JPS60218396A - 抗生物質ｄｏ−２４８−ａおよびｂならびにその製造法 - Google Patents
抗生物質ｄｏ−２４８−ａおよびｂならびにその製造法Info
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- JPS60218396A JPS60218396A JP59077372A JP7737284A JPS60218396A JP S60218396 A JPS60218396 A JP S60218396A JP 59077372 A JP59077372 A JP 59077372A JP 7737284 A JP7737284 A JP 7737284A JP S60218396 A JPS60218396 A JP S60218396A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は抗生物質Ｄｏ−２４８−ＡおよびＤＯ−２４８
−Ｂならびにその製薬上許容される塩に関するものであ
り、さらにこれら抗生物質のストレプトパーティシリウ
ム（Ｓｔｒｅｐｔｏｖｅｒｔ １ｃｉｌ目Ｌｍ）属菌に
よる製造方法およびこれらの抗生物質またはその製薬上
許容される塩を有効成分として含有する抗抗酸菌剤に関
する。
−Ｂならびにその製薬上許容される塩に関するものであ
り、さらにこれら抗生物質のストレプトパーティシリウ
ム（Ｓｔｒｅｐｔｏｖｅｒｔ １ｃｉｌ目Ｌｍ）属菌に
よる製造方法およびこれらの抗生物質またはその製薬上
許容される塩を有効成分として含有する抗抗酸菌剤に関
する。
背景技術
抗生物質が抗結核剤として臨床に使用され始めて久しく
、特にアミノグリコサイドであるストレプトマイシンや
カナマイシンおよび半合成マクロライドのリファンピシ
ンは他の合成杭結核剤と配合されて広く用いられている
。しかし、一般に抗生物質が長期にわたり投与されると
耐性菌の出現が避は難く、前記の抗結核剤抗生物質につ
いてもその耐性菌の出現が問題化している。本発明にか
かる抗生物質ＤＯ−２４８−ＡおよびＤｏ−２４８−Ｂ
はカナマイシン耐性菌およびリファンピシン耐性菌に抗
菌活性を示し、その上、非定型抗酸菌症の病原菌に対し
てもカナマイシンより優れた抗菌活性を示す。
、特にアミノグリコサイドであるストレプトマイシンや
カナマイシンおよび半合成マクロライドのリファンピシ
ンは他の合成杭結核剤と配合されて広く用いられている
。しかし、一般に抗生物質が長期にわたり投与されると
耐性菌の出現が避は難く、前記の抗結核剤抗生物質につ
いてもその耐性菌の出現が問題化している。本発明にか
かる抗生物質ＤＯ−２４８−ＡおよびＤｏ−２４８−Ｂ
はカナマイシン耐性菌およびリファンピシン耐性菌に抗
菌活性を示し、その上、非定型抗酸菌症の病原菌に対し
てもカナマイシンより優れた抗菌活性を示す。
なお、α−グＴニジノー３，５−ジヒドロキシフェニル
酢酸残基を有する抗生物質としてはフエガノマイシン群
抗生物質が知られている（第１５回ペプチド化学討論会
講演要旨集１２１頁（１９７７年））が、同抗生物質は
へキサまたはへブタペプチド誘導体であり、グリシン誘
導体であるＤＯ−２４８−ＡおよびＤｏ−２４８−８は
フエがノマイシンとは明らかに異なる化学構造を有する
。
酢酸残基を有する抗生物質としてはフエガノマイシン群
抗生物質が知られている（第１５回ペプチド化学討論会
講演要旨集１２１頁（１９７７年））が、同抗生物質は
へキサまたはへブタペプチド誘導体であり、グリシン誘
導体であるＤＯ−２４８−ＡおよびＤｏ−２４８−８は
フエがノマイシンとは明らかに異なる化学構造を有する
。
発明の開示
本発明にかかる抗生物質Ｄｏ−２４８−ＡおよびＤＯ−
２４８−Ｂは下記の理化学的性状を示す。
２４８−Ｂは下記の理化学的性状を示す。
＜ｌＩＤ０−２４８−Ａ
■元素分析
実験値二Ｇ４７．０１．Ｈ６，１５，Ｎ１５．４４計算
値 Ｃｌ４Ｈ，ＯＮ、 ０．−２ＨρとしてＣ４６，６
６、Ｈ，６，７１，Ｎ１５．５８■分子皿（セカンダリ
−イオン質量分析による）（Ｍ＋１）＋ ３２５ ■融点 １９４〜２００℃ ■比旋光度 〔α〕６２・５＋８４．３±１．３（ＣＯ，９６６、水
〕■紫外線吸収スペクトル（第１．図参照）Ｈ，０１％ λｉｔｍｘ ｒｍ （Ｅｌ、 ） ２７６ （３６）。
値 Ｃｌ４Ｈ，ＯＮ、 ０．−２ＨρとしてＣ４６，６
６、Ｈ，６，７１，Ｎ１５．５８■分子皿（セカンダリ
−イオン質量分析による）（Ｍ＋１）＋ ３２５ ■融点 １９４〜２００℃ ■比旋光度 〔α〕６２・５＋８４．３±１．３（ＣＯ，９６６、水
〕■紫外線吸収スペクトル（第１．図参照）Ｈ，０１％ λｉｔｍｘ ｒｍ （Ｅｌ、 ） ２７６ （３６）。
２ ｒ、 ＋ＩＮＨＣｊ’ １ ｄｒｏｐ １％、、（
Ｅｌ、）２８３（３６ン １％ λ点？＋１ＮＮａＯＨ１ｄｒ０ｐｆＩｎ（ＥｌｃｒＲ）
２９７（７４ン■赤外線吸収スペクトル（第２図参照）
ＫＢｒ −８ ν ｃｍ ３３５０．１６６０．１６０５．１４３３゜
１３９０．１３０５，１２８０．１１３０．］０８０，
１０１５゜８２３．８０３゜ ■溶解性 水に可溶、メタノール、エタノール、ジメチルホルムア
ミドに易溶、クロロホルム、酢酸エチル、アセトンにＩ
Ｎ＝ｍ、ベンゼン、エーテル、ヘキサンに不溶。
Ｅｌ、）２８３（３６ン １％ λ点？＋１ＮＮａＯＨ１ｄｒ０ｐｆＩｎ（ＥｌｃｒＲ）
２９７（７４ン■赤外線吸収スペクトル（第２図参照）
ＫＢｒ −８ ν ｃｍ ３３５０．１６６０．１６０５．１４３３゜
１３９０．１３０５，１２８０．１１３０．］０８０，
１０１５゜８２３．８０３゜ ■溶解性 水に可溶、メタノール、エタノール、ジメチルホルムア
ミドに易溶、クロロホルム、酢酸エチル、アセトンにＩ
Ｎ＝ｍ、ベンゼン、エーテル、ヘキサンに不溶。
■呈色反応
坂口反応 陽性
■外観および塩基性、酸性、中性の区別無色粉末、両性
物質 ［相］１Ｈ核磁気共鳴スペクトル（２００ＭＨｚ−Ｄρ
、外部基準ＴＭＳ（ＤＳＳからのδ値０，６５））（第
３１図参照） δ ｍ（Ｊ＝）１２ ） １．２３ （ｄ ６ＨＪ＝７
） 、 ３．３５ （ｍＰ １０Ｊ＝７ ） 、 ３．６１ （Ａｎ ｄ ｔｌ−Ｉ
Ｊ＝１７ ）、３．８３（ＡＢｄＩＨＪ＝１７ン、５
．１０（Ｓ ＩＨ）、６．４８（Ｓ 、２）１）。
物質 ［相］１Ｈ核磁気共鳴スペクトル（２００ＭＨｚ−Ｄρ
、外部基準ＴＭＳ（ＤＳＳからのδ値０，６５））（第
３１図参照） δ ｍ（Ｊ＝）１２ ） １．２３ （ｄ ６ＨＪ＝７
） 、 ３．３５ （ｍＰ １０Ｊ＝７ ） 、 ３．６１ （Ａｎ ｄ ｔｌ−Ｉ
Ｊ＝１７ ）、３．８３（ＡＢｄＩＨＪ＝１７ン、５
．１０（Ｓ ＩＨ）、６．４８（Ｓ 、２）１）。
＠ ” ” 核１１１ ％ 共鳴スヘクト” （５ｏ、
ａ ０９ ”Ｈｚ ＋ ｐ２ｏ １内部基準ジオキサン
（δ値６７．４）（第４、図参照）６ ２０．５（（ｌ
Ｘ２） 、２５．０（ｄ） 、４４．４（す。
ａ ０９ ”Ｈｚ ＋ ｐ２ｏ １内部基準ジオキサン
（δ値６７．４）（第４、図参照）６ ２０．５（（ｌ
Ｘ２） 、２５．０（ｄ） 、４４．４（す。
Ｐｍ
５９．３（ｄ）、１０８．１（ｄＸ２）、１２３．８（
Ｓ）、１３４．８（Ｂ）１ｓ６．４（ｓｘ２）、１５７
．３（ｓ）、１７１．０（Ｓ）、１７７．０ＣＢ）。
Ｓ）、１３４．８（Ｂ）１ｓ６．４（ｓｘ２）、１５７
．３（ｓ）、１７１．０（Ｓ）、１７７．０ＣＢ）。
■アミノ酸分析
グリシンおよびアンモニア検出。
（２１００−２４８−Ｂ
■元素分析
実験値： Ｃ４５，２６，１−１６，１３、Ｎ １６．
１３計算値： Ｃ，、Ｈ，、Ｎ、０．・２Ｈ２０として
Ｃ４５，０８、Ｈ６，４０、Ｎ １６．１８■分子量（
セカンダリ−イオン質量分析にヨル）ＣＭ＋１）＋ ３
１１ ■融点 １８９〜１９３℃ ■紫外線吸収スペクトル（第５７図参照）λＨρ １チ ェエ□（Ｅｌ、、） ２７６（３６）、２８１．５（３
６）２Ｈρ＋ＩＮ）ＩＣ１！１ｄ”Ｐ（Ｅ” ’ ）２
７６（３６）、２８１．５（３６）ｍａｘ ｎｍ １０
に ２Ｈρ＋１ＮＮａα（ｌｄｒｏｐ （Ｅｌチ）２９７（
７２）ＩｎａＸ ｎｍ ｌａａ ■赤外線吸収スペク） ／ｌ／（第６４図参照）Ｂｒ −ｘ、−１３３５０１１６６０１１６０８１１４３５１
１３９３．１３１０，１２５０．１１０５，１０００゜
■呈色反応 坂口反応 陽性 ■外観および塩基性、酸性、中性の区別無色粉末、両性
物質 ■１Ｈ核磁気共鳴スペク） ル（２０ＱＭＨｚ、Ｄ２０
、外部基準”Ｉ” Ｍ Ｓ （Ｄ Ｓ Ｓ カラ＜７）
δ値０．６５ ））（第７図参照） δ、Ｐｍ（Ｊ＝ｎＺ）１．００（ｔ ３ＨＪ＝７．３）
、２．５２（（１２）ＩＪ＝７．３） 、 ３．６１
（ＡＨｄ １８ Ｊ＝１７） 、 ３．８３（ＡＢ
ｄＩＨＪ＝１７） 、５．１０（Ｓ ＩＨ） 、６．５
０（Ｓ ２ｌ−１）■１３Ｃ核磁気共鳴スペクトル（２
５，２ＭＨｚ 、 Ｄ２０゜内部基準ジオキサン（δ値
６７．４ ） ）δＰＰｍ（Ｊ＝Ｈｚ）１３．６（（１
）、１６．９（す、 ４４．５ （す。
１３計算値： Ｃ，、Ｈ，、Ｎ、０．・２Ｈ２０として
Ｃ４５，０８、Ｈ６，４０、Ｎ １６．１８■分子量（
セカンダリ−イオン質量分析にヨル）ＣＭ＋１）＋ ３
１１ ■融点 １８９〜１９３℃ ■紫外線吸収スペクトル（第５７図参照）λＨρ １チ ェエ□（Ｅｌ、、） ２７６（３６）、２８１．５（３
６）２Ｈρ＋ＩＮ）ＩＣ１！１ｄ”Ｐ（Ｅ” ’ ）２
７６（３６）、２８１．５（３６）ｍａｘ ｎｍ １０
に ２Ｈρ＋１ＮＮａα（ｌｄｒｏｐ （Ｅｌチ）２９７（
７２）ＩｎａＸ ｎｍ ｌａａ ■赤外線吸収スペク） ／ｌ／（第６４図参照）Ｂｒ −ｘ、−１３３５０１１６６０１１６０８１１４３５１
１３９３．１３１０，１２５０．１１０５，１０００゜
■呈色反応 坂口反応 陽性 ■外観および塩基性、酸性、中性の区別無色粉末、両性
物質 ■１Ｈ核磁気共鳴スペク） ル（２０ＱＭＨｚ、Ｄ２０
、外部基準”Ｉ” Ｍ Ｓ （Ｄ Ｓ Ｓ カラ＜７）
δ値０．６５ ））（第７図参照） δ、Ｐｍ（Ｊ＝ｎＺ）１．００（ｔ ３ＨＪ＝７．３）
、２．５２（（１２）ＩＪ＝７．３） 、 ３．６１
（ＡＨｄ １８ Ｊ＝１７） 、 ３．８３（ＡＢ
ｄＩＨＪ＝１７） 、５．１０（Ｓ ＩＨ） 、６．５
０（Ｓ ２ｌ−１）■１３Ｃ核磁気共鳴スペクトル（２
５，２ＭＨｚ 、 Ｄ２０゜内部基準ジオキサン（δ値
６７．４ ） ）δＰＰｍ（Ｊ＝Ｈｚ）１３．６（（１
）、１６．９（す、 ４４．５ （す。
５９．４（ｄ）、１０７．４（ｄＸ２）、１２０．１（
Ｓ）、１３４．８（Ｓ）。
Ｓ）、１３４．８（Ｓ）。
１５６．０（ＳＸ２）、１５７．３（Ｓ）、１７１．０
（Ｓ）、１７７．０（す（第８図参照） 上記の理化学的性状よりＤｏ−２４６−ＡおよびＤｏ−
２４８−Ｂの化学構造は下記の一般式Ｉで表わされるも
のであると決定した。
（Ｓ）、１７７．０（す（第８図参照） 上記の理化学的性状よりＤｏ−２４６−ＡおよびＤｏ−
２４８−Ｂの化学構造は下記の一般式Ｉで表わされるも
のであると決定した。
（式中１（はエチルまたはイソプロピルを表わす。）す
なわち、ＤＯ−２４８−Ａは式ｌにおいてＫがイソプロ
ピルであるＮ−（α−グアニジノ−３，５−ジヒドロキ
シ−４−イソプロピルフェニルアセチル）グリシンであ
り、Ｄｏ−２４８−ＢはＫがエチルであるＮ−（σ−グ
アニジ／ ３％５−ジヒドロキシ−４−エチルフェニル
アセチル）グリシンである。したがって、ＤＯ−２４８
−ＡおよびＢは新規抗生物質である。
なわち、ＤＯ−２４８−Ａは式ｌにおいてＫがイソプロ
ピルであるＮ−（α−グアニジノ−３，５−ジヒドロキ
シ−４−イソプロピルフェニルアセチル）グリシンであ
り、Ｄｏ−２４８−ＢはＫがエチルであるＮ−（σ−グ
アニジ／ ３％５−ジヒドロキシ−４−エチルフェニル
アセチル）グリシンである。したがって、ＤＯ−２４８
−ＡおよびＢは新規抗生物質である。
Ｄｏ−２４８−ＡおよびＤＯ−２４８−”は土壌試料よ
り常法に従って分離された放線菌により産生きれる。同
菌株は分類学的検討よりストレプトパーティシリウム・
ロゼオバーティシラータム（シップ）ファリナ アンド
ロッジ（Ｓｔｒｅｐｔｏ−ｉｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕ
ｍ ｒｏｓｅｏｖｅｒｔｉｃｉｌｌａＬｕｍ（Ｓ１１ｉ
ｎｏｂｕ）Ｆａｒｉｎａ ａｎｄ Ｌｏｃｃｉ）と同種
と同定された。
り常法に従って分離された放線菌により産生きれる。同
菌株は分類学的検討よりストレプトパーティシリウム・
ロゼオバーティシラータム（シップ）ファリナ アンド
ロッジ（Ｓｔｒｅｐｔｏ−ｉｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕ
ｍ ｒｏｓｅｏｖｅｒｔｉｃｉｌｌａＬｕｍ（Ｓ１１ｉ
ｎｏｂｕ）Ｆａｒｉｎａ ａｎｄ Ｌｏｃｃｉ）と同種
と同定された。
（３）生理学的諸性状
ゼラチンの液化能 陰性
メラノイド色素の産生能 陽性
チロシナーゼ反応 弱陽性
ミルクの凝固 陰性
ミルクのペプトン化能 弱陽性
澱粉の氷解能 陽性
（４）糖の利用能
廿：良く生育する ＋：かなり生育する。
本菌株は対照区（糖無添加）でかなりの生育が認められ
た。
た。
（５）生育温度
本菌は１４〜４５℃で生育し、生育至適温度は２６〜３
２℃である。
２℃である。
（６）細胞壁の組成
ジアミノピメリン酸はＬＬ−型である。
上記の諸性状より本菌株がストレプトパーティシリウム
（ＳｔｒｅｐＬｏｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ）属に属す
る株であることは明らかである。
（ＳｔｒｅｐＬｏｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ）属に属す
る株であることは明らかである。
本菌株の近縁種を下記の文献より検索した。
（１）ワックスマン著［ジ・アクチノミセテス（Ｔｈｅ
Ａｃｔ ｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ Ｊ第２巻（１９６１年
ン（文献１）（２）シャーリングおよびゴツトリープの
ｌ５Ｐ（Ｉｎ−ｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｔｒｅｐｔ
ｏｍｙｃｅｓ Ｉ’ｒｏｊｅｃり報告（Ｉｎ−ｔｅｒｎ
ａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍ
ａｔｉｃ Ｂａｃｔ −ｅｒｉｏｌｏｇｙ）（文献２）
第１８巻６９〜１８９頁、２７９〜３９２頁（１９６８
年）、第１９巻３９１〜５１２頁（１９６９年）、第２
２巻２６５〜３９４頁（１９７２年ン、 （３）バーシーズ・マニュアル・オフ・デイターミネイ
ティブ・バクテリオロジ−（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ Ｍａｎ
ｕａｌｏｆ ＤｅＬｅｒｍｉｎａｔｉｖｅ Ｂａｃｔｅ
ｒｉｏｌｏｇｙ）第８版（１９７４年）（文献３） （４）その他の放線菌の新種発表文献 その結果、下記の３種の菌株が近縁種と認められた。
Ａｃｔ ｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ Ｊ第２巻（１９６１年
ン（文献１）（２）シャーリングおよびゴツトリープの
ｌ５Ｐ（Ｉｎ−ｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｔｒｅｐｔ
ｏｍｙｃｅｓ Ｉ’ｒｏｊｅｃり報告（Ｉｎ−ｔｅｒｎ
ａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍ
ａｔｉｃ Ｂａｃｔ −ｅｒｉｏｌｏｇｙ）（文献２）
第１８巻６９〜１８９頁、２７９〜３９２頁（１９６８
年）、第１９巻３９１〜５１２頁（１９６９年）、第２
２巻２６５〜３９４頁（１９７２年ン、 （３）バーシーズ・マニュアル・オフ・デイターミネイ
ティブ・バクテリオロジ−（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ Ｍａｎ
ｕａｌｏｆ ＤｅＬｅｒｍｉｎａｔｉｖｅ Ｂａｃｔｅ
ｒｉｏｌｏｇｙ）第８版（１９７４年）（文献３） （４）その他の放線菌の新種発表文献 その結果、下記の３種の菌株が近縁種と認められた。
（１１ストレプトパーテイシリウム ヒロシメンセ（Ｓ
ｔｒｅｐｔｏｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｂｉｒｏｓｈ
ｉｍｅｎｓｅ） ［文献２、第１８巻１３（１〜１３４
頁（１９６８年）、文献３，８３５頁〕 （２）ストレプトパーティシリウム ロゼオバーティシ
ラータム（Ｓｔｒｅｐｔｏｖｅｒｔｉｃｉｌｌ ｉｕｍ
ｒｏｓｅｏｖｅ −ｒｔｉｃｉｌｌａｔｕｍ）［文献
２、第１８巻１６８頁（１９６８年）、文献３．８３４
頁〕 （３）ストレプトパーティシリウム ビパーティシラー
タｘ （Ｓｔｒｅｐｔｏｖｅｒｔｉｃｉｌｌ ｉｕｍ
ｂｉｖｅｒｔｉｃｉｌｌ −ａｔｕｓ） Ｃ文献２、第
１８巻３００頁（１９６８年）、文献３．８３４頁〕 本菌株と上記３菌株を比較実験した結果、これら４株は
いずれも良く近似しているが、中でもストレプトパーテ
ィシリウム ロゼオバーティシラータムに最も似ており
、ミルクの凝固を除く他の性状は極めて良く一致した。
ｔｒｅｐｔｏｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｂｉｒｏｓｈ
ｉｍｅｎｓｅ） ［文献２、第１８巻１３（１〜１３４
頁（１９６８年）、文献３，８３５頁〕 （２）ストレプトパーティシリウム ロゼオバーティシ
ラータム（Ｓｔｒｅｐｔｏｖｅｒｔｉｃｉｌｌ ｉｕｍ
ｒｏｓｅｏｖｅ −ｒｔｉｃｉｌｌａｔｕｍ）［文献
２、第１８巻１６８頁（１９６８年）、文献３．８３４
頁〕 （３）ストレプトパーティシリウム ビパーティシラー
タｘ （Ｓｔｒｅｐｔｏｖｅｒｔｉｃｉｌｌ ｉｕｍ
ｂｉｖｅｒｔｉｃｉｌｌ −ａｔｕｓ） Ｃ文献２、第
１８巻３００頁（１９６８年）、文献３．８３４頁〕 本菌株と上記３菌株を比較実験した結果、これら４株は
いずれも良く近似しているが、中でもストレプトパーテ
ィシリウム ロゼオバーティシラータムに最も似ており
、ミルクの凝固を除く他の性状は極めて良く一致した。
したがって、Ｄｏ −２４８株は同種に属する一菌株で
あると同定し、ストレプトパーティシリウム・ロゼオバ
ーティシラータムＤ Ｏ−２４Ｂ （Ｓｔｒｅｐｔｏｖ
ｅｒｔｉｃｉｌｌ ｉｕｍ ｒｏｓｅ −ｏｖｅｒｔｉ
ｃｉｌｌａｔｕｍ Ｄ Ｏ−２４８）と命名した。本菌
株は茨城県筑波郡谷田部町、１竺技術院微生物工業技術
研究所に微工研菌寄第７５６１号（ＦＥＲＭＰ−７５６
１）として、昭和５９年３月２６日より寄託されている
。
あると同定し、ストレプトパーティシリウム・ロゼオバ
ーティシラータムＤ Ｏ−２４Ｂ （Ｓｔｒｅｐｔｏｖ
ｅｒｔｉｃｉｌｌ ｉｕｍ ｒｏｓｅ −ｏｖｅｒｔｉ
ｃｉｌｌａｔｕｍ Ｄ Ｏ−２４８）と命名した。本菌
株は茨城県筑波郡谷田部町、１竺技術院微生物工業技術
研究所に微工研菌寄第７５６１号（ＦＥＲＭＰ−７５６
１）として、昭和５９年３月２６日より寄託されている
。
本発明においては上記のＤＯ−２４８株は勿論のこと、
ストレプトパーティシリウム属に属する抗生物質ＤＯ−
２４８−Ａおよび／またはＤＯ−２４８−Ｂ産生菌を用
いてＤｏ−２４８−Ａおよび／またはＤＯ−２４８−Ｂ
を産生ずる方法をすべて包含する。
ストレプトパーティシリウム属に属する抗生物質ＤＯ−
２４８−Ａおよび／またはＤＯ−２４８−Ｂ産生菌を用
いてＤｏ−２４８−Ａおよび／またはＤＯ−２４８−Ｂ
を産生ずる方法をすべて包含する。
以下にＤｏ−２４８−Ａおよび／またはＤｏ −２４８
−Ｂ産生菌を用いてＤｏ−２４８−Ａおよび／またはＤ
Ｏ−２４８−Ｂを製造する方法を示す。製造方法は一般
の抗生物質の醗酵製造法に準じて行うとよい。すなわち
、ＤＯ−２４８−Ａおよび／またはＢ産生菌を各種栄養
物質を含む培地で好気的条件下で培養する。培養条件お
よび培地の組成は抗生物質の産生に一般に用いられるも
のと同様でよい。培地は原則として、炭素源、窒素源、
無機塩を含む。さらに必要に応じてビタミン類、先駆物
質などを加えてもよい。炭素源としては、たとえば、グ
ルコース、スクロース、でんぷん、デキストリン、グリ
セリン、糖蜜、有機酸などが単独または混合物として用
いられる。窒素源としては、たとえば、大豆粉、コーン
・スチープ・リカー、肉エキス、酵母エキス、綿実粉、
ペプトン、小麦胚芽、硫酸アンモニウム、硝酸アンモニ
ウムなどが単独または混合して用いられる。無機塩とし
ては、たとえば、炭酸カルシウム、塩化ナトリウム、塩
化カリウム、硫酸マグネシウム、塩化コバルト、各種リ
ン酸塩などがあげられ、必要に応じて培地に添加する。
−Ｂ産生菌を用いてＤｏ−２４８−Ａおよび／またはＤ
Ｏ−２４８−Ｂを製造する方法を示す。製造方法は一般
の抗生物質の醗酵製造法に準じて行うとよい。すなわち
、ＤＯ−２４８−Ａおよび／またはＢ産生菌を各種栄養
物質を含む培地で好気的条件下で培養する。培養条件お
よび培地の組成は抗生物質の産生に一般に用いられるも
のと同様でよい。培地は原則として、炭素源、窒素源、
無機塩を含む。さらに必要に応じてビタミン類、先駆物
質などを加えてもよい。炭素源としては、たとえば、グ
ルコース、スクロース、でんぷん、デキストリン、グリ
セリン、糖蜜、有機酸などが単独または混合物として用
いられる。窒素源としては、たとえば、大豆粉、コーン
・スチープ・リカー、肉エキス、酵母エキス、綿実粉、
ペプトン、小麦胚芽、硫酸アンモニウム、硝酸アンモニ
ウムなどが単独または混合して用いられる。無機塩とし
ては、たとえば、炭酸カルシウム、塩化ナトリウム、塩
化カリウム、硫酸マグネシウム、塩化コバルト、各種リ
ン酸塩などがあげられ、必要に応じて培地に添加する。
培養方法も一般に抗生物質の製造に用いられる方法に準
じて行なえばよい。本発明方法においては特に液体培養
が好ましく、大量生産を行なう場合には、深部通気培養
がよい。培地の声は約５，５〜８．５カ好ましく、培養
温度は約２０〜４０℃、特に２５〜３２℃が好ましい。
じて行なえばよい。本発明方法においては特に液体培養
が好ましく、大量生産を行なう場合には、深部通気培養
がよい。培地の声は約５，５〜８．５カ好ましく、培養
温度は約２０〜４０℃、特に２５〜３２℃が好ましい。
培養時間は発酵の規模に太き（左右されるが、大量生産
を行なう場合は約２０〜８０時間が奸才しい。必要に応
じて培養前または培養中に植物油などの消泡剤を適宜添
加してもよい。
を行なう場合は約２０〜８０時間が奸才しい。必要に応
じて培養前または培養中に植物油などの消泡剤を適宜添
加してもよい。
培養終了後、培養物からＤｏ−２４８−ＡおよびＤＯ−
２４８−８を採取する方法は、通常発酵生産物を培養物
から分離採取する方法に準する。
２４８−８を採取する方法は、通常発酵生産物を培養物
から分離採取する方法に準する。
例えば、濾過、遠心分離、各種活性吸着剤による吸脱着
やクロマトグラフィー、各種有機溶媒による抽出などを
適宜組合せて行なうとよい。
やクロマトグラフィー、各種有機溶媒による抽出などを
適宜組合せて行なうとよい。
（以下余白）
車
本発明が提供するＤＯ−２４８−ＡおよびＢは結核菌を
含む抗酸菌に対して活性を有している。
含む抗酸菌に対して活性を有している。
以下にＤｏ−２４８−Ａの抗菌力試験の結果を示す。
試験方法
表１に示す抗酸菌０．０１”ｆをデュボス・ツウイー／
−７／にブミン液体培地（Ｄｕｂｏｓ １’ｗｅｅｎ
ａｌｂｕｍｉｎ璽１ｑｕｉｄ ｍｅｄｉｕｍ）２． Ｑ
、ｚに接種し、倍数希釈法によりＤＯ−２４８−Ａ（
検体Ａ〕、カナマイシン（ＫＭ）およびリファンピシン
（ＲＦＰ）の最少発育阻止濃度（ＭＩＣ，μ（１／ｄ
）を測定した。培養温度はＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ
ｍａｒｉｎｕｍ が２８℃であり、それ以外の菌はす
べて３７℃である。判定は一般に２週間後であるが、Ｍ
、 ｆｕｒｔｕｉｔｕｍおよびＭ、ｃｈｅｌｏｎｅｉで
は１週間後、Ｍ、ｘｅｎｏｐｉは５週間後に行なった。
−７／にブミン液体培地（Ｄｕｂｏｓ １’ｗｅｅｎ
ａｌｂｕｍｉｎ璽１ｑｕｉｄ ｍｅｄｉｕｍ）２． Ｑ
、ｚに接種し、倍数希釈法によりＤＯ−２４８−Ａ（
検体Ａ〕、カナマイシン（ＫＭ）およびリファンピシン
（ＲＦＰ）の最少発育阻止濃度（ＭＩＣ，μ（１／ｄ
）を測定した。培養温度はＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ
ｍａｒｉｎｕｍ が２８℃であり、それ以外の菌はす
べて３７℃である。判定は一般に２週間後であるが、Ｍ
、 ｆｕｒｔｕｉｔｕｍおよびＭ、ｃｈｅｌｏｎｅｉで
は１週間後、Ｍ、ｘｅｎｏｐｉは５週間後に行なった。
ｃ以下余白）
表２
注１）リファンピシン耐性株
２）カナマイシン、リファンピシン耐性株表２に示され
るように本発明にかかる抗生物質ＤＯ−２４８−Ａはカ
ナマイシン耐性およびリファンピシン耐性の抗酸菌に対
して活性を示し、また難治性の非定扇抗酸菌症の原因菌
であｇＪ、ａｖｉｕｎ−ｉｎｔｒａｃｅ（Ｉｕｌａｒｅ
に対してもカナマイシンやりファンピシン以上の効力
を示す。なお、ＤＯ−２４８−ＢもＤＯ−２４８−Ａと
同様の効力を示す。したがって、これら抗生物質および
その製薬上許容される塩は医療用および動物用の抗抗酸
菌剤の活性成分として使用しつる。
るように本発明にかかる抗生物質ＤＯ−２４８−Ａはカ
ナマイシン耐性およびリファンピシン耐性の抗酸菌に対
して活性を示し、また難治性の非定扇抗酸菌症の原因菌
であｇＪ、ａｖｉｕｎ−ｉｎｔｒａｃｅ（Ｉｕｌａｒｅ
に対してもカナマイシンやりファンピシン以上の効力
を示す。なお、ＤＯ−２４８−ＢもＤＯ−２４８−Ａと
同様の効力を示す。したがって、これら抗生物質および
その製薬上許容される塩は医療用および動物用の抗抗酸
菌剤の活性成分として使用しつる。
Ｄｏ−２４８−Ａ、Ｄｏ ２４６ Ｂまたはその製薬上
許容される塩は経口または非経口により人または動物に
投与される。一般ｔこ製薬上許容される賦形剤、安定化
剤、保存剤、湿潤剤、界面活性剤、矯味剤、芳香剤など
を用いて、錠剤、カプセル剤、粉剤、液剤などとして経
口投与しうるし、注射剤、坐剤などとして非経口で投与
することもできる。投与量は投与対象の罹患程度、性別
、年令、体重等で大きく左右されるが、通常成人−日量
が約０．２〜約８ｇである。本抗抗酸菌剤は一般の抗結
核剤と同様に他の抗抗酸菌剤と併用してもよい。
許容される塩は経口または非経口により人または動物に
投与される。一般ｔこ製薬上許容される賦形剤、安定化
剤、保存剤、湿潤剤、界面活性剤、矯味剤、芳香剤など
を用いて、錠剤、カプセル剤、粉剤、液剤などとして経
口投与しうるし、注射剤、坐剤などとして非経口で投与
することもできる。投与量は投与対象の罹患程度、性別
、年令、体重等で大きく左右されるが、通常成人−日量
が約０．２〜約８ｇである。本抗抗酸菌剤は一般の抗結
核剤と同様に他の抗抗酸菌剤と併用してもよい。
次に本発明の目的物質Ｄｏ−２４８−ＡおよびＤＯ−２
４８−Ｈの製造例を示すが、下記実施例はなんら本発明
を限定するものではない。
４８−Ｈの製造例を示すが、下記実施例はなんら本発明
を限定するものではない。
実施例１
３）発酵工程
Ｓ培地：可溶性澱粉０．５％ グルコース０．５％ポリ
ペプトン０．５％ 牛肉エキス０．５％ 酵母エキス０
．２５％ 食塩０．２５％ 脱イオン水（ＰＨ７，０殺
菌前） Ｘ培地：生澱粉２．０％ グルコース２．０％ 脱脂大
豆粉２，０％ 酵母エキス０．５％ 食塩０．２５％炭
酸カルシウム０．３５％ 塩化マンガン４水和物０．０
００５チ 硫酸銅５水和物０．０００５％ 硫酸亜鉛７
永和物０．０００５％ ストレプトパーティシリウム・
ロゼオバーティシラータム Ｄ’ｏ −２４８株（ＦＥ
ＲＭ Ｐ−７５６１）を１００ｄの上記Ｓ培地を含む５
００ｍ／容坂ロフラスコに一白金耳接種し、２８℃、４
８時間振とう培養した。
ペプトン０．５％ 牛肉エキス０．５％ 酵母エキス０
．２５％ 食塩０．２５％ 脱イオン水（ＰＨ７，０殺
菌前） Ｘ培地：生澱粉２．０％ グルコース２．０％ 脱脂大
豆粉２，０％ 酵母エキス０．５％ 食塩０．２５％炭
酸カルシウム０．３５％ 塩化マンガン４水和物０．０
００５チ 硫酸銅５水和物０．０００５％ 硫酸亜鉛７
永和物０．０００５％ ストレプトパーティシリウム・
ロゼオバーティシラータム Ｄ’ｏ −２４８株（ＦＥ
ＲＭ Ｐ−７５６１）を１００ｄの上記Ｓ培地を含む５
００ｍ／容坂ロフラスコに一白金耳接種し、２８℃、４
８時間振とう培養した。
この種培養液を上記Ｘ培地１００ｄを含む５００−容坂
ロフラスコに４ｒｎｌづつ接種し、２８℃、４日間振と
う培養し、培養液４３．８Ｊを得た。
ロフラスコに４ｒｎｌづつ接種し、２８℃、４日間振と
う培養し、培養液４３．８Ｊを得た。
ｂ）分離工程
上記工程で得られた培養液４３．８１に濾過助剤ハイフ
ロス−パーセル■（Ｊｏｈｎｓ−ｍｎｖｉｌｌｅ ５ａ
ｌｅｓＣＡｒｐ、 ） １．２ ＪＱＦを加え、菌体を
戸別した。Ｆ液３９Ｉ！を合成吸着剤ＨＰ−２０４，３
６１！（三菱化成工業（株）＋ １５０〜３００μ晶〕
のカラムに通し、目的成分を吸着させた。カラムを水洗
後、メタノールで溶出し、活性区分を集め、減圧下で濃
縮。水溶性不純物含有量の多い前半活性区分は、再度、
合成吸着剤ＣＵＰ−２０ＰＩ：三菱化成工業（株ン７５
〜１５０μｍ）５８０−／で吸脱着を行い、得られた活
性区分を合わせて凍結乾燥し、２５９の茶褐色の粗粉末
を得た。次にこの粗粉末２５ｇをシリカゲル（メルク社
、６３〜２００μｍ）４７０ｇのカラムに吸着させ、ク
ロロホルム−メタノール−水＝１５：１０：１で不純物
を溶出除去後、メタノールで活性成分を溶出させ減圧乾
個する。得られた活性成分を含む黄褐色残渣３，１８ｆ
を少量の水に溶かし、セファデックスＬＨ−２０（ファ
ルマシア社）７００−のカラムに通し、水洗後、メタノ
ール洗浄して活性区分を減圧乾個した。この粉末１．２
２ｆＩを再び少量の水に溶かし、トヨパールＨＷ−５０
ＣＩ：東洋曹達工業蛛）、１００〜５００μｍ〕のカラ
ムｌこ通し活性成分を吸着させ水洗後、メタノール洗浄
を行って活性区分を減圧乾個した。（この精製法では余
り不純物は除けないが、ｍ１ｎｏｒ活性成分のＤＯ−２
４８−Ｂが前半にまとまった区分として得られた。）こ
こに得られた、それぞれの粗粉末を逆相系ローパーカラ
ム（リクロプレツプＲＰ−１８■、４０〜６３μｍ ＋
２５Ｘ３１０ｍｍ、メルク社） ｊｃ メタ／−ルー
水＝１：１で通して、不純物を除去後、活性区分を減圧
乾個し黄色粉末４４５ηを得る。最後に、逆相系高速液
体クロマトグラフィー、セミ分取用カラム、ヌクレオシ
ルＩＯＣ，（エム、ナーゲル社、１ＯＸ２５０ｉｏｉ）
でＤｏ−２４８−Ａ、Ｂに単離後（Ｄｏ−２４８−Ａの
溶出時間１４〜１５分、Ｄｏ−２４８−Ｈの溶出時間７
〜８分、メタノール−水＝１：２．流速３ｒｎｌ／分て
溶出。紫外２５４ ｎｍ検出器使用）凍結乾燥し、おの
おのの無色粉末１１６１ｎｇと１６ｍ２を得た。
ロス−パーセル■（Ｊｏｈｎｓ−ｍｎｖｉｌｌｅ ５ａ
ｌｅｓＣＡｒｐ、 ） １．２ ＪＱＦを加え、菌体を
戸別した。Ｆ液３９Ｉ！を合成吸着剤ＨＰ−２０４，３
６１！（三菱化成工業（株）＋ １５０〜３００μ晶〕
のカラムに通し、目的成分を吸着させた。カラムを水洗
後、メタノールで溶出し、活性区分を集め、減圧下で濃
縮。水溶性不純物含有量の多い前半活性区分は、再度、
合成吸着剤ＣＵＰ−２０ＰＩ：三菱化成工業（株ン７５
〜１５０μｍ）５８０−／で吸脱着を行い、得られた活
性区分を合わせて凍結乾燥し、２５９の茶褐色の粗粉末
を得た。次にこの粗粉末２５ｇをシリカゲル（メルク社
、６３〜２００μｍ）４７０ｇのカラムに吸着させ、ク
ロロホルム−メタノール−水＝１５：１０：１で不純物
を溶出除去後、メタノールで活性成分を溶出させ減圧乾
個する。得られた活性成分を含む黄褐色残渣３，１８ｆ
を少量の水に溶かし、セファデックスＬＨ−２０（ファ
ルマシア社）７００−のカラムに通し、水洗後、メタノ
ール洗浄して活性区分を減圧乾個した。この粉末１．２
２ｆＩを再び少量の水に溶かし、トヨパールＨＷ−５０
ＣＩ：東洋曹達工業蛛）、１００〜５００μｍ〕のカラ
ムｌこ通し活性成分を吸着させ水洗後、メタノール洗浄
を行って活性区分を減圧乾個した。（この精製法では余
り不純物は除けないが、ｍ１ｎｏｒ活性成分のＤＯ−２
４８−Ｂが前半にまとまった区分として得られた。）こ
こに得られた、それぞれの粗粉末を逆相系ローパーカラ
ム（リクロプレツプＲＰ−１８■、４０〜６３μｍ ＋
２５Ｘ３１０ｍｍ、メルク社） ｊｃ メタ／−ルー
水＝１：１で通して、不純物を除去後、活性区分を減圧
乾個し黄色粉末４４５ηを得る。最後に、逆相系高速液
体クロマトグラフィー、セミ分取用カラム、ヌクレオシ
ルＩＯＣ，（エム、ナーゲル社、１ＯＸ２５０ｉｏｉ）
でＤｏ−２４８−Ａ、Ｂに単離後（Ｄｏ−２４８−Ａの
溶出時間１４〜１５分、Ｄｏ−２４８−Ｈの溶出時間７
〜８分、メタノール−水＝１：２．流速３ｒｎｌ／分て
溶出。紫外２５４ ｎｍ検出器使用）凍結乾燥し、おの
おのの無色粉末１１６１ｎｇと１６ｍ２を得た。
実施例２
ａ）発酵工程
Ｓ培地；可溶性澱粉０．５％ グルコース０．５％ポリ
ペプトン０．５％ 牛肉エキス０．５％ 酵母エキス０
．２５％ 食塩０．２５ｔｓ 脱イオン水（ｐＨ７，０
殺菌前） Ａ培地−生澱粉２％ グルコース２チ 脱脂大豆粉２％
バタトソイトン（商品名）１％食塩０．２５％ 水（
ｐｌ（７，０殺菌前）上記組成よりなるＳ培地８００ｒ
ｎ１．を含む２Ｉ！容三角フラスコにストレプトパーテ
ィシリウム・ロゼオバーティシラータム ＤＯ−２４８
（ＦＥＲＭＰ−７５６１）の種培養スラントを接種し、
毎分１８０回転で２８℃、２４時間振盪培養を行う。
ペプトン０．５％ 牛肉エキス０．５％ 酵母エキス０
．２５％ 食塩０．２５ｔｓ 脱イオン水（ｐＨ７，０
殺菌前） Ａ培地−生澱粉２％ グルコース２チ 脱脂大豆粉２％
バタトソイトン（商品名）１％食塩０．２５％ 水（
ｐｌ（７，０殺菌前）上記組成よりなるＳ培地８００ｒ
ｎ１．を含む２Ｉ！容三角フラスコにストレプトパーテ
ィシリウム・ロゼオバーティシラータム ＤＯ−２４８
（ＦＥＲＭＰ−７５６１）の種培養スラントを接種し、
毎分１８０回転で２８℃、２４時間振盪培養を行う。
こノ培養液８００ｒｎｌづつを、上記組成からなるＡ培
地２０１！を含む３０１！容ジヤーに植菌し、通気量２
０１／分、撹拌数毎分１８０〜３００回転で２８℃、５
日間培養する。
地２０１！を含む３０１！容ジヤーに植菌し、通気量２
０１／分、撹拌数毎分１８０〜３００回転で２８℃、５
日間培養する。
ｂ）分離工程
上記工程で得られた培養液をＰＨ３，０に調整後、シャ
ープレス遠心分離により上清液１００１！を得る。この
上清液をダウエックス５０Ｘ４（Ｎｌ−１４＋型）（米
国、ダウケミカル社製）樹脂１０１！のカラムに流速７
００ｒｎｌ／分で流す。水洗後０．３Ｎアンモニア水で
溶出し活性分画３５Ｉ！を集める。アンモニアを除去し
てｐｌ−１９，Ｑに調整後、ダウエックス１ ｘ ２
（Ｃｊ’−型）５１！のカラムに流速１５０ｄ／分で流
す。５％食塩を含む５０％メタノール水で溶出し、活性
分画１３Ｊを減圧濃縮してメタノールを留去する。残留
液をｐＨ７，Ｑに調整し１−Ｉ Ｐ −２０（三菱化成
社製）２．５ｆのカラムに流す。水洗後、５０％メタノ
ール水で溶出し活性分画２．７１！を減圧濃縮しメタノ
ールを留去する。残留液を凍結乾燥するとＤＱ−２４８
の粗粉末２．２５１を得る。
ープレス遠心分離により上清液１００１！を得る。この
上清液をダウエックス５０Ｘ４（Ｎｌ−１４＋型）（米
国、ダウケミカル社製）樹脂１０１！のカラムに流速７
００ｒｎｌ／分で流す。水洗後０．３Ｎアンモニア水で
溶出し活性分画３５Ｉ！を集める。アンモニアを除去し
てｐｌ−１９，Ｑに調整後、ダウエックス１ ｘ ２
（Ｃｊ’−型）５１！のカラムに流速１５０ｄ／分で流
す。５％食塩を含む５０％メタノール水で溶出し、活性
分画１３Ｊを減圧濃縮してメタノールを留去する。残留
液をｐＨ７，Ｑに調整し１−Ｉ Ｐ −２０（三菱化成
社製）２．５ｆのカラムに流す。水洗後、５０％メタノ
ール水で溶出し活性分画２．７１！を減圧濃縮しメタノ
ールを留去する。残留液を凍結乾燥するとＤＱ−２４８
の粗粉末２．２５１を得る。
（ｂ）Ｄｏ−２４８Ａの精製工程
以下の精製工程１こおけるＤｏ−２４ｆ３−Ａの検出な
らびに定量はヌクレオシル１０Ｃ１８（エム・ナーゲル
社製）のカラム（４８２５０ｍ）および２０ｍＭす／酸
緩衝液（ｐＨ７，０）とアセトニトリルの混合液（５二
１）を用い、２３０ ｎｍでの吸光度で追跡する高速液
体クロマトグラフィーで行った。この課外によるＤＯ−
２４８−Ａの保持容量は８．００ｍ／であった。
らびに定量はヌクレオシル１０Ｃ１８（エム・ナーゲル
社製）のカラム（４８２５０ｍ）および２０ｍＭす／酸
緩衝液（ｐＨ７，０）とアセトニトリルの混合液（５二
１）を用い、２３０ ｎｍでの吸光度で追跡する高速液
体クロマトグラフィーで行った。この課外によるＤＯ−
２４８−Ａの保持容量は８．００ｍ／であった。
上記工程によって得られた粗粉末２．０１ＤＯ−２４８
−Ａの含量、約１０５ＩＩ９）を２０ｍＭリン酸緩衝液
（ｐＨ７，０）約４０．ｎ／に溶解する。少量の不溶物
を除去した後、この溶液をＱＡＥ−セファデックスＡ−
２５（ファルマシア社製）のカラム（２００ｍ／）に附
す。カラムに２０１ｎＭリン酸緩衝液（ＰＨ７，０）
２００ｍ１を通過せしめた後、同緩衝液６００−とＩＭ
の塩化ナトリウムを含む同緩衝液６００−を用いて直線
濃度勾配溶出を行う。溶出液を上記の高速液体クロマト
グラフィーで追跡しＤＯ−２４８−Ａを含む分画を集め
る。
−Ａの含量、約１０５ＩＩ９）を２０ｍＭリン酸緩衝液
（ｐＨ７，０）約４０．ｎ／に溶解する。少量の不溶物
を除去した後、この溶液をＱＡＥ−セファデックスＡ−
２５（ファルマシア社製）のカラム（２００ｍ／）に附
す。カラムに２０１ｎＭリン酸緩衝液（ＰＨ７，０）
２００ｍ１を通過せしめた後、同緩衝液６００−とＩＭ
の塩化ナトリウムを含む同緩衝液６００−を用いて直線
濃度勾配溶出を行う。溶出液を上記の高速液体クロマト
グラフィーで追跡しＤＯ−２４８−Ａを含む分画を集め
る。
集められた溶出分画をＣＩ（Ｐ−２０Ｐ（三菱化成社製
）のカラム（１００−）に附し、水で洗滌した抜水３０
０−と８（１％メタノール３００＃ｌ／とによる直線濃
度勾配溶出を行う。溶出液を高速液体クロマトグラフィ
ーにより追跡し、［）Ｏ−２４８−Ａを含む分画を集め
る。集められた溶出分画を減圧上濃縮、次いで凍結乾燥
する事により、含有率約７０％の粉末１００〜を得る。
）のカラム（１００−）に附し、水で洗滌した抜水３０
０−と８（１％メタノール３００＃ｌ／とによる直線濃
度勾配溶出を行う。溶出液を高速液体クロマトグラフィ
ーにより追跡し、［）Ｏ−２４８−Ａを含む分画を集め
る。集められた溶出分画を減圧上濃縮、次いで凍結乾燥
する事により、含有率約７０％の粉末１００〜を得る。
この粉末について、−回につき約ｓｏｑを高速液体クロ
マトグラフィー分取用カラム（ヌクレオシルａＯＣ，，
。
マトグラフィー分取用カラム（ヌクレオシルａＯＣ，，
。
２０ Ｘ ２５０間ンに附し、５９ｍＭ リン酸緩衝液
（ｐＨ７，０）とメタノールの混合液（９： １ ）で
展開する。２３０ ｎｍでの吸光度で追跡し目的物のピ
ーク部分を分取する。この分取液をＣＨＰ−２ＱＰのカ
ラム（４０１１１／）に通過せしめ、カラムを水洗後５
０チメタノールで溶出し、前記の高速液体クロマトグラ
フィーで検出してＤＯ−２４８−Ａを含む溶出液を集め
、減圧下濃縮続いて凍結乾燥する事により、ＤＯ−２４
８−Ａの無色粉末。
（ｐＨ７，０）とメタノールの混合液（９： １ ）で
展開する。２３０ ｎｍでの吸光度で追跡し目的物のピ
ーク部分を分取する。この分取液をＣＨＰ−２ＱＰのカ
ラム（４０１１１／）に通過せしめ、カラムを水洗後５
０チメタノールで溶出し、前記の高速液体クロマトグラ
フィーで検出してＤＯ−２４８−Ａを含む溶出液を集め
、減圧下濃縮続いて凍結乾燥する事により、ＤＯ−２４
８−Ａの無色粉末。
６０■を得る。
第１図、第２図、第３図Ｓよび第４図はそれぞれＤｏ−
２４８−Ａの水溶液による紫外線吸収スペクトル、臭化
カリウム錠による赤外線吸収スペクトル、’ｌ−１核磁
気共鳴スペクトルおよび１３Ｃ核磁気共鳴スペクトルを
表わし、第５図、第６図、第７図および第８図はそれぞ
れ０Ｏ−２４８−Ｈの水溶液による紫外線吸収スペクト
ル、臭化カリウム錠による赤外線吸収スペクトル、１Ｈ
核磁気共鳴スペクトルおよび１３Ｃ核磁気共鳴スペクト
ルを表わす。 第１図 第２図 第３図 第５図 第７図 （ｐｐｍ） 手続ネ甫正書（自発） 昭和５９年 ７月２０日 特許庁長官 殿 追 １、事件の表示 昭和５９年特許願第７７３７２号 ２、発明の名称 抗生物質Ｄｏ−２４８−ＡおよびＢならびにその製造法
３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 住所 大阪府大阪市東区道修町３丁目１２番地シオノギ
セイヤク 名称（１９２）塩野義製薬株式会社 ヨシトシ カズオ 代表者 吉 利 −雄 ４、代理人 住所 大阪市福島区鷺洲５丁目１２番４号〒５５３塩野
義製薬株式会社 特許部 （電話 ０６−４５８−５８６１） ５、補正の対象 明細書の発明の詳細な説明の欄。 ６、補正の内容 （υ明細書８頁１行の構造式を下記のように訂正る。 （２）回書同ｊｊｓ行および６行（ただし構造式を算入
せず、）の「Ｎ−」を’（Ｓ） Ｎ Ｊに訂正する。。 以上
２４８−Ａの水溶液による紫外線吸収スペクトル、臭化
カリウム錠による赤外線吸収スペクトル、’ｌ−１核磁
気共鳴スペクトルおよび１３Ｃ核磁気共鳴スペクトルを
表わし、第５図、第６図、第７図および第８図はそれぞ
れ０Ｏ−２４８−Ｈの水溶液による紫外線吸収スペクト
ル、臭化カリウム錠による赤外線吸収スペクトル、１Ｈ
核磁気共鳴スペクトルおよび１３Ｃ核磁気共鳴スペクト
ルを表わす。 第１図 第２図 第３図 第５図 第７図 （ｐｐｍ） 手続ネ甫正書（自発） 昭和５９年 ７月２０日 特許庁長官 殿 追 １、事件の表示 昭和５９年特許願第７７３７２号 ２、発明の名称 抗生物質Ｄｏ−２４８−ＡおよびＢならびにその製造法
３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 住所 大阪府大阪市東区道修町３丁目１２番地シオノギ
セイヤク 名称（１９２）塩野義製薬株式会社 ヨシトシ カズオ 代表者 吉 利 −雄 ４、代理人 住所 大阪市福島区鷺洲５丁目１２番４号〒５５３塩野
義製薬株式会社 特許部 （電話 ０６−４５８−５８６１） ５、補正の対象 明細書の発明の詳細な説明の欄。 ６、補正の内容 （υ明細書８頁１行の構造式を下記のように訂正る。 （２）回書同ｊｊｓ行および６行（ただし構造式を算入
せず、）の「Ｎ−」を’（Ｓ） Ｎ Ｊに訂正する。。 以上
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 （１）下記一般式ｌで表わされる化合物およびその製薬
上許容される塩。 （式中にはエチルまたはイソプロピルを表わす。）（２
）一般式Ｉにおいてｋがイソプロピルの抗生物質Ｄｏ−
２４８−Ａである特許請求の範囲第（１）項記載の化合
物。 （３１一般式ｌにおいてｋがエチルの抗生物質り。 −２４８−Ｂである特許請求の範囲第（１）項記載の化
合物。 （４）ストレプトパーティシリウム属に属する抗生物質
ＤＯ−２４８−Ａおよび／またはＤｏ−２４Ｂ−Ｂ産生
菌を培地に培養し、Ｄｏ−２４８−Ａおよび／またはＤ
ｏ−２４８−Ｂを得ることを特徴とするＤｏ−２４８−
Ａおよび／またはＤＯ−２４８−Ｂの製造法。 （５）抗生物質ＤＯ−２４８−Ａ、ＤＯ−２４８−Ｂお
よびそれらの製薬上許容される塩の１以上を含有するこ
とを特徴とする抗抗酸菌剤。
Priority Applications (8)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59077372A JPS60218396A (ja) | 1984-04-16 | 1984-04-16 | 抗生物質ｄｏ−２４８−ａおよびｂならびにその製造法 |
| US06/719,737 US4647693A (en) | 1984-04-16 | 1985-04-03 | Antibiotics DO-248-A and B and process for preparing the same |
| DE198585104546T DE159004T1 (de) | 1984-04-16 | 1985-04-15 | Antibiotika do-248-a und b und deren verfahren zur herstellung. |
| KR1019850002516A KR930000275B1 (ko) | 1984-04-16 | 1985-04-15 | 항생물질 do-248-a 및 b의 제조방법 |
| DE8585104546T DE3576694D1 (de) | 1984-04-16 | 1985-04-15 | Antibiotika do-248-a und b und deren verfahren zur herstellung. |
| EP85104546A EP0159004B1 (en) | 1984-04-16 | 1985-04-15 | Antibiotics do-248-a and b and process for preparing the same |
| GB08509577A GB2159150B (en) | 1984-04-16 | 1985-04-15 | Antibiotics do-248-a and b and their preparation |
| CN 85102956 CN1011245B (zh) | 1984-04-16 | 1985-04-19 | 抗生素do-248-a和do-248-b的生产方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59077372A JPS60218396A (ja) | 1984-04-16 | 1984-04-16 | 抗生物質ｄｏ−２４８−ａおよびｂならびにその製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60218396A true JPS60218396A (ja) | 1985-11-01 |
| JPH0361662B2 JPH0361662B2 (ja) | 1991-09-20 |
Family
ID=13632065
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59077372A Granted JPS60218396A (ja) | 1984-04-16 | 1984-04-16 | 抗生物質ｄｏ−２４８−ａおよびｂならびにその製造法 |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4647693A (ja) |
| EP (1) | EP0159004B1 (ja) |
| JP (1) | JPS60218396A (ja) |
| KR (1) | KR930000275B1 (ja) |
| DE (2) | DE3576694D1 (ja) |
| GB (1) | GB2159150B (ja) |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2153987A1 (en) * | 1993-01-14 | 1994-07-21 | U. Prasad Kari | Amino acids and peptides having modified terminals |
| US5654451B1 (en) * | 1993-01-14 | 2000-02-22 | Magainin Pharma | Amino acids and peptides having modified c-terminals and modified n-terminals |
| AUPN115095A0 (en) * | 1995-02-15 | 1995-03-09 | Butt, Henry Lawrence | Analysis of and compositions and methods for the treatment of disease |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3994965A (en) * | 1974-08-09 | 1976-11-30 | Pfizer Inc. | D-N-(guanylureidoacetyl)-α-aminophenyl acetic acid and D-N-(guanylureidoacetyl)-α-aminophenyl acetyl chloride |
| JPS59144717A (ja) * | 1983-02-07 | 1984-08-18 | Microbial Chem Res Found | 鎮痛剤 |
-
1984
- 1984-04-16 JP JP59077372A patent/JPS60218396A/ja active Granted
-
1985
- 1985-04-03 US US06/719,737 patent/US4647693A/en not_active Expired - Fee Related
- 1985-04-15 KR KR1019850002516A patent/KR930000275B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 1985-04-15 GB GB08509577A patent/GB2159150B/en not_active Expired
- 1985-04-15 DE DE8585104546T patent/DE3576694D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1985-04-15 EP EP85104546A patent/EP0159004B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1985-04-15 DE DE198585104546T patent/DE159004T1/de active Pending
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| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0159004A2 (en) | 1985-10-23 |
| DE3576694D1 (de) | 1990-04-26 |
| KR930000275B1 (ko) | 1993-01-14 |
| DE159004T1 (de) | 1986-02-27 |
| EP0159004B1 (en) | 1990-03-21 |
| EP0159004A3 (en) | 1987-08-12 |
| US4647693A (en) | 1987-03-03 |
| GB8509577D0 (en) | 1985-05-22 |
| JPH0361662B2 (ja) | 1991-09-20 |
| GB2159150B (en) | 1987-07-22 |
| GB2159150A (en) | 1985-11-27 |
| KR850007277A (ko) | 1985-12-02 |
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