JPS60164486A - エステル交換用リパ−ゼの固定化法 - Google Patents
エステル交換用リパ−ゼの固定化法Info
- Publication number
- JPS60164486A JPS60164486A JP59017183A JP1718384A JPS60164486A JP S60164486 A JPS60164486 A JP S60164486A JP 59017183 A JP59017183 A JP 59017183A JP 1718384 A JP1718384 A JP 1718384A JP S60164486 A JPS60164486 A JP S60164486A
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- JP
- Japan
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- lipase
- water
- immobilizing
- immobilized
- soluble
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- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、２（１１ｉ又は３価の低級アルコールおよび
水と水溶性固定化担体の組合せによりエステル交換用リ
パーゼを包括固定化する方法に関する。
水と水溶性固定化担体の組合せによりエステル交換用リ
パーゼを包括固定化する方法に関する。
リパーゼは、従来から油脂の加水分解用に広く利用され
ているが最近ではこのリパーゼを利用して、加水分解反
応の逆反応であるエステル化反応さらにはエステル交換
反応が開発されるに及んでいる。またリパーゼの寿命を
長くするため、リパーゼの固定化についても広く研究さ
れている。しかしリパーゼは、水の存在下では油脂を加
水分解するため、少量でも水分が存在すると、油脂の加
水分解によりエステル交換反応は阻害され、交換能の収
率は低下するという欠点を持っていた。
ているが最近ではこのリパーゼを利用して、加水分解反
応の逆反応であるエステル化反応さらにはエステル交換
反応が開発されるに及んでいる。またリパーゼの寿命を
長くするため、リパーゼの固定化についても広く研究さ
れている。しかしリパーゼは、水の存在下では油脂を加
水分解するため、少量でも水分が存在すると、油脂の加
水分解によりエステル交換反応は阻害され、交換能の収
率は低下するという欠点を持っていた。
この欠点を改良するため、水分の代りに２価又は３価の
低級アルコールおよび物理的吸着による１■体を用いる
方法（特開昭５５−８４３９７）が開発され、交換能の
収率が大幅に向上したが、物理的吸着による酵素の固定
化ではエステル交換反応中の酵素のＭ Ａｆｔや酵素自
体の失活が激しいという点においていまだ不満足であっ
た。
低級アルコールおよび物理的吸着による１■体を用いる
方法（特開昭５５−８４３９７）が開発され、交換能の
収率が大幅に向上したが、物理的吸着による酵素の固定
化ではエステル交換反応中の酵素のＭ Ａｆｔや酵素自
体の失活が激しいという点においていまだ不満足であっ
た。
また酵素の固定化技術としては、上記の発明の如く適当
な担体に酵素を化学的又は物理的に結合させる担体結合
法の外に、酵素同士を共有結合させる架橋法及び高分子
母体中又はマイクロカプセル中に酵素を包蔵させる包括
法などが知られている。
な担体に酵素を化学的又は物理的に結合させる担体結合
法の外に、酵素同士を共有結合させる架橋法及び高分子
母体中又はマイクロカプセル中に酵素を包蔵させる包括
法などが知られている。
本発明ｆｒらは、上記の発明が有する欠点を解決すべく
鋭意（η究の結果、２価又は３価のアルコールに特定量
の水分を添加し、水溶性固定化担体を組合せ、該水溶性
固定化担体により包括させることによって、リパーゼを
固定化できることを見出し、本発明を完成するに至った
。
鋭意（η究の結果、２価又は３価のアルコールに特定量
の水分を添加し、水溶性固定化担体を組合せ、該水溶性
固定化担体により包括させることによって、リパーゼを
固定化できることを見出し、本発明を完成するに至った
。
即ち本発明は、２価又は３価の低級アルコール９９〜７
５重量％に水を１〜２５重量％加え混合し、これにリパ
ーゼを溶解して後、水溶性固定化担体で包括固定化する
ことを特徴とするエステル交換用リパーゼの固定化法で
ある。
５重量％に水を１〜２５重量％加え混合し、これにリパ
ーゼを溶解して後、水溶性固定化担体で包括固定化する
ことを特徴とするエステル交換用リパーゼの固定化法で
ある。
本発明による固定化リパーゼを用いてエステル交換反応
を行うと加水分解反応がほとんど起こらず、交換脂が高
収率で得られ、リパーゼの安定性も非常に良いというメ
リットがある。
を行うと加水分解反応がほとんど起こらず、交換脂が高
収率で得られ、リパーゼの安定性も非常に良いというメ
リットがある。
本発明で用いる２価又は３価の低級アルコールとしては
グリセロール、プロピレングリコール、エチレングリコ
ールがある。水及びアルコールの混合比率（重量）は１
〜２５ ： ９９〜７５が望ましい。水の比率が１重量
％未満では水溶性担体のゲル化能が著しく低下し、リパ
ーゼの包括固定化が不能となる。また、２５重量％を超
える含水率では、エステル交換反応よりも加水分解反応
の進行が著しくなり、目的とする固定化酵素にならない
。
グリセロール、プロピレングリコール、エチレングリコ
ールがある。水及びアルコールの混合比率（重量）は１
〜２５ ： ９９〜７５が望ましい。水の比率が１重量
％未満では水溶性担体のゲル化能が著しく低下し、リパ
ーゼの包括固定化が不能となる。また、２５重量％を超
える含水率では、エステル交換反応よりも加水分解反応
の進行が著しくなり、目的とする固定化酵素にならない
。
水溶性固定化担体としては、アルギン酸ソーダ、寒天な
どの天然高分子系やアクリルアミドなどの合成品上ツマ
ー類及びこれに類する高吸水性担体が使用できる。
どの天然高分子系やアクリルアミドなどの合成品上ツマ
ー類及びこれに類する高吸水性担体が使用できる。
リパーゼの熔解ｍは、エステル交換率を高める為には当
然多い方が良いと考えられるが、水とアルコールの混合
物１００重量部に対して１００重量部以上のリパーゼを
使用しても固定化しない。
然多い方が良いと考えられるが、水とアルコールの混合
物１００重量部に対して１００重量部以上のリパーゼを
使用しても固定化しない。
望ましくは５０重量部以下が良い。
本発明により青られたリパーゼをエステル交換に使用す
ると、従来リパーゼを固定化しない場合には原料油１１
１１に対し、混入する水の量が２％以下に制限されてい
たものが、５〜１０％程度の水の量でも反応が進行する
という大きな利点がある。
ると、従来リパーゼを固定化しない場合には原料油１１
１１に対し、混入する水の量が２％以下に制限されてい
たものが、５〜１０％程度の水の量でも反応が進行する
という大きな利点がある。
以下、実施例により本発明を説明する。
実施例１
水５ｇとグリセロール９５ｇを混合し、これに）ラング
Ｊ・型リパーゼ（名糖産業製：リバーゼＯＦを２０ｇ溶
解した。さらにこの溶液にアクリルアミド１０ ｇ 、
！：Ｎ、Ｎ’−メチレンビスアクリルアミド０．３ｇを
熔解した後、脱気処理を行った。このものに重合剤とし
て２％、Ｋ２ Ｓｔ Ｏ３溶液３ｍｌとＤＭＡＰＮ３０
μｌを加え、酵素の固定化を行った。得られた固定化酵
素は、約１１角に切断した後、ヘキサンなどの溶剤で洗
浄し、使用した。ヘキサン洗浄によるリパーゼの固定化
剤からの遊離はほとんど認められなかった。
Ｊ・型リパーゼ（名糖産業製：リバーゼＯＦを２０ｇ溶
解した。さらにこの溶液にアクリルアミド１０ ｇ 、
！：Ｎ、Ｎ’−メチレンビスアクリルアミド０．３ｇを
熔解した後、脱気処理を行った。このものに重合剤とし
て２％、Ｋ２ Ｓｔ Ｏ３溶液３ｍｌとＤＭＡＰＮ３０
μｌを加え、酵素の固定化を行った。得られた固定化酵
素は、約１１角に切断した後、ヘキサンなどの溶剤で洗
浄し、使用した。ヘキサン洗浄によるリパーゼの固定化
剤からの遊離はほとんど認められなかった。
この固定化酵素１０ｇに、オレイン酸トリグリセライド
５．４ｇとパルミチン酸４．６ｇ、ヘキサン２０ｍ１の
混合物を添加し４５℃、３時間攪拌しながら反応を行っ
た。反応物中より脂肪酸を分離したところ４．８ｇの脂
肪酸が得られた。また、トリグリセライド画分は５．０
ｇでその組成は表−１のようであった。
５．４ｇとパルミチン酸４．６ｇ、ヘキサン２０ｍ１の
混合物を添加し４５℃、３時間攪拌しながら反応を行っ
た。反応物中より脂肪酸を分離したところ４．８ｇの脂
肪酸が得られた。また、トリグリセライド画分は５．０
ｇでその組成は表−１のようであった。
表−１
実施例２
水１５ ｇとプロピレングリコール８５ｇを混合し、こ
れに１，３型リパーゼ（田辺製薬製：タリパーゼ）を１
５ｇ熔解した。さらにこれに８ｇのアルギン酸ソーダを
添加し、よく混合した後、脱気した。この溶液を約０．
２ｍｌずつ水滴状に塩化カルシウム（５％）水溶液中に
滴下し包括固定化した。
れに１，３型リパーゼ（田辺製薬製：タリパーゼ）を１
５ｇ熔解した。さらにこれに８ｇのアルギン酸ソーダを
添加し、よく混合した後、脱気した。この溶液を約０．
２ｍｌずつ水滴状に塩化カルシウム（５％）水溶液中に
滴下し包括固定化した。
この固定化酵素Ｌｏｇを用いて実施例１と同様のエステ
ル交換反応を行った結果、脂肪酸５．０ｇとトリグリセ
ライド画分４．８ｇが得られた。トリグリセライド画分
の組成を表−２に示す。
ル交換反応を行った結果、脂肪酸５．０ｇとトリグリセ
ライド画分４．８ｇが得られた。トリグリセライド画分
の組成を表−２に示す。
表−２
手続補正書（方式）
昭和特年夕月２ψ日
特許庁長官 若 杉 和 夫 殿
１、事件の表示
昭和５９年特許願第１７１８３号
２、発明の名称
エステル交換用リパーゼの固定化法
３、？！正をする者
事件との関係 特許出願人
郵便番号 １０４
４、補正命令の日付
明細書の浄書（内容に変更なし）
Claims (1)
- （１）２価又は３価の低級アルコール９９〜７５重量％
に、水を１〜２５重量％加え混合し、これにリパーゼを
熔解して後、水溶性固定化担体で包括固定化することを
特徴とするエステル交換用リパーゼの固定化法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59017183A JPS60164486A (ja) | 1984-02-03 | 1984-02-03 | エステル交換用リパ−ゼの固定化法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59017183A JPS60164486A (ja) | 1984-02-03 | 1984-02-03 | エステル交換用リパ−ゼの固定化法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60164486A true JPS60164486A (ja) | 1985-08-27 |
| JPH0322151B2 JPH0322151B2 (ja) | 1991-03-26 |
Family
ID=11936825
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59017183A Granted JPS60164486A (ja) | 1984-02-03 | 1984-02-03 | エステル交換用リパ−ゼの固定化法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60164486A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH08502412A (ja) * | 1992-10-29 | 1996-03-19 | ロダース・クロックラーン・ビー・ブイ | 酵素的トリグリセリド変換 |
-
1984
- 1984-02-03 JP JP59017183A patent/JPS60164486A/ja active Granted
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH08502412A (ja) * | 1992-10-29 | 1996-03-19 | ロダース・クロックラーン・ビー・ブイ | 酵素的トリグリセリド変換 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0322151B2 (ja) | 1991-03-26 |
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