JPS60258207A - 診断試薬用ラテックス - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （技術分野） 本発明は、免疫血清学的診断試薬に有効なラテックスお
よびその製造方法に関する。

（従来技術） 免疫血清学の進歩に伴い、臨床検査における技術の向上
はめざましい。免疫血清学検査は、試験管を用いて行わ
れ、血清希釈にはメスピペットが使用される。このよう
な試験管やピペットによる作業の繁雑さと、検査件数の
増加に伴う大量の検体処理とが免疫血清学検査の精度を
低くしている原因でもある。しかし、臨床検査の自動化
導入によって、免疫血清学検査の領域においても患者か
らの採血量を少なりシ、微量の検査材料で正確な検査デ
ータが得られる微量検査法（マイクロタイター法）が実
施されるに至っている。　このマイクロタイター法は１
９５５年ハンガリーのＴａｋａｔｓｙによって考案され
、さらに、　１９６２年に、アメリカの５ｅｖｅｒによ
って改良された。１９６３年にアメリカでマイクロタイ
ターキットが市販されて以来、これが免疫血清学的検査
に採用され３世界中で使用されるようになった。　１９
６７年、アメリカのＣ，ＤＣ（Ｃｅｎｔｅｒ　ｆｏｒ　
Ｄｉｓｅａｓｅ　Ｃｏｎｔｒｏｌ）がこれを補体結合反
応の標準検査法として採用した。　ＰｕｂｌｉｃＨｅａ
ｌｔｈ　５ｅｒｖｉｃｅのトレーニングマニュアルにマ
イクロタイター法の手法が使用されている。我国では、
ウィルス学の研究者によって比較的はやく紹介され、輸
入品によってウィルスの血清学的検査（血球凝集反応、
血球凝集阻止反応、補体結合反応など）や細胞・組織な
どの培養が行なわれている。これらマイクロタイター法
の特徴は、■微量の血清で多項目の検査ができること；
■操作が簡便で多数の検体を短時間で迅速に希釈するこ
とができること；■抗原、抗血清、試薬などが現行法に
くらべ少量ですみ経済的であること；０１枚のプレート
で全体の反応がみられ、＠集像や溶血が鮮明で判定しや
すいこと；■現行法との反応の感度や精度が変わらず、
再現性もよいことなどである。これらマイクロタイター
法に用いられる血球の主流はヒツジ赤血球およびニワト
リの血球であ町す る。これら動物血球を用いた場合には血球の腐敗および
変性が激しく、長期の保存性に欠けること。

および個体差が大きいために検査値のバラツキ幅が広く
正確なデータがなかなか得られないこと等の問題点があ
る。そのうえ、血球そのもの自体に抗原を含んでいるた
め、これが検査を受ける血清中の種々の抗体と反応し、
その結果、まぎられしい反応を起こしやすい。これら血
球の代替品として近年２合成ラテックスが用いられつつ
ある。例えば、特開昭５１−９７１６号公報には合成ラ
テックス試薬が開示されている。この合成ラテックスは
界面活性剤（乳化剤）を用いて製造される。この他にも
界面活性剤を用いた合成ラテックス試薬が知られている
。その製法は１例えば、水中にアニオン系、ノニオン系
またはカチオン系の乳化剤を混合したものにスチレンモ
ノマーや水溶性ラジカル開始剤等を共存させて、好まし
くは酸素を除いた雰囲気で、適当な温度に適当な時間保
つというものである。合成されたこれらラテックスは、
一般には１重合の際に用いた乳化剤の一部がポリスチレ
ンラテックス粒子の表面に吸着されるか化学的に結合さ
れ、残りはラテックス中に遊離の状態で存在する。これ
らの状態の間には乳化剤のポリスチレンラテックス粒子
表面に対する吸着脱着平衡が成立している。このように
通常の方法で製造されるポリスチレンラテックスにおい
ては乳化剤は安定なラテックスの形成に不可欠であるが
、その反面、遊離の乳化剤は前述の抗原または抗体によ
るラテックスの凝集反応に対して好ましくない影響を与
える。診断試薬を製造するには、まず、既述のようにポ
リスチレンラテックスに抗原または抗体を感作させる。

しかし、遊離の乳化剤を含むラテックスを用いるとこの
段階ですでに凝集してしまう。次に、抗原または抗体を
感作させたラテックスを用いてこの抗原または抗体に反
応する抗体または抗原をラテックスの凝集反応によって
検出する際には、検出されるべき抗体または抗原を含む
血清と接触すれば感作ラテックスは凝集し。

かかる抗体または抗原を含まない血清と接触しても感作
ラテツクスは凝集しないことが必須要件である。しかし
、これら遊離の乳化剤を含む感作ラテツクスの場合には
陰性血清と接触しても凝集してしまい、いわゆる非特異
的凝集反応となることが多い。これら乳化剤をラテック
スからイオン交換法や透析法の技術を用いて除くことは
可能ではあるが、これら遊離の乳化剤をラテックスから
除いてしまうと、前述の如く遊離の乳化剤とラテックス
粒子表面に吸着された乳化剤との間の吸着脱着平衡の成
立によるラテックス安定化がくずれてしまい、ラテック
スの安定性は極端に悪くなり実際上は使用不可能となっ
てしまう。　特開昭５７−１４６１０号公報には、スチ
レンを乳化剤の不存在下に過硫酸塩を重合開始剤として
水中で重合させた後、アルカリ性条件下で加熱して得ら
れるラテックスの開示がある。このようにして得られた
ラテックスを試薬化すると乳化剤を使用していないため
自己凝集反応や非特異的凝集反応が起こらない。

かつラテックスの安定性にも優れている。しかし。

このようなラテックスの比重は１．０３〜１．０５と小
さく、これはポリスチレンと同程度である。そのため、
ラテックスを試薬化して、検体との凝集性を調べる場合
には長い時間を必要とする。

高比重のラテックスを得るために例えばビニルトルエン
、クロロスチレン、メタクリル酸メチル。

塩化ビニル、塩化ビニリデンなどを重合もしくは共重合
させることも行われている。しかし２例えばクロロスチ
レンは非常に反応性に冨むため１重合反応の制御が困難
である。得られたラテックスも残存モノマーが存在する
ため不快臭がある。

（発明の目的） 本発明の目的は、ロフト間のバラツキがなく長期間安定
に保持しうる診断試薬用ラテックスおよびその製造方法
を提供することにある。本発明の他の目的は、自己凝集
および非特異凝集が少なく誰もが簡単にしかも短時間で
評価できる。マイクロタイター法に最適なソープフリー
系ラテックスおよびその製造方法を提供することにある
。本発明のさらに他の目的は、高精度で検査値を得るこ
とのできるラテックスおよびその製造方法を提供ｔお。

、６ｏあお。オえ、。ｏ４３や。、４よ、ヶ　）、［望
の粒径および比重のラテックスおよびその製造方法を提
供することにある。

（発明の構成） 本発明の診断試薬用ラテックスは、スチレンを乳化剤の
不存在下で過硫酸塩を開始剤として弱アルカリ性条件下
で重合させポリスチレン粒子の懸濁液を得、該懸濁液を
中性〜酸性の条件下で加熱処理し架橋ポリスチレンを含
むポリスチレン粒子を得、そして架橋ポリスチレンを含
むポリスチレン粒子を塩素化処理して得られ、そのこと
により上記目的が達成される。本発明の診断試薬用ラテ
ックスの製造方法はスチレンを乳化剤の不存在下で過硫
酸塩を開始剤として弱アルカリ性条件下で重合させポリ
スチレン粒子の懸濁液を得る工程；該Ｑｆｉｇ液を中性
〜酸性の条件下で加熱処理し架橋ポリスチレンを含むポ
リスチレン粒子を得る工程；そして架橋ポリスチレンを
含むポリスチレン粒子を塩素化処理する工程を包含し、
そのことにより上記目的が達成される。

本発明において開始剤として用いられる過硫酸塩として
は２例えば、過硫酸アンモニウム、過硫酸カリウム、過
硫酸ナトリウムなどがある。これらの過硫酸塩のスチレ
ンに対する割合は８重量％以下、好ましくは０．０９〜
６重量％、さらに好ましくは０．１〜５重量％である。

本発明では、水の仕込まれた反応器にスチレンと開始剤
とを加えて攪拌しながら弱アルカリ性条件下で加熱して
重合反応を行いポリスチレンの懸濁液を得る。重合反応
の温度は５０〜１００℃、好ましくは６０〜８５℃であ
る。反応時間はスチレンの濃度、開始剤の種類および濃
度により異なる。通常５〜３５時間の範囲で行われ２反
応時のｐＨは７．１〜７．８が好ましい。反応時のｐＨ
をこのような範囲に設定するため２反応液にはアルカリ
土類金属の水酸化物、酸化物、炭酸塩１重炭酸塩などが
加えられる。例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウ
ム、炭酸ナトリウムなどが用いられる。このようにして
得られたポリスチレンの懸濁液を次いで中性もしくは酸
性条件下で加熱する。　その反応条件は所望するポリス
チレンの架橋の度合により異なるが２通常１反応温度は
５０〜１００℃、好ましくは６０〜８５℃；反応時間は
５〜３０時間；そしてｐＨは２．４〜７．Ｏ１好ましく
はｐｉ　３．０〜６．８である。中性もしくは酸性条件
下で加熱されるとポリスチレン間に一部架橋反応が起こ
る。得られた架橋ポリスチレンを含むポリスチレンは２
次いで、塩素化処理に供される。そのときの温度は、懸
濁液の仕込み量および処理条件により異なるが２通常、
５〜６５°Ｃ好ましくは１０〜６０℃である。最終塩素
化量はラテックスの架橋度および粒径により異なるが。

通常、５〜４０％好ましくは１０〜３０％である。塩素
化処理時間は１０〜５００分、好ましくは３０〜４００
分であり、より好ましくは６０〜３６０分である。ラテ
ックスの比重は、塩素化の条件を適宜選択することによ
り、　１．０６〜１．５０の範囲、好ましくは１．１０
〜１．５０の範囲に調整される。

上記処理条件を外れて過度に塩素化されると１得られる
ラテックスの表面の損傷が激しく自己凝集の原因となる
。　かりにうまく処理できても今度はラテックス自体の
比重が大きずぎてマイクロタイター法等で評価したとき
早く沈降しすぎ、±（１０分以内に起こる明らかな凝集
）〜十（３分以内に起こる明らかな凝集）付近の凝集が
すべて逆転してしまい正確なデータが得られない。

本発明においては、上記のように一部架橋構造を有する
ポリスチレンが塩素化処理に供される。

このようなポリスチレンは粒子表面の電荷密度が高いた
め塩素化反応を行う際２反応の制御が容易になされうる
。そのため、所望の比重のラテックスが容易に得られう
る。塩素化が過度に進みその結果ラテックス表面が損傷
を受けるということもない。得られたラテックスは一部
架橋構造を有するため凍結乾燥を行っても、凍結時や再
分散時にラテックス表面が損傷を受けたり破壊されるこ
とかない。そのため、自己凝集や非特異的凝集反応が起
こらない。例えば、溶連菌などを用いて調製された。力
価が下が°りやす（不安定なラテックス試薬も凍結乾燥
により長期間保存することが可能になる。

本発明によれば９重合および塩素化の反応条件　η、・
ヲコントロールすることにより所望の粒径ト比重とを有
する１粒径の揃ったラテックスが得られる。

このようにして得られたラテックスは、非特異的凝集反
応を起こさないためマイクロタイター法に用いられるラ
テックスとして特に好適である。

（実施例） 以下に本発明を実施例について述べる。

大施桝上 （Ａ）ラテックスの調製：スチレンモノマ−９０ｇ、過
硫酸カリウム０．４８　ｇおよびイオン交換水４７０ｇ
を反応容器に仕込んだ。そして、容器を窒素ガスで置換
し反応温度を７０°Ｃ〜７２°Ｃの範囲におさまるよう
コントロールしながら２４時間単独重合させた。このと
きのｐ）ｌは７．５であった。重合終了後、ポリスチレ
ン懸濁液のｐ［＋を６．３に調節した。

これを１次いで、７０℃で２４時時間）Ｉ　６．３に保
ちながら反応させた。反応器を停止し容器から架橋ポリ
スチレンを含むポリスチレンラテックスを取り出し東洋
濾紙歯２　（直径１２．５ｃｍ）を用いて濾過精製処理
を行なった。次いで、７０°Ｃ乾燥機を用いてこのラテ
ックスを乾燥し、得られた精製固型分を秤量したところ
、　１２．６　（Ｗ／Ｗ）％であった。次に。

３に反応容器に水２０００　ｇと、精製ラテックスを蒸
留水で７．０％に希釈したラテックス５００ｇとを投入
したのち、自然光下において反応温度を１３〜１５℃に
保ちながら２７０分間塩素ガスを吹きこみ塩素化処理し
た。窒素ガスで容器内を１８０分間置換した後、得られ
た塩素処理ラテックスを取り出し東洋濾紙Ｎｅｔ２を用
いて濾過精製処理した。このラテックスを超音波発生装
置を用いて３０秒間処理し。

水中に分散させた。さらに、ラテックスを透析膜を用い
て蒸留水にて２４時間精製処理した。塩素化処理後のラ
テックス中の塩素量は１４．７％であった。

塩素処理後のラテックスを電子顕微鏡で観察した結果、
平均粒径は０．４８μｍそして粒径のバラツキは変動係
数（粒径の標準偏差／平均粒径）で表して０．００５で
あった。このラテックスの比重は１．３１であった。塩
素化処理前の架橋ポリスチレンを含むポリスチレンラテ
ックスの一部をビー力に取り出し秤量後７０℃で５時間
乾燥した。これを試験管に入れ、メチルエチルケトン（
ＭＥＫ）を加えて試験管を密封した。これをシリコンバ
スで９０°Ｃに加熱し、４８時間抽出を行った。ＭＥＫ
不溶部分を取り出し７０℃で８時間乾燥し、その重量を
測定した。ゲル分率は８．１％であった。

（Ｂ）Ｒ−ＰＨＡ法凝集反応によるラテックス評価：　
（Ａ）項で得られたポリスチレンラテックスをｐｏ　７
．４のリン酸緩衝液に分散させ固型分１％としたもの１
容と１モルモットの産生じたＨＢｓモノスベシフィック
ス抗体（セファローズ４Ｂに固定したＨＢｓ抗原のカラ
ムに２回通液したアフィニティークロマトグラフィーに
よる精製品）を同じくリン酸緩衝液中に４０μｇ　７ｍ
　ｊｌ！の濃度に溶解したちの１容とを混合し、３７℃
で６０分間インキュベートしてラテックスに抗体を結合
させた。次に、こ゛の感作ラテツクスを１５００Ｏｒｐ
ｍにて１５分間遠心分離し、未吸着の抗体を除去した。

この上澄中の抗体価はＰＨＡ　（受身赤血球凝集反応）
法により測定され少なくとも９９．５％以上の抗体がラ
テックスに吸着していることがわかった。　この沈降し
たラテックスを１８００Ｏｒｐｍで８分間遠心分離し、
上澄み液を捨て、沈降した処理後の感作ラテツクスをｐ
Ｈ７，０のリン酸緩衝液に再分散してラテックス試薬の
調製を終了した。このようにして調製されたラテックス
を用い現在市販されているリバーセイア（ＨＢｓ抗原検
出ＥＴＡキット　山の内製薬製）を用いてＲ−ＰＨＡ　
（逆受身血球凝集反応）試験法を試みた。

マイクロタイターにマイクロドロンパーを用い緩衝液５
０μｌを各管に分注した。そして、１μｇのＨＢｓ抗原
を含む検体２５μｌを取り出し、すみゃかにダイリュー
タ−で倍々希釈した。そして、上記方法で得られたラテ
ックスを２５μｐ各管に分注したのちミキサーで分注し
、３０秒間振盪した。これを２７０分間・　４２０分間
静置後凝集像を判定した。

比較のために、ラテックスの代わりにあらかじめヒツジ
赤血球に抗ＨＢｓ抗体を吸着させたＲ−ＰＨＡセルを同
時に用いラテックス凝集との比較として評価した。その
結果を第１表および第２表に示す。第１表および第２表
は、それぞれ２７０分間静　１．、ｉ直後および４２０
分間静置後の凝集像の判定結果である。

実車■１ （Ａ）ラテックスの調製：スチレンモノマ−７５ｇ、過
硫酸カリウム０．４０　ｇおよびイオン交換水４５０ｇ
を反応容器に仕込んだ。そして、容器を窒素ガスで置換
し反応温度を７０℃〜７２℃の範囲におさまるようコン
トロールしながら３０時間単独重合させた。このときの
ｐＨは７．３であった。　重合終了後、ラテックス懸濁
液のｐＨを６．０に調節した。

これを１次いで、７０℃で２８時間ｐＨ６，０に保ちな
がら反応させた。　反応器を停止し容器から架橋ポリス
チレンを含むポリスチレンラテックスを取り出し東洋濾
紙魚２を用いて濾過精製処理を行なった。次いで、７０
℃乾燥機を用いてこのラテックスを乾燥し、得られた精
製固型分を秤量したところ。

１２．３　（Ｗ／Ｗ）％であった。次に、３β反応容器
に水１８００　ｇと、精製ラテックスを蒸留水で１０．
０％に希釈したラテックス４００ｇとを投入したのち。

１００−の水銀灯下において反応温度を２５〜２７℃に
保ちながら１６０分間塩素ガスを吹きこみ塩素化処理し
た。窒素ガスで容器内を１４０分間置換した後。

得られた塩素処理ラテックスを取り出し東洋濾祇階２を
用いて濾過精製処理した。このラテックスを超音波発生
装置を用いて１分間処理し、水中に分散させた。さらに
、ラテックスを透析膜を用いて蒸留水にて２４時間精製
処理した。塩素化処理後のラテックス中の塩素量は反応
溶液中のＨＣｊ２分析を行った結果２５．２％であった
。塩素処理後のラテックスを電子顕微鏡で観察した結果
、平均粒径は０．５０μｍそして粒径のバラツキは変動
係数（粒径の標準偏差／平均粒径）で表して０．００８
であった。このラテックスの比重は１．４３であった・
。−塩素化処理前の架橋ポリスチレンを含むポリスチレ
ンラテックスの一部をビー力に取り出し秤量後７０℃で
５時間乾燥した。これを試験管に入れ、ＭＥＫを加えて
試験管を密封した。これをシリコンバスで９０℃に加熱
し、４８時間抽出を行った。ＭＥＫ不溶部分を取り出し
７０℃で８時間乾燥し、その重量を測定した。ゲル分率
は７．０２％であった。

（Ｂ）Ｒ−ＰＨＡ法凝集反応にヰるラテ・ノクス評価；
本実施例（Ａ＞項で得られたポリスチレンラテックスを
用い、実施例１　（Ｂ）項の方法に準じてラテックスの
評価を行った。その結果を第１表および第２表に示す。

第１表 第２表 以上の試験結果から１本発明によるラテ・ノクスは。

乳化剤が使用されていないため、また、その組成に一部
架橋構造を有するため自己凝集および非特異凝集が少な
く、保存性に優れ口・ノド間のノλラツキもないことが
わかる。粒子がよく揃いかつ比重が比較的大きいため凝
集反応を、だれもが簡単に。

しかも短時間で評価できる。しかも検査値への影響が少
なくマイクロタイター法等にもつとも適したラテックス
であることが明らかである。

ル較炎 （Ａ）ラテックスの調製：スチレンモノマ−９０ｇ、ノ
ニオン乳化剤（第一工業製薬社製、エマルジット４９）
２ｇ、過硫酸カリウム０．６ｇおよびイオン交換水４５
０ｇを反応容器に仕込み、容器を窒素ガスで置換し反応
温度を７０〜７２℃の範囲におさまるようコントロール
しながら２４時間重合した。

得られたラテックスを電子顕微鏡で観察した結果平均粒
径は０．７５μｍそして粒径のバラツキは変動係数で表
して０．１２７であった。このラテックスの比重は１．
０４であった。

（Ｂ）Ｒ−ＰＨＡ法凝集反応によるラテックス評価：　
（Ａ）項で得られたポリスチレンラテックスをｐＨ７，
４のリン酸緩衝液に分散させ固型分１％としたちの１容
と２モルモットの産生したＨＢｓモノスペシフイノクス
抗体（セファローズ４Ｂに固定したＨＢｓ抗原のカラム
に２回通液したアフィニティークロマトグラフィーによ
る精製品）を同じくリン酸緩衝液中に４０ｇｇ／ｍｌ！
濃度に溶解したもの１容とを混合し、３７℃で、６０分
間インキユベートシてラテックスに抗体を結合させた。

次に。

この感作ラテツクスを１５００Ｏｒｐｍにて１５分間遠
心分離し、未吸着の抗体を除去した。この沈降したラテ
ックスを１５００Ｏｒｐｍで１５分間遠心分離し、上澄
み液を捨て、沈降した処理後の感作ラテツクスをｐＨ７
，０のリン酸緩衝液に再分散してラテックス試薬の調製
を終了した。このようにして調製されたラテックスを用
いリハーセイア（Ｈ’Ｂｓ抗原検出ＥＩＡキット　山の
内製薬製）を用いてＲ−ＰＨＡ試験法を試みた。試験法
は実施例１と同様である。２７０分間・　４２０分間後
の判定では静置前に比べて凝集像の変化は全く認められ
なかった。比較例（Ａ）項で得られたラテックスを用い
実施例１に準してラテックス試薬を調製しこれを用いて
種々の濃度のＨＢｓ抗原を含むヒト血清に対する凝集の
強さを測定した。使用したラテックス試薬は２５μｎ、
ＨＢｓ抗原を含むヒト血清検体は１００μｌである。そ
の結果を第３表に示す。

第３表 次に、リバーセイア（ＨＢｓ抗原検出ＥＩＡキット　山
の内製薬製）を用いて、血清中のＨＢｓ抗原が０．４ｎ
ｇ／　ｍｌ！以下であることが判明している１５８人の
正常なヒト血清について同様のテストを行った。１５Ｂ
検体中、陽性が２０件そして偽陽性が２７件であった。

以上の試験結果より、比較例のラテックスを使用し試薬
化したラテックスは非特異的凝集反応を起こすことが明
らかである。

（発明の効果） 本発明によれば、このように、乳化剤を全く含まないに
もかかわらず、常時は安定で抗原抗体反応に鋭敏に感応
して高凝集性が得られるラテックスが製造される。この
ラテックスはしかも粒径がよく揃っている。このラテッ
クスは、乳化剤を全く含まないために免疫血清学的診断
試薬として用いると、非特異的凝集反応による検査値の
バラツキがない。ラテックスの調製時に反応条件をコン
トロールすることにより所望の粒径および比重のラテッ
クスを得ることができる。ラテックスはその一部が架橋
構造を有するため、凍結乾燥保存を行ってもラテックス
表面が損傷を受けたり破壊されることがない。そのため
、不安定なラテックス試薬も凍結乾燥により長期間保存
することができる。本発明によるラテックスはマイクロ
タイター法等に特に偉力を発揮しうる。

以上 出願人　積水化学工業株式会社 １４］・ 手続補正書（自発） 昭和６０年２月２６日 １、事件の表示 昭和５９年　特許願第１．１　ｓ　７　ｇ　５号２、発
明の名称 診断試薬用ラテックスおよびその製造方法３、補正をす
る者 事件との関係　特許出願人 郵便番号　５３０ 住　所　大阪市北区西天満二丁目４番４号特許部東京駐
在　置東京（０３）　４３４−９５５２４、補正の対象 明細書の特許請求の範囲の欄及び発明の詳細な説明５、
　補正の内容 （１）特許請求の範囲を別紙の通抄に補正する。

（２）　明細書第１２頁第１行〜第３行に、「±（１０
分以内番と起こる明らかな凝集）〜＋（３分以内に起こ
る明らかな凝集）ｆｔ近」とあるのを 「±〜十叶近」と訂正する。

（３）明細書第１６頁第１４行に 「ミキサーで分注し、３０秒間振盪した。」とあるのを 「ミキサーで３０秒間振盪した。」 と訂正する。

（４）　明細書第１７頁第１行〜第２行に、「判定結果
である。なお以下の表における符号の意味は次の通りで
ある。

ｍ：凝集が認められない ±：ゆるやかな凝集が認められる ＋：明瞭な凝集が認められる。

＋：完全な凝集が顕著番と認められる」と訂正する。

ａ　添付書類の目録 （１）補正後の特許請求の範囲を記載した書面　１通以
上 「Ｌ　スチレンを乳化剤の不存在下で過硫酸塩を開始剤
として弱アルカリ性条件下で重合させポリスチレン粒子
の懸濁液を得、該懸濁液を中性〜酸性の条件下で加熱処
理し架橋ポリスチレンを舎むポリスチレン粒子を得、そ
して架橋ポリスチレンを含むポリスチレン粒子を塩素化
処理して得られる診断試薬用ラテックス０ ２、ｉＩＱ記弱アルカリ性条件下での重合反応がｐＨ７
，１−７，８，５０〜１００℃にて５〜３５時間行−わ
れる特許Ｉ！Ｉ末の範囲第１項に記載のラテックス。

良　前記加熱処理がｐｍ’ｌ！４〜７．０．５０−１０
０℃にて５〜３０時間行われる特許請求の範囲第１項に
記載のラテックス。

表　前記塩素化処理が１０〜ｂ ５αＯ時間行われる特許請求の範囲第１項に１゜ 記載のラテックス。

改　比重がＬＩＯ〜Ｌ５０である特許請求の範囲第１項
に記載のラテックス。

ａ　粒径がα１−’ｌα０μｍである特許請求の範囲第
１項に記載のラテックス。

７、　スチレンを乳化剤の不存在下で過硫酸塩を開始剤
として弱アルカリ性条件下で重合させポリスチレン粒子
の懸濁液を得る工桿；該懸濁液を中性〜酸性の条件下で
加熱処理し架橋ポリスチレンを含むポリスチレン粒子を
得る工程；そして架橋ポリスチレンを含むポリスチレン
粒子を塩素化処理する工程を包含する診断試薬用ラテッ
クスの製造方法。

＆　前記弱アルカリ性条件下での重合反応がｐＨ７，１
〜７．８．５０〜１００℃にて５雫３５時間行われる特
許請求の範囲第７項に記載の方法。

９、　前記加熱処理がｐＨ２４Ｎ７．０．５０〜１００
℃にて５〜３０時間行われる特許請求の範囲第７項に記
載の方法。

ｌα　前記塩素化処理が１０−６５℃にてα３−７５α
Ｏ時間行われる特許請求の範囲第７項１こ１ｌＰ１の方
法。」 手続補正書（自発） 昭和６０年９月５日 国 特許庁長菅殿 １、事件の表示 昭和５９年　特許願第１１５７８５号 ２、発明の名称 診断試薬用ラテックスおよびその製造方法３、補正をす
る者 事件との関係　特許出願人 郵便番号　５３０ 住　所　大阪市北区西天満二丁目４番４号５、補正の内
容 （１）明細書第１６頁第５〜７行及び第２２頁第１１〜
１２行に、 ［リバーセイア（ＨＢｓ抗原検出ＥＩＡキット山の内製
薬製）を用いて」 とあるのを、 ［リバーセル（山の内製薬製）のうちの感作シ 赤血球を該ラテックスにおきかかで」 と訂正する。

（２）明細書第１６頁第１１行及び第１３行に、「２５
μβ」とあるのを、 「５０μａ」と訂正する。

以上

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、スチレンを乳化剤の不存在下で過硫酸塩を開始剤と
   して弱アルカリ性条件下で重合させポリスチレン粒子の
   懸濁液を得、該懸濁液を中性〜酸性の条件下で加熱処理
   し架橋ポリスチレンを含むポリスチレン粒子を得、そし
   て架橋ポリスチレンを含むポリスチレン粒子を塩素化処
   理して得られる診断試薬用ラテックス。 ２、前記弱アルカリ性条件下での重合反応がｐＨ７，１
   〜７．８．５０〜１００℃にて５〜３５時間行われる特
   許請求の範囲第１項に記載のラテックス。 ３、前記加熱処理がｐＨ２，４〜７．０．　５〜１００
   °Ｃにて５〜３０時間行われる特許請求の範囲第１項に
   記載のラテックス。 ４、前記塩素化処理が１０〜６５℃にて０．３〜５０．
   ０時間行われる特許請求の範囲第１項に記載のラテック
   ス。 ５、比重が１．１０〜１．５０である特許請求の範囲第
   １項に記載のラテックス。 ６、粒径が０．１〜１０，０μｍである特許請求の範囲
   第１項に記載のラテックス。 ７、スチレンを乳化剤の不存在下で過硫酸塩を開始剤と
   して弱アルカリ性条件下で重合させポリスチレン粒子の
   懸濁液を得る工程；該懸濁液を中性〜酸性の条件下で加
   熱処理し架橋ポリスチレンを含むポリスチレン粒子を得
   る工程；そして架橋ポリスチレンを含むポリスチレン粒
   子を塩素化処理する工程を包含する診断試薬用ラテック
   スの製造方法。 ８、前記弱アルカリ性条件下での重合反応がｐＨ７，１
   〜７．８．５０〜１００°Ｃにて５〜３５時間行われる
   特許請求の範囲第７項に記載の方法。 ９、前記加熱処理がｐＨ２，４〜７．０．　５〜１００
   ℃にて５〜３０時間行われる特許請求の範囲第７項に記
   載の方法。 １０、前記塩素化処理が１０〜６５°Ｃにて０．３〜５
   ０．０時間行われる特許請求の範囲第７項に記載の方法
   。