JPS60258120A - 胸腺製品の製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） この発明は医薬に関し、さらに詳しくは胸腺製品及びそ
の製造方法に関し、そしてこのものは、ヒトにおける擾
乱された免疫過程の回復、再生、造血、凝血、並びに炭
水化物、脂肪及び蛋白質代謝の正常化のために有用であ
る。

（従来技術） ヒト及び動物の胸腺組織の抽出物中に、生物の成長及び
発達、並びに幾つかの免疫過程及び代謝過程に顕著な影
響を与える生理的に活性な物質が存在することが知られ
ている（　Ｏｏｍｓａ　Ｔ、、　Ａｍｅｒ。

：ｒ、　Ｍｅａ、　Ｓｏｉ、　２５０．７９．１９６５
　；　Ｇｏｌｅｔｅｉｎ　Ａ。

等、Ｊ、工ｍｍｕｎｏ１．　、１４０．３５９．１９７
０３　ソ連発明者証出願第４５９２２７号；米国特許第
４、１２０．９５１号を参照のこと）。

文献から得られるデータに従えば、子牛の胸腺からの抽
出物〔チモシン（ｔｈｙｍｏｓｉｎ　）　）は、ある種
の腫瘍性及び先天性免疫不全症の症例において、ヒトの
免疫系の機能の回復のための治療目的で使用される（　
Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎ　Ａ、等、Ｔｒａｎ８ｐｌａｎｔＰ
ｒｏｏ、　７．　１（５ｕｐ１）：１．１　）　、　６
８１．１９７５　；及びサカイ等５Ｏａｎｃｅｒ　５６
．３．９７．３．１９７５　）。

胸腺製品を患者に投与することにより、生物の攪乱され
た免疫反応が回復する。現在まで、ＷＩｉ腺組織組織得
られた生理的活性物質の治療効果、及び医療の実際にお
けるその使用が検討されているが、不十分である。

１、０００〜１４．１１００ドルトンの分子量を有する
ポリペプチドの複合体（約３０の成分から成る）を含ん
で成る（　Ｈｏｏｐｅｒ等、Ａｎｎ、　Ｎ、　Ｙ、　Ａ
ａａｄ。

Ｓｏｉ、、　２４９．１２５．１９７５　）胸腺組織か
らの医薬製品、すなわちチモシン（ｔｈｙｍｏｓｉｎ　
）　（Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎ九等、Ｐｒｏ、　Ｎａｔ、　
Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳＡ、　６９．７．１８００
゜１９７２　）が当業界において知られている。チモシ
ンの製造のために次の方法が用いられる（　Ｈｏｏｐｅ
ｒ等、１９７５　）。

子牛の胸腺を０．１５　ＭのＮａａｔ溶液中でホモジナ
イズし、１４，０ＯＯＧで遠心分離し、上清液を分離し
、そして８０Ｃの温度で加熱し、生成した沈澱をｒ失し
、残留溶液に５溶量のア七トンを加える。得られた沈澱
をフィルター上で乾燥し、次に再度溶解し、そして硫酸
アンモニウムを用いてまず２５％飽和で塩析し、次に５
０％飽和で塩析する。塩析操作により得られた沈澱を濾
過し、セファデックスＧ−２５のカラム中で脱塩し、そ
して凍結乾燥する。精製のこの段階において標品中　ｌ
に含有されるポリペプチドの得られた複合体は最も顕著
な生物学的活性、すなわち細胞免疫を刺激する能力を有
する（　Ｈｏｏｐｅｒ等、１９７５　）。

この標品をさらに精製すれば生物学的活性が低下する。

この方法により製造されたチモシンは、６．５〜６７の
等電点及び１．０００〜１４．［１００ドルトンの分子
量を有し、そして実質的に支配的な量のアスパラギン酸
及びグルタミン酸を含む（合計量がチモシンの５０重量
％に達する）酸性ポリペプチドの複合体を含有する。

しかしながら、チモシン製造のためのこの方法はむしろ
複雑であり、そして多段階的である（合計１０段階）点
に注意すべきである。操作の数はこの方法を工業的に適
用する場合の幾つかの困難性（限外濾過、セファデック
スバッキングの使用）と関連する。この方法によっては
高収量で医薬製剤、すなわちチモシンを得ることができ
ない。チモシンはまた、多くの患者において幾つかの副
作用及びアレルギー反応を生じさせる。チモシンの療法
的有効性及び医療の実際においてこれを適用する可能性
は十分に研究されていない。

（発明が解決しようとする間顯点） この発明は、アルカリ性ポリペプチドを含有し、薬理学
的作用の広いスペクトルを有し、他方において副作用及
び適用に対するアレルギー反応が除去されている、胸腺
に基礎を置く医薬製剤を提供することを目的とする。

この発明の他の目的は、免疫不全の症例において高い臨
床的効果を保証するアルカリ性ポリペプチドの分離を含
んで成る、単筒な方法により高収量を保証する、胸腺か
らの医薬製剤の製造方法を提供することである。

（間一点を解決するための手段） これらの目的は、６００〜６．　ＯＤ　Ｏドルトンの分
子量を有するポリペプチドを含んでなる胸腺製品であっ
て、その１０〜２０重爪％が７〜９の等電点及び２，０
００〜４．　ＯＯＯドルトンの分子量を有するポリペプ
チドであり、さらに３，５〜６．７の等電点を有するポ
リペプチドを含有することを特徴とする製品を提供する
ことにより達成される。

この発明の胸腺製品の医療の実際における使用により、
生物の低下した免疫反応性を刺激し、修復過程の活性及
び造血活性を輪化し、そして生物における感染過程及び
破壊過程の進行を防止することが可能になり、これによ
り多くの病気のより効果的な治療又はこれらの病気のヒ
トにおける行ｉ１ｆ：を防止することが可能となる。こ
の発明の胸腺製品を病院において使用することにより、
慢性疾患及び欅乱された害生過程を有する患者の治療期
間を短縮することが可能となるであろう。このことは、
医療におけるこの発明の使用の効果に関連する決定的要
因となるであろう。

この発明の胸腺製品は、この中にアルカリ性ポリペプチ
ドが存在するため、公知の胸腺を基礎にした製品と異な
り、損傷された組織の再生過程を刺激し、このことは創
傷、潰瘍の治癒期間の短縮において示され、又は造血の
刺激において、末梢血中の白血球、栓球及び赤血球の含
量が減少している症例におけるこれらの数の増加によっ
て示される。

この発明の胸Ｍｌ製品はなんらの副作用又はアレルギー
反応も惹起しないが、チモシンの投与により２０〜３０
％の患者においてアレルギー反応が生ずることが文献か
ら知られている。

この発明はまた、胸腺製品の製造方法に関し、この方法
はｆｌ喋組織をホモジナイズし、得られたホモジネート
を沈澱及び上清液に分離し、後者を有機溶剤により処理
し、そして次に目的生成物を分離することを含んで成り
、この場合に前記の分離に先立って、胸腺組織のホモジ
ネートを塩化亜鉛の存在下で１〜１０％酢酸水溶液によ
り、少なくとも２４時間抽出することを特徴とする。

この発明の方法は単純な方法であることを特徴とし１、
そして商業的規模において容易に再現する。

この方法は、大形の蛋白質及び他の高分子化合物の加水
分解、並びに胸腺からの製品の高い精製程度における十
分に高い収得を可能にし、そしてこの製品は、ヒトに導
入した場合、副作用又はアレルギー反応を惹起しない。

　１ 触媒量の塩化亜鉛の存在下で酢酸を用いる幾分長時間の
抽出の使用はアルカリ性ポリペプチドの回収に寄与し、
このポリペプチドは、製品中に存在する場合、拡大され
た範囲の薬理学的効果を保証する。

最大の生物活性を有し、７〜９の等電点及び２、．００
０〜４，０００ドルトンの分子量を有するポリペプチド
の最大の回収を保証する観点から、抽出を、４８〜７２
時間にわたり、ｐＨ２，５〜４において、５７ｍ’〜１
５Ｃの範囲の温度において、酢酸を当り０．２〜２ｆ！
の量の塩化亜鉛の存在下で行うのが好ましい。

生物学的活性物質すなわちアルカリ性ポリペプチドの十
分な回収のため、及び出発材料の保存のために、胸腺を
、ホモジナイズするのに先立って一３０Ｃ〜−５０Ｃの
湿度にて少なくとも１００時間保持するのが好ましい。

発明者等は、胸腺からの製品の性質を、Ｈ＋形のカルボ
キシル陽イオン形［ビオカーブ（Ｂｉｏａａｒｂ　）　
上でのイオン交換クロマトグラフ法（Ｎ、　Ｎ、　Ｋｕ
ｚｎｅｔｓｏｖａ等、Ｈｌｇｈ−ｍｏｌｅｃｕｌａｒＯ
ｏｍｐ、、　１８α、　２．２３５．１９７６を参照の
こと）、ゲル濾過（？ｉｇｈ等、Ｔ、　Ｂｉｏｌ、　Ｏ
ｈｅｍ、、　２４４．４９８９゜１９６９　）　、紙上
又はポリアクリルアミドゲル中でのゾーン電気泳動（常
法に従って）、並びにアミノ酸分析（スタイン及びムー
アの方法、Ｔ、　Ｂｉｏｌ。

Ｏｈｅｍ、、　１７６、５０７．１９４８による）によ
り検討した。

イオン交換クロマトグラフ法により、回収された化合物
がその電気化学的性質を異にする３つの両分を特定の比
率で含有することが見出された。

この発明の胸腺製品に含有される両分の物理化学的性質
を下記の第１表に示す。

画分■、■、及び川は、ゾーン電気泳動法により同定さ
れる多数の成分を含んで成る。各画分の分子量はセファ
デックスＧ−２５を用いるゲル濾過法により測定した。

第　１　表 面分１．４０〜７０　６００〜１．０００　３．５〜５
．０画分ｎ　２０〜４０　５，０００〜６．ＯＤＤ　５
．５〜６．７上記の両分のペプチドのアミノ酸組成を決
定するために、自動アミノ酸分析器”ｂＫＢ−５２０１
”（スエーデン）を使用した。測定方法はＳｐ＆ｏｋｍ
ａｎ　Ｄ、　Ｈ，等、Ａｎａｌ、　Ｏｈｅｍ、　１９５
８．３０゜１１９０〜１２０６　に記載されている通り
とした。

この発明の胸腺製品のアミノ酸組成を第２表に示す。

第２表 スレオニン　５．７　６．３　６．４　５．８セリン　
５．７　６．５　７．５　１０．４グルタミン階　６．
２　Ｂ、６　１４．１　６．２ブローリン　１０．１　
１０．８　１３．２　９．５グリシン　８．６　１０．
４　１１．７　１０．１アラニン　１０．７　１２．６
　８．７　１８．６シスチン　３．４　２．６　１．０
　０．９バリン　８．８　５．２　６．５　３．５メチ
オニン　痕跡　痕跡　−− イソ四イシン　６．９　２．３　４．９　１．３ｐイシ
ン　６．７　６．２　５．８　！１．２チ四シン　２．
４　１．２　２．４　０．８フエニルアラニン　３．２
　１．７　３．３　０．９ヒスチジン　２．９　２．９
　２．２　０．５リジン　７．０　８．５　７．１　２
１．６アルギニン　８．５　７Ｂ　４．６　２．１トリ
プトフアン　痕跡　痕跡　痕跡　痕跡６００〜６．００
０ドルトンの分子量を有するこの発明の胸腺製品の生物
学的活性及び広範囲の薬理学的効果は、この中に７〜９
の等電点及び２．０００〜４．０００の分子量を有しそ
して塩基性アミノ酸成分、例えばリジンの存在により特
徴付けられるポリペプチドが１Ｄ〜２０重量％存在する
ことと関連する。この発明の胸腺製品は、その物理化学
的性質及びアミノ酸組成に関し、１，０００〜１４，０
００ドルトンの分子量を有しそしてかなり支配的なグル
タミン酸及びアスパラギン酸に　“）□れらの合計が製
品の５０重量％に及ぶ）を含有する（　Ｈｏｏｐｅｒ等
％　Ａｎｎ　、　Ｎ　、　Ｙ　、　Ａｏａｄ、　Ｓｃｉ
、　、　２４９゜１２５、１９７５　）ポリペプチドの
複合体（等電点３．５〜６．７）から成るチモシンと異
なる。

この発明の胸腺製品は次のようにして製造される。

血管、血液凝固物及び脂肪組織を除去して胸腺を清浄に
し、水で洗浄し、そしてホモジナイズする。

出発物質の転換を確実にし、そして生物学的活性物質、
すなわち等電点６．５〜６．７及び７〜９を有するポリ
ペプチドの収量を増加するため、ホモジナイズに先立っ
て胸腺組織を一５０Ｃ〜−３０Ｃの範囲の温度に保持し
、又は−２０Ｃ〜−１Ｃの温度において有機溶剤、例え
ばアセトン、クロロホルム、又はエタノールで処理する
のが好ましい。

胸腺組織のホモジネートを塩化亜鉛の存在下で１〜１０
％酢酸水溶液により少なくとも２４時間抽出する。この
ような条件下での抽出は、２，０００〜４．００　Ｄ　
Ｄｔ　（ドルトン）の分子量及び７〜９の等電点を有す
るポリペプチドの最も十分な回収に寄与し、そして胸腺
製品を患者に適用した場合にアレルギー反応を生じさせ
る蛋白質及び高分子化合物の除去な確実にする。抽出の
ための最適条件は、ｐＨが２，５〜４、湿度が５Ｃ〜１
５Ｃ１所要時間が４８〜７２時間、そして塩化亜鉛の濃
度が酢酸！当り０．２〜２１である。

抽出が完了した後、得られた基材を沈澱と上清液とに分
離し、上清液を有機溶剤、例えばアセトン、クロロホル
ム、エタノールで処理し、次に、生成した沈澱を回収す
る。後者を粉状に乾燥する。

この粉状物は生物学的活性物質、すなわちポリペプチド
を含有する。

この粉末を酢酸に溶解し、この溶液を１過により無菌化
し、そして１ｍｌの無菌フラスコに注入し、このフラス
コをゴム栓で密閉する。１個のフラスコが胸腺から得ら
れた物質１０ｍｇを含む。

こうして得られたこの発明の胸腺製品は、生物学的活性
物質、すなわち相互の比率が等電点３．５〜６．７のポ
リペプチド９０〜８０重量％、及び等電点７〜９のポリ
ペプチド１０〜２０重量％である、分子量６００〜６．
ＤＯＯＤｔのポリペプチドを含有する。

この発明の胸腺製品は白色粉末、又は黄味を帯びた白色
粉末であり、５％酢酸溶液及び水に可溶性であり、そし
てアルコールに実質上溶解しない。

このものは蛋白質を実質上含有せず、そして１％水溶液
のｐＨは５〜５８である。胸腺製品は、乾燥した遮光場
所において、２０Ｃ以下の湿度にて２年間貯蔵される。

胸腺製品は骨及び軟組織の化膿性炎症疾患、慢性の外傷
性及び造血性骨髄炎、骨折、熱傷病変、栄養性潰瘍、床
ずれ、組部の放射環化、閉塞性アテローム性動脈硬化症
、慢性肺炎、胃及び−二指脱潰瘍、並びにそれぞれ胸腺
の機能低下、癌患者における放射線療法及び化学療法後
における免疫及び造血の阻害と関連する症状の治療に用
いることができる。この発明の胸腺製品はまた、感染性
併合症、多量の抗生物質を伴う放射線療法又は化学療法
の過程における、外傷後及び手術後の免疫造血、再生過
程の阻害の予防のために使用することができる。このも
のはまた、抗細菌性療法に対する不耐性、又はこの療法
による効果の欠除の場合に、及び生物における炭水化物
、脂肪及び蛋白質代謝の機能的撹乱に対する正常化剤と
して使用することができる。

発明者等は、この発明の胸腺製品の簡単で安価な製造方
法を示唆した。この方法は商業的規模で容易に実施する
ことができ、高品位の製品を、例えばチモシンの収量を
５位以上の高い収量において提供する。

次に、この発明をさらに詳細に説明するため、例を記載
する。

例１゜ ５００ｙの胸腺組織から血管、凝血、脂肪組織を除去し
て清浄化し、次に水及びアセトンで洗浄し、そしてこの
後、胸腺に対して４：１の重量比のアセトンに入れ一１
Ｃにおいて２４時間保持し、そしてホモジナイズする。

得られた胸腺ホモシネ　１：：−トを、３％酢酸水溶液
中に１！６の重量比で加える。酢酸２ｅ当り１ｙの塩化
亜鉛の存在下で、Ｉ）Ｈ６，２，１０ｔｌｌ”の湿度に
て７２時間抽出を行う。抽出が完了した後、基材をｇ、
ｏｏｏｒｐｍにて２０分間遠心分離し、上清液を分離し
、そして１：５の重量比でアセトンを加える。生成した
沈澱を１過により回収し、そしてアセトンで洗浄し、フ
ィルター上で乾燥する。得られた５グの白色粉末は生物
学的活性物質、すなわち６００〜６．０００　Ｄｔの分
子量を有し、・そして６．５〜６．７の等電点を有する
ポリペプチド８０重量％及び７〜９の等電点を有するポ
リペプチド２０重量％から成るポリペプチドを含有して
いた。

こうして胸腺から得られた製品は５％酢酸及び水に可溶
性の白色粉末であり、１％水溶液のｐＨは５．５である
。

この発明に従って胸腺製品の医薬を製造するために、上
記のようにして製造した粉末Ｂ５００ｍ１の１％酢酸に
溶解する。この製品の溶液をｒ過により無菌化し、そし
て１ｄの無菌フラスコに注入し、凍結乾燥し、そしてゴ
ム栓で密閉する。結果として、１本のフラスコは胸腺か
ら得られた１０即の物質を含有する。

例２． ５００１の胸腺な、血管、凝血、脂肪組織を除去するこ
とにより清浄にし、水及びクロロホルムで洗浄し、そし
て胸腺組織に対して８：１の重量比でクロ四ホルムに入
れ、−１ＤＣの温度にて４８時間保持し、次にホモジナ
イズする。

胸腺組織の得られたホモジネートを、１％酢酸水溶液に
、１：１０の重量比で加える。酢酸！当り２ＦＩの塩化
亜鉛の存在下で、ｌｌＨ４，１５Ｃの温度にて４８時間
抽出を行う。抽出が完了した後、基材を２４時間ｒ過し
、上澄液を分離し、り００ホルムを１：８の重量比で加
える。生成した沈澱をＰ’ｌＡにより回収し、そしてク
ロ四ホルムで洗浄し、次にフィルター上で乾燥する。こ
うして得られた３１の白色粉末は、生物学的活性物質、
すなわち６００〜６．０００Ｄｔの分子量を有し、そし
て３．５〜６．７の等電点を有するポリペプチド９０重
量％及び７〜９の等電点を有するポリペプチド１０重量
％から成るポリペプチドを含有する。

得られた胸腺組織の製品は５％酢酸及び水に可溶性の白
色粉末であり、１％水溶液のｐＨは５．８である。

この製品の溶液Ｔｔ濾過により除菌し、そして１ｍｌの
無菌フラスコに注入し、次に凍結乾燥し、そしてゴム栓
で密閉する。結果として、１本のフラスコは胸腺から得
た物質１０〜を含有する０例３． ５００１の胸腺組＃ｌｌ′ｆ：、血管、凝血、脂肪組織
を除去することによって清浄にし、水で洗浄し、そして
ホモジナイズする。胸腺の得られたホモジネートを１０
％酢酸水溶液に、１：４の重量比で入れる。酢酸！当り
０，２１の塩化亜鉛の存在下で、ｐＨ２，５，５Ｃの温
度において、２４時間抽出を行う。抽出が完了した後、
基材を５，０００ｒｌｌｌｌにて１０分間遠心分離し、
上清液を分離し、そしてこれにエタノールを１：１０の
重量比で加える。生成した沈澱を濾過により分離し、そ
してエタノールで洗浄し、次にフィルター上で乾燥する
。こう１・て得られた４ｆの白色粉末は、生物学的に活
性な物質、すなわち６００〜６．０００　Ｄｔ　の分子
量を有し、そして３．５〜６．７の等電点を有するポリ
ペプチド８７重量％及び７〜９の等電点を有するポリペ
プチド１６重量％から成るポリペプチドを含有する。

こうして得られた胸腺製品は５％酢酸に可溶性の白色粉
末であり、そして１％水溶液のｐｉｉは５．３である。

こ゛の胸腺製品の医薬を製造するために１粉末を４００
ｄの３％酢酸に溶解する。この溶液を濾過により無菌化
し、そして１ｍｌの無菌フラスコに油送し、次に凍結乾
燥し、・そしてゴム栓で密封する。

結果として、１本のフラスコは胸腺から得られた物質１
００ｒｎｙを含有する。

例４゜ ５００ノの胸腺組織を、血管、凝血、脂肪組織を除去す
ることによって清浄化し、水で洗浄し、−３０Ｃにて２
００時間保持し、この後ホモシナ　８１．・イズする。

胸腺の得られたホモジネートを１；５の重量比において
５％酢酸水溶液に入れる。酢酸ｐ当り０５２の塩化亜鉛
の存在下で、ｐ　Ｈ４，１２Ｃの温度にて５６時間抽出
を行う。抽出が完了した後、基質を４，０００囮にて２
０分間遠心分離し、上澄液を分離し、そしてこれに１！
乙の重量比でアセトンを加える。生成した沈澱を遠心分
離し、そしてアセトンで洗浄し、フィルター上で乾燥す
る。５．５１の得られた黄味を帯びた白色粉末は、生物
学的活性物質、すなわち６００〜６．０００の分子量を
有し、３．５〜６７の等電点を有するポリペプチド８２
重量％及び７〜９の等電点を有するポリペプチド１８重
量％から成るポリペプチドを含有する。

胸腺から製造されたこの製品は黄色を帯びた白色粉末で
あり、５％酢酸に可溶性であり、１％水溶液のｐＨは５
．２である。

胸腺製品の医薬を製造するために、得られた粉末を５５
０ｍ１の４％酢酸に溶解する。この製品の溶液を濾過に
より無菌化し、そして１ｍｌの無菌フラスコに注入し、
そして凍結乾燥し、そしてゴム栓で密閉する。結果とし
て、１本のフラスコは胸腺から得られた物質１０ｍ９を
含有する。

例５゜ ５００１の胸腺組織を、血管、凝血、脂肪組織を除去す
ることにより清浄にし、水で洗浄し、−５Ｏｒにて１０
０時間保持し、この後ホモジナイズする。胸腺の得られ
たホモジネートを１＝７の重量比で、２％酢酸水溶液に
入れる。酢酸形当り１．５１の塩化亜鉛の存在下で、１
）　Ｈ３，０，８Ｃの温度において、６０時間抽出を行
う。抽出が完了した後、基質を６，０００ｒｌ’ｌｌｌ
にて１０分間遠心分ＷＦし、上澄液を分離し、そしてこ
れに１；１０の重量比でエタノールを加える。生成した
残漬を１過により回収し、そしてエタノールで洗浄し、
そしてフィルター−ヒで乾燥する。得られた５、６１の
白色粉末は、生物学的活性物質、すなわち６００〜６．
０００Ｄｔの分子量を有し、そして６．５〜６．７の等
電点を有するポリペプチド８０重量％及び７〜９の等電
点を有するポリペプチド２０重世％から成るポリペプチ
ドを含有する。

得られた白色粉末は５％酢酸、及び水に可溶性であり、
１％水溶液のｐＨは５．４である。

胸腺製品の医薬を製造するために、上記のようにして製
造した粉末を５７０ｍＡ！の２％酢酸に溶解する。この
製品の溶液を濾過によって無菌化し、そして１　ｍｌの
無菌フラスコに注入し、次に凍結乾燥シ、そしてゴム栓
で密封する。結果として、１本のフラスコは胸腺からの
物質１ｏｍｇを特徴する特許出願人 レニングラトスキイ　ゴスダルストベニイペダゴギチェ
スキイ　インスティテユト　イメニエー、アイ、ゲルツ
ェナ 特許出願代理人 弁理士　青　木　朗 弁理士西舘和之 弁理士　福　本　積 弁理士山口昭之 弁理士西山雅也 手続補正書（自発） 昭和５９年１１月７６日 特許庁長官　志　賀　学殿 １、事件の表示 昭和５９年　特許願　第１１３２３４号２、発明の名称 胸腺製品及びその製造方法 ３、補正をする者 事件との関係　特許出願人 ニー、アイ、ゲルツェナ ４、代理人 ５、　補正の対象 明細書の「発明の詳細な説明」の欄 ６、補正の内容 明細書第１６頁＠１０行目と第１１行目との間に次の記
載ケ加入する。

「胸腺は一般に子ウシから得られる、しかしこれ以外の
若哺乳動物、例えばウマ、ブタ、ヒラジルクジラ等から
得ることもできる。

この発明の胸腺製品は非経口的に、特に筋肉内に投与す
る。前記の疾患を治療するためには、筋肉内注射の形で
１日１０〜３０■ケ５〜２０日にわたって投与する。し
かしながら体重及び疾患によっては日用１ｔｖｉ〜以下
とすることもできる。

ＥＤ５８はＯ１■／ｍであるが、治療のための投与量ヶ
さらに下げてｏ、　０１　／ｋｆとしても有効な場合が
ある。急性毒性試験において、この発明の胸腺製品ｆマ
ウスに１００ｗｙ／ｍ、５００　＊／ｋｌ、１０００　
ｔｒｙ／ｋｆ及び１５ｏ　ｏｒ／ｈの投与量で筋肉内投
与した場合、動物の死亡は生じなかった。

投与量１１５００■／梅より多くすることは実質上困難
でわ−た。この製品の有効投与ｔはＥＤ、。＝ｏ、１Ｔ
ｌｑ／ｌｖであるから、この製品は実質上毒性？有しな
い。この製品が毒性ケ有しないことは、これが動物の組
織から得られたものであること、及び生理的に適切な物
質であることにより説明される。この製品は広い治療範
囲？有するＣ」以下余白

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、　６００〜６．　［１００ドルトンの分子量を有す
   るポリペプチドを含んで成る胸腺製品であって、その１
   ０〜２０重量％が７〜９の等電点及び２，０００〜４．
   ０００ドルトンの分子量を有するポリペプチドであり、
   さらに３．５〜６．７の等電点を有するポリペプチドを
   含有することを特徴とする製品。 ２．６’ＯＤ〜６．０００ドルトンの分子量を有するポ
   リペプチドを含んで成る胸腺製品であってその１０〜２
   ０重量％が７〜９の等電点及び２，０００〜４，０００
   ドルトンの分子量を有するポリペプチドであり、さらに
   ３．５〜６．７の等電点を有するポリペプチドを含有す
   る製品の製造に当り、胸腺組織をホモジナイズし、得ら
   れたホモジネートを沈澱と上清液に分離し、これを有機
   溶剤で処理し、次に目的生成物を分離することを含んで
   成る方法において、分離に先立って胸腺組織ホモジネー
   トを、塩化亜鉛の存在下酢酸の１〜１０％水溶液により
   少なくとも２４時間にわたり抽出することを特徴とする
   方法。 ６、　前記の抽出を４８〜７２時間行うことを特徴とす
   る特許請求の範囲第２項記載の方法。 ４、抽出のために塩化亜鉛を酢酸２当り０．２〜２１の
   量で使用することを特徴とする特許請求の範囲第２項又
   は第３項に記載の方法。 ５、抽出をｐＨ２，５〜４．５″ｃ〜１５Ｃの温度にお
   いて行うことを特徴とする特許請求の範囲第２項〜第５
   項のいずれか１項に記載の方法。