JPS60186760A - 血液凝固促進剤 - Google Patents
血液凝固促進剤Info
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- JPS60186760A JPS60186760A JP59042660A JP4266084A JPS60186760A JP S60186760 A JPS60186760 A JP S60186760A JP 59042660 A JP59042660 A JP 59042660A JP 4266084 A JP4266084 A JP 4266084A JP S60186760 A JPS60186760 A JP S60186760A
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- Japan
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- blood coagulation
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- serum
- hydrolytic enzyme
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- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/86—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood coagulating time or factors, or their receptors
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（技術分野）
本発明は血液凝固促進剤に関し、詳しくはｘｎ因子活性
化能を有する血液凝固促進剤に関する。
化能を有する血液凝固促進剤に関する。
（従来技術）
近年、検査技術の目覚しい進歩と相俟って、血清生化学
検査、血清免疫学検査、血球検査等の血液検査が広（普
及し、病気予防や早期診断に大きく貢献するに至ってい
る。なかでも血清検査は血液検査の主体をなしており、
この検査において必要な血清は、通常、血液を血液検査
用容器に採取し、これを凝固させた後、遠心分離によっ
て比重の異なる血餅、即ち、フィブリンと血球が混合し
たゲル様塊状物を分離させ、血清部分をピペットで吸い
上げたり、或いはデカンテーションして採取している。
検査、血清免疫学検査、血球検査等の血液検査が広（普
及し、病気予防や早期診断に大きく貢献するに至ってい
る。なかでも血清検査は血液検査の主体をなしており、
この検査において必要な血清は、通常、血液を血液検査
用容器に採取し、これを凝固させた後、遠心分離によっ
て比重の異なる血餅、即ち、フィブリンと血球が混合し
たゲル様塊状物を分離させ、血清部分をピペットで吸い
上げたり、或いはデカンテーションして採取している。
しかしながら、一般に血液は凝固するまでにかなりの時
間を要し、従来、迅速に検査を実施することが困難であ
る。最も血液凝固時間が短いとされているガラス製血液
検査用容器でさえ、血液を注入した後、凝固に至るまで
に４０分乃至６０分を必要とし、合成樹脂製血液検査用
容器に至っては、血液凝固までに４時間以上の放置を必
要とする。
間を要し、従来、迅速に検査を実施することが困難であ
る。最も血液凝固時間が短いとされているガラス製血液
検査用容器でさえ、血液を注入した後、凝固に至るまで
に４０分乃至６０分を必要とし、合成樹脂製血液検査用
容器に至っては、血液凝固までに４時間以上の放置を必
要とする。
このため、血液凝固第ｘｎ因子活性化能を有し、血液凝
固を促進するガラス、カオリン、ベントナイト、シリカ
、エラジン酸等が血清検査における血液凝固促進剤とし
てのほか、血液の凝固機能検査の一つである活性化部分
トロンボプラスチン時間の測定試薬の一成分として実用
に供されているが、その純度や組成等によってその活性
化能が安定しない問題がある。
固を促進するガラス、カオリン、ベントナイト、シリカ
、エラジン酸等が血清検査における血液凝固促進剤とし
てのほか、血液の凝固機能検査の一つである活性化部分
トロンボプラスチン時間の測定試薬の一成分として実用
に供されているが、その純度や組成等によってその活性
化能が安定しない問題がある。
更に、これらの血液凝固促進剤による場合、一般に血液
凝固後に血清から血餅を分離し、血清を採取する際に血
清の分離性がよくなく、血清に血餅成分が混入するのを
避けられない。
凝固後に血清から血餅を分離し、血清を採取する際に血
清の分離性がよくなく、血清に血餅成分が混入するのを
避けられない。
（発明の目的）
本発明は上記した問題を解決するためになされたもので
あって、Ｘ■因子を活性化させ、血液凝固に要する時間
を大幅に短縮させると共に、その血液凝固の促進効果が
極めて安定しており、更に、血清の分離性にもすぐれた
血液凝固促進剤を提供することを目的とするものである
。
あって、Ｘ■因子を活性化させ、血液凝固に要する時間
を大幅に短縮させると共に、その血液凝固の促進効果が
極めて安定しており、更に、血清の分離性にもすぐれた
血液凝固促進剤を提供することを目的とするものである
。
（発明の構成）
本発明の血液凝固促進剤は、シュウ酸の金属塩であって
、当該金属イオンが２価以上であるシュウ酸塩からなる
血液凝固第ｘｎ因子活性化剤と、アミノ酸配列において
Ａｒｇ又はＬｙｓ残基と任意のアミノ酸残基との間の結
合の加水分解酵素とを含有することを特徴とするもので
ある。
、当該金属イオンが２価以上であるシュウ酸塩からなる
血液凝固第ｘｎ因子活性化剤と、アミノ酸配列において
Ａｒｇ又はＬｙｓ残基と任意のアミノ酸残基との間の結
合の加水分解酵素とを含有することを特徴とするもので
ある。
本発明の血液凝固促進剤において、その−成分である上
記シュウ酸塩における２価以上の金属イオンは、アルカ
リ土類金属、遷移金属及び希土類金属から選ばれる少な
くとも１種であるが、好ましくはＣｕ２ ＋、Ｃｏ”、
Ｆｅ２′″、Ｎｉ”、Ｍ ｇ ２ ＋、Ｓｎ２゛及びＣ
ｅ３＋よりなる群から選ばれる少なくとも１種である。
記シュウ酸塩における２価以上の金属イオンは、アルカ
リ土類金属、遷移金属及び希土類金属から選ばれる少な
くとも１種であるが、好ましくはＣｕ２ ＋、Ｃｏ”、
Ｆｅ２′″、Ｎｉ”、Ｍ ｇ ２ ＋、Ｓｎ２゛及びＣ
ｅ３＋よりなる群から選ばれる少なくとも１種である。
本発明者は既に、分子内に相隣るカルボニル基を有し、
且つ、これらが立体的に実質的に同一の平面上にある一
群の環式有機化合物がタンパク質である血液の凝固因子
に対して特異的な作用をもつことを明らかにしたが（特
願昭５８−１１４６５９号）、シュウ酸塩を形成する金
属イオンが２価以上であって、シュウ酸イオンが当該金
属イオンを介してキレート様の塩構造を形成し、炭素−
炭素結合が自由回転を阻害されるとき、シュウ酸塩は分
子内に相隣るカルボニル基を有し、且つ、これらが立体
的に実質的に同一の平面上に位置するような立体構造を
とるために、作用機序は明らかではないが、上記と同様
にして血液凝固因子に対して特異的な効果を有するとみ
られる。
且つ、これらが立体的に実質的に同一の平面上にある一
群の環式有機化合物がタンパク質である血液の凝固因子
に対して特異的な作用をもつことを明らかにしたが（特
願昭５８−１１４６５９号）、シュウ酸塩を形成する金
属イオンが２価以上であって、シュウ酸イオンが当該金
属イオンを介してキレート様の塩構造を形成し、炭素−
炭素結合が自由回転を阻害されるとき、シュウ酸塩は分
子内に相隣るカルボニル基を有し、且つ、これらが立体
的に実質的に同一の平面上に位置するような立体構造を
とるために、作用機序は明らかではないが、上記と同様
にして血液凝固因子に対して特異的な効果を有するとみ
られる。
尚、金属イオンが１価であるとき、シュウ酸塩は炭素−
炭素間結合が自由に回転することができると共に、カル
ボニル基相互の立体的な反発や二つの金属イオンの静電
的な反発のために、相隣るカルボニル基が立体的に実質
的に同一の平面上にないために、血液凝固に対して特異
的な作用を有しないのであろう。因にシュウ酸の１価の
金属塩、例えば、シュウ酸カリウムやシュｆ）＃Ｉナト
リウムは血液中において解離して、重要な血液凝固因子
であり、且つ、Ｋ゛やＮａ”よりもイオン化傾向の小さ
いＣａ”と難溶性のキレート化合物を形成するので、Ｃ
ａ Ｚ＋を失なった血液は凝固機構を阻害され、従って
、上記１価金属塩は従来より血液の抗凝固剤として広く
使用されている。
炭素間結合が自由に回転することができると共に、カル
ボニル基相互の立体的な反発や二つの金属イオンの静電
的な反発のために、相隣るカルボニル基が立体的に実質
的に同一の平面上にないために、血液凝固に対して特異
的な作用を有しないのであろう。因にシュウ酸の１価の
金属塩、例えば、シュウ酸カリウムやシュｆ）＃Ｉナト
リウムは血液中において解離して、重要な血液凝固因子
であり、且つ、Ｋ゛やＮａ”よりもイオン化傾向の小さ
いＣａ”と難溶性のキレート化合物を形成するので、Ｃ
ａ Ｚ＋を失なった血液は凝固機構を阻害され、従って
、上記１価金属塩は従来より血液の抗凝固剤として広く
使用されている。
次に、本発明による血液凝固促進剤の他の成分である加
水分解酵素は、アミノ酸配列においてＡｒｇ又はＬｙｓ
残基と任意のアミノ酸残基との間の結合の加水分解酵素
であり、このような加水分解酵素としては、特にプロテ
アーゼが好ましく用いられる。このプロテアーゼの具体
例として、例えハ、トリプシン、トロンビン、ヘビ毒ト
ロンビン様酵素等のセリンプロテアーゼ、カテプシンＢ
１、フィシン等のチオールプロテアーゼ、キニナーゼＩ
のような金属プロテアーゼ等を挙げることができるが、
セリンプロテアーゼが入手容易でもあるので、使用する
のに好適である。これらプロテアーゼは、単独でも血液
凝固を活性化し得るが、本発明に従って、前記したシュ
ウ酸金属塩からなる血液凝固第ｘｎ因子の活性化剤と併
用することによって、血液凝固の活性化能が飛躍的に向
上するのである。
水分解酵素は、アミノ酸配列においてＡｒｇ又はＬｙｓ
残基と任意のアミノ酸残基との間の結合の加水分解酵素
であり、このような加水分解酵素としては、特にプロテ
アーゼが好ましく用いられる。このプロテアーゼの具体
例として、例えハ、トリプシン、トロンビン、ヘビ毒ト
ロンビン様酵素等のセリンプロテアーゼ、カテプシンＢ
１、フィシン等のチオールプロテアーゼ、キニナーゼＩ
のような金属プロテアーゼ等を挙げることができるが、
セリンプロテアーゼが入手容易でもあるので、使用する
のに好適である。これらプロテアーゼは、単独でも血液
凝固を活性化し得るが、本発明に従って、前記したシュ
ウ酸金属塩からなる血液凝固第ｘｎ因子の活性化剤と併
用することによって、血液凝固の活性化能が飛躍的に向
上するのである。
本発明の血液凝固促進剤の使用においては、例えば、血
液を血液検査用容器に採取し、これを凝固させる際に促
進剤を血液中に存在させる。この場合、ト記血液凝固促
進削は、これをそのままの粉末状で血液中に存在させて
もよいが、好ましくは、血液凝固促進剤を適宜の溶剤に
溶解若しくは分散させて、血液中に添加する。上記血液
検査用容器は特に制限されず、従来より普通に使用され
ているガラス製又は樹脂製の容器が適宜に用いられる。
液を血液検査用容器に採取し、これを凝固させる際に促
進剤を血液中に存在させる。この場合、ト記血液凝固促
進削は、これをそのままの粉末状で血液中に存在させて
もよいが、好ましくは、血液凝固促進剤を適宜の溶剤に
溶解若しくは分散させて、血液中に添加する。上記血液
検査用容器は特に制限されず、従来より普通に使用され
ているガラス製又は樹脂製の容器が適宜に用いられる。
尚、血液が血液検査用容器内において瞬間的に、又は部
分的に高濃度のこれら血液凝固促進剤と接触し、血液中
のタンパク質成分が変質するおそれがあるときは、比表
面積の大きい担体に血液凝固促進剤を担持させ、これを
血液検査用容器中の血液に添加してもよい。上記担体と
しては、血液検査に有害な影響を与えず、大きい比表面
積を有するものであれば、特に制限されることなく、種
々のものを用いることができるが、例えば、不織布、織
布、樹脂ビーズ等を好適に用いることができる。
分的に高濃度のこれら血液凝固促進剤と接触し、血液中
のタンパク質成分が変質するおそれがあるときは、比表
面積の大きい担体に血液凝固促進剤を担持させ、これを
血液検査用容器中の血液に添加してもよい。上記担体と
しては、血液検査に有害な影響を与えず、大きい比表面
積を有するものであれば、特に制限されることなく、種
々のものを用いることができるが、例えば、不織布、織
布、樹脂ビーズ等を好適に用いることができる。
このような担体に血液凝固促進剤を担持させるには、例
えば、その溶液や分散液を塗布し、又はこれに浸漬した
後、乾燥して、担体に付着させればよい。また、アラビ
アゴム等の適宜の助剤と混合して水分散液とし、これを
急速凍結乾燥する等の方法に・より、血液凝固促進剤を
担持した粒子状物を得ることもできる。
えば、その溶液や分散液を塗布し、又はこれに浸漬した
後、乾燥して、担体に付着させればよい。また、アラビ
アゴム等の適宜の助剤と混合して水分散液とし、これを
急速凍結乾燥する等の方法に・より、血液凝固促進剤を
担持した粒子状物を得ることもできる。
血液凝固促進剤の血液中における存在量は、血液１ｍｌ
について少なくともｌＸｌ０−”ｇであり、これよりも
少ないときは、血液凝固の促進効果が乏しい。しかし、
余りに多量に存在させるときは、却って血液検査に種々
の支障を来すおそれがあるので、１０−’ｇ以下とする
のが好ましい。
について少なくともｌＸｌ０−”ｇであり、これよりも
少ないときは、血液凝固の促進効果が乏しい。しかし、
余りに多量に存在させるときは、却って血液検査に種々
の支障を来すおそれがあるので、１０−’ｇ以下とする
のが好ましい。
（発明の効果）
本発明の血液凝固促進剤によれば、これを血液中に存在
させるとき、Ｘ■因子が迅速に活性化され、容器に血液
を採取後の凝固に要する時間が著しく短縮されると共に
、血餅成分の収縮が十分に行なわれる結果、血清と血餅
との分離性にすくれ、分離採取した血清に血餅成分が混
入することがなく、更に、血清の収量も著しく増大する
。従って、本発明の血液凝固促進剤は、臨床検査分野に
おいて広く用いることができるほか、出血側の止血等に
も使用することができる。
させるとき、Ｘ■因子が迅速に活性化され、容器に血液
を採取後の凝固に要する時間が著しく短縮されると共に
、血餅成分の収縮が十分に行なわれる結果、血清と血餅
との分離性にすくれ、分離採取した血清に血餅成分が混
入することがなく、更に、血清の収量も著しく増大する
。従って、本発明の血液凝固促進剤は、臨床検査分野に
おいて広く用いることができるほか、出血側の止血等に
も使用することができる。
以下に実施例を挙げて本発明を説明するが、本発明はこ
れら実施例により何ら限定されるものではない。
れら実施例により何ら限定されるものではない。
（実施例）
実施例１
血液凝固第ｘ■因子活性化剤であるシュウ酸塩としてシ
ュウ酸銅、シュウ酸マグネシウム、シュウ酸コバルト、
シュウ酸鉄、シュウ酸ニッケル、シュウ酸スズ及びシュ
ウ酸第１セリウムを、また、プロテアーゼとしてトリプ
シン、トロンビン及び蛇毒トロンビン様酵素をそれぞれ
用いて、本発明による血液凝固促進剤を調製した。尚、
各血液凝固促進剤における各成分の含有量は、シュウ酸
塩が０．５重量％、プロテアーゼは、トリプシン、トロ
ンビン及び蛇毒トロンビン様酵素がそれぞれについて０
．０５重量％、５００単位／ｍｌ及び０．００５重量％
とじた。
ュウ酸銅、シュウ酸マグネシウム、シュウ酸コバルト、
シュウ酸鉄、シュウ酸ニッケル、シュウ酸スズ及びシュ
ウ酸第１セリウムを、また、プロテアーゼとしてトリプ
シン、トロンビン及び蛇毒トロンビン様酵素をそれぞれ
用いて、本発明による血液凝固促進剤を調製した。尚、
各血液凝固促進剤における各成分の含有量は、シュウ酸
塩が０．５重量％、プロテアーゼは、トリプシン、トロ
ンビン及び蛇毒トロンビン様酵素がそれぞれについて０
．０５重量％、５００単位／ｍｌ及び０．００５重量％
とじた。
市販のポリエチレンブレーンスビソツを用いて、本発明
による血液凝固促進剤３０μｐを大新鮮血３ｍｌに加え
、血液が流動性を失なうまでに要した時間を凝固時間と
して測定し、また、凝固後、３０００回転／分で５分間
遠心分離して、分離状態を観察した。
による血液凝固促進剤３０μｐを大新鮮血３ｍｌに加え
、血液が流動性を失なうまでに要した時間を凝固時間と
して測定し、また、凝固後、３０００回転／分で５分間
遠心分離して、分離状態を観察した。
結果を第１表に示す。
比較例１
比較のために、実施例１で用いたシュウ酸塩及びプロテ
アーゼをそれぞれ単独で用いた場合の凝固時間及び分離
状態を第２表に示す。
アーゼをそれぞれ単独で用いた場合の凝固時間及び分離
状態を第２表に示す。
比較例２
血液凝固促進剤を用いないほかは、実施例１と同様に血
液処理したときの凝固時間及び分離状態を第３表に示す
。
液処理したときの凝固時間及び分離状態を第３表に示す
。
特許出願人 積水化学工業株式会社
代表者 藤 沼 基 利
手続補正書（自発）
昭和６０年６月３日
１、事件の表示
昭和５９年 特許願第４２６６０号
２、発明の名称
血液凝固促進剤
３、補正をする者
事件との関係 特許出願人
郵便番号 ５３０
住 所 大阪市北区西天満二丁目４番４号特許部東京駐
在 Ｔ［！Ｌ東京（０３） ４３４−９５５２４、補正
の対象 明細書の発明の詳細な説明の欄 ζｅ、 ４＝ ５、補正の内容 （１） 明細書第１０頁の「第１表」を別紙の通りに補
正する。
在 Ｔ［！Ｌ東京（０３） ４３４−９５５２４、補正
の対象 明細書の発明の詳細な説明の欄 ζｅ、 ４＝ ５、補正の内容 （１） 明細書第１０頁の「第１表」を別紙の通りに補
正する。
６、添付１１１類の目録
（１） 補正された第１表を記載した書面 １通板 上
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 （１１シュウ酸の金属塩であって、当該金属イオンが２
価以上であるシュウ酸塩からなる血液凝固第Ｘ■因子活
性化剤と、アミノ酸配列においてＡｒｇ又はＬｙｓ残基
と任意のアミノ酸残基との間の結合の加水分解酵素とを
含有することを特徴とする血液凝固促進剤。 （２）金属イオンがＣｕ２＋、Ｃｏ”、Ｆｅ ２ ＋、
Ｎｉ”、Ｍ ｇＺ ＋、Ｓｎ”及びＣｅ’＋よりなる群
から選ばれる少なくとも１種であることを特徴とする特
許請求の範囲第１項記載の血液凝固促進剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59042660A JPS60186760A (ja) | 1984-03-05 | 1984-03-05 | 血液凝固促進剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59042660A JPS60186760A (ja) | 1984-03-05 | 1984-03-05 | 血液凝固促進剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60186760A true JPS60186760A (ja) | 1985-09-24 |
| JPH0515437B2 JPH0515437B2 (ja) | 1993-03-01 |
Family
ID=12642166
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59042660A Granted JPS60186760A (ja) | 1984-03-05 | 1984-03-05 | 血液凝固促進剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60186760A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5041558A (en) * | 1986-04-11 | 1991-08-20 | Sekisui Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Accelerator of the activity of hydrolase |
| WO2000037937A1 (fr) * | 1998-12-21 | 2000-06-29 | Nagase & Co., Ltd. | Methode et dispositif de separation de serum |
| FR2908892A1 (fr) * | 2006-11-21 | 2008-05-23 | Hyphen Biomed Soc Par Actions | Procede pour le dosage chromogenique de l'activite du facteur viii:c et necessaire de dosage chromogenique de l'activite du facteur viii:c,dans les plasmas ou les fractions therapeutiques |
-
1984
- 1984-03-05 JP JP59042660A patent/JPS60186760A/ja active Granted
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5041558A (en) * | 1986-04-11 | 1991-08-20 | Sekisui Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Accelerator of the activity of hydrolase |
| WO2000037937A1 (fr) * | 1998-12-21 | 2000-06-29 | Nagase & Co., Ltd. | Methode et dispositif de separation de serum |
| FR2908892A1 (fr) * | 2006-11-21 | 2008-05-23 | Hyphen Biomed Soc Par Actions | Procede pour le dosage chromogenique de l'activite du facteur viii:c et necessaire de dosage chromogenique de l'activite du facteur viii:c,dans les plasmas ou les fractions therapeutiques |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0515437B2 (ja) | 1993-03-01 |
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