JPS60231622A - ムチン性卵巣癌細胞モノクロ−ナル抗体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、人卵巣癌に対する甲−クローン抗体及びそれ
を産生ずるバイブリド−７に関する。

更に詳しくは、本発明は、人の卵巣癌細胞で免疫された
抗体産生細胞と骨髄腫細胞との融合によって形成された
ハイブリドーマによって産生され、次の性質を有するｒ
ａ　Ｇ＋のクラスに属する単一クローン抗体に関づる： （１）ムチン性嚢胞腺癌細胞、類内膜癌細胞、顔中腎癌
細胞と反応する； （２）漿液性嚢胞腺癌細胞、ムチン性嚢胞腺師細胞どは
反応しない； （３）卵巣腫瘍以外の子宮体部病、肺癌、乳癌、胃癌、
肝癌、腎細胞癌、大腸癌、肝癌、精上皮腫の細胞と反応
しない； （４）卵巣、脳、心臓、肺臓、肝臓、胃、腸、膵臓、腎
臓、子宮、卵管、皐丸の正常組繊細胞と反応しない； （５）１−リブシンで分解しない。

更に本発明は、人の卵巣癌細胞で免疫された抗体産生細
胞と骨髄ｍｌ胞との融合によって形成され、次の性質を
有するＩ（Ｉ　Ｇ＋のクラスに属する単一クローン抗体
を産生ずるハイブリドーマに関する： （１）ムチン性勃胞腺癌細胞、類内膜癌細胞、顔中腎癌
、細胞と反応する； （２）漿液性嚢胞腺癌細胞、ムチン性嚢胞腺腫細胞とは
反応しない； （３）卵巣腫瘍以外の子宮体部病、肺癌、乳癌、胃癌、
膵癌、腎細胞癌、大腸癌、肝癌、精上皮肺の細胞と反応
しない： （４）卵巣、脳、心臓、肺臓、肝臓、胃、腸、膵臓、腎
臓、子宮、卵管、翠丸の正常組繊細胞と反応しない； （５）トリプシンＣ′分解しない。

近年、高い特異性を有する単一クローン抗体を、診断及
び治療手段として利用しようとづる試みが精力的にな′
されていることは周知の通りである。

本発明者等も、人の卵巣癌に対して特異性の高い単一ク
ローン抗体の確立、どの単一クローン抗体を産生するパ
イブリドーマの確立のために鋭意研究を行なった結果、
本発明を完成した。

卵巣癌は婦人科癌の中にあって、子宮癌はど頻度の高い
疾忠ではないが、腹腔的腫瘍であるため早期診断の困難
な場合が多く、予後が悪いことが特徴である。従って、
卵巣癌の治療成績の向上には、早期の確実な診断法を確
立して適切な治療をおこなう必要があり、最近、Ｂ　ａ
ｓｔ等およびＢｈａｔｔａｃｈａｒｙａ等は、細胞融合
法（Ｋ″６旧ｅｒ、Ｑ、。

とＭｉｌｓｔｅｉｎ、Ｃ，：　Ｆｕｒ、　Ｊ、Ｉｎ＋ｍ
ｕｎｏｌ、、６．　５ＩＬ−５１９，１９７６）を用い
て、卵巣癌関連抗原に対する単一クローン抗体（以下Ｍ
ＯＡｂと略す）を作成し、免疫学的な方法で卵巣癌の診
断及び治療を行なうための基礎的な成績を発表した。

まず、Ｂ　ａｓｔ等はヒト漿液性嚢胞腺癌の培養細胞。

に対するＭｏ　Ａｂ　ＱＣ−１２５を作成し、螢光抗体
法で分析したところ、卵巣癌の大部分と反応を認めたが
仙臓器どほとんど反応しなかったため、卵巣癌関連抗原
に対するＭｏ　Ａｂであると報告し１＝　（Ｊ、　Ｃｌ
１ｎ　、Ｉｎｖｅｓｔ、、　６８．１３３１−１３３７
．１９８１）。しかし、Ｂ　ａｓｔはＫ　ａｌｌａＷａ
ｔ等、との第２報でＱＣ−１２５が漿液性嚢胞腺癌とと
もに類内膜癌、顔中腎癌及び良性の漿液性嚢胞腺癌など
と反応し、ムチン性嚢胞腺癌と反応しなかったため、Ｑ
Ｃ−１２５は漿液性、類内膜、顔中腎の二型の卵巣腫瘍
に共通した表面抗原に対するＭｏ　Ａｂであるど報告し
１：Ｃ（Ａｍ、Ｊ　、　ＣＩｉｎ。

Ｐａｔｈｏｌ、、７９．９８−１０４．１９８３）、　
一方、Ｂ　ｈａｔｔａｃｈａｒｙａ等は漿液↑１又はム
チン性と判別出来ない低分化の嚢胞腺癌の抽出液を免疫
原として、ＭＯΔｂｌＤ３及びＩＤ５を作成した。これ
らは、３ｏｌｉｄｐｈａｓｅ　ＲＩ　Ａによる吸収実験
で、ムチン性罰胞腺癌とのみ反応して伯臓器癌と全く反
応しなかったため、ムチン性嚢胞腺癌関連抗原に対Ｊる
ＭＯＡｂであると報告した（　ＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａ
ｒｃｈ、４２　、１６５０−１６５４　、１９８２）。

しかし、これらの　ＭＯＡｂは、いずれも正常組織、卵
巣癌以外の悪性腫瘍、卵巣の良性腫瘍にも反応し、顔中
腎癌には反応しないと゛いう欠点がある。

本発明者は種々検討の結果、卵巣癌の中でも最も頻度の
高いムチン性嚢胞腺癌に対して特異性の高い新規なＭＯ
Ａｂ　、及びこのＭＯＡｂを産生ずるハイブリドーマを
創製することに成功し、本発明を完成するに至った。

以下に本発明のハイブリドーマおよびＭｏ　Ａｂの調製
法について詳述する。

なお、以下の説明において、抗体産生ハイブリドーマの
製造のために免疫原として使用する癌細胞及び、本発明
のＭｏ　Ａｂの各細胞との反応性を調べる為に用いる各
種細胞（よ、全て人の細胞である。

まず、適当な動物を癌細胞で免疫する。免疫原としては
、ムチン性嚢胞腺癌細胞、または順向膜癌細胞、顔中腎
癌細胞等の卵巣癌細胞が使用出来る。これらの癌細胞は
、特定の株のものに限定されない。免疫する動物はマウ
ス、ラット等のネズミ科の動物又はその他の動物であっ
てよいが、通常はマウスが好ましい。具体的には、例え
ばＢＡＬＢ／Ｃマウスにムチン性嚢胞腺癌の細胞又はそ
のホモジネート又はそれから採取された抗原を数日〜数
週間おぎに数回接種する。接種量は１匹あたり１回につ
き１０５〜１０７個の細胞を使うのが好ましい。

その後マウスよりｌ’ｌ’ｉＥを摘出し、遠心分離によ
り抗体産生細胞（牌臓細胞〉を得る。この細胞は増殖し
ていく能力を持たないので、自己増殖能力を有する細胞
と融合させる。自己増殖能力を有する細胞としては骨髄
腫細胞が特に好ましい。骨髄腫細胞としては、抗体産生
細胞を得た動物と同種の動物のものを用いるのが好まし
く、また、抗体を産生しないものを選択するのが好まし
い。

抗体産生細胞と骨髄腫細胞をポリエチレングリコール等
の細胞融合剤を含む溶液（又は懸濁液）に加え、細胞融
合を行なう。抗体産生細胞と骨髄腫細胞の使用割合は細
胞数比で約５：１とするのが好ましい。

１びられた融合細胞を限界稀釈法により分離し、分離し
た融合細胞を増殖させ、各ウェル辷おいて産生される抗
体を公知の方法、例えば螢光抗体法又は酵素抗体法等に
より各種細胞組織等と反応させ、その結果から所望の抗
体を産生ずるハイブリドーマを選択することができる。

選択されたハイブリドーマを培養基中で培養し、その上
清液から常法により所望のＭｏＡｂを採取することがで
きるが、生体内、例えばヌードマウス腹腔内にハイブリ
ドーマを注入し、これをヌードマウス体内で腫瘍として
生育させ、そのヌードマウスの面清あるいは腹水がらＭ
ＯＡｂを回収することも出来る。

この様にして得られたＭｏＡｂはＩＱ　Ｇ＋のクラスに
属するものであり、分子量は約１５万である。このＭｏ
Ａｂはトリプシンで分解されない。

本発明者等はこのＭｏ　Ａｂを、ＭｏＡｂ４Ｃ７ど命名
した。

後述する実施例に示したように、本発明のＭ。

Ａｂ　４Ｃ７はムチン性嚢胞腺癌の７６．９％、順向１
１１癌（７）８５．７％及び顔中腎癌の８１．８％に陽
性反応を認めたが、漿液性嚢胞腺癌及びムチン性嚢胞腺
腫と共に、非上皮性卵巣潰瘍、他の臓器癌組織や正常組
織等とは全く反応を認めなかった。

従って、本発明のＭｏ　Ａｂ　４Ｃ７産生ハイブリドー
マは、ムチン性嚢胞腺癌に存在する抗原に対するＭＯＡ
ｂ産生ハイブリドーマである。

Ｍｏ　Ａｂ　４Ｃ７が順向膜層と反応したことは、ムチ
ン性嚢胞腺癌に特有の癌関連抗原が順向膜層にも存在し
ていることを示しており、又、ＭＯＡｂ４Ｃ７が顔中腎
癌と反応したことは、ムチン性■胞腺癌に特有な癌関連
抗原が顔中腎癌にも分布していることを示している。即
ち、本発明のＭｏＡｂ４Ｃ７が認識する抗原は、ムチン
性栓胞腺癌の癌細胞の表面、膣腔を形成する順向膜癌癌
細胞の表面、顔中腎癌の癌細胞の表面に存在する表面抗
原である。

本発明のＭｏ　Ａｂは、一種類で数種類の卵巣癌を証明
出来るから、臨床応用を考える場合、極めて有用な抗体
であると言える。即ち、本発明のＭｏＡｂ４Ｃ７は、ラ
ジオイミュノアッセイ等の方法で体液中の抗原濃度を測
定したり、放′射性同位元素で標識したＭｏ　Ａｂの放
射活性をイメージングするなどして、診断の目的に用い
ることも出来る。このＭｏ　Ａｂ　４Ｃ７を用いると、
ムチン性嚢胞腺癌に対して、非常に精度の高い診断を行
なうことが出来る。又、本発明のＭＯＡｂは対応する抗
原を保有する癌組織を標的としたＭＯＡｂ単独使用によ
る治療又は、ＭＯＡｂを抗癌剤の癌組織への特異的な運
搬手段として用いるＭｏ　Ａｂ　−抗癌剤複合体による
ミサイル療法に用いることも出来る。

なお、本発明における実施例及び実験例で用いた間接酵
素抗体法は、辻の方法（免疫実験操作法、Ｘ、３１６１
−３１６４．１９８１）に準じ以下のように行なった。

癌細胞を細切した後、０．　１％のトリプシン（Ｓｉｇ
ｍａ）と０．１％コラゲナーゼ（Ｓ　ｉ（１ｍａ）を加
えた溶液中、３７℃で２時間反。

応させ、ステンレスメツシュ（Ｓ−２００永田理化）を
用いて単細胞化したものをＰＢＳで洗浄浮遊し、試料細
胞どする。０．２５％ゲルタールアルデハイド（和光紬
薬工業）で前処理したＭｉｃｒ。

ＥＬＩＳＡ　Ｄｌａｔｅ　Ｕ　２ＱＱ１．（［）ｙｎａ
ｔｅｃｋｌ−ａｂ、）の各ウェルに１０４個の試料細胞
を加え、１６０Ｇで１０分間遠沈したのち９９％エタノ
ールを加えて固定乾燥する。次に、ハイブリドーマの培
養上清５０．−’を加えて室温で３００分間反応せ、Ｐ
ＢＳで洗浄したのち、第二抗体として、ｂｉｏｔｉｎｙ
ｌ　ａｎｔｉｍｏｕｓｅ　Ｉ　ｇＧ　（Ｖｅｃｔｏｒ　
Ｌａｂ、　１２．５μｇ／か）の５０〆を滴下し、室温
で３００分間反応せたのちＰＢＳで洗浄する。続いて、
ｈｏｒｓｅｒａｄｉｓｈ　ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ　Ａｖ
ｉｄｉｎ　Ｄ　（ＶｅｃｔｏｒＬ　ａｂ、　２　μ、Ｏ
／？ｘ１２　）の５０〆を加え、室温で５分間反応させ
たのちＰ　Ｂ’Ｓで洗浄し、０．０５％１」２０２を含
むＡルソフエニレンジアミン（０，２ＩＩ１ｇ／鱈、０
．１５Ｍクエン酸緩衝液、ｐＨ４，０＞５０／ｄ２を用
いて室温で５分間呈色反応を行ない、１０％Ｈ２ＳＯａ
　５０／’を加えて、Ａ　ｕｔｏｍａｔ　ｉｃｍｉｃｒ
ｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒ　（Ｑ　ｏｒｏｎａ　Ｍ　Ｔ　
Ｐ　１２　）で測定する。

また、間接螢光抗体法は、高田の方法（兵医大学会誌７
．９１−９９．１９８２）に準じ、以下のように行なっ
た。

マーｒクロスライドガラス（検波硝子）上に戦けた培養
細胞や１１織切片などを９９％エタノールで５分間固定
し、ＰＢＳ　（生理的リン酸緩衝液）で５分間洗浄する
。培養癌細胞や組織切片の上にＭＯＡｂ　（２００μｇ
／戴）の５０〆を滴下し、室温で乾燥しないように注意
しながら３００分間反応せる。ＰＢＳで洗浄後、第二抗
体としてのｂｉｏｔｉｎｙｌ　ａｎｔｉｍｏｕｓｅ　Ｉ
　（］　Ｇ　（Ｖｅｃｔｏｒ　１−ａｂ。

１２．５μｇ／戯）５０／と室温で３００分間反応せ、
ＰＢＳで洗浄する。最後に、ＦＩＴＣｃｏｎｊｕｏａｔ
ｅｄ　Ａｖｉｄｉｎ　Ｄ　（Ｖｅｃｔｏｒ　Ｌ　ａｂ、
１０μｇ／か）の５０パと室温で５分間反応させ、ＰＢ
Ｓで十分洗浄し１コ′のら、９０％グリセロール１０％
ＰＢＳで封入し、螢光顕微鏡（Ｎｉｋｏｎ　ＶＦＤ−Ｒ
）で観察する。

実施例 免疫原には、ムチン性嚢胞腺癌から確立したヌードマウ
ス移植株から採取したムチン性嚢胞腺癌細胞（以下０Ｖ
Ａ−１という）を細切したのちｌＸ１０６個相当吊に相
当量のＲＰＭＩ−１６４０を加えてホモシネ、−トし、
その総伯を用いた。

６週令の雄Ｂ△しＢ／Ｃマウス（チャールズリバー）の
腹腔内に、前述した量の０ＶＡ−１ホモジネートを１週
間毎に４回注入し、３月後にマウスから牌臓を摘出した
。

細胞融合の方法は、波力等の方法（免疫実験操作法Ｖｌ
、２９６３−２９６７．１９７８）及び高田の方法（兵
医大学会誌、７．９１−９９．１９８２）に準じて行な
った。即ち、摘出した牌臓を細切したのち、ステンレス
メツシュ（Ｓ２００永田理化）を通し、１５００．ｒｏ
ｍ　、２００Ｇで遠沈して得た沈渣に０．７％ＮＨａＣ
ｉ！、１０πβを加えて赤血球を除き、ＲＰＭＩ−１６
４０で２回洗浄して得た生細胞浮遊液３．９Ｘ１０７個
／２２かにマウス骨髄腫細胞株Ｐ３Ｘ６３−Ａ（１８−
Ｕｌ（以下Ｐ３（Ｊｌという）をＲＰＭＩ−１６４０で
２回洗浄して得たＰ３ｔＪ１．７．８Ｘ１０’６個／２
．５か（５：　１　）を混合し、２０００ｒｐｍ。

２００Ｇで１０分間遠沈した。沈澱細胞をよくとぎほぐ
した後、４２．５％（Ｗ　／Ｖ　）のポリエチレングリ
コール（ＰＥＧＩ　０００．Ｓｉｏｍａ）を含有した３
７℃、ｐＨ７，４のＲＰＭＩ−１６４０，１戴を回転し
ながら１分間かけて徐々に加え、細胞融合を行なった。

反応１分後からＲＰＭＩ−１６４０を徐々に加え、総（
ｉ３Ｑｙ／とじて細胞融合を終了した。２０ＱＱｒｐｍ
　、２００Ｇｒ遠沈俊、１０％牛脂児血清を含んだＲＰ
ＭＩ−１６４０，１００戴を加えて細胞浮遊液を作り、
ｌ−ａｌｃｏｎ　ｎ＋１ｃｒｏ　ｃｕｌｔｕｒｅｐｌｃ
ｌｊｅ　（３０４２）の１ウエルあたりＯ，，２ｆｆｚ
ずつ分注し、３７℃、５％ＧＯ２培養器中ひ培養した。

２４時間後から２日毎に上清の半量をト１Δ丁培地（ヒ
ボキサンチン、アミノプテリン、チミジン　１０％、牛
胎児血清）と入れ換えた。１０日目に上清を取り出して
後述する酵素抗体法で抗体産生の有無を確かめ、限界稀
釈法により、抗体産生が陽性を示したウェルの中のハイ
ブリドーマを１ウエルあたり０．３〜０．６個となるよ
うに調節した。培地は最初ＨＴ（ヒポキサンチン、チミ
ジン、１０％牛脂児血清）を用い、ｆ’ｅｅｄｅｒ　１
ａｙｅｒとしてＢＡＬＢ／Ｃマウスの胸腺細胞５Ｘ１０
５／ウエルを加えた。次に１０％牛脂児血清を加えたＲ
ＰＭ　Ｉ−１６４０培地に置換した。

このような限界稀釈法によるクローニングを２回ずつ行
ない、約５００種の抗体産生細胞を作成した。これらの
中から間接酵素抗体法によりムチン性嚢胞腺癌のヌード
マウス継代移植株（ＯＶＡ−１）に反応するＭｏＡｂ４
Ｃ７産生ハイブリドーマ１種を得た。

得られたハイブリドーマの大量培養は、１ウエルのハイ
ブリドーマを５ウエル、２４ウエル（Ｆａｌｃｏｎ　３
００８　）ど増量しながら、最終的にはＦａＩｃｏｎ組
織培養フラスＩＩ　（３０１３，３０２４＞を用いて培
養した。

培養上清を５０％飽和硫安で塩析して採取したγ−グロ
ブリン分画を凍結乾燥し、目的のＭＯＡｂ４Ｃ７を得た
。Ｍｏ　Ａｂ産生ハイブリ′ドーマ及び乾燥したＭｏ　
Ａｂは共に一８０℃で凍結保存した。

実験例 上記実施例で得られたモノクローナル抗体の各種細胞に
対する反応性を検討した。

１　“ヒｍに・　る　↓ 実施例で得たＭｏ　Ａｂ　４Ｃ７を２００μＱ　／ｍの
濃度でＰＢＳに溶かし、卵巣癌を主とした卵巣腫瘍等に
対する反応性を間接螢光抗体法により調べたところ、表
−１に示すような結果であった。

すなわち、本発明のモノクローナル抗体ＭＯＡｂ４Ｃ７
はムチン性嚢胞腺癌の１３例中１０例（７６，９％）、
順向股癌の７例中６例（８５゜７％）、腹水中の癌細胞
を含めた顔中腎癌の１１例中９例８１．８％）に陽性反
応を示した。一方漿液性嚢胞腺癌１２例、ムチン性嚢胞
腺腫６例全てに反応を示さなかった。　′ 前述した４種の上皮性卵巣癌以外の分類不能層、類皮崩
胞癌、胎児性病、Ｋ　ｒｕｋｅｎｂｅｒｇ腫瘍、充実性
奇形種、身分化胚細胞腫、顆粒膜細胞腫等に対してはＭ
ｏＡｂ４Ｃ７は全く反応を示さなかった。

表−１ＭｏＡｂ４Ｃ７の各１ヒト叫１創１旦ＭＯＡＩ）
４Ｃ７に よる免疫螢光染色 紋１Ｌ　−／倹 ムチン性嚢胞腺癌　１０／１３ 類内膜癌　６／７ 類中腎癌　８／１゜ 顔中腎癌（腹水中）１／１ 皮様のう腫の悪性変化　０／　１ ムチン性看胞腺腫　０／　６ 漿液性貴胞腺癌　ｏ／１１ 漿液性罰胞腺癌（胸水中癌細胞）ｏ／１低悪性度漿液性
嚢胞腺腫　０／　６ 漿液性程胞腺腫　０／　７ 胎児性癌　０１５ Ｋ　ｒｕｋｅｎｂｅｒｇ腫瘍　０／　１未分化胚細胞腫
　０．／　４ 顆粒膜Ｉｌｌ胞腫　ｏ７／３ Ｂ　ｒｅｎｎｅ腫　ｏ／′１ ２　を以　のヒト　−　に）する−　性卵巣癌以外の各
種箱く子宮大部病、肺癌、乳癌、胃癌、膵癌、腎細胞病
、大賜癌、肝癌及び精上皮腫）に対１−る反応性は表−
２に示す通りである。

ＭＯＡＩ）４Ｃ７は、上記各種箱に対し全く反応性を示
さなかった。

人二二、？　ｏ　ｂ４（’　の　７に　・　７〜ＭＯＡ
ｂ　４Ｃ７による免疫螢光染色 癌」Ｌ胞−／々 子宮体部癌　０／　５ 肺癌　０／２ 乳癌　０／２ 胃癌　０／４ 肝癌　０／２ 膵癌　０／１ 腎細胞病　０／２ 大賜癌　０／３ 精上皮腫　０／２ ±１Ｌ作１ヒ１〜正′−組　に〜−る 成人及び１４週令と１５週令の胎児正常組織に対してＭ
ｏＡｂ４Ｃ７による間接螢光抗体法を実施したところ、
卵巣をはじめ、脳、心臓、肺臓、肝臓、胃、腸、膵臓、
腎臓、子宮、卵管、皐丸等全ての組織で反応を認めなか
った。結果を表−３に示す。

サンプル数 Ｌｌｌｌ　良友−１Ｌ　【Ｅ１ 卵巣　５０　− 脳　２　２　− 肺臓　２　２　− 心臓　２　２　− 肝臓　２　２　− 胃　１　２　− 腸　２　２　− 膵臓　１　１　− 牌臓　１　１　− 腎ｉｉ　２２　− 卵包・　３　〇　− 子宮　３　０　− 翠丸　２　〇　− 皮膚　０　１　− 原始繊毛　０１　− 特許出願人　ロ］辺製薬株式会ネ１゜

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、人の卵巣癌細胞で免疫された抗体産生細胞と骨髄腫
   細胞との融合によって形成されたバイブリド−７によっ
   て産生され、次の性質を有゛ケる１（］　Ｇ＋のクラス
   に属する単一クローン抗体：（１）ムチン性収胞腺癌ｌ
   ｌ！ＩＩＩ胞、類内膜癌側り顔中腎癌細胞と反応する； （２）　’ｌ、’！液性翁胞液性細胞腺癌細胞性Ｒ胞腺
   腫細胞とは反応しない； （３）卵巣ｍ瘍以外の子宮体部病、肺癌、乳癌、胃癌、
   膵陥、腎細胞病、大腸癌、肝癌、精上皮腫の細胞と反応
   しない； （４）卵巣、脳、心臓、肺臓、肝臓、胃、腸、膵臓、腎
   臓、子宮、卵管、皐丸の正常組繊細胞ど反応しない； （５）トリプシンで分解しない。 ２、抗体産生細胞がマウスの牌細胞であり、骨髄腫細胞
   がマウスの骨髄腫細胞である第１項に記載の単一クロー
   ン抗体。 ３、人の卵巣癌細胞で免疫された抗体産生細胞と骨髄腫
   細胞との融合によって形成され、次の性質を有するＩ（
   ｌ　Ｇ＋のクラスに屈する単一クローン抗体を産生づる
   ハイブリドーマ： （１）ムチン性嚢胞腺癌細胞、類内膜癌細胞、顔中腎癌
   細胞と反応する： （２）漿液性嚢胞腺癌細胞、ムチン性嚢胞腺腫細胞とは
   反応しない： （′３）卵巣腫瘍以外の子宮体部病、肺癌、乳癌、胃癌
   、肝癌、腎細胞病、大腸癌、肝癌、精上皮腫の細胞と反
   応しない： （４）卵巣、脳、心臓、肺臓、肝臓、胃、腸、膵臓、腎
   臓、子宮、卵管、翠丸の正常組繊細胞と反応しない； （５）トリプシンで分解しない。 ４、抗体産生細胞がマウスのＮ細胞であり、骨髄腫細胞
   がマウスの骨髄腫−胞である第５項に記載のハイブリド
   ーマ。