JPS60115599A - Ｂｂｍ―２４７８ａ抗生物質 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新規な抗腫瘍抗生物質ならびにその生産、採取
および２種の生物活性成分への分離に関する。

本発明の２つの抗生物質化合物は、アグリコン、チャー
タリン（ｃｈａｒｔａｒｉｎ　）、チャートリューシン
（ｃｈａｒ−ｔｒｅｗｓｉｎ）のアグリコンおよび１つ
または２つの糖部分からなるグリコシドである。ＥＢＭ
−２４７８Ｂはアグリコンに結合している式 の１つの糖部分を有し、一方本発明の他の抗生物質でめ
るＢＢＭ−２４７８Ａは更に式 を有するアミン糖を有している。

例えば、Ｊ、アム、ケム、ツクＣＪ−Ａｍ、　Ｃｈｅｍ
、　Ｓｏｃ、）、７５巻、４０１１−４０１２頁、１９
５３年およびヘルプ。

シム、アクタ（Ｉｌｔｊｌｖ、　Ｃｈｉｒｎ、　Ａｃｔ
ａ　）、４７巻、１４５９−１４８４頁、１９６４年に
開示されている抗生物質チャートリューシンは本発明の
抗生物質と同じアグリコン部分を有しているが、２種の
異った糖、すなわちＤ−フコースおよびＤ−ジキタロー
スを含有している。

チャートリューシンは構造式 ％式％ を有し、そしてストレプトマイセス・チャートリューシ
スＣ８ｔｒｇｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｃｈｎ、ｒｔｒｅｕｓ
ｉａ）、ストレプトマイセス・Ｓｐ、　１６７４７　（
Ｓ、グイリゾイス（Ｓ、ｖｉｒｉｄｉｓ）、ストレプト
マイセス・Ｓｐ、６Ａ３６Ｃ８，グイリドクロモグネス
（Ｓ、　ｖｉｒｉｄｏｃｈｒｏｍｏｇｅｎｅｓ　）およ
びストレプトマイセス・Ｓｐ、Ｘ−３９８８およびＳ−
４６５と称される２種の放線菌の醗酵により生産される
。チャートリューシンは一見すると抗生物質７４７およ
び抗生物質Ｘ−４６５Ａと同じものである。

本発明によれば、ＢＢＭ−２４７８と称する新規な抗生
物質複合体が提供され、この複合体は菌株、７９０７−
２１（ＡＴＣＣ３９４１７）と称する放線菌またはその
変異株を区部好気条件下に同化可能な炭素および窒素源
を含む水性栄養培地中でその中に実質的な友のＢＢＭ−
２４’１８複合体が該菌株で生産されるまで培養し、そ
して次に培地からＢＢＭ−２４７８複合体を採取するこ
とにより生産される。ＢＢＭ−２４７８複会体はＢＢＡ
ｉ−２４７８ＡおよびＢＢＭ−２４７８Ｂと称する２種
の生物活性成分抗生物質を含有し、これらは通常のクロ
マトグラフィー操作で分離され、実質的に純粋な形態で
単離することができる。

ＢＢＭ−２４７８ＡおよびＢは好気性グラム陽性細菌お
よび嫌気性細菌に対して抗凶活性を示す。ＢＢＭ−２４
７８Ａはまた実験動物ｊ１市場での悪性ｊポ瘍の生育を
抑制する。

本発明は本文でＢＢＭ−２４７８ＡおよびＢＢＭ−２４
７８Ｂと称する新規なグリコシド抗生物質ならびに菌株
、７９０７−２１と称する放線菌菌株の醗酵によるそれ
らの製造に関する。エル・サルパドルで採集された土壌
試料から単離された生産−は現在のところ非ストレプト
マイセス放線菌菌株としてのみ分類されて（・る。この
菌株の生物学的に純粋な培養体は常法で調製され、米国
、ワシントン州、アメリカン・タイプ・カルチュア・コ
レクション（ｔｈｅ　Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｔｙｐｅ　Ｃ
ｕ１ｔｕｒｅ　ＣｏＬｌｔｔｃｔｉｏｎ）に受理番号Ａ
ＴＣＣ３９４１７で寄託されている。

生産培養体の分類学 菌株Ｊ９０７−２１は良く分枝した、非断片栄養菌糸を
形成するが、真の気菌糸を担有する能力を欠除している
。

この菌株は現在まで検査したところでは無胞子性である
。

細胞壁にメン−ジアミノピメリン酸また全細胞加水分解
物ニマテュロース（ｍａｄｌＬｒｏｓ　ｅ　）を含有し
ているので、菌株Ｊ９０７−２１は細胞壁タイプｍＥに
入る。菌株Ｊ９０７−２１は例えば胞子鎖および胞子の
うのようないずれの形態学的に重要な主要部を担有して
いない。それで、現在のところ、菌株Ｊ９０７−２１は
非ストレプトマイセス放線菌菌株として分類することが
できるのみでるる。

形態学 菌株Ｊ９０７−２１は長い、良く分枝した栄養菌糸（巾
０．４μ？７Ｌ）を形成し、この菌糸は棒状もしくは球
状細胞に分断されていない。発育不全の短い気菌糸が若
干の寒天培地で時には形成されるが、真の気菌糸はいず
れの記述培地でも形成されない。胞子形成部分および胞
子は検査された眠りでは観察されていない。

培養特性 表１に示すように、この菌株は天然有機培地では普通に
生育するが、はとんどの合成培地では貧弱な生育を示す
。

菌株Ｊ９０７−２１は真の気菌糸を形成しないが、発育
不全の短い気菌糸が部分的にｌ５ＰＩ６２および４なら
びにベネット寒天で形成される。発育不全の気菌糸はま
たコバラミンもしくはビタミン８８体を補完しＬＩＳＰ
ｙｆ６７培地でも形成される。栄養菌糸の裏面の色はは
とんどの寒天培地で淡黄色乃至種々の色相の褐色である
。深赤色白糸色素がＩＳＰ／１６２培地およびＶＤＹＡ
（Ｖ８ジコースーデキストロースー酵忍　キス寒天）で
生産される。メラノイド色素はＩＰＳ、４６１．６およ
び７培地）で生産されない。ＩＳＰ／Ｉ６２培地でのコ
ロニーは極めてもつ上り、硬くかつ折り重なっている。

生理学的特性 最高の生育は２８℃および３７℃でみとめられる。７℃
および４５℃で生育がみられない。生育は１５℃〜４３
℃の範囲である。メラニンはＬ−３，４−ジヒドロキシ
−フェニルアラニンＣＬ−ＤＯＰＡ）からは形成されな
い。菌株Ｊ９０７−２１は４Ｘ以下で塩化ナトリウムに
耐容するが５Ｘでは耐容しないし、またリゾチームに感
受性を有する。

菌株Ｊ９０７−２１はほとんど全てのペントースおよび
ヘキソースを利用する。生理学的特性および炭水化物利
用性をそれぞれ表２および３に示す。

細胞壁のアミノ酸組成をアプル、ミクロビオル＜Ａｐｐ
ｔ−Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ　、）、１３巻、２３６−２４
３頁、１９６５年にベラカーＣＢｅｃｋｅＴ）等により
、またＪ、バグテリオルＣＪ、　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ　
、）、８９巻、４４４−４５３頁、１９６５年に山口に
より報告された方法に従って検討し、またアミノ酸分析
計（日立０３４２Ｕモデル）＃こよっても測足した。全
細胞加水分解物中の糖成分を、“ケミカル・メンツズ・
アズ・クライテリア・フォア・ザ・セパレーション・オ
ブ・ノカルディアエ・クロム・アザ−・アクチノマイセ
テス、バイオロジイ・オブ・ザ・アクチノマデユラス・
アンド・リレーテッド・オーガニズムズＣＣｈｅｒｎｉ
ｃａｔＭｅｔｈｏｄｓ　Ａｓ　Ｃｒ１ｔｅｒｉａ　Ｆｏ
ｒ　Ｔｈｅ　５ｅｐａｒａｔｉｏｎＯｆ　Ｎｏｃａｒｄ
ｉａｇ　Ｆｒｏｍ　０ｔｈｅｒ　Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅ
ｔｅｓ　。

ＥｉｏＬｏｇｙ　Ｏｆ　Ｔｈｅ　Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｓ
ｔａｓ　Ａｎｄ　ＥａｌａｔｅｄＯｒｇα１８情８）、
１１巻、７Ｂ−９２頁、１９７６年に、レッヘバリア（
Ｌｇｃｈｅｖａｌｉｅｒ）およびレツヘバリアｌこより
説明されている操作に従って同定した。菌株Ｊ９０７−
２１の細胞壁はメン−ジアミノピメリン酸および小量の
グリシンを含有している。全細胞加水分解物はグルコー
ス、マンノース、マデュロースおよびリボースの存在を
示す。

上記の細胞壁組成および全細胞糖成分は菌株Ｊ９０７−
２１が細胞壁タイプｒｌｌＢに属していることを示して
いる。

分類学 菌株Ｊ９０７−２１は中温性、ダラム陽性放ｍ菌でるり
、時には発育不全の短い気菌糸を形成するが、真の気菌
糸、胞子担有体および胞子を形成する能力を欠除してい
る。菌株、７９０７−２１はタイプＩＢ細胞壁を有して
いる。タイプｍＢ細胞壁を有する既知の放線菌には、ア
クチノマデユラ（Ａｃ　ｔ　１ｎｏｒｒｕｘｔｈｂｒａ
　）、ミクロビスポラ＜Ｍｉｃｒｏｂｉｓ−ｐｏｒα）
、ストレブトスボランジウムＣ８ｔｒｅｐｔｏｓｐｏ−
ｒａｎｄｉｗｍ）、スピリロスボラ（Ｓｐｉｒｉｌｌｏ
ｓｐｏｒａ）、プラノモノスポラ（Ｐｌａｎｏｍｏｎｏ
ｓｐｏｒａ）、プラノビスポラ（ＰＬａｎｏｂｉｓｐｏ
ｒａ）およびデルマドフィルス（Ｄｅ　ｒｍａ　−ｔｏ
ｐｈｉｌｕｓ）Ｍが包含される。天然の個性動物病源体
でるるデルマドフィルス應の栄養菌糸は横軸および縦軸
双方の隔壁を示す。従って、菌株Ｊ９０７−２１は明ら
かにデルマドフィルス属と区別される。残りの６種の属
は気菌糸上に胞子小胞（胞子のり）もしくは分節胞子を
担有することを特徴とする。ストレプトマイセス（Ｓｔ
ｒｇｐｔｏｍｙｃｅｓ）の種とは異り、これら６つの縞
の多くの菌株は胞子形成において多少なりともより好み
が委ると報告されている。それ故、菌株Ｊ９０７−２１
は多分上記６種の鵜の一つに属するものとなろう。６槙
の鵬のうち、アクチノマデユラ＾は世界に広く分Ｘ５シ
ている土壌棲息菌であると報告されている。ゴートン（
Ｇｏｒｄｏｎ）はＪ、ゼネ、ミクロビオル。

ＣＪ、　Ｇｅｎ、Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、）、１０９巻、
６９−７８頁、１９７８年でノカルディア訪起アクチノ
マデユラ・マデュラエＣＡｃ　ｔ　ｉ　ｎｏｍａｄｕｒ
ａ　ｒｒｕｘｄｗｒａ　ｅ　）の生理学的１４分類群を
特徴づけしだ。ゴートンの生理学的検討ｌこ基いて、菌
株、７９０７−２１をＡ、マデュラエと比較した（表４
）。

菌株Ｊ９０７−２１は細胞壁タイプ１ｔ（ｏおよび■を
有する他の分類群（類似５４．８％−７６，９％）より
もアクチノマデユラ・マデラエ（類似８５−７’％）に
より密接な関係を有していた。しかしながら、タイプ■
Ｂ細胞壁を有する６種の属間の生理学的関係が確立され
ていない。それはこれらのものが形態学において相互に
明白ζこ相違しているからでるる。それで、菌株Ｊ９０
７−２１は無胞子性の非−ストレプトマイセス（ｎｏｎ
−８ｔｒｅｐｔｏｍｙｃｍｇ）と分類することができる
だけでらる。

表　１ ＣＩＳＰ洗１）　ペレット Ｄ　：なし しよ糖−硝ｆｅ塩寒天　Ｇ　：貧弱 （ツアペック寒天）　Ｒ：ｆｉ白色（９２）″す乃至明
るいオリーブ褐 色（９４） Ａ　：なし Ｄ　：なし グルコース−アスパラギン　Ｇ　：％、％９寒天　Ｒ：
’Ｒ白色（９２）乃至 適度のオリーブ褐色 （９５） Ａ　：なし Ｄニフ！ＴｈＬ グリセリン−アスパラギン　に：貧弱 寒天Ｃｌ５Ｐ痛５）　ノＩ！：明るい灰黄褐色（７９）
乃至暗灰黄褐色（８１） Ａ　二なし Ｄ　ＳｉＭ度の黄褐色（７７） 無機塩−でんぷん寒天　Ｇ：貧弱 ＜ｌ５ＰＡ６４）　Ｒ：灰黄褐色（８０）Ａ：なしもし
くは非常に微 弱（形成しても）、発 育不全、黄白色（９２） Ｄ：暗灰黄褐色（８１） チロシン寒天Ｃｌ５Ｐ　Ｇ：普通 Ａ７）　Ｒ：灰黄色（９ｏ）乃至深黄 褐色（７５） Ａ：なし Ｄ：なし 栄養外大　Ｇ：貧弱 Ｒ：深黄色（８５）乃至暗オ リーブ褐色（９６） Ａ：なし Ｄ：なし 酵母エキス−麦芽エキス　Ｇ：普通 寒天（ＩＳＰＡ６２）　Ｒ：暗灰黄色（９１）乃至暗オ
リーブ褐色（９６） Ａ：なしもしくは非常に微 弱（形成しても丸見 育不全、明るい灰黄褐 色（７９） Ｄ：暗黄褐色（７８） オートミール寒天　Ｇ：普通 （ＩＳＰＡ３　Ｒ：黄白色（９２）乃至灰黄色（９０） Ａ：なし Ｄ＝なし ペネット寒天　Ｇ：普通 ノシ：暗灰黄色（９１）乃至暗 オリーブ褐色（９６） Ａ：なしもしくは非常に微 弱（形成しても）、発 育不全、銭日色（９２） Ｄ：深戴色（８５） ペプトン−酵母エキス　Ｇ：ｆＡ −鉄殊天（ＪＳＰ　１６６　）　ノｔ：明るいオリーブ
褐色（９４）乃至深黄褐色 （７５） Ａ：なし Ｄ＝光輝める橙黄色（６７） ＹＤＹＡ寒天　Ｇ：豊富 しバパヴイザス（Ｐａｐσ、−Ｒ：鮮明な深赤色（１４
）乃ｖｉｇα８）、１９６４）　全黒赤色（２１）Ａ：
なし Ｄ：暗赤色（１６） コーンミール寒天　Ｇ：豊富 しライカー（）ｔｉｋａｒ）、　Ｒ：深赤褐色（７５）
乃至曝ライカー、１９３６）　黄褐色（７８）Ａ：なし Ｄ二強褐色（５５） Ｃ−２寒天　Ｇ：貧弱 （封材、１９７１）　Ｒ：明るい黄褐色（７６）乃至深
黄褐色（７５） Ａ：なしもしくは非常に微 弱（形成しても）、発 育不全、白色（２６３） Ｄ＝なし ばれいしょ−にんじん　Ｇ：貧弱−普通寒天〔クロス　
Ｒ：灰黄色（９ｏ）乃至暗黄（Ｃｒｏｓｓ）等、１９６
３〕褐色（７８）Ａ：なし Ｄ二暗負ピンク色（３０） ＩＳＰ／ｆ６２培地上のコロニー：良好な生育；極めて
も９上り、硬くかつ折り 重っている；直径３− ５　ｔｔｒｔｓｓ赤黒色（２４）表 面発色、気菌糸形成な しもしくは発育不全 ４ｋ　２８℃で３週間培養後ｆｉ奈 骨肴　略号：Ｇ−生育、Ｒ−泉Ｕ＋’＋兄色、Ａ−気一
系、Ｄ−拡散性色素 脣脣骨　色および括弧内の数字は、［グリ−１Ｋ、Ｌお
よびり、Ｂ、シュド：　ｌ５ＣＣ−ＮＢＳ：／Ｊ　ラ−
・＄−ム・チャート、セントロイド・カラーズで例示。

Ｕ、Ｓ。

チット・オプ・コム・サーク５５３．１ノシントン州、
１９７５年、１１月Ｊ　Ｃ１＜ｅｌＬｙ　ＩＣ，Ｌ、　
＆Ｄ、Ｂ、　Ｊｕｄｄ：　ｌ５ＣＣ−ＮＢＳ　ｃｏｌｏ
ｒ−ｎａｍｅｃｈａｒｔｓ　１ｌｌｕｓｔｒａｔｅｄ　
ｗｉｔｈ　ＣｅｎｔｒｏｉｄＣｏｌｏｒｓ、Ｕ、Ｓ、　
Ｄｅｐｔ、　ｏｆ　Ｃｏｑｎｍ、　Ｃ４ｒ、　５５３Ｗ
ａ　ａんｉｎｇｔｏｎ　１）、Ｃ，＋　Ｉ’Ｊｏｖ、　
１９７５　）でのカラー・スタンダードに従う。

表　２ 菌株／１６Ｊ　９０７−２１の生理学的特性試　験　反
　応　方法または培地 生育温度範囲　２８−３７℃で最高　ベネット寒天生育
　１５−４３℃ の生育範囲、７℃お よび４５℃で生付せ ゼラチン液化　液化　１％麦芽エキ ス、０．４３１６酵 母エキス、 ０．４％グルコ ース、２０％ ゼラチン 脱脂乳での反応　凝同せず、完全に　ディフコペプトン
化　（Ｄｉｆｃｏ）脱 脂乳 メラノイド色素　陰性　チロシン寒天、形成　ペプトン
−酵 母エキス−寒 天およびトリ プトンー酵母 エキスブロス チロシナーゼ　陰性　新井の方法” 反応 硝酸塩還元　陰性　０．５Ｘ酵母エ キス、１％グ ルコース、 ０．５　％　Ａ／’１１０．． ０．１％ｃａｃｏ。

ｐｎｔ容性　ｐＨ５，０−１１，０酵母エキス−麦′で
生育、ｐＨ４，５芽エキス寒天 で生育せず ＨａＣ１耐容性　４％以下のＮａＣ１基礎培地：ｌ九で
生育、５　ＸＮａＣｅ　ＩＩＩ母エキス、２リゾチーム
耐容　感受性あり　トリプチケース・性　０．００１％
リゾチ　大豆プロス＋−ムで生育せず　１．５９６殊天 肴　新井、三上二りロモグニシティ・オブ・ストレプト
マイセス（Ｃｈｒｏｍｏｇｅｎｉｃｉｔｙ　ｏｆ　Ｓｔ
ｒｅｐｔｏ−ｍｙｃｇｓ）、アプル、ミクロビオル（Ａ
７’７１ｊ　、　Ｍｉｃ−ｒｏｂｉｏｌ、）２３巻、４
０２−４０６頁、１９７２年表　３ 菌株Ａ６Ｊ９０７−２１の炭水化物利用性グリセリン　
＋ Ｄ（−）−アラビノース　＋ Ｌ（十）−アラビノース　＋ Ｄ−キシロース　＋ Ｄ−リボース　＋ Ｌ−ラムノース　＋ Ｄ−グルコース　＋ Ｄ−ガラクトース　＋ Ｄ−フルクトース　＋ Ｄ−マンノース　＋ Ｌ（−）−ンルボース　− しよ糖　− 乳糖　− セルビオース　士 メリビオース　− トレハロース　士 ラフィノース　− Ｄ（＋）−メレジトース　− 可溶性でんぷん　士 セルロース　− ズルシトール　− インシトール　＋ Ｄ−マンニトール　＋ Ｄ−ソルビトール　− チロシン　＋ ３７℃で３週間培養後観察 基礎培地：プリーダム・ゴツトリープ（Ｐｒｉｄｈａη
Ｌ−ＧｏｔｔＬｉｅｂ’ｓ）無機培地 略号：十：陽性利用 一二陰性利用 表　４ 菌株Ｊ９０７−２１とアクチノマデユラ・マ、ｌ９０７
−２１　マデュラエ（４７）”アデニン　＋　− カゼイン　士　士 ヒボキサンチン　十　士 チロシン　士　士 尿素　−− キサンチン　−− 次のものＧこ対する抵抗性： リゾチーム　−− リフアンピン　＋　ｙ 次のものの加水分解： エスクリン　＋　子 馬尿酸塩　十　− でんぷん　士　士 仄のものからの酸： アラビノース　士　士 セルビオース　士　士 グルコース　士　士 グリセリン　＋　＋ イノシトール　＋　Ｖ 乳糖　Ｖ マンニトール　士　士 マンノース　士　士 メレジトース　−　− メリビオース　−− ラフィノース　−− ラムノース　士　十 ンルビトール　−− トレハロース　士　士 キシロース　＋　十 次のものの利用性： 安息香酸塩　−− くえん酸塩　Ｖ 粘欣酸埴　−− コハク酸塩　十　Ｖ 酒石酸塩　−− 硝酸塩から亜硝酸塩　士 ５０℃で８時間生存　−十 十二陽性、−二陰性、■＝菌株の１５−８４％陽性畳　
コ゛−トン等のデータ リ　検討した菌株数 他の微生物の場合と同じく、凶株Ｊ９０７−２１の特性
は変化させることかでざる。例えば、菌株Ｊ９０７−２
１の人工変異株は様々の既知の変異源例えば紫外線、Ｘ
線、高周波、放射線および化学薬品での処理によって得
ることができる。ＢＢＭ−２４７８抗生物員を生産する
１株Ｊ９０７−２１の全ての天然および人工変異株もま
た本発明の範囲内に包含されることが企図されている。

本発明のＢＢＭ−２４７８抗生物質は、水性栄養培地中
深部好気条件下で菌株Ｊ　９０７−２１　（Ａｉ’ＣＣ
３９４１７）またはそのＢＢＭ−２４’１８生座変異株
を培養することによって生産される。生産菌は同化可能
な炭素源例えば同化可能な炭水化物を含む栄養培地中で
生育する。適当な炭素源の例Ｅこは、グリセリン、アラ
ビノース、キシロース、グルコース、フルクトース、マ
ンノース、可溶性でんぷん、マンニットおよびセルビオ
ースが包含される。栄養培地はまた同化可能な窒素源例
えば魚粉、大豆粉、コーン・スチープ・リカー、ペプト
ン、肉エキス、落花生粉酵母エキスまたはアンモニウム
塩をも含有していなければならない。

無機塩例えば塩化す）　ＩＪウム、塩化カリウム、硫酸
マグネシウム、炭酸カルシウム、りん酸塩等を必要に応
じて加える。所望により微量元素、例えば銅、マンガン
、鉄、亜鉛、１も培地に加えてもよいし、またはこれは
培地の他の成分の不純分として供給してもよい。培養温
度は生産菌株が生育可能である任意の温度例えば１５−
４３℃であってもよいが、醗酵を２５−３５℃殊に２７
−３２℃で実施するのが好ましい。中性もしくは中性近
辺のｐｆｌを培地に使用するのが好ましい。抗生物質の
生産は一般に約６−１０日の間行われる。通常、約６−
７日で最適な生産が達成される。

比較的小量の生産には、振とうフラスコおよび表面培養
を使用し得るが、より大量の製造には無菌タンクでの深
部好気培養が好ましい。タンク醗酵を実施する場会、微
生物からの胞子をプロス培地に接種することにより栄養
培地中ｌこ増殖接種体を生成させるのが望ましく、また
若く、活性のある増殖接種体がイけられたとぎはそれを
無菌的に醗酵タンク培地に移す。タンクおよびびんの通
気ぽ無−の空気を醗酵培地の表面にまたはその中に圧入
することによって提供することができる。１幾械的羽根
車により更にかくはんをしてもよい。必双ならば、消泡
剤例えばラード油を加えてもよい。

醗酵培地中のＢＢＭ−２４７８の生産は姥酵中に供試菌
としてミクロコツカス・ルテウス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃ
ｕｓｌｌＬｔｅｌＬｓ）ＰＣＩ　１００１を用いるペー
パー・ディスク寒天拡散アツセーにより′４易ｌこ追跡
することができる。

ＢＥＭ−２４７８抗生物質の単離 最適プロス力価が得られた後、菌糸および未溶解残渣を
常法例えば沖過または遠心分離により醗酵プロスから分
離する。菌糸ケーキ中の抗生物質は、菌糸ケーキをメタ
ノールで抽出し、不溶物を沖去しそしてメタノール抽出
液を水溶液に濃縮することにより採取することができる
。プロス上澄液中の活性分は九−ブタノールでの抽出お
よびブタノール抽出液の水溶液への濃縮ｌこより採取す
ることができる。

ＢＢＭ−２４７８ＡおよびＢ抗生物質を含む水性メタノ
ールおよびブタノール抽出液を次に通常のクロマトグラ
フィー精ｌＩｌ！操作にかけて精製ＢＢＭ−２４７８Ａ
およびＢを提供する。好ましい精製方法は以下の実施例
２に記載する。

ＢＢＭ−２４７８ＡおよびＢは黄橙色結晶性固体として
−得られる。ＢＥＭ−２４７８の両成分は衆５ｆＣ示す
如く薄層クロマトグラフィー（７°ＬＣ）によりチャー
トリニーシン（ｅｈａｒｔｒｅｕｓｉｎ）と区別丈るこ
とができる。ＢＢＭ−２４７８Ａはジメチルスルホキサ
イド、ジメチルホルムアミド、ジオキサンおよび酸性の
水に易溶で襟り、メタノール、エタノールおよびクロロ
ホルムに倣溶で必り、そしてその他の有磯溶媒ｔこ不溶
でめる。ＥＢＭ−２４７８Ｂの溶解性はＢＢＭ−２４７
８Ａと類似しているが、但しＢＢＭ−２４７８Ｂは酸性
の水に不溶である。ＢＢＭ−２４７８ＡおよびＢは塩化
第二鉄およびアンスロン試薬に陽性反応な呈し、ＢＢＭ
−２４７８Ａはニンヒドリンに陽性反応を示すが、ＢＢ
Ｍ−２４”！８Ｂは同じ試験では陰性である。トレンス
および坂口反応は両成分共に陰性でめる。ＢＢＭ−２４
７８ＡおよびＢの物理化学的性質を表６に要約する。

二つの成分のＵＶスペクトルは同じで、めり、中性およ
び酸性溶液で２３６．２６６．３９８および４２２ｎ常
に、またアルカリ性溶液で２４０．２６８および４３５
ｎｔｎで極大を示す。これらのスペクトルはチャートリ
ューシンと密接に関連している。ＢＢＭ−２４’１８Ａ
およびＢ（ＤＩＲスペクトルをそれぞれ第１図および第
２図に示す。ＢＢＭ−２４７８Ａｆ）フＨ）　ンＣＰＭ
Ｒ）　オヨヒ”Ｃ−ＮＭＲ（ＣＭＲ）スペクトルを第３
図および第４図に示す。

表　５ ＢＢＭ−２４７８Ａ　Ｒｆ　Ｏ，３７０，１６ＢＢＭ−
２４７８Ｂ　Ｏ，７８０，５７チヤートリユーシン　Ｕ
、６５　０．４８表　６ ＥＢＭ−２４７８ＡおよびＢの物理化学的性質ＢＢＭ−
２４７８Ａ　ＢＢＭ−２４７８Ｂ融点　２２５−２２６
℃２７１−２７２℃（分解）３３３（１００）　３３３
（１１８） ３７８（１３２）　３７８（１６９） ３９８（２０５）　３９８（２５５） ４２２（２２５）　４２２（２９０） 分析値　実験値　Ｃ５９，２８に　６３．（１７Ｉｆ　
５．４０　Ｈ４，５１ Ｎ　２．０６ 計算値　Ｃ５ｄｌｓｓＮＯ＋ｓ・１ｉ２０　ＣｔｎＨｔ
ｔ　（Ｊｌ。

ｃ　５ｃ＋、ｔ＋ｔ　Ｃ６３，１６ １１５，５５Ｈ４，４８ Ｎ　２．０９ ＢＢＭ−２４７８抗生物質の構造検討 ＢＢＭ−２４７８ＡのＣＭＲスペクトルから、４つの５
つの−ＣＩｉ＝および１３の＞Ｃ４を含む３３個の炭素
の存在が実証された。ＥＢＭ−２４７８Ａの微量分析デ
ータと組合せたＣＭＲスペクトルデータからこの抗生物
質についてＣ３ｓＨｓｓＮ　Ｏ８ｓの分子式が推論され
る。ＥＢＭ−２４７８Ａを０．４Ｎメタノール性塩化水
素で１時間還流丁に加水分ｍした。沈殿した黄色結晶を
戸果した。Ｆ液を真空で＃縮するとニンヒドリン陽性の
糖部分を含むシロップが得られた。結晶性物質は標品と
の比較スペクトル分析によりチャータリン（ｃｈａｒｔ
ａｒｉｎ）、すなわちチャートリューシンのアグリコン
と同定された。

水性−Ｒｄ液に含まれる糖部分はコ屈の“γツマー混付
物（化合物ｌ）でめ９、このものはアンバーライ）　（
Ａｍｂ　ｇ　−ｒＬｉｔａ）ＣＧ−５０（Ｎｉ１４−形
ンクロマトグラフィーで分離すると＃よとんど等垣のα
およびＩ−メチルグリコシド（ＩＧおよびｌｂ）を生じ
た。化合′勿１ｃＬおよびｌｂの分子式は％ｉ　（Ｍ”
＋１　：ｑｎ／　Ｚ　３５２　）およびＣｈｉＲスペク
トルを基にして共にＣｌ５１１２ＪＯｓと確定された。

ｌｃおよび１６の物理化学的ａ負を表７に安約する。化
合物１ａおよび１６はそれ以上の酸加水分解に抵抗性を
示し、セしてグリコシド結合を開裂するのに十分な厳し
い酸性伶件下で得られた糖部分の多大な分解をき１ヒし
た。化合物ｌαおよびｌｂの混合物（３７０〜）をメタ
ノール中でアセチル化するとモノーＮ−アセチル肪導体
（４６０Ｊｆｆｇ、Ｍ＋１ニーｚ　３９４）が得うわ、
このものを４５Ｎメタノール性塩化水素中で加水分解し
た。生成物を、ＣＩｉＣｌｊＣｌｌＣｌｊＨ−。

ＮｌｌａＨ（６：　１　：　１　）の低相でのシリカゲ
ルカラムでクロマトグラフィーな行うとＮ−アセチルア
ミノｍ＜化合物Ｎ−Ａｃ−…α、１４０ｊ１９およびＮ
−Ａｃ−１６，２２りおよび中性糖（化合物■α、８５
ｍ２およびｍｂ、７９１１１＋９）のα−およびＩ−ア
ノマーが得られた。飽和Ｂａ（ＯＢ）を溶液で処理する
と、Ｎ−Ａｃ−１１６は定量約６こ遊離アミノ体（化合
物ｌｌｌ０Ｌ）ｆこ変換された。ＩＱ、Ｉｌｌαおよび
ｍｂの物理化学的データを表８に示す。■αはそのＮＭ
Ｒスペクトル解析からメチル２−アミノ−２，６−シデ
オキシー３−〇−メチルーα−Ｄ−ガラクトピラノサイ
ドと定められた。

表別こ示す如＜、ｌａのＮＭＲスペクトルは２つのＱ（
＄ｓおよび１つのｃ−ｃｈ、シグナルと共に５つの環プ
ロトンを包含していた。環プロトンの一次解析はカップ
リング定数Ｊ、−１””’λ８１．７．．＝１０．５、
Ｊ、−４＝３．（１、Ｊ＜−ｓ＜１．０およびＪｓ−ｅ
＝６．４１ｈを示し、これらは指定の栴造と相客し得る
。更に、Ｎ、０−ジアセチル１１αの物理化学的で一タ
（融点１６３−１６４℃および〔α〕２３：十１５４゜
（Ｃ＝０．３、ＣｌＩＣｌ５　））は、キャナ、Ｊ、ケ
Ｌ　（Ｃａｎ、　Ｊ。

Ｃ；ｈｅｍ）、５２巻、３２５１−３２５５頁、１９７
４年、にＭ、Ｂ、ペリイ（Ｍ、Ｂ、ツノｅｒｒｙ）によ
りメチル２−アセトアミド−４−０−アセチル−２，６
−シテオキシー３−υ−メチルーα−Ｄ−ガラクトピラ
ノサイドについて報告されたデータど同一である。

ＷｈａのＰＡＩＲスペクトルはカップリング定数Ｊ１−
２　＝４．５、Ｊ＜−ａ＜１．０およびＪ５−ｓ＝　６
．７１１２を示し、一方ｍｂのスペクトルはＪ、、＝７
．８、Ｊ４−ｓ＜　１．０　およびＪｓ−ａ＝　６．５
　ｆｉｚでβつだ。Ｃ３での環プロトンの不存在は両ス
ペクトルで明白であった。スペクトル解析から、■αお
よび１１［６はそれぞれ６−ジオキシ−３−Ｃ−メチル
グロピラノシド（メチルヴイレノザイド）または６−ジ
オキシ−３−Ｃ−メナルガラクトビラノサイドのα−お
よびβ−メチルグリコシドであることがわかった。メチ
ルβ−Ｄ−ヴイレノサイドの標品はｍｂとは’ｌ’ＬＣ
およびＮＭＲスペクトルによって相違することがわかっ
た。メチルヴイレノサイドのＲ１およびＨ，シグナルは
１１１６のシグナルよりも相当をこ低い磁場に観察され
、このことはメチルヴイレノサイドのＣ５−０１１がア
キシアル配位であり、一方ｍｂのそれは配位がエフアト
リアルでるることを示している。■αおよびｍｂの旋元
値ならびに■αについて観察された△ＣＭ〕”ｊ′ｍ（
−１３０９°）ＪＣ基イテＩＩＩＪｃＸ’ＪＬテＤ−配
位が定められた。すなわち、■αおよび１１１ｂはそれ
ぞれメチル６−ジオキシ−３−Ｃ−メチル−α−および
β−Ｄ−ガラクトピラノサイドであることが決定された
。

ノｃＩ ２１固の糖のか吉会は、ｌαおよびｌｂおよびそｇらの
アセテートの質量スペクトルをこより確認され、これら
スペクトルは三糖のハ→■配列に指屋され得るフラグメ
ントイオンを示した。２００Ａｉｌｌｚ　ＰＭＲスペク
トルおよびＮ、υ−トリアセチルーｌαについて実施し
たデカラフリング実験から、糖１１はα−グリコシド結
合によって■のＣ，−Ｏツノに結合していることが明ら
かとなり、かくしてｌαおよび１ｂのｒり造が以下に示
すとおりに決定された。

Ｉａ：Ｒ，＝ＵＣＩｌ、、Ｒ２＝Ｈ ［６：　＝ＩＩ、　＝ＯＣ１ｉ。

種々のｐｌｉで測定したＢＢＭ−２４７８ＡのＵＶスペ
クトルはチャートリューシンのそれに非常に類似してい
る。

このことは、ＢＢＭ−２４’１８Ａの三糖部分がチャー
トリューシンと同じヒドロ蕎シ基でチャータリリンに結
合していることを示唆している。ＢＢＭ−２４７８Ａと
チャートリューシンのクロロホルムのＩＲスペクトルは
カルボニル吸収の同一パターンを示し、これは上述の指
定を支持するものである。Ｎ−アセチル−ＢＢＭ−２４
７８ＡのＮＭＲスペクトルで、　ＤＩのアノ−マープロ
トンはＪ＝８．０Ｈｚのスペースで二乗線に上昇し、こ
れｔ」、本発明者等に抗生物質に対して■のβ−ピラノ
サイド構造の指定を可能とするものである。Ｃ７１Ｉｌ
ｉｎ　（Ｊ＋ｏの分子式が微縫分析に基いてＢＢＭ−２
４７８Ｂに指定された。温オロな酸メタノール分解で、
ＢＢＭ−２４７８１３はチャータリンおよびＢＢＭ−２
４７８Ａから得られたのと同一の中性糖（ｉｌｌαおよ
びＩＩＩ　ｂ　）を生成した。従って、ＢＢＭ−２４７
８Ｂは明らかにアミノ楯部分（１）を有していないＢＢ
Ｍ−２４’１８Ａの類似体である。それで、ＢＢＭ−２
４７８ＡおよびＢの構造は次のとおりに確定された。

表　７ 融点　７９−８２℃　８０−８３℃ 〔α〕ＤＣｃＬＯ，Ｈ２０）　＋２１１’　＋１１６゜
（６３：１０：２７） 分子式　ＣＪｌｚｏＮＯｓ　ＣＪｉ２ｏＮＯｓ１６０　
１６０ 生物学的性質 ＢＢＭ−２４７８の最小阻止濃度（ＭＩＣ）をチャート
リューシンと比較して種々のグラム陽性およびグラム陰
性ａ１菌および真菌ならびにいくつかの嫌気性菌に対し
て系列２倍寒天希釈法によシ測定した。栄梓寒天培地を
グラム陽性およびグラム陰性細菌に対し、またＧＡＭ寒
天培地１ｃ嫌気性菌に対し、ぞしてサブロードＣ８ａｂ
ｏｗｒａｕｄ）寒天培地を真菌に対して使用した。表９
に示す如（、ＢＢＡｆ−２４７８Ａ、Ｂおよびチャート
リューシンはグラム陽性細菌および嫌気性菌に対して同
じような抗菌ス被りトラムを示したが、グラム陰性菌お
よびＡ菌に対しては無効であった。ＢＢＭ−２４７８Ａ
の抗ブドウ球菌活性はＢＢＭ−２４７８Ｂまたはチャー
トリュー７ンよシも２−４倍高いものであった。

ＥＢＭ−２４７８Ａの抗ＩＦド瘍活性ヲリンパ球性白血
症Ｐ３８８、リンパ系白血症Ｌ１２１０および黒皮性色
素細胞ａＢ１６に対してチャートリューシンと比較して
マウスで測定した。腫瘍はそれぞれ接種サイズ１０６．
１０′ｓおよび１０’＋？Ｉ１１胞／マウスでＢＤＦマ
ウスに腹腔内移植した。供試化合物を１０チジメチルス
ルホキサイドを含む０．９％食塩水に溶かし、そして腫
瘍移植後２４時間に段階投与量の抗生物質を腹腔内投与
した。処置を１日１回９日間行った（ｑｄｌ→９）。結
果を表１０，１１および１２に示す。

ＢＢＭ−２４７８７は最小有効量に換算してチャートリ
ューシンよりもはぼ１０−３０倍活性であり、また供試
全腫瘍に対してチャートリューシンよりもすぐれたｉ’
ｌＣ値を達成した。ＩＩＢＭ−２４７８１ｎｄ抗ＩＰＭ
４ｆ、活性を欠いていることがわかった。ＢＢＭ−２４
７８Ａの急性毒性を単独膜腔内投与によシマウス（ｄｄ
　Ｙ系）でめた。ＬＤｓｏは３８Ｉｎ９／ｌｃ９であっ
た。

表　１０ ０．１　１４．５　＠３）　＋１．２　６／６　０／６
０．０３　１０．０　１１１　＋２．３　６／６　０／
６α０１　１０．Ｕ　１１１　＋２．０　６／６　０／
６１　１４．０　（）＋１．３　６／６　０／６０．３
　１０．５　１１７　＋２．０　６／６　０／６０．１
　９．０　１００　＋２．８　６／６　０／６ビヒクル
　−９，０−＋２４　１２／１２　０／１２来　ｑｄ　
１→９ 未来　丸印は有意差のある損腫瘍効果を示す。

表　１１ ０．３　１０．５　Φの　＋１．３　６／６　０／６０
．１　８．０　１００　＋２−６　６／６　０／６０．
０３　ａｏ　１（１０＋２．９　６／６　０／６０、ｔ
）１　ａｏ　１００　＋３．２　６／６　０／６チヤー
トリ　ｉｏ　ｉｉ、ｓ　σ■リ　＋１．３　６／６　０
／６ユーシン　３　９．０　１ｉ３　＋１．４　６／６
　０／６１　９．０　１１３　＋１．９　６／６　０７
６０．３　ａ（１１（１０＋３．２　６／６　０／６０
．１　１　１．００−　＋３．１　６／６　０／６ビヒ
クル　−　ａｏ　−＋２．８　１２／１２０／１２米　
ｑｄ　ｌ→９ ＊来　丸印は有意差のある抗腫瘍効果を示す。

表　１２ ｏ、ａ　２５；５　（５ゆ　＋２．５　６／６０／６０
．１　１８．５■　＋２．５　６／６０／６α０３　１
６．０　１１４　＋２．０　６／６　０／６１　１６．
０　１１４　＋２．３　６／６　１／６０．３　１４．
０　１００　＋Ｌ８　６／６　０／６ビヒクル　−１４
，０−−１４３１０／１００／１０＊　ｑｄ→９ 未来　丸印は有意差のある抗腫瘍効果を示す。

上述の如く、ＢＥＭ−２４７８ＡおよびＢｄ好気性グラ
ム陽性に（Ｉ菌および嫌気性細菌に対して強力な抗菌活
性を有し、それ故かかる細菌によって生じる感染性疾患
液対して油孔動物およびその他の動物の治療処置に有用
である。更に、これらの化合物は抗菌剤のその他の通常
の適用例例えけ矢療および歯科装置の消毒に利用するこ
とができる。

実験用マウス腫瘍系に対して１１ＢＭ−２４７８Ａが示
す顕著な抗腫瘍活性によシ、ＢＢＭ−２４７８Ａはまた
油孔動物の腫瘍の生長を閉止するのに治療上有用である
ことが示される。

従って、本発明によれば、細菌感染症に罹っている動物
宿主に有効４Ｊ°１□菌量のＢＢＭ−２４７８Ａ’ｌ：
たはＢＪｉＭ−２４７８Ｂあるいはその製薬組成物を投
与することからなる該宿主を治療的に処置する方法が提
供される。更に、本発明によれば、悪性腫瘍に罹ってい
る油孔動物宿主に腫瘍抑制量のＢＢＭ−２４７８Ａまた
はその製薬組成物を投与することからなる該宿主を治療
的に処置する方法が提供される。

本発明の他の特徴によれば、有効抗菌量のＢＢＭ−２４
７８Ａま罠はＢＢＡｉ−２４７８Ｂを不活性な製薬上許
容し得る担体または希釈剤と組合さって含有することを
特徴とする製薬組成物が提供される。更に、本発明によ
れば、有効腫瘍抑制量のＢＢＡ（−２４７８Ａを不活性
な製薬上許容し得る担体または希釈剤と組合さって含有
することを特徴とする製薬組成物が提供される。これら
の組成物は非経口投与に適した任意の製薬形態で調製す
ることができる。

非経口投与のだめの本発明の組成物には、無菌の水性ま
たは非水性溶液、懸濁液またはエマルジョンが包含され
る。

これらはまた使用直前に無菌の水、生理食塩水または若
干の他の無菌注射可能な媒質に溶解し得る無菌の固形製
剤の形態で製造することもできる。

ＢＢＭ−２４７８抗生物質の実際の好ましい使用ｉｋは
、特別な成分、特別な処方組成物、適用の１兼式および
特別な部位、処１ハ゛する宿主および疾、倶に従って変
ることが明らがである。薬物の作用全変更する多くの要
因例えば年令、体重、性別、食、ル、投与時間、投与経
路、排ｉｔ）の速度、宿主の状態、薬物の併用、反応感
受性および疾患の程度は当業者によシ考慮される。投与
は最大許容投与量内で連続もしくは間けっして行うこと
ができる。ｊＪｉ足の状態の組合せに対する最適適用程
度は上記のガイドラインに鑑み通常の適用量決定テスト
ヲ用いて当業者が定めることができる。

次の実施例Ｖま説明のためにのみ提示するものであ勺、
本発明の庇囲を限定することを企図するものでｔまない
。温度は他に指示のない限シ全て℃である。アンバーラ
イト（Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ）ＣＧ−５０は、カルボン酸
型弱酸性陽イオン交換樹脂に対する米国、ローム・アン
ド・ハース・カンパニー（ｌンｏｈｍ　＆　Ｉｉαα５
ＣＯ１）の商品名であシ、ダイアイオン（Ｄｉａｉｏｎ
）ＺＩＰ−２０は、非イオン性マクロ網状ポリマー樹脂
に対する日本国、三菱化成工業株式会社の商品名である
。

実施例１ １３ＢＭ−２４７８ＡおよびＢの醗酵 放線菌菌株／ｌ６Ｊ９０７−２１の良く生育した斜面培
地を用いて、３％可溶性でんぷん、１％バクドーリバー
（Ｂａｃｔｏ−１ｉｖｅｒ）Ｃダイア：’　（Ｄｉｆｃ
ｏ）３，０．５％魚粉、０．３％ＮａＣ１１，０１％（
ＮＲ４）　２　ｓ　０４および０．６％（１’　ａ　Ｃ
Ｏｓからなる栄養培地（滅菌前にｐｌｉを７．０に調節
した）に接種した。栄養培地全回転しんとう機（２５０
ｒｐｍ）で７２時間２８℃で培養し、そして生育物５ｄ
を栄養培地と同一の組成を有する醗酵培地１００ｍ１の
入った５００ｄエルレン−ｒイニルフラスコに移した。

醗酵を回転しんとう機で２８℃で７−４．０日間行った
。醗酵ブロス中の抗菌活性を供試菌としてミクロコツカ
ス・ルテウス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓｈｂｔｅｕｓ）
　Ｉノｃｚ　ｉ　ｏ　ｏ　ｉｉ用いるーξミーパーディ
スク天拡敢法によシ訓定した。抗生物質生産性は６−７
日間の醗酵後に１５０ｎｖＣぬへｌの最大力価に達した
。

実施例２ ＢＢＡｉ−２４７８ＡおよびＢの申開、８１′ｉｉ製実
施例１の如くして製造、採集したブロス（２Ｍ。

ｐｌｉ　６．８　）　ｅシャープレス型遠心分離畿〔コ
クサンＣＫｏｌｃｔｂｓαｎ）１６４Ａ）を用いて菌糸
ケーキと上澄面とに分離した。菌糸ケーキ金メタノール
各５１で３回抽出した。

不溶物２ｆ５去した後、メタノール性抽出液を合し、そ
して真空で水溶液に濃縮した。醗酵ブロスの上澄液をｎ
−ブタノール（２０１）で抽出し、そして抽出液を真空
で蒸発して水溶液とした。２種の水性ｄ線部を合し、ダ
イアイオン（Ｄｉａｉｏｎ　ＩＩＦ−２０）のカラム〔
三菱化成、５．５Ｘ６０ｃｍ〕にかけた。この方ラムを
連続して水（５Ａり、５０％水性メタノール（５１）お
よび８０％水性メタノール（６１）で展開した。ＢＢＭ
−２４７８を含むフラクションを供試菌としてＢ、スプ
チリス（Ｂ、ｓｔｔ、ｂｔｉｌｉｓ　）Ｍ−４５ＣＲｅ
ｃ−）を用いるペーパー・ディスク・アッセイでモニタ
ーした。８０％水性メタノールで溶出した活性フラクシ
ョンをプールし、減圧蒸発し、そして凍結乾燥すると粗
製ＢＢＭ−２４７８複合体の黄色固体４５Ｉが得られた
。粗Ｍ＋Ｕ複合体をクロロホルムで予洗したシリカゲル
カラム（＋ｉＪ３．５Ｘ５５ｃｍ）にかけ、そして油性
分をメタノール濃度を段階的に増大する（５−１０％Ｖ
／Ｖ　）クロ自ホルムーメタノール混合Ｉ吻で溶出した
。５％メタノールで溶出される第一の活性フラクション
を集め、真空で濃縮し、そして凍結乾燥するとＢＢＭ−
２４７８Ｂ　（７２ｎＶ）が得られた。

１０％メタノールで浴出される第二活性フラクションを
同様に処理するとＢＢＭ−２４７８Ａの半純粋な固体（
２，５１ｇ）が得られた。後者の固体を中間圧液体クロ
マトグラム（カラム：キリャ−ｖ　（１＜ｉｒｉｙａｍ
ａ）、巾１１Ｘ５００ｕｒａｓポンプ、ＦＭＩラブ・ポ
ンプ、圧力８０−８０−９０ｐを用いてシリカゲルで更
にクロマトグラフィーを行った。クロロホルム−メタノ
ールでの浴出によシ、活４生フラクションが得られ、こ
のものｒ真空で濃縮するとｌ）　ｌ７ＡＩ−２４７８Ａ
の均一な固体（１，３０ｇ）が得られた。この固体をツ
タノールから結晶化させるとＢＢＭ−２４７８Ａ−水和
物の黄橙色棒状晶が得られた。

４、〔図面のｉハ〕単な説明〕 第１図はＢＢＭ−２４７８Ａの赤外吸収スペクトルを示
す。

第２図はＢＢＭ−２４７８Ｂの赤外吸収スペクトルを示
す。

第３図はＢＢＭ−２４７８Ａのプロトン磁気共鳴スペク
トル（８０Ｍｌ）ｚ％ＣＤ５ＯＤ）　ｆ：示す。

第４図に一１ＢＢＡＩ−２４７８Ａ（Ｄ”Ｃ核ｍ気共鳴
スペク）ル（２０ＡｉｌＪｚ、ｄ６−ＩＭＩＳＯ）’ｃ
示す。

特許出願人　ブリストルーマイヤーズ研究所株式会社 ） 代　理　人　弁理士　川　瀬　良　治 ゛、。

代　理　人　弁理士　斉　藤　武　彦、、・パ。

１１．′ 第１頁の続き ｏｌｎｔ、ＣＩ、’　識別記号 Ｃ１２Ｒ１二４６５Ｊ 庁内整理番号 ６７６０−４Ｂ ６７６０−４Ｂ 手続補正■（方式） １１１３第１１５９年１０月３１日 特酌・庁長官　志　賀　学　毀 １、事件の表示 昭和５９年％Ｗ晴〔１第２０６２８７号２、発明の名称 ＨＢＭ−２４７８抗生物１刊４合体 ３、袖」會する渚 事件との匹係　特許出ｌｖ人 名称　ブリストル・ヤイヤーズ研究所株式会社願書に淫
付の手デき明灯；すお工び代理（トケんｌ−する１面６
、補止の内容 手続補正書（方式） ％式％ １、重性の表示 昭和５９年特許＆！［Ｂ９．２０６２８７号２、発明の
名称 Ｂ　Ｂ　Ａｆ　−２４７８抗生物質板合体３、補止をす
る堝 事件との関係　特許出願人 名称　フリストＡ・マイヤーズ研究所株式会社赤坂大成
ピル（電話５８２−７１６１　）氏名　デ理士　（６３
２３）　用瀬良治５、補止の対象 願書に添付の図面 ６、補正の内容 別紙のとおり正式図面を提出する。ただし内容の補止は
ない。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １式 を有する抗生物質ＢＢＭ−２４７８Ａ。 ２式 を有する抗生物質ＢＢＭ−２４７８Ｂ。 ａ　深部好気条件下に同化可能な炭素および窒素源を含
   有する水性栄養培地中で菌株Ｊ９０７−２１ＣＡＴＣＣ
   ３９４１７）またはそのＢＢＭ−２４７８Ａ生産変異株
   を実質的な量のＢＢＭ−２４７８Ａが該培地中に線菌で
   生産されるまで培養し、そして次に培地からＢＥＭ−２
   ４１８Ａを採取することを特徴とする抗生物質ＢＢＭ−
   ２４７８Ａの生産方法。 生　深部好気条件下に同化可能な炭素および窒素源を含
   有する水性栄養培地中で菌株Ｊ９０７−２１（ＡＴＣＣ
   ３９４１７）ｉたはそのＢＢＭ−２４７８Ｂ−生産変異
   株を実質的な量のＢＢＭ−２４７８Ｂが該培地中Ｃ仁線
   菌Ｃ生産されるまで培養し、そして次に培地からＢＢＡ
   ｉ−２４７８Ｂを採取することを特徴とする抗生物質Ｂ
   ＢＡｉ−２４７８Ｅの生産方法。 ＆　ＢＢＭ−２４’１８Ａ抗生物質の抗菌有効量を製薬
   上許容し得る担体または希釈剤と組合さって含有するこ
   とを特徴とする抗菌剤。 ａ　ＢＢＭ−２４７８Ｂ抗生物質の抗菌有効量を製薬上
   許容し得る担体または希釈剤と組合さって含有すること
   を特徴とする抗菌剤。 ’Ｌ　ＢＢＭ−２４７８Ａ抗生物質のｌｆｆ１瘍抑制有
   効量を製薬上許容し得る担体または希釈剤と組合さって
   含有することを特徴とする抗腫瘍剤。