JPS6041658A - 新規アミノ酸誘導体の製法 - Google Patents

Abstract

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め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新規なアミノ酸誘導体とこれを含有する医薬組
成物、並びにその製法に関する。

本発明の新規化合物は下記の一般式（１）に相当する。

一般式（１）中。

Ｂ１は式−５０２０１１または　−〇ＰＯ（０１１）２
の基であり。

Ｒは水素または低級アルキルであり。

Ｒ１は水素またはアラルコキシカルボニル（当該アラル
コキシカルボニル中のアルキル残基は低級アルキルであ
り、アリール残基はメ１−キシまたはニトロで置換され
ていてもよい）を表わし。

Ｒ２は水素またはカルボキシであり。

ｎは１または２であり。

ｔは１または２である。

本発明の新規化合物及びその塩の成るものは有用な薬剤
としての性質を有し、他のものは有用な生理学的または
薬剤の性質を有する化合物の製造における中間体として
使用できる。

生物学的活性に関して２本発明の新規化合物の１ｍ 中で著しく有利なものは下記一般式（Ｘ＝ＸＷ）のガン
マ−Ｌ−グルタミルタウリンである。

この化合物は”ＡＧＡＳ”（生物気圏−発生−適応系統
Ａｅｒｏｂｉｏｓｐｈｅｒｉｃａｌ−Ｇｅｎｅｔｉｃａ
ｌ−Ａｄａｐｔａｔｉｏｎ−ａｌ−５ｙｓｔｅｍ）の損
傷に直接的または間接的に関係した病理学的変化に対し
て広範な治療及び予防効果を有する。

ＡＧＡＳの概念を説明するために、この系を構成する最
も重要な組織と器官を列挙する。

（ａ）生体と生物生活圏としての大気との境界を形成す
る生物学的界面（皮膚その他の皮膚様構造。

角膜及び結膜９口膣及び咽頭腔、気道並びに肺）；（ｂ
）骨格系統並びに体肢（管骨及び海綿質骨２球関節、滑
膜、骨格筋組織）； （Ｃ）地上（ｔｅｒｒｅｓｔｒｉａｌ）イオン平衡の調
節に関係する器官（上皮を通る輸送系統、Ｆｊ絨及び腎
小管）；（ｄ）固形食物の分解に必要な槽生歯（歯床を
伴ない、歯根によって固定されている）； （ｆ）地上聴覚、嗅覚及び音形成器官。

本発明によって製造した化合物は上記系統の器官並びに
その組織に対して生物学的な好ましい治療作用を発揮す
る。

その上、さらにＡＧＡＳ系に関して本発明の化合物は次
の効果をも発揮する： 放射線保護作用、創傷の絶合の促進作用、全身メンセン
カイマ（ｍｅｎｓｅｎｃｈｙｍａ　）活性化作用、粘膜
及び皮膚の感染及び、汚染の高まる危険に対す名保護（
湿った粘膜のリゾチーム製造、呼吸管の有毛上皮の発育
１等）、皮膚のウィルス性及び細菌性感染に対する保護
の向上。

地上生命の著しく高まったストレス作用（例。

気象的及び激しい日周変化、損償の高まる危険）に対し
て、この化合物は粘性皮質性ステロイド群により誘起さ
れる末梢組織の損傷（例、結合組織骨基質等の損傷）を
同時に防止することによって適応症候群を安定化する傾
向がある。

免疫動的平衡の発達（自己及び非自己細胞の認識の向上
）。

揮する。この活性は、腎小管の２５−ヒドロキシコレカ
ルシフェロール−１−α−ヒドロキシラーゼ（２５−ｈ
ｙｄｒｏｘｙ−ｃｈｏｌｅｃａｌｃｉｆｅｒｏｌ−１−
α−ｈｙｄｒｏｘｙ−１ａｓｅ）酵素に対して上皮小体
ホルモンが引き起すものと類似している。上記の事実は
本発明の化合物の広範かつ多様な生化学的、薬理学的及
び治療学的活性を説明する。

＾）ビタミーンＡ特性の効 （ａ）薬理学的及び生化学的効果 ラットの軟骨、並びに鶏胚子の水晶体や肝及び肺組織中
へのラベルした硫酸塩の混入を促進する作用；ラットの
軟骨中へのラベルしたリンの混入を促進する作用：コン
ドロイチン硫酸の合成を促進する作用；創傷の癒合を有
利にする作用（ラットや犬にコルチソンを投与して誘起
した創傷癒合の低下に対しても効果がある）；肥満細胞
の顆粒減少を増大させる作用；ラット及び鶏の実験的ビ
タミン不足または過多症の場合のビタミンＡ強化作用；
ラットのストレス潰瘍の軽減作用、リゾチーム製造を増
大させる作用；痕跡性元素（ケイ素。

銅、亜鉛、マンガン、フッ素）の交替に影響する作用；
上皮生成を促進する作用；アルカリ性リン酸酵素の活性
を増大させる作用；ビタミンＡの局所作用によって誘起
される嚢生成に対して発揮する作用；投与量一応答曲線
の非ｙｅｔにζ１を坦な走行本び高い投与量での前兆徴
候の変化；ゴルジ体を活性化する作用；杯状細胞の生成
を促進する作用；血清ビタミンＡの濃度を増大させる作
用。

（ｂ）臨床治療における使用 乾性角結膜炎；ショーグレン症候■ｒ；軸性鼻喉頭咽頭
炎；臭Ｍｉ症；慢性気管支炎；シノブロンキティス（ｓ
ｙｎｏｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓ）　；すい臓線維症：小児
期のフユーモパシイー（ｐｈｓｕｍｏｐａｔｈｙ）傾向
；歯周症；ウィルス性及び細菌性の感染に対する皮膚及
び粘膜の素因増大；コルチソン拮抗作用；粘膜の手術創
傷及び損傷；大腸びらん：掻痒症群；味覚及び嗅覚障害
。

（ロ）−：ビタミンΔ寺性のＪ果 （ａ）薬理学的及び生化学的効果 一過性血ＩＮ低下作用ニリン酸塩尿を減少させ。

血清リン酸塩爪を増大させる作用；放射線保護作用；不
活性動物での迷路試験で標的到達を促進する作用；実験
的なフッ素沈着症及びカドミウム中毒を軽減する作用；
実験的なエジプト豆中毒症を軽減する作用；腎の環式ア
デノシン−リン酸排出を増大させる作用；肝チロシンア
ミノトランスフェラーゼのｒＪり紫活性を増大させる作
用。

（ｂ）臨床治療における使用 あまり重くない照射傷害；白斑；筋無力症；精神高揚効
果；退行老化状態及び記憶機能をよくする作用５ケロイ
ド素因；強直形成を椎症；減損に由来する運動器官の病
気；硬化基底（ｓｃｌｅｒｏｔｉｃｆｕｎｄｕｓ）　Ｈ
類でんぷん症；斑状硬皮症；線維のう飽性乳腺症。

本発明の化合物による治療の継続期間は広い範囲内で異
なる。化学的に純粋な活性物質を５μ＆の経口投与量で
１日に３回服用させたところ、患者のある者は２週間後
にもう症状がなくなり（例。

乾性鼻喉頭咽頭炎）、別のある病気のπ？療には工ない
し２ケ月を必要としく例、歯周症、シボ−グレン症候群
）、さらに別の病気の場合には３ないし６ケ月の治療期
間が必要である（例９強直形成を椎症）。

本発明の化合物は人畜の治療に使用するだめの化粧また
は薬品組成物に転換することができる。

この組成物は、活性成分として本発明の化合物だけを含
有していてもよく、また他の生物学的活性物質をいっし
ょに含有していてもよい。本発明の活性薬剤は体重１ｋ
ｇにつき５０ないし５００ナノグラムの投与量で１０に
３回服させるのが好まし％Ｎ。

１錠は、生物学的に不活性な担体（例、ラクトース、ス
ターチ）及び通ｆｉｔの助剤物質（例、ポリビニルピロ
リドン、ゼラチン、タルク、ステアリン酸マグネシウム
、超微粉シリカ等の造粒剤及び滑剤）と混和した状態で
本発明の活性成分を２ないし２０μｇ、好ましくは約１
０μｇ含有する。

この非常に低い投与量を考えると２錠剤中にこの活性物
質を均一に分散させるために、溶液状の活性成分を造粒
前の錠剤塊と混和し、混線機を使用して均質な混合物を
調製するのが好ましい。必要な有効投与適量が非常に低
いために、数兆個の錠剤を製造する場合でも２本発明の
活性成分を大きな実験室的規模の装置によって満足しう
る価格で製造することができる。この活性成分は安定な
ので２錠剤は長期間保存できる。デボ−錠剤またはスパ
ンスールド（ｓｐａｎｓｕｌｅｄ）カプセルの場合の活
性成分含有量は１０ないし３０μｇである。

任意に生物学的に不活性な水溶性希釈剤と混和した状態
でパウダーアンプル中に本発明の活性成分を含有してい
る注射用製剤は、１アンプル当り５ないし１０μｇの活
性成分を含有しているのが好ましい。非経口的適用は筋
肉注ＩＩＪ、皮下注射または静脈内注射によるのがよい
。所定濃度の本発明の活性成分は組織や管壁を刺激しな
いので１点滴の形態でも適用できる。

生薬は、この目的に使用できるカカオ・バターまたは合
成脂ロウ（例、イムハウゼン・マス、ＧＦＲ）を使用し
て２ないし２０μｇ、りｆましくは約１０μｇの活性成
分含有量で調製できる。

通常の親水性または疎水性軟こう基材（例、コレステロ
ール、パラフィン、グリセリン、ラノリン、亜麻仁油２
等）で調製した皮膚病用または化粧用の軟こうは、活性
成分含有量が０．１ないし１．０μｇ／ｇでよい。

エーロゾル製剤は活性成分を０．１ないし１．０μｇ／
ｇ１３度で含有しているのがよい。舌十錠は活性成分含
量が１錠当り約１０μＣで９分解時間は０．５ないし１
時間である。

持続効果を有する高分子量のポリマーも調製でき、たと
えば活性成分含量が１がないし５μｇ／ｇの懸濁液の形
態とすることができる。同様に、このポリマーまたは本
発明の化合物の塩と高分子量有機塩基（例、プロタミン
、ヒストン）との混合物から持続効果を有する注射用製
剤を調製できる。

この組成物は１アンプル当り１０ないし２０μｇの量の
活性成分を含有している。

皮膚病用及び化粧用パウダーは活性成分含有量が０．１
ないし１μｇ／ｇでもよく９通常の担体（例。

タルク）を含有している。

眼科用に適用される点眼液並びに涙と混和性もしくは不
混和性の軟こうは活性成分含量が０．１ないし１．０μ
ｇ／ｇである。

小児科用に対しては最も好ましい投与適量は。

体重１ｋｇにつき活性成分０．３μｇの割合である。

殺菌組成物はいずれも滅菌濾過によって調製するのが好
ましい。

本発明の化合物を含有する上記製剤の併用剤は目的とす
る予防、治療または化粧効果を増大し。

強化し、または改良する。主として次の併用補充成分が
使用されよう。ビタミンＡ、ビタミンＣ。

ビタミンＥ、ビタミンに、根跡性元索、コルチソンとそ
の誘導体、プロゲステロン、甲状腺ポルモン、ラジウム
類似及び免疫抑制作用の生成物、精神薬剤（特に精神安
定剤及びチモレブティックス。

ｔｈｙｍｏｌｅｐｔｉｃｓ）　、有機ケイ素化合物、老
人学的製剤、経口抗糖尿病剤、消炎剤、抗ヒスタミン剤
等。

併用製剤中の各成分の適量は一般にこれを単独で使用す
るときの通常の治療適量と大体同じである。

本発明の化合物は、さらに治療及び栄養プレミックスの
添加剤としても使用できる。このような組成物に使用す
ると、この化合物は体重増加量を増大させ、またビタミ
ンＡ要求旦を低下させ及び／またはビタミンＡの吸収と
代射を向上させる。

この化合物は痕跡性元素の吸収をよくシ、またその血液
水準を高める。飼料添加剤として使用する場合、これは
体重１ｋｇ当り１００ないし３００ナノグラム、好まし
くは約２００ナノグラムの日毎経口量で動物に服用させ
ることができる。これは。

動物飼料と混合した場合、一般に飼料１ｋｇ当り１ない
し２μｇの濃度（すなわち、１ないし２　ｍｇ／トンま
たは０．００１ないしＯ，ＯＯ２ｐｐｍ）　ニ相当する
。

必要な濃度が非常に低いことを考慮して２本発明の化合
物はビタミンプレミックスとが他の有用な飼料添加剤を
含有するマイクロカプセルとかに混和することもでき、
また飲用水または舐める塩の添加剤として投与すること
もできる。本発明の化合物はまた人の治療に適用するの
と同様々形態で獣医学用に使用することもできる（上皮
形成、創傷癒合、骨折等）。

一般式（Ｉ）の化合物の共通の購造上の特徴は。

α−置換ジカルボン酸部位を含有し、そのω−カルボキ
シル基が、アルキル側鎖の中に他の置換基に加えてω位
置の強酸性基を含有している第一級または第二級アミノ
基にアミド結合を介して結合していることである。

本発明によれば、一般式（１）の化合物およびその塩は
、一般式（ＩＩ　） の化合物のα−カルボキシ基に結合している保護基を酸
加水分解、アルカリ加水分解、水添分解または酵素加水
分解によって部脱し、ぞして所望なら得られた化合物を
その塩に変えることにより製造できる。

一般式（ＩＩ）において。

Ａ２はアラルコキシ（当該アラルコキシ中のアルキル残
基は低級アルキルであり、そして、アリール残基はメト
キシまたはニトロで置換されていてもよい）または一般
式−ＮｌＩＣ１１２ＣＯＹ　（ここでＹはヒドロキシま
たは低級アルキルである）を表わし。

Ｒ：″は水素またはアラルコキシカルボニル（当該アラ
ルコキシカルボニル中のアルギル残基は低級アルキルで
あり、アリール残基はメトキシまたはニトロで置換され
ていてもよい）を表わし。

そしてＢ”＋ＲｒＲ”＋ｎおよびｔはそれぞれ前記と同
義である。

本発明方法にあっては、一般にα−アミノ酸化合物のα
−カルボキシ基上の保護基を離脱するための方法として
それ自体知られた処理手段および処理条件を駆使する酸
加水分解、アルカリ加水分解、水添分解または酵素加水
分解により、一般式（ＩＩ）の出発化合物のα−カルボ
キシ基上の保護基を離脱する。

α−カルボキシ基上の保護基の離脱はＲ３が水素以外の
ものである場合には９反応条件を選ぶ必要があるが、酸
加水分解、水添分解（接触水添分解がよい）、アルカリ
加水分解または酵素加水分解によって行なえるが、この
場合酸加水分解は非水媒体に溶かしたハロゲン化水素好
ましくは臭化水素でもってもしくはトリフルオロ酢酸で
の処理により行うのが有利であり、アルカリ加水分解は
水。

アルコールおよび／またはアセトンの存在下水酸化アル
カリ好ましくは水酸化カリウムで行うのが有利であり、
そして酵素加水分解はロイシンアミノペプチダーゼを用
いて行うのが有利である。

Ｒ３が水素である場合には、α−カルボキシ基上のエス
テル基の離脱は、酸加水分解により有利には氷酢酸−臭
化水素で、アルコールに溶がした乾燥塩化水素でもしく
はトリフルオロ酢酸で、またはナトリウムもしくはナト
リウムアミドを用いたアルカリ加水分解により、または
水添分解有利には接触水添分解によりパラジウム活性炭
の存在下で、または酵素加水分解により実施できる。

次に参考例により一般式（旧の出発化合物の製法をそし
て実施例により本発明方法を具体的に説明するが９本発
明はこれらに限定されるものではない。

参考例１ ４０．８５　ｇ（０，１１モル）のカルボベンジルオキ
シ−Ｌ−グルタミン酸・α−ベンジルエステル（Ｌｉｅ
ｂｉｇ’ｓ　Ａｎｎ、　６５５．２００／１９６２）を
５００ｍｆｌのアセトニトリルに溶解する。空気中の湿
気を排除してこの溶液を一１５℃に冷却し’、１５．４
ｍＱ（０，１１モル）のトリエチルアミンを攪拌された
溶液に添加し、その後１５．４ｍＱ（０，１１モル）の
クロロギ酸イソブチルを添加する。この混合物を一１５
℃で４０分間攪拌し、その後２８ｍＱ（０，２モル）の
トリエチルアミンと１１．２６ｇ（０，０５モル）のシ
スタミン・２塩酸塩と最後にする。

この反応混合物を３０℃で真空蒸発する。残渣を冷却と
攪拌下に２００ｍＱの氷−冷水と混合し。

得られた混合物を３５℃で真空蒸発する。残渣に２５０
ｍ＋Ｑの水と５００ｍＱの酢酸エチルを加え。

混合物を分離ロー１−の中に入れる。酢酸エチル相を順
に２５０１１ＩＱの水、　２　Ｘ　２５０＋＋ｌｌの５
％炭酸す１−リウム水溶液、　２　Ｘ　２５０ｍＱのＩ
Ｎ塩酸そして２５０ｍｆｌの水で洗浄する。（水性−ア
ルカリ性洗液は塩酸で酸性化し、エーテルで抽出すると
約５ｇの未反応カルボベンジルオキシ−Ｌ−グルタミン
酸・α−ベンジルエステルが回収される。）酢酸エチル
を無水硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空下３０℃で蒸発
乾固する。濃厚な油状残渣が得られ、これは放置すると
結晶化する。残渣を２５０ｍＱ　の無水エーテルと共に
すりつぶし、結晶性物質を濾別し、こうして得られた約
４０〜４２ｇの粗生成物を１００ｍＱの酢酸エチルと１
７０ｍＱのエーテルから再結晶する。２９．３ｇのＮ、
Ｎ’−ビス［Ｎ−カルボベンジルオキシ−ガンマ−（α
−ベンジル）−Ｌ−グルタミン〕　−シスタミンが得ら
れる。ｍ、ｐ、９１〜９２℃。

分析Ｃ４４Ｉ−■５゜Ｎ４０□。Ｓ２（ＭＷ　＝８５０
．０５）計算値：ｃ　６１．５２％、　Ｈ５，８９％、
　Ｎ　６．５２％。

８　７．４６％ 実測値：　Ｃ６０，８５％、　Ｉ−１５，９１％、　Ｎ
　６．６１％。

５　７．７２％ 参象件え ２５．７７　ｇ　（０，０３モル）のＮ、Ｎ’−ビス−
〔Ｎ−カルボベンジルオキシ−γ−（α−ベンジル）−
Ｌ−グルタミル）−シスタミン（参考例１に記載の方法
で調製を７５ｍＱ　の氷酢酸に溶解する。この溶液を水
浴で冷却し、　７５ｍ１ｌｌの３０％過酸化水素と２２
５ｍＱ　の氷酢酸の新しく調製した混合物を１５分で滴
下添加する。その後、水浴を取り除き、混合物を室温で
４時間攪拌し、３０℃で真空蒸発する。油状生成物を次
いでデシケータ−に入れ、まず五酸化リン上で次いで固
体水酸化カリウム上で乾燥する。２８．５ｇのカルボベ
ンジルオキシ−γ−（α−ベンジル）−Ｌ−グルタミル
タウリンが得られる。

見炙椎王 ５．４２　ｇ（１１ミリモル）のカルボベンジルオキシ
−Ｌ−グルタミン酸・（α−ベンジル）−γ−ｐ−二ト
ロフェニルエステル（ＣｈｅＩＩｌ、　Ｂａｒ、　９６
゜２０４／１９６３）を５０ｍ（＋のピリジンに溶解す
る。この溶液を０℃に冷却し、１．２５ｇ（１０ミリモ
ル）のタウリンを２０ｗＱ　の水にとかした溶液を激し
い攪拌下に３０分で滴下添加する。その後３．０８ＩＩ
ＩＱ（２２ミリモル）のトリエチルアミンを混合物に滴
下添加し、冷却と攪拌を中止する。この混合物を室温で
７２時間放置し、その後真空蒸発する。

残渣を５０ｍＱの水にとかし、ＩＮ塩酸を黄色の着色が
消失するまで溶液に添加する。ｐ−ニトロフェノールを
除去するために溶液を１０　Ｘ　５０ｍ１２のエーテル
で洗浄し、水性相を真空蒸発する。

６．９ｇのカルボベンジルオキシ−γ−（α−ベンジル
）−Ｌ−グルタミルタウリン・１−リエチルアンモニウ
ム塩が得られる。

参Ａ遼Ｉ− ０，４８ｇ（１ミリモル）のカルボベンジルオキシ−α
−Ｌ−グルタミル−（γ−Ｐ−二１〜ロフェニルエステ
ル）−グリシンエチルエステル（ＡｃｔａＣｈｉｍ、　
Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ｆｌｕｎｇ、　６５．３７５／
１９７０）を６　ｍ　Ｄ。

の酢酸エチルに溶解する。この溶液を氷水で０℃に冷却
し、０．０８ｇ（１ミリモル）のシステアミンを１ｍ１
ｌｌ　のジメチルホルムアミドにとかした溶液を加える
。その後、０．１４ｍＱ（１ミリモル）のトリエチルア
ミンをこの溶液に滴下添加する。沈澱が徐々に分離しは
じめる。この反応混合物を氷水中９次いで室温に１日間
放置する。混合物を酢酸エチルとエーテルの１：１混合
物で希釈し、沈澱を遠心分離し、エーテルと酢酸エチル
の４＝１混合物で数回、最後にエーテルで１回洗、１′
＃する。

この沈澱を硫酸上で乾燥し、その後顧にＩＮ塩酸で３回
、水で２回、飽和重炭酸ナトリウム水溶液で２回、さら
に水で２回洗浄し、硫酸上で真空乾燥する。０．３５　
ｇ（８５％）のカルボベンジルオキシ−α−Ｌ−グルタ
ミル−（γ−システアミン）−グリシンエチルエステル
が得られる。

分　析　Ｃ，、Ｈ２□０６Ｎ３Ｓとして計算値：Ｃ２５
，６％、Ｈ６，１％、８７．８％。

実測値：Ｃ５３，４％、Ｈ６，５％、Ｓ７．７％Ｉ　Ｒ
スペクトル：［ｉ！ｉｔ有吸収極大３３１０（Ｎ）ｌ）
　。

１７４８（エステルカルボニル）。

１９６０（Ｃ＝　Ｏ、カルボベンジル オキシ）及び１６５５（アミドカル ボニル）Ｃｍ−’ｅ １００ｍｇのカルボベンジルオキシ−α−Ｌ−グルタミ
ル−（γ−システアミン）−グリシンエチルエステルを
２１１ＩＱの氷酢酸にとかし、　０．５ｍ＋２の３０％
過酸化水素をこの溶液に添加する。反応混合物を水浴中
に４時間放置する。反応の進行を電気泳動中で監視する
。反応が終了したら、混合物を水で希釈し、凍結乾燥す
る。Ｏ，１，ｉｇの固体の泡状カルボベンジルオキシ−
α−Ｌ−グルタミル（γ−タウリン）−グリシンエチル
エステルが得られる。収率９５％。

参考例５ ０．４７ｇ（１ミリモル）のカルボベンジルオキシ−α
−Ｌ−グルタミル−（γ−Ｐ−二Ｉ〜ロフェニルエステ
ル）−グリシンメチルエステルを６ｍＱのピリジンに溶
解する。この溶液を水浴で冷却し。

０．１２５ｇ、（１ミリモル）のタウリンを２ｍＱの水
にとかした溶液と次いで０．２８ｍＤ、（２ミリモル）
のトリエチルアミンとを添加する。常に透明な溶液を得
るように各反応剤は少しづつ添加すべきである。反応混
合物を室温に３０間放置し、その後真空蒸発する。油状
残渣をエーテル及び石油エーテルと共につき砕き、真空
下硫酸上で乾燥する。カルボベンジルオキシ−α−Ｌ−
グルタミル命−（γ−タウリン）−グリシンメチルエス
テルが得られる。

豊２１１灸 １．０８３ｇ　（２，２ミリモル）のカルボベンジルオ
キシ−Ｌ−グルタミン酸・（α−ベンジル）−γ−Ｐ−
二トロストロフェニルエステルａＲのピリジン−水２：
１混合物に溶解し、２７８ｍｇ（２ミリモル）のホモタ
ウリンと０．５９ｍＮ（４，２ミリモル）のトリエチル
アミンをこの溶液に添加する。

得られた黄色溶液を室温で７２時間放置し２次いで真空
蒸発する。油状残渣を水にとがし、塩酸で中和Ｌ　ｐ　
ｐ−二トロフェノールを除去するために連続式のｈｌＩ
出柵で８時開エーテル抽出を行う。水性相を真空蒸発す
ると１１．６８ｇのカルボベンジルオキシ−γ−（α−
ベンジル）−Ｌ−グルタミル−ホモタウリンが得られる
。

を工桝ユ １．０８３ｇ　（２，２ミリモル）のカルボベンジルオ
キシ−Ｌ−グルタミン酸・（α−ベンジル）−γ−ｐ−
二トロフェニルエステルを２７８ｍｇ（２ミリモル）の
Ｎ−メチルタウリンと参考例６記載の方法で反応する。

１．５９ｇのカルボベンジルオキシ−γ−（α−ベンジ
ル）−Ｌ−グルタミル−Ｎ−メチルタウリンが得られる
。

炙互■旦 ２．８７　ｇ　（６，６ミルモル）のカルボベンジルオ
キシ−Ｌ−グルタミン酸・（α−ベンジル）−γ−Ｐ−
二トロストロフェニルエステル０ｍＱ　のピリジンにと
かし、１．２５ｇ（６ミリモル）のＬ−システィン酸−
水和物を１’７ｍＱの水とｌ　’１ｍＱのピリジンの混
合物にとかした溶液を加える。この混合物に２．６＋ｕ
ｌ　（１８，６ミリモル）のトリエチルアミンを加え１
反応混合物を室温に７２時間放置する。この溶液を３０
℃で真空蒸発する。残渣を２０１１１℃　の水にとかし
、この溶液を濃塩酸で酸性化した後、１５Ｘ１０ｍΩの
エーテルで洗浄する。

水性相を３５℃で真空蒸発する。カルボベンジルオキシ
−γ−（α−ベンジル）−Ｌ−グルタミル−Ｌ−システ
ィン酸が得られる。

参考例９ １．０８３ｇ　（２，２ミリモル）のカルボベンジルオ
キシ−Ｌ−グルタミン酸・（α−ベンジル）−γ−ｐ−
ニトロフェニルエステルをピリジンと水の２：１混合物
６ｍｆｌにとかし、この溶液に２８２ｍｇ（２ミリモル
）のコラミンホスフェート（米国特許第２，７３０，５
４２号）と０．８７ｍＱ（６，２ミリモル）のトリエチ
ルアミンを加える。混合物を室温に７２時間放置した後
、真空蒸発する。残渣を参考例６に記載したようにして
処理する。１．２５ｇのカルボベンジルオキシ−γ−（
α−ベンジル）−Ｌ−グルタミルーコラミンホスフェ−
１へが得られる。

歩邊」１Ｌ更 ５２６Ｂ（１，１ミリモル）のカルボベンジルオキシ− β−Ｐ−二トロフェニルエステル（Ｃｈｅｍ．　Ｂｅｒ
．貯ｐ１７８９／１９６４）を５ｍＱのピリジンに溶解
する。この溶液を０℃に冷却し＋　１　２　５　ｍｇ（
　１ミリモル）のタウリンを２ｍｇ　の水にとかした溶
液を少しづつ添加し，その後０．２８ｍ（ｉ　（２ミリ
モル）のトリエチルアミンを加える。反応混合物を室温
に４８時間放置し，その後真空蒸発する。残渣を５ｍＱ
　の水にとかし，この溶液に黄色の着色が消えるまで１
Ｎ塩酸を滴下添加する。Ｐ−二トロフェノールを除去す
るために溶液を１０Ｘ５ｍＱ　のエーテルで洗浄し，水
性相を真空蒸発する。４　７　８　ｍｇのカルボベンジ
ルオキシ−β−（α−ベンジル）−Ｌ−アスパルチルタ
ウリンが得られる。

参考例１１ ５　２　６ｍｇ（１　、　１ミリモル）のカルボベンジ
ルオキシ−Ｌ−アスパラギン酸・（α−ベンジル）−β
−ｐ−二トロフェニルエステルを参考例１０のようにし
て１３９ｍｇ（１ミリモル）のホモタウリンと反応させ
ると，カルボベンジルオキシ−β−（α−ベンジル）−
Ｌ−アスパルチルホモタウリンが得られる。

参１汁１」２ カルボベンジルオキシ−Ｌ−アスパラギン酸・（α−ベ
ンジル）−βーＰー二１へロフェニルエステルを参考例
９のようにしてコラミンボスフエートを反応させる。カ
ルボベンジルオキシ〜β−（α−ベンジル）−Ｌ−アス
バルチルコラミンホスフェートが得られる。

貴３４０　１　３ カルボベンジルオキシ−γ−（α−ベンジル）−Ｌ−グ
ルタミルタウリンをグルタミン酸γーアミドの調製に一
般に適用できる方法によって調製する。（Ａｃｔａ　Ｃ
ｌａｉｍ．　Ａｃａｄ．　Ｓｃｉ．　ｌｌｕｎ（Ｈ．　
６４，　２８５／１７９０）。得られた物質４．１４ｇ
を５　０ｍ１２の無水ピリジンにとかし，９ｇのジフェ
ニルホスホリルクロリドを加える。この混合物を０℃に
１２時間保持し，その後８０ｍＱのクロロホルムで希釈
する。

析出した物質を濾別し，希塩酸，次いで水で洗浄し，最
後に固体水酸化カリウムの入ったデシケータで乾燥する
とカルボベンジルオキシ−γ−　（α−ベンジル）−Ｌ
−グルタミルーコラミンホスフ工ートが得られる。

参考例１４ ２６、３２ｇ（５５ミリモル）のカルボベンジルオキシ
−γ−　（α−ベンジル）−Ｌ−グルタミルタウリン（
参考例２に記載の方法で調製）を５０１１Ｑ　の氷酢酸
にとかし，４モルの臭化水素を含有する５０ｍＡ　の氷
酢酸を加える。激しい二酸化炭素の発生が起る。この混
合物を室温で２時間放置し，次いで３０℃で真空蒸発す
る。油状残渣を１　７　０ｍｆｌの水にとかし，この７
８液を５　Ｘ　７　０ｍｆｌのエーテルで洗浄する。水
性相を３３５℃で真空蒸発すると，２０．４２ｇのγ−
（α−ベンジル）−Ｌ−グルタミルタウリンを得られる
。この生成物は９０％エタノール水から再結晶できる。

Ｒ　ｆ　＝Ｑ．５３（ｎ−ブタノール、ピリジン、氷酢
酸及び水の１５：１０：３：１２混合物中）；０．３９
（ｎ−ブタノール、氷酢酸及び水の４　：　１．　：　
ｌ混合物中）。

隻λ粁上旦 １００ｍｇのカルボベンジルオキシ− ルタミル（γータウリン）−グリシンエチルエステル（
参考例４の方法により調製）をＩ用Ｑのトリフルオロ酢
酸と，　１ｍｌｌｌ　の濃塩酸の混合物にとかす。この
溶液を密封管の中で３５℃に７３時間保持する。得られ
た溶液を真空蒸発し，残渣をエーテル及びｎ−ヘキサン
と共に数回つき砕き，最後に再度蒸発を行う。０．０６
ｇ（８８％）のα−Ｌ−グルタミル−（γ−タウリン）
−グリシンが白色の無定形物質として得られる。電気泳
動によるとこの生成物は均質であり、ニンヒドリン反応
は陽性である。

分析Ｃ９Ｈ，□Ｎ３０□Ｓ　（ＭＷ＝３１１．３）計算
値：ＳｌＯ，３％ 実ｄ１り値：Ｓ１０．０％ ＩＲスペクトル：固有吸収帯３１００　（ブロード。

Ｎｌ−ｌ３”）、　３２００（ブロード、カルボキシＯ
Ｈ）、　１７３０（カルボキシカルボニル）、　１６８
０（アミドカルボニル）、　１５６０（アミドカルボニ
ル）、、　１２２０（強、スルホン酸５＝０）及び１０
４５（強＋　Ａ　）Ｌ／　ホン酸Ｓ二〇）　ｃｍ−’。

」１記物質２０ｍｇを１＋ｎＱの６Ｎ塩酸と混和し。

この６７合物を密封管の中で１０５℃に２４時間加熱す
る。冷却後、溶液の試料を電気泳動に付す。

この試料はグルタミン酸、グリシン及びタウリンを含有
している。

参考例１６ 参考例５の方法で得られたカルボベンジルオキシ−α−
Ｌ−グルタミル−（γ−タウリン）−グリシンメチルエ
ステル１００ｍｇを室温において氷酢酸中の２Ｎ臭化水
素酸４ｍＱ　で完全なＩＲ解が起るまで（約３０分間）
処理する。得らＡした透明な溶液を３０ｍＲのエーテル
に投入し、この混合物を冷たい場所で１日間放置する。

分離してきた物質を遠心分離で取り出し、エーテルで数
回洗浄し。

真空下で水酸化カリウム、硫酸及び五酸化リン上でそれ
ぞれ乾燥する。α−Ｌ−グルタミル−（γ−タウリン）
−グリシンメチルエステル臭化水素酸塩が得られる。電
気泳動では得１）れだ生成物は実際上完全に純粋である
。

その塩を氷で冷却しながら２ｍｆｆ　のＩＮ水酸化ナト
リウム溶液と３時間処理する。加水分解の進行は電気泳
動で監視する。反応混合物を１０１１ＩＱのＤｏｗｅｘ
　５０イオン交換体（Ｈ十型）で処Ｊ：’Ｉ！ｌ、、凍
結乾燥する。電気泳動によると　７＋）られだ物質はな
お不純物を含有している。この粗生成物を所望の純度が
達成されるまで水性エタノールから数回再結晶する。４
０ＩＩＩｇ（５９％）のα−Ｌ−グルタミル−（γ−タ
ウリン）−グリシンが得ら九る。

ＩＲスペクトル：固有吸収帯３３１０（ＮＨ）、　３１
００（ブロードＮＨａ”）　、　１７３０（カルボキシ
カルボニル）、１６５０（アミ ドカルボニル）＋　１５７０（アミドカルボニル）、　
１２２０（強、５＝Ｏ）及び１０４５（強）ＣＩＩ＋−
１６ 去遣Ｊｕ ５２９ｍｇ（１、１ミリモル）のカルボベンジルオキシ
−γ−（α−ベンジル）−Ｌ−グルタミルタウリン（参
考例２に記載の方法で調製）を５ｍＱのＩＮ水酸化カリ
ウム水溶液にとかし、この混合物を室温で４時間放置す
る。この溶液を３Ｘ３ｍｆｌのエーテルで洗浄し、　Ｄ
ｏｗｅｘ　５０　Ｘ　２樹脂を充填したｌＸ２０ｃｍの
カラムに通し、このカラムを水で溶離する。５　ＱｍＲ
の溶出液を捕集し、真空下３５℃で蒸発※Ｚ固する。得
られた粗製カルボベンジルオキシ−γ−Ｌ−グルタミル
タウリンをｐＨ６，５で濾紙電気泳動法により精製する
。相対移動能（ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｍｏｔｉｌｉｔｙ）
（システィン酸に対して）１．０５．Ｒｆ−０，５７（
ｎ−ブタノール、ピリジン、氷酢酸及び水の１５：１０
：３：１２混合物中）。

入施孤又 ２０．４２ｇのγ−（α−ベンジル）−Ｌ−グルタミル
タウリン（参考例１４に記載の方法で調製）を１５　Ｑ
ｍＲのＩＮ水酸化カリウム水溶液に溶解する。この混合
物を室温で４時間放置し、その後Ｄｏｔｉｅｘ　５０　
ｘ２樹脂（Ｆｌｕｋａ、　１００−２００メツシユ、Ｈ
＋サイクル）を充填した２Ｘ１００ｃｍのカラムに通し
、カラムを水で溶離する。洗浄工程の開始から３００＋
１２　の溶出液を捕集し、これを３５℃で真空蒸発する
。油状残渣に８〜１０ｍＱの水と約１００ｍｆｌ　のエ
タノールを加えて結晶を析出させる。結晶を濾別し、ア
ルコールで洗浄し。

乾燥する。１３．７ｇのγ−Ｌ−グルタミルタウリンが
得られる。この生成物を８０％エタノール水から再結晶
する。　９．７９　ｇ　（Ｎ、　Ｎ’−ビス−〔Ｎ−カ
ルボベンジルオキシ−γ−（α−ベンジル）−Ｌ−グル
タミル〕−システアミンから計算して７０％）の精製生
成物が得られる。

寒凰展主 ２５．４＋ｎｇ（０，１ミリモル）のγ−Ｌ−グルタミ
ルタウリンを２ｍｌ１の水にとかした溶液に１０ｍｆｉ
の０．０ＩＮ水酸化ナトリウム水溶液を加え、この混合
物を３５℃で真空蒸発乾固する。白色の結晶性残渣をデ
シケータ−の中で五酸化リン上で乾燥する。γ−Ｌ−グ
ルタミルタウリンのモノナトリウム塩が得られる。この
生成物はメタノールとエタノールにやＮ可溶性である。

またこの生成物ははっきりした融点がなく、約２００℃
で収縮しはじめ、約２５０℃で炭化する。

寒度孤土 １００ｍｇのα−Ｌ−グルタミル−（γ−タウリン）−
グリシン（参考例１６記載の方法で調製）を２５１＋ｌ
ρの０．２Ｍ重炭酸アンモニウム緩衝液（ｐ１１８．５
）に溶解し、１ｍｇのカルボキシペプチダーゼ（Ｓｅｒ
ｖａ　、　Ｈｅｉｄｅｒｂｅｒｇ）　０　、５　ｍ　Ｑ
の水にとかした溶液を加える。この混合物を３７℃の４
７．（温に２４時間保持し、その後凍結乾燥する。乾い
た残渣はγ−Ｌ−グルタミルタウリンとグリシンを含有
している。この混合物から電気泳動またはｌ）ｏｗｅｘ
　５０イオン交換体を使用したクロマトグラフィーでγ
−Ｌ−グルタミル−タウリンだけを純粋な状態で分離す
ることができる。

大胤孤旦 参考例１３の方法で得たカルボベンジルオキシ−γ−（
α−ベンジル）−Ｌ−グルタミルーコラミンホスフェー
トを臭化水素の３．３Ｍ氷酢酸溶液１５ｍρ　にとかす
。この溶液を１５分間放置した後、３５℃で真空蒸発す
る。残渣を固体水酸化カリウム上で乾燥する。乾いた物
質を３０ｍＱ　の水酸化ナトリウム溶液にとかし、室温
で１時間放置した後、酢酸でｐＨ４に酸性化し、副生成
物（フェノールとベンジルアルコール）を除去するため
に３　Ｘ　３０ｍＱ　のエーテルで抽出する。水性相を
Ｄｏｗｅｘ５０イオン交換体（Ｈ＋サイクル）の入った
カラムに通し、カラムを水で溶ｍする。溶出液を真空蒸
発し、残渣をアセトンと水の２：１混合物から再結晶す
る。０．８区のγ−Ｌ−グルタミルーコラミンホスフエ
ートが得られる。

特許出願人　キノイン・ジョージセル・ニーシュ・ヴエ
ジエーセテイ・テルメーケク・ ジャーク・エルチー 代理人　弁理士松井政広（外２名） ）１頁の続き 優先権主張　［相］１９７奔３月２６日［相］ハンガリ
ー（ＨＵ）［有］Ｃｌ−１５５８り発　明　者　アール
バード・フル力　ハンガリー国、　１０７４ブタ３ ９発　明　者　フエレンツ・シエベシ　ハンガリー国、
　１１０３７−タユテイエーン　７２ ９発　明　者　ヨーラン・ヘルチェル　ノ）ンガリー国
、　１０９４ブタ３５／アー ｂ発　明　者　エルジエーベト・ペン　ハンガリー国、
　１１２２ブタデイフイ　１７ ペスト、チェンジエリ争つッツア ペスト、ジエルジエリ・ウッツア ペスト、マールトン・ウツツア ペスト、セーカーチュ・ウッツア

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 一般式（１） Ｃ式中。 Ｂ１は式−５Ｏ□ＯＨまたは一〇ＰＯ（ＯＨ）、　＋７
   ）基であり。 あり、アリール残基はメトキシまたは二１・口で置換さ
   れていてもよい）を表わし。 Ｒ２は水素またはカルボキシであり。 ｎは１または２であり。 ｔは１または２である〕 の化合物またはその塩を製造するにあたり、一般式（Ｉ
   Ｉ） Ｃ式中。 Ａ２はアラルコキシ（当該アラルコキシ中のアルキル残
   基は低級アルキルであり、そして、アリール残基はメ１
   −キシまたは二１−口で「を換さ、ｂていてもよい）ま
   たは一般式−Ｎｌ＋（：ＩＩ、ＣＯＹ　（ここでＹはヒ
   ドロキシまたは低級アルキルである）を表わし。 Ｒ３は水素またはアラルコキシカルボニル（当該アラル
   コキシカルボニル中のアルキル残基は低級アルキルであ
   り、アリール残基はメ１〜キシまたはニトロで置換され
   ていてもよい）を表わし。 、パ　二　゛−− 棲参強そしてＢ’、　Ｒ，Ｒ２，ｔ＋およびｔはそれぞ
   れ前記と同義である〕 の化合物のα−カルボキシ基に結合した保護基Ａ２を酸
   加水分解、アルカリ加水分解、水添分解または酵素加水
   分解によって離脱し、そして所望なら得られた化合物を
   その塩に変えることからなる方法。