JPS60155971A - 抗原と白血球細胞抗体間の反応程度を測定する方法及びその装置 - Google Patents
抗原と白血球細胞抗体間の反応程度を測定する方法及びその装置Info
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- JPS60155971A JPS60155971A JP59228042A JP22804284A JPS60155971A JP S60155971 A JPS60155971 A JP S60155971A JP 59228042 A JP59228042 A JP 59228042A JP 22804284 A JP22804284 A JP 22804284A JP S60155971 A JPS60155971 A JP S60155971A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
この発明は、抗原／白血球細胞抗体反応の領域に関する
ものであり、更に詳しくは、ヒトの血液に存在する細胞
抗体のレベルの間接的測定、および特殊な個人の血液に
存在する抗原と白血球細胞抗体間の反応程度を測定する
方法及びその装置に関する。
ものであり、更に詳しくは、ヒトの血液に存在する細胞
抗体のレベルの間接的測定、および特殊な個人の血液に
存在する抗原と白血球細胞抗体間の反応程度を測定する
方法及びその装置に関する。
アレルギーは、世界中の数百万の人々の生命に一亥る一
般的で、肉体的衰弱をもたらす現象である。アレルギー
反応を含む基本的な肉体上の反応は広く知られている。
般的で、肉体的衰弱をもたらす現象である。アレルギー
反応を含む基本的な肉体上の反応は広く知られている。
同化アミノ酸、すなわち、抗原（以下、一般に「本物質
」と称する）が体内に入ったとき、身体の免疫防御シス
テムは、それが、有害なものであるか（すなわち、その
物質が「毒素」または「アレルゲン」である）、または
有害なものでないか（すなわち、その物質が「中性」で
ある）かを識別する。その物質が中性のものであると識
別されれば、身体が、異常な仕方で反応することはない
。
」と称する）が体内に入ったとき、身体の免疫防御シス
テムは、それが、有害なものであるか（すなわち、その
物質が「毒素」または「アレルゲン」である）、または
有害なものでないか（すなわち、その物質が「中性」で
ある）かを識別する。その物質が中性のものであると識
別されれば、身体が、異常な仕方で反応することはない
。
しかし、その物質が、アレルゲンであると識別された場
合、身体は、侵入アレルゲンとたたかう特殊細胞抗体を
作り出すことにより、それ自体を保護するように反応す
る。
合、身体は、侵入アレルゲンとたたかう特殊細胞抗体を
作り出すことにより、それ自体を保護するように反応す
る。
この場合に、本発明者が観察したことは、身体の最初の
反応が、白血球（１ｅｕｋｏｃｙｔｅｓ）の内圧を増大
させ、それによって白血球の外部細胞膜壁を破壊しなが
ら、白血球を拡大させることあり、このことが、細胞の
中味が突出することを可能にするということである。こ
れが、アレルゲンに対する白血球の観察された反応であ
る。抗原／抗体反応を試験する主たる既知の方法は、「
細胞毒性試験として周知のものであり、北米耳鼻咽喉科
学の４臨床講議（４０ｔｏｌａｒｙｎｇｏｌｏｇｉｅ
Ｃ１１ｎｉｃａ ｏｆ ＮｏｒｔｈＡｍｅｒｉｃａ）
（Ａ ３ ）ページ５２３−３４（１９７１年１０月）
の食物アレルギーの診断における細胞毒性反応で、Ｗ、
Ｔ、 Ｋ、 Ｂｒｙａｎ等により詳細に記述されてい
る。本質的に、この方法は、顕微鏡スライド上で予め乾
燥された疑わしいアレルゲンの少量の乾燥抽出物と、患
者の血液サンプルを混合することより成る。この混合物
は、約２時間反応され、その後、観察される。疑わしい
アレルゲンと白血球との間の反応（もしあれば）の程度
が直接観察され、そして、少数の観察された細胞の状態
が、アレルギー反応の発生を示しているかどうかを決定
する訓練された技術者により、疑わしいアレルゲンと白
血球との間の反応の程度が主観的に判定される。それ故
に、この試験の精度は、この試験を実施する５技術者個
人の能力および技価に全面的に依存する。それ故に、こ
の試験が主観的なものであるので、その信頼性は、技術
者に与えられたトレーニングの質に依存するであろう。
反応が、白血球（１ｅｕｋｏｃｙｔｅｓ）の内圧を増大
させ、それによって白血球の外部細胞膜壁を破壊しなが
ら、白血球を拡大させることあり、このことが、細胞の
中味が突出することを可能にするということである。こ
れが、アレルゲンに対する白血球の観察された反応であ
る。抗原／抗体反応を試験する主たる既知の方法は、「
細胞毒性試験として周知のものであり、北米耳鼻咽喉科
学の４臨床講議（４０ｔｏｌａｒｙｎｇｏｌｏｇｉｅ
Ｃ１１ｎｉｃａ ｏｆ ＮｏｒｔｈＡｍｅｒｉｃａ）
（Ａ ３ ）ページ５２３−３４（１９７１年１０月）
の食物アレルギーの診断における細胞毒性反応で、Ｗ、
Ｔ、 Ｋ、 Ｂｒｙａｎ等により詳細に記述されてい
る。本質的に、この方法は、顕微鏡スライド上で予め乾
燥された疑わしいアレルゲンの少量の乾燥抽出物と、患
者の血液サンプルを混合することより成る。この混合物
は、約２時間反応され、その後、観察される。疑わしい
アレルゲンと白血球との間の反応（もしあれば）の程度
が直接観察され、そして、少数の観察された細胞の状態
が、アレルギー反応の発生を示しているかどうかを決定
する訓練された技術者により、疑わしいアレルゲンと白
血球との間の反応の程度が主観的に判定される。それ故
に、この試験の精度は、この試験を実施する５技術者個
人の能力および技価に全面的に依存する。それ故に、こ
の試験が主観的なものであるので、その信頼性は、技術
者に与えられたトレーニングの質に依存するであろう。
従って、その結果が、技術者毎に異なるのは無理のない
ところである。記述されているような細胞毒性試験を実
施するため、技術者を適切に訓練するには長い教育期間
を要することが注目される。従って、この試験の主観的
性質は、それが信頼できないもので、不正確性が生ずる
恐れがあるので、極めて望ましくないものである。
ところである。記述されているような細胞毒性試験を実
施するため、技術者を適切に訓練するには長い教育期間
を要することが注目される。従って、この試験の主観的
性質は、それが信頼できないもので、不正確性が生ずる
恐れがあるので、極めて望ましくないものである。
この発明の目的は、疑わしいアレルゲンと、患者の白血
球の間の反応の程度を客観的に測定する方法と装置を提
供することにある。
球の間の反応の程度を客観的に測定する方法と装置を提
供することにある。
更に、この発明の目的は、精度および信頼性が、技術者
による顕微反応の主観的解釈によらない改良された方法
と装置を提供することにある。
による顕微反応の主観的解釈によらない改良された方法
と装置を提供することにある。
この発明の目的はまた、限られた顕微解釈とは対照的に
、数千の白血球の反応を得ることにある０これは、我々
に、より広範な平均値を与えるであろう。また、正常サ
イズ細胞分布から、特殊サイズ分布を得ることも、この
発明の目的である。
、数千の白血球の反応を得ることにある０これは、我々
に、より広範な平均値を与えるであろう。また、正常サ
イズ細胞分布から、特殊サイズ分布を得ることも、この
発明の目的である。
更に、この発明の他の目的は、数千の白血球の計算に基
づく試験結果を得ること、および、抗原の存在下で白血
球の細胞変位のみならず、破壊の直接測定を得ることに
ある。
づく試験結果を得ること、および、抗原の存在下で白血
球の細胞変位のみならず、破壊の直接測定を得ることに
ある。
この発明の前述および他の目的に基づいて、疑わしいア
レルゲンと、少くとも１つの血液サンプルとの間の反応
の程度を客観的に測定するための方法が提供される。こ
の方法は、次の手段を含む；最初の血液サンプルの白血
球数を数えること１第２のｍ液すンプルと疑わしいアレ
ルゲンとを混合すること：その混合物の白血球を数える
こと；および最初の血液サンプルの白血球数と混合物の
それとを比較することからなる。
レルゲンと、少くとも１つの血液サンプルとの間の反応
の程度を客観的に測定するための方法が提供される。こ
の方法は、次の手段を含む；最初の血液サンプルの白血
球数を数えること１第２のｍ液すンプルと疑わしいアレ
ルゲンとを混合すること：その混合物の白血球を数える
こと；および最初の血液サンプルの白血球数と混合物の
それとを比較することからなる。
この発明の第１実施例について説明すると、最初の対照
サンプルの白血球数を数え、混合した疑わしいアレルゲ
ンを有する第２血液サンプルの白血球数を５え、各計算
の結果を含むアウトプットを有するカウンター：カウン
ターが実施した白血球計数のサイズ分布を発生させるた
め、これらのアウトプットを分布するカウンターのアウ
トプットと結合したアナライザー；第１と第２血液サン
プルの計数と、それぞれのサイズ分布を比較し、それに
よって、疑わしいアレルゲンがアレルギー反応を起すか
どうかを測定するアナライザーと結合した比較手段を提
供することができる。
サンプルの白血球数を数え、混合した疑わしいアレルゲ
ンを有する第２血液サンプルの白血球数を５え、各計算
の結果を含むアウトプットを有するカウンター：カウン
ターが実施した白血球計数のサイズ分布を発生させるた
め、これらのアウトプットを分布するカウンターのアウ
トプットと結合したアナライザー；第１と第２血液サン
プルの計数と、それぞれのサイズ分布を比較し、それに
よって、疑わしいアレルゲンがアレルギー反応を起すか
どうかを測定するアナライザーと結合した比較手段を提
供することができる。
第１図に示すように、この発明の装置１０は、各々直列
に接続したカウンター１２、アナライザー１４、コンピ
ュータ・インターフェース１６、コンピュータ１８、な
らびにコンピュータ１８のアウトプットに各々接続した
ディスク２０、プリンター２２およびプリンター２４を
備える。
に接続したカウンター１２、アナライザー１４、コンピ
ュータ・インターフェース１６、コンピュータ１８、な
らびにコンピュータ１８のアウトプットに各々接続した
ディスク２０、プリンター２２およびプリンター２４を
備える。
この発明の装置の操作を開始するために、そのユーザー
は、最初に、試験を受ける患者から血液サンプルを得な
ければならない。望ましくは、ユーザーは、試験中の血
液の凝固を防ぐため抗凝固剤としてクエン醗ナトリウム
を用いて、被験者から蓚酸塩加血液１０ｃｃを採る（す
なわち、血液は、ブルートップＢ−Ｄブランドのバキュ
テーナーに貯蔵される。） 血液サンプルの全容量に均一細胞分布を確保するために
、バキュテーナーから、連続流体循環能力のある装置（
図示せず）へ、既知の方法で血−液を移すことが必要で
ある。
は、最初に、試験を受ける患者から血液サンプルを得な
ければならない。望ましくは、ユーザーは、試験中の血
液の凝固を防ぐため抗凝固剤としてクエン醗ナトリウム
を用いて、被験者から蓚酸塩加血液１０ｃｃを採る（す
なわち、血液は、ブルートップＢ−Ｄブランドのバキュ
テーナーに貯蔵される。） 血液サンプルの全容量に均一細胞分布を確保するために
、バキュテーナーから、連続流体循環能力のある装置（
図示せず）へ、既知の方法で血−液を移すことが必要で
ある。
患者から採取した単一の血液サンプルを数多くのアレル
ギーの一群の試験中に用いることが望ましい。従って、
血液は、試験用に、更に小さな複数のサンプルに分離さ
れる。望ましい分離方法は、適切な懸濁媒質、すなわち
、１０ｃＣまたは２０ｃｃのＩ ５ｏｔｏｎ ｎ （Ｃ
ｏｕｌｔｅｒ Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃｓ Ｌｔｔ製）を
含む容器に１００マイクロリツトルの血液を入れること
である。用いられるｉｇｏｔｏｎＩＩの正確な量は、重
要でないが、同じ量が試験を通して、すなわち、同じ゛
血液の各サンプルに使用されなければならない。このこ
とは、供試および対照サンプルについて得られる測定値
が、この供試および対照サンプルが同じ数の白血球と容
量を有するという事実の故に、關比較できることを保証
するものである。
ギーの一群の試験中に用いることが望ましい。従って、
血液は、試験用に、更に小さな複数のサンプルに分離さ
れる。望ましい分離方法は、適切な懸濁媒質、すなわち
、１０ｃＣまたは２０ｃｃのＩ ５ｏｔｏｎ ｎ （Ｃ
ｏｕｌｔｅｒ Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃｓ Ｌｔｔ製）を
含む容器に１００マイクロリツトルの血液を入れること
である。用いられるｉｇｏｔｏｎＩＩの正確な量は、重
要でないが、同じ量が試験を通して、すなわち、同じ゛
血液の各サンプルに使用されなければならない。このこ
とは、供試および対照サンプルについて得られる測定値
が、この供試および対照サンプルが同じ数の白血球と容
量を有するという事実の故に、關比較できることを保証
するものである。
ごの点におし、１て、各サンプルは％ Ｉ ５ｏｔｏｎ
ＩＩおよび全血の混合物を含み、それは、次に、白血球
、赤血球、および血小板を含む。しかし、研究された反
応にとって重要な唯一の粒子は、白血球であり、カウン
ター１２が、これらの細胞を数えることだけが重要であ
る。望ましい実施例では、カウンター１２は、Ｃｏｕｌ
ｔｅｒ Ｃｏｕｎｔｅｒ Ｍｏｄｅｌ Ｚ−Ｍで、これ
を一定サイズの範囲内の粒子数を数えるように設定して
もよい。かくして、血小板は、白血球よりはるかに小さ
いので、血小板のそれよりも大きなサイズで、白血球の
それよりも小さいサイズ（例えば、４８ミクロン）の最
小粒子サイズを設定することにより、それらの計算を避
けることは簡単である。
ＩＩおよび全血の混合物を含み、それは、次に、白血球
、赤血球、および血小板を含む。しかし、研究された反
応にとって重要な唯一の粒子は、白血球であり、カウン
ター１２が、これらの細胞を数えることだけが重要であ
る。望ましい実施例では、カウンター１２は、Ｃｏｕｌ
ｔｅｒ Ｃｏｕｎｔｅｒ Ｍｏｄｅｌ Ｚ−Ｍで、これ
を一定サイズの範囲内の粒子数を数えるように設定して
もよい。かくして、血小板は、白血球よりはるかに小さ
いので、血小板のそれよりも大きなサイズで、白血球の
それよりも小さいサイズ（例えば、４８ミクロン）の最
小粒子サイズを設定することにより、それらの計算を避
けることは簡単である。
白血球とほぼ比較できるサイズである赤血球のが望まし
い。このことは、赤血球を直ちに分解させる物質（「溶
解」物質）、例えば、ＺａｐｏｇｌｏｂｉｎｆＪ （Ｃ
ｏｕｌｔｅｒ ）を加えることで望ましく達成される。
い。このことは、赤血球を直ちに分解させる物質（「溶
解」物質）、例えば、ＺａｐｏｇｌｏｂｉｎｆＪ （Ｃ
ｏｕｌｔｅｒ ）を加えることで望ましく達成される。
代わりに、赤血球をサンプルから機械的に除去すること
ができる。赤血球を除去し、カウンター１２を予め設定
した最小サイズレベルにセットした後、カウンター１２
は、最初のサンプルの白血球を数え、分類（１ｉＺｅ
）するのに使用することができる。この最初のサンプル
は、その中に疑わしいアレルゲンを導入していないので
、対照サンプルとして使用される。
ができる。赤血球を除去し、カウンター１２を予め設定
した最小サイズレベルにセットした後、カウンター１２
は、最初のサンプルの白血球を数え、分類（１ｉＺｅ
）するのに使用することができる。この最初のサンプル
は、その中に疑わしいアレルゲンを導入していないので
、対照サンプルとして使用される。
残余の（「供試」）血液サンプルも同様に扱われ石。但
し、供試サンプルが、それに疑わしいアレルゲンが加え
られている場合は除く。現在、既知の溶解剤は、白血球
にとって危険であるかもしれない。依って、現在、次の
方法が望ましい。
し、供試サンプルが、それに疑わしいアレルゲンが加え
られている場合は除く。現在、既知の溶解剤は、白血球
にとって危険であるかもしれない。依って、現在、次の
方法が望ましい。
手順Ｉ：患者の血液１００マイクロリツトルを予め定め
られた量の懸濁媒質に入れる。血液の連続混合の故に、
その各１００マイクロリツトルは、手順ＩＩ：予め混合
した食物抽出物１００マイクロリツトルを供試サンプル
に加える。対照サンプルには何も加えない。この２つの
サンプルを６０分間放鳳する。
られた量の懸濁媒質に入れる。血液の連続混合の故に、
その各１００マイクロリツトルは、手順ＩＩ：予め混合
した食物抽出物１００マイクロリツトルを供試サンプル
に加える。対照サンプルには何も加えない。この２つの
サンプルを６０分間放鳳する。
手順ＩＩＩ ＊ Ｚａｐｏｇｌｏｂｉｎ ■を用いて、
赤血球を溶解する。ＬｙＢｅ −Ｓ−［、Ｌｙａｅ −
５−ＩＬＩまたはＡｃ１ｄ Ｌｙｓｅ（すべてＣｏｕｌ
ｔｅｒ製）を用いて、正常な無反応白血球を破壊せずに
、反応白血球を溶解する。対照サンプルで数えられた白
血球の数に応じて、その薬剤５０マイクロリツトルかそ
れ以上を用いることが望ましい。そして、Ｌｙｓｅ −
Ｓ ＩＩとＬｙｓｅ −８−■の１００マイクロリット
ル混合物は、正常白血球レベルにとっては、通常、十分
なものである。
赤血球を溶解する。ＬｙＢｅ −Ｓ−［、Ｌｙａｅ −
５−ＩＬＩまたはＡｃ１ｄ Ｌｙｓｅ（すべてＣｏｕｌ
ｔｅｒ製）を用いて、正常な無反応白血球を破壊せずに
、反応白血球を溶解する。対照サンプルで数えられた白
血球の数に応じて、その薬剤５０マイクロリツトルかそ
れ以上を用いることが望ましい。そして、Ｌｙｓｅ −
Ｓ ＩＩとＬｙｓｅ −８−■の１００マイクロリット
ル混合物は、正常白血球レベルにとっては、通常、十分
なものである。
手順Ｉｖ：溶解後３０秒で、白血球数と細胞分布の記録
をとる。
をとる。
疑わしいアレルゲンの食物抽出物は、乾燥抽出物１００
ｍｇを、Ｉ ５ｏｔｏｎ ■または■（または、その混
合物）１０ｍｔに加えることにより、あるいは、注入可
能、無ｐａｒａｇｅｎ ％減菌水１０ｍｔに加えること
により調製される。この混合物を、２４時間）室温で放
置した後、固形粒子をろ過できるメツシュを通してろ過
される。適切な抽出物は、Ｈｏ１ｌｉｓｔｅｒ３ｊｅｅ
ｌ Ｃｏ、により製造されている。記述したように調製
された疑わしいアレルゲンは、１ｏ日間−４℃で貯蔵で
きる。記述したように調製した採取血液ＩＯ立方センチ
メートルは、約７５の試験に適当であろう。
ｍｇを、Ｉ ５ｏｔｏｎ ■または■（または、その混
合物）１０ｍｔに加えることにより、あるいは、注入可
能、無ｐａｒａｇｅｎ ％減菌水１０ｍｔに加えること
により調製される。この混合物を、２４時間）室温で放
置した後、固形粒子をろ過できるメツシュを通してろ過
される。適切な抽出物は、Ｈｏ１ｌｉｓｔｅｒ３ｊｅｅ
ｌ Ｃｏ、により製造されている。記述したように調製
された疑わしいアレルゲンは、１ｏ日間−４℃で貯蔵で
きる。記述したように調製した採取血液ＩＯ立方センチ
メートルは、約７５の試験に適当であろう。
この時点で、供試サンプルをカウンター１２に入れ、そ
の中の白血球数を数えることができる。
の中の白血球数を数えることができる。
カウンター１２のアウトプットを視覚で読み取り、供試
サンプル中の白血球数が、対照のそれよりも少い（ボジ
テプの反応を示す）かどぅがを測定するか、あるいは、
それを、例えば、ＣｏｕｌｔｅｒＣｈａｎｎｅｌｙＺｅ
ｒのようなアナライザー１４にインプットシ、複数のサ
イズ分布範囲の各々に存在する白血球の細胞母集団分布
を得ることができる。これを、［サイジング（ｓｉＺｉ
ｎｇ ）Ｊと呼ぶ。
サンプル中の白血球数が、対照のそれよりも少い（ボジ
テプの反応を示す）かどぅがを測定するか、あるいは、
それを、例えば、ＣｏｕｌｔｅｒＣｈａｎｎｅｌｙＺｅ
ｒのようなアナライザー１４にインプットシ、複数のサ
イズ分布範囲の各々に存在する白血球の細胞母集団分布
を得ることができる。これを、［サイジング（ｓｉＺｉ
ｎｇ ）Ｊと呼ぶ。
アナライザー１４のアウトプットを、インターフェース
１６を通して、既知の方法でコンピュータ１８にインプ
ットし、データを記憶させ、各供試サンプルの計算結果
を、白血球のサイズ分布のみならず、対照サンプルの計
算と自動的に比較することができる。供試サンプルにお
ける白血球数が、カウンター１２の誤差率以上に、対照
の白血球数より少なければ、陽性反応がある。また、サ
イズ分布結果の比較が、白血球の拡大を示す場合、陽性
反応がある。ひとたびすべての比較が行われれば、コン
ピュータ１８のアウトプットは、例えば、プリンター１
８またはビデオ・ディスプレー２４のような望ましい手
段により表示され、また、将来の引用のためにディスク
２０に記憶できる。
１６を通して、既知の方法でコンピュータ１８にインプ
ットし、データを記憶させ、各供試サンプルの計算結果
を、白血球のサイズ分布のみならず、対照サンプルの計
算と自動的に比較することができる。供試サンプルにお
ける白血球数が、カウンター１２の誤差率以上に、対照
の白血球数より少なければ、陽性反応がある。また、サ
イズ分布結果の比較が、白血球の拡大を示す場合、陽性
反応がある。ひとたびすべての比較が行われれば、コン
ピュータ１８のアウトプットは、例えば、プリンター１
８またはビデオ・ディスプレー２４のような望ましい手
段により表示され、また、将来の引用のためにディスク
２０に記憶できる。
この方法で、患者が、被試験物質のいずれかにアレルギ
ー反応を有するか否かが、客観的に測定し得る。
ー反応を有するか否かが、客観的に測定し得る。
当業者には、極めて明らかなように、この発明は上記実
施例に限定されることはなく、この発明の精神と範囲に
反することなく種々変更態様のものを行うことができる
。例えば、ひとたび白血球サンプルが患者から採取され
れば、結果が完了するまで、人間の介在または行為を必
要としなくなるように、装置全体を自動化せることかで
きる。
施例に限定されることはなく、この発明の精神と範囲に
反することなく種々変更態様のものを行うことができる
。例えば、ひとたび白血球サンプルが患者から採取され
れば、結果が完了するまで、人間の介在または行為を必
要としなくなるように、装置全体を自動化せることかで
きる。
この発明に係る抗原と白血球細胞抗体間の反応程度を測
定する方法を実施することによシ、アレルギー患者は被
試験体にアレルギー反応を示し、それによシ客観的なデ
ータが得られ・各種アレルギー患者の病気治療に大きく
貢献するという効果をもっている。
定する方法を実施することによシ、アレルギー患者は被
試験体にアレルギー反応を示し、それによシ客観的なデ
ータが得られ・各種アレルギー患者の病気治療に大きく
貢献するという効果をもっている。
第１図は、この発明の測定装置の主要構成要素の諸関係
を示すブロック図、第２図は、この発明の測定方法の手
順を示す７０−チャートである。
を示すブロック図、第２図は、この発明の測定方法の手
順を示す７０−チャートである。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 （４）疑わしいアレルゲンと最低１つの血液サンプル間
の反応程度を客観的に測定する方法において； 第１の血液サンプルにおいて白血球数を計算する手段と
； 疑わしいアレルゲンと第２の血液サンプルとを混合し、
混合物を作り、それによって、アレルゲンを前記第２サ
ンプルの白血球と反応させる手段と； 前記混合物における無反応白血球数を計算する手段と；
及び 前記第１血液サンプルで計算された白血球数と、前記混
合物で計算された無反応白血球数とを比較し、それによ
って、疑わしいアレルゲンが、前記第２サンプルの白血
球と反応したかどうかを測定する手段とを備えた抗原と
白血球細胞抗体間の反応程度を測定する方法。 （２）第１血液サンプルの白血球を計算する前に一１第
１血液サンプルに存在する赤血球を溶解する手段を備え
た特許請求の範囲第１項記載の抗原と白血球細胞抗体間
の反応程度を測定する方法。 （３） 混合物の無反応白血球数を計算する前に、混合
物に存在する赤血球を溶解する手段を備えた特許請求の
範囲第１項記載の抗原と白血球細胞抗体間の反応程度を
測定する方法。 （４）混合物の無反応白血球数を計算する前に、混合物
中の反応白血球を溶解する手段を備えた特許請求の範囲
第１項記載の抗原と白血球細胞抗体間の反応程度を測定
する方法。 （５）少くとも１つの第１血液サンプルおよび混合物の
白血球の計算が、複数のサイズの異なる範囲の各々の白
面球数を計算することにより実施される特許請求の範囲
第１項記載の抗原と白血球細胞抗体間の反応程度を測定
する方法。 （６）各サイズ範囲において計算された白血球数を示す
グラフを作る手段を備えた特許請求の範囲第５項記載の
抗原と白血球１ｌｆｌ＃！抗体間の反応程度を測定する
方法。 （７）少く、とも１つの疑わしいアレルゲンと患者血液
の１つのサンプルとの間の反応程度を客観的に測定する
方法において； そのサンプルを、はぼ同等の白血球分布を有する対照サ
ンプルと少くとも１つの供試サンプルに分離する手段と
； 前記対照サンプル中の赤血球を溶解す不手段と；疑わし
い一アレルゲンと供試サンプルとを混合し、混合物を作
り、それによって、前記疑わしいアレルゲンと、前記供
試サンプルに存在する白血球とを反応させる手段と； 前記対照サンプル中の赤血球を溶解させる手段と； 前記対照サンプル中の白血球数を計算する手段と； 疑わしいアレルゲンと供試サンプルとを混合し、混合物
を作り、それによって、前記疑わしいアレルゲンと、前
記供試サンプルに存在する白血球とを反応させる手段と
； 前記混合物中の赤血球を溶解させる手段と； ′前記混
合物中の反応白血球を溶解させる手段と；前記混合物中
の無反応白血球数を計算する手段と； 前記混合物中の無反応白血球数と、前記対照サンプル中
の白血球数とを比較し、それにより、前記疑わしいアレ
ルゲンが、患者の血液と反応を生ずるかどうか測定する
手段とを備えた抗原と白血球細胞抗体間の反応程度を測
定する方法。 （８）対照サンプルおよび混合物中の白血球の計算が、
複数のサイズの異なる範囲の各々において白血球数ｆｉ
ｔ算することにより実施され、また、この方法が、更に
、 対照サンプルおよび混合物の各々における白血球分布の
前記計算のサイズ分布グラフを作る手段と； 対照サンプルの白血球計算の前記サイズ分布グラフと、
混合物の白血球計算の前記サイズ分布グラフとを比較す
る手段とを備えた特許請求の範囲第７項記載の抗原と白
血球細胞抗体間の反応程度を測定する方法。 （９）混合物中で計算された白血球数が、対照ザンプ・
ル中で計算された白血球数よシ、も、使用した機器の誤
差率を超えた量だけ少い場合、疑わしい゛ｒアレルゲン
患者の血液とアレルギー反応を起した。 かどうかの測定が陽性である特許請求の範囲第７項記載
の抗原と白血球細胞抗体間の反応程度を測定する方法。 ｎｏ＋ 疑わしいアレルゲンと少くとも１つの血液サン
プルとの間の反応の程度を客観的に測定する方法におい
て： 第１血液サンプル中の白血球数をサイジングする手段と
： 疑わしいアレルゲンと第２血液サンプルとを混合して、
混合物を作り、それによって、アレルゲンと、前記第２
サンプルの白血球とを反応させる手段と； 前記混合物中の無反応白血球数をサイジングする手段と
：及び 前記第１血液サンプルのサイジングした白血球と、前記
混合物のサイジングした無反応白血球とを比較し、それ
によって、疑わしいアレルゲンが、前記第２サンプル中
の白血球と反応したかどうか測定する手段とを備える抗
原と白血球細胞抗体間の反応程度を測定する方法。 （１１）第１血液サンプル中の白血球のサイジングの前
に、第１血液サンプルに存在する赤血球を溶解する手段
とを備えた特許請求の範囲第１０項記載の抗原と白血球
細胞抗体間の反応程度を測定する方法。 Ｏｚ 混合物中の無反応白血球をサイジングする前に、
混合物に存在する赤血球を溶解する手段を備えた特許請
求の範囲第１０項記載の抗原と白血球細胞抗体間の反応
程度を測定する方法。 （１渇 混合物中の無反応白血球をサイジングする前に
、混合物中の反応白血球を溶解する手段を備えた特許請
求の範囲第１０項記載の抗原と白血球細胞抗体間の反応
程度を測定する方法つ（１ｊ）少くとも１つの第１血液
サンプルおよび混合物の白血球のサイジングが、′＋１
ｉＩ数のサイズの異なる範囲の各々の白血球数を計算す
ることにより実施される特許請求の範囲第１０項記載の
抗原と白血球細胞抗体間の反応程度を測定する方法。 ｒｔＩｉｌ 少くとも１つの疑わしいアレルゲンと患者
の血液サンプル１つとの間の反応程度を客観的に測定す
る方法において； サンプルを、はぼ同等の白血球分布を有する対照サンプ
ルと少くとも１つの供試サンプルに分離させる手段と； 前記対照サンプル中の赤血球を溶解する手段と：前記対
照サンプル中の白血球をサイジングする手段と； 疑わしいアレルゲンと供試サンプルとを混合して、混合
物を作り、それによって、前記アレルゲンと、前記供試
サンプルに存在する白血球とを反応させる手段と； 前記混合物中の赤血球を溶解する手段と；前記混合物中
の反応白血球を溶解する手段と；前記混合物中の白血球
をサイジングする手段と；及び 前記混合物中の白血球のサイズ分布と、前記対照サンプ
ル中の白血球のサイズ分布とを比較し、それによって、
疑わしいアレルゲンが、患者の血液との反応を起したか
どうか測定する手段とを備えた抗原と白血球細胞抗体間
の反応程度を測定する方法。 （ｌｅ 対照および供試サンプル中の白血球のサイジン
グが、複数のサイズの興なる範囲の各々の白血球数を計
算することにより実施され、また、この方法が、更に、 対照および供試サンプルの各々の計数のサイズ分布を生
じさせる手段と；および 対照サンプルの白血球計数の前記サイズ分布と、供試サ
ンプルの白血球計数の前記サイズ分布とを比較する手段
を備えた特許請求の範囲第１５項記載。抗原２白血球細
胞抗体間。あ応ッ度を測定ｔする方法。 ａη′混合物においてサイジングした白血球の数が、対
照サンプルにおいてサイジングした白血球数よりも、使
用した機器の誤差率を超える量だけ少い場合、疑わしい
アレルゲンが、患者の血液とアレ、ルギー反応を生じた
かどうかの反応が陽性で、″ある特許請求の範囲第１５
項記載の抗原と白血球細胞抗体間の反応程度を測定する
方法。 ａ８１ 疑わしいアレルゲンが、供試サンプルにおいて
患者の血液の最初の部分と混合され、患者の血液の次の
部分が対照サンプルとして用いられる、少くとも１つの
疑わしいアレルゲンと患者の血液との間の反応の程度を
客観的に測定する装置において； 供試サンプルと対照サンプルの各々における白血球数を
計算するカウンター（１３（該カウンターＱのは、前記
計算の各々の結果を含むアウトプットを有する）： 前記供試サンプルおよび対照サンプルの各々における白
血球の細胞サイズ分布を得るため前記カウンターａ２の
前記アウトプットに結合したアナライザーＱ４）（該ア
ナライザーＩは、前記カウンターα２の前記アウトプッ
トおよび前記細胞サイズ分布を含むアウトプットを有す
る）；及び 対照サンプル中の白血球数を比較し、前記供試サンプル
と前記対照サンプルの各々中の白血球のそれぞれの細胞
サイズ分布を比較し、前記供試サンプルと前記対照サン
プルの各々中の白血球のそれぞれのサイズ分布を比較し
、それによって、疑わしいアレルゲンが患者の血液と反
応し、従って、供試サンプルに存在する白血球数の減少
が生じたか、または、供試サンプル中の白血球サイズ分
布に変化が生じたかどうか測定するために、前記アナラ
イザーａ４の前記アウトプットに結合した比較手段部を
備えた抗原と白血球細胞抗体間の反応程度を測定する装
置。
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| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US06/547,767 US4614722A (en) | 1983-11-01 | 1983-11-01 | Method and apparatus for measuring the degree of reaction between antigens and leukocyte cellular antibodies |
| US547767 | 1995-10-24 |
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| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60155971A true JPS60155971A (ja) | 1985-08-16 |
| JPH061272B2 JPH061272B2 (ja) | 1994-01-05 |
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| JP59228042A Expired - Lifetime JPH061272B2 (ja) | 1983-11-01 | 1984-10-31 | 抗原と白血球細胞抗体間の反応程度を測定する方法及びその装置 |
Country Status (6)
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|---|---|
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| EP (1) | EP0140379B1 (ja) |
| JP (1) | JPH061272B2 (ja) |
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-
1984
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- 1984-10-31 DE DE8484113101T patent/DE3485653D1/de not_active Expired - Lifetime
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| EP0140379B1 (en) | 1992-04-15 |
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