たは近
年開発された組み換えＤＮＡ法によシ天然アミノ酸残基
のみを含有する類似体の一部を製造することもできる１
７例えば、全固相合成法は文献°゛固相被ブチド合成′
”（スチュワードおよびヤング者、フリーマンｒｌ：、
サンフランシスコ、１９６９年）Ｋ開示さゎており、米
国特許第４−．１０５，６０３号（１９７８年８月８日
ペイルらに付与）明細書の記載により例証されている。

古典的な溶液合成法は論文”Ａ−／ｃｔＩｔ、ｏｄｅル
ｄｅｒＯｒｇａｎｉｓｃｈ、ｅｎＣｈｅｍｉｅ（）ｉｏ
ｔｔｂｅｎ−Ｗｅ’ｌｌ）：５ｙｎ−１ｈｅｓｅｖｏｎ
Ｐｅｐｔｉｄｅｎ”、Ｅ、Ｗｔｕｔｓｃｈ（編者）（１
９７４）Ｇｅｏｒｇ’ｌ’ｈｉｅｍｅｌ／ｅｒｌａｇ（
西独、７ユトツトガルト）中に詳＋Ｍ（ｌに説ｊ（ｌさ
れている。断片縮合による合成法は米国４”が許第３，
９７２，８５９号明細書（１９７６年８月３日）に例示
されている。他に用いられる合成法は米国特許ｉ３，８
４２゜０６７号（１９７４年１０月１５日）および同第
３．８６２，９２５号（１９７５年１月２８日）各明細
書によシ例示される。

前記のような合成に一般的なことは、各種アミノ酸部分
の不安定な側鎖基をこの部位で化学反応が起こるのを阻
止する適切な保護基によって、この基が最終的に除去さ
れるまで保護することである。同様に通常一般的である
のは、アミノ酸丑たは断片上のα−アミン基を保護し、
その間にこれがカルホキフル基において反応し、次いで
α−アミン保護基を選択的に除去してこの部位で次ぎの
反応が起こシうる状態にすることである。従って合成の
一工程として、ペプチド鎖中に希望する順序で位置する
各アミノ酸残基を含みかつ側鎖保護基が適切な残基に結
合した中間化合物を合成することが一般に行われる。

同様に本発明の範囲内にあると考えられるものは次式の
中間体である。

Ｘｌ−Ｒ，（Ｘ−４たはＸ２）＆Ｒ５ＣＸ３）Ａｌａｌ
１ｅ−ＰｈｅＴｈｒ（Ｘ’）ＲｓＣＸ’またはＸ’）−
８ｅｒＣＸ’）−Ｉ＋′、ｏ（、￥２）−ＡｒａＣＸ６
）−Ｒ＋ｔＣＸ’またはＸ７）−Ｒ＋＋−Ｌｅｒｔ−Ｒ
Ｉ５−Ｇｌｎ（Ｘ’）−Ｒ＋７−／？＋ｓ（Ｘ２）Ａｌ
ａ−ＡｒｇＣＸ６）Ｌｙ８ｃＸ７）Ｌｅｕ−１１２３Ｒ
２＜（ＸまたはＸ５）＆ｓＣＸ３）Ｉｌｅ−１ビ２？／
？ｚｓ（Ｘ’ｔたはＸ５）−Ａｒｇ（Ｘ’）−Ｇｉｎ（
Ｘ５）−Ｇｌｕ、（、Ｙ’）−Ｇｌ’／−Ｇｉｎ（Ｘ３
）Ｒｓ＋（Ｘ’または、￥’）−Ａｓ＞ｚ（、Ｙ’）Ｇ
ｌ７１．（、Ｙ’）ＧＬｕ（Ｘ”）Ｒ３ｓＣＸ５または
Ｘ”）Ｒ３ｏＣＸ６）−Ｒ４゜（、Ｙ’）−Ａｒｇ（、
Ｙ’）−＆２−Ｒ＜３（、ｌｒ”ｔたはＸ６）−Ｒ，。

（ｘ８）ｘ９ 上記式中Ｘ１は水素原子またシ：１．α−アミノ基保護
基である。Ｘｌによシ意図さノするα−アミン基保護基
はポリ４プチドの段階的合成の分野で有用であることが
知られているものである。Ｘｌとして使用できるα−ア
ミノ基保護基には下記のものがある。

（１）芳香族ウレタン型保ａノ１’１、たとえばフルオ
レニルメチルオキシカルボニル（１＝’ＭＯＣ）、ベン
ジルオキシカルボニル基（Ｚ）、：Ｊ’、−よび置換さ
れたＺ。

ｆｃトエハｐ−りｏｔレベンジルオキシ力ルボニル基、
ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル基、ｐ−フ゛ロム
ベンジルオキシカルボニル基、ｐ−メトキシベンジルオ
キシカルボニル基、（２）脂肪族ウレタン保護基、たと
えばｔ−ブチルオキシカル７１にル基（ＢＯＣ）、ジイ
ンプロピルメチルオキシカルボニル基、インプロピルオ
キシカルボニル基、エトキシカルボニル基、アリルオキ
シカルボニル基、（３）シクロアルキルウレタン型保護
基、たとえばシクロペンチルオキシカルボニル基、アダ
マンチルオキ７カルボニル基およびシクロヘキシルオキ
シカルボニル基などである。第１位にＮ（ｉＭＣ−置換
残基が存在している場合であっても、好−ましいα−ア
ミン基保護基はＢＯＣである。

Ｘは水素またはＨｉｓのイミダゾールチッ素のだめの７
“ｏｓのような保護基である。

Ｘ２はＴ’／ｒのフェノール性水酸基のだめの適当な保
護基であｐ、テトラヒドロピラニル基、１−ブチル基、
トリチル基、Ｂｚｌ、ＣＢＺ、４１ゴｒ−ＣＢＺおよび
２，６−ジクロルベンジル基などである。

好ましい保護基は２，６−ジクロルベンジル基である。

Ｘ２は水素であってもよい。これはその位置のアミノ酸
残基上に側鎖保護基がないことを意味する。

Ｘ３は水素原子、またはＡｓｐもしくはＧｌｕのカルボ
キシル基のだめの適当なエステル形成型保護基であり、
ベンジル（ＯＢｚｌ）、２，６−ジクロルベンジル基、
メチル基および−Ｊ−アル基などである。

Ｘ４はｉ’ｈｒおよびｓｅｒの水ｒ１′！／基のための
適当な保護基であり、アセチル基、ベンゾイル基、ｔ−
ブチル基、トリチル基、テトラヒドロピラニル基、Ｂｚ
ｌ、２．５−ジクロルベンジル基およびＣＢＺなどであ
る。好捷しい保護基ｔ」、１ｌｚｌである。Ｘ４は水素
原子であってもよい。これは水酸基に保護基がないこと
を意味する。

Ｘ５−：水素であるが、またｔ、ＩＡｓｎあるいはＧｌ
ｎの側鎖アミン基のための過当な１呆護基である。キサ
ンチル（ＸｃＬｎ）が好ましい。

ＸｏはＡｒｇのダアニジン基のだめの適当な保護基でア
シ、ニトロ基、７’ｔｒ５１ＣＩＩＺ、アダマンチルオ
キ７カルボニル基およびＢＯＣなどである。Ｘｏはある
いは水素原子である。

Ｘ７は水素原子またはＩＪＪｔｓの側鎖アミノ基のため
の保護基である。適切な側鎖アミン基保護基の具体例は
２−クロルベ／ジルオキシカルボニル基（２−Ｃ１−Ｚ
）、Ｔｏｓ、ｔ−アミルオキシカルボニル基およびＢＯ
Ｃである。

Ｘ８は水素原子であるか、またけ、前記のような適当な
側鎖保護基である。

Ｍ’ｅｔは酸素によって随意に保護することができる。

しかし、保護しないままにしておくことが好ましい。

側鎖アミノ基保護基の選択は厳密なものではないが、た
だし合成に際してα−アミノ基の脱保護中に除去されな
いものでなければならない。しかし、ＨｉＳのようなア
ミノ酸の場合、カップリンク。

が完了した後は保護しておく必要は一般的になし）。

また保護基は同一であってもよい。

Ｘ９はエステル形成基Ｘ３のような、Ｃ−末端カルボキ
シル基のだめの適当な保護基である力・、または、固体
樹脂支持体に結合するために固相合成で使用される定着
結合であるか、若しくはｄｅｓ−、ｙｏ（この場合、Ｃ
−末端に秒ける残基は前記のようなＹからなるカルボキ
シル部分を有する）である。このよう々固体樹脂支持体
を使用する場合、この樹脂支持体は広義にし、１．１呆
護基であると考えられる。例えば、−０−ＣＪｉ２−樹
脂支持体、−＃ｆｉ−ベンズヒドリルアミン（ＢＩｉＡ
）樹脂支持体または−Ｎ１１−バラメチルベンズヒドリ
ルアミン（ルｆＢＩ−ＩＡ）樹脂支持体のような当分野
で公知のもののいずれであってもよい。非置換アミドが
所望の場合、Ｗ（ｔｉｌｆすると直接、アミドを生成す
るのでＢＩｆＡまたはＭＢＩＩＡ樹脂を使用することが
好ましい。Ｎ−メチルアミドをノリ１′イ！する場合、
これはＮ−メチル１３ＨＡｍ脂から生成できる。その他
の置換アミドを所望する場合、まｆｃは、Ｃ−末端に遊
離酸以外の基を必要とする場ば、ｌ−１ｏｕｂｅｎ−Ｗ
ｅ’ｌｌの教科書に述べられているような古典的な方法
によりペプチドを合成することが好ましいであろう。

中間体の構造式において、λ−基のうちの少なくとも１
つは保護基またはＸ１１含有樹脂支持体である。従って
、本発明は、（α）少なくとも１個の保護基を有し、次
式（ＩＩ） Ｘ’−Ｒ，ＣＸまたｌ’ｊＸ２）７１！２Ｒ５ＣＸ３）
ＡｌａＩｌｅ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（Ｘ’）−Ｒ８ＣＸ”Ｊ
たはＸ５）Ｓｅｒ（Ｘ’）Ｔ’ｌｒＣＸ２）Ａｒｇ（Ｘ
’）−Ｒ＋２（ＸｏまたはＸ７）−Ｒ＋５−Ｌｅｕ、−
Ｇｌ’１−Ｇｉｎ（Ｘ５）−Ｒ＋□ｌｌｌ５ＣＸ２）−
Ａｌａ−ＡｒｇＣＸ６）Ｌｙｓ（Ｘ７）−Ｌｅｕ−Ｒ２
３−Ｒ２４（ＸまたはＸ５）−Ｒ２ｓにＹ３）ＩｌｅＲ
２ｔ−Ｒｚｓ（Ｘ’ｉだ―−Ｘ′）−ＡｒｒｔＣＸ６）
ＧｌｎＣＸ５）ＧｌｎＣＸ５）ＧＩＬ（ｉｌｕ（Ｒ３）
−＆（、Ｙ’またはＸｏ）−Ａｓｎ（Ｊ＋”）−Ｇｌｎ
（Ｘ”）Ｇｌｕ（Ｘ３）−Ｒ３ａ（Ｘ’またはＸｏ）−
Ｒ，（Ｘ”）−Ｒ４゜（、Ｙ’）−ＡｒｇＣＸ６）−Ｒ
４□−＆ｓＣＸ５′ｆ、ｆｃはＸｏ）−Ｒ４４（、Ｙ８
）、Ｙ９ （式中、Ｘ、Ｘ’、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ′ｉ、Ｘｏ、
Ｘ７およびＸ８は各々、水素または保護基である；Ｘ９
は保護基または樹脂支持体への定着結合名しくはｄｅ８
−Ｘ９（この場合、Ｃ−末端の残基ｔｔ、ｉＹからなる
カルボキシ部分を有する）である。）のペプチド中間体
を生成し；（ｂ）式（１１）の前記ペプチドから保護基
または定着結合を除去し：そして、＜Ｃ）所望によシ、
得られたペプチドを対応する非責性塩に転化させること
からなる、ペプチドの製造方法が提供される。

ペプチドの合成に用いられる特定の側鎖保護基を選択す
る際には、下記の基イＬ、Ｌ、ｊに従う。（α）保護基
はその保護特性を保持することが好ましく、カンプリン
グ条件下では離脱さ才ｔてはならない。（ｂ）保護基は
試薬に対して安定でなければならず、またＸａ、ｎを除
いて、合成の各段階においてα−アミノ保護基を除去す
るために選ばＪ＋、る試薬に対して同乗件下で安定であ
ることが好；ましい。（ｃ）側鎖保護基は希望するアミ
ノ酸配列を含む合成が終了した時点で、ペプチド鎖を変
化さぜない条件下において除去されなければならない。

ペプチドを糾み換えＤＮＡ技法によシ合成しない場合、
４プチドはノリフィールド〔Ｊ、Ａｍ。

ＣＩＬｅｍ、Ｓｏｃ、、８５＋２１４９（１９（ｉ３）
）によシ記述されるように、同相合成法を用いて製造さ
れることが好ましい。ただし前記のように当業界で知ら
れている他の相当する化苧イ１成法も用いることができ
る。固相合或はペプチドのＣ−末端から、保護されたα
−アミノ酸を適切な樹脂にカンプリングさせることによ
シ行われる。この棟の出発物質はα〜アミン基を保護さ
れたアミノ酸をエステル結合によジクロルメチル化欄脂
もしくｉｒ、Ｊヒドロキシメチル樹脂に結合させるか、
またはアミド結合によりＢＩｉＡ樹脂もしくはル４ＢＨ
Ａ樹脂に結合させることによって製造することができる
。ヒドロキシメチル樹脂の製造についてはボダンスキー
ら（Ｃｈｅｒｎ、Ｉｎｄ、（ｏンド７）３８．１５９７
−９８（１９６６））によシ記述されている。クロルメ
チル化樹脂はバイオ・ラド・ラホラトリーズ社（カリフ
ォルニア州すッチモンド）およびラボーシステムズ社か
ら市販されている。この神の樹脂の製造についてはスチ
ュワードらによシ”同相波プチド合成”（フリーマン社
、サンフラン７スコ、１９６９年）、第１章、１〜６頁
に記載されている。ＢＨ，４およびＭＢＩＩＡ樹脂系支
持体は市販されておシ、合成される目的ポリペプチドが
Ｃ−末端にα−カルボキシアミド基をもつ場合にのみ一
般に用いられる。

４３残基のペプチドを合成する場合、Ｋ、１Ｊｏｒｉｋ
ｉらがＣｈ、ｅｍｉｓｔｒ５Ｌｅｔｔｅｒｓ”、■６５
〜１６８（１９７８）に開示した方法に、１、す、ＫＦ
のＤＭＦ溶液を使用し、約６０℃で２４時間撹拌しなが
ら、ＢＯＣおよびｘａｎで保護されたＣ−末端アミノ酸
、即ち、Ａｓｎを最初にクロルメチル化樹脂に結合させ
ることができる。ＢＯＣ−保睦アミノ酸の樹脂支持体へ
の結合に続いて、α−アミノ保護基を除去する。これは
トリフルオロ酢酸（’Ｉ’ＦＡ）と！２４化メチレンの
混液または７“／Ｉ’／ｌのみを使用することによって
行なわれる。脱保護反応はほぼ０℃から室温までの温度
で行われる。、シュレーダーおよびリュプケ著”ペプチ
ド１．７２〜７５頁（アカデミツク・プレス社、１４）
６５年）に記載されるように、特定のα−アミン基保護
基を除去するだめの他の標準的な鋭部試薬（例えば、ｌ
１Ｃ６のジオキザン溶液）および条件を用いることがで
きる。

Ａｌａのα−アミン基保護基を除去したのち、残シのα
−アミノ基および側鎖を保護されプこアミノ酸を希望す
る順に段階的にカップリングさせ、前記の中間化合物を
得るか、あるいは合成に際し各アミノ酸を別個に添加す
る代わりにこれらのうち幾つかを固相反応器に添加する
ことができる。適切なカンプリング試薬を選択すること
は当技術分野に含まれる。カンプリング試薬としてｔ１
牙に適切なものはＮ、Ｎ’−ジシクロへキシルカルボジ
イミド（ＤＣＣＩ）である。

ペプチドの固相合成に用いられる活性化試薬はにプチド
技術において周知である。適切な活性化試薬はたとえば
Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルカルボジイミド、Ｎ−エチル−
Ｎ’−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド
のようなカルボジイミドである。ペプチドのカップリン
グにおけ２）他の活性化試薬およびそれらの使用につい
てはシュレーダーおよびリュプケによシ前出の文献、Ｉ
ＩＩ前に、およびカブール（Ｋａｐｏｏｒ）によりＪ、
Ｐｈａｒ、Ｓｃｉ、。

５９．１−２７（１９７０）に記述されている。

保護された各アミノ酸またはアミノ酸配列を約４倍捷た
はそれ以」二過剰に同相反応器に導入し、ジＪ−ｔルホ
ルム７ミ）”ＣＤＭｉ”）：ｃＲ２Ｃ１１２Ｃ１：１）
ノ媒体中で、葦たはＤＡ４Ｆ’もしくはｃａ２Ｃ１２単
独の中でカップリング反応を行うことができる。不完全
なカンプリング反応が起こっｐ３．ｉ合、次のアミンｉ
′１．２のカンプリングを行う前に、α−アミノ基保護
基の除去前に上記のカップリング操作を繰り返す。

カップリング反応を作手業でおこなう場合、合成の各段
階Ｖこおけるカップリング反応の成功はＥ。

カイザーら〔Ａｎａｌ、Ｂｉｏｃｈｅｍ、、３４、５９
５（１９７０）：］に」ニジ記述さｔｔていゐようにニ
ンヒドリン反応によって監視される。カップリング反応
はＲｉｖｉｅｒらが”Ｈｉｏｐｏｌ’／ｍｅｒｓ”、１
９７９，１７．ｐｐ、１９２７〜１９３８Ｆ（：報告し
たようなプログラムを使用し、ＪＪｅｃｋｍａｎ９９０
自動合成餞°還などにょシ自動的に行なうこともてきる
。希望するアミノ酸配列が終了したのち、樹脂からペプ
チドづ囲１脱させるだけでなく残存するすべての側鎖保
護！ｒ’、Ｘ、ｘ２、Ｘａ、Ｘ４、Ｘｌ；Ｘａ、、Ｙ７
およびＸ８と足着結イ゛１−Ｘ９ならびにα−アミノ基
保穫基Ｘ１（使用した揚自）をも離脱させる試薬（たと
えば液体フン化水素）で処：１４Ｊｊすることによシ、
支持体樹脂から中間体積プチドを分離し、遊離酸の形の
ペプチドを得る。アミノ酸配列中にＭｅｔが存在する場
合、■・リフルオロｒｌｌ’１１１＊ｃｉ’ＦＡ）／エ
タンジチオールを使用してＢＯＣ保護基を最初に除去し
、次いで、ＨＦて樹脂からぜブチドを解離することによ
り、Ｓ−アルキル化がおこることを防止する。解離のた
めにフッ化水素を用いる場合は、脱除のためにアニソー
ルおよび硫化メチルエチルを反応器に装入することかで
きる。

下記の具体例は固相法により被プチドを合成するための
好ましい方法を示したものである。もちろん対応するよ
シ短かい被プチド断片の合成は同じ方法で、単に鎖のい
ずれかの端において必要な数のアミノ酸を除去すること
によシ行われることは理解されるであろう。しかし、生
物ｌ胡４１．をもつ断片はＮ−末端にここに示した配列
を含むべきであると現在は考えられる。

実施例１ 次式、 Ｎ（ｉＭｅｌｉｉｓ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｉｌｅ
−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−８ｅｒ−８ｅｒ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−
１ｌｒｇ−１１ｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｌｅｖ、
−１’ｙｒ−Ａｉｔｔ−Ａｒｇ−Ｌ’／５−Ｌｅｕ−Ｌ
ｅｕ−Ｂｉｓ−Ｇｌｕ−１１ｅ−Ｍｅｌ−Ａｓｎ−Ａｒ
ｇ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇ１’／−Ｇｌｒｔ−Ａｒｇ−Ａ
、５ｎ−Ｇｌｎ−Ｇｉｎ−Ｇｌｎ、−Ａｒｇ−８ｅｒ−
Ａｒｇ−Ｐｈ、ｅ−Ａｓｎ−ＯＨで示される被プチドＣ
，ｌＶ”Ｍｅｌｌｉｓ’：］−ｒｈＧＲＦ（１−４３）
−０１−１の合成をＢｅｃｌｃｍｕ、ｎ、９９０ｄプチ
ド合成機を用いてクロルメチル化樹脂（約０６１〜０．
５ミ！１モル／ｇ樹脂の１１′を換１１ｔ１＞囲を有す
る〕上で段階的に行なッｙｊｏＢＯＣ−Ａｓｔｔ（Ｘａ
ｎ）ｃｌ）樹脂へのカップリングは前掲の”Ｃｈｅｍ、
１ｓｔｔ゛’／Ｌｅｔｔｅｒｓ”に開示された一般法に
ょシ、１（ＬｌのＤＭＦ溶液を使用し、約６０℃で２４
時間撹拌しながら行なった。樹脂１ｇにつき約０．３５
ミＩＪモルのＡｓｎの置換が行なわれた。

脱保護基および中和ののち、ペプチド鎖を樹脂上に段階
的に形成させた。脱保護基、中和、および各アミノ酸の
添加は一般にＪ、ＲｉｖｅｒがＪ。

Ａｍｅｒ、Ｃｈｅｍ、Ｓｏｃ、”、９６．２９８６〜２
９９２（１９７４）に詳細に開示した方法に、１：り行
なった。用いた溶剤は全て不活性ガス（例えば、ヘリウ
ムまたはチッ素）を噴入することにょシ注意深く脱ガス
され、Ａ４ｅｔ残基のイオウ原子を不本意に酸化する可
能性のある酸素の不在を確実なものにした。

脱保護は次のスケジュールＡに従って行なうことが好ま
しい。

１、６０％ＴＦＡ／２％エタンジチオール１（）２、６
０％ＴＦＡ／２％エタンジチオール１５３、ＩＰＡ／１
％エタンジチオールＱ、５４、Ｅｔ３ＮＣ１０％）のＣ
１１２Ｃ１１２溶液０，５５、ＭｅＯＨＯ，５ ６、Ｅｔ、Ｎ（１０％）（’）ＣＨ２Ｃｌ２ｍ液０．５
７、ＭｅＯＥ（２回）０．５ ８、ＣＨ２Ｃ１ｔ（２回）０．５ カップリングは次のスケジュールＢに従って行なうこと
が好ましい。

９、ＤＣＣＩ− １０、ＢＯＣ−７Ｓ／酸５０−９０ １１、ＭｇＯＨ（２回）ｏ、５ １２、Ｃｆｆ２ＣＴｏ（２回）ｏ、５ １３、Ａｃ２０（３Ａグ）（’）ＣＩＩ２Ｃ１２溶液１
５．０１４、ＣＨ２Ｃｌ１２ｏ、ｓ １５、ＭｅＯｆｉＯ，５ １６、Ｃｌ１２Ｃ１２（２回）０．５ 要約すると、樹脂１ｇにつき塩化メチレン中のＢＯＣ−
保護アミノ酸１〜２ミリモル、および塩化メチレン中の
ｘ、ｏＭＤＣＣＩｌ当量を２時間使用した。Ｉ）ＱＣ−
ＡｒｇＣ’ｌ“ｏｓ）をカンプリングさせる」場合は、
５０％ＤＭＦおよび」ム比メチレンの混合物を用いた。

Ｓｅｒおよび７°ｈ、ｒの側鎖水酸基の保護基としては
Ｂｚｌエーテルを使１’ＪＬ、た。ＤＣＣカップリング
を使用することが好丑しい場合、ＡｓｎまたはＧｉｎの
アミド基はＸａｎによって保護する。また、Ａｓｎまた
はＧｌｎのカルボキシル末端を活性化サセるのにｐ−ニ
トロフェニルエステル（ＯＮｐ）を使用することもでき
る。例えば、ＤＭＦと塩化メチレンの５０％混合物中で
１ｉＯＢｔ１当）ｔｌｏを使用し、ＢＯＣ−ＡｓｎＣＯ
Ｎｐ）を−晩カップリノグさせることができる。この場
合、Ｄｅｃは添加されない。Ｌｙｓ側鎖の保護基として
は２−クロル−ベンジルオキシカルボニル（２Ｃ１ｊ−
Ｚ）ヲ用いた。Ａｒｇのグアニジノ基およびＨｉｓのイ
ミダゾールチソ素を保護するためには７゛ｏ８を用い、
ＧｌｕおよびＡｓｐの側鎖カルボキシル基は０Ｂｚｌで
保護されたＴ’Ｊτ０）’ニアＺ／−ル性水酸基は２，
６−ジクロルベンシル（ＤＣＥ）によシ保護された。合
成終了１１ｆに、下記の組成物が得られた。

ＢＯＣ−Ｎ（ｘＭｅＨｉｓ（Ｘ）−Ａｌａ−Ａｓｐ（、
￥３）−Ａｌａ−１１ｅ−Ｐｈｔｔ−Ｔｈｒ（Ｐ）−Ｓ
ｅｒ（Ｘ’）−８ｅｒ（Ｘ’）−Ｔｙｒ（Ｘ”）−Ａｒ
ＱＣＸ’）、Ａｒｇ（￥６）−ＩＩｅ−Ｌｅａ−Ｇｌ’
Ｊ−Ｇｌｎ（￥５）−Ｌｔｔｗ−Ｔ’／ｒ（Ｘ”）−Ａ
ｌａ−Ａｒｇ（Ｙ’）−Ｌｙｅ（￥７）−Ｌｔｔｗ−Ｌ
ｇｗ−Ｈｊｓ（Ｘ）−に１ｒＬ（Ｘ”）−１１ｅ−Ｍｅ
ｔ−Ａｓｎ（ＸＩ＋）−Ａｒｇ（￥６）−Ｇｌｎ（、￥
’）−ＧｌｎｃＸ５）−Ｇ１３１−ＧｌｔｔｃＸ”）−
ＡｒｙＣＸ６）−ＡＳｎ（、Ｙ’）−ＧｌｎＣＸ’）−
ＧｌｎｃＸ：′）−ＧｌｎｃＸ”）−Ａｒｇ（￥６）−
８ｅｒ（Ｘ’）−ＡｒｒｉＣＸ’）−Ｐｈｅ−Ａｓｎ（
￥５）７１１ （式中、Ｘは’ｌ’ｏｓであシ、Ｘ２２ｒＬＩ）ＣＢで
あシ、Ｘｌは０１ｌｚｌであり１．￥’ＩｒＪ、Ｂｚｌ
であり、￥５はＸａｎであり、Ｘ６ｕＴｏｓであり、￥
７は２Ｃ６−Ｚであシ、そして、Ｘ”は−〇−Ｃ／Ｉ２
−樹脂支持体である。）Ｘａｎはα−アミノ保護基を脱
保護するのに使用されるＴＦＡ処理により部分的に、ま
たは、完全に除去することもできる。

得られた保護されたペプチド鎖を分翻し、保護基を除去
するため、これをペプチド鎖ＩＪにつぎアニソール１．
５ｍｌ、硫化メチル−Ｉ−チル０．５ｍｌおよび７７化
水素Ｃ１１Ｆ）１５ｎｔｉチー２１）℃ｖｃオイテｙ；
時間、および０℃においてンｎｈ間処理した。開度の真
空下でＩｉＦを除去したのち、残存する樹脂−にブチド
を乾燥ジエチルニーデル」？よびクロロホルムで父互に
洗浄し、次いで被ゾナドを脱ガスした２Ｎ酢酸水溶液で
抽出し、濾過するこＬにより樹脂から分離した。

分離され、保護基を除去されたこのペプチドを次いで０
〜５％酢酸に溶解し、セファデックスＧ−５０微細ゲル
濾過のような手段で′＃製した。

次いで、このペプチドは、１ｌｉｖｉｅｒらが”Ｐｅｐ
ｔｉｄｅｓ：５ｔｒｕｃｔｕｒｅａｎｄＢｉｏｌｏ（Ｉ
ｉｃａｌＦｕｎｃｔｉｏｎ″、（１９７９）ｐｐ１２５
〜８およびＭａｒｋｉらが’Ｊ−Ａｒｎｅｒ、Ｃｈｅｍ
−８ｏｃ、”、１０３＋３１７８（１９８１）に開示し
たような分取または半分取ＨＰＬＣによＩ）精製する。

ＷａｔｅｒｓＡｓｓｏｃｉａｔｅｓ社製ＬＣ−５００に
あうカートリッジにはＶ’１ｄａｃ社１５−２０ＣＩ８
シリカ（：１００Ａ）が充てんされている。Ｃ１１ｓＣ
Ｉ’Ｊ／ｌ’ＥＡＰ勾配はＪ、Ｒｉｖｉｅｒが”Ｉ、ｉ
ｑ、Ｃｈ、ｒｏｍａｔｏｇｒａｐｌｒ、’ｌ”ｌ。

３４３〜３６７（１９７８）に開示した。Ｌうな低圧Ｅ
ｌｄｅｚ勾配１７Ｃより製造されている。クロマトグラ
フした画分はノｉｌ）ＬＣによシ入念ＶＣモニターし、
実質的な純度を示した両分のみを集めた。

純度を各々チェックされた精製画分をＣ１１３ＣＮ／０
．１％７“ＦＡ勾配で脱塩した。次いで、中央画分を凍
結乾燥し、所望のペプチドを生成した。このにブチドの
純度は９８％以上であった。

Ａ（ＢＩｉＡ樹脂を用いてこのｒ１成をくりがえした。

Ｖａｌｅらの米国特許第４，２９２，３１３号に開示さ
れた最初の方法にょシＡｓｎをＡ４ＢｌｉＡ樹脂に結合
させることにょシ、アミド化Ｃ−末端を有する同一のペ
プチドを製造した。

実施例２ 次式、 １１−Ｃ”／１ｙｌｅ）ｉｉｓ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｌ
ｔｔ、−１ｌｅ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−８ｅｒ−８ｅｒ−１
’ｙｒ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−１１ｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌ３／−
Ｇｌｎ−Ｌｅｔｂ−１’ｙｒ−Ａｔａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ
−Ｌｚｔｔｕ−’Ｌｅｕ−ノ１ｉｓ−Ｇｌｒｂ−１１ｅ
−Ａｌｅｔ−Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ｇ１ｎ−Ｇｔ’
／−Ｇｌｒｂ−Ａｒ（１−Ａｓｎ−Ｇ１ｎ−Ｇｌｕ−Ｇ
ｌｎ−Ａｒｇ−８ｅｒ−ＮＪｊ２で示される４ｏ残基ア
ミド化被ブチドの合成を、Ｖａｌｅらの米国特許第４，
２９２，３１３号明細書に一般的に説明されているよう
に、Ｂｅｃｋｒｎａｎ９９０浸プチド０合成機を用いて
、ＭＢｌｉＡ樹脂上で段階的に行なった。ＴＬＣおよび
１１ＰＬＣによシ、このペプチドは、おおむね純粋であ
ることが確認された。

］Ｌ」に隨−ユ 次式、 Ｎ”ＭｅＭｅｔ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｉｌｅ−Ｐ
ｈｅ−Ｔｈｒ−８ｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ａｒ
ｇ−１１ｅ−Ｌｅｒｂ−Ｇｌ’１−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−１
”ｌｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌ’Ｊ５−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−
１１ｉｓ−Ｇｌｗ−１１ｅ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ａｒｇ−
Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−ＡＩ９７１
．−Ｇｉｎ−Ｇｌｒｂ−Ｇｉｎ−Ａｒｇ−８ｅｒ−Ａｒ
ｇ−Ｐｈｅ−Ａｓｎ−ＯＲ で示されるｒｈＧＲＦ類似体、即ち、〔）ＶＡｒ１ａ−
Ｍｅｔ’、Ｌｅｕ２７：］−ｒｈＧＲＦ（１−４３）−
０１１の合成を、実施例１に述べたように、Ｂｅｃｋｎ
ｔａｎ９９’０イプチド合成磯を用いて、クロルメチル
化′４１１１哨上で段階的に行なった。ＴＬＣおよびＨ
Ｉ）ＬＣにより、このペプチドは、おおむね純粋である
ことが確認された。

次式、 ノブ−ＣＣｔＭｅＰｈｅＣ４Ｃ１！）−Ａｌａ−Ａｓｐ
−Ａｌａ−１ｌｅ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−Ｓｅｒ−
１’ｙｒ−４ｒｇ−Ｚ、ｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｗ−Ｇｌｙ
−Ｇｉｎ−Ｌｅｕ−８ｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−
Ｌｅｕ−Ｌｅｔｕ−Ｇｉｎｓ−Ａｓｐ−Ｉｌｅ−Ｍｅｔ
−８ｅｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ｇｌ＋＋、−−Ｇｌｙ−Ｎ
ＩＩ２で示されるｈｐＧＲＦ類似体■類似体部１ハ（Ｃ
ａＭｅＰｈｅ（４Ｃ１ｌ）’）−んｐＧＲＦ（１−３２
）−Ｎｌｉ２の合成を、実施例２に述べたように、１３
ｅｃＩｔフｎ、ａｎ９９０ペプチド台成機を用いて、Ａ
ＩＩ）ＩＩＡ４ＤＪ脂上で段階的に行なった。ＴＬＣお
よびＩＩＰＬＣによシ、このペプチドは、おおむね純粋
であることが確認された。

＋”＋ｌ）ｎＩＩＶ、４２回＜リカ；ン（、［４Ｃｅ−
Ｐｉｔ、（１’１−１ｒ、１ンＧＲ１ｊ’（１−３２）
−Ａ’／／２および〔）ＶｃｔＭｅＰｈｅ’）−ｈｐＧ
ＩビＩ’（１３２）Ａ’ｌｆ２をｇ造した。

実施例５ 次式、 Ｎ”ＭｅＴｙｒ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｔａ−−１１ｅ−
Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−８ｅｒ−１’ｙｒ−Ａｒｇ−
Ｌｙ５−ＶＣＬＬ−Ｌｔｔｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｌｅｒ
ｂ−８ｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ
−ＧＡｎ−Ａｓｐ−Ｉｌｇ−Ｍｅｔ−８ｅｒ−ＡｒＵＭ
Ｂ２で示されるｈｐａＲＦ類似体断片、即ち、ＣＮｃｔ
Ｍ’ｅＴ’／ｒ’：］−ｈｐＧＲＦ（１−２９）−ＭＢ
２の合成を、実施例２に述べたように、１３ｅｃｋｍａ
ｎ９９０（プチド合成機を用いて、ＭＢｌｌＡ樹脂上で
段階的に行なった。ＴＬＣおよびｆｉＪ’ＬＣによシ、
このペプチドは、おおむね純粋であることが確認された
。

実施例６ 次式、 ＮＣｌＭｅＰｈ、ｅ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｌａ−１１ｅ
−Ｐｈｅ−７’ｈｒ−８ｅｒ−８ｅｒ−Ｔ’／ｒ−Ａｒ
ｇ−Ａｒｇ−１１ｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｉｎ−Ｌｅｗ
−Ｔｙｒ−ＡＬａ−Ａ、ｒｇ−Ｌｙｓ−Ｌｅｗ−Ｌｅｕ
−Ｈｉｓ−Ｇｌｖ、−Ｉｌｅ−Ａ４ｃ＋ｌ−Ａｓｎ−Ａ
ｒｇ−Ｎ＆ で示されるｒｈＧＲＦ断片、即ち、（Ｎ（ｉｌ’１４ａ
Ｊ’ｌＬｅ’）−ｒｈＧＲＦ（１２９）ＭＢ２の合成を
、実施例２に述べたように、Ｂｅｃｋｍａｎ９９０ゝプ
チド合成機を用いて、ＭＢＨＡ樹脂上で段階的に行なつ
た。ＴＬＣおよびＩ−１，ＰＬＣに、ｌ、す、このペプ
チドは、おおむね、純粋であることが確認された。

実施例７ 次式、 Ｎ（ｉＭｅＬｅｕ−Ａ、ｌａ−ＡＳｐ−Ａｌａ−／ｌｅ
−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−３ｅｒ−Ｔ’／ｒ−Ａｒｇ
−Ｌ’／、ｑ−Ｖａｔ−Ｌｅｕ−Ｇｌ３’−Ｇｌｎ−Ｌ
ｅｕ−８ｅｒ−Ａｌｔｒ−−）１．ｒｇ−Ｌｔ’ｔｓ−
Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｔｔ−Ａｓｐ−Ｉｌｅ−Ｉｌｃ−
８ｅｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−ＭＩＪ２ で示される［Ｎ”Ａ４ｅＬｅｕ’、ＩＩｔ！２°’〕−
ｈ、ｐＧＲＦ（１−３２）ＮＨ２の合成を、実施例２に
述べたように、Ｂｅｃｋｒｎａｎ９９０ペプチド合成機
を用いて、ＭＩＪ、ＩＩＡ樹脂樹脂膜階的に行なった。

ＴＬＣおよびＩｆＰＬＣによシ、このペプチドは、おお
むね純粋であることが確認された。

”Ｌ／’９１Ｊ３ 次式、 ｔｉ−ＣＣｔＭｅＰｈ、ｅＣ４Ｃｌ）−Ａｌａ−Ａｓｐ
−Ａｌａ−１１ｅ−Ｐｈｅ−Ｔｈｅ−８ｅｒ−８ｅｒ−
Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−１１ｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇ
ｌｎ−Ｌｅｕ−ｉ’ｙｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌ’ｔ５−
Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｈｉ５−Ｇｌｎ−１１ｅ−Ｍａｔ−Ａ
ｓｎ−Ａｒｇ−ＭＩＪ２ で示されるｒｈＧＲＦ類似体断片、即ち、〔ＣＣｔＭｅ
Ｃ４Ｃｌ）’〕−ｒｈＧＲＰ’（１−２９）−ＭＩＪ２
の合成を、実施例２に述べたように、Ｂｅｃ１ｃｍａｎ
９９０ペプチド合成機を用いて、Ａ／ＢＩＩ／１樹脂上
で段階的に行なった。ＴＬＣおよびＩｆＰＬＣにより、
このにプチドは、おおむね純粋であることが確認された
。

実施例９ 次式、 １１−＃αＭ’ｅＴ”／ｒ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｌａ−
ＩＩＣ−Ｐｈｅ−’ｌ”ｈｒ−８ｅｒ−８ｅｒ−Ｔｙｒ
−Ａｒｇ−Ａｒｇ−ＩＩｅ−Ｌｅｒｔ−Ｇｌ’／−Ｇｌ
ｎ−Ｌｅｕ−Ｔ’／ｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｌｅ
ｕ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｍｅｔ−Ａｓｎ
−Ａｒｇ−ＮＨ２ で示されるγｈＧＲＦ’ＡＩＡ似体断片、即ち、ＣＮＣ
ｔＭｅＴｙｒ’）−ｒｈＧＲＦ（１−２９）−Ｎｉ１２
の合成を、実施例２に述べたように、Ｂｅｃｋｍｔｘｎ
９９０ぼプチド合成機を用いて、ＭＢＪ−ＩＡ樹脂上で
段階的に行なった。７”ＬＣおよびＩＩＰＬＣにょシ、
このペプチドは、おおむね純粋であることが確認された
。

ユニ」Ｌ」Ｌ」旦 次式、 Ｂ−Ｃ”ＭｅＬｅｍ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａ／ａ−１ｌｅ
−Ｐｈ、ｅ−Ｔｈｒ−８ｅｒ−８ｅｒ−７’ｙｒ−Ａ、
ｒ（１−−Ａｒｇ−１１ｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌ３／−Ｇｌｎ
−Ｌｅｒｔ、−Ｔ’ｌｔ”−／Ｌｌｎ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ
−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−１１ｉｓ−Ｇｌｕ、−／ｌｅ−Ａ、
Ｉｃｌ−−Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ、−Ｇｌｎ−Ｇ１’
／−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ｇ１ｎ１Ｇｌｕ−Ｇｌｎ
−Ａ、ｒｇ−８ｅｒ−Ａｒｇ−Ｐ）ｒ、ｃ−−−、□１
ｓｎ−Ｖａｌ−Ｎｌｉ２で示される〔Ｃ”ＭｅＬｅｕ”
）−ｒｌｒ、ＧＩＩＦ−（−Ｖａけ−Ｎ’ＪＪ２］の合
成を、実施例２に述べたように、Ｂｅｃｋｍａｎ９９０
”４プチド合成機を用いて、ＭＢＩｉＡ樹脂上で段階的
に行なった。７“ＬＣおよび１ｉＰＬＣによシ、このペ
プチドは、おおむね純粋であることが確認された。

”’１３’！Ｉ」ユ 次式、 ＮａＭｅＴ’／ｒ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｌａ−１ｌｅ−
Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−：３ｅｒ−８ｅｒ−Ｔ”／ｒ−Ａｒｇ
−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｌｅｗ−
Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌ’／５−Ｌｅｒｂ−Ｄ−Ｌ
ｅｒｂ−ｆｌｉ５−Ｇｌｕ−１ｌｅ−Ｍｅｔ−ＡＳＩＬ
−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇ１ｙ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−
Ａｓｎ−Ｇｌｙｔ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−８ｅｒ−
Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ａｓｎ−ＯＨで示されるペプチドＣＮ
ａＭｅＴｙｒ’、Ｄ−Ｌａｕ”）−ｒＧＲＦｃｌ、−４
３）−ＯＨの合成を、実／１ｉｉｊ例１に述べたように
、Ｂｅｃｋｒｎａｎ９９０ｄプチドＣ成磯を用いて、ク
ロルメチル化樹脂（；ｉ＆Ｊ脂１ｇあたシ約０．１〜０
．５ミｌＪモルの置換範囲を有する。）上で段階的に行
なった。

合成終了時点で、次の、１ｉｔｌ成が得られ／ξ。

１３０Ｃ−ＮａｋｉｅＴｙｒ（Ｘ２）−Ａｌａ−Ａｓｐ
（Ｘ”）−Ａｌａ−ＩＩｅ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ（Ｘ’）−
８’ｅｒ（Ｘ’）−、”；ｅｒ（Ｘ’）−１”／ｒｃＸ
２．）−Ａｒｇ（Ｘ６）−Ａｒｇ（Ｘ６）−１’ｌｅ−
ＬｅｕＧｌ’／Ｇ１ｎＣＸ５）−Ｌｅｕ−Ｔ’／ｒＣＸ
２）−Ａ、ｌａ、−ＡｒｇＣＸ６）−Ｌｙｓ（Ｘ７）−
Ｌｅｒｔ−Ｄ−Ｌｅｕ−１１ｉ’５ｌＪ）−Ｇｌｕ（Ｘ
３）−１１ｅ−Ｍ’ｅｔ−Ａｓ？Ｚ（、Ｙ５）−Ａｒａ
’ＣＸ６）−ＧｌｎＣＸ！Ｉ）−Ｇｌｎ（Ｘ”）−Ｇｌ
ｙ−Ｇ１ｎＣＸ５）−Ａｒｇ（Ｙ’）−Ａｓｎ（Ｘ”）
−Ｇｌｎ（、￥’）−Ｇｌπ（Ｘ３）−〇ｉｎ（Ｘ５）
−Ａｒｇ（Ｘ６）−８ｅｒ（Ｘ’）Ａ、ｒｒｔＣＸ”）
−ｐｈｅ−，４Ｓ７１．（、￥５）−、Ｙ９ （式中、Ｘ２はＤＣＢてあり、Ｘ３は□Ｂｚｌであり、
Ｘ４はＢｚｌであシ、Ｘ５はＸａｎであシ、Ｘｏは１’
ｏｓてあムＸ７は２Ｃｅ−Ｚであｐｌそして、Ｘ９は−
０−Ｃ１１２−樹脂支局体である。）α−アミノ保護基
の脱保Ｈ色に使用されるＴＦＡ処理によシＸａｎを部分
的に、！ｒ、Ａ−，は完全に除去することができる。

実施例１に述べたように保護ペプチド−樹脂をノ・Ｉｒ
＋１ｆさせ、脱保穫し、そして１，１１１Ｘ！Ｍシた。

純度を谷々チェックされたＮＪＡ画分の脱塩はｃｌｉ３
ＣＡｌ’１０．１％ＴＥＡ勾配により行なった。次いで
中央画分を凍結乾慄し、所望のペプチドを得た。このペ
プチドの純度は９８％以上であった。

Ｍ１３ＨＡ樹脂を使用し、この合成をくシかえした。Ｖ
ａｌｅらの米国特許第４，２９２，３１３号に開示され
た最初の方法にょシＡｓｒｔをＭＢＩ−ＩＡ樹脂に結合
させ、アミド化Ｃ−末端を有する同一のペプチドを製造
した。

実施例１２ 次式、 １１−Ｃ”Ｍｅｌｉｆｆｌｓ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｌａ
−Ｉｌｅ−Ｐｌ、＋、ｅ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−８ｅｒ−Ｔ
’／ｒ−Ａｒｇ−Ｌ’Ｊｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｗ−Ｇｌｙ−
Ｇｉｎ−Ｌｅｕ−８ｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｌ
ｅｕ−Ｄ−Ｌｅｖ、−Ｇｌｎ−Ａｓｐ−Ｉｔｅ−Ｍｅｔ
−８ｅｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌ３／−Ｇｌｕ
−３ｅｒ−Ａ、８７＋−（にＩｎ−Ｇｌｖ、−Ａｒｇ−
Ｇｌ３／−Ａｌａ−ＮＨ２で示される４０残基アミド化
ペプチド〔♂Ｍｅｌｉｉｓ’。

Ｄ−Ｌｅｕ２３〕−ｈｐＧＲＦ（１，−４０）−Ｎｉｉ
２の合成を、Ｖａｌｅらの米国特許第４，２９２，３１
３号明訓書に一般的に説明されているように、Ｂｅｃｋ
脚ｙＬ９９０イプチド合成機を用いて、ＭＢ／ｉＡ樹脂
上で段階的ＶＣ行なった。ＴＬＣおよびＪｉＰＬＣによ
シ、このペプチドは、おおむね純粋であることが１ｌｉ
ｉ認された。

実施例１３ 次式、 ＮａＭｅＭｅｔ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｌａ−１１ｅ−Ｐ
ｈ、ｅ−１’ｈｒ−８ａｒ−８ｅｒ−Ｔａｒ−Ａｒｇ−
Ａｒｇ−１１ｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌ’／−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ−
１”Ｉｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌ’／５−Ｌｅｕ−１）−
Ｌｅｖ、−Ｉｆｉｓ−Ｇｌｕ−１１ａ−Ｎｌｅ−Ａｓｎ
−Ａｒｇ−Ｇｌ＞Ｌ−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ
−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｒｂ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−８ｅｒ
−Ａｒｇ−１’Ｉｔｅ−Ａｓｎ−ＯＨて示される〔Ｎ”
Ｍ’ａ−Ｍｅｔ’、Ｉ）−Ｌｔ＋ｕ２３．Ｎｌｅ２７）
−ｒＧＲＦ（１−４３）−ＯＨの合成を、実施例１に述
べたように、Ｂｅｃｋｍａｎ９９０・々グチド合成機を
用いて、クロルメチル化樹脂］・て段階的に行なった。

ＴＬＣおよびＨＰＬＣにより、この波プチドは、おおむ
ねｒａ＋＋枠であることが（ｒ（ｆ：認された。

−１６施例Ｉ４ 次式、 １ノー１’ｙｒ−Ａｔａ−Ａｓｐ−Ａｌａ−１／ｅ−Ｐ
ｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−８ｅｒ−Ｔ’Ｊｒ−Ａｒｇ−Ｌ
’ｌ５−Ｖａ１−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−にｌＩＬ−Ｌｅｕ−
８ｅｒ−Ａｌａ−Ａｒ（１＝Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｅ
ｕ−Ｇｌｎ−Ａｓｐ−１１ｅ−Ｍｅｔ−８ｅｒ−Ａｒｇ
−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌ３’−ＮＨ２ て示さ八るｈｐＧＩＩＦ類似休所］；、即ち、〔Ｄ−Ｌ
ｅｕ”Ｊ−ｈｐＧＲＦＣｌ−２：３）−ＮＨ２の合成を
、実施例２に述べたように、Ｈｅｃｋｒｎａｎ、９９０
ペプチド合成機を用いて、ＭＢＨＡ樹脂上で段階的に行
なった。ＴＬＣおよびＨ’ＰＬＣにより、このペプチド
は、おおむね純粋であることが確認された。

この合成を２回〈シかえし、［Ｄ−Ｌｅｕ２３．Ｄ−Ｇ
ｌｕ”〕−ｈｐＧＲＦ（Ｌ３２）Ｎ’Ｈ２お」：び〔Ｄ
−Ｌｅｌｌ、”、Ｎｌｅ”〕−ｈｐＧＲＦ（１−３２）
−＃Ｈ’２を製造した。

実施例１５ 次式、 Ｈ−Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａ、ｌａ−Ｉｌｅ−７’
ｌＬｅ−Ｔｈ、ｒ−Ａｓ７１−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ
−、Ｚ／３１５−Ｖａ１−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｌ
ｅｕ−８ｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌ’ｙ５−Ｌｔ＋ｕ−
Ｄ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｄ−Ａｓｐ−Ｉｌｅ−Ｎｌｅ−８
ｅｒ−Ａｒｇ−Ｈ２ で示されるｈｐＧＲＦ’ｆｔ４似体ｌ所片、即ち、〔ｆ
）−Ｌｅｕ２３．Ｄ−Ａｓｐ”、Ｎｌｅ”）−ｈｐＧＲ
Ｆ（１−２９）−ＮＨ２の合成を、実施例２に述べたよ
うに、Ｂｅｃｋｍａｎ９９０ペプチド合成磯を用いて、
ＭｊＭｉＡ樹脂上で段階的に行なった。ＴＬＣおよび１
１１）ＬＣによシ、このにプチドは、おおむね純粋であ
ることが確認された。

実ｈ也例１Ｇ 次式、 ｊｌ−１−１ｉｓ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｌａ−／Ｉｅ−
Ｐんｅ−Ｔ’ｈ、ｒ−８ｅｒ−８ｅｒ−１’ｙｒ−Ａｒ
ｇ−Ａ、ｒｑ−１１ｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌ’／−Ｇｌｎ−Ｌ
ｅｒｔ、−Ｔ’／ｒ−Ａｌａ−ＡｒＨ＋−Ｌｙｓ−Ｌｅ
ｕ−Ｄ−Ｌｅｒｂ−Ｎｉ５−Ｇｌ＋ｂ−−１１ｅ−Ｎｉ
ｔ□−Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ｈ２ で示されるＣＩ）−Ｌｅｕ”、Ｍｌｅ２７−、Ｉ−ｒＧ
ＲＦ（１−２９）−Ｎｌｉ２の合成を、実施例２に述べ
たように、Ｂｅｃｋｍａｎ９９０″′２′２ブチド１を
用いて、Ａ＝ｌＢＩｉＡ樹脂上で段階的に？Ｊ′４こっ
た。ＴＬＣおよびＩＩ／）ＬＣによシ、このペプチドは
、おおむね純粋であることが確６２された。

この合成をく９かえし、［Ｉ））−１，ｅｗ”、Ｎｌｅ
２７：］−ｒＧＲＦ（１−２９）ＮＨ２をけ成した。

次式、 １ｌ−−Ｔ’／ｒ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｌａ−１ｌｔ＋
−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−８ｅｒ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−
Ｌｙ５−Ｖａ１−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｌｅｕ、−
８ｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌ’／ｓ−Ｌｅｗ−Ｌｅ７ｂ
−Ｇｌｎ−Ｄ−Ｇｌｕ−１ｌｅ−Ｎｉｅ−８ｅｒ−Ａｒ
ｇ−Ｎｌ１２で示される〔Ｄ−Ｇｌｖ、”、Ｎ１ｅ２７
〕−ｈｐＧＩビＩ−’（１−２９）−ＮＨ２の合成を、
実施例２に述べ／ζように；Ｂｅｃｋｍａｎ９９０ペプ
チド合成機を用いて、ＭＢＨＡ樹脂上で段階的に行なっ
た。Ｔｌｉ、ＣおよびＩ−ＩＰＬＣにより、このぜプチ
ドは、ｋおむね純粋であることが確認された。

実施例１８ 次式、 ｌｌ−１ｉｉｓ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｌａ−１１ｅ−Ｐ
ｈｅ−１’ｌｔ、ｒ−３ｅｒ−、’Ｅｅｒ−１”／ｒ−
Ａｒｇ−Ａｒｇ−１１ｅ−Ｌｃｕ、−Ｌ；ｌｙ−Ｇｌｎ
−Ｌｅｑｂ−Ｔｙｒ−Ａｌａ、−Ａｒｇ−Ｌ’／ｓ−ノ
ｒ（’、ＩＬ−Ｌｅｗ−１１ｉｓ−Ｄ−Ｇｌｕ−Ｉｔｅ
−Ｍｌｅ−Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ｈ２ で示される［Ｄ−Ｇｌｕ２５．Ｎ１ｅ２７〕−ｒＧＩビ
Ｊｌ’（１２９）＃Ｈ２の合成を、実施例２に述べたよ
うに、ＢｅＣｋｍａル９９０ペプチド合成機を用いて、
ＭＨＩ−ＩＡ樹脂上で段階的に行なった。７”／、Ｃお
よびＩｆＰＬＣによシ、このペプチドは、おおむね純７
１卆であることが確認された。

ブて流側１９ 次式、 ／−／−１）−７”／ｒ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｌａ−１
１ｅ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−３ｅｒ−’１”／ｒ−
Ａｒｇ−Ｌ’ｌ５−Ｖａ１−Ｌｅｗ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−
Ｌｅｕ−８ｅｒ−Ａ、ｌｕ、−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｌｅｗ
−Ｉ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ａｓｐ−１１ｅ−Ａ４ｅｔ−
８ｅｒ−Ａｒｇ−−にｌｎ、−Ｇｌｒｖ−Ｇｌ１／−Ｇ
ｌ７Ｌ−Ａｔ・（７−ＡＳｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ
−Ｇ１３’−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｖａ、ｌ−Ａｒｇ−Ｌｅ
ｗＮＨ２ で示される〔Ｄ−Ｔｙｒ’、Ｄ−Ｌｅｕ２３〕−ｐＧＲ
Ｆ（］−４４）＃Ｈ２の合成を、Ｖｎ、ｌａらの米国特
許ｕＳ４，２９２，３１３号明細書に一般的に説明され
ているように、Ｂｅｃｋｎｕｘｎ９９０−々ブチド合成
機を用いて、ＭＤＩ−Ｊ’Ａ樹脂樹脂膜階的に行なった
。ＴＬＣおよびＩｉＩ）ＬＣにより、このペプチドは、
おおむね純粋であることが確認された。

」ヨＪＬヱＬ」立 次式、 Ｈ−Ｄ−Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ａｓ７ｙ−Ａ１ａ−Ｊｌｅ−
Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−８ｅｒ＝Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ａ
ｒｇ−ＩＩａ−Ｌａｗ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｄ−Ｌｅｒｂ
−Ｔ”／ｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌ’／ｓ−Ｌｅｗ−Ｄ−
Ｌｅ’ｕ−Ｈ４ｓ−Ｄ−Ｇｌｎ−Ｉｒｅ−Ｎｌｅ−Ａｓ
ｎ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ、−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ａｒ
ｇ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｇ１１Ｌ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｓｅ
ｒ−Ａｒｇ−Ｐｈ、ｅ−Ａ、ｓｎＯＨ で示される（Ｄ−Ｈｉｓ’、Ｄ−Ｌｅｕ１７ｒ２’、ｌ
）−にｌＪ５゜Ｎ１ｅ２７〕−ｒＧＲＦ（１−４３）−
Ｏｆｆの合成を、実施例１に述べたように、Ｂｅｃｌｃ
＞ｎαｎ９９０ペプチド合成機を用いて、クロルメチル
化樹脂−にで段階的に行なった。７“ＬＣおよびＨＰＬ
ＣＫより、このにプチドは、おおむね純粋であることが
確認された。

実施例２１ 次式、 １ｌ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｌａ−１１ｅ−
／”／４ｇ−Ｔｈｒ−Ａｓｎ−８ａｒ−Ｔ！／ｒ−Ａｔ
”ｇ−Ｌ’／ｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ、−
Ｄ−Ｌｅｕ−８ｅｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙ５−Ｌｅｕ
−Ｄ−Ｌｒｔｔｕ−Ｇｌｎ−Ｄ−Ａｓｐ−１１ｅ−Ａｆ
ｇｔ−８ｅｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇ１ｙ−ＮＩ
Ｉ２て示されるＣＤＡｌａ２．Ｄ−Ｌｃｕ”＋”、Ｄ−
，４ｇ、２５］−ｈｐＧＲＦ（１−３２）Ｎ１１２の合
成を、実施例２ｅこ述べたように、Ｂｅｃｋｎｕｒｎ９
９０−″２２プチド成機を用いて、ＭＢＩｉＡ樹脂上て
段階的に行なった。

７’／、ＣおよびＩｉＰＬＣにより、このペプチドは、
おおむね純粋であることが確認された。

実施例２２ 次式、 １ｆ−Ｄ−７”／ｒ−Ｄ−Ａｌａ−Ｄ−Ａ、ｓｐ−Ａｌ
ａ−Ｉｌｅ−／’Ｉｔ、ｅ−Ｔｈ、ｒ−／Ｊ−Ａｓｎ−
８ｅｒ−１）−−’Ｊ”Ｊｒ−Ａｒｇ−Ｌｙ５−Ｖａ１
−Ｌｅｕ−Ｄ−Ａｌａ−Ｇ／ｎ−Ｄ−Ｌｅｕ−８ｅｒ−
Ａ、ｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｅｗ−Ｇｌ
ｎ−Ｊ）−Ａｓｐ−１１ｅ−Ｄ−Ｍｅｔ−８ｅｒ−Ａｒ
ｇ−ＮＩＩ２て示される［Ｄ−７”ｊ）ｒ’、Ｄ−Ａ、
ｌａ”、Ｄ−Ａｓｐ３゜１）−Ａｓｎ８．Ｄ−１’ｙｒ
”、Ｄ−Ａｌａ＋″、１）−４，、Ｈｕ＋７＋’３゜１
）−Ａｓｐ”、ｌ）−ルノｅｔ２７］−ｈｐＧＩｅｌ’
（１−２９）−Ｎｌ１２の合成を、実施例２に：′ｖｌ
ｉべたように、ｌノｅｃｋｎｍｎ９９０ペプチド合成（
幾を用いて、ＭＢＨＡ樹脂上で段階的に行なった。１’
ＬＣおよびＩｉＰＬＣにより、この４プチドは、おおむ
ね純粋であることが確認された。

実施例２３ 次式、 １１Ｄ−Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｌａ−１１ｅ−Ｐ
ｈｅ−Ｔｈｒ−Ｄ−８ｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−
Ａｒｇ−ＩＬｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＧＬｎ−Ｌｅｕ−Ｔ
ｙｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌ’／５−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｅｕ
−Ｈｉｓ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｎ’ｌｅ−ＡＳｎ−Ａ、ｒ
ｇ−Ｇｌｎ、−Ｇｌｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ａｓ
ｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｗ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−８ｅｒ−Ａ、ｒ
ｇ−Ｐｈｅ−Ａｓｎ−０１１ で示されるＣＤ−１４ｉｓ’、１）−８ｅｒ”、Ｄ−Ｌ
ｅｕ”。

Ｎ’ｌｅ”〕−ｒＧＲＦ（１−４３）−０１１の合成を
、実施例１に述べたように、Ｂｅｃｌｃｎｖａ、ｎ９９
０′ゾチド合成機を用いて、クロルメチル化樹脂上て段
階的に行なった。７’ＬＣおよびＩｉｉ’ＬＣにより、
このペプチドは、おおむね純粋であることがｌ１ｒｌｉ
１：（’ｊされた。

］Ｌ」に飢−１先 次式、 ＮＣｔＭｅＴｙｒ−ＡＬｃ−Ａｓｐ−Ａｌａ−ＩＬｅ−
Ｐｈｅ−１１ノｂｒ−、”Ｅｅｒ−８ｅｒ−Ｔ’／ｒ−
Ａｒｇ−Ａｒｇ−１１ｅ−Ｌｅｒｂ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−
Ｌｅｒｔ−Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｙ５−Ｌｅｔｂ
−Ｌｅｕ−Ｈｉ５−Ｄ−Ｇｌｗ−Ｉｌｅ−Ｍｅｔ−Ａ、
ｓｎＡｒｇＮ１１２ で示されるγＧＲＦ類似体類似体断固ち、いμＭｅ７”
／ｒ’。

Ｄ−Ｇｌｕ２′）−ｒｈＧＲＦ（１−−２９）−Ｎｌ１
２の合成を、実施例２に述べたように、ｌＩｅｃｋｎｗ
、ｎ９９０ｄプチド合成機を用いて、ＭＢＩＩＡ樹脂−
ヒで段階的に行なった。７“ＬＣおよびＨｌ）ＬＣに、
Ｌす、この被フ。

チドは、おおむね純粋であることが確認された。

実施例２５ 次式、 Ｉｆ−ＣｃｔＭｅＬｅｕ、−Ａｌａ−ＡＳ、７１−Ａ、
ｌｒｔ、−ＩＩｅ−Ｐｈ、ｅ−’ｌ”ｈｒ−３ｅｒ−８
ｅｒ−Ｔ’／ｒ−Ａｒｇ−−−Ａｒｇ−ＩＩｅ−Ｌｅｕ
−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ＝Ｌｅｗ−７’ｙｒ−Ａ、ｌａ−Ａｒ
ｇ−Ｌ’ｔ５−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｌｅｕ−Ｈｉｇ−１）−Ｇ
ｌｕ−７１ｅ−Ｎｌｅ−ＡｓＷ−Ａｒｇ−Ｇｌｎ−Ｇｔ
ｙｉ−（’；Ｌ、！／ＧＬｕ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ｇｉｎ
−ＧＬｕ−Ｇｌｎ、−−−Ａｒｇ−８ｅｒ−Ａｒｇ−Ｐ
ｈｅ−Ａ、ｓｎ−Ｖａｌ−ＮＩＩ２ｆ；Ｊｒ、ｈＬｒ／
’αＪ／−Ｔ−−−１７１／ａ、ｊ”ｎ−４１−ｕ”Ｎ
ｌｅ”〕−ｒＧＲＦ−ＣＶａｌ”〕−Ｎ＆の合成を、実
施例２に述べたように、Ｂｅｃｋｙ恥ｎ９９０ペプチド
゛合成機を用いて、ＭＢＩｉＡ樹脂上で段階的に行なっ
た。ＴＬＣおよびｊ−ｔｐＺ、ｃによシ、このにブチド
は、おおむね純粋であることが確認された。

実施例で製造した様々な合成ペプチドを試験管内検定に
よシ合成ｈｐＧＲＦＣ１−４０）−Ｏｆｆと比較し、そ
して、この合成にプチドは全て、ＧＨの分泌について一
層高い効力を示し、そして、同等の固有活性を有するこ
とが発見された。

成長ホルモンの放出を促進するペプチドの有効性を判定
するため、標準物質として合成ＩＬｐＧＩＩＦ（１−４
０）−□Ｈを用いて、当モル濃度のその他の様々な合成
類似体および断片との密綴な比較のもとに試験管内検定
を行なった。はぼ、ご３〜５日前に摘出されたラット下
垂体の細胞を含む培養物を用いた。生長ホルモンの分泌
についてｊ］λ適であると考えられる培養物をこの比較
試験に、（／ａｌｅらがＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ″
、９１．５６２−５７２（１９７２）に開示した方法、
更に詳細には、Ｖａｌｅらがｔ＊、”ｎｄｏｃｒｉｎｏ
ｌｏｇ’／”（１９８３）（印刷中）に開示した一般的
方法にνｔつて使用した。

被験物質に関するインキュベーションを３〜４時間行い
、培地の一部を取り出して処理し、それらの免疫反応性
ＧＨ（ｉｒＧＩｉ）づト１″分に特性が明らかにされた
ラジオイムノアッセイによシ測定シた。

等モル濃度で行なわれたこの比較試験の結果を下記の表
Ｉに示す。

表１ 〔Ｄ−Ｌｅｕ１７．ｔｖｌｅ”〕−ｒＧＲＦ’（Ｌ−２
９）−Ｎｌｆ２１３８％ＣＩＶ’Ｍ’ｅＰｈｅ’〕−ん
ｐＧ１１！Ｆ（１３２）Ｎ１１２１２％Ｃ４Ｃ１Ｐｈｅ
’′３ｈｐＧＲＦ（１３２）−ＮＨ２２％これらの合成
ペプチドの試験管同試験により、これらのペプチドは各
々ｈｐＧＲＦ（１−４０）−ＯＲの完全な固有生物活性
を有することが示された。

〔Ｄ−Ｌｅｕ２３．Ｎｌｅ”］−ｈｐＧＲＦ（１−２９
）−ＮＦ２の最大有効濃度は約１ナノモルである。

生長ホルモンの分泌に関する試験管内試験の他に、生体
内試験も行なった。自由に走第１る正常なオスのラット
をＦＬＡ−６３（外生ＧＲＦに対する反応に悪影響を及
ぼすことなく、内生ＧＨ分泌を抑制するドーパミンヒド
ロキシラーゼ阻害剤）で事前処理した後、該ラット中に
インデウエリングカテーテルから合成ペプチドを注入し
た。注入直前、注入５分後および２０分後に該カテーテ
ルで血液サンプルを採取した。血液中のＧＨレベルをラ
ジオイムノアッセイにより測定した。その結果、合成Ｃ
Ｄ−Ｌｅｒｂ”、Ｎｌｅ２７〕−ｒＧＲＩｊ’（１−２
９）−ＮＩｉ２、その他のｒＧＲＦのＤ−ＬＩＩｕ”お
よびＤ−Ｇｌｕ２５類似体類およびｈｐＧＲＦ（１３２
）Ｎｉ１２の前記ＮａＭｅおよびＣ“Ｍ’ｅ類似体類は
下垂体Ｇｌ−Ｉの分泌を刺激する強力な刺激剤であるこ
と、および、ｒＧＲＦ（１−２９）ＮＦ２お、）：びり
、ｐＧＲＦ（１−３２）＃Ｉｉ２よシも相当長い有効期
間を有することが判明した。Ｇｌｌの分泌を検出するの
に有効なことが知られているその他の公知のｔＩＩＩ！
Ｆを生体内試験に使用し、この結果を確認し／ｃｏ体重
１に９あたシこの被ブチド約１００ナノグラム〜約５０
μｇの投勾融はＧＨ分泌をおこさせるのに有効であると
思われる。

このような合成ｈｐＧＲＦ３’ｆＪ世体および多分子Ｃ
；ＲＦならびにｐＧＲＦ類似体・：Ｊｌは、医者がＧｌ
ｉ産生量を高める必要があると〕ζえるヒトに投与する
のに有用である。このようなり」ｊ似体によるＧｌｉ分
泌の刺激は外生ＧＩＩ７”の生産不足によシひきおこさ
れた兄全な、または、相対的なＧｌｉ欠如を有するヒト
に著効を示す。更に、Ｇ’ＩＩ分泌量の増大およびそれ
に付随する生長増大ｔ、１正常なＧＨレベルのヒトまた
は動物において・０１？こるだろうと思われる。筐だ、
投与によシ脂肋ａ青が変更され、そして、その他のＧＢ
−依存性代謝、免疫および生殖過程も変化される。例え
ば、これらの類似体は火傷の治療中のヒトの蛋白同化作
用を刺激する手段として有用である。その他の例としで
は、これらの類似体類はニワトリ、七面鳥、ブタ、ヤギ
、ウシおよびヒツジのような商業的温血動物に投与する
こともでき、また、魚類およびその他の冷血水棲動物（
例えば、海ガメ、およびウナギ）の養殖にも使用できる
。斯くして、有効性の被ブチドを投与することによって
蛋白質対脂肪の比率を高め、生長を促進させることがで
きる。

これらの合成ペプチドはヒトに投与するためには少なく
とも９３％好ましくは少なくとも９８％の純度をもたな
ければならない。この純度は、目的とするペプチドが存
在するｉＡ似ペプチドおよびペプチド断片すべてのうち
で上記の重帽係を構成しなければならないことを意味す
る。生長を促進させ、そして、脂肪含量を低下させる７
′こめにこれらの合成ペプチドを商栗的動物およびその
他の動物に投与する場合には、約５％低度の低純度ある
いは更に、０．０１％程度の低純度であってもか１わな
い。

これらの合成波ブチドｊ、ｆｃｉｆぞの無毒性塩を、薬
剤組成物を形成する薬剤学的ＶＣ″！、たは獣医薬的に
受容できるキャリヤーと組み合わせてヒトを含む哺乳動
物に静脈内、皮下、Ｊｆ７ｉ肉内、経皮（例えは経鼻１
体）または経口的に投Ｉｊすることができる。

この投与は、治療されるべき受容者がこの種の治療を必
要とする場合に、成長ホルモンの放出を刺激するために
医師により採用す２）ことができる。

必要な用４ｄ−は治療されるｑ！ｉ、疋σ）状態、状態
の重症度、および目的とする治療の期間に応じて変わる
であろう。

この棟のペプチドはしはしｔ、１：、無毒性の塩たとえ
ば酸付加塩、寸だはだとえｉｌ：Ｊｌｉ鉛、鉄などとの
金属錯体（これらは本発明の目的のための塩と考えられ
る）の形で投与される。この棟の酸付加塩の具体例は塩
酸塩、臭化水素１’Ｈ４９塩、硫酸塩、リン酸塩、マレ
イン酸塩、酢酸塩、クエジ酸塩、安息香ｅＪＡ、コハク
酸塩、リンゴ酸塩、アスコルビン酸塩、酒石酸塩などで
ある。γ、ＩＩ性成分金成分の形で経口投与すべきであ
る場合、錠？−１ｌＪＶＣは結合剤、たとえばトラガカ
ント、コーンスターチもしくはゼラチン；崩壊剤、たと
えばアルギン酸；および滑沢剤、たとえばステアリン酸
マグネシウムが含有されていてもよい。液状での投与を
希望する場合、甘味剤および／または香味剤を用いても
よく、等張食塩液、リン酸塩緩衝液などに入れて静脈内
投与することも行われる。

これらのＲプチドは医師の指導のもとにヒトに投与され
るべきであシ、薬剤組成物は通常＆：ｊニー２プチドを
、慣用される薬剤学的に受容できる常用の固体捷たは液
体キャリヤーと共に含有するであろう。通常、非経口投
布量は受容者の体津ＩＪｃｇ当たりペプチド約１００ナ
ノグラム〜約５０１１７であろう。

本発明者らに現在知られている最良の形ｊ／、ｊ’ｔを
構成する好ましい実施態様に関して本発１３Ｊ＋を記述
したが、特許請求の範囲に示した本発明の範囲を逸脱す
ることなく当業者に明らかな各種の変更および修正を行
うことができると解すべきである。たとえば（プチド鎖
における変更、特にペプチドのカルボキン末端に始まる
削除＜ｒ今日既知の実験慣例に従って行い、ペプチドの
生物学的効力のすべてまたはきわめて実質的な１１１−
分を保持するペプチドまたは４プチド断片を製造するこ
とができ、これらのペプチドは本発明のｆｌｉｉｊ囲内
にあると考えられる。さらにいずれかの末端もしくは両
末端に伺加を行い、および／または一般に４プチド化学
の全般的技術において周知のように天然残基の代わりに
一般的に等しい残基を用いて、本発明の範囲から逸脱す
ることなく特許請求のｉ（・を囲に記載されたポリペプ
チドの効力の少々くとも実質的な部分をもつ同族体を製
造することができる。

特許出願人ザ・ザルク・インステチュート・フォー・バ
イオロジカル・スタブ ィーズ （外５名） 手続補正椙 昭和パ年ｒｒ月ユ／Ｂ 特許庁長官志賀学殿 １、事件の表示１５′ 昭和げ年特許願第／ア２’１２−ｏ号 ２、発明の名称 （ｒＲＦプθイ・入イオむ１ ６袖正をする者 事件との関係特許出願人 住所 乙グ・、力・づ）′１１ソイアＺテｆエート−／ｄ−八
４＃Ｉ：”−”７＋＋ｔ、゛Ｚクチイー２４゜代理人 別紙の通り””ｒ１’ｌ、慟ｔ’）ｌ’ｌ’＞’−’Ｉ
ｓＩ−１，１’ｆ−’、（）手続補１１：書 昭和５９年１７月ノ１口 特許庁長官志賀学殿 ２、発明の名称 ＧＲＦ類似類似 乙類正をする者 事件との関係特ぎ′１出に１ａ人 住所 ４代埋人 ５補正の対象 明細書の〔特許請求の範囲〕と〔発明の詳細な説明〕の
欄（別紙） （１）〔特許請求の範囲〕を下記のとおりに補正する。

「（Ｉ）次式で示される合成ベゾチドマたはその非毒性
塩。

Ｒ，−Ｒ２−Ｒ３−Ａｈａ、−Ｉｌｅ−Ｐｈｅ−’］’
、ｈｒ−Ｒ８ＳｅｒＲ１０ＡｒｇＲ１２８１３ＬｅｕＲ
１、−ＧＩＪｎ−Ｒ１，−Ｒ１８−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌ
ｙｓ−ＬｅｕＲ２３Ｒ２４Ｒｚ５ＩＩＪｅＲ２７Ｒ２８
Ａｒｇ−ＧＡｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ｒ３４−Ａｓｎ−Ｃ
ｘ１ｌｎ−Ｃ＃ｕＲ３８−Ｒ３，−Ｒ４ｏ−Ａｒｇ−Ｒ
４２−Ｒ４Ａ−Ｒ４４〔式中、Ｒ□はＴｙｒ、Ｄ−Ｔｙ
ｒ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ。

Ｄ−Ｐｈｅ、ｐｃ１−Ｐｈｅ、Ｌｅｕ、ＨＪｓ、まブこ
はＤ−Ｈｔｓである； Ｒ２はＡｉｆｆａまたはＤ−ＡＩＪａである；Ｒ３はＡ
ｓｐまたはＤ−Ａｓｐである；Ｒ８はＳｅｒ、Ａｓｎ、
Ｄ−８ｅｒまたはＤ−Ａｓｎである； Ｒ１０はＴｙｒまたはＤ−Ｔｙｒである；Ｒ，はＡｒｇ
またはＬ１２である； Ｒ１３はＩｌｅまたはＶａ１３である；Ｒ□５はＧ７３
．またはＤ−Ａ（ｌａである；Ｒ１７はＬｅｕまたは］
）”Ｌｅｕである；Ｒ１８はＴｙｒまたはＳｅｒである
； Ｒ２３はＬｅｕまたはＤ−ＬｅｕＣ＝ある；Ｒ２４はＨ
ｊ、ｓまたはＧｌｎ−（ある；Ｒ２５はＧＩＪｕ、Ａｓ
ｐ、Ｄ・−（：ｌｕ、またはＤ−ＡＢｐである； Ｒ２□はＭｅｔ、Ｄ−Ｍｅｔ、Ａ（４ａ、ＮＩｌｅ、Ｉ
ｌｅ。

−ｉｅｕ、’ＮＶｍ＋またはＶａｅ−：ある；Ｒ２Ｈは
Ａｓｎ、またはＳｏＩである；Ｒ３，はＡｒｇ、または
Ｓｅｒである；Ｒ３８はＧｄｎ１たはＡｒＬ！−’Ｑあ
る；Ｒ３−まＡｒｇまたはＧ６ｙ′＋スりる；Ｒ４０は
ＳｅｒまたはＡ１１ａ−（−Ａｔ、、る；Ｒ４２はＰｈ
ｅ、ＡｌａまたはＶａｎである；Ｒ４３は、ＡＢｎまた
はＡｒ（−である；Ｒ４４は天然アミノ酸である； ただし、 （ａｌＲ１はＣαＭｅまたはＮＣｔＭｅ置換基を有する
か、または（ｂｌＲ□７および／またはＲ２１，はＤ−
Ｌｅｕであるか、若しくは（ｃｌＲ２ｓはＤ−Ｇｌｕか
、あるいは、Ｄ−Ａｓｐである； また、ただし、 Ｒ２，とＲ４４の間の残基のうちのいずれか、または全
部を除去することもできる。〕 （２）Ｒ２５はＤ−Ｇｌｕである特許請求の範囲第１項
に記載のはプチピ。

（３）Ｒ２，はＤ−Ａｓｐである特許請求の範囲第１項
に記載のにプチド。

（４）Ｒ２３はＤ−Ｌｅｕである特許請求の範囲第１項
、２項または６項に記載のイプチド、。

（５）Ｒ，７はＤ−Ｌｅｕである特許請求の範囲第１項
、２項、６項ずたは４項に記載のベノ゛リード。

（６１Ｒ２，はＮｌｅである特許請求の範囲第１項、２
項、６項、４項または５項に記載のベゾチド。

（７１Ｒ，はＬｅｕであり、Ｒ２３はＤ−Ｌｅｕであり
、Ｒ２５はＧｌｕであり、Ｒ，はＮｌｅであり、そして
、Ｒ３０”’４４残基は除去されている特許請求の範囲
第１項に記載の（プチド。

（８）Ｒ，はＲ１８であり、Ｒ２はＡｈａであり、Ｒ３
はＡｓｐであり、Ｒ８はＳｅｒであり、Ｒ１０はＴｙｒ
であり、Ｒ１２はＡｒｇであり、Ｒ１：、は工ｌθであ
り、Ｒ１５はＧｌｙであり、ＲｉｓはＴｙｒであり、Ｒ
２４はＨｉｓであり、そして、Ｒ２ＨはＡｓｎである特
許請求の範囲第７項に記載の−ぐプチト゛。

（９）Ｒ，はＣａＭｅまたはＮ”Ｍｅ置換Ｊｌ（を有す
る特許請求の範囲第１項〜第６項のいずれかに記載のに
プチド。

０■特許請求の範囲第１項〜第９項のいずれかに記載の
はプチドまたはその非班性塩：ｊｔｉよび医療桑用また
は獣医桑用の液状あるいは固体状１１．！体からなる、
動物中でＧＨの放出を刺激するだめの医薬組成物。」 （２）明細１８頁２行の［−Ｌｅｕ−Ｒ２４−Ｊラミ”
””Ｒ２Ｈ−Ｒ２４Ｊに補正する。

（３）明細智８負下３行と丁２行との間にＦ記の記載を
挿入する。

「Ｒ２３はＬｅｕまたはＤ−Ｌｅｕである；」（４）ｌ
ＪＩ［１Ｉｈｉｔ９負７行）ｒＲａ８ＪヲｒＲ３ｔ、、
ＪＧ、Ｊｒｌｉ正ｔル。

以上

Claims (9)

【特許請求の範囲】
1. （１）次式で示される合成ペプチドまたはその非毒性塩
   。 Ｒ，−Ｒ２−ＲｓＡｌａ−１１ｅ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−４
   −８ｅｒ−Ｉｌ＋ｏＡｒｇ−Ｒ，２−Ｒ，３−Ｌｅｒｂ
   −Ｉ＋！、、、−Ｇｉｎ−Ｒ，７−Ｅ、Ｂ−Ａｔａ−Ａ
   ｒｇ−Ｌｙ５−Ｌｅｗ−Ｌａｕ−Ｒ２４−Ｒ２ａ−１１
   ｇ７１！２７ｆｅ２ｓ−Ａｒｇ−Ｇｉｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌ
   ｕ−Ｒ，、−Ａ８ｎ−ＧｌｎＧｌｕ−Ｒ３ｓｌ１ｓｏ１
   ｅｓｏＡｒｇＲｕＲ＜５−Ｒｌ４ 〔式中、Ｒ８はＴｙｒ＋Ｄ−７’ｙｒ＋Ａ（ｅｔ、ＰＩ
   Ｌｅ、Ｄ−ＰｈｅｒｐＣＩｌ−Ｐｈｅ＋Ｌｅｕ、ｌ１ｉ
   ｓ、またはＤ−１１ｉｓである； Ｒ２はＡｌａまたはＤ−Ａ！ａテア７）；Ｒ３はＡｓｐ
   またはＤ−Ａ８７Ｊである；Ｒ８はＳｅｒｒＡｇｎｒＤ
   −８ａｒまたはＤ−Ａｓｎでらる； ＲｌｏはＴｙｒまたはＤ−Ｔｙｒである；ＲＩ□はＡｒ
   ｇまたはＬｙｓである； Ｒ８，はＩｌｅまたはＶａｌである； Ｒ４はＧｌｌまたはＤ−Ａｌａである；Ｒ，７はＬｅｒ
   ｂまたはＤ−Ｌｅｒｂである；ＲＩ８はＴｙｒまたはＳ
   ｅｒである； Ｒ２，はＨｉｓまたハＧｌｎである； Ｒ２，はＧｌｕｒＡｓｐ＋ＤＧｌｕ＋またはＤ−Ａ８ｐ
   である： Ｒ２□はＭｅｔｒＤ−ＭｅｔｒＡｌａ＊Ｎｌｔ、Ｉｌａ
   、Ｌｅｔｂ。 ＮｖａｘまたはＶａｌである； Ｒ２８はＡｓｎ＋またはＳｅｔである；Ｒ３４はＡｒｇ
   ＋またはＳｅｒである：Ｒ８８はＧｌｎまたはＡｒｇで
   アル。 Ｒ３，はＡｒｇまたはＧ１１１である；Ｒ４ｏはＳｅｒ
   またはＡｌａである： Ｒ４□はＰｈｅ、ＡｌａまたはＶａｔである；Ｒ４３は
   、ＡｓｎまたはＡｒｇである：Ｒ４４は天然アミノ酸で
   ある； ただし、 （ロ））亀はＣａＭｅまたはＮ“Ｍｅ置換基を有するか
   、または（ｂ）Ｒ１７および／またに１１ビ２３はＤ−
   Ｌｅａであるか、若１．（は（ｃ）Ｒ２５はＤ−Ｇｉｎ
   カ、ｈル１／’１ハ、Ｄ−Ａｓｐである； また、ただし、 Ｉｔ′２．とＲ８４の間の残基の９１）のいずれが、ま
   たは全部を除去することもできる３、〕
2. （２）Ｒ２，はＤ−Ｇｉｎである特ｉｉ’Ｆ請求の範囲
   第１項にｉ己載のパフ０チド。
3. （３）Ｒ２５はＩ）−Ａｓｐである時ｉｆ’ｌ１ｔＩＩ
   ｆ求の範囲第１項ζこｉ；己載のペプチド。
4. （４）Ｒ，，３はＤ−Ｌｅｕである！１″Ｉ許請求の範
   囲第１項、２項または３項に記載のペプチド′。
5. （５）Ｒ，□はＤ−Ｌｅｕである／１°行ｉ’ｌ請求の
   範囲第１項、２項、３項または４項に記載のペプチド。
6. （６）Ｒ２７はＮｌｅである特許請求の範囲第１項、２
   項、３項、４項または５項ζこ記載のペプチド。
7. （７）Ｉ？、、７はＬｅｕであり、１７２．はＩ）−Ｌ
   ｅｕであり、ｌうはＧｌｒｂであり、Ｒ２７はＨ１ｔ＋
   であシ、そして、Ｒ３ｏ〜Ｒ４４残基は除去されている
   特許請求の範囲第１項に記載のペプチド。
8. （８）Ｒ，はｌ１ｉｓであり、Ｒ２はＡｌａであり、Ｒ
   ３はＡｓｐであり、Ｒ８はＳｅｒであり、１１．、はＴ
   ｙｒであり、ＲＩ２＆よＡｒｇでアリ、Ｒ，３＆まＩｌ
   ａであり、Ｒ１，はＧ１４１であり、Ｒ１８はＴｙｒで
   あり、Ｒ２４はＨｉｓであり、そして、Ｒ２８はＡｓｎ
   である特許請求の範囲第７項に記載のペプチド。
9. （９）Ｒ，はＣａＭｅまたはＮａＭｅ置換基をイ１する
   特許請求の範囲第１項〜第６項のいずれかに記載のペプ
   チド。 （但特許請求の範囲第１項〜第９項のいずれかに記載の
   ペプチドまたはその非毒性塩および医療薬用捷たは獣医
   薬用の液状あるいは固体状１！−１体からなる、動物中
   でＧＨの放出を刺激するた＋Ｖ）の医薬組成物。