JPS60246362A - α−アミノ酸ヒドラジドの製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、α−アミノ酸ヒドラジドの製造方法に関する
ものである。

α−アミノ酸ヒドラジドは１例えば、アンド法によるペ
プチドの合成などに使用される前駆体になるものであり
、有機合成において価値のある化合物である。

α−アミノ酸からα−アミノ酸のヒドラジドを合成する
反応は、多数知られている。例えば、（１）α−アミノ
酸のα−アミノ基及び必要なら側鎖の官能基を保護基で
保護した上で、保護基を含有するα−アミノ酸誘導体を
＃無水物、酸ハロゲン化物あるいは酸アジド等の形で活
性化し、続いてこの活性化合物をヒドラジンと反応させ
、保！Ｉ基含有α−アミノ酸ヒドラジドに変換し、さら
に最終的に保護基を除く方法、　ｆ２Ｈ１＋と同様に保
護基を含有するα・−アミノ酸とヒドラジンとを脱水剤
存在下で縮合させてα−アミノ酸ヒドラジドに変換し。

最後に脱保護する方法、あるいは（３）α−アミノ酸を
、まずα−アミノ酸エステルに変換した後、ヒドラジン
と反応させてα−アミノ酸ヒドラジドに変換する方法な
どが代表的なものである。

これらの反応は、いずれもα−アミノ酸から多段階の工
程を経てα−アミノ酸ヒドラジドを合成するものである
。また、　ｉｌｌ、　＋２１においては高価な保護基が
必要となるうえ、有機溶媒が通常、必要となり、α−ア
ミノ酸ヒドラジドを製造する上で複雑な多工程の設備が
必要となる。

一方、安価なα−アミノ酸の混合物を原料に用いて特定
のα−アミノ酸からのみのα−アミノ酸ヒドラジドを合
成することは、非常に難しい。従って、α−アミノ酸混
合物中から、特定のα−アミノ酸のみのα−アミノ酸ヒ
ドラジドを製造するためには、α−アミノ酸混合物から
特定のα−アミノ酸を精製した後、ヒドラジド化反応を
行うか。

あるいは、α−アミノ酸ヒドラジドの混合物中から、特
定のα−アミノ酸ヒドラジドを分離精製することが必要
である。α−アミノ酸混合物中からの特定のα−アミノ
酸を分離するには、各種のα−アミノ酸の物性が、非常
に似かよっていることから、クロマトグラフィー等で分
離する場合でも容易ではない。同様に各種のα−アミノ
酸ヒドラジドの混合物中から特定のα−アミノ酸ヒドラ
ジドのみを分離精製することも、一般に容易ではない。

本発明者らは、これらのα−アミノ酸ヒドラジド製造上
の問題点すなわち、保３！基が必要であること１反応が
多段階で複雑であること等を解決し。

α−アミノ酸から単一の反応のみで進行し、保護基の必
要がない経済的なα−アミノ酸ヒドラジドの製造方法に
つき鋭意検討を重ねた結果、α−アミノ酸を核酸の一種
である転移リボ核Ｍ（以後ｔＲＮＡと略記。）に結合さ
せてアミノアシル−１ＲＮＡを合成する作用を有する酵
素であるアミノアシル−１ＲＮＡシンテターゼを触媒と
して使用すると、α−アミノ酸が単一の反応のみで容易
にα−アミノ酸ヒドラジドに変換されることを見い出し
、しかも安価な原料であるα−アミノ酸の混合物から目
的とするα−アミノ酸ヒドラジドを製造できることを見
い出し３本発明を完成した。

すなわち１本発明は、α−アミノ酸とヒドラジンとから
α−アミノ酸ヒドラジドを製造するに際し、触媒として
アミノアシル−ｔＲＮＡシンテターゼを用いることを特
徴とするα−アミノ酸ヒドラジドの製造方法である。

本発明の特徴とするところは、触媒としてアミノアシル
−ｔＲＮＡシンテターゼを用いることにより５α−アミ
ノ酸を何ら保護することなく、単一の反応のみでヒドラ
ジド化反応を起せしめてα−アミノ酸ヒドラジドを製造
することにあり、また、α−アミノ酸は必ずしも純粋な
ものである必要がなく、安価な二種以上のα−アミノ酸
の混合物であっても適当なアミノアシル−ｔＲＮＡシン
テターゼを選択することにより、目的とする特定のα−
アミノ酸をα−アミノ酸ヒドラジドに変換させることに
ある。

本発明に使用されるアミノアシル−ｔＲＮ＾シンテター
ゼは、酵素分類６．１．１に属し３次式アミノ酸＋ＡＴ
Ｐ　＋　ｔＲＮＡ→アミノアシル−ｔＲＮＡ　＋ＡＭＰ
＋ピロリン酸 の反応を触媒する酵素であり１例えば、ウサギ。

ウマ、ウシ、ラント、ニワトリ、ヘビなどの動物組織よ
り得られるもの、イネ、イモ、ｌ・マドなどの植物組織
より得られるもの、カビ、酵母、キノコ、細菌、放射菌
などの微生物及び藻類より得られるものなどがあげられ
る。なかでも、酵素の取得が容易であることから、微生
物より得られるものが好ましく、さらに酵素の安定性か
らバチルス・ステアロサーモフィルス、サーマス　サー
モフィルス、サーマス・フラバス、クロストリジウム・
サーモアセチカム、サーマス・マクアティカスなどの耐
熱性細菌より得られるアミノアシル−ｔＲＮ＾シンテタ
ーゼが最適である。

これら各種のアミノアシル−ｔＲＮＡシンテターゼは１
種々のα−アミノ酸に特異性のあるものとしては、チロ
シル−ｔＲＮ＾シンテターゼが、またロイシンに特異性
のあるものとしては、ロイシル−ｔＲＮＡシンテターゼ
が５さらにバリンに特異性のあるものとしては、バリル
−１ＲＮＡシンテターゼ、その他イソロシルーｔＲＮＡ
シンテターゼ、フェニルアラニル−ｔＲＮＡシンテター
ゼ、アラニル−１ＲＮＡンンテターゼ、グルタミル−ｔ
ＲＮＡシンテターゼ、アスパラギニルーｔＲＮ＾ンンテ
ターゼ、メチオニル−１ＲＮ＾シンテターゼ、ヒスチジ
ル−ＬＲＮ＾シンテターゼ、リジル−ｔＲＮＡシンテタ
ーゼ、トレオニルーｔＲＮ＾シンテターゼ、セリル−１
ＲＮＡシンテターゼ。

アスパラチル−ｔＲＮＡシンテターゼ、グルタミル−ｔ
ＲＮ＾シンテターゼ、システイニル−ｔＲＮ＾シンテタ
ーゼ、プロリル−１ＲＮＡシンテターゼ、グリシル−ｔ
ＲＮＡシ７テターゼ、アルギニル−ｔＲＮ＾シンテター
ゼ、トリプトファニル−ｔＲＮＡシンテターゼなどが具
体例としてあげられる。

これらの各種アミノアシル−ｔＲＮＡシンテターゼは、
−上記組織又は細胞をホモジナイザーやダイノミル等で
破砕したのち１例えばバイオケミストリー誌、１３巻、
　２３０７頁（１９７４年）に記載されているようにＤ
ＥＡＥ−セルロースカラムクロマトグラフィー、ヒドロ
キシアパタイトカラムクロマトグラフィーなどのクロマ
トグラフィー及び硫酸アンモニウムによる分別沈殿法な
ど通常の酵素精製法を用いて精製することによって得る
ことができる。

本発明で好ましく用いられるα−アミノ酸としては９例
えばチロシン、アラニン、ロイノン、イソロイノン。フ
ェニルアラニン、メチオニン、リジン、セリン、バリン
、アスパラギン、アスパラギン酸、グリシン、グルタミ
ン、グルタミン酸。

システィン、アルギニン、シスチン、ヒスチジン。

プロリン、トレオニン、トリプトファンなどがあげられ
る。

また、α−アミノ酸の混合物とは１例えば−■二記α−
アミノ酸を２種以上含むものをいい、これらのα−アミ
ノ酸の合計が、原料の乾燥重量のうら。

少なくとも５重量％、好ましくは３０重量％占めるもの
が好ましい。このα−アミノ酸の混合物中に。

脂質、炭水化物、核酸等の生体由来物質、無機イオン等
が混入あるいは混合されていてもよい。

このα−アミノ酸の混合物の例としては、大豆かす、綿
実かす、ごまかす、落花生かす等の植物性たんばく質を
加水分解したα−アミノ酸の混合物、魚かす（アンチョ
ビー）、入毛３羽毛、生糸くず等の動物性たんばく質を
加水分解したα−アミノ酸の混合物、酵母エキスやｓｅ
ｐ　＜シングルセルプロティン）等の微生物由来のたん
ばく質を加水分解したもの等の自然に存在するたんばく
質を加水分解して得たα−アミノ酸の混合物があげられ
る。また、これらのアミノ酸混合物を荒く精製した混合
物でもよい。さらに３通常９例えば食品加工業等から排
出される。たんばく質あるいはアミノ酸を含有する排液
なども中和、濃縮、濾過等の簡単な前処理を行えば、原
料として使用することが可能である。

このように、天然に存在するたんばく質から由来するα
−アミノ酸の混合物以外にも、任意の組成の化学合成さ
れたα−゛アミノ酸の混合物も原料として使用すること
が可能である。

本発明に使用されるヒドラジンとしては、一般式（１） ％式％（） （但し、Ｒ＋　、Ｒ２、Ｒ３は水素又は有機基を表す。

） で示されるヒドラジンが好ましい。その式中の有機基と
しては１例えば、メチル、エチル、プロピル、ブチルあ
るいは炭素数がこれ以上のアルキル基、アリル等の不飽
和アルキル基、シクロヘキシル基等の環状アルキル基、
フェニル、トリル、ヘンシル、ナフチル、あるいは核に
置換基を有するこれらの誘導体等の芳香族基を有する基
などがあげられる。また、ハロゲン尽、ニトロ基、カル
ボキシル基、カルボニル基、エステル基、アミド基。

水酸基等の官能基が上記の基の一部に導入されていても
よい。

このようなヒドラジン例としては、ヒドラジン。

メチルヒドラジン、エチルヒドラジン、プロピルヒドラ
ジン、フェニルヒドラジン、トリルヒドラジン、ソクロ
へキシルヒドラジン、アリルヒドラジン、ヘンシルヒド
ラジン、ナフチルヒドラジン。

ベンゾイルヒドラジン、アセデルヒドラジン、プロピオ
ニルヒドラジン、ブロモフェニルヒドラジン、ニトロフ
ェニルヒドラジン、１．】−ジノチルヒドラジン、■、
■−ジエチルヒドラジン、１．１−メチルフェニルヒド
ラジン、１−メチル−２−フェニルヒドラジン、１，１
−ジフェニルヒドラジン。

１．２−ジフェニルヒドラジン、トリメチルヒドラジン
、トリフェニルヒドラジンなどがあげられる。

本発明では、α−アミノ酸とヒドラジンとから。

触媒としてアミノアシル−ｔＲＮ八シへテターゼを用い
てα−アミノ酸ヒドラジドを製造するが、そのときにア
デノシン三リン酸の存在下で行うことが望まれる。この
アデノシン三リン酸は１反応を進めるうえでのエネルギ
ー源となる化合物であり。

そのような化合物であれば、他の類縁体の化合物に置き
換えてもよい。このような化合物としては。

例えば３゛−デオキシアデノシン三すン酸、アデノシン
三リン酸のβ又はＴ−チオ類縁体、あるいはアデニン環
に置換基の入ったアデノシン三リン酸などがあげられる
。

本発明において、α−アミノ酸、ヒドラジン。

アミノアシル−ｔＲＮＡシンテターゼ及びアデノシン三
リン酸の添加順序はいずれを先に添加してもよいが、酵
素の失活を考えて、アミノアシル−ｔＲＮ＾シンテター
ゼを最後に加えるのが望ましい。

このときに１反応に用いる媒体としては２本法が酵素を
触媒とする反応であるため、主成分として水を含有する
溶媒が選ばれる。また、酵素の活性が維持できる限度で
、水溶性の有８！溶媒を添加してもよい。水溶性の有機
溶としては９例えば。

メタノール、エタノール５アセトニトリル、ジオキサン
、テトラハイドロフラン、Ｎ、Ｎ−ジメチルピロリドン
、ジメチルスルホキシドなどがあげられる。このような
有機溶媒の添加は、原料のヒドラジンが水に難溶性であ
る場合、特に有効である。

このときに１反応を円滑に進行させ、酵素の失活を防ぐ
ことを主目的として１反応系にマグネシウム、マンガン
などの二価カチオン、メルカプトエタノール、ジチオス
レイトールなどのスルフヒドリル化剤、ピロホスファタ
ーゼを単独又は混合して添加してもよい。各添加剤の好
適な濃度としては、二価カチオン　０．０１ｍＭ〜５０
０ｍＭ　、スルフヒドリル化剤０．００１ｄ〜１００　
ｍＭ　、ピロホスファターゼ０．００１ユニツト／１〜
　１００ユニツト／ｍｌであり。

最適な濃度としては、それぞれ二価カチオン０．１ｍＭ
〜１１０１Ｗ、スルフヒドリル化剤０．０１ｍＭ〜１　
ｍＭ、ピロホスファターゼｌユニット／ｍ１〜１０ユニ
ツト／ｍ１である。また、酵素の活性を維持するため、
溶媒に緩衝液を添加することが好ましい。その緩衝液の
濃度としては、１０抛門以下が好ましい。その緩衝液と
しては、α−アミノ酸、ヒドラジン、アミノアシル−ｔ
ＲＮＡシンテターゼ及びアデノシン三リン酸が溶解し、
しかも酵素活性を維持し、所望のｐｌ＋が得られるもの
であれば５いかなるものを使用してもよい。そのような
具体例として１例えばトリス塩酸塩緩衝液、ヘペス緩衝
液、トリエタノールアミン緩衝液、マレート緩衝液、リ
ン酸緩衝液、ビシン緩衝液、エソブス緩衝液などがあげ
られる。　次に反応条件について述べると、アミノアシ
ル−ｔＲＮ＾シンテターゼは１通常２反応の至適ｐｉを
７〜９付近にもつため５反応液のｐｌ（を、上記緩衝液
で５ないし１１に、好ましくは６〜１０に制御すること
が好ましい。また１反応の温度としては。

アミノアシル−ｔＲＮＡシンテターゼの触媒活性が維持
できる限り、特に限定されないが１通常０〜７０℃が好
ましく、最適には、１０〜４０℃で行うことが好ましい
。さらに原料の濃度としては、特に限定されるものでは
ないが、実用的な収量を得るためには、目的のα−アミ
ノ酸の濃度が０．１ｍＭ以上。

好ましくは１１１１Ｍ以上とし、アデノシン三リン酸を
目的とするα−アミノ酸に対し、１−１０倍、好ましく
は１〜５倍相当量を使用し、アミノアシル−ｔＲＮＡシ
ンテターゼを、目的とするアミノ酸に対し。

１）１〜１／１００，０００相当量、好ましくはＩ／１
００〜い。また、ヒドラジンの濃度は１通常、　１０ｍ
Ｆから１０Ｍの範囲が好ましい。　本発明によれば、α
−アミノ酸のアミノ基を保護することなく、常温。

常圧の極めて穏和な条件下でα−アミノ酸のヒドラジド
を合成することが可能である。また、安価な原料である
α−アミノ酸の混合物から特定のα−アミノ酸のみを５
選択的にヒドラジド化することが可能である。

以下１本発明を実施例により具体的に説明する。

なお、実施例中で、酵素の濃度は、ユニット単位で表示
しており、このユニットは、以下のように定義する。

＋１１アミノアシル−ｔＲＮ＾シンテターゼ；１ユニ、
トは、１０分間に３０℃で１μｍｏｌｅのα−アミノ酸
を。

アミノアシル−ｔＲＮＡに変換する能力。

（２）ピロホスファターゼ；ｌユニットは、ピロリン酸
から、１．０μｍｏｌｅの無機りん酸を、１分間に２５
℃で、　ｐ＋＋　７．２で生成させることができる能力
。

参考例１ バチルス・ステアロサーモフィルスｕＫ７８８　（ｍ工
研菌寄　第５１４１号）の菌体６ｋｇを２倍量の１００
ｍＭトリス・塩酸緩衝液（ｐＨ７，５）に懸濁し、ダイ
ノミルを用いて細胞を破砕後、遠心分離により不溶物を
除去し、ヒスチジンに特異的なヒスチジル−ｔＲＮ＾シ
ンテターゼを含む粗抽出液を得た。あらかじめ５ＩＩＩ
Ｍメルカプトエタノール、２ｍＭエチレンジアミン四酢
酸ナトリウム及び０．１ｉ＋Ｍホスホフェニルスルホニ
ルフルオリドを含む５０ＩＩＩＭトリス緩衝液（ｐＨ７
，５）で平衡化したマートレソクスゲルレノドへ（アミ
コン社製）を充填したカラムに、上記の粗抽出液をとお
し、塩化カリウムを上記緩衝液に加えた溶液で、線速度
６０ｃｍ−ｈ−’で溶出せしめると、ヒスチジル−ｔＲ
ＮＡシンテターゼが溶出した。この区分を集め、　ｔａ
縮、脱塩を行った結果。

約５２％の収率でヒスチジンに特異的なヒスチジル−ｔ
ＲＮＡシンテクーゼを含む粗酵素液を得た。上記操作を
すべて４°Ｃで行った。

参考例２ バチルス・ステアロサーモフィルスｔｌＫ７８８５ｋｇ
よりバイオケミストリー誌１３巻、　２３０７頁（１９
７４年）記載の方法に従い、チロシンに特異的に作用す
るチロシル−ｔＲＮＡソンテタ−ゼを精製した。

精製酵素の収率は６７％で、総ユニットは７００．００
０ユニツトであった。

参考例３ サツカロミセス・セルビシアエα５２８８Ｃｌ０００ｇ
をダイノミルで細胞破砕後、得られた粗抽出液を硫酸ア
ンモニウム分画、　ＤＥＡＥ−セルロースクロマトグラ
フィー、リン酸セルロース（ワットマン社製）クロマト
グラフィー、　ＤＥＡＥ−セファセル（ファルマソア社
製）クロマトグラフィー、ウルトロゲルＡＣ＾３４クロ
マトグラフィー及び側−セルロース（ワットマン社製）
クロマトグラフィーでロイシンに特異的なロイシル−Ｌ
ＲＮＡＲＮＡシンテターゼ２ｇを得た。

実施例１ アデノシン三リン酸・二ナトリウム塩３ｍｇ＋Ｌ−ヒス
デシン１．６ｎ＋ｇ、塩化マグネシウム六水和物１０ｍ
ｇ、及びフェニルヒドラジン塩酸塩４３ｍｇを含む５０
ｍＭ−ビシン緩衝液溶液８００μＰを調整し、　ｐＨを
水酸化ナトリウムで８．０とした。これに参考例１で得
られた濃度がｌＯ万ｕｎｉｔ／ｍｌ　まで濃縮されたヒ
スチジル−ｔＲＮＡシンテターゼ２００μｐを加え。

十分攪拌後、　３０℃で２日放置して反応を完結させて
反応混合物を得た。

この反応混合物に、　０．ＩＮ−水酸化ナトリウム１０
ｍ１を加え、酢酸エチル２０ｍ　ｌで３回抽出した。酢
酸エチル層は、混合して蒸溜水で２回洗浄後無水硫酸ナ
トリウムで乾燥させ、しかる後溶媒を減圧下で蒸発させ
て除去した。蒸発残査を、０．５ｍｌの水と０．５ｍｌ
のアセトニトリルの混合物に溶解後。

ボンダパックＣ１１ｌカラム（つＡ　ターズ社製）を担
体とし、アセトニトリル１５０ｍＭ−リン酸カリウム水
溶液を展開溶媒として、高速液体クロマトグラフィーで
生成物を分離した。

この生成物は、１−Ｌ−ヒスチジル−２−フ１、ニルヒ
ドラジドであり、収量は２．１ｇｇであった。

この化合物の元素分析（Ｃ＋□）（＋ｓＩ’Ｊｓ　０＝
２４５．２８）の結果は２次のとおりであった。

計算値（％’）　Ｃ＝５８．７６、Ｈ＝６．１６．Ｎ＝
２８．５５実測埴（％）　Ｃ＝５８．８２．８＝６．２
＋、Ｎ＝２８．４７実施例２ α−アミノ酸として、Ｌ−ヒスチジン１．６ｍｇ。

し−セリン１．Ｑｍｇの混合物を使用すること以外は。

実施例１と全く同様にして１−Ｌ−ヒスチジル−２−フ
ェニルヒドラジドＬ　３ｍｇを得た。

このトキに、１−Ｌ−セリル−２−フェニルヒドラジド
の生成は検出されなかった。

実施例３ アデノシン三リン酸・二ナトリウム塩３Ｑｍｇ、Ｌ−チ
ロシン３．６ｍｇ＋　グリシン１．５ｍｇ、Ｌ　−バリ
ン２．３ｍｇ、塩化マグネシウム六水和物１０２ｍｇ及
びジチオスレイトール８ｍｇを、　２０ｍＭのヘペス緩
衝液に溶解し、水酸化ナトリウムでｐＨを８．５に調整
し。

さらに２０ｍＭのビシン緩衝液を加えて、溶液量を７．
５ｍｌとし、５０℃程度に加熱して均一な溶液を得た。

この溶液を、室温に戻した後、ピロホスファターゼ（ヘ
−リンガ−・マンハイム社製、　２０ｕｎｉｔ／ｍｌ）
　０．５ｍｌ、塩酸でｐＨを８．５に調整した５Ｍ−１
，１−ジメチルヒドラジン水溶液１ｍｌ及び参考例２で
得られた２０万ｕｎｉｔ／ｍｌ　のチロシル−ｔＲＮＡ
シンテターゼで溶液１ｍｌを混合し、総計１０ｍ１とし
た。この溶液を３０℃の恒温槽中で一日放置して反応を
完結させて反応液を得た。

次いで得られた反応液にアセトン２００ｍ　ｌを加え。

沈殿を濾別後、上清をエバポレーターにて、溶媒を蒸発
乾固した。得られた固体を水に再熔解後。

ボンダパックＣ１１ｌカラム（ウォーターズ社製）に供
し、アセトニトリル１５０ｍＭリン酸カリ水溶液（５／
９５）　ｐｉｔ　６．５を展開溶媒として用いて分離し
、１−Ｌ−チロシル−２，２−ジメチルヒドラジド１．
６Ｉ１ｇを得た。

この収率は、チロシンを基として約５０％であった。ま
た、グリシン及びバリンのヒドラジドは認められなかっ
た。

この化合物の元素分析（ＣＩｌＨ１７Ｎ３０２　＝２２
３．２７）の結果は９次のとおりであった。

計算イ直　（％）　Ｃ＝５９．１８．Ｈ＝７．６７、Ｎ
＝１８．８２実測値（％）　Ｃ＝５９．２１．　Ｈ＝７
．７０．　Ｎ　＝１８．８０実施例４〜７ 実施例３と同様の条件下でヒドラジンとして。

ヒドラジン、メチルヒドラジン、エチルヒドラジン、Ｐ
−トリルヒドラジンの四種のヒドラジンを用い２反応を
行った。

反応混合液を、そのままプルハノクスＯＤＳ　（デュポ
ン社製）を担体とし、溶出液としてアセトニトリル１５
０ｍＭ−リン酸カリウム水溶液を使用し。

アセトニトリル濃度を０〜５０％にグラディエンドをか
けながら、高速液体クロマトグラフィーで分析した。

それぞれチロシル−ヒドラジド、１−Ｌ−チロシル−２
−メチルヒドラジド、１−Ｌ−チロシル−２−エチルヒ
ドラジド、１−Ｌ−チロシル−２−Ｐ−トリルヒドラジ
ドの生成が認められた。

グリシン及びし−バリンからのヒドラジドは。

いずれの場合も実質上高速液体クロマトグラフィーでは
検出されなかった。

出発原料中の１７−チロシン量を基準に収率を計算する
と表１の結果となった。

表１ 実施例８ 小麦グルテン１５ｇを、濃塩酸２００ｍ１に加え、−夜
装置し、２４時間煮沸分解後、減圧下で塩酸を除去した
。蒸発残査に２０ｍＭ−エノプス緩衝液約３００Ｍ１を
加え、水酸化ナトリウムでｐＨを８．３に調整した後、
不溶分を濾過して除き、さらに２０ｍＭ−工・ノプス緩
衝液（ｐＨ８，５）を加えて、最終的に容量を５００ｍ
　ｌとした。

この溶液５００μｐに、アデノシン三リン酸二ナトリウ
ム塩３ｍｇ、塩化マグネシウム六水和物１０ｍｇ。

ピロホスファターゼ（２０ｕｎｉｔ／ｍｌ　）　ｌＯμ
ｆｔ　、及びフェニルヒドラジン４７ｍｇを添加し、　
ｐＨを８．３に調整した後、蒸溜水を加え、９００　μ
ｌの溶液とした。

これに参考例３で得られたロイシル−ｔＲＮＡシンテタ
ーゼ（５万ｕｎｉｔ／ｍｌ　）　１００＃　ＩＩを加え
て、　３０℃で２日間反応させて反応混合物を得た。

得られた反応混合物を口径１μｍのメンブランフィルタ
−で濾過後、濾液を分取用高速液体クロマトグラフィー
にかけ、実施例２の溶出条件で。

生成物を分取した。

この生成物は、１−Ｌ−口イシル−２−フェニルヒドラ
ジドであり、収量は１　、９ａ＋ｇであった。

この化合物の元素分析（Ｃ，２Ｈ，、Ｎ３０　＝２２１
．３０）の結果は１次のとおりであった。

計算イぽｙ　（％）　Ｃ＝６５．１３．Ｈ＝８．６５．
Ｎ＝１８．９９実測値（％）　Ｃ＝６５．１３．Ｈ＝８
．６７、Ｎ＝１８．９２特許出願人　ユニチカ株式会社

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 ＋１．１α−アミノ酸とヒドラジンとからα−アミノ酸
   ヒドラジドを製造するに際し、触媒としてアミノアシル
   −ｔＲＮＡンンテタ−ゼを用いること特徴とするα−ア
   ミノ酸ヒドラジドの製造方法。 （２）α−アミノ酸が、２種以上のα−アミノ酸の混合
   物である特許請求の範囲第１項記載の製造方法。 （３）ヒドラジンが、一般式（１） ％式％ （但し、Ｒ＋　、Ｒ２−Ｒｘは水素又は有機基を示す。 ）で示されるヒドラジンである特許請求の範囲第１項又
   は第２項記載の製造方法。